CN103110626A

CN103110626A - 一种药物组合物及其应用

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Publication number: CN103110626A
Application number: CN2013100692578A
Authority: CN
Inventors: 周阳峰
Original assignee: HUNAN HILL PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: HUNAN HILL PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date: 2013-03-05
Filing date: 2013-03-05
Publication date: 2013-05-22
Anticipated expiration: 2033-03-05
Also published as: CN103110626B

Abstract

本发明涉及一种药物组合物，具体公开了一种用于治疗糖尿病及其并发症的药物组合物。本发明的药物组合物由1-脱氧野尻霉素(简称1-DNJ）和白藜芦醇（Resveratrol）组成，其中1-DNJ和白藜芦醇的重量比为1~5：15。本发明的药物能有效的抑制α-葡萄糖苷酶，降低血糖浓度，较单一降糖化合物效果更好，副作用更低，可用于制备降血糖药物、食品或保健品，还可用于制备治疗或预防糖尿病并发症的药物、食品或保健品。

Description

一种药物组合物及其应用

技术领域

本发明涉及一种药物组合物，具体地是一种用于治疗糖尿病及其并发症的药物组合物。

背景技术

糖尿病（Diabete mellitus，DM）是以持续性高血糖为基本生化特征的一种综合病症。主要是由于胰岛素相对或绝对不足所引起的糖代谢紊乱所致。近年来，糖尿病发病率逐年增多，已成为继肿瘤、心血管病后的第三位严重慢性病。糖尿病患者如不及时进行降糖治疗，可导致眼、肾、神经、血管和心脏等组织、器官的慢性并发症，以至最终导致失眠、下肢坏疽、***、脑中风或心肌梗死。

α-葡萄糖苷酶是一种能使不被吸收的复合碳水化合物分解成小肠可吸收的单糖的酶。α-葡萄糖苷酶抑制剂是治疗糖尿病的一类药物，它通过抑制该酶作用而延迟或减少餐后血糖升高，主要代表药物有阿卡波糖（Acarbose）和伏格列波糖（Voglibose）。它们通过在小肠刷状缘竞争性抑制α-葡萄糖苷酶，从而减少淀粉、糊精、双糖在小肠的吸收，从而延长葡萄糖和果糖在消化道的吸收速度，降低餐后血糖水平。但这类药物使糖在肠道分解和吸收障碍，滞留时间延长，因而导致细菌酵解产气增加，可产生肠道多气、腹泻、腹痛等不良反应。

1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin，DNJ)，化学名称为3，4，5-三羟基-2-羟甲基四氢吡啶，是桑科植物的枝、叶、皮或蚕沙中含有的含氮生物碱成分。

DNJ的结构类似于葡萄糖，相当于吡喃糖环上的氧被氮取代，使DNJ在酶催化的糖代谢过程中与糖基中间体形成竞争，可以完全占据酶的活化口袋，从而表现出很强的α-葡萄糖苷酶抑制活性，在糖尿病的治疗方面显现了高效的药理活性，且发生副作用如肠道多气等不良反应的可能性大大低于其他的α-葡萄糖苷酶抑制剂。

白藜芦醇（Resveratrol），化学名称为（E)-5-[2-(4-羟苯基)-乙烯基]-1,3-苯二酚，主要来源于蓼科植物虎杖，是一种多酚类化合物。

白藜芦醇具有多重生物活性作用, 包括抗肿瘤、抗氧化、抗炎、心血管保护等。近年来研究发现白藜芦醇具有降低血糖, 改善胰岛素抵抗，调节异常的脂质代谢，减少炎症因子的分泌和表达、抗氧化、抑制血小板聚集、舒张血管、增加一氧化氮( NO) 生成等作用。李晓媛等“在白藜芦醇对大鼠α-葡萄糖苷酶活性影响”（《华北煤炭医学院学报》，2010，1）中报导了白藜芦醇对大鼠血糖升高的抑制作用主要是通过抑制α- 葡萄糖苷酶而发挥作用的。

发明内容

本发明的目的是要提供一种效果更好、副作用更低的降血糖药物组合物，该药物组合物主要是通过抑制α-葡萄糖苷酶活性发挥降糖作用。本发明的药物组合物中含有1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin，简称1-DNJ）和白藜芦醇（Resveratrol），能有效的抑制α-葡萄糖苷酶，降低血糖浓度，较单一降糖化合物效果更好，副作用更低，可用于制备降血糖药物、食品或保健品，还可用于制备治疗或预防糖尿病并发症的药物、食品或保健品。

为实现上述目的，本发明的技术方案是：

一种药物组合物，该药物组合物由1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇组成，且1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇的重量比为1～5：15。

其中， 1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇优选的重量比为2～3：15。

该药物组合物的剂型优选包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、滴丸剂或口服液。

本发明还提供了所述药物组合物在制备治疗糖尿病或者糖尿病并发症的药物中的应用。

所述糖尿病并发症优选为糖尿病肾病。

本发明也提供了所述药物组合物在制备预防糖尿病食品或保健品中的应用。

下面对本发明做进一步解释和说明：

本发明对含有不同配比1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇的组合物降低血糖的作用进行了研究，发现两者在一定的比例范围内有很好的协同降糖作用。根据本发明的实施例，选择了协同降糖作用较好且副作用低的配比。

本发明还研究了上述组合物对糖尿病并发症的治疗作用。各配比1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇的组合物对糖尿病性肾病有明显的治疗作用，缓解糖尿病肾病（DN）的病变。

上述含有1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇的药物组合物可以制成各种制剂，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、滴丸剂、口服液等。制备的方法可以采用常规的辅料和方法。

与现有技术相比，本发明的优势在于：

本发明中含有1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇，且1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇的重量比为1～5：15，该药物组合物较单一降糖化合物效果更好，副作用更低，可用于制备降血糖药物、食品或保健品，还可用于制备治疗或预防糖尿病并发症的药物、食品或保健品。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的内容作进一步的详细说明，但不应理解为本发明的保护范围仅限定在以下的实施例的范围之内。

实施例1

1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇配伍对α-D-葡萄糖苷酶抑制活性的测定

按表1所示按不同组别在96孔板孔穴中加入样品水溶液（样品组）或磷酸缓冲液（对照组）80μL，加入40μL底物溶液（20×10^-3mol/L对硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)），混匀后置于37℃水浴中预保温5 min，再加入40μL鼠肠酶初提液（精确称取100 mg鼠肠丙酮粉加入1mL 0.9%生理盐水中，超声波处理（1 min×3）溶解，3000r/min离心30min，取出上清液用蒸馏水稀释4倍，置于4℃下保存备用），37℃下反应15 min，加入0.2 mol/L Na₂CO₃160μL溶液终止反应，用酶标仪于405 nm处测定吸光值。样品对α-葡萄糖苷酶抑制率按下式计算：抑制率（%）=[（对照组OD_405nm - 样品组OD_405nm）/对照组OD_405nm]×100。当样品对α-葡萄糖苷酶的抑制率为 50%时，将样品的质量浓度值定为 IC₅₀值。

表1 1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇对α-糖苷酶抑制率试验

Figure 2013100692578100002DEST_PATH_IMAGE001

注：1、表中1-脱氧野尻霉素简称DNJ

表2 1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇不同配比对α-糖苷酶抑制率试验

注：表2中1-脱氧野尻霉素简称DNJ，白藜芦醇简称Res。

结论：试验结果表明，与拜糖平组相比，1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇对α-葡萄糖糖苷酶均有极强的抑制作用，且两者有协同作用(1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇的总量不变)，在1-脱氧野尻霉素∶白藜芦醇配比为1～5∶15时，可较好的抑制α-葡萄糖糖苷酶，明显优于单独使用同浓度1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇的效果；但是当1-脱氧野尻霉素∶白藜芦醇配比大于5∶15时，效果反而不好。

实施例2

不同剂量组合物对自发性高血糖小鼠血糖的影响

1、药物：1-脱氧野尻霉素，白藜芦醇，自制，试验前用蒸馏水配制成所需要的浓度( 组合物中1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇的浓度总和与单独配制白藜芦醇或1-脱氧野尻霉素的浓度相同)。拜糖平，拜耳医药保健有限公司。

2、动物：NOD小鼠，体重25-35g，由北京大学医学部实验动物中心。试验前测定血糖，选择血糖值高于11.1mmol/L 的动物进行试验。

3、试验方法与结果

对小鼠血糖的影响：NOD小鼠，空腹6h 后，测定血糖，选择血糖值高于11.1mmol/L 的动物80 只，随机分为8组，分别灌胃给予下列药物：①对照组( 蒸馏水) ；②拜糖平组(50mg/kg) ；③ -⑧不同配比的组合物(50mg/kg，药物比例不同，总量不变)。给药连续给药7天，末次给药前禁食2h。眼眶静脉窦采血。用葡萄糖氧化酶试纸法测定血糖值。结果见表3。

表3 药物组合物对自发性高血糖小鼠血糖的影响(X±SD)

Figure 2013100692578100002DEST_PATH_IMAGE003

注：1、与空白对照组比较：*P ＜0.05，**P ＜0.01(t检验)。

2、表中1-脱氧野尻霉素简称DNJ，组合物配比为DNJ : 白藜芦醇。

结论：1-脱氧野尻霉素、白藜芦醇及1-脱氧野尻霉素：白藜芦醇配比为1~5:15的组合物均可有效降低NOD小鼠血糖，当1-脱氧野尻霉素与白藜芦醇为2～3：15 配比的组合物时，对NOD小鼠血糖的降血糖效果最好，显著优于同浓度1-脱氧野尻霉素或白藜芦醇的单独应用，说明二者组合应用具有协同增效作用。

实施例3

不同剂量组合物小鼠胃肠推进运动的影响

1. 实验动物

昆明种小鼠，清洁级，体重20g-22g

2．实验方法

取禁食12h的昆明种小鼠60只, 按体重随机分为6组，禁食18h后，分别灌胃给予下列药物：①对照组( 蒸馏水) ；②阿卡波糖组(10mg/kg) ；③-⑥不同配比的组合物(10mg/kg，药物比例不同，总量不变)，15min后每只小鼠均灌胃给予5%炭末***胶混悬液0.2ml，灌胃前将5%炭末***胶混悬液用力摇匀。炭末灌胃后20min，将小鼠脱臼处死，剖开腹腔，取出胃肠道。剪去附着在肠管上的肠系膜,将肠管不加牵引地轻轻地平铺在玻璃板上(玻璃板上滴少许盐水)。以幽门为起点,测量炭末在肠管内的移动距离和小肠(自幽门至回盲部)的全长,计算每只小鼠炭末的移动距离占小肠全长百分率，比较各组动物结果之不同

。

表3 药物组合物对正常小鼠小肠推进的影响(x ± s, n= 10)

Figure 2013100692578100002DEST_PATH_IMAGE005

注：与空白对照组比较：*p<0.05。

从本实验结果来看,相较于蒸馏水对照组, 不同配比药物组合物组均对小鼠肠推进无明显抑制作用，显著优于阿卡波糖组，表明该药物组合物不会产生肠道多气、腹泻、腹痛等不良反应，明显优于其他的α-葡萄糖苷酶抑制剂。

实施例4

对SZT糖尿病大鼠动物模型所致肾脏病变的防治作用的试验

1. 实验动物

Wistar大鼠，雄性，清洁级，体重180g-220g

2．实验方法

2.1大鼠糖尿病模型的建立

大鼠禁食16h，2%STZ腹腔注射(50mg／kg；0.25ml/l00g)，注射后72h尾静脉取血，测定空腹血糖，空腹血糖水平> 300mg/dl (16.7mM)为大鼠糖尿病模型造模成功。

2.2实验分组及给药

大鼠60只按体重随机分为6组，确认糖尿病模型成功后，常规饮食分别灌胃给予下列药物：①对照组( 蒸馏水) ；②消渴丸组(500mg/kg) ；③-⑥不同配比的组合物(60mg/kg，药物比例不同，总量不变)，饲喂12周。

2.3．组织取材及病理学检测

分别用4℃生理盐水及4%多聚甲醛右心室灌流固定。摘取眼肾脏，4%多聚甲醛固定，石蜡包埋、切片、HE染色，观察对肾小球动脉、肾小球毛细血管网的影响。

2.4 结果：对糖尿病大鼠肾脏小血管病变的影响

表5 对糖尿病大鼠肾血管及肾小球血管病变的影响(x±s)

注：与空白对照组比较：*p<0.05，**p<0.01。

糖尿病大鼠肾小动脉病变包括小动脉管壁增厚、管腔缩小或闭塞、动脉壁变性、小动脉增生等，有的还有小血管扩张、球囊扩大、肾小球硬化和萎缩等。

本实验中肾小动脉病变情况如下：消渴丸组、1-DNJ组与空白对照组比较肾小动脉管壁增厚、管腔缩小或闭塞、动脉壁变性、出入球动脉壁细胞增生等病理改变未见明显的好转(p>0.05)；白藜芦醇组、不同配比组合物组与对照组比较病理改变明显减轻(p<0.05)。另各给药组肾小动脉扩张（包括出入球动脉扩张）、肾小球毛细血管网扩张及基底膜增厚等变化与对照组比较相对明显。各组动物肾小球发现早期硬化或（和）萎缩、部分球囊内见小滴样蛋白渗出物。

另外消渴丸组、白藜芦醇组和不同配比组合物组与对照组比较肾小管空泡变性（糖原沉积）程度有所减轻，肾盂扩张和炎细胞浸润及粘膜增生程度减轻并降低了其发生率。

结果表明，该药物组合物对改善大鼠糖尿病性肾小血管病变、肾小管空泡变性、肾盂扩张及粘膜增生和炎症等病理改变具有一定的作用。

综上，本发明的药物组合物对α-葡萄糖苷酶活性有良好的抑制作用，较单一降糖化合物效果更好，副作用更低，还对糖尿病并发症有一定的治疗作用，可用于制备降血糖药物、食品或保健品，还可用于制备治疗或预防糖尿病并发症的药物、食品或保健品。

Claims

1.一种药物组合物，其特征是，该药物组合物中由1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇组成，且1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇的重量比为1～5：15。

2.根据权利要求1所述药物组合物，其特征是，所述1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇的重量比为2～3：15。

3.根据权利要求1或2所述药物组合物，其特征是，该药物组合物的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、滴丸剂或口服液。

4.权利要求1-3之一所述药物组合物在制备治疗糖尿病或者糖尿病并发症的药物中的应用。

5.根据权利要求4所述应用，其特征是，所述糖尿病并发症为糖尿病肾病。

6.权利要求1-3之一所述药物组合物在制备预防糖尿病食品或保健品中的应用。