CN103007001B - 一种治疗睡眠障碍的中药制剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种治疗睡眠障碍的中药制剂，该中药制剂按重量份由远志8-12份，酸枣仁（炒）13-17份，绞股蓝6-10份，徐长卿8-12份，萱草花6-10份和蜘蛛香4-8份制成。本发明中药制剂对失眠有显著疗效且未见毒副作用和耐药性，镇静作用显著， 本发明中药制剂的制备方法在制剂的生产过程中无需添加多种辅料，不增加病人的服药量和使用成本。本发明中药制剂对不同中医证型及不同疾病所致之失眠均有很好的疗效，且不因连续给药而产生耐药性，安全有效，疗效显著。

Description

一种治疗睡眠障碍的中药制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种治疗睡眠障碍的中药制剂（商品名：复方远枣宁神中药制剂）及其制备方法，属于药物制备领域。
背景技术
失眠（insomnia）是睡眠障碍领域内近百种疾病中的常见症状，是睡眠质量或数量达不到正常需求的一种主观体验。睡眠障碍是多种疾病的伴随症状，中医治疗睡眠障碍主要用养心安神和重镇安神两类中药及其复方。几千年的临床实践证明，这些中药及其复方在改善睡眠、提高睡眠质量方面具独特的疗效。
现有的中药及其复方制剂，镇静作用不明显，对失眠的疗效也不显著，而且在制剂的生产过程中需要添加多种辅料，增加了病人的服药量和使用成本。
发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗睡眠障碍的中药制剂及其制备方法。该中药制剂对失眠有显著疗效且未见毒副作用和耐药性，镇静作用显著， 本中药制剂的制备方法在制剂的生产过程中无需添加多种辅料，不增加病人的服药量和使用成本。
为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下：治疗睡眠障碍的中药制剂，该中药制剂按重量份由远志8-12份，酸枣仁（炒）13-17份，绞股蓝6-10份，徐长卿8-12份，萱草花6-10份和蜘蛛香4-8份制成。
前述的治疗睡眠障碍的中药制剂，按重量份优选由远志9-11份，酸枣仁（炒）14-16份，绞股蓝7-9份，徐长卿9-11份，萱草花7-9份和蜘蛛香5-7份制成。
前述的治疗睡眠障碍的中药制剂，按重量份更优选由远志10份，酸枣仁（炒）15份，绞股蓝8份，徐长卿10份，萱草花8份和蜘蛛香6份制成。
前述的治疗睡眠障碍的中药制剂中，所述的中药制剂为任意一种临床上用的内服制剂。
前述的治疗睡眠障碍的中药制剂中，所述的内服药剂为，散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、微囊剂、丸剂、滴丸、口服液、软胶囊，糖浆剂、分散剂、薄膜包衣片或泡腾片。
制备前述治疗睡眠障碍的中药制剂的方法，包括以下步骤：
A. 按上述配方称取远志、酸枣仁（炒）、绞股蓝、萱草花四味药材，用60％乙醇加热提取3次，得提取液，为A品；
B. 将A品趁热过400目滤布，减压浓缩回收乙醇后，得清膏为B品； 
C. 将B品置于减压70℃烘箱中或微波真空干燥机中干燥，得干膏，粉碎后过五号筛，得干膏粉为C品；
D. 按上述配方取徐长卿、蜘蛛香二味药材，先洁净、干燥、灭菌，然后粉碎过六号筛，得粉末为D品；
E. 将C品与D品混合均匀，得E品；
F. 将F品加工成临床用的中药制剂。
前述的制备治疗睡眠障碍的中药制剂的方法，步骤A中，所述的用60％乙醇提取3次，具体为，先用9.5倍量的60%乙醇提取一次，时间为1.5小时，然后用8倍量60％乙醇提取两次，每次时间为1小时，提取时以60℃-90℃加热。
前述的制备治疗睡眠障碍的中药制剂的方法，步骤B中，所述的清膏，在20℃时测得的相对密度为1.2。
与现有技术相比，本发明中药制剂对失眠有显著疗效且未见毒副作用和耐药性，镇静作用显著， 本发明中药制剂的制备方法在制剂的生产过程中无需添加多种辅料，不增加病人的服药量和使用成本。本发明中药制剂对不同中医证型及不同疾病所致之失眠均有很好的疗效，且不因连续给药而产生耐药性，安全有效，疗效显著。
本发明组方中的药材均属于祖国医学“虚证”所致不寐症等范畴，因此采用益气养阴，养血，宁心安神，清热除烦为本病的治则。该组方分析及论证如下：方中远志归肝、胆、心经，性味甘平以养肝阴，故能补肝，宁心安神，是治疗血虚烦躁不眠之要药；酸枣仁归心、肾经，有安神益智，降心火功效；两药合用养肝肾血，宁心神，为君药。辅以绞股蓝、徐长卿益气养阴，生津安神。佐以萱草花、蜘蛛香镇静安神，祛风止痛。诸药合用，心肝肾之血滋养有源，共奏收益气，养血，调肝滋肾，宁心安神，清心除烦，止痛之效。
我们做了初步的生物活性研究试验，其结果表明：以上6味药组成的复方提取物均能显著减少小鼠的自主活动数，能明显延长戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间，并且能提高阈下剂量戊巴比妥钠小鼠入睡数，有明显的镇静催眠活性。
本发明人对原料药的组方、提取、成型工艺进行了大量的实验研究：
（一）提取工艺的研究
一） 处方的筛选
1．药材徐长卿的选择与研究
药材徐长卿在原处方中是6g药材直接打最细粉（过120目筛）再与6g药材蜘蛛香最细粉（过120目筛）与其它四味药材的提取干膏混合均匀后使用。但是加入生药粉会使处方的服用量增大，也不符合现代中药制剂的要求，为了减少服用量，考虑拟对徐长卿药材进行提取。药材徐长卿中的主要化学成分为挥发性成分，有文献报道该挥发性成分具有镇静安神的作用，故采用水蒸气蒸馏法来提取药材徐长卿中的挥发性成分。
1.1徐长卿药材的提取：称取药材徐长卿 50g置于2000ml圆底烧瓶中，加入20倍量的水，浸泡0.5hr，用水蒸气蒸馏法提取4hr，馏出速度约200ml/hr，待蒸馏液在锥形瓶中收集约800ml，加入10gNaCl，放入冰箱中冷藏结晶。药渣再加5倍量水煎煮1小时，过滤，合并两次滤液，减压浓缩后80℃下干燥，干膏打粉，备用。
表1  徐长卿药材提取试验结果
1.2 徐长卿药材直接打粉与提取物镇静试验的比较研究
为了探索药材徐长卿经提取后的生物活性与直接打粉是否有差异，故将药材徐长卿直接打粉与提取物之间进行了生物学镇静试验的平行比较研究。
原理：本次试验用多功能小鼠自主活动仪来测定。通过多功能小鼠自主活动仪中的红外线装置测定小鼠在仪器中自发活动频率，可以反应中枢神经***的状况。记录小鼠单位时间内的自发活动数，以评价药物对中枢神经***是否有抑制作用。
活动抑制率％＝（空白组活动数均值－给药组均值）/空白组均值×100％
1.2.1  10g药材徐长卿的提取物与10g药材徐长卿打粉之间生物活性的比较
为了二者之间的可比性，故将用量均设计为10g药材，结果见表2和表3。
表2  10g药材徐长卿提取物与10g药材徐长卿最细粉给药量
注：上述药粉分别溶于10ml蒸馏水中，均折合成相同生药浓度（含生药0.2g.ml-1）。
表3  10g药材徐长卿提取物与10g徐长卿生药细粉镇静试验比较数据
注：徐长卿打粉组与提取物组比较，p﹤0.01。
结果：由表2和表3数据可得：p﹤0.01。故10g药材徐长卿的提取物与10g药材徐长卿细粉之间有极显著性差异，药材细粉镇静试验明显优于提取物。
1.2.2  10g药材徐长卿的提取物与6g药材徐长卿细粉间镇静试验的比较研究
10g药材徐长卿提取物与10g药材徐长卿细粉之间有极显著性差异，原处方中药材徐长卿的一个处方量为6g，10g药材徐长卿提取物与6g药材徐长卿细粉再进行镇静试验的比较，以确定并筛选出最佳处方用量。
设计：打粉组生药浓度为0.12g/ml,提取物组（挥发性成分＋水提干膏）折合成生药浓度为0.2g/ml。
表4  10g药材徐长卿提取物与6g药材徐长卿细粉间镇静试验的比较数据
结果：由表4数据可得：p﹥0.05。所以10g药材徐长卿提取与6g药材徐长卿细粉间无显著性差异。
1.2.3 本试验结果分析与总结
1.2.3.1  药材徐长卿打粉组、提取组均各为10g生药量时，试验为每组13只小鼠。结果见表5。
表5  10g药材徐长卿提取物与10g药材徐长卿细粉镇静入药试验的比较数据
  生药浓度（g.ml-1） 每分钟活动数 活动抑制率％
打粉组 0.2 7.88 71.86
提取组 0.2 21.11 24.61
由表5可见，打粉组的活动数约为提取组1/3，并在组间有极显著性差异（P﹤0.05,P﹤0.01）。
1.2.3.2  6g生药打粉组，10g生药提取组，试验为每组10只小鼠。结果见表6。
表6  10g药材徐长卿提取物与6g药材徐长卿细粉镇静试验比较数据
  生药浓度（g.ml-1） 每分钟活动数 抑制率％
打粉组 0.12 17.5 49.51
提取组 0.2 22.8 34.22
由表6可见，打粉组减少了生药40％（减少4g），生药浓度比提取组还降低0.4倍，但生物活性仍比提取组10g药材的生物活性好。
1.2.3.3   药材徐长卿10g与6g打粉组的比较，结果见表7。
表7  徐长卿直接打粉两次镇静试验比较数据
  生药浓度（g.ml-1） 每分钟活动数 生药量（g）
第一次试验 0.2 7.88 10
第二次试验 0.12 17.5 6
结果：第二次试验减少了药材徐长卿 40％，其每分钟活动数约增加了约1.2倍。同时也证明了本复方中量效关系有一致性
1.2.3.4    10g药材提取物的比较，结果见表8。
表8  10g药材徐长卿提取物两次镇静试验比较数据
  生药浓度（g.ml-1） 每分钟活动数
第一次试验 0.2 21.11
第二次试验 0.2 22.8
  由表8可见，二次试验中10g药材提取组每分钟小鼠活动数相近（21.11，22.8），说明本试验的可重复性。
结论：根据整个复方新药开发以安全性、有效性为基础，以及本方制剂成型、剂量需减少等方面来综合考虑，故筛选6g徐长卿生药为一个处方中的量，直接打粉和四味药合提干膏粉混合均匀后，具有易分散、奏效快的特点。
2．药材蜘蛛香的筛选方法研究
药材蜘蛛香的化学成分极为复杂，脆弱，化学结构易变，如含挥发油类、环烯醚萜类、萜酸类、生物碱类等，其中环烯醚萜类的结构中常具羧基、醛基、羰基、不饱和双键、偕二醚、半缩醛等官能团，故化学性质极其活泼，在制剂过程中，受酸、碱、热等较剧烈条件影响，易发生断键、开环和异构化，就会产生降解产物。Thies等也发现蜘蛛香无论是在柱层析，还是在60℃蒸馏时，环烯醚萜类均会降解，无法得到较好的分离效果。其制剂如若干燥处理或贮存条件不当，则只能得到真正有效成分的降解或转化产物。Chapell发现蜘蛛香适宜的干燥温度是40℃ ，如将温度升至60℃或120℃ ，将使环烯醚萜类损失30 % -75%。Chapelle等 发现蜘蛛香二氯甲烷提取物放置5个月后，只剩下25% 环烯醚萜类的未降解。 
环烯醚萜类和挥发油在制剂中应是不可缺少的活性成分和部位。文献研究还证实，在蜘蛛香浸膏、蜘蛛香酊的工业生产过程中环烯醚萜类提取不完全，挥发油在浓缩过程中损失也较多。而蜘蛛香粉剂未经提取浓缩等工艺处理，各种成分仍保持其原生状态，对保证药物疗效较为理想。故英、美、日等发达国家药典由最初的蜘蛛香根、根茎入药，经过浸膏剂、流浸膏剂及酊剂发展为有效成分制剂，而后近几年又重新返回原生药粉剂，生药粉剂还具有表面积较大，因而具有易分散，奏效快的特点。
综上所述，拟仍以药材蜘蛛香最细粉直接入药为宜。
二） 远志、酸枣仁、绞股蓝、萱草花四味药乙醇提取工艺的考察
1．处方中四味药不同浓度乙醇回流提取优选
考察指标：1.细叶远志皂苷提取转移率；2.总皂苷提取量；3.干膏收率；4.镇静试验（小鼠自主活动抑制率）。
2．不同浓度乙醇回流提取工艺中细叶远志皂苷的含量测定
分别精密称取不同浓度乙醇回流提取的干膏粉各2份，每份450mg于250ml平底烧瓶中，得到供试品，进行细叶远志皂苷的含量考察，测定：取上配溶液，精密吸取10μl，各重复进样2次，计算，结果见表9。
细叶远志皂苷的含量考察的方法为：
（1）色谱条件与***适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 流动相为55:45的甲醇和0.05％磷酸；流速为1.0ml/min；柱温为30℃；检测波长为202nm，理论塔板数以细叶远志皂苷峰计应不低于5000； 
（2）对照品溶液的制备：精密称定细叶远志皂苷对照品10.00mg于10ml容量瓶中，用色谱甲醇溶解并定容，摇匀，即得浓度为1.00mg/ml的对照品溶液；
（3）供试品溶液的制备：在供试品加入10%NaOH溶液100ml，水解2h，水解后取出，冷却，用盐酸调pH值至4～5，用水饱和的正丁醇萃取4次，合并正丁醇层，80℃水浴挥干，用甲醇溶解残渣并转移至25ml容量瓶中，定容，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液
（3）测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，按峰面积值采用外标一点法对制剂中的细叶远志皂苷进行含量计算；
   表9  不同浓度乙醇回流提取工艺考察的细叶远志皂苷含量测定（n=2）
结果：
a.细叶远志皂苷含量随着乙醇浓度的增大而升高，80％乙醇提取干膏中细叶远志皂苷含量最高（1.83％），50％乙醇提取干膏中细叶远志皂苷含量最低（1.33％）。
b.干膏得率随着乙醇浓度的增大而呈现下降趋势，50％﹥60％﹥70％﹥80％，80％的干膏得率最低（26.41％），50％的干膏得率最高（29.46％）。
3. 不同浓度乙醇回流提取工艺中总皂苷的含量测定
分别精密平行称取不同浓度乙醇回流提取的干膏粉各2份，每份55mg于10ml容量瓶中，得到供试品，进行总皂苷的含量考察，以不加样的甲醇同法制备为随行空白，在544nm下进行测定，测得总皂苷含量以人参皂苷Rb1计。结果见表10。
总皂苷的含量考察的方法为：
测定条件：用比色法，547±2nm 为测定波长，显色剂为5％香草醛－冰醋酸溶液0.2ml和0.8ml高氯酸；
（2）对照品溶液的制备：精密称取人参皂苷Rb1对照品10.00mg于10ml容量瓶中，加入色谱甲醇溶解并定容，摇匀即得对照品溶液，其浓度为1.00mg/ml； 
（3）供试品溶液的制备：在供试品中加入10ml热蒸馏水溶解，溶液置分液漏斗中，用同体积石油醚脱脂3次（10ml/每次），弃去石油醚层，水层用水饱和的正丁醇萃取4次（20ml/每次），合并正丁醇层于250ml分液漏斗中，用正丁醇的饱和水溶液80ml洗涤1次，弃去水层，正丁醇层于80℃水浴挥干，残渣用甲醇溶解并转移至25ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；
