CN103221078B - 用于自动化血小板洗涤的***和方法 - Google Patents
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Abstract
一种用于洗涤血小板的方法,包括将抗凝剂引入到血小板产品容器中,从该血小板产品容器抽取重新抗凝的血小板产品,以及将其引入到离心机转筒中。该离心机转筒将血小板与它们悬浮于其中的上清液分离。然后,该方法通过将洗涤溶液引入到该离心机转筒中来洗涤血小板。在将洗涤溶液引入到转筒中时,该洗涤液将上清液从转筒置换并且到废物容器中。然后,该方法将血小板添加溶液引入到离心机转筒中,该离心机转筒将洗涤溶液从离心机转筒置换并且到废物容器中并且进一步洗涤血小板。然后,该方法反复地使离心机转筒加速和减速以使血小板重新悬浮在血小板添加溶液中。
Description
优先权
本专利申请要求2010年11月5日提交的标题为“System andMethod For Automated Platelet Wash(用于自动化血小板洗涤的***和方法)”的美国临时专利申请序号61/410,738的优先权,其分配代理卷号1611/A68,并且Etienne Pagès、Dominique Uhlmann、和MatthewMurphy作为发明人,该专利申请的公开内容以其整体通过引用并入本文。
技术领域
本发明涉及用于洗涤收集的血小板的***和方法,并且更具体地,涉及用于在自动化且封闭的过程中洗涤收集的血小板的***和方法。
背景技术
清血(apheresis)是可以将单独的血液成分(例如,血小板)从临时从对象抽出的全血分离并且收集的程序。另外,可以使用各种其它过程来收集诸如血小板的血液成分。这些成分一旦被收集,就可以被存储并且稍后被输给病人。然而,在一些情况下,接收的病人对于输血可能具有不良反应(有时严重)。例如,对于血小板浓缩液(PC)和/或富含血小板血浆(PRP)的诸如***反应、过敏反应、和/或发热非溶血性输血反应(FNHTR)的不良反应的发生是证据充分的。很多这些不良反应因病人对包含在血浆(例如,血小板悬浮在其中的上清液)内的蛋白质的敏感性而引起。另外,血浆/上清液还可能包含溶于上清液和/或悬浮在上清液内的多种污染物。这些污染物可能增加反应的严重程度和/或可能引起附加反应。
为了减少这些反应的发生,各种现有技术***“洗涤”血小板以在输血之前从血小板浓缩液和/或PRP中移除血浆上清液。例如,现有技术***可以在血小板收集袋内利用盐溶液稀释血小板产品。一旦被稀释,现有技术***和方法就使稀释的血小板产品受离心作用以便在袋的底部形成“血小板颗粒(platelet pellet)”。然后,可以例如使用全血分离挤压(whole blood separation press)来移除颗粒上清液(例如,血浆)以及重新悬浮在不同的溶液中的血小板。然后稀释程序必须重复多次(例如,至少三次)以便充分地移除上清液(例如,血浆)和蛋白质/污染物。一旦已经充分地移除上清液和蛋白质,则可以使血小板重新悬浮在血小板添加溶液内。通过用血小板添加溶液基本上取***上清液,现有技术方法能够减小不良反应的风险。
然而,像上文所描述的那些的现有技术***和方法出于各种原因是有问题的。首先,因为现有技术***要求多个无菌对接步骤(例如,以便重复洗涤程序以及以增加血小板添加溶液),该产品未以在功能上密封的方式被处理,这进而增加污染的风险并且缩短血小板可以被存储的时长。另外,手动过程固有地具有人为误差的高风险,并且结果可能依赖于操作员而变化(例如,它们是不可重现的)。此外,手动现有技术程序是劳动密集的。
发明内容
根据本发明的一个实施例,一种用于洗涤血小板的方法包括将抗凝剂引入到血小板产品容器中,并且从容器抽取经抗凝的血小板产品。在容器内的血小板产品(例如,富含血小板血浆)可以包含悬浮在上清液(例如,血浆)内的血小板。因此,该方法可以将经抗凝的血小板产品引入到离心机转筒中,该离心机转筒进而将血小板从上清液分离。一旦将血小板从上清液分离,该方法然后可以将洗涤溶液(例如,经抗凝的盐葡萄糖溶液)引入到离心机转筒中以将上清液从转筒置换(例如,置换到废物容器中),并且将血小板添加溶液引入到离心机转筒中以将洗涤溶液从离心机转筒置换(例如,置换到废物容器中)。
在引入血小板添加溶液并且置换洗涤溶液之后,然后该方法可以通过使离心机转筒加速(如持续2秒)和减速(沿相同的方向或在顺时针和逆时针方向交替)多次(例如,启动和停止一次,然后重复例如三次)来“微动(jog)”转筒,以使血小板重新悬浮在血小板添加溶液中。然后,该方法可以将重新悬浮的血小板和血小板添加溶液转移到血小板存储容器。
