CN102924708A - 一系列新型环糊精聚合物手性拆分剂的合成及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种新型磺丙基醚环糊精聚合物及其合成方法，将取代不均一的衍生化环糊精连接成聚合物，环糊精经过磺酸化和聚合两步反应，获得取代位置和取代度均一的衍生化环糊精手性拆分剂。通过对磺丙基醚α-CD聚合物、磺丙基醚β-CD聚合物和磺丙基醚γ-CD聚合物这三类新型磺丙基醚环糊精聚合物进行的表征结果证明本发明设计思想的优势，将这些聚合物作为缓冲液添加剂可分别用于毛细管电泳手性化合物分离中。本发明可以解决当前天然环糊***溶性低，带电环糊精衍生物离子强度高、合成产品批次重复性差，峰展宽等问题，具有合成方法简单，步骤少，合成成本低等优点。
Description
技术领域
本发明涉及一类新型手性拆分剂——磺丙基醚α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精聚合物的合成方法及应用，该类聚合物可作为手性拆分剂添加至毛细管电泳运行缓冲液中，用于毛细管电泳手性化合物的分离，具有水溶性高、磺酸化功能基取代度和取代位置统计学上均一性好、高效、经济、可回收再利用等特点，有利于工业化大规模使用，具有较好的经济价值和应用前景。
背景技术
在上市的合成药物中，单一对映异构体药物甚少，随着手性选择技术的发展，具有高效药理作用的纯对映异构体药物在合成药物中的比例将大幅度提高。自然界中的手性同样是一种普遍现象，氨基酸、糖类的生命活性物质都是手性分子。由于手性化合物不同的对映体在药理药效方面的不同，开发高效、低耗、快速的分离对映体的分析方法具有非常广泛的意义。
与高效液相色谱（HPLC）、气相色谱（GC）等技术相比，毛细管电泳（CE，capillaryelectrophoresis）技术具有高效、快速、样品量少、选择性高、分离模式多样及易于实现自动化等优势，被广泛应用于手性分离领域。
对于CE手性分离，利用手性选择剂来构建立体选择性环境是实现对映体区分的关键。手性选择剂的种类很多，其中，环糊精（CDs，cyclodextrins）及其衍生物是应用最为广泛的一类手性拆分剂，其对多种结构各异的手性化合物显示出优良的手性识别能力。环糊精的空间结构具有一个疏水的桶状空腔，空腔与对映体间的包合作用的差异，以及包合后迁移率的变化导致了对映体的分离。
天然环糊精及其中性衍生物，如β-环糊精，虽已成功分离了一些手性化合物，但是其溶解度低和难以拆分中性对映体等缺点限制了其实际应用，参见Salvatore Fanali的文章“Fanali S.J.Chromatogr.A,1996,735:77~121.”。带电CDs衍生物因具有自身电泳淌度而能将中性对映体分离开。此外，带电CDs衍生物还能和带相反电荷的分析物产生静电作用，故往往表现出更高的手性拆分能力，因此对环糊精进行衍生化不仅可以提高选择性，还可以扩大手性分离范围。一般α-CD适用于像氨基酸、无机离子等小分子的手性分离，β-CD适用于比苯环大、比苯并芘小的分子的手性分离，γ-CD适于大分子的手性分离。
在目前已经合成并使用过的所有环糊精衍生物中，磺酸化环糊精以其优异的对映体拆分能力及普适性而倍受青睐，见Stalcup，Chen F.T.等人的文章“Stalcup A.M.,Gahm K.H..Anal.Chem.,1996,68,1360.”和“Chen F.T.,Shen G.,Evangelista R.A..J.Chromatogr.A,2001,924,523”；其次还有羧甲基化环糊精，甲基化环糊精等。但是，环糊精分子中有多个反应活性相似的羟基，以此环糊精为母体的衍生化产物也有其局限性：1）带电CDs衍生物通常是不同离子基团取代度和取代位置不同的混合物，会对手性化合物的分离产生不利影响，如重现性差、柱效低等；2）带电CDs衍生物对缓冲液的离子强度贡献高，随之产生较高的运行电流，增加了电泳中的焦耳热；3）难以实现对昂贵的带电CDs衍生物的回收。
为了实现负电CDs衍生物取代度的均一性，Vigh等人设计并合成了一类伯醇基完全磺酸化的单一异构体，参见文章“W.Zhu,G.Vigh,Anal.Chem.2000,72,310-317.”以及“J.B.Vincent,A.D.Sokolowski,T.V.Nguyen,G.Vigh,Anal.Chem.1997,69,4226-4233.”。实验证明，这类负电CDs衍生物不仅具有良好的取代度均一性，而且具有较高的手性识别能力。但是，这类负电CDs衍生物的制备过程包括羟基的保护及脱保护，各步产物的色谱柱纯化等复杂步骤，产物不但价格昂贵且无法回收再利用，故在很大程度上限制了其广泛使用。
发明内容
针对上述现有技术，本发明提供一种新型合成思路以获得取代位置和取代度均一的衍生化环糊精手性拆分剂，将取代不均一的衍生化环糊精连接成聚合物，从而有效地解决取代度难均一的问题，以及当前天然环糊***溶性低，带电环糊精衍生物离子强度高、合成产品批次重复性差，峰展宽等问题，具有合成方法简单，步骤少，合成成本低等优点。通过对磺丙基醚α-CD聚合物、磺丙基醚β-CD聚合物和磺丙基醚γ-CD聚合物这三类新型磺丙基醚环糊精聚合物进行的表征结果证明本发明设计思想的优势，将这些聚合物作为缓冲液添加剂分别可以用于CE手性化合物分离中。
