CN102973592A

CN102973592A - 硫酸葡聚糖在制备治疗糖尿病药物中的应用

Info

Publication number: CN102973592A
Application number: CN2012104860277A
Authority: CN
Inventors: 董磊
Original assignee: Hefei Botai Pharmaceutical Biotechnology Development Co Ltd
Current assignee: Hefei Botai Pharmaceutical Biotechnology Development Co Ltd
Priority date: 2012-11-26
Filing date: 2012-11-26
Publication date: 2013-03-20

Abstract

本发明公开了硫酸葡聚糖在制备治疗糖尿病药物中的新的应用，该药物能够保护机体免受肥胖等原因产生的活化巨噬细胞引起的慢性炎症导致的胰岛素抵抗，从而抑制糖尿病的发作或症状加重。硫酸葡聚糖在高糖高脂诱导的动物模型中取得很好的疗效，同时，本发明所使用的药物易于获取，价格低廉，性质稳定，便于保存和运输，具有广阔的应用前景。

Description

硫酸葡聚糖在制备治疗糖尿病药物中的应用

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及硫酸葡聚糖在制备治疗糖尿病药物中的应用。

背景技术

糖尿病是严重影响人民生命健康的疾病。近年来随着人们生活方式，饮食习惯的变化，糖尿病发病率有不断上升，发病年龄有不断年轻化的趋势。糖尿病总体上分为胰岛素依赖型（I型）和非胰岛素依赖型（II型）两大类，糖尿病患者中，90%以上是II型糖尿病患者。

硫酸葡聚糖Dextran sulfate，分子量2KD~600KD不等，其是葡聚糖的聚阴离子衍生物，由葡聚糖和氯磺酸的酯化反应形成，目前，其主要用于降血脂和抗动脉粥样硬化药。

最近的基础研究证明，伴随肥胖等生理因素产生的脂质过氧化会导致长期，低水平的慢性炎症，其中分布于脂肪组织中的活化巨噬细胞可以通过长期表达某些炎症因子导致显著的胰岛素抵抗，使机体对胰岛素不敏感，继而引发糖尿病症状。因此针对这一发病机制，可以开发有针对性的治疗手段和治疗药物。

发明内容

本发明的目的即在于提供一种硫酸葡聚糖在制备治疗糖尿病药物中的应用，本发明所述的硫酸葡聚糖在所涉及的实验中能够显示出强烈抑制巨噬细胞活化的性质，抑制相关炎症因子的表达，从而可以缓解II型糖尿病发病过程中的胰岛素抵抗，减轻糖尿病症状。因此，原理上硫酸葡聚糖可以发展成为一种治疗糖尿病的药物。

本发明的硫酸葡聚糖在制备治疗糖尿病药物中的应用，其中，所述硫酸葡聚糖为α-葡聚糖，分子量为3.6 kD ~ 300 kD。

所述硫酸葡聚糖可以为市售产品，也可以使用商业上可得的葡聚糖硫酸酯化修饰来合成，如可通过氯磺酸-吡啶法修饰不同分子量大小的葡聚糖获得，制备方法如：将吡啶加入附有冷凝管和搅拌装置的三颈瓶中，置于冰盐浴，逐滴加入氯磺酸，10 min滴加完毕，再加入α-葡聚糖，立即将其移入预热的油浴中于400-1000摄氏度恒温反应。反应完毕后，将反应液倾入冰水中。以10 mol/LNaOH调至pH中性。以去离子水透析48 h，透析液浓缩醇沉、复溶、冻干，即得硫酸葡聚糖（Richetts CR. Preparation of dextran sulphate and tracer experiments in the rabbit. Biochem J. 1954; 58:523. 广东利民制药厂. 右旋糖酐硫酸酯：吡啶-氯磺酸酯化法简介. 医药工业，1975；3：1。）。控制反应温度，可控制葡聚糖的修饰率，本发明中不同修饰率与对应反应温度对照表如下：

分子量与修饰率	反应温度
		3.6 KD 硫酸葡聚糖，5%修饰	400 摄氏度
3.6 KD硫酸葡聚糖，27%修饰	690 摄氏度
		40 KD 硫酸葡聚糖，7%修饰	570 摄氏度
40 KD 硫酸葡聚糖，22%修饰	750 摄氏度
		70 KD硫酸葡聚糖，8%修饰	630 摄氏度
70 KD 硫酸葡聚糖，24% 修饰	860 摄氏度
		70 KD硫酸葡聚糖，43% 修饰	970 摄氏度
110 KD 硫酸葡聚糖，6% 修饰	790 摄氏度
		110 KD 硫酸葡聚糖，18% 修饰	940 摄氏度
300 KD 硫酸葡聚糖，4% 修饰	880 摄氏度
		300 KD硫酸葡聚糖，14% 修饰	1000 摄氏度

采用本发明的硫酸葡聚糖当然也可以为硫酸葡聚糖的可溶盐如硫酸葡聚糖钠盐与多种药学上可以接受的载体相结合，通过如口腔、静脉、鼻腔、直肠或其他任何可以输送有效剂量的活性物质的给药方式，可以制备成各种液体制剂如注射剂、口服液制剂等，也可以制备成各种有效且易于给药的固体制剂如胶囊剂、栓剂等。其中，用于注射或口服用的液体制剂，其所需的载体可以为无菌水、无菌盐水或者水溶性有机载体如环糊精、玉米油、橄榄油、油酸乙酯、二醇类等医学上可接受的载体；固体给药制剂在制备中可加入固体制剂常用的辅料如赋形剂葡萄糖、乳糖、纤维素等，还可加入润滑剂聚乙二醇、硬脂酸镁等，以及粘结剂、矫味剂等固体制剂所需的辅料成分，再通过混合、制粒等工序成型。上述这些制剂中的活性物质的有效量是能使糖尿病症状明显降低的量，具有常规技术的研究人员将能够确定本项发明所提供的试剂的最有效的给药剂量和时间考虑给药方式，药物代谢，以及其他一些药代动力学参数例如药物分布，清除率等。本发明所提供的试剂还可以和其他试剂例如常规降糖药治疗药物联合给药，以使糖尿病发病程度有效降低。

本发明通过体内对高糖高脂诱导的糖尿病模型进行例证。此处的动物包括但是不限于：小鼠，大鼠，驯养动物包括但是不限于猫，狗，以及其它一些动物例如但是不限于牛，羊，猪，马，灵长类动物例如但是不限于猴子和人。

本发明提出了硫酸葡聚糖在制备治疗糖尿病药物中的新的应用，该药物能够保护机体免受肥胖等原因产生的活化巨噬细胞引起的慢性炎症导致的胰岛素抵抗，从而抑制糖尿病的发作或症状加重。硫酸葡聚糖在高糖高脂诱导的动物模型中取得很好的疗效，同时，本发明所使用的药物易于获取，价格低廉，性质稳定，便于保存和运输，具有广阔的应用前景。

具体实施方式

动物实验例

（硫酸葡聚糖注射溶液制剂对高糖高脂诱导的糖尿病模型的治疗）

将不同分子量和不同修饰率的硫酸葡聚糖用生理盐水溶解配成2.0mg/ml注射液备用，用10 mol/L NaOH溶液调节pH值至7.0。取雌性新西兰大白兔78只，体重1.8 kg-2.0 kg，将动物随机分成13组，每组6只，即正常对照组，糖尿病模型组、分别用不同分子量和修饰率的硫酸葡聚糖治疗的治疗组。正常对照组利用常用饲料（兔用标准常用饲料，Standard Laboratory Chow for Rabbits，Shanghai Shengwang Experimental Animal Ranch （P.R.China）公司）进行饲养。模型组动物和各治疗实验组供给在上述兔用标准实验饲料中含有10%的猪油和37%的蔗糖的高脂糖饲料，腹腔注射硫酸葡聚糖进行治疗，不给药治疗的模型组注射等体积的生理盐水。在实验开始后（0周后）、4周后、8周后、12周后、16周后、20周后及24周后，使各组兔绝食一夜，从耳动脉进行采血，使用市售的利用酶法的葡萄糖测定试剂盒（Glucose Determination Kit（Glucose oxidase-peroxidase method），Shanghai Rongsheng Biotech Inc.（P.R.China）公司制造），测定血浆中的葡萄糖浓度（mg/dl），实验结果如表1所示：

表1：硫酸葡聚糖的药效测定

组别	0周	4周	8周	12周	16周	20周	24周
								正常组	54	61	48	72	58	67	55
模型组	51	109	118	122	125	134	134
								3.6 KD 硫酸葡聚糖，5%修饰	57	81	82	78	74	68*	72*
3.6 KD硫酸葡聚糖，27%修饰	57	78	73	71	74	65*	61*
								40 KD 硫酸葡聚糖，7%修饰	62	90	85	89	83	78*	81*
40 KD 硫酸葡聚糖，22%修饰	50	98	91	88	86	78*	87*
								70 KD硫酸葡聚糖，8%修饰	63	77	88	67	72	81*	62*
70 KD 硫酸葡聚糖，24%修饰	41	87	73	66	74	72*	63*
								70 KD硫酸葡聚糖，43%修饰	59	61	85	71	73	63*	72*
110 KD 硫酸葡聚糖，6%修饰	47	78	83	74	66	70*	72*
								110 KD 硫酸葡聚糖，18%修饰	56	68	89	92	93	89*	83*
300 KD 硫酸葡聚糖，4%修饰	72	98	101	94	81	93*	92*
								300 KD硫酸葡聚糖，14%修饰	67	78	89	86	86	84*	85*

Claims

1.硫酸葡聚糖在制备治疗糖尿病药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述硫酸葡聚糖分子量为3.6 kD ~ 300 kD。