CN103250568A - 一种制备富硒猴头菌的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种制备富硒猴头菌的方法，包括如下步骤：(1)斜面试管培养：将分离纯化的菌种接种于斜面试管培养基中培养；(2)三角瓶培养：将斜面试管培养得到的菌种接种到三角瓶培养基中培养；(3)发酵罐培养：将三角瓶培养得到的菌种接入发酵罐培养基中进行培养；(4)富硒猴头菌菇的栽培：在20-27℃向盛有培养基的容器中，接种其中培养基总重量的1.0-3.0%的步骤（3）得到的菌种，培养，直到猴头子实体长出；其中，在步骤（2）～（4）的培养基中均含有***钠。所述方法省去了制备富硒猴头菌菇时分离纯化发酵罐培养基的操作步骤，而且制备得到的富硒猴头菌菇中有机硒和多糖的含量均得以提高。
Description
技术领域
本发明涉及一种猴头菌的制备方法，特别是涉及一种制备富硒猴头菌的方法。
背景技术
微量元素硒具有抗癌抗肿瘤以及提高机体免疫力，抗氧化保护心血管、提高红细胞的携氧能力、拮抗和降低某些有毒元素及物质的毒性、保护视器官的健全功能等保健作用。近年来，各种具有补硒功能的保健品不断涌现，已成为保健品市场一支生力军。目前国内外普遍采用的无机强化剂主要为***钠，主要用于制备口服液，***钠片和***钠强化食盐等。有研究表明，有机硒对动物的毒性明显低于无机硒，且有机硒在动物组织中的保留量大于无机硒。有机硒作为重要的硒源引起了人们的重视。微生物由于生长速度快，收获周期短，培养方便，各种条件易于控制，因此微生物无机硒的转化成为生物源有机硒的主要来源。且不少微生物具有良好的富硒能力。目前常见的有机硒富硒产品有富硒酵母，富硒香菇，富硒灵芝等。
猴头菌菇是著名的药食两用菌，含有多肽、多糖和酰胺等高分子化合物，对消化***的癌变、溃疡及神经衰弱等疾患具有显著疗效。并有抗溃疡、抗肿瘤、助消化、抗衰老、提高机体耐缺氧能力、增加心肌血液输出量、加速机体血液循环、降血糖、降血脂、保肝护肝等作用。猴头富硒除了能有效将无机硒转化为有机硒从而降低毒性以外，更有可能提高猴头中有效成分保健功效。达到1＋1﹥2的良好效果。
猴头对硒的转化率较高，且人体对菌类有机硒的利用率较高，可以达到70%-90%。在猴头的培养料中加入一定量的硒能够提高子实体的产量并且能够提高猴头中有效成分的含量。使得富硒猴头菇成为一种极具开发潜质的具有优良功效的保健食品。
猴头作为一种传统各药学典籍中早有记载。猴头栽培工艺简单，设备要求低，富硒猴头毒性低，安全性高。研究猴头菌富硒将为人们的日常摄取提供了全新的硒源。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种制备富硒猴头菌的方法，所述方法采用在猴头菌菇培养基中添加定量的***钠，即Na2SeO3的方法，通过微生物转化后，生产出富硒猴头菌，所得产品中有机硒和多糖的含量高，食用安全、方便，可满足各类人群的补硒要求。
一种制备富硒猴头菌的方法，包括如下步骤：
(1)斜面试管培养：将分离纯化的菌种接种于斜面试管培养基中培养；
(2)三角瓶培养：将斜面试管培养得到的菌种接种到三角瓶培养基中培养；
(3)发酵罐培养：将三角瓶培养得到的菌种接入发酵罐培养基中进行培养；
(4)富硒猴头菌菇的栽培：在20-27℃向盛有培养基的容器中，接种其中培养基总重量的1.0-3.0%的步骤（3）得到的菌种，培养，直到猴头子实体长出；
其中，在步骤（2）～（4）的培养基中均含有***钠。
本发明所述的制备富硒猴头菌的方法，其中所述斜面试管培养基的每1升液体培养基中含有180-220g的土豆、18-22g的葡萄糖、1-2g的磷酸二氢钾、0.7-0.8g的硫酸镁、18-22g的琼脂，并且所述培养基的pH值为4.5-6。
本发明所述的制备富硒猴头菌的方法，其中所述斜面试管培养基的每1升液体培养基中含有200g土豆、20g葡萄糖、1g磷酸二氢钾、0.5g硫酸镁、20g琼脂，并加水至1L，并且所述培养基的pH值为5.02。
本发明所述的制备富硒猴头菌的方法，其中所述的三角瓶培养基和发酵罐培养基的每1升液体培养基中均含有45-55g的麦麸、18-22g的葡萄糖、1.8-2.2g的蛋白胨、1.8-2.2g的酵母粉、1.3-1.7g的磷酸二氢钾、0.7-0.8g的硫酸镁、80-120mg的***钠，并且所述培养基的pH值为4.5-6。
本发明所述的制备富硒猴头菌的方法，其中所述三角瓶培养基的每1升液体培养基中含有50g麦麸、20g葡萄糖、2g蛋白胨、2g酵母粉、1.5g磷酸二氢钾、0.75g硫酸镁、109.7mg***钠，并用水补足至1L，并且所述培养基的pH值为5.0；
所述三角瓶培养的条件为：24-26℃温度，120-160转/分钟的振动速度下，在恒温振荡培养箱中培养5-7天。
本发明所述的制备富硒猴头菌的方法，其中所述的振动速度为140转/分钟。
本发明所述的制备富硒猴头菌的方法，其中步骤（3）中，所述的发酵罐培养包括一级发酵罐培养和二级发酵罐培养。
本发明所述的制备富硒猴头菌的方法，其中步骤（3）的发酵培养条件为：首先将发酵罐中的液体培养基灭菌，将灭菌后的培养基冷却，再将三角瓶培养后的菌种接入培养基中培养；
所述的灭菌条件为：在50L气升式发酵罐中装入20L液体培养基，培养基温度为250C-270C，pH值为4.5-6，并加入0.045-0.055%培养基重量的食用消泡剂，在14.7×104Pa压力下通入蒸汽加热到115-1250C，保持30-45分钟；
在步骤（3）中，所述的培养条件如下：培养温度为25-260C，通气量为1:0.5V/V·min，压力保持4.903-7.0845×104Pa，培养4-6天。
本发明所述的制备富硒猴头菌的方法，其中所述步骤（4）的培养基中含有750-800g的玉米芯、180-220g的麦麸、8-12g的蔗糖、8-10g的石膏和87.76-109.70mg的***钠；
步骤（4）中的培养条件如下，首先将所述的培养基物料混合均匀后，加入适量的水，其重量份为物料：水＝1：2，拌匀装入聚丙烯塑料袋中灭菌，将灭菌后的固体培养基放置于无菌通风室中冷却至240C-250C，向培养基接种其总重量的1.7%的液体菌种；放入培养室中培养；温度保持在250C-280C湿度保持在95%-100%培养80-100天。
本发明所述的制备富硒猴头菌的方法，其中所述培养基中含有780g的玉米芯、200g的麦麸、10g的蔗糖、10g的石膏和109.7mg的***钠；培养天数为90天。
本发明制备富硒猴头菌的方法与现有技术不同之处在于本发明所述方法将发酵培养后的菌种再次进行接种，直到猴头子实体长出，如此操作不但省去了现有技术中，制备富硒猴头菌菇时分离纯化发酵罐培养基的操作步骤，而且制备得到的富硒猴头菌菇中有机硒和多糖的含量均得以提高。
具体实施方式
实施例1
一种制备富硒猴头菌的方法，包括如下步骤：
(1)斜面试管培养：将分离纯化的菌种接种于斜面试管培养基中培养；所述斜面试管培养基的每1升液体培养基中含有200g土豆、20g葡萄糖、1g磷酸二氢钾、0.5g硫酸镁、20g琼脂，并加水至1L，并且所述培养基的pH值为5.02；
(2)三角瓶培养：将斜面试管培养得到的菌种接种到三角瓶培养基中培养；所述三角瓶培养基的每1升液体培养基中含有50g麦麸、20g葡萄糖、2g蛋白胨、2g酵母粉、1.5g磷酸二氢钾、0.75g硫酸镁、109.7mg***钠，并用水补足至1L，并且所述培养基的pH值为5.0；培养的条件为：24-26℃温度，120-160转/分钟的振动速度下，在恒温振荡培养箱中培养5-7天；
(3)发酵罐培养：将三角瓶培养得到的菌种接入发酵罐培养基中进行培养；所述的发酵罐培养包括一级发酵罐培养和二级发酵罐培养；
发酵培养条件为：首先将发酵罐中的液体培养基灭菌，将灭菌后的培养基冷却，再将三角瓶培养后的菌种接入培养基中培养；
所述的灭菌条件为：在50L气升式发酵罐中装入20L液体培养基，培养基温度为250C-270C，pH值为4.5-6，并加入0.045-0.055%培养基重量的食用消泡剂，在14.7×104Pa压力下通入蒸汽加热到115-1250C，保持30-45分钟；
在步骤（3）中，所述的培养条件如下：培养温度为25-260C，通气量为1:0.5V/V·min，压力保持4.903-7.0845×104Pa，培养4-6天；
(4)富硒猴头菌菇的栽培：在20-27℃向盛有培养基的容器中，接种其中培养基总重量的1.0-3.0%的步骤（3）得到的菌种，培养，直到猴头子实体长出；
所述培养基中含有780g的玉米芯、200g的麦麸、10g的蔗糖、10g的石膏和109.7mg的***钠；培养条件如下：首先将所述的培养基物料混合均匀后，加入适量的水，其重量份为物料：水＝1：2，拌匀装入聚丙烯塑料袋中灭菌，将灭菌后的固体培养基放置于无菌通风室中冷却至240C-250C，向培养基接种其总重量的1.7%的液体菌种；放入培养室中培养；温度保持在250C-280C湿度保持在95%-100%培养80-100天。
实施例2
一种制备富硒猴头菌的方法，其中所述斜面试管培养基的每1升液体培养基中含有180g的土豆、18g的葡萄糖、2g的磷酸二氢钾、0.7g的硫酸镁、18g的琼脂，并且所述培养基的pH值为4.5；
所述的三角瓶培养基和发酵罐培养基的每1升液体培养基中均含有45g的麦麸、18g的葡萄糖、1.8g的蛋白胨、1.8g的酵母粉、1.3g的磷酸二氢钾、0.7g的硫酸镁、80mg的***钠，并且所述培养基的pH值为4.5；培养中所述振动速度为140转/分钟；
步骤（4）所述的培养基中含有750g的玉米芯、180g的麦麸、8g的蔗糖、8g的石膏和87.76mg的***钠；
其他同实施例1。
实施例3
一种制备富硒猴头菌的方法，其中所述斜面试管培养基的每1升液体培养基中含有220g的土豆、22g的葡萄糖、2g的磷酸二氢钾、0.8g的硫酸镁、22g的琼脂，并且所述培养基的pH值为6；
所述的三角瓶培养基和发酵罐培养基的每1升液体培养基中均含有55g的麦麸、22g的葡萄糖、2.2g的蛋白胨、2.2g的酵母粉、1.7g的磷酸二氢钾、0.8g的硫酸镁、120mg的***钠，并且所述培养基的pH值为6；
步骤（4）所述的培养基中含有800g的玉米芯、220g的麦麸、12g的蔗糖、10g的石膏和109.70mg的***钠；
其他同实施例1。
实施例4
一种制备富硒猴头菌的方法，其中所述斜面试管培养基的每1升液体培养基中含有210g的土豆、19g的葡萄糖、1g的磷酸二氢钾、0.75g的硫酸镁、19g的琼脂，并且所述培养基的pH值为5；
所述的三角瓶培养基和发酵罐培养基的每1升液体培养基中均含有52g的麦麸、21g的葡萄糖、1.9g的蛋白胨、2.1g的酵母粉、1.6g的磷酸二氢钾、0.75g的硫酸镁、110mg的***钠，并且所述培养基的pH值为5；
步骤（4）所述的培养基中含有790g的玉米芯、190g的麦麸、11g的蔗糖、9g的石膏和100mg的***钠；培养天数为90天。
其他同实施例1。
以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。
Claims (10)
1.一种制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)斜面试管培养：将分离纯化的菌种接种于斜面试管培养基中培养；
(2)三角瓶培养：将斜面试管培养得到的菌种接种到三角瓶培养基中培养；
(3)发酵罐培养：将三角瓶培养得到的菌种接入发酵罐培养基中进行培养；
(4)富硒猴头菌菇的栽培：在20-27℃向盛有培养基的容器中，接种其中培养基总重量的1.0-3.0%的步骤（3）得到的菌种，培养，直到猴头子实体长出；
其中，在步骤（2）～（4）的培养基中均含有***钠。
2.根据权利要求1所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：所述斜面试管培养基的每1升液体培养基中含有180-220g的土豆、18-22g的葡萄糖、1-2g的磷酸二氢钾、0.7-0.8g的硫酸镁、18-22g的琼脂，并且所述培养基的pH值为4.5-6。
3.根据权利要求2所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：所述斜面试管培养基的每1升液体培养基中含有200g土豆、20g葡萄糖、1g磷酸二氢钾、0.5g硫酸镁、20g琼脂，并加水至1L，并且所述培养基的pH值为5.02。
4.根据权利要求2所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：所述的三角瓶培养基和发酵罐培养基的每1升液体培养基中均含有45-55g的麦麸、18-22g的葡萄糖、1.8-2.2g的蛋白胨、1.8-2.2g的酵母粉、1.3-1.7g的磷酸二氢钾、0.7-0.8g的硫酸镁、80-120mg的***钠，并且所述培养基的pH值为4.5-6。
5.根据权利要求4所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：所述三角瓶培养基的每1升液体培养基中含有50g麦麸、20g葡萄糖、2g蛋白胨、2g酵母粉、1.5g磷酸二氢钾、0.75g硫酸镁、109.7mg***钠，并用水补足至1L，并且所述培养基的pH值为5.0；
所述三角瓶培养的条件为：24-26℃温度，120-160转/分钟的振动速度下，在恒温振荡培养箱中培养5-7天。
6.根据权利要求5所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：所述的振动速度为140转/分钟。
7.根据权利要求6所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：步骤（3）中，所述的发酵罐培养包括一级发酵罐培养和二级发酵罐培养。
8.根据权利要求7所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：步骤（3）的发酵培养条件为：首先将发酵罐中的液体培养基灭菌，将灭菌后的培养基冷却，再将三角瓶培养后的菌种接入培养基中培养；
所述的灭菌条件为：在50L气升式发酵罐中装入20L液体培养基，培养基温度为250C-270C，pH值为4.5-6，并加入0.045-0.055%培养基重量的食用消泡剂，在14.7×104Pa压力下通入蒸汽加热到115-1250C，保持30-45分钟；
在步骤（3）中，所述的培养条件如下：培养温度为25-260C，通气量为1:0.5V/V·min，压力保持4.903-7.0845×104Pa，培养4-6天。
9.根据权利要求7或8所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：所述步骤（4）的培养基中含有750-800g的玉米芯、180-220g的麦麸、8-12g的蔗糖、8-10g的石膏和87.76-109.70mg的***钠；
步骤（4）中的培养条件如下，首先将所述的培养基物料混合均匀后，加入适量的水，其重量份为物料：水＝1：2，拌匀装入聚丙烯塑料袋中灭菌，将灭菌后的固体培养基放置于无菌通风室中冷却至240C-250C，向培养基接种其总重量的1.7%的液体菌种；放入培养室中培养；温度保持在250C-280C湿度保持在95%-100%培养80-100天。
10.根据权利要求9所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：所述培养基中含有780g的玉米芯、200g的麦麸、10g的蔗糖、10g的石膏和109.7mg的***钠；培养天数为90天。
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