CN103190538A - 一种黄曲霉毒素b1降解剂及其应用 - Google Patents

一种黄曲霉毒素b1降解剂及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种黄曲霉毒素B1降解剂,包括成分a和成分b,其组合比例为2∶3,其中:所述成分a的制备方法为:乳酪杆菌CGMCC1.62、枯草芽孢杆菌CGMCC1.504、异常汉逊酵母CGMCC2.881,单独培养48h后,以2∶1∶1的比例混合后加载体低温干燥。所述成分b的制备方法为:以AFB1作为碳源和能源进行AFB1降解菌株的筛选,经过26S rDNA的鉴定结果显示,筛选到降解AFB1的真菌为米曲霉,在中国微生物菌种保藏中心的登记编号为CGMCC5817,对降解AFB1的真菌进行固体发酵培养,提取AFB1降解酶粗酶液,加入载体后低温干燥。本发明为黄曲霉毒素B1降解剂在动物生产中的应用,以及从基因水平上研究AFB1的致病机制并采取措施缓解其危害奠定了基础。

Description

一种黄曲霉毒素B1降解剂及其应用
技术领域
本发明属于家禽养殖技术领域,具体涉及一种黄曲霉毒素B1降解剂及其应用。
背景技术
全世界每年因霉菌毒素污染的粮食作物占粮食总产量得1/4以上,采取措施抑制霉菌毒素的产生并对污染的粮食和饲料进行脱毒处理,是减少损失及保护动物和人类健康的迫切要求。目前在动物生产中应用较为广泛的脱毒方法是通过添加吸附剂的方法对被污染的粮食和饲料作物进行脱毒处理。但是这种方法多是吸附剂与霉菌毒素的螯合,虽然可以有效的吸附霉菌毒素,但是这种简单的吸附在条件改变时霉菌毒素极易从吸附剂上解离且毒性依然存在,同时吸附剂还会吸附饲料中的一些营养物质而影响其利用率。因此采取更为有效和安全的方法对霉菌毒素进行脱毒处理便成为解决问题的关键。采用微生物降解霉菌毒素,由于其具有效率高、无残留、成本低廉和操作简便等优点引起了研究人员的广泛关注,尤其是利用微生物或者其产生的酶将霉菌毒素降解为无毒产物更成为目前研究的热点。
对被霉菌毒素污染的粮食作物和饲料进行脱毒处理是扩大饲料资源、降低损失的有效方法,而如果能采取措施抑制原料储藏过程中霉菌的生长,则可从源头上减少霉菌毒素产生。因此可以考虑利用微生物之间的竞争作用,将具有抑制霉菌生长的微生物或其代谢产物按比例添加到饲料原料中抑制霉菌的生长,进而抑制毒素的产生,从而达到预防畜禽霉菌毒素中毒的目的。
发明内容
为了解决上述技术问题,本发明提供一种黄曲霉毒素B1降解剂,在对AFB1有降解作用的益生菌和降解酶的基础上,将益生菌与AFB1降解酶配合应用于肉鸡生产中,观察其对肉鸡饲料中AFB1的解毒效果并探索其解毒机理,为其在动物生产中的应用提供依据。
其技术方案如下:
一种黄曲霉毒素B1降解剂,包括成分a和成分b,其组合比例为2∶3,其中
所述成分a的制备方法为:乳酪杆菌CGMCC1.62、枯草芽孢杆菌CGMCC1.504、异常汉逊酵母CGMCC2.881,单独培养48h后,以2∶1∶1的比例混合后加载体低温干燥。
所述成分b的制备方法为:以AFB1作为碳源和能源进行AFB1降解菌株的筛选,经过26S rDNA的鉴定结果显示,筛选到降解AFB1的真菌为米曲霉,在中国微生物菌种保藏中心的登记编号为CGMCC5817,对降解AFB1的真菌进行固体发酵培养,提取AFB1降解酶粗酶液,加入载体后低温干燥。
成分a和成分b,按2∶3比例混合后制成黄曲霉毒素B1降解剂,其中乳酪杆菌、枯草芽孢杆菌和异常汉逊酵母三种菌的含量分别为2×109个/g、1×109个/g和1×109个/g,AFB1降解酶活力为135U/g。AFB1降解酶活力的定义为:在37℃的条件下每分钟降解1ng AFB1为一个酶活单位。
发明所述黄曲霉毒素B1降解剂在肉鸡生产中的应用。
本发明的有益效果:
本发明通过筛选得到对黄曲霉菌生长及AFB1降解效果较好的菌株,并对AFB1降解酶进行分离纯化,之后将益生菌与AFB1降解酶配合应用于肉鸡生产中,观察其对肉鸡饲料中AFB1的解毒效果,最后运用基因芯片对肝脏中相关基因表达量进行了测定,为AFB1降解在动物生产中的应用,以及从基因水平上研究AFB1的致病机制并采取措施缓解其危害奠定了基础。
附图说明
图1为益生菌组合与AFB1降解酶粗酶液配伍对AFB1的降解作用示意图,A、B、C表示的是统计分析中差异显著性,其中大写字母不同表示差异显著(P<0.05),有一个大写字母相同表示差异不显著(P>0.05);
具体实施方式
下面结合附图具体实施方式对本发明的方法作进一步详细地说明。
1、试验菌株及材料
实验所用的乳酪杆菌(Lactobacillus casei)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、异常汉逊酵母(Hansenula anomala)均购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,并由河南农业大学生物技术与动物营养研究室保存。黄曲霉毒素B1购自Sigma公司,其测定采用德国RIDASCREEN公司Aflatoxin B1 30/15酶联免疫测定试剂盒。
2、单一益生菌的制备
(1)乳酪杆菌培养液的制备:按4%(v/v)的接种量在MRS培养基中接种乳酪杆菌,置于37℃恒温静止培养,待培养48h时收获。调节菌的含量为1×109CFU/mL。
(2)枯草芽孢杆菌培养液的制备:按4%(v/v)的接种量在LB培养基中接种枯草芽孢杆菌,置于37℃恒温振荡培养(150转/分),待培养48h时收获。调节菌的含量为1×109CFU/mL。
(3)异常汉逊酵母培养液的制备:按4%(v/v)的接种量在LB培养基中接种异常汉逊酵母,置于30℃恒温振荡培养(150转/分)培养,待培养48h时收获。调节菌的含量为1×109CFU/mL。
其中,MRS培养基的组成:胰蛋白胨10g、牛肉蛋白胨10g、酵母5g、葡萄糖20g、K2HPO4 2g、乙酸钠5g、柠檬酸铵2g、MgSO4 0.2g、MnSO4 0.05g,用800mL蒸馏水溶解后加入1mL Tween80,调pH为6.2~6.6,之后定容至1000mL,在121℃、1.034×105Pa条件下高压蒸汽灭菌20min;
LB培养基的组成:胰蛋白胨10g,酵母5g,NaCl10g,用800mL蒸馏水溶解后调pH为7.0,之后定容至1000mL,在121℃、1.034×105Pa条件下高压蒸汽灭菌20min。
3、AFB1降解菌株的筛选
以AFB1作为碳源和能源进行AFB1降解菌株的筛选。经过26S rDNA的鉴定结果显示,筛选到降解AFB1的真菌为米曲霉,在中国微生物菌种保藏中心的登记编号为CGMCC5817。
4、降解AFB1的米曲霉所产粗酶液的提取
挑取降解AFB1米曲霉菌株,将其涂布于PDA固体平皿,置于30℃恒温培养至孢子大量产生时收获(约96h)。在平皿中加入适量灭菌生理盐水(含体积分数0.05%的Tween80),用涂布棒将平皿上的孢子刮下,用四层纱布过滤以除去菌丝残体,将孢子浓度调整为1×108CFU/mL,按每瓶5mL接种于固体发酵培养基中,混合均匀后置于30℃恒温培养箱中培养5d后收获。按照固液比1∶2的比例将固体发酵培养物与生理盐水混合均匀,室温浸泡1h(浸泡过程中间断搅拌)。浸泡完成后先用8层纱布过滤发酵培养物,之后将滤液10000×g条件下离心5min,再用定性滤纸过滤,最后用0.20μm的滤膜过滤除菌后保存于4℃冰箱,即为米曲霉所产降解AFB1的粗酶液。
5、粗酶液对AFB1的降解作用
选取粗酶液6mL(另取6mL高温灭活的粗酶液作为对照组),加入AFB1使其浓度约为100μg/L,混合均匀后置于30℃恒温培养,48h后取样测定其中AFB1含量。经测定粗酶液对AFB1的降解率为77.05%。经过热变性试验证明AFB1降解酶的粗酶液为蛋白质。
6、益生菌与粗酶液配合对AFB1的降解作用
(1)试验设计
将益生菌组合(按上文推荐的比例组合,每种菌的含量为1×109CFU/mL)与降解AFB1粗酶液按表1的组合比例进行调配,使反应体系的最终体积均为60mL。加入AFB1使其在体系中的最终浓度约为50μg/L,将其置于37℃恒温气浴振荡器中振荡培养。以相同体积的PBS缓冲液加同等剂量的AFB1作为空白对照。
表1益生菌组合与降解AFB1粗酶液配伍对AFB1的降解的试验设计
Figure BSA00000860715200041
(2)益生菌组合与粗酶液配伍对AFB1的降解上清液中AFB1测定
将培养液混合均匀,用移液器吸取1mL,13,000转/分条件下离心5min,取离心后上清液用于AFB1含量测定。
(3)益生菌组合与粗酶液配伍对AFB1的降解作用
从图1可知,第5处理组对AFB1的降解率最高,降解率达到78.07%,说明益生菌组合与AFB1降解酶粗酶液以2∶3的比例配伍对AFB1的降解效果最好。单独的益生菌组合或AFB1降解酶对AFB1的降解率分别为69.48%和70.46%。充分说明,益生菌组合与AFB1降解酶具有很好的配伍作用。
本发明所述黄曲霉毒素B1降解剂在肉鸡生产中的应用。在具体应用后得到以下结论:
(1)益生菌组合与AFB1降解酶按2∶3的组合比例对AFB1的降解效果最好,对AFB1的降解率达78.07%。
(2)在AFB1含量为200μg/kg的肉鸡饲料中添加0.15%的益生菌和AFB1降解酶,可以显著缓解AFB1对肉鸡生产性能的不良影响。
(3)基因芯片检测结果显示,添加益生菌和AFB1降解酶显著缓解了因添加AFB1所导致的影响生产性能发挥的氧化还原酶系、细胞凋亡相关酶系、细胞生长相关酶系、免疫***过程控制酶系及代谢过程控制酶系等基因表达量发生不良改变的问题。
以上所述,仅为本发明较佳具体实施方式,本发明的保护范围不限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内,可显而易见地得到的技术方案的简单变化或等效替换均落入本发明的保护范围内。

