CN102970998B - 含有彩色豆提取物的组合物 - Google Patents

含有彩色豆提取物的组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN102970998B
CN102970998B CN201180034969.5A CN201180034969A CN102970998B CN 102970998 B CN102970998 B CN 102970998B CN 201180034969 A CN201180034969 A CN 201180034969A CN 102970998 B CN102970998 B CN 102970998B
Authority
CN
China
Prior art keywords
extract
ethanol
resin
composition
cut
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201180034969.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102970998A (zh
Inventor
金镇官
金采旭
郑然守
尹晙源
林庆珉
朱泳协
朴永镐
申贤贞
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Amorepacific Corp
Original Assignee
Amorepacific Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Amorepacific Corp filed Critical Amorepacific Corp
Publication of CN102970998A publication Critical patent/CN102970998A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102970998B publication Critical patent/CN102970998B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

本发明涉及包含彩色豆提取物的馏分的抗血栓组合物。所述抗血栓组合物对于治疗循环***疾病，包括由血栓形成引起的心脑血管疾病、脑血管疾病、动脉硬化、高血压和糖尿病非常有效。

Description

含有彩色豆提取物的组合物
技术领域
本发明涉及抗血栓组合物，该组合物含有作为活性成分的彩色豆提取物的馏分。
背景技术
近年来，由于饮食生活方式的改以及内在和外在压力的增加，在中年和老年人群中已在增加被称为成人疾病的循环***疾病的发病，并且该增长已成为一个严重的问题。根据韩国国家***在2008年提供的统计数据，除了癌症之外，包括动脉硬化、脑出血、中风和脑梗塞的脑血管疾病和心脏病成为死亡原因中首要或第二大原因。这些疾病的最主要的原因是血栓形成，血栓形成是由于血小板过度聚集而造成的病理现象。当血管破损时，血小板被如胶原、凝血酶、二磷酸腺苷（ADP）等的激动剂激活，导致血小板粘附、释放和粘集。该过程不仅在止血中，而且在包括血栓形成的循环***疾病的发病中发挥着重要作用。
已知，冠状动脉疾病属于循环***疾病，它是在全球范围内最常见的导致死亡的一种疾病。具体地，急性冠脉综合症是一种冠状动脉疾病，它是导致死亡的直接原因。急性冠脉综合征可分为不稳定心绞痛、非ST段抬高型心肌梗死（NSTE；非Q波MI）以及ST段抬高型心肌梗死（STE MI; Q-波 MI），因为前两个的治疗和预测互为相似，因此将前两个统称为NSTE ACS（非ST段抬高型急性冠脉综合征）。在慢性稳定型心绞痛中，局部贫血（ischemia）是由动脉硬化引起的冠状动脉有效直径的减少引起的，但是急性冠脉综合征具有与所述慢性稳定型心绞痛不同的病理。当由动脉粥样硬化斑块破裂或侵蚀引起的冠脉内急性血栓形成导致的血流在迅速减少或阻塞时，发生急性冠脉综合征。
更具体地，在急性冠脉综合征中，血管内血栓形成的过程与发生创伤性血管损伤之后的止血过程相同。换言之，当发生脆弱的动脉粥样硬化斑块破裂或侵蚀时，位于内皮细胞下面的***将暴露于血液中。血液中的血小板会粘附到被暴露的***上（血小板粘附），所述血小板经机械和生化刺激被激活，从而释出TxA2（凝血恶烷A2），ADP（二磷酸腺苷），肾上腺素等（血小板激活）。这些分泌物质会激活血小板表面的GP IIb/IIIa受体，且所述被激活的GP IIb/IIIa受体使血小板通过纤维蛋白原粘集在一起（血小板粘集）。血小板可通过多种途径所激活，但是最终由纤维蛋白原通过GP IIb/IIIa受体粘集在一起，因此该过程为血小板粘集的最终共同途径。起初产生的血栓是富集在血小板上的“白血栓”，相当于止血过程中的初级止血。