在附加实施例中,该方法可以将血小板添加溶液和重新悬浮的血小板的一部分从离心机转筒转移到血小板存储容器,然后再次重复加速和减速过程至少一次(例如,额外四次)。在重复加速和减速过程之后,然后该方法可以将离心机转筒内剩余的血小板和血小板添加溶液转移到血小板存储容器。在***将剩余的血小板和血小板添加溶液转移到经洗涤血小板容器之后,该方法还可以将血小板添加溶液添加到经洗涤血小板存储容器,以实现预定的经洗涤血小板体积和/或预定的经洗涤血小板产量。
在一些实施例中,在将洗涤溶液引入到离心机转筒中之前,该方法可以将抗凝剂引入到洗涤溶液中。在第二次微动步骤之后,该方法还可以利用血小板添加溶液冲洗离心机转筒,并且将在离心机转筒中的血小板添加溶液(例如,用于冲洗的溶液)转移到血小板存储容器。
根据附加实施例,在将抗凝剂引入到血小板产品容器中时,该方法可以(例如,利用摇动器(shaker))摇动(agitate)血小板产品容器。另外,在最初微动离心机转筒之前,该方法还可以将血小板添加溶液和重新悬浮的血小板的一部分转移到血小板存储容器。
根据本发明的进一步的实施例,一种用于自动化血小板洗涤的***可以包括:(1)无菌连接,用于将血小板产品容器连接到***以及将血小板产品从容器抽出,(2)离心机转筒,(3)洗涤溶液源,(4)血小板添加溶液源,以及(5)控制器。离心机转筒将血小板产品分离成血小板和上清液,并且可以被构造成将上清液传送至废物容器。洗涤溶液源可以被流体地连接到离心机转筒并且被构造成将洗涤溶液传送至离心机转筒。血小板添加溶液源可以被流体地连接到离心机转筒并且被构造成将血小板添加溶液传送至离心机转筒。控制器控制离心机转筒的操作,并且可以使离心机转筒加速(例如,持续2秒)和减速多次(例如,四次)以使血小板重新悬浮在血小板添加溶液内(例如,在将血小板添加溶液添加到血小板并且将上清液传送至废物容器之后)。加速和减速可以包括启动和停止转筒。在一些实施例中,当对离心机转筒进行加速和减速时,控制器可以交替地沿顺时针和逆时针方向启动转筒。
***还可以包括经洗涤血小板存储容器,并且在控制器使离心机转筒加速和减速(例如,启动和停止)之后,***可以将重新悬浮的血小板的一部分转移到经洗涤血小板存储容器。在此种实施例中,在将重新悬浮的血小板的一部分转移至经洗涤血小板存储容器中之后,控制器可以重复对离心机转筒的加速和减速。另外,在控制器重复加速和减速之后,***可以将剩余的血小板和血小板添加溶液转移到经洗涤血小板存储容器。***还可以包括抗凝剂源,并且***可以将抗凝剂从抗凝剂源引入到血小板产品容器中。在一些实施例中,控制器还可以被构造成:在***将剩余的血小板和血小板添加溶液转移到经洗涤血小板容器之后,将血小板添加溶液添加到经洗涤血小板存储容器以实现预定的经洗涤血小板体积和/或预定的经洗涤血小板产量。
根据附加实施例,一种用于洗涤血小板的***可以包括:(1)用于将抗凝剂引入到血小板产品容器中的装置,(2)用于将经抗凝的血小板产品从血小板产品容器抽取的装置,(3)离心机转筒,(4)用于将洗涤溶液引入到离心机转筒中的装置,(5)用于将血小板添加溶液引入到离心机转筒的装置,以及(6)用于控制离心机转筒的操作的控制器。血小板产品可以包含悬浮在上清液内的血小板,并且离心机转筒可以将血小板与上清液分离。随着洗涤溶液进入转筒,它可以将上清液从转筒置换并且到废物容器中。类似地,随着血小板添加溶液进入转筒,血小板添加溶液可以将洗涤溶液从离心机转筒置换并且到废物容器中。
在血小板添加溶液已经将上清液(例如,被污染的上清液)置换至废物容器之后,控制器可以对离心机转筒加速和减速多次以使血小板重新悬浮在血小板添加溶液内。***还可以包括用于将重新悬浮的血小板和血小板添加溶液转移到血小板存储容器的装置。
一些实施例还可以包括用于将血小板添加溶液和重新悬浮的血小板的一部分从离心机转筒转移到血小板存储容器的装置。在此种实施例中,控制器还可以被构造成:在将重新悬浮的血小板的一部分转移至血小板存储容器中之后,重复对离心机转筒进行加速和减速(例如,停止和启动)。***还可以包括:用于将剩余的重新悬浮的血小板和血小板添加溶液从离心机转筒转移至血小板存储容器的装置;以及在将洗涤溶液引入到离心机转筒中之前,用于将抗凝剂引入到洗涤溶液中的装置。
控制器还可以进一步被构造成:当启动和停止离心机转筒时,交替地沿顺时针和逆时针方向启动转筒。另外,***还可以包括摇动器,以在将抗凝剂引入到血小板产品容器中时摇动血小板产品容器。在一些实施例中,控制器还可以被构造成在***将剩余的血小板和血小板添加溶液转移到经洗涤血小板容器之后,将血小板添加溶液添加到经洗涤血小板存储容器,以实现预定的经洗涤血小板体积和/或预定的经洗涤血小板产量。
附图说明
实施例的前述特征将通过结合附图参考下文中的详细描述被更加容易地理解,在这些附图中:
图1是根据本发明的一个实施例的血小板洗涤***的示意图;
图2是根据本发明的一个实施例的用于与图1的***一起使用的一次性***的示意图;
图3A示意性地示出根据本发明的一些实施例的用于与图1的血小板洗涤***一起使用的离心机转筒的侧视图;
图3B示意性地示出根据本发明的一些实施例的用于与图1的血小板洗涤***一起使用的替代离心机转筒的侧视图;
图3c示意性地示出根据本发明的一些实施例的用于与图1的血小板洗涤***一起使用的第三离心机转筒的侧视图;
图4是描述根据本发明的一个实施例的用于洗涤收集的血小板和血小板产品的方法的流程图;并且
图5是描述根据本发明的附加实施例的用于洗涤收集的血小板和血小板产品的替代方法的流程图。
具体实施方式
参照图1和图2,自动化血小板洗涤***100使用离心机110以将血小板从自其上清液(例如,血小板悬浮于其中的流体)分离,该离心机110诸如在美国专利No.4,983,158中描述的离心机转筒,该美国专利据此通过引用并入。可以使用其它类型的分离室和设备,诸如但不限于如在美国专利No.3,145,713和5,882,289中描述的标准Latham类型离心机(图3C),这些美国专利据此通过引用并入。
离心机110包括旋转转筒120以及由旋转密封部74典型地紧密地耦合到转筒内部的固定的输入和输出端口PT1和PT2(参见图3A)。虽然转筒120的材料和大小可以依赖于应用和将被洗涤的血小板产品的量而变化,但本发明的优选的实施例利用具有范围从210至275ml的容积并且由K-树脂制成的转筒。另外,***100可以是血液/细胞处理***,诸如由Haemonetics,Corp.提供的215***和/或在美国专利No.6,440,372中描述的红细胞低温贮藏和回收设备,该美国专利据此通过引用并入。
如在图3B中所示,在一些实施例中,离心机转筒120可以包括具有位于转筒120的内部内的分流器122的芯121,诸如在美国专利No.4,943,273中描述的离心机转筒,该美国专利据此通过引用并入。分流器122可以是位于靠近转筒120的底部的甜甜圈状(donut-like)构件,并且可以具有在周边边缘处的开口123以及在开口123与芯121之间的开口126。随着将被处理的流体(例如,血小板产品、PRP、等)通过输入端口PT1进入转筒120,流体流经供给管124并且到转筒120的底部中。然后,离心力迫使血小板产品通过开口123向外且向上流动并且到分离区125中。随着洗涤溶液(或血小板添加溶液)进入转筒120,洗涤溶液可以通过开口126进入分离区125以产生洗涤交叉流。
离心机转筒120的输入端口PT1经由管132、连接件134、管136、和Y形连接件138与血小板产品容器130流体连通。管132和136与血液和血液产品具有兼容性,在***100中的所有的管道均是如此。血小板产品容器130可以装有使用诸如从Haemonetics,Corp.可获得的MCS清血***的血液清血***源自于捐赠人的血小板产品(例如,富含血小板血浆)。如下文更详细地描述的,进口端口PT1也经由阀V1/V2/V3、管144/154/164、连接件112、以及管115流体地连接到各种溶液容器140/150/160(在下文中更详细地描述)。离心机转筒120的出口端口PT2由管116、阀V4和管118流体地连接到废物容器170。
如上文所提及的,除了血小板产品容器130之外,离心机110的进口端口PT1也可以流体地连接到多个溶液容器140/150/160。溶液容器可以包括用于存储抗凝剂的袋或容器140、洗涤溶液存储容器150、以及血小板添加溶液存储容器160。在下文中更详细地描述这些溶液中的每一种的使用。将溶液容器140/150/160连接到离心机转筒120的管115可以包括防止在抗凝剂、血小板添加溶液、和/或洗涤溶液内的任何细菌进入***100的滤菌器180。容器140/150/160优选地是由与每个袋所装的溶液兼容的材料制成的塑料袋。