Claims (2)

1.一种黄曲霉毒素B1降解剂,其特征在于,包括成分a和成分b,其组合比例为2∶3,其中:
所述成分a的制备方法为:乳酪杆菌CGMCC1.62、枯草芽孢杆菌CGMCC1.504、异常汉逊酵母CGMCC2.881,单独培养48h后,以2∶1∶1的比例混合后加载体低温干燥;
所述成分b的制备方法为:以AFB1作为碳源和能源进行AFB1降解菌株的筛选,经过26SrDNA的鉴定结果显示,筛选到降解AFB1的真菌为米曲霉,在中国微生物菌种保藏中心的登记编号为CGMCC5817,对降解AFB1的真菌进行固体发酵培养,提取AFB1降解酶粗酶液,加入载体后低温干燥;
成分a和成分b,按2∶3比例混合后制成黄曲霉毒素B1降解剂,其中乳酪杆菌、枯草芽孢杆菌和异常汉逊酵母三种菌的含量分别为2×109个/g、1×109个/g和1×109个/g,AFB1降解酶活力为135U/g,AFB1降解酶活力的定义为:在37℃的条件下每分钟降解1ng AFB1为一个酶活单位。
2.权利要求1所述黄曲霉毒素B1降解剂在肉鸡生产中的应用。
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Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103820353A (zh) * 2013-11-08 2014-05-28 山东农业大学 一株降解afb1的枯草芽孢杆菌
CN104738363A (zh) * 2013-12-27 2015-07-01 中粮营养健康研究院有限公司 红城红球菌在降解饲料或其原料中的黄曲霉毒素b1中的用途
CN105219677A (zh) * 2015-10-26 2016-01-06 山东华牧天元农牧股份有限公司 一种降解黄曲霉毒素的复合微生物制剂及其应用
CN106261474A (zh) * 2016-08-08 2017-01-04 广东海洋大学 一种利用乳酸菌降解食品中真菌毒素的方法
CN106860878A (zh) * 2017-01-13 2017-06-20 华中农业大学 Mt基因作为防治afb1致鸭肝脏损伤靶标基因的应用
CN108865901A (zh) * 2018-07-17 2018-11-23 山东省科学院生物研究所 一株米曲霉菌株及其在降解黄曲霉毒素中的应用
CN108893434A (zh) * 2018-07-21 2018-11-27 泸州正泰生物工程有限公司 一种降解黄曲霉素b1的微生物处理剂及其制备方法与应用
CN111281970A (zh) * 2018-12-10 2020-06-16 河南普爱饲料股份有限公司 一种复合益生菌发酵组合物及其在制备防治霉菌毒素引起的上皮细胞损伤的制剂中的应用
CN113521115A (zh) * 2021-07-15 2021-10-22 河南普爱饲料股份有限公司 黄曲霉毒素解毒组合物及其制备方法与应用
CN115281316A (zh) * 2022-06-24 2022-11-04 黄淮学院 用于降解肉制品中霉菌毒素的复合发酵菌剂及高消化率发酵鸡肉干的制备方法
CN116064332A (zh) * 2023-02-01 2023-05-05 山东省花生研究所 一株降解黄曲霉毒素b1的菌株及其应用