产生的PRT（富血小板血栓）是在动脉粥样硬化斑块的受伤部分的血管壁上产生的，而且通常不会完全堵塞冠状动脉（附壁血栓）。这在临床上与NTSE ACS相对应。在PRT（富血小板血栓）上，通过凝血与连锁反应的激活产生凝血酶（IIa因子）。凝血酶能将纤维蛋白原激活成为纤维蛋白，当形成含有血细胞，如红细胞的血栓时，被激活的纤维蛋白形成网状组织。所形成的血栓为“红血栓”，其与止血过程中的二级止血相对应。血栓形成/溶栓溶解平衡继续朝着生成血栓形成的方向进行，进而血管被完全堵塞，导致STE MI。
抗血栓形成药物可分为在初级止血中用于抑制血小板的抗血小板剂，以及在二级止血中用于抑制凝血的抗凝血剂。抗血小板剂包括阿司匹林，其能抑制TxA2的产生；氯吡格雷（clopidogrel）和噻氯匹定（ticlopidine），为ADP受体阻断剂；阿昔单抗（abciximab），为GP IIb/IIIa受体阻断剂，等类似物。此外，已知茶碱（theopylline）、吗斯酮胺（molsidomine）、戊酸丙胺（verapamil）、硝苯吡啶（nifedipine）、***等能促进cAMP和cGMP，所述cAMP和cGMP能抑制Ca2+被补充。抗凝血剂包括能激活抗凝血酶III来降低凝血酶的肝磷脂、作为直接凝血酶抑制剂（DTI）的水蛭素、作为维生素K对抗剂的华法令阻凝剂（warfarin）等。
然而，上述药物可能产生各种副作用，包括体内过度的抑制止血、不育以及消化***疾病。因此，需要开发一种制剂，其可明显减低抗血栓形成药物的副作用，同时具有安全性。
发明内容
技术问题
本发明的一方面要提供具有抗血栓效果的组合物。
本发明的另一方面要提供具有抗血栓效果的药物组合物或健康食品组合物。
技术方案
本发明的一方面提供一种组合物，所述组合物含有作为活性成分的彩色豆提取物的馏分，所述彩色豆提取物是通过水、C1-C5醇或它们的混合物提取而得。
有益效果
根据本发明一方面的组合物具有良好的抗血栓效果，包含无副作用的天然物质，并可广泛用于药物和健康食品领域。
附图说明
图1展示了通过HP-20树脂分馏蚕豆的20%乙醇提取物所得的50%乙醇馏分的浓度对血小板聚集的抑制效果。
具体实施方式
以前对豆类进行的研究在于从豆类中分离并提纯具有药理学活性的成分，但对豆类本身的医学用途的研究仍是不足的。此外，通过采用高浓度有机溶剂的提取方法提取豆类，该提取方法为常用于提取天然物质的提取方法。
除了已识别出的成分，豆提取物含有几种未知成分，这些成分中的部分将展现出对人体有益的药理效果。此外，豆类的有用成分也可能无法通过使用高浓度有机溶剂的提取方法所提取。与通常用于天然物质和药草的提取方法不同，本发明人已利用水或低浓度有机溶剂作为提取溶剂，从豆类中取得了提取物，并发现通过用树脂分馏所获得的豆提取物而得到的馏分表现出强有力的抗血栓效果。
根据本发明一方面的组合物，其特征在于，它含有利用作为提取溶剂的水、有机溶剂或其它们的物所得的豆提取物的馏分。根据本发明另一方面的组合物可以为抗血栓组合物，所述组合物含有利用作为提取溶剂的水、C1-C5醇或它们的混合物所得的彩色豆提取物的馏分。
在本发明的一个实施例中，所述有机溶剂不受具体限制，可以为C1-C5低级醇。所述C1-C5低级醇可以为，例如，甲醇，乙醇，异丙醇，正丙醇，正丁醇和异丁醇中的一种醇或者两种或多种醇的混合物。具体地，所述C1-C5低级醇可以为乙醇。在本发明的另一个实施例中，所述C1-C5醇的浓度为1-70%(v/v)，具体为1-40%(v/v)，更具体为5-25%(v/v)，优选为7-20%(v/v)。例如，所述溶剂可以为5-25%(v/v)的乙醇，更为具体为10%或20%(v/v)的乙醇。
在本发明中，用水或低浓度的低级醇提取豆类。本发明人已经进行了各种研究并重复测试，最终发现在各种有机溶剂中，利用低级醇，如乙醇，特别是利用低浓度的乙醇获得的彩色豆提取物可有效地改善血液循环，预防并治疗肥胖和糖尿病，且对预防和治疗高血脂症具有卓越的效果，从而完成了本发明。
在本发明的一个实施例中，所述彩色豆提取物的馏分可以为水或低级醇提取物的树脂馏分，具体为HP-20树脂馏分。所述树脂馏分为，例如利用包含苯和聚苯乙烯的聚合物的合成吸附柱分馏而得的馏分，更具体为HP-20树脂馏分。本发明人进行了测试，从通过利用低浓度乙醇获得的彩色豆提取物中提取各种馏分，并作为典型实施例。结果发现，通过用HP-20树脂分馏所述提取物而得的馏分具有卓越的抗血栓效果。特别地，与水馏分相比，HP-20树脂的50%乙醇馏分具有良好的效果。
在本发明的一个实施例中，所述彩色豆提取物的馏分可以为对彩色豆的水或低级醇提取物的树脂馏分，更具体地，通过用HP-20树脂分馏低浓度的乙醇提取物所得的馏分。
