CN103130550A - 一种桑黄菌丝体的培养基及培养方法 - Google Patents
一种桑黄菌丝体的培养基及培养方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103130550A CN103130550A CN2013100907832A CN201310090783A CN103130550A CN 103130550 A CN103130550 A CN 103130550A CN 2013100907832 A CN2013100907832 A CN 2013100907832A CN 201310090783 A CN201310090783 A CN 201310090783A CN 103130550 A CN103130550 A CN 103130550A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- substratum
- mycelium
- phellinus
- rice
- nutrient solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明提供了一种桑黄菌丝体的培养基及其制备方法,以及用该培养基培养桑黄菌丝体的方法,该培养基包括大米和培养液。本发明的培养基采用大米作为原料不仅材料易取,而且非常经济,操作简单,且效果良好。
Description
技术领域
本发明涉及食用菌培养领域,具体的说涉及一种桑黄菌丝体的培养基及培养方法。
背景技术
鲍姆木层孔菌(Phellinus baumii),俗称桑黄菇、桑耳,是近年来开发的一种多年生药用真菌,最早收载于李时珍《本草纲目》中。传统中医认为桑黄性甘、平,味苦、辛,归肝、膀胱经,用于治疗血崩、血淋、脱肛泻血、带下、闭经、脾虚泄泻等。众多的实验研究表明,桑黄中的多糖和黄酮类化合物有重要的生物活性,在治疗癌症、保肝护肝、增强免疫、神经修复方面有重要作用。
自由基是人体新陈代谢的产物,一般情况下,人体有能力清除自身所产生的自由基,但是随着人体的衰老,清除自由基的能力减弱。如果产生的自由基不能被及时清除,就会加速机体衰老,甚至使人体发生病变等。现有研究表明:药用真菌桑黄中的多糖和黄酮类物质具有很好的抗氧化作用;不过现在的研究多集中在桑黄子实体提取物及液体发酵的研究方面,而对固体发酵桑黄菌丝体及其抗氧化作用的研究较少。野生的子实体主要分布于黑龙江、陕西等林区,资源蕴藏量稀少,由于产量低导致价格昂贵。目前桑黄子实体主要靠人工栽培获得,但是人工栽培周期长,需要较大的人力财力投入。相比之下,发酵技术具有周期短、可控性好、实验环境简单等优点,是获得桑黄次生代谢产物的良好途径。而液体发酵在培养的过程中易污染,在一定培养时间内不能达到预期的生物量,培养过程中不好人为地控制。
发明内容
本发明的目的之一在于提供一种桑黄菌丝体的培养基,该培养基包括如下组分:
大米和培养液,其中大米的重量(g)与培养液的体积(ml)比为x:(x+(0-30),其中x≥10;
其中培养液含:2.5%葡萄糖、0.3%KH2PO3和0.15%MgSO4·7H2O。
上述培养基是通过如下方法配制的:
配置培养液(2.5%葡萄糖,0.3%KH2PO3,0.15%MgSO4·7H2O),将大米置于培养液中,高压灭菌。
本发明还提供了一种利用上述培养基培养桑黄菌丝体的方法,该方法包括如下步骤:
将桑黄母种接种于上述培养基上,置于26℃生化培养箱中培养,生长周期25-30天;
将培养好的菌丝体连同培养基至于30℃鼓风烘箱中烘干。
经上述米饭培养基发酵后的桑黄菌丝体具有抗氧化的生物活性作用,可作为食品添加剂应用,提高食品的营养价值。
本发明的创新之处:
1、使用本发明的培养基进行培养,相对液体培养具有方便易行、节约能源、不易污染的优点。
2、本发明的培养基,采用大米作为原料不仅材料易取,而且非常经济,效果良好。在液体培养中动力能源消耗很大,而本发明培养菌种只需在一定的温度下静置培养,节省能源,并且生长状态也优于液体培养。同时通过抗氧化实验发现,培养的菌丝体有较强的抗氧化效果。如今食品添加剂受到广泛关注,大米作为一种营养安全的食品,培养的菌丝体可作为添加剂来提高食品的营养价值。
具体实施方式
桑黄菌种(Phellinus baummii Pilat,来自中国微生物菌种保藏中心上海食用菌分中心,编号为:Phellinus baumii Pilat3249)。
实施例1-4配制培养基
配置2.5%葡萄糖,0.3%KH2PO3,0.15%MgSO4·7H2O的培养液,分别取60ml于250ml培养瓶中,然后分别称取30、40、50、60g的大米置于培养液中,浸泡6小时左右,121℃高压灭菌30min。大米(润庄香粳)由上海润庄农业科技有限公司提供。
表1大米装量对生物量的影响
注:生物量的回收率是指最终烘干后的菌丝体与大米装量的比值。
实施例5用实施例3的培养基进行培养
将桑黄菌种长于PDA斜面上,生长周期为一周。
取上述桑黄菌种接种于实施例1的培养基上,置于26℃生化培养箱中培养,生长周期25-30天。
取出桑黄菌丝体,至于30℃的鼓风烘箱中烘干。
实施例6菌丝体醇提物中黄酮含量的测定
将烘干的菌丝体加入10倍体积的80%乙醇,浸泡24h,过滤;收集滤液,残渣再用10倍体积的80%乙醇浸泡过夜,重复上述操作,合并两次滤液,浓缩,得到桑黄菌丝体醇提物。