本发明的主要目的如下：
（1）以制备带电环糊精聚合物为例阐述一种新型手性拆分剂设计思想以解决天然环糊精（如β-CD环糊精）水溶性低，带电CDs衍生物离子强度高、取代度和取代位置难以控制、价格昂贵等难题。
（2）通过两步缩聚法制备三类新型、高效、价廉、可回收再利用的手性拆分剂——磺丙基醚α-环糊精、磺丙基醚β-环糊精、磺丙基醚γ-环糊精聚合物。
（3）将磺丙基醚α-环糊精或磺丙基醚β-环糊精或磺丙基醚γ-环糊精聚合物添加至基质缓冲液中用于手性化合物拆分。
为了解决上述技术问题，本发明新型磺丙基醚环糊精聚合物的化学结构是：
本发明新型磺丙基醚环糊精聚合物的合成方法之一是：由环糊精经过磺酸化和聚合两步反应制备得到，其制备的反应路线如下：
其中：R=-(CH2)3SO3 -Na+或-OH，
CD-OH表示环糊精，m，n均为自然数且均≥1。
按照上述反应路线合成磺丙基醚α-环糊精聚合物（SPE-α-CDP，sulfopropyl ether α-CDpolymer）、β-环糊精聚合物（SPE-β-CDP，sulfopropyl ether β-CD polymer）、γ-环糊精聚合物（SPE-γ-CDP，sulfopropyl ether γ-CD polymer）的步骤如下：
1）室温下将α-环糊精或β-环糊精或γ-环糊精溶解于质量分数为20%-30%的氢氧化钠溶液中，搅拌0.5-2h使羟基充分解离，缓慢滴加6-24倍当量的1,3-丙烷磺内酯，滴加完后在65-85℃反应3-7h，冷却至室温，加盐酸调pH值至中性，反应液浓缩得到磺丙基醚α-环糊精或磺丙基醚β-环糊精或磺丙基醚γ-环糊精单体；
2）将上述制得的磺丙基醚α-环糊精或磺丙基醚β-环糊精或磺丙基醚γ-环糊精单体溶于质量分数为30%-50%的氢氧化钠溶液中，搅拌0.5-2h，逐滴加入1-25倍当量的环氧氯丙烷，保持快速搅拌，65-85℃下反应，在形成凝胶前停止反应，盐酸中和后进行透析以除去未反应的单体，最后经冻干得到磺丙基醚α-环糊精或磺丙基醚β-环糊精或磺丙基醚γ-环糊精聚合物。
本发明新型磺丙基醚环糊精聚合物的另一种合成方法是：由环糊精经过聚合和磺酸化两步反应制备得到，其制备的反应路线如下：
其中：R＝-(CH2)3SO3 -Na+或-OH，
CD-OH代表环糊精，m，n均为自然数且均≥1。
按照上述反应路线合成磺丙基醚α-环糊精聚合物（SPE-α-CDP）、β-环糊精聚合物（SPE-β-CDP）、γ-环糊精聚合物（SPE-γ-CDP，）的步骤如下：
1）室温下将α-环糊精或β-环糊精或γ-环糊精溶解于质量分数为30%-50%的氢氧化钠溶液中，搅拌0.5-2h使羟基充分解离，加入1-25倍当量的环氧氯丙烷，保持快速搅拌，65-85℃下反应，在形成凝胶前停止反应，加盐酸调pH值至中性，反应液浓缩得到α-环糊精聚合物或β-环糊精聚合物或γ-环糊精聚合物；
2）将上述制得的α-环糊精聚合物或β-环糊精聚合物或γ-环糊精聚合物溶于质量分数为20%-30%的氢氧化钠溶液中，搅拌0.5-2h，缓慢滴加6-24倍当量的1,3-丙烷磺内酯，加完后在65-85℃反应3-7h，冷却至室温，盐酸中和后进行透析以除去未反应的单体，最后经冻干得到磺丙基醚α-环糊精或磺丙基醚β-环糊精或磺丙基醚γ-环糊精聚合物。
本发明中所得磺丙基醚环糊精聚合物，包括磺丙基醚α-环糊精、磺丙基醚β-环糊精和磺丙基醚γ-环糊精聚合物，通过元素分析、四氮唑蓝法、间接紫外法等手段进行表征，具体实施方案原理如下：
1）元素分析法
通过测定不同磺丙基醚环糊精单体的C元素、S元素含量，即可通过元素含量比例计算产物中磺酸根的含量，继而得到产物的平均取代度。
2）四氮唑蓝法
四氮唑蓝能与还原性糖作用生成深蓝色二甲月替色素，其在660nm左右有最大吸收，故可以用作还原糖的测定。在酸性条件下环糊精会分解成葡萄糖，故也可将此法用来测定环糊精聚合物中环糊精的含量。
将四氮唑蓝溶于氢氧化钠溶液中，与酒石酸钾钠溶液等体积混合后即可得到显色剂。取葡萄糖加水溶解，配置成不同浓度的葡萄糖标准溶液，在此溶液中加入适量的显色剂，煮沸3min，冷却后测定其在660nm处的吸光值并绘制标准曲线。将磺丙基醚环糊精聚合物在浓硫酸下回流水解成葡萄糖，配置成一定浓度的溶液，同样加入相同量的显色剂，测定其在660nm处的吸光值，即可根据标准曲线计算其中环糊精的含量。
3）间接紫外法
间接紫外法可用于毛细管电泳中以检测分析那些没有足够强的紫外吸收的物质。这里用间接紫外法对比了磺丙基醚环糊精单体和磺丙基醚环糊精聚合物的取代均一性。背景缓冲液选用具有紫外吸收的对甲苯磺酸-三（羟甲基）氨基甲烷(Tris)缓冲液，其中的对甲苯磺酸提供了背景吸收，紫外吸收较弱的磺丙基醚环糊精单体和磺丙基醚环糊精聚合物经过检测窗口时就会出现倒峰。为了更好的证明待检测分子的电性，我们在样品溶液中加入了DMF作为中性标记物。通过峰面积大小以及出峰时间和个数等信息验证聚合物取代均一性。
本发明所合成的新型磺丙基醚环糊精聚合物（包括磺丙基醚α-环糊精、磺丙基醚β-环糊精和磺丙基醚γ-环糊精聚合物）作为缓冲液添加剂，在毛细管电泳中对手性化合物对映体进行分离，具体技术方案如下：
