CN103472155A

CN103472155A - 气相色谱法检测稻谷中9种有机磷农药残留量

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Publication number: CN103472155A
Application number: CN2013104536278A
Authority: CN
Inventors: 邬金飞
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2013-09-29
Filing date: 2013-09-29
Publication date: 2013-12-25

Abstract

本发明建立一种检测稻谷中9种有机磷农药残留量的气相色谱方法，实现对稻谷中的敌敌畏、乙酰甲胺磷、氧化乐果、乐果、甲拌磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、水胺硫磷、***磷农药残留的定性定量检测。该方法的特征在于用乙腈作为提取剂，提取液经氮吹仪浓缩，用丙酮定容后，直接在气相色谱仪上痕量分析。本发明的优点在于：一是色谱柱对目标物分离效果好，检测结果准确度高，重现性好，方法灵敏度达到了农药多残留检测的技术要求；二是较GB/T5009.145-2003（植物性食品中有机磷和氨基甲酸酯类农药多种残留的测定）国家标准的方法更为简便，简化了样品前处理步骤，缩短了检测时间，节约了成本。

Description

气相色谱法检测稻谷中9种有机磷农药残留量

技术领域

本发明建立一种检测稻谷中敌敌畏、乙酰甲胺磷、氧化乐果、乐果、甲拌磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、水胺硫磷、***磷9种有机磷农药残留量的气相色谱方法，属于农药残留检测技术领域。

背景技术

中国是世界上稻谷生产与消费大国，水稻的种植面积约占全球23%，产量占30%以上，居世界第一。由于水稻生育期长，病虫害频发，因此农用化学品被大面积、高浓度、高频次地使用，这在减轻病虫害损失上，起到了至关重要的作用，但是由此带来了稻谷的食用安全问题。

有机磷杀虫剂是我国稻田使用最主要的农药，占所有使用农药的70%以上。其中，敌敌畏、乙酰甲胺磷、氧化乐果、乐果、甲拌磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、水胺硫磷、***磷等品种起着重要的作用，由于这些农药内吸性好、渗透性强，因此在水稻中后期施药后，就容易在谷粒内残留。

稻谷不仅给我们提供大米，由稻谷脱粒后产生的米糠，也是畜牧生产的饲料，也会进入人们的食物链中。在检测中发现，只要稻谷中有农药检出，在碾出的大米中就有相应的农药检出。

目前，对稻谷中有机磷农药残留量的检测，大多采用的是国家标准GB/T5009.145-2003方法（植物性食品中有机磷和氨基甲酸酯类农药多种残留的测定），该方法提取净化过程比较复杂、耗时较长，效率较低。

本发明旨在建立一种廉价、快速、准确、灵敏的多残留检测方法，对稻谷中敌敌畏、乙酰甲胺磷、氧化乐果、乐果、甲拌磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、水胺硫磷、***磷农药残留进行日常的监测。

发明内容

本发明有如下二方面内容：

1、稻谷样品前处理

2、气相色谱仪检测

本发明所采用的技术，包括以下内容：

（1）稻谷样品的制备

将稻谷样品晒干，用植物粉碎机粉碎，过筛（1mm），制成待检样。

（2）仪器与试剂

①仪器 Agilent 6890气相色谱仪、配有火焰光度检测器（FPD），DB-608（30m×0.32mm×0.5μm）作为定量检测色谱柱，HP-5（30m×0.32mm×0.25μm）作为定性确认色谱柱，电子天平，德国IKA高速匀浆机，美国N-EVAP24水浴氮吹仪，真空泵。

②试剂乙腈：分析纯；丙酮：色谱纯；氯化钠：分析纯，140℃烘烤4h。

③农药标准样品敌敌畏、乙酰甲胺磷、氧化乐果、乐果、甲拌磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、水胺硫磷、***磷标准溶液购自农业部环境保护科研监测所，质量浓度为100μg/ml。用丙酮配制成10μg/ml浓度的混合储备液，临用时选用没有本底干扰的稻谷样品提取液配制校准标准溶液，以消除基质增强效应的影响（乙酰甲胺磷、氧化乐果、乐果、甲拌磷基质增强效应非常明显）。

（3）样品前处理

①提取用电子天平准确称取10.0g样品于250 ml烧杯中，加入20.0 ml蒸馏水浸泡30 min，再加入40.0 ml的乙腈，以8000rmp/min高速匀浆2min，接着用定量滤纸抽滤，滤液收集到装有约7 g氯化钠100ml具塞量筒中，收集好滤液，盖上塞子，剧烈震荡2min，在室温下静置40min，使乙腈相与水相分层；

②浓缩吸取l0.0 ml乙腈溶液于10.0 ml刻度试管中，将试管放入氮吹仪的水浴锅中，水浴温度控制在45℃-50℃，然后将氮吹仪的不锈钢通气针紧贴试管壁，氮气或空气流沿着试管壁吹至样品表面（如果水浴的温度过高、通气针吹出的气流过大，都会降低敌敌畏回收率），待样品溶剂挥发、浓缩至0.5ml-1ml（样品浓缩至0.5ml以下，敌敌畏的回收率急剧下降）时，立即用丙酮定容，定容至5.0ml，充分摇匀，静置5min，取上清液，供气相色谱仪检测。

（4）气相色谱仪检测

①色谱参数设定（用DB-608色谱柱与HP-5色谱柱所设定的参数相同）载气：高纯氮气（纯度99.999%）；检测器的燃气与助燃气H₂150 ml/min、空气110ml/min；进样模式：恒流，流量为1.8 ml/min；进样口温度：235℃；检测器温度：270℃；柱升温程序：初始温度90℃，保持1min，以35℃/min上升至210℃，以20℃/min上升至250℃，以25℃/min上升至270℃，保持6min；进样方式：不分流；进样量1μl。

②定性和定量方法以敌敌畏、乙酰甲胺磷、氧化乐果、乐果、甲拌磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、水胺硫磷、***磷校准标准溶液色谱峰的保留时间来定性，以样品峰面积与校准标准溶液峰面积比较来定量，对于阳性样品采用HP-5色谱柱确认。

（5）方法验证（见表1）

①线性和范围分别配制浓度为0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mg/kg的敌敌畏、乙酰甲胺磷、氧化乐果、乐果、甲拌磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、水胺硫磷、***磷系列混合标准溶液，按上述色谱条件下依次进样，以目标农药的色谱峰面积Y对相应的标准溶液浓度 X （mg/kg）绘制标准曲线，相关系数均在0.9990以上。

②准确度、精密度以添加回收率来衡量方法的准确度，以变异系数（CV）来表示方法的精密度。在本底不含有机磷农药的稻谷样品中添加敌敌畏、乙酰甲胺磷、氧化乐果、乐果、甲拌磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、水胺硫磷、***磷农药的混合标准溶液，添加浓度为0.05、0.1、1.0、5.0 mg/kg，同时设置6个重复，再按前述的样品处理方法及色谱条件进行添加回收率试验，在4个添加水平上，有机磷农药的平均回收率为77.3%-115.2%，变异系数在10%以下。

③最小检出限体现了方法的灵敏度。用敌敌畏、乙酰甲胺磷、氧化乐果、乐果、甲拌磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、水胺硫磷、***磷农药的混合标准溶液逐级稀释添加，按上述方法检测，以3倍噪声强度的信号计算，测得最低检出浓度为0.006mg/kg -0.021mg/kg。

本发明利用相似相溶原理，以乙腈为提取剂，提取液经氮吹仪浓缩，用丙酮定容后，直接在气相色谱仪上痕量分析。该方法的优点在于：一是色谱柱对目标物分离效果好，检测结果准确度高，重现性好，方法灵敏度达到了农药多残留检测的技术要求；二是较GB/T5009.145-2003（植物性食品中有机磷和氨基甲酸酯类农药多种残留的测定）国家标准的方法更为简便，简化了样品前处理步骤，缩短了检测时间，节约了成本。

表1 检测方法的检出限、准确度和精密度

具体实施方式

方式1：籼谷中9种有机磷农药残留量的检测

（1）样品前处理

（2）气相色谱仪检测

（3）方法的准确度和精密度

在本底不含有机磷农药的籼谷样品中，添加敌敌畏、乙酰甲胺磷、氧化乐果、乐果、甲拌磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、水胺硫磷、***磷农药的混合标准溶液，添加浓度为0.05 mg/kg、0.1 mg/kg、1.0mg/kg、5.0mg/kg 4个水平，各处理重复6次。结果：9种有机磷农药的平均回收率为78.2%-111.2%，变异系数为2.1%-9.8%（见表2），完全符合农产品中农药多残留检测的技术要求。

表2 籼谷样品中9种有机磷农药不同浓度的添加回收率（%）

方式2：粳谷中9种有机磷农药残留量的检测

（1）粳谷样品前处理

与方式1相同。

（2）气相色谱仪检测

与方式1相同。

（3）方法的准确度和精密度

在本底不含有机磷农药的粳谷样品中，添加敌敌畏、乙酰甲胺磷、氧化乐果、乐果、甲拌磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、水胺硫磷、***磷农药的混合标准溶液，添加浓度为0.05 mg/kg、0.1 mg/kg、1.0mg/kg、5.0mg/kg 4个水平，各处理重复6次。结果：9种有机磷农药的平均回收率为77.3%-115.2%，变异系数为2.5%-9.6%（见表3），完全符合农产品中农药多残留检测的技术要求。

表3 粳谷样品中9种有机磷农药不同浓度的添加回收率（%）

Claims

1.一种检测稻谷中敌敌畏、乙酰甲胺磷、氧化乐果、乐果、甲拌磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、水胺硫磷、***磷9种有机磷农药残留量的气相色谱方法，其特征在于包括下述步骤：

②浓缩吸取l0.0 ml乙腈溶液于10.0 ml刻度试管中，将试管放入氮吹仪的水浴锅中，水浴温度控制在45℃-50℃，然后将氮吹仪的不锈钢通气针紧贴试管壁，氮气或空气流沿着试管壁吹至样品表面（如果水浴的温度过高、通气针吹出的气流过大，都会降低敌敌畏回收率），待样品溶剂挥发、浓缩至0.5ml-1ml（样品浓缩至0.5ml以下，敌敌畏的回收率急剧下降）时，立即用丙酮定容，定容至5.0ml，充分摇匀，静置5min，取上清液，供气相色谱仪检测；

③色谱参数设定（用DB-608色谱柱与HP-5色谱柱所设定的参数相同）载气：高纯氮气（纯度99.999%）；检测器的燃气与助燃气H₂150 ml/min、空气110ml/min；进样模式：恒流，流量为1.8 ml/min；进样口温度：235℃；检测器温度：270℃；柱升温程序：初始温度90℃，保持1min，以35℃/min上升至210℃，以20℃/min上升至250℃，以25℃/min上升至270℃，保持6min；进样方式：不分流；进样量1μl；

④定性和定量方法以敌敌畏、乙酰甲胺磷、氧化乐果、乐果、甲拌磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、水胺硫磷、***磷校准标准溶液色谱峰的保留时间来定性，以样品峰面积与校准标准溶液峰面积比较来定量，对于阳性样品采用HP-5色谱柱确认。

2.根据权利要求1所述的一种检测稻谷中9种有机磷农药残留量的气相色谱方法，其特征在于用乙腈作为提取剂，提取液经氮吹仪浓缩，用丙酮定容后，直接在气相色谱仪上痕量分析。

3.根据权利要求1所述的一种检测稻谷中9种有机磷农药残留量的气相色谱方法，其特征在于用没有本底干扰的稻谷样品提取液配制校准标准溶液。

4.根据权利要求1所述的一种检测稻谷中9种有机磷农药残留量的气相色谱方法，其特征在于用Agilent 6890气相色谱仪（配有火焰光度检测器）检测。

5.根据权利要求1所述的一种检测稻谷中9种有机磷农药残留量的气相色谱方法，其特征在于用DB-608（30m×0.32mm×0.5μm）色谱柱检测，用校准标准溶液色谱峰的保留时间定性，用外标法（以峰面积计）定量，对于阳性样品采用HP-5（30m×0.32mm×0.25μm）色谱柱确认。