CN103272006A - 白头翁提取液的制备方法及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种白头翁提取液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取白头翁生药根粉碎成粗粉，按粗粉与水的质量比1:5加水，用索氏提取器提取；提取后的汤剂再用旋转蒸发仪蒸发，将汤剂用棕色瓶装罐后存于冰箱备用。本发明的白头翁提取液制备方法工艺简单，步骤少，适宜工业化生产。本发明通过光照甩尾法，发现白头翁提取液可以对小白鼠产生的镇痛作用十分明显，白头翁提取液具有镇痛的药理作用，作用的时间也十分迅速。本发明的方法与现有技术相比其制备方法工艺简单，步骤少，适宜工业化生产。

Description

白头翁提取液的制备方法及其应用

技术领域

本发明涉及制药技术领域，具体涉及一种白头翁提取液的制备方法及其应用。

背景技术

白头翁为毛莨科多年生白头翁属植物白头翁(chinese pulsatilla)，多年生草本，别名有奈何草、粉乳草、白头草、老姑草、菊菊苗、老翁花、老冠花、猫爪子花等等，分布在中国的吉林、辽宁、河北、山东、河南、山西、陕西、黑龙江等省的山岗、荒坡及田野间，始载于《神农本草经》，列为下品，是常用中药，具有清热解毒、凉血止痢、燥湿杀虫的功效。白头翁的特征在《开宝本草》中有记载：“今验此草丛生，状如白薇而柔细稍长，叶生***，如杏叶，上有细白毛，近根者有白茸。”传统主要用于治疗细菌性痢疾、阿米巴痢疾等。现代研究认为白头翁除了抗菌和抗病原作用外，还具有提高机体免疫力、抗癌、抗炎、抗毒、止泻、镇静、镇痛、杀灭滴虫和球虫、抑制肠运动、抗内毒素血症等作用。

白头翁的化学成分主要为皂苷和内酯等成分。其中包括白头翁皂苷、皂苷、白桦酯酸、白桦脂酸、***吡喃糖苷、氧代白桦脂酸、胡萝卜苷、原白头翁素、白头翁灵、白头翁英等。白头翁药材的多成分决定了其治疗作用的多靶点与多层次。白头翁根含白头翁皂甙（pulchinenoside）A、B、C、D，3-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→2）-α-L-吡喃***糖-3β，23-二羟基-Δ20（29）-羽扇豆烯-28-酸（3-O-α-L-rhamnopyranosyl-（1→2）α-L-arabinopyranosyl-3β，23-dihydroxylupΔ-20（29）-en-28-oicacid〕，白头翁皂甙（pulchinenoside）A3、B4，皂甙（saponin）1、2，白桦脂酸-3-O-α-L***吡喃糖甙（betulinicacid3-O-α-L-arabinopyranoside），白桦脂酸（betulinic acid），3-氧代白桦脂酸（3-oxobetulinic acid），胡萝卜甙（daucosterol），白头翁素（anemonin），原白头翁素（protoanemonin）。

白头翁提取液出自张仲景的《伤寒论》，组方严谨，仅白头翁、黄连、黄柏、秦皮四味药，功擅清阳明之湿热，泄厥阴之郁火，解血分之热毒，治湿热痢疾。后世常变通应用于多种病证。如孙思邈用以治疗赤带下血症；吴鞠通加味用以治疗湿温病内虚所致湿热下陷、热利下重等症；《临证指南医案》载：温邪经旬不解，发热自利，神识有时不清，此邪伏厥阴，恐致变痉，治宜白头翁提取液加生芍药；《类聚方广义》谓：白头翁提取液又治眼目郁热，赤肿阵痛，风泪不止者，又为洗蒸剂，亦效；张锡纯用变通白头翁提取液治下腹疼痛或久痢肠中腐烂。现代多用于痢疾、溃疡性结肠炎、慢性结肠炎、鼠伤寒肠炎等消化***疾病，同时白头翁提取液加减方在治疗泌尿***疾病、心血管***疾病、造血***疾病、妇科疾病、男科疾病、眼科疾病等方面也有较好的疗效。

发明内容

本发明的目的在于针对白头翁在镇痛方面的疗效进行研究，提供一种白头翁提取液及其应用。

本发明的技术方案如下：

一种白头翁提取液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）取白头翁生药根粉碎成粗粉，按粗粉与水的质量比1:4-6加水，用索氏提取器提取；

