CN103189732B - 用于自动将至少一个显微标本与标本载体分离并且转移到收集***的装置和方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种用于自动将至少一个显微标本与标本载体(4)分离并且转移到收集***(11)进行自动后续分析的装置(1),包括:选择装置(2),用来选择至少一个位于标本载体(4)上的标本;可控的分离装置(6),用于自动分离至少一个所选的标本;可控的转移装置(7),所述转移装置具有用于确定性拾取和确定性放下至少一个所选的分离标本、从而将至少一个所选的分离标本从标本载体(4)自动和确定性转移到收集***(11)的载具;以及控制单元,所述控制单元与选择装置(2)、分离装置(6)和转移装置(7)数据连接,从而可自动执行分离和转移操作。

Description

用于自动将至少一个显微标本与标本载体分离并且转移到收集***的装置和方法
技术领域
本发明涉及用于自动将至少一个显微标本与标本载体分离并且转移到收集***的装置和方法。
尽管可以应用于任意的标本,以下仍然将参考基于膜的标本,这里尤其参考基于膜的显微切割组织,尤其是利用激光辅助显微切割技术分离的显微切割组织,对本发明及其所要解决的问题进行详细描述。
背景技术
激光辅助显微切割技术能够从组织切片中定点分离极小的区域直至单个细胞,所述切片组织不仅可以包括固定化细胞***,而且也可以包括活细胞***。除此之外,还可以利用非接触激光操纵保证显微切割单个的细胞区室,例如细胞器、染色体和染色体片段。结合运用PCR、克隆技术和激光显微切割,就能培养用于分子细胞遗传学的区域特异性染色体标本。然而这些基于激光显微切割的方法类似于玻璃针显微切割法,均利用尽可能细的玻璃针来收集片段。激光显微切割技术的进一步改进是采用激光捕获显微切割,该方法是将塑料膜覆在待研究的区域上,通过局部熔化薄膜将待分离的细胞从组织中去除。
激光压力弹射原理(LPC或LMPC)描述了一种不同的单个细胞和细胞群分离方法,该技术是将具有几瓦功率峰值的脉冲紫外激光对准待分离的组织区域。与激光捕获显微分割技术相反,将组织覆在厚度为几个μm的超薄载体膜上。可以利用脉冲紫外微激光束定点分离细胞或细胞群,在另一个操作步骤中利用高能光脉冲将其分离到收集装置之中。目视检查放置情况之后,分离物质即可用于其它生物化学方法。
专利文献WO 2005/107949 A1描述了一种方法和一种装置,可用来形成一种具有离散独立测量区进行生物、生化或化学分析的分析布置。
发明内容
鉴于上述已知的方法,本发明的目的在于提供一种经过进一步改进的装置和一种经过改进的方法。
本发明的目的按照本发明采用具有权利要求1所述特征的一种装置以及具有权利要求10所述特征的一种方法得以实现。
按照本发明所述,提供一种用于自动将至少一个显微标本与标本载体分离并且转移到收集***进行自动后续分析的装置,包括:选择装置,用来选择至少一个位于标本载体上的标本;可控的分离装置,用于自动分离至少一个所选的标本;可控的转移装置,所述转移装置具有用于确定性拾取和确定性放下至少一个所选的分离标本、从而将至少一个所选的分离标本从标本载体自动和确定性转移到收集***的载具;以及一个控制单元,所述控制单元与选择装置、分离装置和转移装置数据连接,从而可自动执行分离和转移操作。
此外还提供一种自动将至少一个显微样本与样本载体分离并且转移到收集***的方法,包括以下方法步骤:利用选择装置选择至少一个位于样本载体上的样本;利用可控的分离装置自动分离至少一个所选的样本;利用可控的转移装置自动并且确定性将至少一个所选的分离样本从样本载体转移到收集***,所述转移装置具有用来确定性拾取和确定性放下至少一个所选分离样本的载具;并且利用一个通过数据线与选择装置、分离装置和转移装置相连的控制单元根据至少一个样本的选择步骤来控制分离装置和转移装置。
与已知的方法相比,本发明的优点在于:以完全确定性和可控的方式进行分离并且将所分离的样本全部从样本载体转移到收集***。还可以同步所有过程步骤并且使其完全自动化,从而有利于进行高通量分析。此外本发明还能实现对放下的样本物质进行直接后续分析。还能可靠避免所分离的样本由于确定性拾取、转移和放下而受损。还可以目视检查实际的转移过程。
从属权利要求所述均为本发明所述装置和本发明所述方法的有益实施方式和改进实施方式。
所谓“确定性拾取”、“确定性放下”和“确定性转移”样本,指的是在任何时刻均预先知道样本位置并且控制单元可以干预或者至少任何时刻均可检测样本位置的情况下进行拾取、放下和转移。
所谓“载具”指的是以机械方式拾取、转移和放下样本的器具,也就是说,至少有时会在样本和载具之间产生形锁合、材料锁合和/或者力锁合。
按照本发明的一种优选实施例,选择装置具有显微单元和与其耦合的显示装置,尤其是用来显示样本载体上可供使用的样本的显微图像的触摸屏。显示装置优选具有用来选择至少一个待分离和待转移样本的选择构件,尤其可借助光学标记构件以图形方式在触摸屏上标记至少一个待分离和待转移的样本。例如可利用几何形状标记待分离的区域,并且利用分离装置自动将所标记的区域分割出来。很容易操作这种选择和自动化方法。因此有利于提供一种便于用于操作的装置以及一种便于用户操作的方法。
按照另一种优选实施例,分离装置具有一个经过适当设计的激光器,尤其是UVa激光器,可用来以可重现且没有污染的方式自动分离至少一个所选的样本。所述激光仅仅用来将所选的样本从整个载体上分割出来,并不同时用来将分割出来的样本转移到相应的转移***。
按照另一种优选实施方式,转移装置具有一个经过适当设计的负压吸持***,可用来以可重现且没有污染的方式自动转移至少一个待转移的样本。转移装置适宜具有一个自动对焦***,可用来精确调整负压吸持***的位置,使其与待转移的样本相隔一段预定的距离。这样即可进一步改善整个转移操作的可重现性以及自动化程度。例如可以按照申请号为08150662的欧洲专利申请中所述设计负压***。
由于所使用的负压吸持***具有特殊的载具,可以实现确定性输送,并且能够将例如显微切割样本定点放在例如液滴上的结构化放置点上,所述液滴尤其位于微薄片或者微量滴定板上。例如转移装置可以具有特殊设计的托臂和安装于托臂上的吸盘,从而可保证以可重现的方式确定性输送样本。还可以在整个分离和转移操作过程的任何时刻检查各个操作步骤或者分离样本的相应状态。还能以简单方式保证获得可用于后续分析方法的均匀样本物质。
按照另一种优选实施方式,负压吸持***包括多个可以逐一控制的、用于同时转移多个样本的吸持装置,这样就能有利于进一步提高样本通量和分析量。可以设想,例如这里是一种自动储存***,该***具有若干单个的吸持装置,首先逐一吸持预定数量的样本,接着将所吸持的这些样本同时转移到对应的收集***,而后再将其逐一放下。
按照另一种优选实施例,收集***具有一个部分受到保护的部分,尤其是部分受到保护的滑槽,其中有一个适合于通过转移装置将至少一个样本放在收集***上的开口区域,这样就能有利于防止外部污染,保证以无污染方式进行转移。
按照另一种优选实施方式,提供一个用来确认成功将至少一个样本放在收集***上的反馈控制装置,该反馈控制装置例如具有布拉格反射镜,其反射在肯定放下至少一个样本之后会发生可以检测到的变化。这样有利于保证检查是否肯定放下,以便能够自动、简单地连接其它后续生化过程。例如只有在用来确认肯定放下的反馈控制装置发出肯定的反馈信号之后,才会开始下一个后续过程。
按照另一种有益的实施方式,成功将样本放在收集***上之后自动分析样本,所述分析例如是一种生化分析、光学分析、PCR分析、核酸分析(DNA,RNA,siRNA,microRNA)和/或者蛋白质分析。
可以将所转移的样本用于所有后续的定性和定量诊断核酸和蛋白质的方法,例如
1)生化方法:
a.定性:凝胶电泳法,PCR,2D蛋白质凝胶
b.定量:RT-PCR(实时聚合酶链反应)
2)光学方法:
a.定性:荧光显微镜检查法,检测光学密度,ELISA,免疫组织化学方法
b.定量:RT-PCR
3)核酸法:
a.定性:杂交法(例如FISH,微阵列技术)
b.定量:RT-PCR,cGH(基因组分析,阵列技术)
由于微型化提高了处理密度,在诊断领域可以追寻以下发展方向:
1)分析用于开发新药物或者用于个人化药品的DNA和蛋白质
2)分析装置的微型化进入纳升范围
3)直接在病床边确定重要的测量值(point-of-care床边诊断,POC)。
附图说明
以下将根据实施例,并且参照附图对本发明进行详细说明。附图如下:
附图1本发明一种优选实施例所述将显微样本从样本载体自动分离并且转移到收集***的装置在取样位置中的示意透视图;
附图2附图1中的局部放大图,尤其绘出了显微装置和转移装置;
附图3附图1所示装置的示意透视图,转移装置位于样本输出位置中;
附图4本发明另一种实施例所述转移装置以及收集***的示意透视图;以及
附图5附图4中的优选实施例所述转移装置的吸持装置透视图。
只要没有其它说明,附图中具有相同编号的附图标记均表示相同的或者功能相同的部件。
具体实施方式
