CN102879576B - 早孕检测试纸条及其检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种早孕检测试纸条及其检测方法，所述试纸条由样品垫、标记垫、硝酸纤维素膜、吸水纸顺次搭接粘贴在底板上构成，所述标记垫上涂覆有胶体金标记的鼠抗β-HCG单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜包括包被有鼠抗α-HCG单克隆抗体的检测区和包被有抗鼠IgG多克隆抗体的控制区，在所述检测区和控制区之间设置有包被有毒品抗原的对比区，所述标记垫上还涂覆有胶体金标记的所述毒品的抗体。本发明在现有的早孕检测试纸条的基础上，通过在检测区和控制区之间设置对比区，从而根据对比区与检测区的颜色深浅比较，来实现预测怀孕时间的目的。检测方法简单，适于广泛推广。

Description

早孕检测试纸条及其检测方法

技术领域

本发明属于医学检验领域，特别是涉及一种早孕检测试纸条及其检测方法。

背景技术

多数妇女怀孕6～8周以后可能出现头晕、乏力、嗜睡、唾液分泌增多、食欲不振、恶心呕吐等现象，呕吐多在清晨或空腹时发生。有些孕妇特别喜好吃酸性和生冷食物。上述这些现象称为早孕反应，多在怀孕后12周左右自行消失。少数人的早孕反应比较严重，持续时间也较长。

目前市面上大多数早孕检测试纸是采用胶体金方法进行检测的，但均只能告知被检者有或没有怀孕，不能知道大概的怀孕时间。而对于一些意外怀孕的女性在6～8周之前是没有明显的早孕反应，此时需要一种经济简单的方法知道怀孕多久，以备对自己后期身体健康等起到提示作用。

发明内容

基于此，本发明提供了一种能得知大概怀孕时间的早孕检测试纸条。

一种早孕检测试纸条，所述试纸条由样品垫、标记垫、硝酸纤维素膜、吸水纸顺次搭接粘贴在底板上构成，所述标记垫上涂覆有胶体金标记的鼠抗β-HCG单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜包括包被有鼠抗α-HCG单克隆抗体的检测区和包被有抗鼠IgG多克隆抗体的控制区，在所述检测区和控制区之间设置有包被有毒品抗原的对比区，所述标记垫上还涂覆有胶体金标记的所述毒品的抗体。

本发明在现有的早孕检测试纸条的基础上，在检测区和控制区之间设置包被有毒品抗原的对比区，并在标记垫上涂覆了胶体金标记的所述毒品的抗体。利用双抗夹心法检测人体尿液中的HCG抗原，如怀孕了，则尿液中含有人体HCG激素，该抗原将与鼠抗β-HCG单克隆抗体及鼠抗α-HCG单克隆抗体结合，并在检测区显色。尿液中含有的人体HCG越多，检测区显色越深。采用竞争抑制法，当尿液标本中没有毒品时，标记的毒品抗体和对比区的毒品抗原结合反应，在对比区显色，而对比区颜色是通过内控控制的(由毒品抗原和毒品抗体的浓度和量所确定)，是固定不变，表示人怀孕6周的显色程度。比较对比区与检测区的颜色深浅，从而实现预测怀孕时间的目的。

在其中一些实施例中，所述对比区包被的毒品抗原为DOA抗原。DOA抗原是指滥用药品抗原，范围较广，一般是由滥用药物小分子添加上一个大分子的蛋白构成。一般说的DOA抗原包括了如THC抗原、MET抗原、***抗原等滥用药品类别的抗原。

在其中一些实施例中，所述对比区包被的毒品抗原为THC抗原、MET抗原或***抗原，所述抗原的包被浓度为0.1-0.5mg/ml。

在其中一个实施例中，所述抗原的包被浓度为0.1mg/ml。

在其中一些实施例中，所述标记垫上涂覆的胶体金标记的毒品的抗体的浓度为0.5～2ug/ml，涂覆量为10cm*12cm/ml。

在其中一个实施例中，所述标记垫上涂覆的胶体金标记的毒品的抗体的浓度为1ug/ml，涂覆量为10cm*12cm/ml。

在其中一些实施例中，所述标记垫上涂覆的胶体金标记的鼠抗β-HCG单克隆抗体的浓度为1.0-1.5mg/ml，涂覆量为0.15-0.2μl/cm。所述检测区包被的鼠抗α-HCG单克隆抗体的浓度为1.0-1.5mg/ml，包被参数为0.15-0.2μl/cm；所述控制区包被的抗鼠IgG多克隆抗体的浓度为1.0-1.5mg/ml，包被参数为0.15-0.2μl/cm。

在其中一个实施例中，所述标记垫上涂覆的胶体金标记的鼠抗β-HCG单克隆抗体的浓度为1.2mg/ml，涂覆量为0.17μl/cm。所述检测区包被的鼠抗α-HCG单克隆抗体的浓度为1.2mg/ml，包被参数为0.17μl/cm；所述控制区包被的抗鼠IgG多克隆抗体的浓度为1.3mg/ml，包被参数为0.18μl/cm。

在其中一些实施例中，所述检测区与控制区之间的间隔为7.0mm。

在其中一些实施例中，所述检测区与对比区之间的间隔为3.5mm。

本发明还提供了一种早孕检测方法，采用上述试纸条，包括以下步骤：将尿液滴加到样品垫上，尿液依次流经标记垫、检测区、对比区、控制区而显色。若检测区、对比区、控制区显色，则表明已怀孕，比较检测区和对比区的颜色，若检测区颜色比对比区颜色深，则怀孕6周以上；若检测区颜色比对比区颜色浅，则怀孕6周以下。若检测区不显色，控制区、对比区显色，则表明未怀孕；若控制区不显色，则表明测试失败。

本发明在现有的早孕检测试纸条的基础上，在检测区和控制区之间设置包被有毒品抗原的对比区，并在标记垫上涂覆了胶体金标记的所述毒品的抗体。利用双抗夹心法检测人体尿液中的HCG抗原，从而在检测区显色，采用竞争抑制法检测尿液标本，当标记的毒品抗体和对比区的毒品抗原结合反应时，在对比区显色，而对比区颜色是通过内控控制的，是固定不变，表示人怀孕6周的显色程度。比较对比区与检测区的颜色深浅，颜色较之深，则怀孕6周以上，较之浅则怀孕不足6周，从而实现预测怀孕时间的目的。同时，本发明试纸条在检测怀孕与否以及怀孕周期的同时，可以检测是否有滥用药物，进而可以提示是否适合妊娠，达到避免畸形胎儿的目的。本发明检测方法简单，适于广泛推广。

附图说明

图1为本发明实施例1的试纸条的结构示意图；

附图标记：1、样品垫；2、标记垫；3、底板；4、硝酸纤维素膜；5、检测区；6、对比区；7、控制区；8、吸水纸。

具体实施方式

以下结合附图和具体实施例来详细说明本发明。

实施例1一种早孕检测试纸条

如图1所示，为本发明的一种早孕检测试纸条的结构示意图，所述试纸条由样品垫1、标记垫2、硝酸纤维素膜4、吸水纸8顺次搭接粘贴在底板3上构成，所述标记垫2上涂覆有胶体金标记的鼠抗β-HCG单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜4包括包被有鼠抗α-HCG单克隆抗体的检测区5和包被有抗鼠IgG多克隆抗体的控制区7，在所述检测区5和控制区7之间还设置有包被有毒品抗原的对比区6，所述标记垫2上还涂覆有胶体金标记的所述毒品的抗体。