配制不同pH值的基质缓冲液，经0.45μm水系滤膜过滤后，向其中加入磺丙基醚α-环糊精或磺丙基醚β-环糊精或磺丙基醚γ-环糊精聚合物得电泳运行缓冲液；使用毛细管电泳仪设备，将毛细管活化冲洗后，向毛细管中充满上述电泳运行缓冲液，开启电泳电压，电泳场强为50-1000V/cm，根据不同手性药物的性质选择检测手性化合物方法；分离条件为：所述磺丙基醚α-环糊精或磺丙基醚β-环糊精或磺丙基醚γ-环糊精聚合物添加浓度为0.1%-6.0%；电泳运行缓冲液pH 1.50-12.50；电泳运行缓冲液浓度为5-200mmol/L；运行电压1-11kV；温度17-37℃；有机添加剂含量0-50%。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
根据本发明的设计思路和目的，通过缩聚法分别合成了磺丙基醚α-环糊精、磺丙基醚β-环糊精、磺丙基醚γ-环糊精单体和磺丙基醚α-环糊精、磺丙基醚β-环糊精、磺丙基醚γ-环糊精聚合物，通过磺酸化、聚合两步法或聚合、磺酸化两步法合成了取代均一的磺丙基醚α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精聚合物，此两步合成法步骤简单、聚合物纯化处理方便，不同聚合物制备批次间差异小，易于获得磺酸化均一、离子强度低、溶解度高、手性拆分能力强、价廉、可回收再利用的聚合磺酸化环糊精手性拆分剂。在合成成本和合成时间上要远远优于其他单一取代的衍生化环糊精手性拆分剂。更重要的是，本发明提出的制备环糊精聚合物以获得环糊精衍生物取代位置和取代度均一的思想通过手性拆分获得了证实，合成的环糊精衍生化聚合物拆分手性化合物的能力均高于环糊精单体和未衍生化环糊精聚合物。此外，本发明合成得到的磺丙基醚环糊精聚合物在CE手性分离中还表现出以下优势：（1）相对于小分子环糊精衍生物而言，衍生化的环糊精聚合物对CE运行电流的贡献较小；（2）合成的衍生化环糊精聚合物可以通过透析等简单方法进行回收再利用。
附图说明
图1（A）间接紫外法测定缩聚型SPE-β-CD的电泳图；
图1（B）间接紫外法测定缩聚型SPE-β-CDP的电泳图；
图2是不同添加浓度的SPE-β-CD及SPE-β-CDP对CE运行电流的影响的电泳图；
图3是SPE-β-CDP分离手性化合物的典型电泳图，其中a曲线为华法林，b曲线为安息香，c曲线为沙丁胺醇，d曲线为特布他林，e曲线为维拉帕米，f曲线为***，g曲线为异丙嗪；
图4（A）和图4（B）是不同磺化度的SPE-γ-CDP分离手性化合物对比电泳图，其中图4（A）为华法林，图4（B）为沙丁胺醇；
图5是不同浓度SPE-β-CDP对特布他林迁移时间及分离度的影响的电泳图；
图6是运行缓冲液pH对华法林迁移时间及分离度的影响的电泳图；
图7是甲醇为有机添加剂时对异丙嗪迁移时间及分离度的影响的电泳图；
图8是不同分离电压下对华法林迁移时间及分离度的影响的电泳图；
图9是温度对异丙嗪迁移时间及分离度的影响的电泳图；
图10是缓冲液浓度对异丙嗪迁移时间及分离度的影响的电泳图；
图11（A）和图11（B）是SPE-β-CDP与SPE-β-CD对手性化合物拆分效果对比的电泳图，其中：图11（A）为安息香，图11（B）为华法林；
图12是不同批次的SPE-γ-CDP分离维拉帕米的对比电泳图；
图13是回收SPE-γ-CDP聚合物与新合成聚合物对异丙嗪的分离效果对比电泳图。
具体实施方式
本发明提出环糊精聚合物衍生化后取代度和取代位置易达到统计学上的均一的设计思想，从而在手性拆分中获得较高的拆分效果，且衍生化环糊精聚合物具有水溶性高、经济、电泳时产生电流低、可回收再利用等优点，在此基础上本发明提供了磺丙基醚α-环糊精、磺丙基醚β-环糊精和磺丙基醚γ-环糊精聚合物的合成方法及其在毛细管电泳手性化合物拆分中的应用，以下通过实施例讲述本发明的详细过程，提供实施例是为了理解的方便，绝不是限制本发明。
实施例1：按照先磺酸化再聚合的反应步骤，合成SPE-β-CDP
9g重结晶β-CD缓慢加入到20mL 20%(w/v)的NaOH溶液中。室温搅拌1h，缓慢滴加4.2mL 1,3-丙磺烷内酯(1,3-PS)，混合物在75℃下反应3h。停止反应后冷却至室温，用6mol/L的HCl中和至中性，浓缩反应液烘干得浅黄色固体SPE-β-CD 11.58g，其产率为87.67%。
4g上述磺丙基醚β-环糊精溶于4mL 30%(w/v)的NaOH溶液中，搅拌0.5h至全部溶解。加入2mL环氧氯丙烷（Ep），保持快速搅拌，75℃下反应3h后停止反应，冷却至室温，用6mol/L的HCl中和，倒入分子截留量为7000的透析袋中，在去离子水中透析以除去未反应的单体。透析液浓缩冻干得疏松固体SPE-β-CDP 3.58g，其产率为48.64%。
实施例2：按照先磺酸化再聚合的反应步骤，合成SPE-α-CDP
称取3.0000g α-环糊精放入圆底烧瓶，加入6.0mL 20%(w/v)的NaOH溶液中，常温搅拌溶解0.5h，加入2.6mL 1,3-PS，75℃下反应3h，反应毕，冷却至室温，用稀HCl调节pH至中性。浓缩反应液烘干得浅黄色固体SPE-α-CD 6.2162g。