（2）提取后的汤剂再用旋转蒸发仪蒸发，将汤剂用棕色瓶装罐后存于冰箱备用。

优选地，步骤（1）所述粗粉的粒径在800μm。

优选地，步骤（1）粗粉与水的质量比1:5。

优选地，步骤（2）中提取后的汤剂再用旋转蒸发仪蒸发至原液的1/3-1/2。

上述方法制备的白头翁提取液具有镇痛作用，可以以其为活性成分制备镇痛药物，制成口服液。

本发明将在实施例中采用光照甩尾法证明其镇痛效果。

本发明的白头翁提取液制备方法工艺简单，步骤少，适宜工业化生产。本发明通过光照甩尾法，发现白头翁提取液可以对小白鼠产生的镇痛作用十分明显，白头翁提取液具有镇痛的药理作用，作用的时间也十分迅速。

具体实施方式

实施例1：

取白头翁生药根100g，粉碎成粗粉，加500mL水，用索氏提取器提取。提取后的汤剂再用旋转蒸发仪蒸发，分别制得浓度为28.8g/kg的高剂量浓度组和浓度为10.8g/kg的低剂量浓度组。将汤剂用棕色瓶装罐后存于冰箱备用。

实施例2

使用实施例1所得提取液用于实验，在16只准备好的小白鼠中，取其中6只作为高剂量组并标记，再取6只作为低剂量组并作不同标记，其余4只为对照组。每天上午8:00-11:00内对小鼠进行灌胃，持续5天。对照组小鼠用相应剂量的蒸馏水灌胃。

光照甩尾法：

在连续灌胃5天后，第6天对小鼠进行光照甩尾测痛试验。灯泡功率保持在30W，以动物出现甩尾行为作为痛反应指标，记录自光照开始到出现甩尾的潜伏期（s），连续测3次，取平均值，称为甩尾阈。潜伏期延长，即甩尾阈升高，表示有镇痛作用。

高剂量组、低剂量组和空白对照组小鼠三次测试的潜伏期和甩尾阈分别如表1、2、3所示，高剂量组、低剂量组和空白对照组的平均甩尾阈如表4所示。

表1高剂量组

表2低剂量组

表3空白对照组

表4平均甩尾阈

可以看出，低剂量组小白鼠的平均甩尾阈明显高于空白对照组小鼠的平均甩尾阈。但是，高剂量组小白鼠的平均甩尾阈只是略高于空白对照组小鼠的平均甩尾阈。由此可推测，高剂量的白头翁提取液的浓度过高，导致白头翁提取液对小白鼠镇痛的效果反而不明显。相比较之下，低剂量的浓度更接近理想中的最佳浓度，相对而言，镇痛效果更明显。

相对于其他有镇痛作用的中药材，白头翁的镇痛效果表现的不同之处在于高剂量组小鼠的痛阈反而低于低剂量组小鼠的痛阈。而低剂量组的表现为起效慢，但在一段时间后也能达到比较显著的镇痛效果。在同样的剂量条件下，高剂量组的白头翁的小鼠镇痛方面反倒低于低剂量组，这一结果可能与白头翁提取液的复杂的化学成分有关，同时，也可能与白头翁提取液的药理作用有关。

白头翁提取液的化学成分包括生物碱类、香豆素类、皂甙类、柠檬苦素类、甾醇类和木脂素类等。其中生物碱类、香豆素类、皂甙类和柠檬苦素类化合物为白头翁提取液中主要的化学成分，亦可能为汤剂发挥药效的主要物质基础。

其中，生物碱类的盐酸小檗碱具有广谱的抗菌作用，可用于治疗菌痢、肠炎、急性扁桃体炎和急性支气管炎等多种疾患。对原生动物、真菌和利什曼原虫均有抑制作用，并有研究发现用小檗碱可治疗霍乱引起的急性腹泻等研究发现，小檗碱对霍乱弧菌肠毒素引起的动物疾病具有防治作用。另有研究表明。小檗碱对大肠杆菌耐热肠毒素和不耐热肠毒素引起的幼兔腹泻具有显著疗效。在这种化学成分的作用下，小鼠体内的诸多不适被消除，对小鼠具有镇静，增加舒适感的作用，同时，也从侧面增加了对小鼠镇痛的影响。

