CN103191177B - 一种采用速冻与脉冲技术提高藤本豆总黄酮提取率的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种采用速冻与脉冲技术提高藤本豆总黄酮提取率的方法，属于天然药物化学提取技术领域。该方法通过将干燥后的藤本豆籽粒进行粉碎、速冻，然后结合脉冲强光辅助提取，最后过滤并收集提取液，得到藤本豆黄酮粗品。通过速冻及脉冲强光联合处理技术制备藤本豆总黄酮，工艺科学合理、操作简单、步骤少、提取流程快、提取得率高、成品稳定、成本低，适合工业化生产要求，且无环境污染。
Description
技术领域
本发明涉及一种采用速冻与脉冲技术提高藤本豆总黄酮提取率的方法，属于天然药物化学提取技术领域。
背景技术
藤本豆是利用野生“藤本豆”母本雄性***与大油豆杂交、粒性诱发、自交分离、风土驯化等科技手段，研发出的一种高效农业蔬菜新物种，兼备粮、油、菜、林、花、饮、药等多样型。研究表明，藤本豆营养极其丰富，富含全价优质蛋白和配比均衡的十八种氨基酸，其对人体所必需氨基酸含量高达50%以上，是一种比大豆蛋白更具营养价值的优质蛋白资源。另外，藤本豆含黄酮、多糖等多种活性成分，药用和保健功能显著，能明显增强T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖，特别是对高胆固醇症，具有调节血清胆固醇水平功能，对心脑血管有很好的保健功效。
黄酮类化合物是一类在自然界广泛分布的多酚类物质，也是目前备受关注的天然活性产物之一。目前，黄酮的主要提取方法有：热水提取法、有机溶剂萃取法、碱性水提法、超声提取法、微波法、超临界萃取法。其中，热水提取法设备简单，但提取率低；有机溶剂萃取法是目前国内外使用最广泛的提取方法，但存在排污量大、有效成分损失多、容积残留及提取效率低等缺陷；碱性水提法具有简单易行、经济方便等特点，但存在强碱污染环境问题；超声提取法能耗低、不破坏有效成分，但大量提取时效率低；微波法提取时间短、提取率高，但其成品的组成不是非常稳定；超临界萃取法速度快、渗透能力强、溶解萃取效率高，但设备投资高，提取成本高。而本项目采用速冻与脉冲强光联合处理提取藤本豆总黄酮，提取率高、成本低，且无环境污染。
发明内容
本发明的目的在于提供一种采用速冻与脉冲技术提高藤本豆总黄酮提取率的方法，该方法具有提取率高、无污染、过程易控制等特点。
本发明的技术方案如下：
所述方法包括如下步骤：
（1）干燥：采收后的鲜藤本豆经晒干、剥壳、整理后得到干燥后的藤本豆籽粒；
（2）粉碎：将干燥后的藤本豆籽粒进行粉碎，粒度为20～40目，得到藤本豆粉；
（3）速冻：将藤本豆粉放入- 40～-18℃速冻设备中速冻1.5～2.5h；
（4）脉冲强光辅助提取：以w/v1:15～25的固液比迅速将速冻后的藤本豆粉与体积比为50～60%乙醇混匀后，放入容器中即刻进行脉冲强光照射；然后在温度40～60℃下提取1～2h，最后过滤并收集提取液，得到藤本豆黄酮粗品。
其中w/v表示质量体积比，单位为g/mL或kg/L。
步骤（1）中晒干后的藤本豆的含水量为12～14%。
步骤（4）中所述容器为正方形或长方形，照射时物料容器表面开口，且容器内物料层厚度为4～8 cm。
步骤（4）中所述脉冲强光的强度为3.2～4.9J/cm2，照射距离为6～12cm，照射时间为2～4s，每秒闪照3次。
本发明的显著优点：
a) 本发明采用速冻及脉冲强光联合处理技术进行藤本豆总黄酮的制备，可以获得提取率高、质量优且无污染的黄酮类产品。
b) 本发明采用速冻及脉冲强光联合处理技术进行藤本豆总黄酮的制备，一方面利用速冻及脉冲强光联合处理破坏了藤本豆细胞壁，有利于细胞内黄酮的浸出，最大程度提高了提取率；另一方面利用脉冲强光瞬时、高强度的脉冲光能量，缩短了后续提取时间，大大提高了提取效率。
c) 本发明采用速冻及脉冲强光联合处理技术进行藤本豆总黄酮的制备，制备工艺简单，操作方便，能满足工业化生产的要求。
具体实施方式
以下是本发明的几个具体实施例，进一步说明本发明，但是本发明不仅限于此。
实施例1
取100g鲜藤本豆经晒干（含水率12.6%）、剥壳、整理后，粉碎至40目，放入- 40℃速冻设备中速冻1.5h；然后加入体积分数55%的乙醇（固液比1：20）混均，装入容器后（物料层厚度4 cm）用脉冲强光照射4s（脉冲强光的强度为4.9J/cm2，照射距离为12cm）；再在40℃下提取2h后过滤并收集提取液，制得藤本豆黄酮粗品。
测定：采用紫外分光光度法，以芦丁作为标准对照品，绘制芦丁标准曲线，测定藤本豆中总黄酮的含量。
（1）芦丁标准曲线的绘制
准确称取120℃下干燥恒重的芦丁标准品12.5mg，用浓度为60%的微热乙醇定容至50.0mL，摇匀，待用。
准确吸取芦丁标准品0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4mL于6支比色管中，分别加入浓度为60%的乙醇至2.4 mL，然后加入0. 4 mL 5%亚硝酸钠，摇匀，放置6min；加人0.4mL10%硝酸铝溶液，摇匀，放置6 min；再加入4.0ml 1mol/L氢氧化钠，摇匀，放置10~15min，测定吸光度。以芦丁标准品浓度(C)为横坐标，吸光度(y)为纵坐标绘制标准曲线。
（2）藤本豆中总黄酮含量的测定
精密吸取样品溶液2mL，置于10mL带塞玻璃管中，按标准曲线法测定总黄酮含量，根据下列公式计算总黄酮提取率。
总黄酮提取率Y(mg/g) =CV/M
式中: C为样品溶液中黄酮浓度mg/mL；
V为样品溶液总体积mL；
M为称取的藤本豆质量g。
根据上述公式，藤本豆中总黄酮的提取率为5.32 mg/g；不经速冻与脉冲强光处理的藤本豆（其它条件一样）总黄酮提取率为4.96 mg/g；不经脉冲强光处理而经速冻处理的藤本豆（其它条件一样）总黄酮提取率为5.07mg/g；不经速冻处理而经脉冲强光处理的藤本豆（其它条件一样）总黄酮提取率为5.12 mg/g。可见，采用速冻及脉冲强光联合处理技术进行藤本豆总黄酮的制备，可以获得提取率高、质量优且无污染的黄酮类产品。
实施例2
取200g鲜藤本豆经晒干（含水率13.1%）、剥壳、整理后，粉碎至20目，放入-18℃速冻设备中速冻2.5h；然后加入体积分数60%的乙醇（固液比1：25）混均，装入容器后（物料层厚度6cm）用脉冲强光照射2s（脉冲强光的强度为4.9J/cm2，照射距离为6cm）；再在50℃下提取1.5h后过滤并收集提取液，制得藤本豆黄酮粗品。
测定方法同实施例1：采用紫外分光光度法，以芦丁作为标准对照品，绘制芦丁标准曲线，测定藤本豆中总黄酮的含量为5.21 mg/g；不经速冻与脉冲强光处理的20目藤本豆（其它条件一样）总黄酮提取率为4.85 mg/g；不经脉冲强光处理而经速冻处理的藤本豆（其它条件一样）总黄酮提取率为4.95mg/g；不经速冻处理而经脉冲强光处理的藤本豆（其它条件一样）总黄酮提取率为5.03 mg/g。
实施例3
取180g鲜藤本豆经晒干（含水率12.3%）、剥壳、整理后，粉碎至30目，放入-30℃速冻设备中速冻2h；然后加入体积分数50%的乙醇（固液比1：15）混均，装入容器后（物料层厚度8cm）用脉冲强光照射3s（脉冲强光的强度为3.2J/cm2，照射距离为8cm）；再在60℃下提取1h后过滤并收集提取液，制得藤本豆黄酮粗品。
测定方法同实施例1：采用紫外分光光度法，以芦丁作为标准对照品，绘制芦丁标准曲线，测定藤本豆中总黄酮的含量为5.42 mg/g；不经速冻与脉冲强光处理的20目藤本豆（其它条件一样）总黄酮提取率为5.01 mg/g；不经脉冲强光处理而经速冻处理的藤本豆（其它条件一样）总黄酮提取率为5.12mg/g；不经速冻处理而经脉冲强光处理的藤本豆（其它条件一样）总黄酮提取率为5.17mg/g。
Claims (3)
1.一种采用速冻与脉冲技术提高藤本豆总黄酮提取率的方法，其特征在于所述方法包括如下步骤：
（1）干燥：采收后的鲜藤本豆经晒干、剥壳、整理后得到干燥后的藤本豆籽粒；
（2）粉碎：将干燥后的藤本豆籽粒进行粉碎，粒度为20～40目，得到藤本豆粉；
（3）速冻：将藤本豆粉放入- 40～-18℃速冻设备中速冻1.5～2.5h；
（4）脉冲强光辅助提取：以w/v1:15～25的固液比迅速将速冻后的藤本豆粉与体积比为50～60%乙醇混匀后，放入容器中即刻进行脉冲强光照射；然后在温度40～60℃下提取1～2h，最后过滤并收集提取液，得到藤本豆黄酮粗品；所述脉冲强光的强度为3.2～4.9J/cm2，照射距离为6～12cm，照射时间为2～4s，每秒闪照3次。
2.根据权利要求1所述的一种采用速冻与脉冲技术提高藤本豆总黄酮提取率的方法，其特征在于：步骤（1）中晒干后的藤本豆的含水量为12～14%。
3.根据权利要求1所述的一种采用速冻与脉冲技术提高藤本豆总黄酮提取率的方法，其特征在于：步骤（4）中所述容器为正方形或长方形，照射时物料容器表面开口，且容器内物料层厚度为4～8 cm。
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2013
- 2013-04-07 CN CN201310117351.6A patent/CN103191177B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102166004A (zh) * | 2011-03-08 | 2011-08-31 | 马涛 | 采用脉冲强光制备发芽糙米的方法 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| 大豆茎中黄酮类化合物的提取及抗氧化作用研究;刘立新，等;《黑龙江医药科学》;20111231;第34卷(第5期);第60-61页 * |
| 殷涌光,等.高压脉冲电场法提取干松针总黄酮及其体外抗氧化性检测.《天然产物研究与开发》.2009,第21卷第1032-1035页、第1056页. * |
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| 食品冷杀菌技术-脉冲强光杀菌;陆蒸;《浙江农村机电》;20051231;第17页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103191177A (zh) | 2013-07-10 |
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