以下将参考附图1~3详细描述本发明的第一种优选实施例。附图1所示为例举的自动分离和转移显微样本的装置1的示意透视图。该例举的装置1包括一个选择装置2,该选择装置尤其具有一个物镜形式的显微单元3作为组成部分。按照本发明的一种实施例,将载物台4设计成显微镜载物台,并且作为显微单元的组成部分。当然同样可以将载物台4设计成可以将具有例如载体膜的载玻片夹紧于其中的独立显微镜载物台。还具有聚光镜9,它布置在光源和待成像的显微样本之间。聚光镜9将光线引向样本,光线透过样本,然后射入成像物镜之中,以获得尽可能大的分辨率。
在此应注意,尤其按照激光显微切割法将装置1设计成用来转移所分离的组织块或细胞(以下称作样本)的显微切割***。按照激光显微切割法,通常将样本排列在载体膜上,通过以下还将详细描述的转移装置将其与载体膜一起从载物台4输送到分析装置。
选择装置2还优选包括一个显示装置5,在该显示装置上显示位于载物台4上的样本的显微图像。例如将显示装置5设计成触摸屏和/或者通常如附图1所示显微镜中一样的望远镜状的透镜***,并且将其与显微单元3相连。按照本实施例所述,用户可以利用相应的软件,以方便于操作的简单方式标记位于载物台4上的样本,以便继续进行处理,尤其是分离和转移。例如在触摸屏上投射样本的显微图像,利用几何形状在触摸屏上标记相应样本的待分离区域,即可在载物台4上定点选择待分离的样本。可以仅仅标记和选择一个待分离的样本,或者按照本实施例所述,依次标记和选择多个待分离和待转移的样本。
按照本实施例所述,装置1还具有一个可控的分离装置6,例如将其设计成适当的激光器,尤其将其设计成UVa激光器。现在可利用分离装置6切割所标记和选择的样本或样本体的某个预定区域,分离出待转移的样本。所述分离装置6适宜与一个控制单元相连,该控制单元尤其可根据设定值来自动控制激光焦距、激光能量和激光触发器。
此外装置1还可以具有例如一个可控的转移装置7,在申请号为08150662的欧洲专利申请书中已详细描述了这种转移装置。因此本申请包括该欧洲专利申请书中所述的转移装置的特征。
转移装置7最好可以独立工作,并且可以将其整合在现有的***之中,这里是可以将其适当整合在装置1之中,从而可以将转移装置7固定安置在显微单元3上。例如转移装置可以具有吸持装置8,该吸持装置可用来在附图1和附图2的放大视图所示的取样位置中从载物台4上吸持样本,或者在附图3所示的样本输出位置中吹出样本。
例如吸持装置8具有由硼硅酸盐玻璃微管和封闭膜构成的纳米吸盘。按照本实施例所述,玻璃微管具有L形状,并且其中一端与连接管气密相连。玻璃微管的另一端在端面侧具有一个包括载板和封闭格栅的封闭膜,载板例如设计成具有中心孔的圆盘。载板优选由导电材料构成,例如铜或者类似材料。载板优选固定在纳米吸盘头部的端面上,使得载板的中心孔与吸管的开口对齐。
封闭膜还具有封闭格栅,该封闭格栅同样也优选由导电材料或者具有导电表面的材料构成。封闭格栅例如同样设计成圆形的盘状,最好能够以适当的方式调整格栅厚度和封闭格栅的孔径,使之适合于待转移的样本。可以想象,例如格栅厚度大约为20μm,孔径大约在60nm~50μm之间。封闭格栅优选这样放在载板上,使得格栅完全遮盖载板的孔和吸管的开口。整个设置优选这样构成,使得吸入空气直接导过格栅并在相对于周围环境不密闭的任何部位不导过。
为了保护样本,应防止纳米吸盘产生静电。因此采用一些电触点在载板和吸管的导电涂层之间形成电连接。这样有利于通过吸管或者对应于吸管的接地线放掉例如样本或封闭膜的材料所引起的静电。
此外转移装置7还包括一个负压/正压单元,例如气动皮升泵,该单元可提供将样本吸附到封闭格栅所需的负压,或者将样本从封闭格栅吹出到收集***11所需的正压。为此负压/正压单元以适当方式与吸持装置8相连。此外负压/正压单元与控制单元数据连接,从而可保证根据相应的应用情况调整负压/正压单元的设置。这样尤其可以根据相应的应用情况预先确定、调整和控制负压/正压单元的吸气能力以及吹气脉冲的强度。可以调节很少毫秒的正压持续时间,同样有利于将所拾取的样本可靠释放到以下还将详细解释的分析装置或收集***11上的液滴之中,不会使得该液滴雾化。
此外转移装置7还优选具有一个自动对焦***,该自动对焦***同样与控制单元相连,并且控制负压吸持***以一定的距离逼近样本表面。例如可采用一种适当的激光传感器,该激光传感器可在联机状态下检测封闭膜与待吸持的样本之间的距离,或者与应放下所拾取的样本的收集***11的距离。例如可以将用于自动调节距离的LTA-02激光传感器自动对焦单元作为激光传感器,该自动对焦单元可自动调整相关表面之间例如100μm的给定距离。
此外转移装置7还包括一个载体装置10,至少一个吸持装置8设置在该载体装置上。载体装置10优选与一个对应的定位单元相连。定位装置最好有四个自由度可用来调整载体装置10,即三个平移运动以及一个使得载体装置在水平平面中摆动的旋转运动。优选使用减振步进电机来精确定位吸持装置8。当然对于专业人士而言显而易见,这里也可以使用其它适当的驱动装置。例如可使用能够以μm级精度定位载体装置10和纳米吸盘的微米级步进电机。