（4）测定法：准确移取1.5ml溶液于具塞比色管中，70℃水浴挥干甲醇，将挥干甲醇的比色管准确加入5％香草醛－冰醋酸溶液0.2ml和0.8ml高氯酸溶液，60℃密闭显色10min后，冰浴10min，再加入5ml冰醋酸摇匀后，以不加样的甲醇同法制备为随行空白，按照2010版药典一部紫外—可见分光光度法在547±2nm下进行吸光度的测定，测得总皂苷吸光度代入人参皂苷Rb1回归方程计算，即得；
表10  不同浓度乙醇回流提取工艺考察中总皂苷含量测定（n=2）
注：①总皂苷提取量＝总皂苷含量×干膏重
②总皂苷提取相对百分比以试验中总皂苷提取量最高为100％计。
结果：
a.总皂苷含量随着乙醇浓度的升高而增大，其中50％乙醇提取干膏中总皂苷含量较低为4.95％，80％乙醇提取干膏中总皂苷含量较高为9.60％。
b.结合干膏重，总皂苷提取量为：80％﹥70％﹥60％﹥50％，其中50％乙醇提取干膏中总皂苷提取量较低为0.5979g，80％乙醇提取干膏中总皂苷含量较高为1.0396g。
4.不同浓度乙醇回流提取干膏的镇静试验（小鼠自主活动次数）
为了探讨四个浓度乙醇提取干膏间生物活性是否存在差异，最终提取工艺的选择指标以药效为主，故对四个浓度乙醇提取工艺的干膏进行镇静试验的比较。
活动抑制率％＝（空白组活动数均值－给药组均值）/空白组均值×100％，结果见表11。
表11  不同浓度乙醇回流提取干膏小鼠自主活动次数试验结果
注：各组间给药量及浓度相同。*给药组与空白对照组相比，p﹤0.05。
从表11可见活动抑制率强弱为60％﹥80％﹥50％﹥70％，而阳性药更弱，仅为10.70％。其中60％、80％乙醇提取物与空白对照组相比，有显著性差异。50％、70％乙醇提取物与空白对照组相比，无显著性差异，所以首先舍弃50％及70％这两个乙醇浓度。
将60％、80％乙醇提取物再进行t-检验分析，结果见表12。
表12  60％、80％乙醇提取物小鼠自主活动数t-检验分析数据表
由表12得出，p﹥0.05，说明60％、80％浓度的乙醇提取物对小鼠自主活动的影响无显著性差异。
为了试验结果的可靠性，不同浓度乙醇提取物的镇静试验做了四次，结果见表13和表14。
表13   四次不同浓度乙醇回流提取干膏小鼠活动抑制率
1 2 3 4
50％ 22.21 50.82 52.06 22.60
60％ 52.89 61.01 66.05 36.81
70％ 18.07 32.88 45.63 13.62
80％ 48.19 43.04 66.94 23.69
表14   四次不同浓度乙醇回流提取干膏小鼠活动抑制率大小比较
试验次数 活动抑制率％ 生药浓度g.ml-1 每分钟活动数
1 60％﹥80％﹥50％﹥70％ 0.62 23.5～26.4
2 60％﹥50％﹥80％﹥70％ 0.992 13.8～20.5
3 80％﹥60％﹥50％﹥70％ 1.14 11.4～19.3
4 60％﹥80％﹥50％﹥70％ 1.14 12.5～23.6
由表13和表14可见，第三次试验80％醇提组﹥60％醇提组，但80％醇提组的活动抑制率为66.94％，60％醇提组的活动抑制率为66.05％，二者相近，说明本试验具有可重复性，结果可靠。
5. 阳性对照药与本复方生物活性的比较研究
在与阳性药（复方枣仁安神胶囊。生产厂家：贵州同济堂制药有限公司；批准文号：国药准字Z20010033；生产批号20071003）对照组比较研究中，阳性药对照组对小鼠自主活动抑制率为10.70％，与生物活性最差的70％乙醇提取组自主活动抑制率18.07％相比较，生物活性仍然相差约1.8倍。将阳性药对照组与60％乙醇提取组进行t检验分析，结果见表15。
表15  阳性药对照组与60％乙醇提取组小鼠自主活动次数t检验分析数据
注：60％乙醇提组与复方枣仁安神胶囊组相比，p﹤0.01。
由表15可以见，p﹤0.01,阳性药对照组与60％乙醇提取组之间生物活性存在显著性差异，60％乙醇提组生物活性优于阳性对照组，说明了本复方与同类上市品种在本试验的比较中，本复方镇静作用显著，成药性好，故有较好的开发前景。
6. 不同浓度乙醇提取工艺的考察总结
结合细叶远志皂苷与总皂苷含量测定、生物学指标（镇静试验）的比较，结果见表16。
表16   不同浓度乙醇提取工艺考察指标及结果
由表16可见：
a.收膏率随着乙醇浓度的增大而呈现下降趋势，其中80％的收膏率最低，50％的收膏率最高。
b.细叶远志皂苷含量与总皂苷含量随着乙醇浓度的增大而升高。
c.小鼠自主活动抑制率则为：60％﹥80％﹥50％﹥70％。
综上所述，故将提取时的乙醇浓度确定为60％乙醇回流提取为宜。
三） 处方中四味药提取工艺的正交试验
1. 四味药提取正交试验
影响60％乙醇回流提取的主要因素有加入溶剂量、提取时间、提取次数，故各取3个水平进行L 9  (3 4 )正交试验，设计见表17。
表17   四味药合提试验因素与水平设定
2.称取一个处方量四味药材41g（远志10g，酸枣仁（炒）15g，绞股蓝8g，萱草花8g），各9份照正交表中各试验号下的要求进行60％乙醇回流提取，浓缩，干燥，得不同工艺下的干膏，打粉，置干燥器中密封保存，备用。
3．评价指标
(1)用细叶远志皂苷的含量考察方法测定君药远志中主要指标性成分细叶远志皂苷的含量。 
(2)用总皂苷的含量考察方法测定大类有效成分总皂苷的含量。
(3)干膏收率。
(4)生物学指标——镇静试验（小鼠自主活动抑制率）。
4. 综合评分
a.因远志为方中君药，具有安神益智的功效。其皂苷类成分是远志中的重要有效成分，而细叶远志皂苷是远志总皂苷碱水解生成的次级皂苷, 远志总皂苷经碱水解均能转化为细叶远志皂苷，故作为指标性成分用细叶远志皂苷的含量考察方法来检测细叶远志皂苷的含量，以此评价提取工艺的优劣，权重系数定为0.4。
b.方中远志、酸枣仁及绞股蓝等均含有四环三萜皂苷类，为镇静安神的主要有效成分。故本方中总皂苷作为大类成分的含量测定也做了深入细致的方法学考察，来评价提取工艺的优劣，权重系数定为0.4。
c.本处方为安神药，采用小鼠自主活动仪来测试小鼠自发活动数，观察其镇静作用，以药效学指标来评价及筛选提取工艺，也是一个具有较好参考价值的评价指标，故权重系数定为0.2。
d．在正交试验中，各提取工艺间干膏收率在试验之间影响并不明显，故加权评分时未将其列入考虑中。
综合评分＝（40/最高细叶远志皂苷提取转移率）×细叶远志皂苷提取转移率＋（40/最高总皂苷提取量）×总皂苷提取量＋（20/最高自主活动抑制率）×自主活动抑制率
5. 四味药回流提取正交试验考察中细叶远志皂苷及总皂苷的含量测定
5.1 细叶远志皂苷含量测定及提取转移率计算
分别精密平行称取不同提取工艺下的提取物干膏粉各2份，每份450mg于250ml平底烧瓶中，方法同前细叶远志皂苷含量考察方法。 
测定：取上配溶液，精密吸取10μl，各重复进样2次，计算，结果见表18。
表18  一个处方四味药提取正交试验中细叶远志皂苷含量及提取转移率（n=2）
结果:在正交试验中，以试验3细叶远志皂苷提取转移率最高（84.80％），其次为试验7（83.83％），细叶远志皂苷提取转移率最低的为试验1（64.65％）。
5.2 总皂苷含量测定及总提取量计算
分别精密平行称取各提取工艺下的提取干膏各2份，每份45mg于10ml容量瓶中，方法同前总皂苷含量考察方法，以不加样的甲醇同法制备为随行空白，在544nm下进行测定，测得总皂苷含量以人参皂苷Rb1计。结果见表19。
表19   一个处方中四味药回流提取中总皂苷含量测定及总提取量（n=2）
注：总皂苷提取相对百分比是以试验3总皂苷提取量最高为100％计。
结果：正交试验工艺中以试验3中总皂苷提取量最高（0.8161g）。其次为试验7（0.7698g），最低为试验1（0.5243g）。
5.3结果
（1）细叶远志皂苷提取转移率：③﹥⑦﹥⑤﹥⑨﹥②﹥④﹥⑧﹥⑥﹥①。
（2）总皂苷提取量：③﹥⑦﹥②﹥⑤﹥⑨﹥⑥﹥④﹥⑧﹥①。
（3）干膏收率：⑦﹥⑤﹥⑨﹥③﹥④﹥②﹥⑧﹥⑥﹥①。
5.4 正交试验中镇静试验的研究
结果见表20。
表20   正交试验小鼠自主活动数测得数据
注：各组间给药量及浓度相同。
结果：镇静强弱：③﹥⑨﹥⑦﹥⑧﹥④﹥⑤﹥⑥﹥②﹥①,9个试验组活动幅度为16.3～28.3次/min。
表21   正交试验小鼠自主活动数比较的单因素方差分析表
组别 观测数 求和 平均 方差
一组 10 1353 135.3 6520.456
二组 10 1256 125.6 4324.489
三组 10 815 81.5 2987.611
四组 10 928 92.8   3282.178
五组 10 1009 100.9 3112.322
六组 10 1187 118.7 7988.456
七组 10 1086 108.6   3342.933
八组 10 1110 111.0 2572.889
九组 10 1050 105.0 3028.0
表22   正交试验小鼠自主活动数比较的方差分析
误差来源 SS df MS F P
组间 21655.16 8 2706.894 0.655611 0.728647
组内 334434.0 81 4128.815    
总计 356089.2 89      
*F0.05（8，81）＝2.054882；F0.01（8，81）＝2.738996
结果：如表21和表22，通过对小鼠自主活动数进行单因素方差分析显示：F﹤F0.05，F﹤F0.01，P﹥0.05，P﹥0.01，各组之间均无显著性差异。
5.5正交试验中各评价指标的比较
结果见表23。
表23   正交试验中9组评价指标的比较结果
由表23可见，细叶远志皂苷提取转移率、总皂苷提取量越高，生物活性越好，它们之间存在量效关系，同时也说明选择化学评价指标的正确性。
5.6一个处方量四味药（远志10g，酸枣仁（炒）15g，绞股蓝8g，萱草花8g）60％乙醇回流提取正交试验结果
如表24所示。
表 24  一个处方四味药60％乙醇回流提取L9 (34)正交试验结果表
5.7 正交试验方差数据
（1）以细叶远志皂苷提取转移率计（相当于一个处方中远志药材10g的量）
表25   细叶远志皂苷提取转移率方差分析表
误差来源 SS f MS F P*显著性
A 23.3878 2 11.6939 18.4767 P>0.05
B 19.3751 2 9.6875 15.3065 P>0.05
C 443.5321 2 221.766 350.3966 P<0.01*极显著
误差e 1.2658 2 0.6329    
*F0.05(2,2)=19.00; F0.01(2,2)=99.00
结果：如表25所示，比较各因素极差R值的大小得出，三个因素对细叶远志皂苷提取转移率的影响大小为提取次数（C）＞溶剂量 (A)＞提取时间(B)，由方差分析表可以得出，溶剂量、提取时间、提取次数中只有提取次数有非常显著的影响，溶剂量和提取时间对细叶远志皂苷的提取转移率无显著性影响。通过直观分析，以细叶远志皂苷提取转移率为评价指标，三个因素以第三水平最好，则最佳提取工艺为A 3 B 3 C 3 。
（2）以总皂苷提取量计（相当一个处方中含绞股蓝原药材8g的量）。
表26   总皂苷提取量方差分析表
误差来源 SS f MS F P
A 0.01021 2 0.005107 1.0786 P>0.05
B 0.00340 2 0.001699 0.3588 P>0.05
C 0.07273 2 0.03637 7.6811 P>0.05
误差e 0.00947 2 0.004735    
    *F0.05(2,2)=19.00; F0.01(2,2)=99.00
结果：如表26所示，三个因素对总皂苷提取量的影响大小是：提取次数（C）﹥溶剂量 (A) ﹥提取时间(B),方差分析的结果显示，三个因素对于总皂苷的提取量均无显著性差异，由直观分析得出，加入溶剂量以第一水平为好，提取时间与提取次数以第三水平最好，则最佳提取工艺为A 1 B 2 C 3 。
（3）以镇静试验中对小鼠自主活动抑制率的强弱来进行方差分析
表27   小鼠自主活动抑制率方差分析表
误差来源 SS f MS F P
A 458.08 2 229.04  1.039 P>0.05
B 115.26 2 57.63 0.26 P>0.05
C 509.55 2 254.77 1.156 P>0.05
误差e 440.80 2 220.40    
*F0.05(2,2)=19.00; F0.01(2,2)=99.00
如表27所示，在镇静试验中，各因素对小鼠自主活动的抑制率影响大小为：溶剂量(A) ﹥提取次数（C）﹥提取时间(B),通过方差分析可知，三个因素对于小鼠自主活动抑制率都无显著性意义。由直观分析看出抑制率最高的为工艺3，其次为工艺9和工艺7，最不好的为工艺1。从药效学直观分析看三个因素都以第三个水平为最好，则最佳提取工艺为A 3 B 3 C 3 。
（4）综合评分结果对正交试验进行方差分析
表28   综合评分结果的方差分析
误差来源 SS f MS F P*
A 121.67 2 60.83 1.2877 P>0.05
B 75.78 2 37.89 0.8021 P>0.05
C 1087.84 2 543.92 11.5140 P>0.05*
误差e 94.49 2 47.24    
*F0.05(2,2)=19.00; F0.01(2,2)=99.00
如表28所示，通过综合评分方差分析结果可知，综合评分结果的影响大小为提取次数（C）﹥溶剂量(A) ﹥提取时间(B)，但三个因素均无显著性差异，且三个因素都以第三个水平为最好即A 3 B 3 C 3 。
5.8直观分析    
比较各因素极差R值的大小得出：三个因素对细叶远志皂苷提取转移率的影响大小为提取次数（C）＞溶剂量 (A)＞提取时间(B)，三个因素以第三水平最好，则最佳提取工艺为A 3 B 3 C 3 ；三个因素对总皂苷提取量的影响大小是：提取次数（C）﹥溶剂量 (A) ﹥提取时间(B), 加入溶剂量以第一水平为好，提取时间与提取次数以第三水平最好，则最佳提取工艺为A 1 B 3 C 3 ；在镇静试验中，各因素对小鼠自主活动的抑制率影响大小为：溶剂量(A) ﹥提取次数（C）﹥提取时间(B), 三个因素都以第三个水平为最好，则最佳提取工艺为A 3 B 3 C 3 ；综合评分结果的影响大小为提取次数（C）﹥溶剂量(A) ﹥提取时间(B)，三个因素都以第三个水平为最好，即A 3 B 3 C 3 。
5.9 结论    
溶剂量对提取并无显著性影响，为了节约成本，将溶剂量确定为8倍，提取时间从直观分析中可以看出每次提取2小时为最佳，综合通过统计方差分析及直观分析，最后得出，最佳提取工艺为A 1 B 3 C 3 ，即用8倍量60％乙醇回流提取3次，每次2hr。
因考虑到提取时间太长（共6hr），在大生产中消耗能源及人力，故成本高。为降低成本，节约工时，又进行了次佳提取工艺的验证比较试验。
6．一个处方中四味药（远志10g，酸枣仁（炒）15g，绞股蓝8g，萱草花8g）提取工艺正交验证试验
称取一个处方量方中四味药材共41g，平行3份，根据上述工艺筛选得到的最佳工艺A 1 B 1 C 3 ，加入8倍量60％乙醇回流提取3次，第一次1.5hr，后两次每次1hr，合并滤液，浓缩，置70℃烘箱干燥，得干膏，打粉备用。
6.1 正交验证试验干膏收率及水分测定
对正交验证试验所得干膏及水分的测定，方法按05版《中国药典》一部附录ⅨH水分测定法第一法（烘干法），计算水分含量，结果见表29。
表29   正交验证试验干膏收率及水份测定数据
样品  水分（％）  干膏重（g）   干膏收率（％）
1 6.32 12.0433 29.37
2 7.21 11.7866 28.75
3 7.16 12.0277 29.34
6.2 正交验证试验3份干膏中细叶远志皂苷及总皂苷含量测定
6.2.1 细叶远志皂苷含量测定及转移率计算
分别精密平行称取正交验证试验3份干膏粉末2份，每份450mg于250ml平底烧瓶中，方法同前细叶远志皂苷含量考察方法。
测定：取上配溶液，精密吸取10μl，各重复进样2次，计算。结果如表30所示。
表30   正交验证试验3份干膏中细叶远志皂苷含量测定结果（n=2）
注：远志药材中细叶远志皂苷以干燥品计为2.11％。
6.2.2 总皂苷含量测定及总提取量计算
分别精密平行称取正交验证试验3份干膏粉末各2份，每份45mg于10ml容量瓶中，方法同前总皂苷含量考察的方法，以不加样的甲醇同法制备为随行空白，在544nm下进行测定，测得总皂苷含量以人参皂苷Rb1计。结果下表31。
表31   正交验证试验3份干膏中总皂苷含量测定结果（n=2）
试验号 称样量（mg） 样品吸收值A 干膏重（g） 含量（％）(以人参皂苷Rb1计) 平均含量（％） 总提取量(以人参皂苷Rb1计)（g） 提取相对百分比（％）
1 45.5 0.3806 12.0433 6.96 6.95 0.8370 98.15
    0.3780          
  45.1 0.3776   6.94      
    0.3723          
2 45.9 0.3879 11.7866 7.01 7.05 0.8310 97.44
    0.3852          
  46.8 0.3983   7.09      
    0.3972          
3 46.4 0.3956 12.0277 7.09 7.09 0.8528 100
    0.3932          
  46.2 0.3931   7.09      
    0.3924          
注：提取相对百分比是以总皂苷含量最高为100％计。
6.2.3正交3次验证试验比较
表32   正交验证试验收膏率、细叶远志皂苷及总皂苷含量测定
由表32可见，三次验证试验中收膏率、细叶远志皂苷提取转移率及总皂苷提取量均无差异，RSD％﹤1.2％，故所筛选优化的提取工艺条件稳定可行。
四）除杂工艺的考察
1．评价指标
a.细叶远志皂苷保留率。  b.总皂苷保留率。  c.固形物收率。
2. 各除杂方法的工艺研究
本试验选取了三种物理除杂方法，为滤布过滤、自然静置（12hr、24hr）和离心除杂（2800r/min，15min），以固形物收率和细叶远志皂苷保留率、总皂苷保留率为评价指标。
3. 药材提取液的制备  按处方比例称取远志300g、酸枣仁450g、绞股蓝240g、萱草花240g，共1230g（30个处方量），按一个处方量的四味药合提确定的最佳提取工艺进行提取，提取液过200目筛，滤液70℃减压浓缩至5000ml(1ml药液相当于0.246g处方药材)。
(1) 四味药合提不同目数滤布过滤除杂工艺研究
1. 样品液制备  取提取液800ml，加热后过200、400目滤布，滤液70℃减压浓缩至100ml，置70℃烘箱中干燥，得干膏，打粉备用。
2.固形物收率测定方法  精密吸取浓缩液10ml于已恒重并称重的蒸发皿中，水浴蒸干，105℃烘箱烘3hr至恒重。取出，迅速置干燥器中冷却，称重。重复3次，计算固形物收率为26.56％。
3.细叶远志皂苷含量测定  精密称取干膏粉2份，每份450mg，于250ml平底烧瓶中，方法同前细叶远志皂苷含量考察方法。结果如表33-表36所示。
表33  细叶远志皂苷四味药合提200目滤布过滤除杂考察结果（n=2）
表34   总皂苷四味药合提200目滤布过滤除杂试验的考察结果（n=2）
表35   细叶远志皂苷四味药合提400目滤布过滤除杂考察结果（n=2）
注：细叶远志皂苷保留率（％）：是以200目滤布过滤工艺所得细叶远志皂苷提取转移率为基数，将其他工艺所得细叶远志皂苷提取转移率与其相比所得。
细叶远志皂苷提取转移率及细叶远志皂苷保留率均以一个处方量中含远志药材10g计。
表36   总皂苷四味药合提400目滤布过滤除杂试验的考察结果（n=2）
注：总皂苷保留率（％）：是以200目滤布过滤所得总皂苷提取量作为基数，将其他工艺所得总皂苷提取量与其相比所得。
1.处方中四味药合提滤布除杂的试验总结
如表33-表36所示，通过滤布过滤（200目或400目）对处方中的四味药提取工艺考察，说明采用滤布过滤除杂时，对有效成份指标（细叶远志皂苷保留率及总皂苷保留率）未见明显影响，而除杂也未有较好的效果，因400目滤布过滤固形物收率降低不大，仅为2.2％。
（2） 四味药合提自然静置除杂工艺研究
1. 样品液制备
取提取液2份，每份800ml，分别静置12hr与24hr，取上清液减压浓缩，置70℃烘箱中干燥，得干膏，打粉备用。
2.固形物收率测定方法  精密吸取浓缩液10ml于已恒重并称重的蒸发皿中，水浴蒸干，105℃烘箱烘3hr至恒重。取出，迅速置于干燥器中冷却，称重。重复3次，计算固形物收率为静置12hr的固形物收率为26.59％，静置24hr的固形物收率为26.38％。
3.细叶远志皂苷含量测定  精密称取静置12hr与24hr的干膏粉各2份，每份450mg，于250ml平底烧瓶中，方法同前细叶远志皂苷含量考察方法。结果如表37和表38所示。
表37   细叶远志皂苷四味药合提自然静置除杂考察结果（n=2）
注：细叶远志皂苷保留率（％）：是以200目滤布过滤工艺所得细叶远志皂苷提取转移率为基数，将其他工艺所得细叶远志皂苷提取转移率与其相比所得。
细叶远志皂苷提取转移率及细叶远志皂苷保留率均以一个处方量中含远志药材10g计。
表38   总皂苷四味药合提自然静置除杂试验的考察结果（n=2）
注：总皂苷保留率（％）：是以200目滤布过滤所得总皂苷提取量作为基数，将其他工艺所得总皂苷提取量与其相比所得。
4. 处方中四味药合提自然静置除杂的试验总结
如表37和表38所示，通过自然静置对处方中的四味药提取工艺考察，说明采用自然静置除杂时，对有效成份指标（细叶远志皂苷保留率及总皂苷保留率）未见明显影响，而除杂也未有较好的效果，静置24hr的固形物收率略有降低，仍仅为2.4％。
（3） 四味药合提离心除杂工艺研究
1.样品液制备    
取提取液800ml放入离心机中离心15min(2800r/min)，取上清液70℃减压浓缩，置70℃烘箱中干燥，得干膏，打粉备用。
2. 固形物收率测定方法  
精密吸取浓缩液10ml于已恒重并称重的蒸发皿中，水浴蒸干，105℃烘箱烘3hr至恒重。取出，迅速置干燥器中冷却，称重。重复3次，计算固形物收率为26.81％。
3.细叶远志皂苷含量测定  
精密称取干膏粉2份，每份450mg，于250ml平底烧瓶中，方法同前细叶远志皂苷含量考察方法。结果如表39所示。
表39   细叶远志皂苷四味药合提离心除杂考察结果（n=2）
注：细叶远志皂苷保留率（％）：是以200目滤布过滤工艺所得细叶远志皂苷提取转移率为基数，将其他工艺所得细叶远志皂苷提取转移率与其相比所得。细叶远志皂苷提取转移率及细叶远志皂苷保留率均以一个处方量中含远志药材10g计。
4. 总皂苷含量测定：精密称取干膏粉2份，每份45mg于10ml容量瓶中，方法同前总皂苷含量考察方法，以不加样的甲醇同法制备为随行空白，在544nm下进行测定。结果见表40。
表40   总皂苷四味药合提离心除杂试验的考察结果（n=2）
注：总皂苷保留率（％）：是以200目滤布过滤所得总皂苷提取量作为基数，将其他工艺所得总皂苷提取量与其相比所得。
5.处方中四味药合提离心除杂的试验总结
通过离心工艺对处方中的四味药提取工艺考察，说明采用离心除杂时，对指标性成份指标细叶远志皂苷保留率未见明显的影响，总皂苷保留率有一定的影响，而除杂对固形物收率未有较好的效果，固形物收率未有明显降低。
（4）对提取工艺中的物理除杂研究进行数据分析及小结
通过本次对过400目滤布，静置12hr，静置24hr及离心四种除杂工艺考察试验，结果见表41。
表41   三种除杂工艺考察的结果
除杂方法 固形物收率(％) 细叶远志皂苷保留率(％) 总皂苷保留率(％)
过400目滤布 26.56 93.89 93.75
自然静置（12hr） 26.59 99.98 97.91
自然静置（24hr） 26.38 96.22 96.41
离心除杂 26.81 98.54 92.74
分析：
1.固形物收率    
三种除杂方法所得固形物收率基本一致，均约为26％，与未除杂相比，三种除杂方法对固形物的收率均降低了不到3%,其降低幅度不大，故无太大影响。
2. 细叶远志皂苷保留率    
三种除杂方法对细叶远志皂苷的保留率影响效果基本差别不大，其保留率均在90％以上，以自然静置（12hr）为最高，其次是离心除杂，保留率最低为过400目滤布除杂工艺。
3. 总皂苷保留率    
三种除杂方法对总皂苷的保留率影响效果差别也不大，其保留率均在90％以上，以自然静置（12hr）为最高，其次是自然静置（24hr），最低为离心除杂工艺。
通过数据可知，四种除杂方法对固形物收率，细叶远志皂苷的保留率，总皂苷的保留率三方面均无显著差别，但由于静置用时较长，且在工厂化大生产过程中操作繁琐，另外，离心工艺又浪费能源，总皂苷保留率下降7.3％。故考虑到工业化大生产中的可操作性及实际性，并从节约成本及时间等方面综合考虑，选用过400目滤布作为最佳除杂工艺，该除杂方法简便，提取液易过滤，所以选择最佳提取工艺所得提取液趁热过400目滤布进行除杂。
五） 干燥工艺的研究
对于本复方研究中的药物，由于其有效成分的多样性，某些成分易挥发或分解，会在干燥时由于高温破坏、损失等而导致药效的降低等方面来综合考虑，对其干燥方式进行考察，以确定工艺中使用合理的干燥温度，确保药效稳定的同时，还要综合考虑干燥耗时而延长工艺流程及工艺设备复杂性等。目前比较常用的干燥方式有常压干燥、减压干燥、喷雾干燥及微波干燥等，根据现有条件选择了常压60℃、70℃、80℃、减压60℃、70℃、80℃与微波真空干燥作为干燥工艺的考察方法。
1． 评价指标
a.细叶远志皂苷含量   b. 总皂苷含量   c. 水分
2. 试验方法
分别以四味药合提确定的最佳提取工艺进行提取50个处方量药材，提取液过400目滤布，减压浓缩至相对密度1.2（20℃时测），各取一个处方量浓缩液分别置常压60℃、70℃、80℃和减压60℃、70℃、80℃的烘箱中进行干燥，另取42个处方量浓缩液于微波真空干燥机中干燥，得干膏，打粉备用。结果如表42所示。
表42   四味药提取工艺中不同干燥方法的试验结果
样品 干膏重g 水分％ 干膏收率％ 干燥时间hr 干膏粉末性状
常压60℃ 12.033 7.59 29.35 26.5 浅黄
常压70℃ 12.0536 7.29 29.40 24 浅黄
常压80℃ 12.0452 4.46 29.38 24 深黄（略有灰褐色）
减压60℃ 12.0727 8.36 29.45 21 黄色
减压70℃ 12.0636 10.0 29.42 21 棕黄色
减压80℃ 12.0574 6.608 29.41 21 棕黄色
微波真空干燥 12.0211 9.137 29.32 3.5 黄色，疏松
由表42可见：
2.1各干燥工艺下所得干膏水份差异较大，其中常压80℃干燥的干膏水份最低，减压70℃干燥的干膏水份最高（打粉时湿度较大所致），约为常压80℃干燥的2倍。水份含量不同的原因是a.干燥时间的不同，b.温度的影响。
2.2 四味药提取工艺经不同干燥方法后所得干膏收率差异不显著。
2.3 各干燥工艺下所得干膏的颜色也是有区别的。其中常压80℃的干膏颜色最深，出现灰褐色小块（热水溶解时有不溶物）。
3．不同干燥工艺下细叶远志皂苷的含量测定
表43   不同干燥工艺下细叶远志皂苷含量测定结果（n=2）
注：含量相对百分比是以减压70℃所得干膏粉中细叶远志皂苷含量为100％，其它含量与其相比所得。
结果：如表43所示，不同干燥工艺对细叶远志皂苷含量影响效果差异较大，其中细叶远志皂苷含量（除去水分影响）高低分别为：减压70℃﹥微波真空干燥﹥减压80℃﹥常压70℃﹥常压60℃﹥减压60℃﹥常压80℃，减压70℃下干膏中细叶远志皂苷含量为常压80℃下干膏中细叶远志皂苷含量的1.5倍。
4．不同干燥工艺下总皂苷的含量测定
表44   不同干燥工艺下干膏中总皂苷含量测定结果（n=2）
结果：如表44所示，不同干燥工艺对总皂苷含量影响效果差异不显著，除去水分后总皂苷含量为：减压70℃﹥减压60℃﹥微波真空干燥﹥减压80℃﹥常压80℃﹥常压60℃﹥常压70℃。减压70℃的总皂苷含量比常压70℃高1.18倍。
5．干燥工艺小结
5.1干燥时间   通过数据分析，干燥时间：微波真空干燥﹤减压60℃、70℃、80℃﹤常压80℃﹤常压70℃﹤常压60℃,其中微波真空干燥时药材为1.722kg（42个处方量）药材提取的浓缩液，但干燥时间仅3.5h（水分较大，原因为药材浓缩液较少，为了避免干燥过程中发生焦化，故未干燥透所致）。由于浸膏是否烘干由人为来判断，主观性太大，故干燥时间只能作为辅助参考指标,还需将水分与干燥时间结合起来分析，得出最佳结果。 
5.2 水分    减压70℃>微波真空干燥>减压60℃>常压60℃>常压70℃>减压80℃>常压80℃。常压80℃干膏水分是减压70℃干膏水分的一半。其余干膏水分基本一致。
5.3 干膏收率    
不同干燥方法对干膏收率影响基本不大。
5.4 细叶远志皂苷含量   
不同干燥工艺对细叶远志皂苷含量影响效果差异较大，其中细叶远志皂苷含量（除去水分影响）高低分别为：减压70℃﹥微波真空干燥﹥减压80℃﹥常压70℃﹥常压60℃﹥减压60℃﹥常压80℃，减压70℃下干膏中细叶远志皂苷含量为常压80℃下干膏中细叶远志皂苷含量的1.5倍。
5.5 总皂苷含量    
除去水份后总皂苷含量为：减压70℃﹥减压60℃﹥微波真空干燥﹥减压80℃﹥常压80℃﹥常压60℃﹥常压70℃。减压70℃的总皂苷含量比常压70℃高1.18倍。由数据可知，不同干燥方法对总皂苷提取量影响效果不显著。
结论： 综合以上数据，减压70℃干燥指标性成分含量最高，干燥时间较短；真空微波干燥指标性成分含量居第二，干燥时间最短（仅3.5hr），二者均有干燥时间短，对有限成分影响小的优点，均可作为本提取工艺的干燥条件。
下面通过贵阳中医学院第一附属医院门诊部失眠专科采用本发明胶囊剂治疗失眠的35 例临床总结报告来进一步阐述本发明的有益效果。
一般临床资料：
随机选择的35例失眠患者病例均来源于贵阳中医学院第一附属医院门诊失眠专科。患者经常失眠多梦，睡眠时间短，2—3 小时即醒，醒后难以入睡，年龄21～62 岁,平均40岁。心脾两虚型8例，心肾不交型7例，心火亢盛型6 例，阴虚火旺型5 例，心胆气虚型4例，肝郁气滞型5例。白天均伴有精神不振、面色苍白、头痛、心悸、健忘、胸中烦热、腰酸膝软、舌质红、脉细弱或细数为主要症状，病程以60天～2年为研究对象。
2.  中医诊断标准：
诊断标准参照国家中医药管理局制定的《中医病证诊断疗效标准》中虚证、实证所致失眠的诊断标准拟定。
凡症见轻者入寐困难或寐而易醒，醒后不寐，重者彻夜难眠，并伴有头痛头昏，心悸健忘，多梦等症为主要临床表现者。
3.  药物与治疗方法：
3．1　药物: 
本发明胶囊剂。       
  治疗方法:  
所有患者接受治疗前3天停止服用任何具有安眠作用的药物，而服用本发明胶囊剂，每日1次，临睡前1小时服用5粒；每天连续服用，7天为一个疗程。
4.  疗效判定标准：
诊断标准按《中药新药临床研究指导原则》中“中药新药治疗失眠的临床研究指导原则”的标准拟定。
临床痊愈：顺利入睡，睡眠时间恢复正常，或睡眠时间在6hr以上，睡眠深沉，其临床症状基本消失。显效：睡眠明显好转，睡眠时间增加3hr以上，睡眠深度增加，临床症状有所改善。有效：症状减轻，睡眠时间较前增加不足3hr。无效：治疗后失眠无明显改善或反加重者，临床症状也无明显改善。
5. 治疗结果：
35例患者中临床痊愈为8例（22.9% ），显效为18例（51.4%），有效6例（17.1%），2例无效（5.7%），1例中途失去联络(2.9%) ,总有效率达91.4 %。决大多数患者一般治疗1～2 个疗程后获效，均可明显改善睡眠。治疗过程中未见有任何刺激作用及毒副反应。
下面结合实施例对本发明作进一步的说明。
实施例1：
治疗睡眠障碍的中药制剂（片剂），该中药制剂按重量份由远志1.0Kg，酸枣仁（炒）1.5Kg，绞股蓝0.8Kg，徐长卿1.0Kg，萱草花0.8Kg和蜘蛛香0.6Kg制成5500片。口服，一日一次，临睡前1小时服用，一次5片。
前述治疗睡眠障碍的中药制剂（片剂）的方法：包括以下步骤：
A. 按上述配方称取远志、酸枣仁（炒）、绞股蓝、萱草花四味药材，用60％乙醇加热提取3次，得提取液，为A品；所述的用60％乙醇提取3次，具体为，先用9.5倍量的60%乙醇提取一次，时间为1.5小时，然后用8倍量60％乙醇提取两次，每次时间为1小时，提取时以60℃加热；
B. 将A品趁热过400目滤布，减压浓缩回收乙醇后，得清膏为B品；所述的清膏，在20℃时测得的相对密度为1.2；
C. 将B品置于减压70℃烘箱中或微波真空干燥机中干燥，得干膏，粉碎后过五号筛，得干膏粉为C品；
D. 按上述配方取徐长卿、蜘蛛香二味药材，先洁净、干燥、灭菌，然后粉碎过六号筛，得粉末为D品；
E. 将C品与D品混合均匀，得E品；
F. 将F品加工成临床用的中药片剂。
实施例2：
治疗睡眠障碍的中药制剂（胶囊剂），该中药制剂按重量份由远志0.9Kg，酸枣仁（炒）1.4Kg，绞股蓝0.7Kg，徐长卿0.9Kg，萱草花0.7Kg和蜘蛛香0.5Kg制成5000粒。口服，一日一次，临睡前1小时服用，一次5粒。
前述治疗睡眠障碍的中药制剂（胶囊剂）的方法：包括以下步骤：
A. 按上述配方称取远志、酸枣仁（炒）、绞股蓝、萱草花四味药材，用60％乙醇加热提取3次，得提取液，为A品；所述的用60％乙醇提取3次，具体为，先用9.5倍量的60%乙醇提取一次，时间为1.5小时，然后用8倍量60％乙醇提取两次，每次时间为1小时，提取时以90℃加热；
B. 将A品趁热过400目滤布，减压浓缩回收乙醇后，得清膏为B品；所述的清膏，在20℃时测得的相对密度为1.2；
C. 将B品置于减压70℃烘箱中或微波真空干燥机中干燥，得干膏，粉碎后过五号筛，得干膏粉为C品；
D. 按上述配方取徐长卿、蜘蛛香二味药材，先洁净、干燥、灭菌，然后粉碎过六号筛，得粉末为D品；
E. 将C品与D品混合均匀，得E品；
F. 将F品加工成临床用的中药胶囊剂。
实施例3：
治疗睡眠障碍的中药制剂（软胶囊），该中药制剂按重量份由远志0.8Kg，酸枣仁（炒）1.3Kg，绞股蓝0.6Kg，徐长卿0.8Kg，萱草花0.6Kg和蜘蛛香0.4Kg制成5000粒。口服，一日一次，临睡前1小时服用，一次5粒。
前述治疗睡眠障碍的中药制剂（软胶囊）的方法：包括以下步骤：
A. 按上述配方称取远志、酸枣仁（炒）、绞股蓝、萱草花四味药材，用60％乙醇加热提取3次，得提取液，为A品；所述的用60％乙醇提取3次，具体为，先用9.5倍量的60%乙醇提取一次，时间为1.5小时，然后用8倍量60％乙醇提取两次，每次时间为1小时，提取时以60℃加热；
B. 将A品趁热过400目滤布，减压浓缩回收乙醇后，得清膏为B品；所述的清膏，在20℃时测得的相对密度为1.2；
C. 将B品置于减压70℃烘箱中或微波真空干燥机中干燥，得干膏，粉碎后过五号筛，得干膏粉为C品；
D. 按上述配方取徐长卿、蜘蛛香二味药材，先洁净、干燥、灭菌，然后粉碎过六号筛，得粉末为D品；
E. 将C品与D品混合均匀，得E品；
F. 将F品加工成临床用的中药软胶囊。
实施例4：
治疗睡眠障碍的中药制剂（散剂），该中药制剂按重量份由远志1.1Kg，酸枣仁（炒）1.6Kg，绞股蓝0.9Kg，徐长卿1.1Kg，萱草花0.9Kg和蜘蛛香0.7Kg制成3000g散剂。1.35g散剂为一袋。口服，一日一次，临睡前1小时服用，一次1袋。
前述治疗睡眠障碍的中药制剂（散剂）的方法：包括以下步骤：
A. 按上述配方称取远志、酸枣仁（炒）、绞股蓝、萱草花四味药材，用60％乙醇加热提取3次，得提取液，为A品；所述的用60％乙醇提取3次，具体为，先用9.5倍量的60%乙醇提取一次，时间为1.5小时，然后用8倍量60％乙醇提取两次，每次时间为1小时，提取时以90℃加热；
B. 将A品趁热过400目滤布，减压浓缩回收乙醇后，得清膏为B品；所述的清膏，在20℃时测得的相对密度为1.2；
C. 将B品置于减压70℃烘箱中或微波真空干燥机中干燥，得干膏，粉碎后过五号筛，得干膏粉为C品；
D. 按上述配方取徐长卿、蜘蛛香二味药材，先洁净、干燥、灭菌，然后粉碎过六号筛，得粉末为D品；
E. 将C品与D品混合均匀，得E品；
F. 将F品加工成临床用的中药散剂。
实施例5：
治疗睡眠障碍的中药制剂（丸剂），该中药制剂按重量份由远志1.2Kg，酸枣仁（炒）1.7Kg，绞股蓝1.0Kg，徐长卿1.2Kg，萱草花1.0Kg和蜘蛛香0.8Kg制成6500枚。口服，一日一次，临睡前1小时服用，一次5枚。
前述治疗睡眠障碍的中药制剂（丸剂）的方法：包括以下步骤：
A. 按上述配方称取远志、酸枣仁（炒）、绞股蓝、萱草花四味药材，用60％乙醇加热提取3次，得提取液，为A品；所述的用60％乙醇提取3次，具体为，先用9.5倍量的60%乙醇提取一次，时间为1.5小时，然后用8倍量60％乙醇提取两次，每次时间为1小时，提取时以75℃加热；
B. 将A品趁热过400目滤布，减压浓缩回收乙醇后，得清膏为B品；所述的清膏，在20℃时测得的相对密度为1.2；
C. 将B品置于减压70℃烘箱中或微波真空干燥机中干燥，得干膏，粉碎后过五号筛，得干膏粉为C品；
D. 按上述配方取徐长卿、蜘蛛香二味药材，先洁净、干燥、灭菌，然后粉碎过六号筛，得粉末为D品；
E. 将C品与D品混合均匀，得E品；
F. 将F品加工成临床用的中药丸剂。
实施例6：
治疗睡眠障碍的中药制剂（口服液），该中药制剂按重量份由远志1.0Kg，酸枣仁（炒）1.5Kg，绞股蓝0.8Kg，徐长卿1.0Kg，萱草花0.8Kg和蜘蛛香0.6Kg制成1200瓶。口服，一日一次，临睡前1小时服用，一次1瓶。
前述治疗睡眠障碍的中药制剂（口服液）的方法：包括以下步骤：
A. 按上述配方称取远志、酸枣仁（炒）、绞股蓝、萱草花四味药材，用60％乙醇加热提取3次，得提取液，为A品；所述的用60％乙醇提取3次，具体为，先用9.5倍量的60%乙醇提取一次，时间为1.5小时，然后用8倍量60％乙醇提取两次，每次时间为1小时，提取时以85℃加热；
B. 将A品趁热过400目滤布，减压浓缩回收乙醇后，得清膏为B品；所述的清膏，在20℃时测得的相对密度为1.2；
C. 将B品置于减压70℃烘箱中或微波真空干燥机中干燥，得干膏，粉碎后过五号筛，得干膏粉为C品；
D. 按上述配方取徐长卿、蜘蛛香二味药材，先洁净、干燥、灭菌，然后粉碎过六号筛，得粉末为D品；
E. 将C品与D品混合均匀，得E品；
F. 将F品加工成临床用的中药口服液。
实施例7
治疗睡眠障碍的中药制剂（薄膜包衣片），该中药制剂按重量份由远志1.0Kg，酸枣仁（炒）1.5Kg，绞股蓝0.8Kg，徐长卿1.0Kg，萱草花0.8Kg和蜘蛛香0.6Kg制成5500片。口服，一日一次，临睡前1小时服用，一次5片。
前述治疗睡眠障碍的中药制剂（薄膜包衣片）的方法：包括以下步骤：
A. 按上述配方称取远志、酸枣仁（炒）、绞股蓝、萱草花四味药材，用60％乙醇加热提取3次，得提取液，为A品；所述的用60％乙醇提取3次，具体为，先用9.5倍量的60%乙醇提取一次，时间为1.5小时，然后用8倍量60％乙醇提取两次，每次时间为1小时，提取时以60℃加热；
B. 将A品趁热过400目滤布，减压浓缩回收乙醇后，得清膏为B品；所述的清膏，在20℃时测得的相对密度为1.2；
C. 将B品置于减压70℃烘箱中或微波真空干燥机中干燥，得干膏，粉碎后过五号筛，得干膏粉为C品；
D. 按上述配方取徐长卿、蜘蛛香二味药材，先洁净、干燥、灭菌，然后粉碎过六号筛，得粉末为D品；
E. 将C品与D品混合均匀，得E品；
F. 将F品加工成临床用的薄膜包衣片。

Claims (8)

1.治疗睡眠障碍的中药制剂，其特征在于：按重量份计算,由以下方法制备而成:
A.称取远志8-12份、炒酸枣仁13-17份、绞股蓝6-10份、萱草花6-10份四味药材，用60％乙醇加热提取3次，得提取液，为A品；
B.将A品趁热过400目滤布，减压浓缩回收乙醇后，得清膏为B品；
C.将B品置于减压70℃烘箱中或微波真空干燥机中干燥，得干膏，粉碎后过五号筛，得干膏粉为C品；
D.取徐长卿8-12份、蜘蛛香4-8份二味药材，先洁净、干燥、灭菌，然后粉碎过六号筛，得粉末为D品；
E.将C品与D品混合均匀，得E品；
F.将E品加工成临床用的中药制剂。
2.根据权利要求1所述的治疗睡眠障碍的中药制剂，其特征在于：按重量份计算,由以下方法制备而成:
A.称取远志9-11份、炒酸枣仁14-16份、绞股蓝7-9份、萱草花7-9份四味药材，用60％乙醇加热提取3次，得提取液，为A品；
B.将A品趁热过400目滤布，减压浓缩回收乙醇后，得清膏为B品；
C.将B品置于减压70℃烘箱中或微波真空干燥机中干燥，得干膏，粉碎后过五号筛，得干膏粉为C品；
D.取徐长卿9-11份、蜘蛛香5-7份二味药材，先洁净、干燥、灭菌，然后粉碎过六号筛，得粉末为D品；
E.将C品与D品混合均匀，得E品；
F.将E品加工成临床用的中药制剂。
3.根据权利要求1所述的治疗睡眠障碍的中药制剂，其特征在于：按重量份计算,由以下方法制备而成:
A.称取远志10份、炒酸枣仁15份、绞股蓝8份、萱草花8份四味药材，用60％乙醇加热提取3次，得提取液，为A品；
B.将A品趁热过400目滤布，减压浓缩回收乙醇后，得清膏为B品；
C.将B品置于减压70℃烘箱中或微波真空干燥机中干燥，得干膏，粉碎后过五号筛，得干膏粉为C品；
D.取徐长卿10份、蜘蛛香6份二味药材，先洁净、干燥、灭菌，然后粉碎过六号筛，得粉末为D品；
E.将C品与D品混合均匀，得E品；
F.将E品加工成临床用的中药制剂。
4.根据权利要求1、2或3所述的治疗睡眠障碍的中药制剂，其特征在于：所述的中药制剂为任意一种临床上用的内服制剂。
5.根据权利要求4所述的治疗睡眠障碍的中药制剂，其特征在于：所述的内服药剂为，散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、微囊剂、丸剂、滴丸、口服液、糖浆剂或分散剂。
6.制备权利要求1至5任一权利要求所述治疗睡眠障碍的中药制剂的方法，其特征在于：包括以下步骤：
A.按上述配方称取远志、炒酸枣仁、绞股蓝、萱草花四味药材，用60％乙醇加热提取3次，得提取液，为A品；
B.将A品趁热过400目滤布，减压浓缩回收乙醇后，得清膏为B品；
C.将B品置于减压70℃烘箱中或微波真空干燥机中干燥，得干膏，粉碎后过五号筛，得干膏粉为C品；
D.按上述配方取徐长卿、蜘蛛香二味药材，先洁净、干燥、灭菌，然后粉碎过六号筛，得粉末为D品；
E.将C品与D品混合均匀，得E品；
F.将E品加工成临床用的中药制剂。
7.根据权利要求6所述的制备治疗睡眠障碍的中药制剂的方法，其特征在于：步骤A中，所述的用60％乙醇提取3次，具体为，先用9.5倍量的60%乙醇提取一次，时间为1.5小时，然后用8倍量60％乙醇提取两次，每次时间为1小时，提取时以60℃-90℃加热。
8.根据权利要求7所述的制备治疗睡眠障碍的中药制剂的方法，其特征在于：步骤B中，所述的清膏，在20℃时测得的相对密度为1.2。
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