CN103141702A - 一种可有效防治猪流行性腹泻的中草药提取物饲料添加剂 - Google Patents

一种可有效防治猪流行性腹泻的中草药提取物饲料添加剂 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种可有效防治猪流行性腹泻的中草药提取物饲料添加剂,属于饲料添加剂领域。所述饲料添加剂以积雪草粉、姜黄粉、决明子粉、牛蒡子粉、薤白粉、中草药制剂、姜黄提取物为主要原料,并科学复配羊肚菌菌剂和枯草芽孢杆菌菌剂,既有效降低了抗生素类药物在养殖猪中的使用量,抗生素用量减少60%以上,又提高了中草药的药性,有效防治由猪流行性腹泻病毒引起的猪流行性腹泻,且安全无毒。其次在饲料的添加量较少,质量稳定,同时采用不同中草药提取物进行组合,提高了作用效果,猪流行性腹泻降低了60-80%,动物制品口味和肉质有明显提升,感官实验评价表明使用本发明产品的动物制品口味和肉质的评价分提高65%以上。

Description

一种可有效防治猪流行性腹泻的中草药提取物饲料添加剂
技术领域:
本发明属于饲料添加剂领域,特别是一种可有效防治猪流行性腹泻的中草药提取物饲料添加剂。 
背景技术:
猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的以猪水样腹泻、呕吐、脱水和对哺乳仔猪高致死率为主要特征的一种高度接触性肠道传染病。猪流行性腹泻病毒,属于套病毒目冠状病毒科冠状病毒属。病毒粒子呈多形性,倾向球形,直径95~l90nm。外有囊膜,囊膜上有花瓣状纤维突起,猪流行性腹泻病毒核酸型为RNA型。1995年国际病毒分类委员会(CTV)第6次报告将PEDV列为冠状病毒属的正式成员。本病自1971年在英国首先报道了PEDV的发生,相继在比利时、德国、瑞士、日本等许多国家报道了本病的发生,在过去的30年间,PEDV在亚洲猪场中的感染非常严重,我国于1976年首次报道PED的发生。近年来,本病的流行区域有逐渐扩大的趋势,从2010年冬季至今,泰国、菲律宾、韩国等亚洲国家,以及我国的大部分省份的很多规模化猪场,陆续发生哺乳仔猪剧烈腹泻,死亡严重的病例,给我国养猪业造成了巨大的经济损失。 
如何解决目前养猪行业中普遍存在的猪流行性腹泻是一个重要问题,中草药因其无毒、无副作用、抗药性强等优点成为了饲料添加剂新宠,但现在大多使用单一的中草药,作用单一,抗药性单一;为了达到防止疾病的目的,直接使用中草药,其使用量比较大,影响饲料口感,且质量指标难以控制。因此采用多种中草药制备能够解决猪流行性腹泻的饲料添加剂成为解决目前问题的一个可选方案。下面为一些中草药的介绍。 
积雪草:其性寒,味苦、辛,具有清热利湿,解毒消肿功能。主要含积雪草酸、马达积雪草酸、积雪草苷、参枯尼苷、羟基积雪草苷、黄酮类成分及积雪草多糖等活性物质,具有提高机体免疫力,保护胃肠道,抗腹泻的作用。 
姜黄:其主要活性成分姜黄素具有抗炎、抗氧化、清除体内自由基、保护肝脏,提高机体体液免疫和细胞免疫。现代药理学表明,姜黄素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等病菌、真菌和病毒等具有强烈的抑制作用,能改善肠道菌群,防治腹泻,姜黄素还可以提高动物的T细胞和B细胞,从而提高动物的免疫活性。 