用NaNO2-Al(NO3)3比色法测定黄酮含量,烘干后的菌丝体醇提物中黄酮的重量百分比含量为40%。
实施例7桑黄菌丝体抗氧化活性的测定
桑黄菌丝体醇提物的来源同实施例6中;测定桑黄菌丝体醇提物的抗氧化活性,主要进行清除过氧化氢,超氧阴离子和DPPH实验。
具体方法如下
一、清除H2O2自由基实验
将醇提物用70%乙醇配制成四个浓度,分别是1μg/mL,10μg/mL,20μg/mL,50μg/mL。对H2O2的清除实验使用鲁米诺-H2O2发光反应体系,用80%乙醇做为空白对照。分别取5μL加入96孔板,由泵1泵入150μL鲁米诺-CBS溶液(pH9.5),泵2泵入10μL6%H2O2,在20℃启动发光反应,每0.6s记录一次发光值,连续记录30s。发光程序如表3-1:
表3-1H2O2自由基的发光程序
H2O2自由基清除率计算公式如下
结果表明,高浓度的桑黄菌丝体醇提物对H2O2自由基的清除率达到80%。
二、清除超氧阴离子实验
将醇提物用80%乙醇溶解配制成不同的浓度,即500μg/mL,800μg/mL,1000μg/mL,2000μg/mL,用80%乙醇做空白对照。采用鲁米诺-邻苯三酚-CBS体系的化学发光法。各浓度样品分别取10μL加入96孔板。由泵1泵入6.25×10-4mol/L邻苯三酚溶液,泵2泵入150μL鲁米诺-CBS溶液(pH10.2)。在20℃启动发光反应,每0.6S收集一次光信号,连续收集30S。
发光程序如表3-2:
表3-2清除超氧阴离子的发光程序
超氧阴离子的清除率公式同清除H2O2自由基清除率公式
结果表明,在低浓度0.5mg/mL时,就表现了较高的清除超氧阴离子的能力,浓度在2mg/mL时,清除率接近100%。
三、清除DPPH自由基实验
取6×10-4mol/L DPPH·的储备液100μL加900μL80%乙醇,稀释成6×10-5mol/L DPPH·工作液。用80%乙醇将菌丝体醇提物样品配制成不同浓度(1μg/mL、20μg/mL、100μg/mL,200μg/mL)。分别取500μL不同浓度的样品加入1mL DPPH·工作液中,混匀,静置20min后于517nm处测定吸光值,以80%乙醇作为空白。对DPPH·自由基清除率计算如下:
结果表明,高浓度的醇提物对DPPH自由基的清除率达到40%。
Claims (3)
1.一种桑黄菌丝体的培养基,其特征在于该培养基包括如下组分:
大米和培养液,其中大米的重量(g)与培养液的体积(ml)比为x:(x+(0-30),其中x≥10;
其中培养液含:2.5%葡萄糖、0.3%KH2PO3和0.15%MgSO4·7H2O。
2.一种制备权利要求1所述培养基的方法,其特征在于该方法为:
配置培养液,将大米置于培养液中,高压灭菌。
3.一种利用权利要求1所述培养基培养桑黄菌丝体的方法,该方法为:
将桑黄母种接种于培养基上,置于26℃生化培养箱中培养,生长周期25-30天;
将培养好的菌丝体连同培养基至于30℃鼓风烘箱中烘干。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201310090783.2A CN103130550B (zh) | 2013-03-20 | 2013-03-20 | 一种桑黄菌丝体的培养基及培养方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201310090783.2A CN103130550B (zh) | 2013-03-20 | 2013-03-20 | 一种桑黄菌丝体的培养基及培养方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103130550A true CN103130550A (zh) | 2013-06-05 |
CN103130550B CN103130550B (zh) | 2015-04-01 |
Family
ID=48491061
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201310090783.2A Active CN103130550B (zh) | 2013-03-20 | 2013-03-20 | 一种桑黄菌丝体的培养基及培养方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN103130550B (zh) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105695345A (zh) * | 2016-04-15 | 2016-06-22 | 上海市农业科学院 | 一种桑树粉提取液及其应用 |
CN109234319A (zh) * | 2018-10-29 | 2019-01-18 | 福建农林大学 | 一种桑黄产黑色素的发酵培养基 |
CN109429892A (zh) * | 2018-09-10 | 2019-03-08 | 山东禹泽医药科技有限公司 | 一种桑黄富硒菌粉 |
CN115572754A (zh) * | 2022-10-09 | 2023-01-06 | 上海市农业科学院 | 一种评价食药用菌液体菌种活力的方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1105208A (zh) * | 1994-09-28 | 1995-07-19 | 湖南省益阳伊嘉生物工程公司 | 灵芝系列保健饮品 |
CN1853458A (zh) * | 2005-04-28 | 2006-11-01 | 徐景辉 | 人工培植冬虫草子实体及其生产方法 |
-
2013
- 2013-03-20 CN CN201310090783.2A patent/CN103130550B/zh active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1105208A (zh) * | 1994-09-28 | 1995-07-19 | 湖南省益阳伊嘉生物工程公司 | 灵芝系列保健饮品 |
CN1853458A (zh) * | 2005-04-28 | 2006-11-01 | 徐景辉 | 人工培植冬虫草子实体及其生产方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
蒋宁等: "桑黄菌丝固体培养基筛选研究", 《食用菌》, no. 1, 31 January 2013 (2013-01-31) * |
赵子高等: "药用真菌桑黄液体深层发酵条件的优化", 《微生物学通报》, vol. 34, no. 3, 31 March 2007 (2007-03-31) * |
赵昊璐等: "桑黄固体培养基选择及发菌条件探讨", 《中药材》, vol. 31, no. 4, 30 April 2008 (2008-04-30) * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105695345A (zh) * | 2016-04-15 | 2016-06-22 | 上海市农业科学院 | 一种桑树粉提取液及其应用 |
CN109429892A (zh) * | 2018-09-10 | 2019-03-08 | 山东禹泽医药科技有限公司 | 一种桑黄富硒菌粉 |
CN109234319A (zh) * | 2018-10-29 | 2019-01-18 | 福建农林大学 | 一种桑黄产黑色素的发酵培养基 |
CN115572754A (zh) * | 2022-10-09 | 2023-01-06 | 上海市农业科学院 | 一种评价食药用菌液体菌种活力的方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN103130550B (zh) | 2015-04-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Gu et al. | Effect of salinity on growth, biochemical composition, and lipid productivity of N annochloropsis oculata CS 179 | |
CN103173399B (zh) | 一种复合微生物菌剂及其生产方法 | |
CN103782801A (zh) | 双孢菇液体菌种及其制备方法 | |
CN104611227B (zh) | 一种耐受高ph的斜生栅藻及其选育方法 | |
CN103740772B (zh) | 一种促进樟芝液态发酵生物合成安卓奎诺尔的方法 | |
CN103130550B (zh) | 一种桑黄菌丝体的培养基及培养方法 | |
CN103299826A (zh) | 可提高虫草素含量的北虫草培养方法 | |
CN102453684B (zh) | 氮源用于提高金藻生物量与油脂含量的培养方法 | |
CN102674929A (zh) | 一种桦褐孔菌的深层发酵培养基及其深层发酵方法 | |
CN104823701A (zh) | 一种富硒羊肚菌深层发酵工艺 | |
CN103270890B (zh) | 一种牛樟芝皿式培养方法 | |
CN103409379B (zh) | 一种阿魏菇与胶红酵母共发酵生产漆酶的方法 | |
CN107841464A (zh) | 一种藻类的培养方法 | |
CN102550294B (zh) | 一种姬菇菌种的液体发酵培养方法 | |
CN102250986A (zh) | 一种用物理场强化策略促进荧光假单孢菌高产乳糖酸的加工方法 | |
CN102703332B (zh) | 一株产花生四烯酸油脂的菌株及其应用 | |
CN102061279A (zh) | 高密度发酵生产沼泽红假单胞菌发酵液的方法 | |
CN108004195A (zh) | 一种利用盐肤木叶提取物促进小球藻快速生长的方法 | |
CN107746809A (zh) | 提高藻类生物量的方法 | |
CN102533903A (zh) | 一种具有抗氧化活性的茶树菇发酵液多糖的制备方法 | |
CN103497941A (zh) | 一种高效发酵绿色木霉制备纤维素酶的方法 | |
CN102978271B (zh) | 光合细菌转化纤维素热解液和内醚糖产类胡萝卜素和单细胞蛋白的方法 | |
CN101928699A (zh) | 一种提高灵芝漆酶产量的发酵方法 | |
CN107988078A (zh) | 一种利用木糖混合营养培养小球藻的方法 | |
CN102409067B (zh) | 一种用于米曲霉菌发酵产曲酸的培养基及其发酵方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |