CN102960444A - 一种基于瑞士乳杆菌发酵的含ace抑制肽的羊奶的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法,将瑞士乳杆菌接种于羊奶或羊奶复原乳中,在30~40℃下恒温厌氧发酵10~15h,得到发酵羊奶;将发酵羊奶80~90份,与5~10份的蔗糖、0.15~0.5份的稳定剂及5~30的水充分混合后冷却至10℃以下,得到混合发酵羊奶;将混合发酵羊奶在2~5℃条件下密封,后熟8~10h,得到含ACE抑制肽的羊奶。所制备的羊奶既具有酸羊奶的营养价值和独特风味,还含有抑制率较高的ACE抑制肽,不仅促进了羊奶资源的开发利用,对于高血压的防治以及高血压患者的营养保健也有积极作用。
Description
技术领域
本发明属于羊奶发酵技术领域,涉及一种基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法。
背景技术
世界卫生组织(WHO)将高血压定义为:在未使用降压药物的情况下,非同日3次测量血压,收缩压≥140mmHg和/或舒张压≥90mmHg。据2010年***组织的全国居民27万人营养与健康状况调查资料显示,我国60岁及以上人群高血压的患病率为49%,即约每2位60岁以上的人中就有1人患高血压。近年来,儿童高血压患病率也有所升高,根据近10年部分省市的调查结果,儿童高血压患病率,学龄前儿童为2~4%,学龄儿童为4~9%。高血压可引起脑卒中、心肌梗死、心力衰竭及慢性肾脏病等多种并发症,不仅致残、致死率高,而且严重消耗医疗和社会资源,给家庭和国家造成沉重负担。
目前常用降压药物包括钙通道阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)、血管紧张素受体阻滞剂(ARB)、利尿剂、α受体阻滞剂和β受体阻滞剂六类,以及由上述药物组成的固定配比复方制剂。
ACE抑制肽是ACEI中的一类具有降血压功能的多肽类物质,它对于血压正常的动物或人没有降血压作用,具有安全性高,无毒副作用的特点。目前,研究者已分离出多种天然来源的ACE抑制肽,其中大多是利用蛋白酶水解各种食物蛋白得到。有研究发现,一些酸奶也具有降血压功能,并有学者从中分离得到了ACE抑制肽。
羊奶以其营养丰富、易于吸收等诸多优点被誉为奶中精品。瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)是一种具有保健功效的新型酸奶生产菌种,其蛋白酶水解活力高,能够水解乳蛋白产生多种对人体有益的生物活性肽,其产生的ACE抑制肽抑制率较高。
发明内容
本发明解决的问题在于提供一种基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法,所制备的羊奶既具有酸羊奶的营养价值和独特风味,还含有抑制率较高的ACE抑制肽,不仅促进了羊奶资源的开发利用,对于高血压的防治以及高血压患者的营养保健也有积极作用。
本发明是通过以下技术方案来实现:
一种基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法,包括以下步骤:
1)将瑞士乳杆菌接种于羊奶或羊奶复原乳中,在30~40℃下恒温厌氧发酵10~15h,得到发酵羊奶;
2)按质量份数计,取步骤1)得到的发酵羊奶80~90份,与5~10份的蔗糖、0.15~0.5份的稳定剂及5~30的水充分混合后冷却至10℃以下,得到混合发酵羊奶;
3)将混合发酵羊奶在2~5℃条件下密封,后熟8~10h,得到含ACE抑制肽的羊奶。
所述的瑞士乳杆菌在接种之前还进行以下活化:
1)将瑞士乳杆菌的冻干菌粉接种于装有灭菌羊奶复原乳的厌氧管中,充分混匀后在37℃厌氧培养10~14h,完成第一次活化;
2)按体积分数计,取3~7%第一次活化的菌液,接种于装有灭菌羊奶复原乳的厌氧管中,充分混匀后在37℃厌氧培养10~14h,完成第二次活化;
3)按体积分数计,取3~7%第二次活化的菌液,接种于装有灭菌羊奶复原乳的厌氧管中,充分混匀后在37℃厌氧培养10~14h,完成第三次活化;
完成第三次活化后,按体积分数计,取3~7%第二次活化的菌液接种于羊奶或羊奶复原乳中。
所述的羊奶复原乳为羊奶粉与水以10~20:100的质量比溶解于水中。
所述的羊奶或羊奶复原乳中还添加了酪蛋白,以提高发酵羊奶的凝固性以及ACE抑制肽的抑制率;以质量比计,酪蛋白添加量为0.5~0.9%。
所述稳定剂为果胶、羧甲基纤维素钠、藻酸丙二醇酯中的一种或两种。
所述含ACE抑制肽的羊奶中瑞士乳杆菌的活菌数大于108cfu/mL。
所述含ACE抑制肽的羊奶中ACE抑制肽抑制率为65~90%。
所述制备的含ACE抑制肽的羊奶在制备预防高血压或高血压辅助治疗的饮品中应用。
与现有技术相比,本发明具有以下有益的技术效果:
本发明提供的基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法,采用以瑞士乳杆菌单菌株发酵的方式制备羊奶饮品,方法简便易行,不仅除去了羊奶中的膻味,还保留了羊奶中丰富的营养物质,凝乳细腻,易于吸收;所制备的发酵羊奶中保加利亚乳杆菌活菌数大于108cfu/mL,可提供包括调节胃肠道菌群平衡、增强免疫力、降低胆固醇等一系列的益生作用。
进一步的,还在发酵过程中添加酪蛋白,提高了发酵羊奶中ACE抑制肽的抑制率,还增加了发酵乳中蛋白质和氨基酸的含量;而为了保证羊奶发酵过程中产生的ACE抑制肽具有较高抑制率,在发酵结束后还添加了蔗糖与稳定剂。
本发明提供的基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法,所制得的发酵羊奶中ACE抑制肽抑制率可达到75~90%,坚持长期饮用,可以有效地预防高血压的发病,同时也可用于高血压患者的辅助治疗,可应用与制备预防高血压或高血压辅助治疗的饮品中。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明,所述是对本发明的解释而不是限定。
实施例1
基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法,包括以下步骤:
1)取0.4g瑞士乳杆菌的冻干菌粉接种于装有10mL灭菌羊奶复原乳的厌氧管中,充分混匀后在37℃培养12h,完成第一次活化;取5%上述第一次活化的菌液,按上述操作方法进行第二次、第三次活化,共活化3次,即得到活化好的菌种。
2)将10mL浓度为1%的酪蛋白溶液添加到90mL鲜羊奶中并混合均匀,过滤净化后在90℃灭菌15min,冷却至40±3℃后,接入5mL活化好的瑞士乳杆菌,在37℃恒温厌氧发酵12h,得到发酵羊奶。
3)以质量份数计,将5.7份的蔗糖、0.3份的果胶用10份的水溶解,在65℃巴氏杀菌20min后冷却至40±3℃,再加入到84份的发酵羊奶中,混合均匀后迅速冷却至10℃以下,再在4℃冰箱后熟8~10h,即制成产品。
所得产品中瑞士乳杆菌活菌数为5.87×108cfu/mL,其中的ACE抑制肽抑制率为88.36%。
ACE抑制肽抑制率的检测方法为:紫外分光光度法
用含有0.3mol/L NaCl的0.1mol/L硼酸盐缓冲液(pH8.3)将HHL(Hip-His-Leu)配成5mmol/L的溶液。在10mL试管中分别加入200μL的5mmol/L Hip-His-Leu溶液和80μL的发酵乳上清液,于37℃下保温5min后,再加入20μL ACE溶液(溶解于蒸馏水中,活力为0.1U/mL),混匀后在37℃下保温30min进行反应,之后加入250μL 1mol/L HCl终止反应,再加入1.5mL醋酸乙酯,经15s振荡混匀后,静置5min,用移液管吸取1.0mL的醋酸乙酯层,于120℃烘干30min,再加入1.0mL蒸馏水,混匀后在228nm处测定吸光度。在上述条件下,抑制50%的ACE活性(IC50)为样品的一个活性单位。
ACE抑制率=[(B-A)/(B-C)]×100%
式中:
A——含有发酵乳乳清(或溶于蒸馏水的多肽溶液)和ACE溶液的吸光度;
B——不含发酵乳乳清(或溶于蒸馏水的多肽溶液)样品,但含有ACE溶液的吸光度;
C——为含脱脂乳乳清(或蒸馏水),但不含ACE溶液的吸光度。
实施例2
基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法,包括以下步骤:
1)取0.4g瑞士乳杆菌的冻干菌粉接种于装有10mL灭菌羊奶复原乳的厌氧管中,充分混匀后在37℃培养12h,完成第一次活化;取5%上述第一次活化的菌种,按上述操作方法进行第二次活化,共活化3次,即得到活化好的菌种。
2)将14g羊奶粉和20mL浓度为1%的酪蛋白溶液添加到80mL水中并混合均匀,在90℃灭菌15min,冷却至40±3℃后,接入7mL活化好的瑞士乳杆菌,在40℃恒温厌氧发酵10h,得到发酵羊奶。
3)以质量份数计,将7份的蔗糖、0.2份的羧甲基纤维素钠用7.8份的水溶解,在65℃巴氏杀菌20min后冷却至40±3℃,再加入到85份的发酵羊奶中,混合均匀后迅速冷却至10℃以下,再在4℃冰箱后熟8~10h,即制成产品。
所得产品中瑞士乳杆菌活菌数为4.75×108cfu/mL,其中的ACE抑制肽抑制率为85.73%。
实施例3
基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法,包括以下步骤:
1)取0.4g瑞士乳杆菌的冻干菌粉接种于装有10mL灭菌羊奶复原乳的厌氧管中,充分混匀后在37℃培养12h,完成第一次活化;取5%上述第一次活化的菌种,按上述操作方法进行第二次活化,共活化3次,即得到活化好的菌种。
2)将14g羊奶粉和50mL浓度为1%的酪蛋白溶液添加到50mL水中并混合均匀,在90℃灭菌15min,冷却至40±3℃后,接入7mL活化好的瑞士乳杆菌,在35℃恒温厌氧发酵14h,得到发酵羊奶。
3)以质量份数计,将5份的蔗糖、0.3份的藻酸丙二醇酯用6.7份的水溶解,在65℃巴氏杀菌20min后冷却至40±3℃,再加入到88份的发酵羊奶中,混合均匀后迅速冷却至10℃以下,再在4℃冰箱后熟8~10h,即制成产品。
所得产品中瑞士乳杆菌活菌数为4.68×108cfu/mL,其中的ACE抑制肽抑制率为83.17%。
实施例4
基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法,包括以下步骤:
1)取0.4g瑞士乳杆菌的冻干菌粉接种于装有10mL灭菌羊奶复原乳的厌氧管中,充分混匀后在37℃培养12h,完成第一次活化;取5%上述第一次活化的菌液,按上述操作方法进行第二次、第三次活化,共活化3次,即得到活化好的菌种。
2)将20mL浓度为1%的酪蛋白溶液添加到80mL鲜羊奶中并混合均匀,过滤净化后在90℃灭菌15min,冷却至40±3℃后,接入7mL活化好的瑞士乳杆菌,在37℃恒温厌氧发酵11h,得到发酵羊奶。
3)以质量份数计,将7份的蔗糖、0.2份的羧甲基纤维素钠用10.8份的水溶解,在65℃巴氏杀菌20min后冷却至40±3℃,再加入到82份的发酵羊奶中,混合均匀后迅速冷却至10℃以下,再在4℃冰箱后熟8~10h,即制成产品。
所得产品中瑞士乳杆菌活菌数为5.66×108cfu/mL,其中的ACE抑制肽抑制率为85.44%。
实施例5
基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法,包括以下步骤:
1)取0.4g瑞士乳杆菌的冻干菌粉接种于装有10mL灭菌羊奶复原乳的厌氧管中,充分混匀后在37℃培养12h,完成第一次活化;取5%上述第一次活化的菌液,按上述操作方法进行第二次、第三次活化,共活化3次,即得到活化好的菌种。
2)将20mL浓度为1%的酪蛋白溶液添加到80mL鲜羊奶中并混合均匀,过滤净化后在90℃灭菌15min,冷却至40±3℃后,接入7mL活化好的瑞士乳杆菌,在35℃恒温厌氧发酵14h,得到发酵羊奶。
3)以质量份数计,将5份的蔗糖、0.1份的羧甲基纤维素钠、0.1份的果胶用7.8份的水溶解,在65℃巴氏杀菌20min后冷却至40±3℃,再加入到87份的发酵羊奶中,混合均匀后迅速冷却至10℃以下,再在4℃冰箱后熟8~10h,即制成产品。
所得产品中瑞士乳杆菌活菌数为4.42×108cfu/mL,其中的ACE抑制肽抑制率为79.80%。
所制备的发酵羊奶坚持长期饮用,可以有效地预防高血压的发病,同时也可用于高血压患者的辅助治疗,可应用于制备预防高血压或高血压辅助治疗的饮品中。
Claims (8)
1.一种基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将瑞士乳杆菌接种于羊奶或羊奶复原乳中,在30~40℃下恒温厌氧发酵10~15h,得到发酵羊奶;
2)按质量份数计,取步骤1)得到的发酵羊奶80~90份,与5~10份的蔗糖、0.15~0.5份的稳定剂及5~30的水充分混合后冷却至10℃以下,得到混合发酵羊奶;
3)将混合发酵羊奶在2~5℃条件下密封,后熟8~10h,得到含ACE抑制肽的羊奶。
2.如权利要求1所述的基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法,其特征在于,所述的瑞士乳杆菌在接种之前还进行以下活化:
1)将瑞士乳杆菌的冻干菌粉接种于装有灭菌羊奶复原乳的厌氧管中,充分混匀后在37℃厌氧培养10~14h,完成第一次活化;
2)按体积分数计,取3~7%第一次活化的菌液,接种于装有灭菌羊奶复原乳的厌氧管中,充分混匀后在37℃厌氧培养10~14h,完成第二次活化;
3)按体积分数计,取3~7%第二次活化的菌液,接种于装有灭菌羊奶复原乳的厌氧管中,充分混匀后在37℃厌氧培养10~14h,完成第三次活化;
完成第三次活化后,按体积分数计,取3~7%第二次活化的菌液接种于羊奶或羊奶复原乳中。
3.如权利要求1所述的基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法,其特征在于,所述的羊奶复原乳为羊奶粉与水以10~20:100的质量比溶解于水中。
4.如权利要求1所述的基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法,其特征在于,所述的羊奶或羊奶复原乳中还添加了酪蛋白,以提高ACE抑制肽的抑制率;以质量比计,酪蛋白添加量为0.1~0.5%。
5.如权利要求1所述的基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法,其特征在于,所述稳定剂为果胶、羧甲基纤维素钠、藻酸丙二醇酯中的一种或两种。
6.如权利要求1所述的基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法,其特征在于,所述含ACE抑制肽的羊奶中瑞士乳杆菌的活菌数大于108cfu/mL。
7.如权利要求1所述的基于瑞士乳杆菌发酵的含ACE抑制肽的羊奶的制备方法,其特征在于,所述含ACE抑制肽的羊奶中ACE抑制肽的抑制率为65~90%。
8.权利要求1所述制备的含ACE抑制肽的羊奶在制备预防高血压或高血压辅助治疗的饮品中应用。
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