如果将转移装置7安置在对应的显微单元3上,则仅需适当调整载物台4,由于是固定安置,可在显微单元3的参考系中调整载体装置10,因此当载体装置10摆动时,能保证将纳米吸盘精确定位在显微单元3的透镜***或激光***上方。这样可保证最大精度,并且能快速拾取相应的样本,也可拾取很小的样本。可利用相应的软件和以上所述的中央控制单元自动执行全部调整运动。
装置1还包括一个收集***11,该收集***优选安置在受保护的滑槽之中,并且将其作为各个样本的存放处。例如收集***由一个位于适当盖板之下具有若干放置点的结构化容纳载体构成,可保证只有预定的开口区域用于通过转移装置7收纳相应的样本。可供转移装置7进入的区域很小,以防止从外部污染待转移和待分析的样本。也适宜利用相应的适配器将收集***11固定安置在预定的显微单元3上。
各个或者至少一个所选的上述部件优选与中央控制单元这样数据连接,使得可以利用中央控制单元选择待分离和待转移的样本,在结构化收集***上全自动执行全部分离、转移以及放下操作过程。还可通过上述装置1保证确定性并且无污染的分离和转移。利用上述装置1执行的所有处理步骤均同步并且完全自动进行,从而可保证高通量分析。负压吸持***能够以无接触方式拾取从样本载体分离的样本,并且能够以最小的体积(例如50~400nl,优选最大1000nl)定向放置在任何类型的结构化收集***上。所述收集***可以是例如多孔滴定板、功能化载玻片或者生物薄片(Lab-on-a-chip***)。可以逐一或者合并拾取样本。为此可维持施加给转移装置7的负压,可以将一个或多个用来拾取样本的吸盘作为吸持装置8。可以逐一控制这些吸盘,或者利用中央控制单元同时控制这些吸盘。在预定的放置位置上方将分离的样本定点放入很小的液滴之中进行进一步分析。
进一步分析例如包括生化分析、光学分析、PCR分析、核酸分析和/或者蛋白质分析。
除了上述组件之外,装置1也可以具有其它组件,例如可保证用户以简单方式检查是否已经按照要求将样本放在收集***中的反馈控制装置(图中没有绘出)。例如反馈控制装置具有布拉格反射镜,这些布拉格反射镜可以被视作格栅,并且可在检测到肯定放下样本的情况下适当改变其反射,从而能够实现用于确认肯定放下的肯定性反馈***。其好处在于,只有当之前已经肯定放下之后,才能执行其它的后续生化处理。
优选通过专门开发的软件进行控制,主要是根据需要调节很少毫秒的正压持续时间,以及实现转移装置的摆动运动,以便能够将所拾取的样本可靠释放到例如收集***11的预定液滴之中,且不会使其雾化。可以通过软件任意设置所需的所有控制参数。
附图4和5中所示为本发明第二种实施例所述的转移装置7,以下将对其进行详细解释。关于以下没有详细描述的组件、实施方式和各个组件的作用原理,可参阅以上所述的实施例。
首先在附图4中可以看出,收集***11由一个可以露出的滑槽12和一个可以翻开的顶盖13构成。可以通过滑板***使得放置板14的各个区域进入、离开受保护的滑槽区域。这可用来避免从外部污染所放下的样本。附图4中所示的收集***当然也可以转用于附图1~3所示的第一种实施例。
此外在附图5中还绘出了附图4所示第二种优选实施例所述的吸持装置8的放大示意图,该吸持装置8可利用各个吸盘15、15′拾取多个样本,按照本实施例可拾取最多八个样本。
例如附图5所示实施例所述的吸持装置8具有一个可以旋转的圆柱体或转塔16,各个吸盘15、15′具有吸管,并且又可以通过相应的压力管路控制这些吸管。各个压力管路连接到对应于相应吸盘15、15′的接口17、17′并且可利用中央控制单元进行相应控制。这样就能单独吸持或者放下所分离的相应样本。例如可利用″Easy-to-Click″快速卡接***将压力管路连接到接口17、17′,从而能够以简单方式任意选择将要使用的吸盘数量。如果仅使用一个吸盘15,则不需要转动圆柱体或转塔16。如果使用多个吸盘15、15′,则将附加的压力管路连接到相应的接口17、17′,转动圆柱体或转塔16即可依次拾取所分离的各个样本。此外按照本实施例还可保证便于更换各个吸盘15、15′,从而有助于进行无污染的操作。
可以利用中央控制单元逐一选择和这样控制吸持装置8或各个吸盘15,使得某一个吸盘15借助可转动吸持装置8的圆柱体移动到载物台4上方并且拾取一个分离的样本。通过该吸盘15拾取该样本之后,吸持装置8的圆柱体16适当转动一定的角度,使得下一个预定的吸盘15′位于载物台4上方来拾取下一个已分离的样本。按照开始所选的待分离和待转移的样本的数量和顺序逐次重复执行该步骤,直至所有吸盘15、15′均已拾取了一个相应的分离样本。接着利用转移装置7,利用步进电机朝向收集***11调整吸持装置8。接着利用控制单元逐次将各个吸盘15、15′定位在收集***11的放置板14的相应放置点上方,并且放下附着在放置板上的样本,在放下一个样本之后重新适当转动圆柱体或转塔16,从而能够通过负压/正压***以适当方式放下另一个样本。