称取磺丙基醚α-环糊精单体3.0064g放入圆底烧瓶，加6.0mL 30%(w/v)的NaOH溶液中，常温搅拌溶解0.5h，加入4mL的Ep，75℃下反应3h，反应完毕冷却至室温，用稀HCl调pH至中性。用分子截留量7000的透析膜透析以除去未反应的单体，透析液旋转蒸发浓缩烘干得SPE-α-CDP 2.3160g。
实施例3：按照先磺酸化再聚合的反应步骤，合成不同聚合度的SPE-γ-CDP
称取10g γ-CD缓慢加入到20mL 20%(w/v)NaOH溶液中。室温搅拌0.5h，缓慢滴加7.7mL 1,3-PS，混合物在75℃下反应3h。停止反应后冷却，用6mol/L的HCl中和，浓缩反应液烘干得浅黄色固体SPE-γ-CD 20.9536g。
然后合成下述不同聚合度的SPE-γ-CDP：
（1）2.0057g上述SPE-γ-CD溶于1.8mL 30%(w/v)的NaOH溶液中，搅拌0.5h至全部溶解。加入0.6mL(5eq)Ep，保持快速搅拌，75℃下反应3h后停止，冷却至室温，用6mol/L的HCl中和，倒入截留分子量为7000的透析袋中，在去离子水中透析2d，每隔12h换一次水。透析液浓缩冻干得SPE-γ-CDP 1.5955g。
（2）2.0084g上述SPE-γ-CD溶于2mL 30%(w/v)的NaOH溶液中，搅拌0.5h至全部溶解。加入1.2mL(10eq)Ep，保持快速搅拌，75℃下反应3h后停止，冷却至室温，用6mol/L的HCl中和，倒入截留分子量为7000的透析袋中，在去离子水中透析2d，每隔12h换一次水。透析液浓缩冻干得SPE-γ-CDP 1.1646g。
（3）3.0078g上述SPE-γ-CD溶于4mL 30%(w/v)的NaOH溶液中，搅拌0.5h至全部溶解。加入2.7mL(15eq)Ep，保持快速搅拌，75℃下反应3h后停止，冷却至室温，用6mol/L的HCl中和，倒入截留分子量为7000的透析袋中，在去离子水中透析2d，每隔12h换一次水。透析液浓缩冻干得SPE-γ-CDP 2.1308g。
（4）2.0078g上述SPE-γ-CD溶于5mL 30%(w/v)的NaOH溶液中，搅拌0.5h至全部溶解。加入2.4mL(20eq)Ep，保持快速搅拌，75℃下反应3h后停止，冷却至室温，用6mol/L的HCl中和，倒入截留分子量为7000的透析袋中透析以除去未反应的单体。透析液浓缩冻干得SPE-γ-CDP 2.4088g。
实施例4：按照先磺酸化再聚合的反应步骤，合成不同磺化度的SPE-γ-CDP
（1）称取10g γ-CD缓慢加入到20mL 20%(w/v)NaOH溶液中。室温搅拌0.5h，缓慢滴加7.7mL 1,3-PS，混合物在75℃下反应3h至两相形成均相溶液。停止反应后冷却，用6mol/L的HCl中和至中性，浓缩反应液烘干得浅黄色固体SPE-γ-CD 20.9536g。
（2）称取7g γ-CD缓慢加入到20mL 20%(w/v)NaOH溶液中。室温搅拌0.5h，缓慢滴加7.7mL 1,3-PS，混合物在75℃下反应3h至两相形成均相溶液。停止反应后冷却，用6mol/L的HCl中和至中性，浓缩反应液烘干得浅黄色固体SPE-γ-CD 20.7322g。
（3）称取5g γ-CD缓慢加入到20mL 20%(w/v)NaOH溶液中。室温搅拌0.5h，缓慢滴加7.7mL 1,3-PS，混合物在75℃下反应3h至两相形成均相溶液。停止反应后冷却，用6mol/L的HCl中和至中性，浓缩反应液烘干得浅黄色固体SPE-γ-CD 13.0267g。
分别称取3.00g由上述（1）、（2）、（3）得到的不同磺化度的SPE-γ-CD溶于4mL30%(w/v)的NaOH溶液中，搅拌0.5h至全部溶解。加入2.7mL(15eq)Ep，保持快速搅拌，75℃下反应3h后停止，冷却至室温，用6mol/L的HCl中和，倒入分子截留量为7000的透析袋中透析以除去未反应的单体。透析液浓缩冻干后分别得SPE-γ-CDP产品2.1308g，2.2801g，1.2333g。
实施例5：按照先聚合再磺酸化的反应步骤，合成SPE-γ-CDP
1）称取20g γ-CD溶解于40mL30%(w/v)的NaOH溶液中，室温搅拌0.5h，加入12mL(10eq)Ep，保持快速搅拌，75℃下反应3h，冷却至室温后加6mol/L的HCl调pH值至中性，反应液浓缩得到γ-CDP产品17.4844g；
2）称取5.0023g γ-CDP溶于10mL 20%(w/v)NaOH溶液中，室温搅拌0.5h，缓慢滴加4mL 1,3-PS，在75℃反应3h，冷却至室温，6mol/L的HCl中和后倒入分子截留量为7000的透析袋中进行透析以除去未反应的单体，最后经冻干得到SPE-γ-CDP产品3.7390g。
实施例6：分别利用元素分析法、四氮唑蓝法和间接紫外法对实施例1合成得到的SPE-β-CDP的表征
（1）利用元素分析法表征
使用Vario Micro元素分析仪测定SPE-β-CDP的各元素含量，元素分析结果碳元素含量：36.42%，硫元素含量：5.69%，碳硫元素含量比WC/WS=6.42，据此计算得每个CD分子上磺酸基的平均取代度为3.0。
（2）利用四氮唑蓝法测定环糊精含量
100mg四氮唑蓝加入到50mL 0.1mol/L NaOH中，超声分散，搅拌下将混合物加热到60℃，形成黄色透明溶液。配制1.0mol/L酒石酸钾钠溶液。将两种溶液滤膜过滤后等体积混合，即得到含0.1%四氮唑蓝，0.05mol/L NaOH，0.5mol/L酒石酸钾钠的显色剂溶液。
取葡萄糖粉末烘干至恒重，准确称取0.1000g葡萄糖加水溶解，加水定容至100mL，即得1mg/mL葡萄糖水溶液。并用此母液稀释配制浓度分别为20、40、60、80、100μg/mL的葡萄糖水溶液，即为标准溶液。
取SPE-β-CDP固体烘干至恒重，称取0.05g SPE-β-CDP置于圆底烧瓶中，加入30mL0.5mol/L H2SO4，加热至沸腾并回流12h。完毕后，用NaOH调节反应液pH至中性，过滤，稀释定容至100mL得待测样品溶液，备用。
分别取4mL上述显色剂加入到洁净试管中，再分别加入500μL不同浓度的葡萄糖标准溶液或待测样品溶液。这时，试管中标准溶液浓度依次变为2.2μg/mL,4.4μg/mL,6.6μg/mL,8.8μg/mL,11.0μg/mL。将上述各溶液加热煮沸3min，冷却3min，扫描其最大吸收波长，并在此波长下测定各标准溶液的吸光值以绘制标准曲线，在相同条件下测定待测样品溶液的吸光值，根据标准曲线计算得每克聚合物中含有164μmol β-CD单元。
（3）利用间接紫外法验证聚合物取代均一性
配制20mmol/L pH 8.0的对甲苯磺酸-Tris背景缓冲液，并用0.45μm水系滤膜过滤，备用。取SPE-β-CD、SPE-β-CDP样品各20mg溶解在990uL去离子水中，各加入10uL中性标记物DMF，涡旋溶解混匀，即得到20mg/mL、含中性标记物1%的样品溶液。使用Bio-rad HPE100毛细管电泳仪进行测定，毛细管总长度为27cm，有效长度为20cm，内径为75μm，未涂层，将毛细管依次用NaOH溶液和H2O冲洗，然后向毛细管中充满缓冲液，开启电泳电压，8kV进样5s，10kV进行电泳，于214nm下室温检测样品出峰情况。实验结果表明，SPE-β-CDP的电荷分布范围较其对应的SPE-β-CD单体明显变窄，如图1（A）和图1（B）所示，SPE-β-CD单体的谱图显示主要有三个不同的取代度范围，而SPE-β-CDP聚合物只有一个峰，表明SPE-β-CDP聚合物分子之间的磺酸基取代度很接近。这也证明，通过缩聚法得到的聚合物能解决小分子负电环糊精取代度的不均一性。除此之外，聚合物的峰较窄也说明其取代度的高均一性，这种作用就是本发明制备的聚合物均一化效应。
实施例7：本发明合成的SPE-β-CDP与天然β-CD溶解度测定对比
合成的SPE-β-CDP因为其带有磺酸根，会比未衍生化的天然β-CD有更好的溶解性。在室温下，向1mL蒸馏水中加入SPE-β-CDP，超声使其溶解，结果发现，SPE-β-CDP溶解度>100g/100g水，远超过β-CD在25℃时溶解度（1.85g/100g水），验证了SPE-β-CDP水溶性良好的优势，扩大了环糊精在电泳缓冲液中的浓度范围，更易于溶解在运行缓冲液中改善手性分离效果。
实施例8：本发明SPE-β-CD和SPE-β-CDP对CE运行电流影响的对比
由于磺酸基团的存在，使用含磺酸基团的强离子型CD时会大大增加CE电泳缓冲液的离子强度，导致运行电流升高，产生过多焦耳热，不利于手性分离。本专利通过将环糊精单体聚合，利用（1）在聚合过程引入中性基团，使聚合物的质核比降低，故在电场中的迁移速度减慢使电流变小；（2）聚合物的高分子量增加了电泳缓冲液粘度，也会降低聚合物的泳动速度而降低电流；（3）聚合物具有协同作用的特性，在提高手性拆分能力的同时，减少磺酸基团数量从而减弱SPE-β-CD对运行电流的这种不良影响。在对比SPE-β-CD和SPE-β-CDP手性分离过程中，通过记录其电泳时对电流的影响（图2），可以发现，虽然随着SPE-β-CDP添加量的增加，电流亦呈线性增加。但其电流变化趋势远低于SPE-β-CD。
实施例9：本发明合成的SPE-β-CDP手性化合物分离
配制20mmol/L pH 2.50的磷酸-三乙胺缓冲液，经0.45μm水系滤膜过滤后，在1mL磷酸-三乙胺缓冲液中加入20mg合成的SPE-β-CDP，得到含2%的SPE-β-CDP的电泳运行缓冲液。使用Beckman2050 P/ACE毛细管电泳仪，毛细管总长度为37cm，有效长度为30cm，内径为50μm，未涂层，将毛细管依次用NaOH溶液和H2O冲洗，然后向毛细管中充满缓冲液，0.5psi压力进样5s，负模式进行电泳，于37℃、214nm下拆分华法林，安息香，沙丁胺醇，特布他林，维拉帕米，***，异丙嗪7种模型手性化合物，分离条件详见图3和表1。
表1SPE-β-CDP作为手性拆分剂时对手性化合物的分离结果
注：分离度Rs=2(t2-t1)/(w1+w2)，其中t1和t2指两对映体的迁移时间，w1和w2指两对映体的峰宽。
实施例10：比较不同聚合度的SPE-γ-CDP分离手性化合物的能力
配制20mmol/L pH 2.50的Tris-H3PO4缓冲液，经0.45μm水系滤膜过滤后，在1mL此缓冲液中加入20mg合成的不同聚合度的SPE-γ-CDP得含2%的SPE-γ-CDP的电泳运行缓冲液。仪器条件及毛细管前处理同实施例9，拆分华法林，异丙嗪这两种手性化合物并比较了他们的分离度，结果如表2所示。从表格可以清晰的看出当Ep与γ-CD比例为15倍时得到的SPE-γ-CDP作为手性拆分剂时分离两种模型手性化合物的结果最好，因为随着环氧氯丙烷的增加，环糊精聚合能力增强，得到的聚合物分子上携带的磺酸基团越多，与手性分子作用力更强，溶液粘度增加，作用时间增加，分离能力越好，但是升到一定程度之后再增加Ep的量，Ep过多而引起本身的自聚反应，得到的产品单位重量上含有的磺酸基团反而下降，作用力降低，分离度反而下降。
表2不同聚合度的SPE-γ-CDP作为手性拆分剂时对两种模型手性化合物的分离结果
实施例11：比较不同磺化度的SPE-γ-CDP分离手性化合物的能力
配制20mmol/L pH 2.50的Tris-H3PO4缓冲液，经0.45μm水系滤膜过滤后，在1mL此缓冲液中加入10mg合成的不同磺化度的SPE-γ-CDP得含1%的SPE-γ-CDP的电泳运行缓冲液。仪器条件及毛细管前处理同实施例9，拆分华法林和沙丁胺醇这两种手性化合物并比较了他们的分离度，结果如图4所示，可以看出随着磺化度的增加手性化合物的分离度有所改善，但是并没有引起分离度明显的增加。
实施例12：比较通过先磺酸化再聚合两步得到的磺丙基醚环糊精聚合物与通过先聚合再磺酸化的方法得到的磺丙基醚环糊精聚合物的分离能力。
配制20mmol/L pH 2.50的Tris-H3PO4缓冲液，经0.45μm水系滤膜过滤后，在1mL此缓冲液中加入10mg合成的SPE-γ-CDP得含1.0%的SPE-γ-CDP的电泳运行缓冲液。仪器条件及毛细管前处理同实施例9，拆分不同的模型手性化合物并比较了他们的分离度，如表3所示，先磺酸化的得到的SPE-γ-CDP因为并未进行聚合反应所以可利用的羟基较多，磺酸化后所携带的磺酸基多于先聚合的SPE-γ-CDP，所以与手性化合物作用力强，分离度增加。
表3不同反应顺序得到的SPE-γ-CDP分离手性化合物能力比较
实施例13：比较不同分离条件时手性化合物在SPE-β-CDP下的分离
配制20mmol/LpH 2.50的磷酸-三乙胺缓冲液，经0.45μm水系滤膜过滤后，在1mL此缓冲液中分别加入2mg、5mg、10mg、20mg合成的SPE-β-CDP得含0.2%、0.5%、1%和2%的SPE-β-CDP的电泳运行缓冲液。仪器条件及毛细管前处理同实施例9，拆分7种手性化合物并比较了他们的分离度，其中，特布他林的分离结果如图5所示。
配制20mmol/L的磷酸-三乙胺缓冲液，pH分别为2.5,3.8,5.2,6.2和7.0，经0.45μm水系滤膜过滤后，分别在1mL上述不同缓冲液中加入5mg合成的SPE-β-CDP得含0.5%的SPE-β-CDP的电泳运行缓冲液。仪器条件及毛细管前处理同实施例9，拆分7种手性化合物并比较了他们的分离度，其中，不同pH下华法林的典型分离结果如图6所示。
配制20mmol/L pH 2.50的磷酸-三乙胺缓冲液，经0.45μm水系滤膜过滤后，将此缓冲液与甲醇按比例混合，使得甲醇含量分别为0%、10%、15%、20%、30%，在1mL此混合缓冲液中加入5mg中合成的SPE-β-CDP得含0.5%的SPE-β-CDP的电泳运行缓冲液，仪器条件及毛细管前处理同实施例9，拆分3种手性化合物并比较了他们的分离度，其中，异丙嗪的典型分离结果如图7所示。
配制20mmol/L pH 2.50的Tris-H3PO4缓冲液，经0.45μm水系滤膜过滤后，在1mL此缓冲液中加入10mg合成的SPE-γ-CDP得含1.0%的SPE-γ-CDP的电泳运行缓冲液。仪器条件及毛细管前处理同实施例9，分离时尝试用-5kV至-11kV的分离电压拆分不同的手性化合物并比较了他们的分离度，其中，华法林的典型分离结果如图8所示。
配制20mmol/L pH 2.50的Tris-H3PO4缓冲液，经0.45μm水系滤膜过滤后，在1mL此缓冲液中加入10mg合成的SPE-γ-CDP得含1.0%的SPE-γ-CDP的电泳运行缓冲液。仪器条件及毛细管前处理同实施例9，分离时尝试用17℃至37℃的分离温度拆分不同的手性化合物并比较了他们的分离度，其中，异丙嗪的典型分离结果如图9所示。
配制pH 2.50的Tris-H3PO4缓冲液，浓度分别为10mmol/L、15mmol/L、20mmol/L和25mmol/L，经0.45μm水系滤膜过滤后，在1mL上述不同缓冲液中加入10mg合成的SPE-γ-CDP得含1.0%的SPE-γ-CDP的电泳运行缓冲液。仪器条件及毛细管前处理同实施例9，拆分不同的手性化合物并比较了他们的分离度，其中，异丙嗪的典型分离结果如图10所示。
实施例14：对比SPE-β-CDP、SPE-β-CD和β-CD聚合物手性识别能力
配制20mmol/L pH 2.50的磷酸-三乙胺缓冲液，经0.45μm水系滤膜过滤后，在1mL此缓冲液中分别加入合成的SPE-β-CDP、SPE-β-CD或β-CDP得含SPE-β-CDP、SPE-β-CD或β-CD的电泳运行缓冲液。仪器条件及毛细管前处理同实施例9，对比分离华法林和安息香，SPE-β-CDP显示出相对较高的对映体选择性。如，SPE-β-CD只能部分分离华法林和安息香，而SPE-β-CDP能基线分离这两种药物，见图11。与此同时，数据显示使用聚合物作为手性添加剂时各对映体的出峰时间更早，这也证明聚合物与分析物之间的作用力更强。通过对比SPE-β-CDP与未衍生化的β-CDP对华法林、安息香和特布他林拆分实验发现：在优化分离条件后，未衍生化的β-CD聚合物对华法林各对映体的分离度仅为0.55，无法分离安息香；而SPE-β-CDP对华法林和安息香的分离度依次为3.34和1.66，此对比结果说明本专利开发的新型磺酸化环糊精聚合物具有更高的手性拆分能力，可作为新型的手性拆分剂供选择使用。