决明子:是国家***公布的69种药食同源的物质之一,其性味甘、苦、咸、微寒,善入肝、肾、大肠经,具有清肝明目、润肠通便之功效。 
牛蒡子:其性寒、味辛苦,具有疏散风热、祛痰止咳、解毒透疹、抗炎、抗病毒、抗菌等作用。 
薤白:为常用中草药,其味辛、苦、性湿,无毒,具有理气、散结之功效。薤白中含有多种生物活性成分,具有抗菌消炎、抗血小板聚集、康养护、降低血脂等药理作用。 
羊肚菌隶属于子囊菌亚门(Ascomycotina)、盘菌纲、盘菌目、羊肚菌科、羊肚菌属,羊肚菌以其菌盖表面生有许多小凹坑,外观极似羊肚而得名。它是一种野生名贵食药用菌,最早收录于李时珍《本草纲目》。中医以羊肚菌子实体入药。羊肚菌是子囊菌中最著名的美味食用菌,羊肚菌含蛋白质22.1%,脂肪3.8%,多糖16.3%;且脂肪中的不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸之比为5比3,对人体有益的亚油酸占脂肪酸总量的56%。人体必需的氨基酸齐全,其含量是猴头菇的5倍。还含有丰富的钾、磷、钙、铁、镁、锌和硒等人体必需的元素。其中钾、磷的含量分别是冬虫夏草的4倍和2倍,锌含量是冬虫夏草的9倍。硒则能改变致癌物的代谢方向和抗氧化,因而羊肚菌被誉为“抗癌明星”。羊肚菌性平,味甘寒,无毒,具有益肠胃、消化助食、化痰理气、补肾、壮阳、补脑、提神之功能。研究发现羊肚菌有降血脂、调节免疫、抗疲劳、抗放射、抗肿瘤作用,并能减轻癌症患者放化疗引起的毒副作用。 
发明内容:
本发明的目的是以复合中草药粉、中草药提取物为主要成分,并科学复配羊肚菌菌剂和枯草芽孢杆菌制剂,提高了不同生长阶段猪机体免疫力,大大降低了抗生素用量,为广大养殖户提供一种可有效防治猪流行性腹泻的中草药提取物饲料添加剂。 
为了达到上述目的,本发明的技术方案如下: 
所述饲料添加剂由以下重量份数的原料组成: 
积雪草粉10-15份;姜黄粉5-10份;决明子粉8-15份;牛蒡子粉10-20份;薤白粉8-15份;中草药制剂20-35份;姜黄提取物5-10份;羊肚菌菌剂20-35份;枯草芽孢杆菌菌剂5-10份。 
所述中草药制剂的制备方法如下: 
称取积雪草20-25份;决明子10-18份;牛蒡子5-15份;薤白10-15份;分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下,然后于容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水,控制温度70℃-90℃保持2-4h,添加混合物料2-3倍重量乙醇和丙醇的混合物,控制温度至60℃-78℃保持3-4h,过滤;滤液真空浓缩后冷冻干燥获得中草药制剂。 
所述乙醇和丙醇的质量比例为1:1-1.5;乙醇浓度为95%;丙醇浓度为100%; 
所述姜黄提取物的制备方法如下: 
将粉碎至粒径为2毫米以下姜黄置于容器中,添加3-6倍重量的水,控制温度50℃-70 ℃保持2-4h,添加混合物料2-3倍重量乙醇和甲醇的混合物,控制温度至30℃-40℃保持3-8h,过滤;滤液真空浓缩后冷冻干燥获得姜黄提取物。 
所述乙醇和甲醇的质量比例为1:2,乙醇浓度85-95%。甲醇浓度100%. 