本发明提供用于自动将至少一个或多个显微样本与标本载体分离并且利用载具转移到收集***的一种装置和一种方法,有利于将显微切割样本水平输送并且定点放置在液滴中的结构化放置点上。可全自动分离和输送显微切割样本,任何操作时刻均可检查各个操作步骤或相应分离样本的状态。此外还能以简单方式操作上述装置,因为仅需通过触摸屏选择待分析的样本。
尽管已根据上述优选实施例对本发明进行了阐述,但可以用若干方式来实现本发明,而并不仅限于上述示例。尤其也可将吸持装置设计成与以上所述不一样的形式,只要保证全自动拾取和放下一个或多个样本即可。由于转移装置的准确性和精度很高,还可以例如任意缩放收集***或整合在其中的放置板。这样不仅有利于控制微量滴定板,而且也可控制含有纳升微滴的微薄片。
附图标记清单
1 装置
2 选择装置
3 显微单元
4 样本载体/载物台
5 显示装置
6 分离装置
7 转移装置
8 吸持装置
9 聚光镜
10 载体装置
11 收集***
12 滑槽
13 顶盖
14 放置板
15,15′ 吸盘
16 圆柱体
17,17′ 接口

Claims (26)

1.用于自动将至少一个显微样本与样本载体(4)分离并且转移到收集***(11)进行自动后续分析的装置(1),包括:
选择装置(2),用于选择至少一个位于样本载体(4)上的样本;
可控的分离装置(6),用于自动分离至少一个所选的样本;
可控的转移装置(7),所述转移装置具有用于确定性拾取和确定性放下至少一个所选的分离样本、从而将至少一个所选的分离样本从样本载体(4)自动和确定性转移到收集***(11)的载具;以及
控制单元,所述控制单元与选择装置(2)、分离装置(6)和转移装置(7)数据连接,从而可自动执行分离和转移操作,其中,转移装置(7)具有经过适当设计的负压吸持***(8),用来以没有污染的方式自动确定性转移至少一个待转移的样本,并且其中,所述负压吸持***(8)具有多个可以逐一控制的、用于同时转移多个样本的吸持装置(15,15'),所述负压吸持***(8)具有能够旋转的圆柱体或转塔(16),各个吸持装置(15,15')具有独立的吸管,这些吸管能够通过相应的压力管路被独立地控制。
2.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,选择装置(2)具有一个显微单元(3)和一个与其耦合的显示装置(5),所述显示装置(5)用来显示样本载体(4)上可供使用的样本的显微图像。
3.根据权利要求2所述的装置,其特征在于,所述显示装置(5)为触摸屏。
4.根据权利要求2所述的装置,其特征在于,显示装置(5)具有用来选择至少一个待分离和待转移样本的选择构件。
5.根据权利要求2所述的装置,其特征在于,显示装置(5)借助光学标记构件以图形方式在触摸屏上标记至少一个待分离和待转移的样本。
6.根据上述权利要求中任一项所述的装置,其特征在于,分离装置(6)具有一个经过适当设计的激光器,所述激光器用来以没有污染的方式自动分离至少一个所选的样本。
7.根据权利要求6所述的装置,其特征在于,所述激光器是UVa激光器。
8.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,转移装置(7)具有自动对焦***,用于精确调整负压吸持***(8)的位置,使之与至少一个待转移的样本相隔预定的距离。
9.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,收集***(11)具有一个部分受到保护的部分,其中有一适合于通过转移装置(7)将至少一个样本放在收集***(11)上的开口区域。
10.根据权利要求9所述的装置,其特征在于,所述部分受到保护的部分是部分受到保护的滑槽(12)。
11.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,还提供一个用来确认成功将至少一个样本放在收集***(11)上的反馈控制装置,该反馈控制装置具有布拉格反射镜,其反射在肯定放下至少一个样本之后会发生可以检测到的变化。
12.用于自动将至少一个显微样本与样本载体(4)分离并且转移到收集***(11)的方法,包括以下方法步骤:
利用选择装置(2)选择至少一个位于样本载体(4)上的样本;
利用可控的分离装置(6)自动分离至少一个所选的样本;
利用可控的转移装置(7)将至少一个所选的分离样本从样本载体(4)自动确定性转移到收集***(11),所述转移装置具有用来确定性拾取和确定性放下至少一个所选分离样本的载具;以及
利用与选择装置(2)、分离装置(6)和转移装置(7)数据连接的控制单元根据选择至少一个样本的步骤控制分离装置(6)和转移装置(7),其中,利用适当设计的负压吸持***(8)以无污染的方式自动确定性转移至少一个待转移的样本,并且其中,所述负压吸持***(8)具有多个可以逐一控制的、可用于同时转移多个样本的吸持装置(15,15'),所述负压吸持***(8)具有能够旋转的圆柱体或转塔(16),各个吸持装置(15,15')具有独立的吸管,这些吸管能够通过相应的压力管路被独立地控制。
13.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,利用显微单元(3)和与其相连的显示装置显示样本载体(4)上可供使用的样本的显微图像。
14.根据权利要求13所述的方法,其特征在于,所述显示装置是触摸屏。
15.根据权利要求13所述的方法,其特征在于,利用选择构件来选择至少一个待分离和待转移的样本。
16.根据权利要求13所述的方法,其特征在于,利用以图形方式在触摸屏上标记至少一个待分离和待转移的样本的光学标记构件来选择至少一个待分离和待转移的样本。
17.根据权利要求12-16中任一项所述的方法,其特征在于,利用适当设计的激光器(6)以无污染的方式自动确定性分离至少一个所选的样本。
18.根据权利要求17所述的方法,其特征在于,所述激光器是UVa激光器。
19.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,利用自动对焦***精确调整负压吸持***(8)的位置,使之与至少一个待转移的样本相隔预定的距离。
20.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,收集***(11)具有一个部分受到保护的部分,其中有一个适合于通过转移装置(7)将至少一个样本放在收集***(11)上的开口区域。
21.根据权利要求20所述的方法,其特征在于,所述部分受到保护的部分是部分受到保护的滑槽(12)。
22.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,利用反馈控制装置成功将至少一个样本放在收集***(11)上,该反馈控制装置具有布拉格反射镜,其反射在肯定放下至少一个样本之后会发生可以检测到的变化。
23.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,在成功将样本放在收集***(11)上之后自动分析样本,所述分析是生化分析。
24.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,在成功将样本放在收集***(11)上之后自动分析样本,所述分析是光学分析。
25.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,在成功将样本放在收集***(11)上之后自动分析样本,所述分析是PCR分析。
26.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,在成功将样本放在收集***(11)上之后自动分析样本,所述分析是核酸分析和/或者蛋白质分析。
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Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10156501B2 (en) * 2001-11-05 2018-12-18 Life Technologies Corporation Automated microdissection instrument for determining a location of a laser beam projection on a worksurface area
DE102013209964B4 (de) * 2013-05-28 2015-12-17 Leica Microsystems Cms Gmbh Lasermikrodissektionssystem mit Benutzerinformationseinheit und Verfahren zur Lasermikrodissektion
DE102013209881A1 (de) * 2013-05-28 2014-12-04 Leica Microsystems Cms Gmbh Lasermikrodissektionssystem mit Visualisierungseinrichtung, Visualisierungseinrichtung für Lasermikrodissektionssystem und Verfahren zur Lasermikrodissektion
DE102013209880A1 (de) * 2013-05-28 2014-12-04 Leica Microsystems Cms Gmbh Verfahren zur Lasermikrodissektion und Lasermikrodissektionssystem
CN107490545A (zh) * 2017-07-21 2017-12-19 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 一种高通量微生物单细胞自动化分选及接收***
CN112534237A (zh) 2018-06-21 2021-03-19 基美健有限公司 分析前基底处理的***和方法
AU2019288739A1 (en) * 2018-06-21 2020-11-26 Genomic Health, Inc. Automated sample preparation system and applications thereof
CN111500426B (zh) * 2020-03-16 2022-03-01 中国农业大学 一种用于分选混合溶液中猪***的微操作吸取装置
CN111366435A (zh) * 2020-04-27 2020-07-03 中国科学院广州生物医药与健康研究院 一种生物样品激光切割自动分离装置及分离方法
EP3971549A1 (en) * 2020-09-22 2022-03-23 Xyall B.V. Method, tool and apparatus for dissecting and transferring biological material
CN116438436A (zh) * 2020-09-22 2023-07-14 Xyall私人有限公司 解剖和转移生物材料的方法、工具和设备
CN114813804B (zh) * 2022-06-28 2022-10-11 浙江大学 一种一体式具有隔离功能的样品转移装置
CN116448499B (zh) * 2023-06-14 2023-08-25 成都永安制药有限公司 一种溶液检测采样装置
CN117491358B (zh) * 2024-01-03 2024-03-22 四川省中医药科学院 一种基于显微观测的中药材鉴定装置及鉴定方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1865432A (zh) * 2005-05-20 2006-11-22 麦克奥迪实业集团有限公司 激光显微切割后细胞收集方法
EP2083257A1 (de) * 2008-01-25 2009-07-29 Helmholtz Zentrum München Deutsches Forschungszentrum für Gesundheit und Umwelt GmbH Verfahren und Vorrichtung zum Übertragen einer mikroskopischen, isolierten Probe, Mikrodissektionssystem mit einer derartigen Vorrichtung sowie Verfahren zur Herstellung eines Nanosaugers

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0683661B2 (ja) * 1988-07-08 1994-10-26 株式会社日立製作所 試料用加工装置及びその操作方法
KR20020062358A (ko) * 1999-12-21 2002-07-25 지멘스 악티엔게젤샤프트 전기적인 컴포넌트를 위한 회전 장치를 포함하는 삽입헤드
JP4178741B2 (ja) * 2000-11-02 2008-11-12 株式会社日立製作所 荷電粒子線装置および試料作製装置