白头翁提取液香豆素类物质主要包括七叶亭、七叶甙等。七叶亭具有抗氧化活性，可清除过氧化自由基和羟基自由基，抑制兔肝脏脂质过氧化；可抑制胶原和蛋白糖的降解，治疗风湿性关节炎和骨关节炎。七叶甙可以降低血管通透性和促进利尿，具有抗炎、抗渗出、抗水肿的作用，还可增强静脉张力、有抗氧自由基作用及神经保护作用等，但其抗氧自由基作用弱于七叶亭。这种物质的存在直接影响了小鼠的镇痛作用，其中抗炎、抗渗出、抗水肿的作用的影响尤为突出。

白头翁提取液所含皂甙有5种以上。其中含量最多的是白头翁皂甙A3(单糖链双糖甙)和皂甙B4(双糖链五糖甙)。皂甙类化合物能增强巨噬细胞的吞噬率。增强机体免疫功能，有抗氧化、抗炎、抗滴虫、抗肿瘤等药理活性。机体免疫力的功能提升，以及抗炎的功效，都增加了小鼠的镇痛效果。

白头翁提取液中的柠檬苦素类主要为黄柏内酯。此类化合物来源于黄连和黄柏，黄柏内酯能够延缓移植排斥反应的发生，还能诱导特异性免疫耐受。

另外，白头翁提取液还有一些其他成分，但是这些化学成分相关研究报道较少。

除了对白头翁提取液的化学成分的分析之外，还需要对白头翁提取液的药理作用进行考虑。到目前为止，对白头翁提取液的药理作用的研究表明，白头翁提取液具有：抗菌作用、消炎和修复溃疡作用、免疫调节作用、抑制肠管运动、抗腹泻作用、增强体内免疫活性作用、对消化***疾病的治疗作用、对肝脏的保护作用、杀***作用、对泌尿***疾病的治疗作用、抑制巨噬细胞分泌IL-6作用等等。

综上所述，白头翁提取液所含药物能促进非特异性免疫功能、抗炎、抗病毒、止泻、镇静、镇痛和抑制肠运动，既能消灭引起湿热下痢之病原微生物。亦能抑制或缓解肠道感染时局部炎症病变及不适，还能促进感染免疫功能，从多方面影响感染过程，从而取得良好疗效。

但是，高剂量组小鼠的镇痛效果差于低剂量组说明，高剂量的药物使得小鼠的药效下降。可以排除药物过量导致药物中毒的可能，因为小鼠并未出现恶心，呕吐，昏迷，精神萎靡等状况。初步推测是由于药物过量导致了机体的强烈反应，以大量排尿的方式将有效成分排除体外，从而导致了镇痛效果不明显的结果。

白头翁提取液在使用时，并非剂量越大约好，相对于一个固定的机体存在一个最适剂量。在使用时，为了发挥最佳镇痛效果应该尽量接近最佳剂量。

结论：

通过光照甩尾法，发现白头翁提取液可以对小白鼠产生的镇痛作用十分明显，白头翁提取液具有镇痛的药理作用。需要注意的是，在使用白头翁提取液是应当由低剂量向高剂量尝试。因为，白头翁提取液镇痛作用明显，且根据其他研究显示，作用的时间也十分迅速。因此，低剂量的白头翁提取液已经能够达到镇痛的效果。相反，过高剂量的药物反而会导致镇痛效果下降。初步认为，是因为过高剂量的药物引起小鼠机体的强烈反应，并以大量排尿的方式将有效物质排出体外，从而导致药效下降。而低剂量组的小鼠并无强烈反应，药物持续在体内作用，所以药效相对明显。

以上所述为本发明的较佳实施例而已，但本发明不应该局限于该实施例所公开的内容。所以凡是不脱离本发明所公开的精神下完成的等效或修改，都落入本发明保护的范围。

Claims (7)

1.一种白头翁提取液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）取白头翁生药根粉碎成粗粉，按粗粉与水的质量比1:4-6加水，用索氏提取器提取；

（2）提取后的汤剂再用旋转蒸发仪蒸发，将汤剂用棕色瓶装罐后存于冰箱备用。

2.权利要求1所述的白头翁提取液的制备方法，其特征在于，所述粗粉的粒径在800μm。

3.权利要求1所述的白头翁提取液的制备方法，其特征在于，粗粉与水的质量比1:5。

4.权利要求1所述的白头翁提取液的制备方法，其特征在于，步骤（2）中提取后的汤剂再用旋转蒸发仪蒸发至原液的1/3-1/2。

5.权利要求1-4任意一项所述方法制备的白头翁提取液。

6.一种镇痛药物，其特征在于，其活性成分为权利要求5所述的白头翁提取液。

7.权利要求6所述的镇痛药物，其特征在于，其剂型为口服液。