在该实施例中，所述毒品为THC(***)。对比区包被的毒品抗原为THC抗原，抗原的包被浓度为0.1mg/ml，包被参数为0.15ul/cm。

所述标记垫上涂覆的胶体金标记的THC的抗体的浓度为1ug/ml，1ml涂布面积为10cm*12cm；所述标记垫上涂覆的胶体金标记的鼠抗β-HCG单克隆抗体的浓度为1.2mg/ml，涂覆量为0.17μl/cm。所述检测区包被的鼠抗α-HCG单克隆抗体的浓度为1.2mg/ml，包被参数为0.17μl/cm；所述控制区包被的抗鼠IgG多克隆抗体的浓度为1.3mg/ml，包被参数为0.18μl/cm。

在该实施例中，所述检测区与控制区之间的间隔为7.0mm。所述检测区与对比区之间的间隔为3.5mm。

该实施例中的试纸条的制备方法如下：

1、硝酸纤维素膜的制备

用包被缓冲液(0.05M pH9.6碳酸盐缓冲液，置4℃备用，下同)稀释鼠抗α-HCG单克隆抗体(检测区T线的包被材料)(厂商：ARISTA)，稀释后鼠抗α-HCG单克隆抗体浓度为1mg/ml；用包被缓冲液稀释THC抗原(对比区的包被材料)(厂商：ARISTA)，稀释后的浓度为0.1mg/ml；用包被缓冲液稀释抗鼠IgG多克隆抗体(控制区C线的包被材料)(厂商：ARISTA)，稀释后抗鼠IgG多克隆抗体的浓度为1mg/ml。控制检测线和控制线两线间隔3.5mm，调试喷膜机，按喷液量(包被参数)为0.15μl/cm进行喷膜包被，包被好后，室温晾干二十分钟后转移至50℃烘箱干燥过夜。

2、标记垫的制备

按常规的标记方法将鼠抗β-HCG单克隆抗体(厂商：ARISTA)标记到胶体金上形成金标结合物，均匀地涂覆在无纺布上，胶体金标记的鼠抗β-HCG单克隆抗体的浓度为1.0mg/ml，涂覆量为0.15μl/cm。37℃干燥房干燥过夜，封袋，置室温密封保存备用。按常规的标记方法将THC抗体标记到胶体金上形成金标结合物，均匀地涂覆在无纺布上，胶体金标记的THC抗体的浓度为1.0ug/ml，1ml涂布面积为10cm*12cm。

3、样品垫的制备

用样品垫处理液(0.5％卵清蛋白，0.01％Tween-20，0.01MPH7.0PBS，0.02％叠氮化钠(防腐剂)，置4℃备用)涂布玻璃纤维，涂布参数为1cm2/ml，37℃干燥房干燥过夜，封袋，置室温密封保存备用。

4、试纸条的制备

把硝酸纤维素膜、吸水纸、标记垫、样品垫粘贴在塑料底板上，组成大板。用切条机将大板切成单条，宽度为4mm。

实施例2一种早孕检测试纸条

该实施例的试纸条的结构与实施例1的试纸条结构相同，除了毒品为MET(***)。对比区包被的毒品抗原为MET抗原，抗原的包被浓度为0.25mg/ml。标记垫上涂覆的胶体金标记的鼠抗β-HCG单克隆抗体的浓度、检测区包被的鼠抗α-HCG单克隆抗体的浓度、控制区包被的抗鼠IgG多克隆抗体的浓度均为1.0mg/ml，涂覆量均为0.15μl/cm。

实施例3一种早孕检测试纸条

该实施例的试纸条的结构与实施例1的试纸条结构相同，除了毒品为***。对比区包被的毒品抗原为***抗原，抗原的包被浓度为0.5mg/ml。标记垫上涂覆的胶体金标记的鼠抗β-HCG单克隆抗体的浓度、检测区包被的鼠抗α-HCG单克隆抗体的浓度、控制区包被的抗鼠IgG多克隆抗体的浓度均为1.5mg/ml，涂覆量均为0.2μl/cm。