实施例15：不同合成批次的SPE-γ-CDP分离能力对比
配制20mmol/L pH 2.50的Tris-H3PO4缓冲液，经0.45μm水系滤膜过滤后，在1mL此缓冲液中加入10mg不同日期合成的不同批次的SPE-γ-CDP得含1.0%的SPE-γ-CDP的电泳运行缓冲液。仪器条件及毛细管前处理同实施例9，拆分不同的手性化合物并比较了他们的分离度，其中维拉帕米的典型分离结果如图12所示。从图12中可以看出不同批次的SPE-γ-CDP分离能力相似，证明磺丙基醚环糊精聚合物具有较好的重复性，能够稳定的分离手性化合物。
实施例16：SPE-γ-CDP的回收再利用
配制20mmol/L pH 2.50的Tris-H3PO4缓冲液，经0.45μm水系滤膜过滤后，在1mL此缓冲液中加入10mg回收的SPE-γ-CDP或新合成的SPE-γ-CDP得含1.0%的SPE-γ-CDP的电泳运行缓冲液。仪器条件及毛细管前处理同实施例9，拆分不同的手性化合物并比较了他们的分离度，其中异丙嗪的典型分离结果如图13所示。图13表明聚合物回收前后对其呈现了类似的手性识别能力，从而证实了该聚合物可以回收再利用，可进一步大大降低手性化合物分析的成本。
以上的实施例适合于本发明提及的所有磺丙基醚环糊精聚合物，即磺丙基醚α-环糊精聚合物、磺丙基醚β-环糊精聚合物和磺丙基醚γ-环糊精聚合物的合成、表征及应用，当然，亦可用于其余环糊精聚合物，所有磺丙基醚环糊精聚合物合成条件，分离能力略有不同，但总体趋势相同。以上所述，仅是本发明的部分实施例而已，并非对本发明做任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对上述实施例作的任何简单的修改，等同变化与修饰，均属于本发明技术方案范围内。
Claims (9)
1.一种新型合成思路以获得取代位置和取代度均一的衍生化环糊精手性拆分剂，其特征在于，将取代不均一的衍生化环糊精连接成聚合物。
2.一种新型磺丙基醚环糊精聚合物，其化学结构为：
CD-OH表示环糊精，m，n均为自然数且均≥1。
3.一种根据权利要求2所述新型磺丙基醚环糊精聚合物的合成方法，其特征在于，由环糊精经过磺酸化和聚合两步反应制备得到，制备的反应路线如下：
其中：R=-(CH2)3SO3 -Na+或-OH，
CD-OH表示环糊精，m，n均为自然数且均≥1。
4.根据权利要求3所述新型磺丙基醚环糊精聚合物的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）室温下将α-环糊精或β-环糊精或γ-环糊精溶解于质量分数为20%-30%的氢氧化钠溶液中，搅拌0.5-2h使羟基充分解离，缓慢滴加6-24倍当量的1,3-丙烷磺内酯，滴加完后在65-85℃反应3-7h，冷却至室温，加盐酸调pH值至中性，反应液浓缩得到磺丙基醚α-环糊精或磺丙基醚β-环糊精或磺丙基醚γ-环糊精单体；
2）将上述制得的磺丙基醚α-环糊精或磺丙基醚β-环糊精或磺丙基醚γ-环糊精单体溶于质量分数为30%-50%的氢氧化钠溶液中，搅拌0.5-2h，加入1-25倍当量的环氧氯丙烷，保持快速搅拌，65-85℃下反应，在形成凝胶前停止反应，盐酸中和后进行透析以除去未反应的单体，最后经冻干得到磺丙基醚α-环糊精或磺丙基醚β-环糊精或磺丙基醚γ-环糊精聚合物。
5.一种根据权利要求2所述新型磺丙基醚环糊精聚合物的合成方法，其特征在于，由环糊精经过聚合和磺酸化两步反应制备得到，制备的反应路线如下：
其中：R＝-(CH2)3SO3 -Na+或-OH，
CD-OH表示环糊精，m，n均为自然数且均≥1。
6.根据权利要求5所述新型磺丙基醚环糊精聚合物的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）室温下将α-环糊精或β-环糊精或γ-环糊精溶解于质量分数为30%-50%的氢氧化钠溶液中，搅拌0.5-2h使羟基充分解离，加入1-25倍当量的环氧氯丙烷，保持快速搅拌，65-85℃下反应，在形成凝胶前停止反应，冷却至室温后加盐酸调pH值至中性，反应液浓缩得到α-环糊精聚合物或β-环糊精聚合物或γ-环糊精聚合物；
2）将上述制得的α-环糊精聚合物或β-环糊精聚合物或γ-环糊精聚合物溶于质量分数为20%-30%的氢氧化钠溶液中，搅拌0.5-2h，缓慢滴加6-24倍当量的1,3-丙烷磺内酯，加完后在65-85℃反应3-7h，冷却至室温，盐酸中和后进行透析以除去未反应的单体，最后经冻干得到磺丙基醚α-环糊精或磺丙基醚β-环糊精或磺丙基醚γ-环糊精聚合物。
7.一种根据权利要求2新型磺丙基醚环糊精聚合物在毛细管电泳手性化合物拆分中的应用。
8.根据权利要求7所述新型磺丙基醚环糊精聚合物在毛细管电泳手性化合物拆分中的应用，是将磺丙基醚α-环糊精或磺丙基醚β-环糊精或磺丙基醚γ-环糊精聚合物作为缓冲液添加剂，在毛细管电泳中对手性化合物对映体进行分离。
9.根据权利要求8所述新型磺丙基醚环糊精聚合物在毛细管电泳手性化合物拆分中的应用，其具体步骤包括：
配制不同pH值的基质缓冲液，经0.45μm水系滤膜过滤后，向其中加入磺丙基醚α-环糊精或磺丙基醚β-环糊精或磺丙基醚γ-环糊精聚合物得电泳运行缓冲液；使用毛细管电泳仪设备，将毛细管活化冲洗后，向毛细管中充满上述电泳运行缓冲液，开启电泳电压，电泳场强为50-1000V/cm，根据不同手性药物的性质选择检测方法测试手性化合物；
分离条件为：所述磺丙基醚α-环糊精或磺丙基醚β-环糊精或磺丙基醚γ-环糊精聚合物添加浓度为0.1%-6.0%；电泳运行缓冲液pH 1.50-12.50；电泳运行缓冲液浓度为5-200mmol/L；运行电压1-11kV；温度17-37℃；有机添加剂含量0-50%。
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|---|---|
| CN (1) | CN102924708A (zh) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105778023A (zh) * | 2016-03-17 | 2016-07-20 | 南通瑞特建筑材料有限公司 | 一种聚羧酸减水剂及其制备方法 |
| CN106883322A (zh) * | 2017-03-08 | 2017-06-23 | 天津大学 | 多元环糊精聚合物的制备及其在ce手性分析中的应用 |
| CN112010724A (zh) * | 2020-09-04 | 2020-12-01 | 南京师范大学常州创新发展研究院 | 萘衍生物异构体分离及其与环糊精结合常数测定的方法 |
| CN112824888A (zh) * | 2020-07-21 | 2021-05-21 | 宁波大学 | 一种基于β环糊精的氨基苯磺酸位置异构体的分析试剂和方法 |
| CN114280134A (zh) * | 2021-09-30 | 2022-04-05 | 宁波大学 | 一种用于两对联萘衍生物对映体结构分析的试剂及其方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1603817A (zh) * | 2004-11-12 | 2005-04-06 | 中国科学院上海有机化学研究所 | 键合环糊精类化合物的高效液相色谱有机相整体柱及其制备方法 |
-
2012
- 2012-11-01 CN CN2012104305974A patent/CN102924708A/zh active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1603817A (zh) * | 2004-11-12 | 2005-04-06 | 中国科学院上海有机化学研究所 | 键合环糊精类化合物的高效液相色谱有机相整体柱及其制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 刘宇宏等: "磺酸化β-环糊精聚合物的合成及其在毛细管电泳手性拆分中的应用", 《中华中医药学会中药分析分会第五届学术交流会论文集》, 1 July 2012 (2012-07-01), pages 260 - 266 * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105778023A (zh) * | 2016-03-17 | 2016-07-20 | 南通瑞特建筑材料有限公司 | 一种聚羧酸减水剂及其制备方法 |
| CN106883322A (zh) * | 2017-03-08 | 2017-06-23 | 天津大学 | 多元环糊精聚合物的制备及其在ce手性分析中的应用 |
| CN112824888A (zh) * | 2020-07-21 | 2021-05-21 | 宁波大学 | 一种基于β环糊精的氨基苯磺酸位置异构体的分析试剂和方法 |
| CN112824888B (zh) * | 2020-07-21 | 2022-07-12 | 常州磐诺仪器有限公司 | 一种基于β环糊精的氨基苯磺酸位置异构体的分析试剂和方法 |
| CN112010724A (zh) * | 2020-09-04 | 2020-12-01 | 南京师范大学常州创新发展研究院 | 萘衍生物异构体分离及其与环糊精结合常数测定的方法 |
| CN112010724B (zh) * | 2020-09-04 | 2023-09-08 | 南京师范大学常州创新发展研究院 | 萘衍生物异构体分离及其与环糊精结合常数测定的方法 |
| CN114280134A (zh) * | 2021-09-30 | 2022-04-05 | 宁波大学 | 一种用于两对联萘衍生物对映体结构分析的试剂及其方法 |
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