***100还可以包括控制***100和离心机110的整体操作的控制器190。例如,控制器190可以控制蠕动泵P1和P2以及阀V1/V2/V3/V4的操作以控制经过***100的流的方向和持续时间。另外,控制器190还可以控制诸如摇动器192和打印机194(如果被装备)的附加***组件的操作。可以使用打印机194来打印与过程相关的报告和/或其它信息。如在下文中更详细地讨论的,可以在装在容器130内的血小板产品的重新抗凝期间使用摇动器192。控制器190还可以被耦合到显示屏幕196以及输入设备198,该显示屏幕196向***操作员展示信息,该输入设备198允许***操作员输入信息以及向控制器190提供信息。例如,输入设备198可以允许用户以输入期望的最终血小板体积(例如,体积大于转筒120容积)和/或期望的最终血小板产量。如在下文中详细地讨论的,控制器190可以将血小板添加溶液添加到经洗涤血小板产品以便实现期望的体积和/或产量。
重要的是要注意,在本发明的其它实施例中,摇动器192和打印机194可以是不连接至***100的独立组件。在此种实施例中,这些组件可以独立于***100和控制器190操作。例如,摇动器192连同其自身的操作控制可以是独立的设备(例如,它可以不受到控制器190的控制)。
为了监测在***100内的压力,***还可以包括一个或多个压力传感器。例如,***100可以包括在管136上的压力传感器122以测量在泵P1与经洗涤血小板收集袋175之间的压力。同样地,***100可以包括在管118上的压力传感器126以测量在离心机转筒120与废物容器170之间的压力。压力传感器122/126中的每一个可以包括过滤器124/128(例如,0.2μm疏水过滤器和/或抗细菌滤过器)以维持***100内的无菌性。
如图2中所示,各个组件可以被包装在一起作为一次性套件200。例如,一次性套件200可以包括管115/116/118/132/144/154/172/174、连接器134/138/112、阀V1/V2/V3/V4、离心机转筒120、滤菌器180、废物容器170、以及经洗涤血小板存储容器175。另外,一次性套件200还可以包括用于溶液容器140/150/160以及血小板产品容器130的连接端口。例如,一次性套件200可以包括用于连接血小板产品容器130的第一无菌连接131、用于连接血小板添加溶液容器160的第二无菌连接162、以及用于连接洗涤溶液容器150和抗凝剂容器140的连接142/152(例如,长钉(spike)连接、鲁尔锁连接等)。在启动血小板洗涤程序之前,一次性套件200可以从其包装移出并且被安装到***100中,如图1中所示。
图4是描述根据本发明的一个实施例的用于洗涤血小板产品的方法的流程图。第一,***操作员可以将血小板产品容器130连接到无菌端口131(步骤401)以及将抗凝剂容器140、洗涤溶液容器150、血小板添加溶液容器160连接到连接器142/152/162(步骤402)。一旦容器被连接,***100可以将抗凝剂(例如,以重新抗凝)添加到在血小板产品容器130内的血小板产品(步骤403)。为此,***100可以激励泵P1和P2和使用泵P1/P2(例如,连续地)以通过管144和115、滤菌器180、线路136和132从容器140抽吸抗凝剂并且抽吸到血小板产品容器130中。为了辅助血小板产品和抗凝剂的混合,血小板产品容器130可以被放置在摇动血小板产品容器130内的溶液(例如,血小板产品和抗凝剂)的摇动器192上。
一旦将抗凝剂添加到血小板产品,***100就可以将一定体积的(例如,全部或部分)重新抗凝的血小板产品转移到离心机转筒120(步骤404)并且开始使重新抗凝的血小板产品受离心作用(步骤405)。虽然血小板产品被转移至离心机转筒120的速率以及转筒120旋转(例如,以使血小板产品受离心作用)的速度可以变化,但是本发明的一些实施例本发明可以以150ml/min转移血小板产品并且使离心机转筒120以近似8000RPM旋转。随着血小板产品进入转筒120(例如,分离区125),在血小板产品上的离心力将开始使血小板从上清液(例如,血浆)分离并且促使血小板朝转筒120的外径迁移。
然后,***100可以继续使转筒120旋转并且开始利用洗涤溶液(例如,盐葡萄糖)洗涤血小板(步骤406)。在该步骤期间,泵P2将开始从容器150抽吸洗涤溶液并且通过使洗涤溶液通过进口端口PT1引入到离心机转筒120中来洗涤装在转筒120内的血小板。随着洗涤溶液进入离心机转筒120,洗涤溶液将开始与在转筒120内的上清液(例如,重新抗凝的血浆)混合并且与血小板分离。随着附加洗涤溶液进入转筒,洗涤溶液/血浆混合物将通过出口端口PT2从离心机转筒120被置换并且将通过管116和118被传送至废物容器170。虽然***100引入洗涤溶液以洗涤血小板的速率也可以依赖于被洗涤的血小板产品的应用和/或体积而变化,但是本发明的一些实施例对于总量为1500ml的洗涤溶液以150ml/min洗涤血小板。另外,重要的是要注意,在洗涤步骤期间,离心机110和转筒120继续以近似8000RPM旋转,并且随着将附加洗涤溶液引入到转筒120,将洗涤溶液连续地置换(例如,离开端口PT2并且到废物容器170中)。
在一些实施例中,可能有益的是,在将洗涤溶液转移到离心机转筒120之前,将抗凝剂添加到洗涤溶液(例如,1:20的比例)。为此,在连接器112处和/或在洗涤溶液流经线路115时,***100/控制器190可以将抗凝剂添加到洗涤溶液。例如,在泵P2正从容器150抽取洗涤溶液时,随着洗涤溶液被转移至转筒120,控制器190或***操作员(如果阀是手动阀)可以以适当的间隔打开和关闭阀V1以将抗凝剂用仪表计量到线路144和115中。
重要的是要注意,通过将抗凝剂添到血小板产品和洗涤溶液,转筒120的血小板和内含物的pH临时下降(例如,在利用洗涤溶液洗涤血小板的同时)。该pH的临时下降帮助防止血小板在处理期间相互粘附。另外,如在下文中更详细地讨论的,一旦使血小板重新悬浮在血小板添加溶液中,最终血小板产品(例如,经洗涤血小板)的pH增加(例如,到6.4以上)。
在***100利用洗涤溶液执行初始洗涤步骤(例如,步骤406)之后,***100然后将开始最终血小板洗涤(步骤407)。在最终血小板洗涤期间,***100将关闭阀V2并且打开V3以便将血小板添加溶液从容器160转移至离心机转筒120。随着血小板添加溶液被转移至离心机转筒120,血小板添加溶液将与在转筒内剩余的来自初始洗涤步骤(例如,步骤406)的洗涤溶液混合。另外,以类似于利用洗涤溶液的初始洗涤步骤(例如,步骤406)的方式,***100将转移比离心机转筒120能够包含的更大体积的血小板添加溶液。例如,在使转筒120以近似8000RPM旋转的同时,最终洗涤步骤可以以150ml/min转移500ml的血小板添加溶液。然而,随着血小板添加溶液通过进口端口PT1进入转筒120,等体积的血小板添加溶液/洗涤溶液混合物将通过出口PT2被置换并且流入到废物容器170中。一旦完成最终洗涤步骤,则***100/控制器190可以使离心机停止。
在完成最终洗涤(步骤407)并且使离心机110和转筒120停止之后,***100/控制器190可以在排空转筒120之前通过开始一系列加速和减速步骤摇动和/或微动转筒120(步骤408)以帮助移除可能被卡到离心机转筒120侧面的任何血小板。例如,控制器190可以启动/加速离心机110/转筒120持续预定的时间量(例如,2秒),然后使离心机110/转筒120减速。微动(例如,交替加速和减速)在转筒120内产生湍流并且引起流体在转筒120中相对于转筒120的运动,这进而帮助从转筒120的壁移除血小板。***100/控制器190可以重复该加速/减速过程多次(例如,额外3次)。
重要的是要注意,在一些实施例中,控制器190不需要在加速和减速步骤之间使转筒停止。例如,在使转筒120加速之前的减速步骤期间,控制器190不需要允许转筒120达到完全停止。另外,为了使转筒120减速,控制器可以仅仅切断转筒120/离心机110的电源并且允许转筒120(例如,通过在马达、转筒120等内的摩擦)自身减速。换言之,在一些实施例中,在减速期间,控制器120不必主动地使转筒120制动。
在一些实施例中,加速和减速步骤可以包括启动和停止转筒120。例如,初始加速步骤可以使转筒120从停止启动。在此种实施例中,在减速步骤期间,控制器190还可以使转筒120完全停止(或允许转筒120以达到完全停止)。
一旦完成初始摇动步骤(步骤408),***100/控制器190可以通过使用泵P1部分地排空转筒120(步骤409)以从转筒120移除一定体积的血小板添加溶液和血小板,并且将该体积转移至经洗涤血小板存储容器175。通过减小在离心机转筒120内的体积,使在转筒120内的“晃动(sloshing)”和湍流在下文中讨论的后续摇动步骤期间增加。
然后,***100/控制器190可以开始第二微动/摇动步骤(步骤410),在该步骤中,***100/控制器190重复摇动过程(步骤408)。例如,***100/控制器190可以再次使转筒120加速和减速(例如,开始和停止)多次,以便在转筒120内产生湍流以及从转筒120的壁移除血小板。另外,与第一摇动步骤(步骤408)相似,控制器可以反复地(例如,总共四次)使转筒加速持续预定时段(例如,2秒)并且使转筒12减速。
离心机110和转筒120的旋转方向可以依赖于所使用的***100和离心机110的类型。例如,如果装备有双向离心机,则对于每个加速/启动循环,***100/控制器190可以使旋转方向交替。换言之,***100/控制器190可以使转筒120沿顺时针和逆时针方向交替旋转(例如,以便增加在转筒120内的湍流)。另外,虽然摇动步骤在上文被所描述为使离心机110加速/启动离心机110持续2秒并且重复三次(例如,持续总共四个启动/停止周期),但是时间和重复的次数能够变化。例如,本发明的一些实施例可以使离心机加速/启动离心机持续3秒,并且其它实施例可以启动离心机110持续一秒或四秒或更多。同样,一些实施例可以仅重复加速/减速步骤两次,并且其它实施例可以重复四次或更多次。
一旦完成第二微动/摇动步骤(步骤410),***100/控制器190就可以使离心机110停止并且排空转筒120(步骤411)。例如,控制器190可以激励泵P2并且通过进口端口PT1抽吸剩余血小板和血小板添加溶液并且将血小板/血小板添加溶液转移至经洗涤血小板存储容器175。
如上文所提及的,在洗涤期间将抗凝剂添加到血小板产品和洗涤溶液减小血小板和血小板产品的pH。然而,一旦血小板添加溶液将转筒120内的洗涤溶液置换并且血小板重新悬浮在血小板添加溶液中,pH就增加到更加适合于血小板存储的水平(例如,在6.4以上和/或血小板添加溶液的pH)。
除了上文所描述的和图4中所示的步骤之外,一些实施例还可以包括附加的可选步骤。例如,如图5中所示,在启动初始微动/摇动步骤(步骤408)之前,一些实施例可以使离心机110停止并且将小体积(例如,50ml)的血小板添加溶液和血小板从转筒120转移至经洗涤血小板存储容器175(步骤501)。通过这样做,***100可以提高在转筒120内的“晃动”和湍流,这进而帮助从离心机转筒120的壁移除血小板。
另外或可替代地,一些实施例可以在排空转筒120之后(例如,在步骤411之后)执行最终冲洗步骤(步骤502)。在最终冲洗步骤期间,***100/控制器190可以将一定体积(例如,35ml)的血小板添加溶液转移到离心机转筒120。然后,***100/控制器190可以以类似于步骤408和410的方式对转筒120进行加速和减速(例如,启动和停止),以冲洗掉在转筒120内包含的任何剩余的血小板。然后,该冲洗液可以被转移至经洗涤血小板存储容器175。
此外,如果操作员将期望的血小板体积或期望的血小板产量输入到输入设备198(上文所讨论的)中,则控制器190可以将血小板添加溶液添加到在收集袋175内的经洗涤血小板产品,以获得程控的体积或产量(步骤503)。例如,控制器190可以使用泵P1和P2(例如,连续地)来将所需体积的血小板添加溶液从容器160转移至收集容器175。
重要的是要注意,上文所讨论的流率和体积仅仅意味着作为示例,并且流率和体积可以变化。例如,洗涤溶液流率和体积分别可以大于或小于150ml/min和1500ml。另外,血小板添加溶液流率和体积分别可以大于或小于150ml/min和500ml。此外,上文提供的RPM同样地意味着仅作为示例并且可以变化。例如,RPM可以小于或大于8000RPM(例如,它可以在7000与7500RPM之间、小于7000RPM、或大于8000RPM)。
上文所描述的***和方法提供优于现有技术的若干优势。具体地,因为本发明的实施例在封闭***内执行,所以存在减小的污染风险,并且最终产品(例如,经洗涤血小板)能够被存储持续更长的时期。例如,与利用上文所描述的现有技术手动程序经洗涤血小板仅持续6-8小时相比,利用本发明的实施例经洗涤血小板可以被存储持续24小时以上。
另外,因为本发明的各实施例被自动化,所以结果(例如,血小板回收、蛋白移除、等)是可重现的并且较少经受操作员错误。例如,本发明的实施例反复地能够减少血小板产品内的蛋白质达80%以上(并且高达99%)并且反复地回收在初始血小板产品(例如,PRP)内的血小板大于80%。
上文所描述的本发明的实施例旨在仅仅是示例性的;若干变化和修改对于本领域的技术人员而言将是明显的。所有的此种变化和修改旨在处于如在任何所附权利要求中所限定的本发明的范围内。
Claims (42)
1.一种用于洗涤血小板的方法,包括:
(a)将抗凝剂引入到装有血小板产品的血小板产品容器中,所述血小板产品包含悬浮在上清液内的血小板;
(b)从所述血小板产品容器抽取经抗凝的血小板产品;
(c)将所述经抗凝的血小板产品引入到离心机转筒中,所述离心机转筒将所述血小板从所述上清液分离;
(d)将洗涤溶液引入到所述离心机转筒中,所述洗涤溶液将所述上清液从所述离心机转筒置换并且到废物容器中;
(e)将血小板添加溶液引入到所述离心机转筒中,所述血小板添加溶液将所述洗涤溶液从所述离心机转筒置换并且到所述废物容器中;
(f)通过对所述离心机转筒加速和减速来微动所述离心机转筒;
(g)重复步骤(f)至少一次,从而使所述血小板重新悬浮在所述血小板添加溶液中。
2.根据权利要求1所述的方法,进一步包括将重新悬浮的血小板和血小板添加溶液转移至经洗涤血小板的存储容器。
3.根据权利要求1所述的方法,其中在步骤(g)中重复步骤(f)四次。
4.根据权利要求1所述的方法,进一步包括:
(h)将血小板添加溶液和重新悬浮的血小板的一部分从所述离心机转筒转移至经洗涤血小板的存储容器;
(i)重复步骤(f)至少一次;以及
(j)将在所述离心机转筒内剩余的血小板和血小板添加溶液转移至所述经洗涤血小板的存储容器。
5.根据权利要求4所述的方法,其中步骤(i)包括重复步骤(f)四次。
6.根据权利要求4所述的方法,进一步包括:
在步骤(j)之后利用血小板添加溶液冲洗所述离心机转筒;以及
将所述离心机中的血小板添加溶液转移至所述经洗涤血小板的存储容器。
7.根据权利要求4所述的方法,其中对所述离心机转筒加速包括当所述离心机转筒在停止状态下启动所述离心机转筒,并且使所述离心机转筒减速包括使所述离心机转筒停止。
8.根据权利要求7所述的方法,其中对所述离心机转筒加速包括交替沿顺时针方向和逆时针方向启动所述离心机转筒。
9.根据权利要求4所述的方法,进一步包括在步骤(j)之后将血小板添加溶液添加到所述经洗涤血小板的存储容器以实现预定的经洗涤血小板体积。
10.根据权利要求4所述的方法,进一步包括在步骤(j)之后将血小板添加溶液添加到所述经洗涤血小板的存储容器以实现预定的经洗涤血小板产量。
11.根据权利要求1所述的方法,其中所述洗涤溶液是盐葡萄糖溶液。
12.根据权利要求1所述的方法,进一步包括在将所述洗涤溶液引入到所述离心机转筒之前将抗凝剂引入到所述洗涤溶液。
13.根据权利要求1所述的方法,进一步包括在将抗凝剂引入到所述血小板产品容器时摇动所述血小板产品容器。
14.根据权利要求1所述的方法,其中所述血小板产品是富含血小板血浆,并且所述上清液是血浆。
15.根据权利要求1所述的方法,其中在步骤(f)期间在减速之前使所述离心机转筒加速持续2秒。
16.根据权利要求1所述的方法,进一步包括在步骤(f)之前转移血小板添加溶液和重新悬浮的血小板的一部分。
17.一种用于自动化血小板洗涤的***,包括:
无菌连接,所述无菌连接用于将血小板产品容器连接到所述***并且将血小板产品从所述血小板产品容器抽出;
离心机转筒,所述离心机转筒用于将所述血小板产品分离成血小板和上清液,所述离心机转筒被构造成将所述上清液传送至废物容器;
洗涤溶液源,所述洗涤溶液源流体地连接到所述离心机转筒并且被构造成将洗涤溶液传送至所述离心机转筒;
血小板添加溶液源,所述血小板添加溶液源流体地连接到所述离心机转筒并且被构造成将血小板添加溶液传送至所述离心机转筒;以及
控制器,所述控制器用于控制所述离心机转筒的操作,所述控制器对所述离心机转筒加速和减速多次,使得在将所述血小板添加溶液添加到所述血小板并且将所述上清液传送至废物容器之后,所述血小板重新悬浮在所述血小板添加溶液内。
18.根据权利要求17所述的***,其中,对所述离心机转筒加速包括当所述离心机转筒在停止状态下启动所述离心机转筒,并且使所述离心机转筒减速包括使所述离心机转筒停止。
19.根据权利要求18所述的***,其中当启动和停止所述离心机转筒时,所述控制器交替沿顺时针和逆时针方向启动所述离心机转筒。
20.根据权利要求17所述的***,其中所述控制器使所述离心机转筒加速四次并且使所述离心机转筒减速四次。
21.根据权利要求17所述的***,进一步包括经洗涤血小板的存储容器,在所述控制器启动和停止所述离心机转筒之后,所述***将重新悬浮的血小板的一部分转移至所述经洗涤血小板的存储容器。
22.根据权利要求21所述的***,其中在将所述重新悬浮的血小板的一部分转移至所述经洗涤血小板的存储容器之后,所述控制器重复对所述离心机转筒的加速和减速。
23.根据权利要求21所述的***,其中在所述控制器重复所述离心机转筒的加速和减速之后,所述***将剩余的血小板和血小板添加溶液转移至所述经洗涤血小板的存储容器。
24.根据权利要求23所述的***,其中所述控制器进一步被构造成:在所述***将所述剩余的血小板和血小板添加溶液转移至所述经洗涤血小板的存储容器之后,将血小板添加溶液添加到所述经洗涤血小板的存储容器,以实现预定的经洗涤血小板体积。
25.根据权利要求23所述的***,其中所述控制器进一步被构造成:在所述***将所述剩余的血小板和血小板添加溶液转移至所述经洗涤血小板的存储容器之后,将血小板添加溶液添加到所述经洗涤血小板的存储容器,以实现预定的经洗涤血小板产量。
26.根据权利要求17所述的***,其中所述血小板产品是富含血小板血浆,并且所述上清液是血浆。
27.根据权利要求17所述的***,其中在停止所述离心机转筒之前,所述控制器对所述离心机转筒加速持续2秒。
28.根据权利要求17所述的***,其中所述洗涤溶液是经抗凝的盐葡萄糖溶液。
29.根据权利要求17所述的***,进一步包括抗凝剂源,所述***将抗凝剂从所述抗凝剂源引入到所述血小板产品容器中。
30.一种用于洗涤血小板的***,所述***包括:
用于将抗凝剂引入到血小板产品容器中的装置,所述血小板产品包含悬浮在上清液内的血小板;
用于从所述血小板产品容器抽取经抗凝的血小板产品的装置;
用于将所述血小板从所述上清液分离的离心机转筒;
用于将洗涤溶液引入到所述离心机转筒中的装置,所述洗涤溶液将所述上清液从所述离心机转筒置换到废物容器中;
用于将血小板添加溶液引入到所述离心机转筒中的装置,所述血小板添加溶液将所述洗涤溶液从所述离心机转筒置换并且到所述废物容器中;
控制器,所述控制器用于控制所述离心机转筒的操作,所述控制器对所述离心机转筒加速和减速多次,使得在将所述血小板添加溶液添加到所述血小板并且将所述上清液和所述洗涤溶液传送至所述废物容器之后,所述血小板重新悬浮在所述血小板添加溶液内。
31.根据权利要求30所述的***,进一步包括用于将重新悬浮的血小板和血小板添加溶液转移至经洗涤血小板的存储容器的装置。
32.根据权利要求30所述的***,其中所述控制器使所述离心机转筒加速四次并且使所述离心机转筒减速四次。
33.根据权利要求30所述的***,进一步包括:
用于将血小板添加溶液和重新悬浮的血小板的一部分从所述离心机转筒转移至经洗涤血小板的存储容器的装置,所述控制器被构造成在将所述重新悬浮的血小板的一部分转移至所述经洗涤血小板的存储容器中之后重复所述离心机转筒的加速和减速;以及
用于将剩余的重新悬浮的血小板和血小板添加溶液从离心机转筒转移至所述经洗涤血小板的存储容器的装置。
34.根据权利要求33所述的***,其中所述控制器使所述离心机转筒加速四次并且使所述离心机转筒减速四次。
35.根据权利要求33所述的***,其中所述洗涤溶液是经抗凝的盐葡萄糖溶液。
36.根据权利要求33所述的***,进一步包括用于在将所述洗涤溶液引入到所述离心机转筒之前将抗凝剂引入到所述洗涤溶液中的装置。
37.根据权利要求33所述的***,其中所述控制器进一步被构造成:在所述***将所述剩余的血小板和血小板添加溶液转移至所述经洗涤血小板的存储容器之后,将血小板添加溶液添加到所述经洗涤血小板的存储容器,以实现预定的经洗涤血小板体积。
38.根据权利要求33所述的***,其中所述控制器进一步被构造成:在所述***将所述剩余的血小板和血小板添加溶液转移至所述经洗涤血小板的存储容器之后,将血小板添加溶液添加到所述经洗涤血小板的存储容器,以实现预定的经洗涤血小板产量。
39.根据权利要求30所述的***,其中,其中对所述离心机转筒加速包括当所述离心机转筒在停止的状态下启动所述离心机转筒,并且使所述离心机转筒减速包括使所述离心机转筒停止。
40.根据权利要求39所述的***,其中所述控制器进一步被构造成:当启动和停止所述离心机转筒时,沿顺时针和逆时针方向交替启动所述离心机转筒。
41.根据权利要求30所述的***,进一步包括摇动器,在将抗凝剂引入到所述血小板产品容器时,所述摇动器摇动所述血小板产品容器。
42.根据权利要求30所述的***,其中所述血小板产品是富含血小板血浆,并且所述上清液是血浆。
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