所述羊肚菌菌剂的制备方法如下: 
从斜面转接培养羊肚菌,逐级扩培后的种子液转接入发酵罐中,控制温度为25-28℃,通风培养68-72小时,搅拌速度100转/分,通风量(V/V)1:0.5,罐压0.05MPa,发酵完毕将发酵液湿法超微破壁,破壁后的菌丝体颗粒度为0.4~0.6微米的占70%,然后喷雾干燥制成羊肚菌菌剂。 
所述斜面培养基重量百分比组成为:马铃薯汁20%,葡萄糖2%,琼脂2.0%,积雪草粉1.2%,姜黄粉0.8%,薤白粉1%,其余为纯净水; 
所述逐级扩培所用一级种子、二级种子、三级种子、一级种子罐、二级种子罐和发酵生产所用培养基重量百分比组成均为:蔗糖5%,葡萄糖2%,脱脂大豆蛋白粉0.5%,磷酸二氢钾0.2%,硫酸镁0.1%,积雪草粉2%,姜黄粉1.2%,决明子粉1.5%,牛蒡子粉2.2%,薤白粉1.5%,其余为纯净水,pH6.0。 
所述枯草芽孢杆菌菌剂的制备方法如下: 
从斜面转接培养枯草芽孢杆菌,逐级扩培后的种子液转接入发酵罐中,控制温度为28-30℃,通风培养19-24小时,通气量为2.0m3/分钟;发酵完毕离心分离获得湿菌体,添加保护剂冷冻干燥获得菌剂,保护剂组成为10%脱脂奶、5%乳糖、5%甘油。 
本发明产品制备方法如下: 
将积雪草粉,姜黄粉,决明子粉,牛蒡子粉,薤白粉,中草药制剂,姜黄提取物,羊肚菌菌剂,枯草芽孢杆菌菌剂混合均匀既得。 
本发明产品在生猪日粮中的添加量为500-1000克/吨。 
有益效果: 
本发明的上述技术方案相比现有技术具有以下优点: 
1.本发明的中草药提取物组合含多种三萜类化合物、甙类、黄酮、多糖等生物活性物质,具有抗菌、抗病毒、增强机体免疫力,促进猪生长的功效。同时其具有添加量少,兼具预防和治疗作用,治疗时间短,药效更优的特点。本发明通过科学复配,将复合中草药粉、中草药提取物、羊肚菌菌剂和枯草芽孢杆菌制剂等实现了有机组合,特别是添加了中药成分和枯草芽孢杆菌制剂,有效降低了抗生素类药物在饲养动物中的使用量,羊肚菌在培养过程中有效吸收积累了积雪草粉、姜黄粉、决明子粉、牛蒡子粉和薤白粉的活性成分,提高了本发明产品的生物效果。本发明的优点是采用中草药提取物添加到饲料中,既提高了中草药的药性, 有效防治各种由细菌性和病毒性引起的猪流行性腹泻,又安全无毒,其次在饲料的添加量较少,质量稳定。同时采用不同中草药提取物进行组合,提高了作用的效果。实现了有效防治猪流行性腹泻,提高动物肉制品的安全性,提高动物的饲料利用效率,增强动物的免疫力,提高饲养效益。 
2.枯草芽孢杆菌具有如下功能:a.耗氧产酸,调节肠道微生态平衡,达到预防腹泻、下痢等疾病;b.分泌多种酶类,提高饲料消化利用率;c.产生多种营养素,参与机体新陈代谢;d.提高动物免疫力。 
3.本发明中通过微生物制剂枯草芽孢杆菌、中草药制剂和天然材料的科学复配,可以有效解决目前饲料养殖中存在的动物免疫力低下,抗生素用量过多,产品质量下降的问题。使用本发明产品使动物免疫力有较大提高,抗生素用量减少60%以上,猪流行性腹泻降低了60-80%,动物制品口味和肉质有明显提升,感官实验评价表明使用发明产品的动物制品口味和肉质的评价分提高65%以上。 
具体实施方式
下面通过具体的实施方案叙述本发明产品组成及工艺。除非特别说明,本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外,实施方案应理解为说明性的,而非限制本发明的范围,本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言,在不背离本发明实质和范围的前提下,对这些实施方案中分离提取条件进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。 
枯草芽孢杆菌菌剂的制备: 
(1)一级种子培养:将枯草芽孢杆菌斜面菌种接入500毫升摇瓶中,培养基装量100毫升,旋转式摇床180转/分,培养温度30℃,培养时间24小时; 
(2)二级种子培养:将一级种子按照10%的接种量接入500毫升二级种子摇瓶中,培养条件与一级种子相同; 
(3)三级种子培养:将二级种子以10%接种量接入5000毫升三级种子摇瓶中,培养基装量1000毫升,旋转式摇床100转/分,培养温度30℃,培养时间24小时; 
(4)一级种子罐培养:将三级种子以10%接种量接入总容积为150L的一级种子罐,发酵培养基装量100L,培养温度28℃,搅拌速度100转/分,通风量(V/V)1:0.5,罐压0.05MPa,培养时间24小时; 
(5)发酵培养:将一级种子罐菌种以10%接种量接入总容积为1.5吨二级种子罐,发酵培养基装量1吨,培养条件培养温度28℃,搅拌速度100转/分,通风量(V/V)1:0.5,罐压0.05MPa,培养时间24小时,培养结束菌体浓度在5.0×108个/ml. 
(6)离心分离:采用离心机分离发酵液获得菌体。 
(7)真空冷冻干燥:添加保护剂后采用真空冷冻干燥工艺处理获得干粉菌剂;保护剂水溶液组成为脱脂奶10%、乳糖5%、甘油5%。真空冷冻干燥工艺参见中国科学院微生物研究所编著菌种保藏手册,1980年出版.第610-653. 
发酵培养基组成:葡萄糖6%,酵母提取物1%,蛋白胨0.2%,CaCO31%,其余为纯净水,pH6.8。 
所述枯草芽孢杆菌冻干菌粉中活菌数量为2*108个/g。 
本发明提供一种饲料生产用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌种,该菌株编号为CGMCCNo.1.210。此菌株购于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。 
羊肚菌菌剂的制备: 
1、发酵法培养真菌发酵液的过程: 
(1)一级摇瓶菌种的培养:将羊肚菌斜面菌种接入一级种子摇瓶中,一级种子摇瓶为500毫升三角瓶,培养基装量100毫升,旋转式摇床60转/分,培养温度24℃,培养时间50小时; 
(2)二级摇瓶菌种的培养:将一级摇瓶菌种以10%的接种量接入二级种子摇瓶中,其培养条件与一级种子相同; 
(3)三级摇瓶菌种的培养:将二级摇瓶菌种以10%的接种量接入三级种子摇瓶中,三级种子摇瓶为5000毫升,培养基装量1500毫升,旋转式摇床100转/分,培养温度24℃,培养时间50小时; 
(4)一级种子罐菌种培养:将三级摇瓶菌种接入一级种子罐中,一级种子罐容积为50升,培养基装量35升,接种量10%,培养温度24℃,搅拌速度120转/分,通风量(V/V)1:0.5,罐压0.05MPa,培养时间48小时; 
(5)二级种子罐菌种培养:将一级种子罐培养的菌种接入二级种子罐中,二级种子罐容积为300升,培养基装量200升,接种量15%,培养温度24℃,搅拌速度120转/分,通风量(V/V)1:0.5,罐压0.05MPa,培养时间48小时; 
(6)发酵罐培养:将二级种子罐培养的菌种接入1.5吨的发酵罐中,培养基装量1吨,接种量20%,培养温度25℃,搅拌速度100转/分,通风量(V/V)1:0.5,罐压0.05Mpa,培养时间72小时,发酵结束。 
2、发酵液湿法超微破壁: 
(1)湿法一级破壁:把发酵液用管道泵输入到胶体磨中,调整胶体磨定子与转子的间隙为1微米,胶体磨流量为0.5吨/小时,进行菌丝体的一级破壁处理,菌丝体破壁后的颗粒度为0.4~0.8微米的占70%; 
(3)湿法二级超微破壁:调整均质压力为60MPa,高压均质流量为0.4吨/小时,利用高压均质机进行菌丝体的超微破壁处理,取样经粒度分析仪检测,破壁率为100%,物料粒度为40~100纳米的占80%,实现了羊肚菌菌丝体的湿法超微破壁。 
本发明羊肚菌菌种编号为CGMCC No.5.621,购自CGMCC。 
破壁后的菌丝体颗粒度为0.04~0.06微米的占70%,然后采用喷雾干燥制成。 
本发明中喷雾干燥的进风温度140-220℃,出风温度70-80℃。 
本实施例中斜面培养基组成为:重量百分比,马铃薯(煮汁)20%,葡萄糖2%,积雪草粉1.2%,姜黄粉0.8%,薤白粉1%,琼脂2.0%,其余为纯净水。 