这里使用的术语“彩色豆”是指外壳为深颜色的豆类，包括黑色、红色、黄色和绿色。所述彩色豆可以为选自“霜太”黑豆（Glycine max MERR，黑豆的一个品种）、“鼠目太”黑豆（Rhynchosia Nolubilis，黑豆的一个品种）、青豆（Glycine max MERR）、黄豆（Glycinemax MERR）、蚕豆（Phaseolus vulgaris L.）、菜豆（Phaseolus vulgaris）、黑白斑豆（Phaseolus vulgaris L.）、小红豆（Vigna angularis）、小黑豆（Phaseolus angularisW.F. WIGHT.）、发芽的豆（Glycine max (L.) Merr.）、大豆（Glycine max）、黑大豆（Glycine max(L.) Merr.）、绿豆（Vigna radiate）和花皮黑豆（Glycine max (L.)Merr.）。在本发明的一个实施例中，所述彩色豆可以为蚕豆。所述彩色豆可以根据其地区、分类、俗称等各种方式来命名。这里使用的术语“彩色豆提取物”统称为通过各种提取方法从彩色豆中提取的物质，其包括，例如用水和有机溶剂提取的物质。这里使用的术语“馏分”统称为任何物质的各种馏分，其包括，例如提取物的馏分。更为具体地，所述术语“馏分”包括所述彩色豆提取物的HP-20树脂馏分。
本发明的含有所述彩色豆提取物馏分的组合物具有通过抑制血小板聚集来抑制血栓形成的效果，并具有通过抑制血管收缩来诱发血管舒张的效果。由于这些效果，本发明的组合物可以有效地用来预防或治疗肥胖、糖尿病和高血脂症。
本发明一方面在于提供一种药物组合物，该药物组合物包括作为活性成分的上述组合物。在本发明的一个实施例中，所述药物组合物可以是用于预防、缓解或治疗血管疾病的组合物。含有本发明所述组合物的所述药物组合物具有预防血栓形成、抑制血管收缩和抑制胆固醇的效果。具体地，所述药物组合物可以是通过抗血栓形成活性来改善血管循环的药物组合物，可以是用于缓解或治疗包括肥胖、糖尿病和高血脂症的血管疾病的药物组合物。例如，所述血管疾病包括肥胖、糖尿病、中风、脑出血、动脉硬化、心绞痛、心肌梗死、高血压、贫血、偏头疼或高血脂症。
当本发明的组合物用于药物时，可通过使用传统无机或无机载体将其制成液体、半固体或固体剂型，以用于口服或肠胃外给药。
用于口服给药的剂型包括，如片剂、丸剂、颗粒剂、软胶囊或硬胶囊、粉剂、细粉剂、乳剂、糖浆、小丸剂等。用于肠胃外给药的剂型包括，如注射溶液、滴剂、软膏、洗剂、喷剂、悬浮剂、栓剂等。根据传统方法可容易的制备本发明的所述活性成分，表面活性剂、辅剂、着色剂、调味剂、防腐剂、稳定剂、缓冲剂、悬浮剂和其它传统添加剂可适用于所述剂型。
本发明的药物组合物可以通过口服给药、肠胃外给药、直肠给药、局部给药、经皮给药、静脉注射、肌肉注射、腹腔给药或皮下给药。
此外，根据各种因素，所述活性成分的剂量将有所不同，所述因素包括待治疗的受试者的年龄、性别和体重、待治疗的具体疾病或生理状况、生理状况的严重程度、给药途径、以及医生的诊断等。根据上述因素所确定的剂量将在本领域技术人员所熟知的范围之内。所述活性成分的给药剂量一般可以为0.001～2000mg/kg/天，优选为0.5～1500mg/kg/天，但不限于此。
本发明的一方面在于提供食品添加剂、功能食品或健康食品组合物，其含有作为活性成分的本发明的组合物。在本发明的一个实施例中，所述含有作为活性成分的本发明的组合物的食品添加剂、功能食品或健康食品组合物可以为用于改善血液循环的组合物，也可以为用于预防或缓解血管疾病的组合物，所述血管疾病包括肥胖、糖尿病或高血脂症。所述血管疾病包括，如肥胖、糖尿病、中风、脑出血、动脉硬化、心绞痛、心肌梗死、高血压、贫血、偏头疼或高血脂症。
含有本发明的组合物的食品添加剂或功能食品包括，如发酵牛奶、乳酪、酸奶、果汁、益生菌、保健食品等。
在本发明的一个实施例中，所述组合物可以包含其它可改善本发明效果的成分，只要该成分不影响本发明的效果。例如，本发明的所述组合物可进一步含有添加剂，所述添加剂包括调味剂、天然色素、杀菌剂、抗氧化剂、防腐剂、湿润剂、增稠剂、无机盐、乳化剂和合成聚合物。
此外，本发明的所述组合物可进一步包括辅助成分，所述辅助成分包括水溶性维生素、油溶性维生素、聚合物肽、多糖和海藻提取物。本领域技术人员可根据所述组合物的剂型和使用目的容易地选取适宜的上述成分，且可在不影响本发明的目的及效果的范围内选择上述成分的含量并进行添加。例如，所要添加的上述成分的含量可以为占所述组合物总质量的0.01～5wt%，优选为0.01-3wt%。
本发明的组合物可被制成各种剂型，所述剂型包括溶液、乳剂、粘胶纤维混合物、片剂和粉剂，可通过各种方法进行给药，包括样品的饮用、注射、喷雾或挤出。
在下文中，根据参考实施例和测试实施例，将进一步详细地描述本发明。但是要理解的是，这些实施例和测试实施例仅用作解释为目的，而不是用于限制本发明的范围。
实施例1：用HP-20树脂分离出蚕豆的10%乙醇提取物
将1kg的干蚕豆浸入5L的10%乙醇溶液中，并在60℃下回流提取3小时，之后在室温下将所述提取物静置预定时间。然后，过滤，减压浓缩并冷冻干燥所述提取物，从而制备10%的乙醇提取物样品。
使用疏水性树脂DIAION HP-20(SUPELCO)，按照以下方法从所述蚕豆的10%乙醇提取物中获得树脂馏分。
为了用HP-20树脂进行分离，在长度为30cm的柱内填充HP-20树脂，然后用500ml的乙醇清洗两次，用500ml的50%的乙醇清洗两次，再用500ml的蒸馏水清洗两次。将6g的所述蚕豆的10%乙醇提取物溶解于水中，并加入于所述HP-20树脂填充柱内，然后将75ml的蒸馏水、750ml的50%的乙醇和500ml的乙醇按顺序注入所述柱内，当每种的所述溶剂从所述柱内溢出时，用250ml的锥形瓶接收。减压浓缩并冷冻干燥所述每种溢出的溶剂，从而获得馏分样品。
实施例2：用HP-20树脂分离出蚕豆的20%乙醇提取物
将1kg的干蚕豆浸入5L的20%乙醇溶液中，并在60℃下回流提取3小时，之后在室温下将所述提取物静置预定时间。然后，过滤，减压浓缩并冷冻干燥所述提取物，从而制备20%的乙醇提取物样品。
使用疏水性树脂DIAION HP-20(SUPELCO)，按照以下方法从所述蚕豆的20%乙醇提取物中获得树脂馏分。
为了用HP-20树脂进行分离，在长度为30cm的柱内填充HP-20树脂，然后用500ml的乙醇清洗两次，用500ml的50%的乙醇清洗两次，再用500ml的蒸馏水清洗两次。将6g的所述蚕豆的20%乙醇提取物溶解于水中，并加入于所述HP-20树脂填充柱内，然后将750ml的蒸馏水、750ml的50%的乙醇和500ml的乙醇按顺序注入所述柱内，当每种的所述溶剂从所述柱内溢出时，用250ml的锥形瓶将其接收。减压浓缩并冷冻干燥所述每种溢出的溶剂，从而获得馏分样品。
实施例3：用HP-20树脂分离出蚕豆的30%乙醇提取物
将1kg的干蚕豆浸入5L的30%乙醇溶液中，并在60℃下回流提取3小时，之后在室温下将所述提取物静置预定时间。然后，过滤，减压浓缩并冷冻干燥所述提取物，从而制备30%的乙醇提取物样品。
使用疏水性树脂DIAION HP-20(SUPELCO)，按照以下方法从所述蚕豆的30%乙醇提取物中获得树脂馏分。
为了用HP-20树脂进行分离，在长度为30cm的柱内填充HP-20树脂，然后用500ml的乙醇清洗两次，用500ml的50%的乙醇清洗两次，再用500ml的蒸馏水清洗两次。将6g的所述蚕豆的30%乙醇提取物溶解于水中，并加入于所述HP-20树脂填充柱内，然后将750ml的蒸馏水、750ml的50%的乙醇和500ml的乙醇按顺序注入所述柱内，当每种的所述溶剂从所述柱内溢出时，用250ml的锥形瓶将其接收。减压浓缩并冷冻干燥所述每种溢出的溶剂，从而获得馏分样品。
实施例4：用HP-20树脂分离出蚕豆的40%乙醇提取物
将1kg的干蚕豆浸入5L的40%乙醇溶液中，并在60℃下回流提取3小时，之后在室温下将所述提取物静置预定时间。然后，过滤，减压浓缩并冷冻干燥所述提取物，从而制备40%的乙醇提取物样品。
使用疏水性树脂DIAION HP-20(SUPELCO)，按照以下方法从所述蚕豆的40%乙醇提取物中获得树脂馏分。
为了用HP-20树脂进行分离，将HP-20树脂填充到长度为30cm的柱内，然后用500ml的乙醇清洗两次，用500ml的50%的乙醇清洗两次，再用500ml的蒸馏水清洗两次。将6g的所述蚕豆的40%乙醇提取物溶解于水中，并加入于所述HP-20树脂填充柱内，然后将750ml的蒸馏水、750ml的50%的乙醇和500ml的乙醇按顺序注入所述柱内，当每种的所述溶剂从所述柱内溢出时，用250ml的锥形瓶将其接收。减压浓缩并冷冻干燥所述每种溢出的溶剂，从而获得馏分样品。
实施例5：用HP-20树脂分离出蚕豆的70%乙醇提取物
将1kg的干蚕豆浸入5L的70%乙醇溶液中，并在60℃下回流提取3小时，之后在室温下将所述提取物静置预定时间。然后，过滤，减压浓缩并冷冻干燥所述提取物，从而制备70%的乙醇提取物样品。
使用疏水性树脂DIAION HP-20(SUPELCO)，按照以下方法从所述蚕豆的70%乙醇提取物中获得树脂馏分。
为了用HP-20树脂进行分离，在长度为30cm的柱内填充HP-20树脂，然后用500ml的乙醇清洗两次，用500ml的50%的乙醇清洗两次，再用500ml的蒸馏水清洗两次。将6g的所述蚕豆的70%乙醇提取物溶解于水中，并加入于所述HP-20树脂填充柱内，然后将750ml的蒸馏水、750ml的50%的乙醇和500ml的乙醇按顺序注入所述柱内，当每种的所述溶剂从所述柱内溢出时，用250ml的锥形瓶将其接收。减压浓缩并冷冻干燥所述每种溢出的溶剂，从而获得馏分样品。
实施例6：用HP-20树脂分离出蚕豆的水提取物
将1kg的干蚕豆浸入5L的水中，并在60℃下回流提取3小时，之后在室温下将所述提取物静置预定时间。然后，过滤，减压浓缩并冷冻干燥所述提取物，从而制备水提取物样品。
使用疏水性树脂DIAION HP-20(SUPELCO)，按照以下方法从所述蚕豆的水提取物中获得树脂馏分。
为了用HP-20树脂进行分离，在长度为30cm的柱内填充HP-20树脂，然后用500ml的乙醇清洗两次，用500ml的50%的乙醇清洗两次，再用500ml的蒸馏水清洗两次。将6g的所述蚕豆的水提取物溶解于水中，并加入于所述HP-20树脂填充柱内，然后将750ml的蒸馏水、750ml的50%的乙醇和500ml的乙醇按顺序注入所述柱内，当每种的所述溶剂从所述柱内溢出时，用250ml的锥形瓶将其接收。减压浓缩并冷冻干燥所述每种溢出的溶剂，从而获得馏分样品。
实施例7：用HP-20树脂分离出“霜太”黑豆提取物
将1kg的干“霜太”黑豆浸入5L的20%乙醇溶液中，并在60℃下回流提取3小时，之后在室温下将所述提取物静置预定时间。然后，过滤，减压浓缩并冷冻干燥所述提取物，从而制备20%的乙醇提取物样品。
使用疏水性树脂DIAION HP-20(SUPELCO)，按照以下方法从所述“霜太”黑豆的20%乙醇提取物中获得树脂馏分。
为了用HP-20树脂进行分离，在长度为30cm的柱内填充HP-20树脂，然后用500ml的乙醇清洗两次，用500ml的50%的乙醇清洗两次，再用500ml的蒸馏水清洗两次。将6g的所述“霜太”黑豆的20%乙醇提取物溶解于水中，并加入于所述HP-20树脂填充柱内，然后将750ml的蒸馏水、750ml的50%的乙醇和500ml的乙醇按顺序注入所述柱内，当每种的所述溶剂从所述柱内溢出时，用250ml的锥形瓶将其接收。减压浓缩并冷冻干燥所述每种溢出的溶剂，从而获得馏分样品。
实施例8：用HP-20树脂分离出大豆提取物
将1kg的干大豆浸入5L的20%乙醇溶液中，并在60℃下回流提取3小时，之后在室温下将所述提取物静置预定时间。然后，过滤，减压浓缩并冷冻干燥所述提取物，从而制备20%的乙醇提取物样品。
使用疏水性树脂DIAION HP-20(SUPELCO)，按照以下方法从所述大豆的20%乙醇提取物中获得树脂馏分。
为了用HP-20树脂进行分离，在长度为30cm的柱内填充HP-20树脂，然后用500ml的乙醇清洗两次，用500ml的50%的乙醇清洗两次，再用500ml的蒸馏水清洗两次。将6g的所述大豆的20%乙醇提取物溶解于水中，并加入于所述HP-20树脂填充柱内，然后将750ml的蒸馏水、750ml的50%的乙醇和500ml的乙醇按顺序注入所述柱内，当每种的所述溶剂从所述柱内溢出时，用250ml的锥形瓶将其接收。减压浓缩并冷冻干燥所述每种溢出的溶剂，从而获得馏分样品。
实施例9：用HP-20树脂分离出“鼠目太”黑豆提取物
将1kg的干“鼠目太”黑豆浸入5L的20%乙醇溶液中，并在60℃下回流提取3小时，之后在室温下将所述提取物静置预定时间。然后，过滤，减压浓缩并冷冻干燥所述提取物，从而制备20%的乙醇提取物样品。
使用疏水性树脂DIAION HP-20(SUPELCO)，按照以下方法从所述“鼠目太”黑豆的20%乙醇提取物中获得树脂馏分。
为了用HP-20树脂进行分离，在长度为30cm的柱内填充HP-20树脂，然后用500ml的乙醇清洗两次，用500ml的50%的乙醇清洗两次，再用500ml的蒸馏水清洗两次。将6g的所述“鼠目太”黑豆的20%乙醇提取物溶解于水中，并加入于所述HP-20树脂填充柱内，然后将750ml的蒸馏水、750ml的50%的乙醇和500ml的乙醇按顺序注入所述柱内，当每种的所述溶剂从所述柱内溢出时，用250ml的锥形瓶将其接收。减压浓缩并冷冻干燥所述每种溢出的溶剂，从而获得馏分样品。
测试实施例1：抑制由胶原诱导的人体血小板聚集的观察
为了检查根据提取溶剂中乙醇含量的改变而发生的提取物活性的变化，通过利用蚕豆提取物进行如下测试，该蚕豆提取物是通过具有不同的水或乙醇含量的提取溶剂进行提取而得的。
为了分离人体富血小板血浆（PRP），将3.2%的柠檬酸钠用作抗凝结剂，并且从2周或更长时间没用过药物的健康的男性的血管中采集血液。将150g所述采集的血液离心15分钟，收集上清液（PRP），然后将剩余物进行离心以分离贫血小板血浆（PPP）。用细胞计数器计算所收集的PRP中的血小板，然后用PPP将PRP稀释至浓度变为3X108个/ml，用于测试。
使用冷光血小板聚集仪（lumi-aggregometer，Chrono-Log Co.，美国）基于吸收率的改变测定血小板聚集的活性。在37℃下的热混合器内，将PRP预培养2分钟，然后将浓度为200㎍/ml的蚕豆提取物加入所述预培养的PRP内，并培养7分钟。将500㎕的所培养的PRP加入到用于血小板聚集的涂有硅酮（silicone）的试管中，培养3分钟。然后，加入最低浓度为1-3㎍/ml的胶原作为血小板聚集诱导剂，在该浓度下可产生最大化的血小板聚集，之后观察该反应6分钟。在以下表1中展示，血小板聚集抑制率（%）相对于仅使用胶原处理的对照组的血小板聚集抑制率（0%）的观察结果。
[表1]
如上述表1中所示，与其它提取物相比，水、10%和20%的乙醇提取物展示卓越的血小板聚集抑制效果。用HP-20树脂同实施例1～5所述的内容进行分馏，以检测各个上述乙醇提取物的HP-20馏分的活性。
测试实施例2：通过使用各种乙醇含量的提取溶剂所得的乙醇提取物的HP-20馏分 的血小板聚集活性
根据实施例1～5的所述，通过使用HP-20树脂所得的蚕豆提取物的水馏分和50%的乙醇馏分，同测试实施例1的方法进行测试。所述测试的血小板聚集抑制率的结果在以下表2中展示。
[表2]
如上述表1和表2中所示，当用HP-20树脂对测试实施例1中展示出相对低的效果的30%、40%和70%的乙醇提取物进行分馏后，再用50%的乙醇对所得馏分进行分馏时能展示出更高的抑制血小板聚集的活性。如图1所示，展示了根据50%乙醇馏分的血小板聚集抑制率，所述50%乙醇馏分是通过用HP-20树脂分馏蚕豆的20%乙醇提取物所得的，其中所述50%乙醇提取物的血小板聚集抑制率与其浓度成正比上升。
因此，这表明通过HP-20树脂的分馏将血小板聚集抑制活性集中于所述50%的乙醇馏分之上。
测试实施例3：根据各种豆的通过HP-20树脂分馏的血小板聚集抑制活性
根据实施例7～9所述的方法，将已展现最佳的抑制血小板具体效果的各种豆的20%乙醇提取物通过HP-20树脂进行分馏，以评估各种豆的血小板聚集抑制活性。
在同测试实施例1的条件下，分别使用200㎍/ml的通过HP-20树脂进行分馏而获得的水馏分和50%乙醇馏分进行测试。所述测试的血小板聚集抑制率的结果在以下表3中展示。
[表3]
如上述表3中所示，在包括蚕豆的所有种类的豆中，与所述20%的乙醇提取物相比，通过HP-20树脂获得的50%的乙醇馏分的血小板聚集抑制效果显著提高。这表明，如测试实施例2中所述，通过HP-20树脂的提取物的分馏是提高血小板聚集抑制活性的主要方法。此外，除了已展现出相对高活性的蚕豆和“霜太”黑豆的提取物之外，相对展现相对低活性的大豆提取物而言，通过HP-20树脂的分馏确实是提高所述提取物的血小板聚集抑制活性的方法。
测试实施例4：对每种血小板聚集刺激源的活性的特殊抑制的观察
为了检查展示出最高抑制活性的、各种豆的20%乙醇提取物的HP-20树脂50%乙醇馏分是否能特别地抑制每种血小板聚集的刺激源，进行以下测试。
当血管破损，破损部位的内皮细胞层也会受损，血管暴露于胶原，并且从血小板将分泌出ADP（二磷酸腺苷）以及凝血酶。已知，这些物质会刺激血小板的聚集。因此，为了检查通过HP-20树脂进行分馏获得的所述50%乙醇馏分能否特别地抑制由ADP和凝血酶引起的血小板聚集活性，除了用ADP和凝血酶代替胶原施加激剂的以外，用与测试实施例相同的方式进行测试。测试结果是以血小板聚集的抑制率（%）来展示于以下表4中。
[表4]
如表4中所示，所述HP-20树脂50%乙醇馏分不仅对由胶原诱导的血小板聚集表现出抑制效果，而且对由其它刺激剂，如ADP和凝血酶诱导的血小板聚集也表现出抑制效果。
测试实施例5：各种的豆提取物的HP-20树脂50%乙醇馏分在血小板聚集后对活性 物质的分泌的抑制效果的观察
将400㎍/ml的每种馏分加入到从测试实施例1中获得的PRP中，并且在37℃下培养10分钟，然后在其中加入5㎍/ml的胶原并进行反应6分钟，以检测在血小板聚集后每种豆提取物的HP-20树脂50%乙醇馏分对凝血氧烷（thromboxane）生成的抑制效果。其中，加入2mM的EDTA和50μM的吲哚美辛（indomethacin），以停止所述反应。在2000xg下，将所得的溶液离心20分钟，然后取所述上清液。通过酶免疫测定法（enzyme immunoassay），对所述上清液中凝血氧烷的含量进行量化。所述测试结果以凝血氧烷生成抑制率来展示在以下表5中。
[表5]
如上述表5所示，观察到，在血小板聚集后，所述HP-20树脂50%乙醇馏分能抑制凝血氧烷的生成。
测试实施例6：对从SD小鼠中分离出的血小板聚集的抑制效果的观察
以与测试实施例1相同的方法，用15㎍/ml的胶原和10μM的ADP进行测试，以检测所述蚕豆提取物的HP-20树脂50%乙醇馏分是否具有对从小鼠中分离出的血小板的聚集的抑制效果。所用的馏分样品的浓度为200㎍/ml。所述测试的结果以血小板聚集抑制率（%）展示在以下表6中。
[表6]
胶原 ADP
蚕豆提取物馏分 83 69
如上述表6中所示，所述蚕豆的HP-20树脂50%乙醇馏分对人体和小鼠都具有高的血小板聚集抑制效果。

Claims (5)

1.蚕豆提取物的HP-20树脂的50%乙醇馏分在制备抗血栓组合物中的用途，其中所述蚕豆提取物是用5-25%（v/v）乙醇提取而得的。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述组合物为用于缓解或治疗血管疾病的药物组合物。
3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述血管疾病为中风、动脉硬化、心绞痛、心肌梗死。
4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述组合物为用于预防或缓解血管疾病的健康食品组合物。
5.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述血管疾病为中风、动脉硬化、心绞痛、心肌梗死。
CN201180034969.5A 2010-06-18 2011-06-17 含有彩色豆提取物的组合物 Expired - Fee Related CN102970998B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020100058068A KR20110138001A (ko) 2010-06-18 2010-06-18 유색콩 추출물을 함유하는 조성물
KR10-2010-0058068 2010-06-18
PCT/KR2011/004450 WO2011159134A2 (ko) 2010-06-18 2011-06-17 유색콩 추출물을 함유하는 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102970998A CN102970998A (zh) 2013-03-13
CN102970998B true CN102970998B (zh) 2016-05-11

Family

ID=45348770

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201180034969.5A Expired - Fee Related CN102970998B (zh) 2010-06-18 2011-06-17 含有彩色豆提取物的组合物

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20130089631A1 (zh)
JP (2) JP2013530181A (zh)
KR (1) KR20110138001A (zh)
CN (1) CN102970998B (zh)
WO (1) WO2011159134A2 (zh)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1649609A (zh) * 2002-03-14 2005-08-03 不二制油株式会社 含大豆皂角苷物质及其生产方法

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH01291761A (ja) * 1988-05-19 1989-11-24 Yuriko Takahama 成人病を予防する健康食品
US5702752A (en) * 1996-03-13 1997-12-30 Archer Daniels Midland Company Production of isoflavone enriched fractions from soy protein extracts
US6132795A (en) * 1998-03-15 2000-10-17 Protein Technologies International, Inc. Vegetable protein composition containing an isoflavone depleted vegetable protein material with an isoflavone containing material
CA2368784A1 (en) * 1999-04-20 2000-10-26 William J. Banz Methods of treating clinical diseases with isoflavones
AUPQ987400A0 (en) * 2000-09-04 2000-09-28 Food Ingredients Technologies Intangibles (Bermuda) Limited Process for selectively extracting bioactive components
KR100337005B1 (ko) * 2000-11-23 2002-05-17 강창환 콜레스테롤 및 혈전 저하 기능이 강화된 생식 타입의 차조성물
US20040131749A1 (en) * 2002-08-29 2004-07-08 Archer-Daniels-Midland Company Phytochemicals from edible bean process streams
CN1594360A (zh) * 2004-06-30 2005-03-16 广州拜迪生物医药有限公司 红腰子豆素和它的制备方法及其用途
JP2006143609A (ja) * 2004-11-17 2006-06-08 Fuji Oil Co Ltd アディポネクチン分泌促進組成物
JP2006225312A (ja) * 2005-02-17 2006-08-31 Fuji Oil Co Ltd レプチン分泌抑制組成物
ITMI20052450A1 (it) * 2005-12-22 2007-06-23 Indena Spa Estratti di phaseolus vulgaris loro uso e formulazioni che li contengono
US20070264401A1 (en) * 2006-05-12 2007-11-15 Taormina Peter J Beverage preservatives
KR100786213B1 (ko) * 2006-05-17 2007-12-17 조정일 납두균 청국16 균주로 발효시킨 두류 식품
WO2007148737A1 (ja) * 2006-06-22 2007-12-27 Toyo Boseki Kabushiki Kaisha 植物抽出物の調製方法、並びに植物抽出物及びその用途
SI2033641T1 (sl) * 2007-08-01 2012-04-30 Ferlux Postopek priprave ekstraktov, bogatih s proantocianidini
CN101116507A (zh) * 2007-08-20 2008-02-06 陈江 参麦安神粥
US20120070520A1 (en) * 2009-05-26 2012-03-22 Hyun Jung Shin Composition containing a bean extract for improving blood circulation and increasing vascular health

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1649609A (zh) * 2002-03-14 2005-08-03 不二制油株式会社 含大豆皂角苷物质及其生产方法

Also Published As

Publication number Publication date
JP2016065087A (ja) 2016-04-28
US20130089631A1 (en) 2013-04-11
CN102970998A (zh) 2013-03-13
JP6284920B2 (ja) 2018-02-28
WO2011159134A3 (ko) 2012-05-03
KR20110138001A (ko) 2011-12-26
JP2013530181A (ja) 2013-07-25
WO2011159134A2 (ko) 2011-12-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102802652B (zh) 用于促进血液循环和增强血管健康的包含豆类提取物的组合物
KR101055337B1 (ko) 오매 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 혈행개선 조성물
CN102970998B (zh) 含有彩色豆提取物的组合物
CN102946893B (zh) 包含彩色豆提取物的组合物
KR101740519B1 (ko) 고압효소분해 천마 추출물 및 산초 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈행 개선 및 혈전 질환의 예방 또는 치료용 조성물
KR100740326B1 (ko) 두통 치료의 약제 조성물 및 그 제조방법과 응용
KR20200069965A (ko) 도토리 화분 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR101918239B1 (ko) 괭생이 모자반 가수분해물을 유효성분으로 함유하는 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물
KR101883181B1 (ko) 모링가 올레이페라 지하부 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
CN105920063B (zh) 一种红毛五加叶提取物及其制备方法和用途
KR102117896B1 (ko) 산사나무 추출물을 포함하는 항혈전용 조성물
CN101327000A (zh) 竹笋壳提取物新用途
CN106880834A (zh) 一种用于缓解高血压症状的植物精油复合物及制备方法
KR101514791B1 (ko) 오갈피 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈관질환의 예방 또는 치료용 조성물
KR102076395B1 (ko) 작약 또는 단삼 추출물을 포함하는 혈행 개선용 조성물
KR102216221B1 (ko) 송화분 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR100247569B1 (ko) 혈전치료용 약제조성물
KR101643245B1 (ko) 고압효소분해 천마를 유효성분으로 포함하는 혈행 개선용 조성물
KR102388396B1 (ko) 대마 줄기 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR102388399B1 (ko) 대마 뿌리 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR102126574B1 (ko) 참당귀 추출물을 포함하는 항혈전 조성물
US11612627B2 (en) Method for preventing or treating thrombosis
US20240131098A1 (en) Pharmaceutical composition and health functional food containing extract of fruiting body of ganoderma lucidum as active ingredient for prevention or treatment of thrombosis
KR102127726B1 (ko) 복합 한방 생약 추출물을 포함하는 혈행 개선용 제제
KR101734926B1 (ko) 얌빈 지하부 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20160511

Termination date: 20210617

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee