CN103275153B - 一种非达霉素晶体的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种非达霉素（Fidaxomicin）晶体及该晶体的制备方法。该晶体的X射线粉末衍射光谱特征峰以2θ表示位于3.324，7.745，9.989，10.607，13.954，14.475，15.355，15.855，18.800，19.999，20.321，22.245，23.104，24.028，24.446处。该方法的制备步骤为：将非达霉素加入乙醇的水溶液中溶解，进行析晶、抽滤、干燥得到非达霉素晶体。本发明的优点在于工艺稳定，操作简单快捷，溶剂易回收，利于环保，适合工业化生产。所得非达霉素晶型稳定性、颗粒均匀，有利于分装和保存。

Description

一种非达霉素晶体的制备方法

技术领域

本发明涉及一种化合物晶体的制备方法，更确切的说涉及一种非达霉素晶体的制备方法。

背景技术

非达霉素（Fidaxomicin）是通过桔橙指孢囊菌发酵产生的一种18元环结构的新型大环内酯类抗生素，其结构式如式（Ⅰ）所示，属于窄谱型抗菌药物，主要抗革兰阳性需氧及厌氧菌、艰难梭菌，亦对耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌、产气夹膜梭菌和肠球菌有良好的抗菌作用。非达霉素临床上主要用于治疗艰难梭菌感染引起的疾病，其具有产生抗性的倾向低，抗生素后效应持久、交叉耐药性低和不良反应少等优点。

（Ⅰ）

非达霉素是一类多晶型化合物，常见为白色针状、雪花状结晶或无定形粉末等，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯等，微溶于苯、二氯甲烷、氯仿、丙酮、丙醇，不溶于己烷、水。同一药物由于晶体类型和纯度的差异，使得药物的物理性质及稳定性存在显著差异，从而对药物的安全、有效性产生影响。目前虽然非达霉素治疗艰难梭菌感染的效果优于万古霉素和甲硝唑，但是仍然存在一些不良反应如恶心、呕吐、头痛、腹痛和腹泻等，因此，开发出安全而有效的非达霉素晶型就显得非常必要，并且该晶型会具有较广阔的市场前景。

目前，国内外专利、文献对非达霉素晶体制备方法的介绍比较少。专利CN200880009132.3公开了一种非达霉素晶体的制备方法：将非达霉素溶于甲醇、乙腈、乙酸乙酯、氯仿、丙酮或含乙酸的混合溶剂中，静置，过滤后可得到结晶沉淀。该方法虽然操作简便，但结晶时间较长，耗时耗力。该方法所用溶剂多为国际协调大会（ICH）规定的第二类溶剂，会对环境产生很大不利影响，且所用溶剂量较大，从而造成溶剂的浪费，增加了生产成本，限制了其工业化应用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种环境友好、成本低廉的非达霉素（Fidaxomicin）晶体的制备方法。

本发明采用的结晶步骤如下：

1）溶解：常温下，将非达霉素加入混合溶剂中，升温至40-50℃进行搅拌溶解，得到溶解液；

2）析晶、抽滤：将上述溶解液冷却，在0-20℃条件下放置2-48小时析晶，然后抽滤，得到滤饼；

3）烘干：将上述滤饼在40-50℃的条件下，真空干燥1-4小时后得到非达霉素晶体。

其中步骤1）中的混合溶剂为体积百分含量为60～90%的乙醇的水溶液。非达霉素和混合溶液的质量体积比为1:5-30，该比例中非达霉素以克计、混合溶液以毫升计。

其中步骤2）中所述的析晶温度为10-20℃，析晶时间为8-24小时。

其中步骤3）中所述的干燥温度为45℃，干燥时间为2-3小时。

本发明方法所制备的非达霉素晶体，以角2θ表示非达霉素晶体X射线粉末衍射光谱的特征峰位于3.324，7.745，9.989，10.607，13.954，14.475，15.355，15.855，18.800，19.999，20.321，22.245，23.104，24.028，24.446处。

本发明的有益效果：

本发明所述方法使用毒性极低的乙醇水溶液作为溶剂，避免了使用高毒性溶剂造成对环境的污染和人体的伤害，且该方法溶剂用量少，成本较低，整个制备过程比较简洁，耗时较短，可控制性强，重现性好并且稳定，适合工业化生产，具有较高的经济价值。

附图说明

图1本发明实施例1所述方法制得的非达霉素晶体的XRPD图谱

具体实施方式

下述实施例仅用于阐述实现本发明的方法，不应理解为对本发明的限制。

本发明所使用的非达霉素发酵液为华北制药集团新药研究开发有限责任公司按照常规手段制得的。大孔树脂HZ816购自安徽三星树脂科技有限公司；大孔树脂LX98购自西安蓝晓公司；聚合物微球PS30-300购自苏州纳微科技有限公司；甲醇、乙醇、乙酸乙酯等试剂均为市售。本发明使用的高效液相色谱仪（HPLC）为996型检测器，515泵（Waters公司）。本发明所使用的X射线粉末衍射仪型号为BrukerD8AdvanceXRD，检测条件为：电压40kV、电流40mA、扫描范围3-40°（2θ）、扫描步长0.02°(2θ)、时间常数0.5s。

非达霉素精粉的制备：

取非达霉素发酵液10升，发酵单位为510微克/毫升。将非达霉素发酵液过滤，得到2.5公斤菌丝体。在上述菌丝体中加入80%的甲醇水溶液5升，搅拌浸提1小时后过滤，收集非达霉素浸提液。浸提液加水稀释至甲醇浓度为30%后导入大孔树脂LX98柱进行脱色，树脂装量为500毫升，流速为1000毫升/小时。脱色液再次导入大孔树脂HZ816柱进行吸附，树脂装量为500毫升，流速为1000毫升/小时。吸附饱和后的树脂依次用浓度为40%、80%的甲醇水溶液解吸，流速为500毫升/小时，分段收集解吸液。将上述非达霉素解吸液浓缩，然后用乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩、干燥后得到非达霉素粗品6.1克，HPLC含量为65.8%。将上述所得非达霉素粗品用甲醇溶解至浓度为100克/升,然后注入500毫升的聚合物微球PS30-300层析柱，再依次用浓度40%、70%的甲醇水溶液洗脱，流速为500毫升/小时，分段收集洗脱液。合并HPLC含量大于95%的非达霉素洗脱液并将其浓缩、干燥得到非达霉素精粉2.4克，HPLC含量为96.7%。

实施例1

取20克非达霉素，用600毫升60%的乙醇水溶液在45℃加热溶解，溶解完全后冷却至0℃析晶24小时，析晶后进行减压抽滤，滤饼置于45℃烘箱真空干燥2小时，得非达霉素晶体15.2克，收率为76%。所制非达霉素晶体的XRPD图谱如图1所示。

实施例2

取20克非达霉素，用200毫升70%的乙醇水溶液在40℃加热下溶解，溶解完全后冷却至20℃析晶48小时，析晶后进行减压抽滤，滤饼置于50℃烘箱真空干燥3小时，得非达霉素晶体16克，收率为80%。

实施例3

取20克非达霉素，用400毫升80%的乙醇水溶液在50℃加热下溶解，溶解完全后，冷却至10℃析晶8小时，析晶后进行减压抽滤，抽干后的滤液回收利用，滤饼置于45℃烘箱真空干燥3小时，得到非达霉素晶体14.4克，收率为72%。

实施例4

取20克非达霉素，用100毫升90%的乙醇水溶液在45℃加热下溶解，溶解完全后，冷却至20℃析晶2小时，析晶后进行减压抽滤，抽干后的滤液回收利用，滤饼置于40℃烘箱真空干燥2小时，得到非达霉素晶体17.2克，收率为86%。

Claims (4)

1.一种非达霉素晶体的制备方法，其特征在于该方法包括下述步骤：

a、溶解：常温下，将非达霉素加入混合溶剂中，升温至40-50℃进行搅拌溶解，得到溶解液；

所述混合溶剂为体积百分含量为60～90%的乙醇的水溶液；

b、析晶、抽滤：将上述溶解液冷却，在0-20℃条件下放置2-48小时析晶，然后抽滤，得到滤饼；

c、烘干：将上述滤饼在40-50℃的条件下，真空干燥1-4小时后得到非达霉素晶型A；

所述非达霉素晶型A,以角2θ表示非达霉素晶体X射线粉末衍射光谱的特征峰位于3.324，7.745，9.989，10.607，13.954，14.475，15.355，15.855，18.800，19.999，20.321，22.245，23.104，24.028，24.446处，其XRPD图谱如图1所示。

2.根据权利要求1所述非达霉素晶体的制备方法，其中步骤a中非达霉素和混合溶液的质量体积比为1:5-30，该比例中非达霉素以克计、混合溶液以毫升计。

3.根据权利要求1或2所述非达霉素晶体的制备方法，其中步骤b中所述的析晶温度为10-20℃，析晶时间为8-24小时。

4.根据权利要求1或2所述的非达霉素晶体制备方法，其中步骤c中所述的干燥温度为45℃，干燥时间为2-3小时。