AU2002235174A1 (en) * 2000-11-03 2002-05-15 Arcturus Engineering, Inc. Road map image for automated microdissection
DE10152404C5 (de) 2001-10-24 2017-06-08 Carl Zeiss Microscopy Gmbh Laser-Mikrodissektionssystem
US8722357B2 (en) * 2001-11-05 2014-05-13 Life Technologies Corporation Automated microdissection instrument
JP4156851B2 (ja) 2002-03-22 2008-09-24 オリンパス株式会社 マイクロダイセクション装置
DE102004021904B4 (de) 2004-05-04 2011-08-18 Carl Zeiss Microlmaging GmbH, 07745 Verfahren und Vorrichtung zur Erzeugung einer Analyseanordnung mit diskreten, separaten Messbereichen zur biologischen, biochemischen oder chemischen Analyse
BRPI0512256A (pt) * 2004-06-17 2008-02-19 Massachusetts Inst Technology método para caracterizar o estágio de desenvolvimento ou patologia de uma amostra de tecido; método de identificação de uma célula de interesse ou de sincìcios multe-nuclear de interesse; método para diagnóstico de pré-neoplasia ou neoplasia; métodos de identificação de um ou mais agentes anti-tumorìgenos e método de preparação de uma amostra de tecido de mamìfero adequada para a identificação de células
JP2006064603A (ja) * 2004-08-30 2006-03-09 Asahi Breweries Ltd サンプリング装置及びビール製造装置
DE102005026540A1 (de) 2005-06-08 2006-12-14 P.A.L.M. Microlaser Technologies Ag Verfahren und Vorrichtung zur Handhabung von Objekten
EP1903325A3 (en) * 2006-09-21 2010-06-16 Kurashiki Boseki Kabushiki Kaisha Apparatus and method for preparing sliced specimen
JP5162738B2 (ja) * 2008-06-18 2013-03-13 学校法人東京医科大学 生細胞、生細胞内の構造物等の単離及び採取方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1865432A (zh) * 2005-05-20 2006-11-22 麦克奥迪实业集团有限公司 激光显微切割后细胞收集方法
EP2083257A1 (de) * 2008-01-25 2009-07-29 Helmholtz Zentrum München Deutsches Forschungszentrum für Gesundheit und Umwelt GmbH Verfahren und Vorrichtung zum Übertragen einer mikroskopischen, isolierten Probe, Mikrodissektionssystem mit einer derartigen Vorrichtung sowie Verfahren zur Herstellung eines Nanosaugers

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