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107937357A (zh) * 2016-10-12 2018-04-20 河南工业大学 复合微生物制剂高效降解黄曲霉毒素b1的制备方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1364421A (zh) * 2001-01-12 2002-08-21 暨南大学 一种饲料中黄曲霉毒素的脱毒方法
CN101238866A (zh) * 2008-03-05 2008-08-13 仲恺农业技术学院 一种黄曲霉毒素的降解方法
CN101525633A (zh) * 2009-04-13 2009-09-09 天津科技大学 一种乳杆菌产抗植物致病真菌发酵液的制备方法
CN101720848A (zh) * 2009-12-09 2010-06-09 中国农业科学院饲料研究所 一种生物降解饲料中霉菌毒素的复合酶
CN102286378A (zh) * 2011-02-25 2011-12-21 河南普爱饲料股份有限公司 一种抑制黄曲霉生长及降解黄曲霉毒素的复合益生菌及其应用
CN102925361A (zh) * 2012-08-10 2013-02-13 河南普爱饲料股份有限公司 一种afb1降解菌及降解酶

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1364421A (zh) * 2001-01-12 2002-08-21 暨南大学 一种饲料中黄曲霉毒素的脱毒方法
CN101238866A (zh) * 2008-03-05 2008-08-13 仲恺农业技术学院 一种黄曲霉毒素的降解方法
CN101525633A (zh) * 2009-04-13 2009-09-09 天津科技大学 一种乳杆菌产抗植物致病真菌发酵液的制备方法
CN101720848A (zh) * 2009-12-09 2010-06-09 中国农业科学院饲料研究所 一种生物降解饲料中霉菌毒素的复合酶
CN102286378A (zh) * 2011-02-25 2011-12-21 河南普爱饲料股份有限公司 一种抑制黄曲霉生长及降解黄曲霉毒素的复合益生菌及其应用
CN102925361A (zh) * 2012-08-10 2013-02-13 河南普爱饲料股份有限公司 一种afb1降解菌及降解酶

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
RUIYU ZUO 等: "Inhibiting Aspergillus flavus growth and degrading aflatoxin B1 by combined beneficial microbes", 《AFRICAN JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY》 *

Cited By (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103820353B (zh) * 2013-11-08 2015-10-14 山东农业大学 一株降解afb1的枯草芽孢杆菌
CN103820353A (zh) * 2013-11-08 2014-05-28 山东农业大学 一株降解afb1的枯草芽孢杆菌
CN104738363B (zh) * 2013-12-27 2019-10-15 中粮营养健康研究院有限公司 红城红球菌在降解饲料或其原料中的黄曲霉毒素b1中的用途
CN104738363A (zh) * 2013-12-27 2015-07-01 中粮营养健康研究院有限公司 红城红球菌在降解饲料或其原料中的黄曲霉毒素b1中的用途
CN105219677A (zh) * 2015-10-26 2016-01-06 山东华牧天元农牧股份有限公司 一种降解黄曲霉毒素的复合微生物制剂及其应用
CN106261474A (zh) * 2016-08-08 2017-01-04 广东海洋大学 一种利用乳酸菌降解食品中真菌毒素的方法
CN106860878A (zh) * 2017-01-13 2017-06-20 华中农业大学 Mt基因作为防治afb1致鸭肝脏损伤靶标基因的应用
CN108865901A (zh) * 2018-07-17 2018-11-23 山东省科学院生物研究所 一株米曲霉菌株及其在降解黄曲霉毒素中的应用
CN108865901B (zh) * 2018-07-17 2020-06-09 山东省科学院生物研究所 一株米曲霉菌株及其在降解黄曲霉毒素中的应用
CN108893434A (zh) * 2018-07-21 2018-11-27 泸州正泰生物工程有限公司 一种降解黄曲霉素b1的微生物处理剂及其制备方法与应用
CN111281970A (zh) * 2018-12-10 2020-06-16 河南普爱饲料股份有限公司 一种复合益生菌发酵组合物及其在制备防治霉菌毒素引起的上皮细胞损伤的制剂中的应用
CN113521115A (zh) * 2021-07-15 2021-10-22 河南普爱饲料股份有限公司 黄曲霉毒素解毒组合物及其制备方法与应用
CN113521115B (zh) * 2021-07-15 2023-12-29 河南普爱饲料股份有限公司 黄曲霉毒素解毒组合物及其制备方法与应用
CN115281316A (zh) * 2022-06-24 2022-11-04 黄淮学院 用于降解肉制品中霉菌毒素的复合发酵菌剂及高消化率发酵鸡肉干的制备方法
CN116064332A (zh) * 2023-02-01 2023-05-05 山东省花生研究所 一株降解黄曲霉毒素b1的菌株及其应用
CN116064332B (zh) * 2023-02-01 2023-08-15 山东省花生研究所 一株降解黄曲霉毒素b1的菌株及其应用

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