实施例4利用实施例1的试纸条进行早孕检测

包括以下步骤：

①将尿液滴加到样品垫上，尿液依次流经标记垫、检测区、对比区、控制区而显色。

②若检测区、对比区、控制区显色，则表明已怀孕，此时比较检测区和对比区的颜色，若检测区颜色比对比区颜色深，则怀孕6周以上；若检测区颜色比对比区颜色浅，则怀孕6周以下。

③若检测区不显色，控制区、对比区显色，则表明未怀孕。

④若控制区不显色，则表明测试失败。

实施例5实施例1的试纸条的灵敏度、特异性

对实施例1的试纸条进行了灵敏度和特异性方面试验，试验结果见表1和表2所示。

表1实施例1的试纸条的灵敏度试验

“+”为阳性，“-”为阴性

表2实施例1的试纸条的特异性试验

“+”为阳性，“-”为阴性

表1和表2结果表明：本发明实施例1的试纸条在现有试纸条的基础上，增加了对比区后，其灵敏度与特异性均不受影响，灵敏度高，特异性好。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (10)

1.一种早孕检测试纸条，所述试纸条由样品垫、标记垫、硝酸纤维素膜、吸水纸顺次搭接粘贴在底板上构成，其特征在于，所述标记垫上涂覆有胶体金标记的鼠抗β-HCG单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜包括包被有鼠抗α-HCG单克隆抗体的检测区和包被有抗鼠IgG多克隆抗体的控制区，在所述检测区和控制区之间设置有包被有毒品抗原的对比区，所述标记垫上还涂覆有胶体金标记的所述毒品的抗体。

2.根据权利要求1所述的早孕检测试纸条，其特征在于，所述对比区包被的毒品抗原为DOA抗原，所述抗原的包被浓度为0.1-0.5mg/ml。

3.根据权利要求2所述的早孕检测试纸条，其特征在于，所述DOA抗原为THC抗原、MET抗原或***抗原，所述抗原的包被浓度为0.1mg/ml。

4.根据权利要求1所述的早孕检测试纸条，其特征在于，所述标记垫上涂覆的胶体金标记的毒品的抗体的浓度为0.5～2ug/ml，涂覆量为10cm*12cm/ml。

5.根据权利要求4所述的早孕检测试纸条，其特征在于，所述标记垫上涂覆的胶体金标记的毒品的抗体的浓度为1ug/ml，涂覆量为10cm*12cm/ml。

6.根据权利要求1所述的早孕检测试纸条，其特征在于，所述标记垫上涂覆的胶体金标记的鼠抗β-HCG单克隆抗体的浓度为1.0-1.5mg/ml，涂覆量为0.15-0.2μl/cm；所述检测区包被的鼠抗α-HCG单克隆抗体的浓度为1.0-1.5mg/ml，包被参数为0.15-0.2μl/cm；所述控制区包被的抗鼠IgG多克隆抗体的浓度为1.0-1.5mg/ml，包被参数为0.15-0.2μl/cm。

7.根据权利要求6所述的早孕检测试纸条，其特征在于，所述标记垫上涂覆的胶体金标记的鼠抗β-HCG单克隆抗体的浓度为1.2mg/ml，涂覆量为0.17μl/cm；所述检测区包被的鼠抗α-HCG单克隆抗体的浓度为1.2mg/ml，包被参数为0.17μl/cm；所述控制区包被的抗鼠IgG多克隆抗体的浓度为1.3mg/ml，包被参数为0.18μl/cm。

8.根据权利要求1-7任一项所述的早孕检测试纸条，其特征在于，所述检测区与控制区之间的间隔为7.0mm。

9.根据权利要求1-7任一项所述的早孕检测试纸条，其特征在于，所述检测区与对比区之间的间隔为3.5mm。

10.一种早孕检测方法，其特征在于，采用权利要求1-9任一项所述的试纸条，包括以下步骤：将尿液滴加到样品垫上4-5min后，比较检测区和对比区的颜色，若检测区颜色比对比区颜色深，则怀孕6周以上；若检测区颜色比对比区颜色浅，则怀孕6周以下。