CN103392460B - 一种野生山豆根的扦插扩繁方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种野生山豆根的扦插扩繁方法，包括以下步骤：（1）野生山豆根茎的裁剪；（2）将茎段装入营养袋；（3）保温培养19～21天；（4）移入大田。本发明解决了传统组培室内扩繁条件要求高、外移易污染的问题，为无性繁殖胡豆莲植株提供了很好的依据，易于大规模实用化、工厂化，为今后生物技术领域大规模组培扩繁、生产开发提供了实现高成活率、低成本、实用化强的技术途径。
Description
技术领域
本发明涉植物培养技术领域，尤其涉及一种野生山豆根的扦插扩繁方法。
背景技术
山豆根（Vietnamese Sophora Root）为双子叶植物纲豆科山豆根属植物，又名越南槐、广豆根、胡豆莲，主要分布于广西、贵州、云南。山豆根为高1～2m的灌木，生于亚热带或温带海拔1000～2000m的石灰岩山地或岩石缝中，星散于沟谷溪边常绿阔叶林下，喜阴湿、腐殖质丰富的环境，通常生长于红壤或黄壤中，pH值为4.5～5.5。因此，野生山豆根的人工培养不易实现。山豆根的干燥根及根茎为常见中药，可清火解毒、消肿止痛，常用于咽喉牙龈肿痛、肺热咳嗽烦渴、黄疸、热结便秘。山豆根提取物还具有抗肿瘤、抗病原微生物等作用，具有较高的药用价值，导致人们对山豆根过量采集，使野生资源急剧下降。在1997年和1999年颁布的《国家重点保护野生植物名录》中，胡豆莲（即山豆根）被收录为二级保护种（《中国植物红皮书》（第一批）将其例入三级保护种），可见其在全国的资源量也较为稀少。因此，栽培山豆根，尤其是野生山豆根，具有重大的经济价值和重要的意义。
山豆根的繁殖方式通常为种子繁殖，但因其发芽力低，生长较慢，繁殖能力低下，故现有技术中常采用组织培养方法，以达到快速繁殖山豆根的目的。但是，野生山豆根的种子的萌发率很低，且对发芽环境要求较高，使种子-幼苗的转化率也很低，加上其生长缓慢，严重制约了种群的扩大。尤其是在人们对森林的破坏导致山豆根生境的破坏后，山豆根的繁殖能力和生活能力下降到虽能勉强生长，但几乎不能繁殖的地步。所以，一般的山豆根组培繁殖方法不一定适用于野生山豆根的培养。
如CN102301951B公开的一种广豆根的组织培养快速繁殖方法，是取广豆根种子作为外植体进行消毒，将消毒后的外植体置于MS基本培养基中诱导发芽得到无菌试管苗，将所述无菌试管苗置于MS繁殖培养基中进行试管苗快速繁殖培养获得丛生芽，将所述丛生芽置于MS壮苗培养基中进行壮苗培养得到健壮植株，将所述健壮植株置于MS生根培养基中培养得到完整的带根苗，取完整的带根苗进行炼苗后移植于沙床生长一个月，再移栽至大田。该方案是以广豆根种子为外植体诱导发芽得到无菌试管苗，其不适用于野生广豆根的扦插扩繁。
又如CN102715090B公开的一种广豆根组培种苗工厂化生产方法，是将广豆根种子消毒后接种到繁殖培养基上培养获得丛生芽，将丛生芽切割成带芽茎段，平铺在繁殖复壮一体化固体培养基面上，再用镊子将茎段的1/2压入到培养基内，接种完毕后转入培养室内培养15天，然后再转入散射自然光照下培养15天，获得叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条；再将健壮枝条剪下，接种到生根炼苗同步化培养基中，在室内培养7天，新根开始萌发后转入玻璃大棚，进行生根炼苗同步化培养25天，获得根系发达，适宜移栽的完整植株，最后将生根苗于阴天傍晚移栽至平整精耕的育苗床上。该方案是将广豆根种子培养得到的丛生芽切割成带芽茎段后继续培养得到健壮枝条，其不适用于野生广豆根的扦插扩繁。
再如CN102499083B一种广豆根组培苗叶柄的生根方法，是将广豆根组培苗接种到MS壮苗培养基中壮苗，使组培苗叶片展开获得完整的木质化程度较高的带柄复叶，将带柄复叶置于MS生根培养基中培养，诱导生根。该方案是将广豆根组培苗接种到培养基中壮苗后得到带柄复叶，其也不适用于野生广豆根的扦插扩繁。
以上现有技术是采用广豆根（即山豆根）种子作为外植体诱导发芽得到试管苗后快速繁殖培养得到丛生芽，再进行壮苗培养得到健壮植株，继续培养得到完整的带根苗，经炼苗后移植到沙床中，最后移栽至大田；或者是将山豆根组培苗接种到培养基中壮苗继而诱导生根。以上的山豆根组织培养对温度、湿度、光照及无菌环境等各种生长条件的要求特别严格。特别是在外移过程中，如果某一环节操作失误，造成霉(细)菌污染，后果将不堪设想，严重时会导致整个扩繁和开发失败。离体繁殖的试管苗能否大量应用于开发生产，特别是野生植物品种能否取得好的效益，取决于试管苗是否有较高的成活率。野生山豆根的成活率低，而且试管苗移栽成本较高，外移成活率低，组培扩繁成本高，难于大规模实用化、工厂化。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种野生山豆根的扦插扩繁方法。
本发明提供了如下的技术方案：
一种野生山豆根的扦插扩繁方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）野生山豆根茎的裁剪：
将野生山豆根的茎裁剪为10～12cm的带芽茎段，每段3～4芽；
（2）将茎段装入营养袋：
将步骤（1）中裁剪所得茎段的2/3植入营养袋内，1/3裸露在营养袋外，所述植入营养袋的茎段上有2～3芽，所述营养袋内装有pH值为6～7的由黑油沙土组成的腐殖土；
（3）保温培养19～21天：
将步骤（2）中植有茎段的营养袋置于温度为15℃～20℃，湿度为50%～70%的环境中，每2天浇水一次，培养19～21天，获得山豆根生根小苗；
（4）移入大田：
将步骤（3）中培养完毕的山豆根生根小苗连同营养袋扦***大田中，扦插的株距为40cm，田垄的垄宽为50cm。
所述步骤（2）中营养袋中的腐殖土是将pH值为6～7的黑油沙土放入干锅中以70～80℃的高温烘炒制得。
本发明的有益效果：解决了传统组培室内扩繁条件要求高、外移易污染的问题，为无性繁殖胡豆莲植株提供了很好的依据，易于大规模实用化、工厂化，为今后生物技术领域大规模组培扩繁、生产开发提供了实现高成活率、低成本、实用化强的技术途径。
现有技术中通常采用山豆根种子为材料进行组织培养，而本发明方法是采用野生山豆根的茎段进行扦插扩繁，采用了装有炒制黑油沙土的营养袋，创新了野生山豆根的繁殖方法，且方法操作简单，生产成本较低。将植有野生山豆根茎段的营养袋置于温度为15℃～20℃，湿度为50%～70%的环境中，解决了传统组培室内扩繁条件要求高的问题。在移栽培养完毕的山豆根生根小苗时，连同营养袋一起扦***大田中，解决了外移易污染的问题。
由于山豆根自身具有固氮作用，其种子在播种前通常需要用根瘤菌拌种，以防止根腐病。本发明营养袋中采用的腐殖土是将pH值为6～7的黑油沙土放入干锅中以70～80℃的高温烘炒制得，既能有效杀灭腐殖土中的杂菌，又能模仿野生土壤环境，避免山豆根在生根过程中因杂菌而无法顺利生长。黑油沙土是一种沙质黑油土，属黑钙土亚类黑黄土土属，该土种母质为黄土状沉积物，颜色为黑棕色或暗棕色粒状及团粒状结构，有机质含量平均大于5.0%。山豆根通常生长于红壤和黄壤中，但是由黑油沙土制成的腐殖土肥力中等，呈中性至微酸性，具有利水、保湿、保肥等特点，是栽培茎段的理想植料，也是栽培山豆根的极佳土壤。采用肥力中等的黑油沙土，是因为胡豆莲（即山豆根）需氮素虽多，但由于其自身具有固氮能力，因此需要施用的氮肥并不太多；中等以下肥力田块，适时适量施用氮肥有较好的增产效果，肥力较高的田块则不明显，施用过多不仅浪费，而且还会造成减产。
具体实施例方式
实施例1
（1）野生山豆根茎的裁剪：
将野生山豆根的茎裁剪为11cm的带芽茎段，每段4芽；将带芽茎段放在超净工作台上，放入0.1%的升汞溶液中进行消毒4min，取出后再用70%的酒精涮一下，在用无菌水冲洗4次；
（2）将茎段装入营养袋：
将步骤（1）中裁剪所得茎段的2/3植入营养袋内，1/3裸露在营养袋外，所述植入营养袋的茎段上有3芽，所述营养袋内装有pH值为6.5的腐殖土；所述营养袋中的腐殖土是将pH值为6.5的黑油沙土放入干锅中以75℃的高温烘炒制得；
（3）保温培养20天：
将步骤（2）中植有茎段的营养袋置于温度为18℃，湿度为60%的环境中，每2天浇水一次，培养20天，获得山豆根生根小苗；在培养过程中防止袋内污染；在前述温度范围内，逐渐增强温室内光照强度，使营养袋内的山豆根苗逐渐适应环境中的光照、温度和湿度条件，当光照强度高时进行遮光管理，防止烧苗；
（4）移入大田：
将步骤（3）中培养完毕的山豆根生根小苗连同营养袋扦***大田中，扦插的株距为40cm，田垄的垄宽为50cm。在扦插前，将大田浇透水，保证扦插成活率。待山豆根小苗扦***大田内后，喷洒多菌灵或其他灭菌药剂，防止小苗染病。
采用上述方法进行野生山豆根的扦插扩繁，操作简单，效率高于山豆根的传统组培，且不易污染，小苗健壮，生长指标均优于试管外移苗，外移成活率可保全苗。
实施例2
（1）野生山豆根茎的裁剪：
将野生山豆根的茎裁剪为10cm的带芽茎段，每段3芽；
（2）将茎段装入营养袋：
将步骤（1）中裁剪所得茎段的2/3植入营养袋内，1/3裸露在营养袋外，所述植入营养袋的茎段上有2芽，所述营养袋内装有pH值为6的腐殖土；
所述步骤（2）中营养袋中的腐殖土是将pH值为6的黑油沙土放入干锅中以70℃的高温烘炒制得；
（3）保温培养19天：
将步骤（2）中植有茎段的营养袋置于温度为15℃，湿度为50%的环境中，每2天浇水一次，培养19天，获得山豆根生根小苗；
（4）移入大田：
将步骤（3）中培养完毕的山豆根生根小苗连同营养袋扦***大田中，扦插的株距为40cm，田垄的垄宽为50cm。
实施例3
（1）野生山豆根茎的裁剪：
将野生山豆根的茎裁剪为12cm的带芽茎段，每段4芽；
（2）将茎段装入营养袋：
将步骤（1）中裁剪所得茎段的2/3植入营养袋内，1/3裸露在营养袋外，所述植入营养袋的茎段上有3芽，所述营养袋内装有pH值为7的腐殖土；
所述步骤（2）中营养袋中的腐殖土是将pH值为7的黑油沙土放入干锅中以80℃的高温烘炒制得；
（3）保温培养21天：
将步骤（2）中植有茎段的营养袋置于温度为20℃，湿度为70%的环境中，每2天浇水一次，培养21天，获得山豆根生根小苗；
（4）移入大田：
将步骤（3）中培养完毕的山豆根生根小苗连同营养袋扦***大田中，扦插的株距为40cm，田垄的垄宽为50cm。
实施例4
（1）野生山豆根茎的裁剪：
将野生山豆根的茎裁剪为11m的带芽茎段，每段3芽；
（2）将茎段装入营养袋：
将步骤（1）中裁剪所得茎段的2/3植入营养袋内，1/3裸露在营养袋外，所述植入营养袋的茎段上有2芽，所述营养袋内装有pH值为7的腐殖土；
（3）保温培养21天：
将步骤（2）中植有茎段的营养袋置于温度为17℃，湿度为65%的环境中，每2天浇水一次，培养21天，获得山豆根生根小苗；
（4）移入大田：
将步骤（3）中培养完毕的山豆根生根小苗连同营养袋扦***大田中，扦插的株距为40cm，田垄的垄宽为50cm。
取野生山豆根种子10粒，编号组1，采用CN102715090B公开的一种广豆根组培种苗工厂化生产方法，对组1中的每粒山豆根种子分别进行组织培养，统计最终的山豆根苗的生根率和成活率。再取野生山豆根带芽茎段20段，平均分为2组，分别编号为组2、组3，采用本发明所述方法对组2、组3中的每段山豆根茎段分别进行培养、扦插扩繁，其中，组2的营养袋中采用以野外田土、干草、落叶、秸秆、家畜粪便、骨屑、米糠、红糖、面粉、酵母制成的普通腐殖土，而组3中的营养袋采用本发明所述的炒制黑油沙土的腐殖土，统计最终的山豆根苗生根率和成活率。野生山豆根的成活率对比结果如表1所示。
表1野生山豆根的生根率及成活率
| 组别 | 材料数 | 生根数 | 移栽成活数 | 生根率（%） | 成活率（%） |
| 组1 | 10 | 7 | 6 | 70 | 60 |
| 组2 | 10 | 6 | 5 | 60 | 50 |
| 组3 | 10 | 9 | 8 | 90 | 80 |
由表1可以看出，组3的生根率和成活率高于组1和组2，即采用本发明所述方法对野生山豆根茎段进行培养野生山豆根植物，其生根率和成活率高于采用现有技术（以山豆根种子进行组织培养）的生根率和成活率，也高于采用与本技术方案相近而营养袋中的培养基质采用普通腐殖土的技术方案。可见，本发明技术方案适用于野生山豆根的扦插扩繁。
Claims (1)
1.一种野生山豆根的扦插扩繁方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)野生山豆根茎的裁剪：
将野生山豆根的茎裁剪为10～12cm的带芽茎段，每段3～4芽；
(2)将茎段装入营养袋：
将步骤(1)中裁剪所得茎段的2/3植入营养袋内，1/3裸露在营养袋外，所述植入营养袋的茎段上有2～3芽，所述营养袋内装有pH值为6～7的由黑油沙土组成的腐殖土；
(3)保温培养19～21天：
将步骤(2)中植有茎段的营养袋置于温度为15℃～20℃，湿度为50％～70％的环境中，每2天浇水一次，培养19～21天，获得山豆根生根小苗；
(4)移入大田：
将步骤(3)中培养完毕的山豆根生根小苗连同营养袋扦***大田中，扦插的株距为40cm，田垄的垄宽为50cm；
所述步骤(2)中营养袋中的腐殖土是将pH值为6～7的黑油沙土放入干锅中以70～80℃的高温烘炒制得。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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