本实施例中一级种子、二级种子、三级种子、一级种子罐、二级种子罐和发酵生产所用培养基组成均为:重量百分比,蔗糖5%,葡萄糖2%,脱脂大豆蛋白粉0.5%,磷酸二氢钾0.2%,硫酸镁0.1%,积雪草粉2%,姜黄粉1.2%,决明子粉1.5%,牛蒡子粉2.2%,薤白粉1.5%,其余为纯净水,pH6.0。 
本实施例中发酵结束时:pH值4.0,菌丝湿重达到22%。 
本实施例中颗粒度采用激光粒度分析仪进行发酵液中颗粒度的测定。 
本发明中胶体磨和均质机的工艺条件如下:调整胶体磨定子与转子的间隙为0.5~1微米,利用其剪切力作用进行处理,胶体磨流量为0.1~1吨/小时;均质机破碎粒度选择0.1~0.5微米,利用其高压释放力、空穴效应、剪切等力的作用,进行超微处理,调整高压均质机压力为60~100MPa,高压均质流量为0.1~1吨/小时; 
实施例1 
一种可有效防治猪流行性腹泻的中草药提取物饲料添加剂由以下重量份数的原料组成: 
积雪草粉10份;姜黄粉5份;决明子粉8份;牛蒡子粉10份;薤白粉8份;中草药制剂20份;姜黄提取物5份;羊肚菌菌剂20份;枯草芽孢杆菌菌剂5份。 
所述中草药制剂的制备方法如下: 
准确称取积雪草20份;决明子10份;牛蒡子5份;薤白10份;分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下,然后于容器中均匀混合并添加3倍重量的水,控制温度70℃保持2h,添加混合物料2倍重量乙醇和丙醇的混合物,控制温度至60℃保持3h,过滤;滤液真空浓缩后冷冻干燥获得中草药制剂。 
所述乙醇和丙醇的质量比例为1:1;乙醇浓度为95%;丙醇浓度为100%; 
所述姜黄提取物的制备方法如下: 
将粉碎至粒径为2毫米以下姜黄置于容器中,添加3倍重量的水,控制温度50℃保持2h,添加混合物料2倍重量乙醇和甲醇的混合物,控制温度至30℃保持3h,过滤;滤液真空浓缩后冷冻干燥获得姜黄提取物。 
所述乙醇和甲醇的质量比例为1:2;乙醇浓度为95%。 
本发明产品制备方法如下: 
将积雪草粉;姜黄粉;决明子粉;牛蒡子粉;薤白粉;中草药制剂;姜黄提取物;羊肚菌菌剂;枯草芽孢杆菌菌剂混合均匀即得。 
本产品在生猪日粮中的添加量为500克/吨。 
实施例2 
一种可有效防治猪流行性腹泻的中草药提取物饲料添加剂由以下重量份数的原料组成: 
积雪草粉15份;姜黄粉10份;决明子粉15份;牛蒡子粉20份;薤白粉15份;中草药制剂35份;姜黄提取物10份;羊肚菌菌剂35份;枯草芽孢杆菌菌剂10份。 
所述中草药制剂的制备方法如下: 
准确称取积雪草25份;决明子18份;牛蒡子15份;薤白15份;分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下,然后于容器中均匀混合并添加6倍重量的水,控制温度90℃保持4h,添加混合物料3倍重量乙醇和丙醇的混合物,控制温度至78℃保持4h,过滤;滤液真空浓缩后冷冻干燥获得中草药制剂。 
所述乙醇和丙醇的质量比例为1:1.5,乙醇浓度为95%;丙醇浓度为100%; 
所述姜黄提取物的制备方法如下: 
将粉碎至粒径为2毫米以下姜黄置于容器中,添加6倍重量的水,控制温度70℃保持4h,添加混合物料3倍重量乙醇和甲醇的混合物,控制温度至40℃保持8h,过滤;滤液真空浓缩后冷冻干燥获得。 
所述乙醇和甲醇的质量比例为1:2;乙醇浓度为95%。甲醇浓度100%. 
本发明产品制备方法如下: 
将积雪草粉;姜黄粉;决明子粉;牛蒡子粉;薤白粉;中草药制剂;姜黄提取物;羊肚菌菌剂;枯草芽孢杆菌菌剂混合均匀即得。 
本产品在生猪日粮中的添加量为1000克/吨。 
实施例3 
一种可有效防治猪流行性腹泻的中草药提取物饲料添加剂由以下重量份数的原料组成: 
积雪草粉12份;姜黄粉8份;决明子粉11份;牛蒡子粉15份;薤白粉11份;中草药制剂28份;姜黄提取物7份;羊肚菌菌剂28份;枯草芽孢杆菌菌剂7份。 
所述中草药制剂的制备方法如下: 
准确称取积雪草22份;决明子15份;牛蒡子10份;薤白12份;分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下,然后于容器中均匀混合并添加5倍重量的水,控制温度80℃保持3h,添加混合物料3倍重量乙醇和丙醇的混合物,控制温度至70℃保持4h,过滤;滤液真空浓缩后冷冻干燥获得中草药制剂。 
所述乙醇和丙醇的质量比例为1:1.2;乙醇浓度为95%;丙醇浓度为100%。 
所述姜黄提取物的制备方法如下: 
将粉碎至粒径为2毫米以下姜黄置于容器中,添加5倍重量的水,控制温度60℃保持3h,添加混合物料3倍重量乙醇和甲醇的混合物,控制温度至35℃保持5h,过滤;滤液真空浓缩后冷冻干燥获得。 
所述乙醇和甲醇的质量比例为1:2;乙醇浓度为95%;甲醇浓度为100%。 
本发明产品制备方法如下: 
将积雪草粉;姜黄粉;决明子粉;牛蒡子粉;薤白粉;中草药制剂;姜黄提取物;羊肚菌菌剂;枯草芽孢杆菌菌剂混合均匀即得。 
本产品在生猪日粮中的添加量为800克/吨。 
使用效果实验 
本发明实施例1饲料添加剂在断奶仔猪中的使用效果试验: 
试验动物选择云南双胞胎饲料有限公司下属养殖场平均体重为(7.16±0.15)kg的健康断奶仔猪120头,经统计分析体重差异不显著。采用单因子随机化设计,将120头健康断奶仔猪,按公母各半,分成2组(对照组和试验组),每组6个重复,每个重复10头猪。试验组添加实施例1制得的本发明产品,对照组不添加本发明产品。连续饲喂15天,与对照组相比,使用发明饲料添加剂可获得如下效果: 
项目 对照组 试验组 偏差
始重(kg) 7.19 7.23 --
末重(kg) 11.00 11.64 --
日增重(g/d﹒头) 254 294 15.7%
日采食量(g/d﹒头) 363.2 367.5 1.2%
[0105] 
料肉比 1.43 1.25 -12.6%
腹泻率(%) 14 2 -85.7%
试验结果表明,在断奶仔猪日粮中添加本产品,仔猪的日增重比对照组有较大提高;料肉比有明显降低;腹泻率降低了85.7%。 
本发明例1饲料添加剂在哺乳母猪中的使用效果试验: 
在云南双胞胎饲料有限公司下属猪场进行了为期21天的饲喂试验。试验采用单因素对比设计,随机选取30头健康的、产仔头数与出生均重相近的、胎次均为2或3胎的哺乳母猪,随机分为2组(即试验组和对照组),每组15个重复。其中:试验组日粮添加由实施例1制备得的本产品,对照组不添加本发明产品。记录仔猪断奶重、腹泻率、死亡率。试验结果如下: 
项目 试验组 对照组 备注
产活仔数(头数) 10.8 11.0  
出生均重(kg) 1.46 1.48  
21天断奶小猪(头) 10 9  
死亡率% 7.4 18.2  
21天断奶窝重(kg) 74.5 64.1  
21天断奶均重(kg) 7.45 7.12  
仔猪腹泻率(%) 3.1 14.3  
试验结果表明,在哺乳母猪日粮中添加本产品,产猪仔的体重比对照组有较大提高;仔猪腹泻率降低了78.3%。 
以上两例试验表明:本发明产品可改善母猪和仔猪机体免疫能力,显著降低仔猪的腹泻率,提高养殖质量和效益。 

Claims (8)

1.一种可有效防治猪流行性腹泻的中草药提取物饲料添加剂,由以下重量份数的原料组成:积雪草粉10-15份;姜黄粉5-10份;决明子粉8-15份;牛蒡子粉10-20份;薤白粉8-15份;中草药制剂20-35份;姜黄提取物5-10份;羊肚菌菌剂20-35份;枯草芽孢杆菌菌剂5-10份;所述中草药制剂的制备方法为:称取积雪草20-25份;决明子10-18份;牛蒡子5-15份;薤白10-15份;分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下,然后于容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水,控制温度70℃-90℃保持2-4h,添加混合物料2-3倍重量乙醇和丙醇的混合物,控制温度至60℃-78℃保持3-4h,过滤;滤液真空浓缩后冷冻干燥获得中草药制剂;所述乙醇和丙醇的质量比例为1:1-1.5;所述姜黄提取物的制备方法如下:将粉碎至粒径为2毫米以下姜黄置于容器中,添加3-6倍重量的水,控制温度50℃-70℃保持2-4h,添加混合物料2-3倍重量乙醇和甲醇的混合物,控制温度至30℃-40℃保持3-8h,过滤;滤液真空浓缩后冷冻干燥获得中草药制剂;所述乙醇和甲醇的质量比例为1:2。
2.根据权利要求1所述的一种可有效防治猪流行性腹泻的中草药提取物饲料添加剂,其特征在于,所述羊肚菌菌剂的制备方法如下:
(一)发酵法培养羊肚菌发酵液的过程:
(1)一级摇瓶菌种的培养:将羊肚菌斜面菌种接入一级种子摇瓶中,一级种子摇瓶为500毫升三角瓶,培养基装量100毫升,旋转式摇床60转/分,培养温度24℃,培养时间50小时;
(2)二级摇瓶菌种的培养:将一级摇瓶菌种以10%的接种量接入二级种子摇瓶中,其培养条件与一级种子相同;
(3)三级摇瓶菌种的培养:将二级摇瓶菌种以10%的接种量接入三级种子摇瓶中,三级种子摇瓶为5000毫升,培养基装量1500毫升,旋转式摇床100转/分,培养温度24℃,培养时间50小时;
(4)一级种子罐菌种培养:将三级摇瓶菌种接入一级种子罐中,一级种子罐容积为50升,培养基装量35升,接种量10%,培养温度24℃,搅拌速度120转/分,通风量V/V为1:0.5,罐压0.05MPa,培养时间48小时;
(5)二级种子罐菌种培养:将一级种子罐培养的菌种接入二级种子罐中,二级种子罐容积为300升,培养基装量200升,接种量15%,培养温度24℃,搅拌速度120转/分,通风量(V/V)1:0.5,罐压0.05MPa,培养时间48小时;
(6)发酵罐培养:将二级种子罐培养的菌种接入1.5吨的发酵罐中,培养基装量1吨,接种量20%,培养温度25℃,搅拌速度100转/分,通风量(V/V)1:0.5,罐压0.05MPa,培养时间72小时,发酵结束;
(二)发酵液湿法超微破壁:
(1)湿法一级破壁:把发酵液用管道泵输入到胶体磨中,调整胶体磨定子与转子的间隙为0.5~1微米,胶体磨流量为0.5吨/小时,进行菌丝体的一级破壁处理;
(2)湿法二级超微破壁:调整均质压力为60~100MPa,高压均质流量为0.4吨/小时,利用高压均质机进行菌丝体的超微破壁处理,均质机破碎粒度选择0.1~0.5微米,然后采用喷雾干燥制成羊肚菌菌剂。
3.根据权利要求2所述的一种可有效防治猪流行性腹泻的中草药提取物饲料添加剂,其特征在于,所述发酵法培养羊肚菌发酵液生产所用培养基组成为:蔗糖5%,葡萄糖2%,脱脂大豆蛋白粉0.5%,磷酸二氢钾0.2%,硫酸镁0.1%,积雪草粉2%,姜黄粉1.2%,决明子粉1.5%,牛蒡子粉2.2%,薤白粉1.5%,其余为纯净水,pH6.0。
4.根据权利要求1所述的一种可有效防治猪流行性腹泻的中草药提取物饲料添加剂,其特征在于,所述枯草芽孢杆菌冻干菌粉中活菌数量为2*108个/g。
5.根据权利要求1-4任一权利要求所述的一种可有效防治猪流行性腹泻的中草药提取物饲料添加剂,
由以下重量份数的原料组成:积雪草粉10份;姜黄粉5份;决明子粉8份;牛蒡子粉10份;薤白粉8份;中草药制剂20份;姜黄提取物5份;羊肚菌菌剂20份;枯草芽孢杆菌菌剂5份。
6.根据权利要求1-4任一权利要求所述的一种可有效防治猪流行性腹泻的中草药提取物饲料添加剂,
由以下重量份数的原料组成:积雪草粉15份;姜黄粉10份;决明子粉15份;牛蒡子粉20份;薤白粉15份;中草药制剂35份;姜黄提取物10份;羊肚菌菌剂35份;枯草芽孢杆菌菌剂10份。
7.根据权利要求1-4任一权利要求所述的一种可有效防治猪流行性腹泻的中草药提取物饲料添加剂,
由以下重量份数的原料组成:积雪草粉12份;姜黄粉8份;决明子粉11份;牛蒡子粉15份;薤白粉11份;中草药制剂28份;姜黄提取物7份;羊肚菌菌剂28份;枯草芽孢杆菌菌剂7份。
8.根据权利要求1-7任一所述的一种可有效防治猪流行性腹泻的中草药提取物饲料添加剂的制备方法,包括如下步骤:
将积雪草粉;姜黄粉;决明子粉;牛蒡子粉;薤白粉;中草药制剂;姜黄提取物;羊肚菌菌剂;枯草芽孢杆菌菌剂混合均匀既得;
所述羊肚菌菌剂的制备方法如下:
从斜面转接培养羊肚菌,逐级扩培后的种子液转接入发酵罐中,控制温度为25-28℃,通风培养68-72小时,搅拌速度100转/分,通风量V/V为1:0.5,罐压0.05MPa,发酵完毕发酵液湿法超微破壁,破壁后的菌丝体颗粒度为0.4~0.6微米的占70%,然后喷雾干燥制成羊肚菌菌剂;
所述一级种子、二级种子、三级种子、一级种子罐、二级种子罐和发酵生产所用培养基组成均为:蔗糖5%,葡萄糖2%,脱脂大豆蛋白粉0.5%,磷酸二氢钾0.2%,硫酸镁0.1%,积雪草粉2%,姜黄粉1.2%,决明子粉1.5%,牛蒡子粉2.2%,薤白粉1.5%,补足至100%的纯净水,pH6.0;
所述中草药制剂的制备方法如下:
准确称取积雪草25份;决明子18份;牛蒡子15份;薤白15份;分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下,然后于容器中均匀混合并添加6倍重量的水,控制温度90℃保持4h,添加混合物料3倍重量乙醇和丙醇的混合物,控制温度至78℃保持4h,过滤;滤液真空浓缩后冷冻干燥获得中草药制剂;
所述乙醇和丙醇的质量比例为1:1.5;
所述姜黄提取物的制备方法如下:
将粉碎至粒径为2毫米以下姜黄置于容器中,添加6倍重量的水,控制温度70℃保持4h,添加混合物料3倍重量乙醇和甲醇的混合物,控制温度至40℃保持8h,过滤;滤液真空浓缩后冷冻干燥获得;所述乙醇和甲醇的质量比例为1:2。
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