CN102813646B - 高芒果苷在制备防治老年痴呆及记忆力减退药物中的应用及其药物组合物与制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了高芒果苷在制备防治老年痴呆及记忆力减退药物中的应用。本发明研究表明,高芒果苷可显著改善APP转基因小鼠受损的学习记忆能力,对APP转基因小鼠的短期记忆中的较长时记忆功能有改善作用。高芒果苷可以提高Ach的含量,增强CHAT的活性,抑制AchE的活性,从而改善APP转基因痴呆模型病理学、胆碱能***及细胞凋亡等方面指标。本发明提供的高芒果苷及其组合物,可用于制备预防和治疗老年痴呆症和记忆力减退的药物。
Description
技术领域
本发明涉及药物应用领域,特别涉及高芒果苷在制备防治老年痴呆及记忆力减退药物中的应用及其药物组合物与制剂。
背景技术
高芒果苷结构如式Ⅰ所示,为C-苷类氧杂蒽酮化合物,全称1,6,7-三羟基-3-甲氧基-2-C-β-D-吡喃葡萄糖苷,又称3-甲氧基芒果苷,英文名homomangiferin,又称1,6,7-trihydroxy-3-methoxy-2-C-β-D-glucopyranosyl-xanthone,存在于漆树科植物芒果(Mangifera indicaL.)、扁桃(Mangifera persiciformis C.)等植物中。
式I
老年痴呆是慢性进行性中枢神经***变性病变所导致的一种慢性疾病,以缓慢发展记忆障碍、定向障碍、语言功能障碍等不同程度的认知功能障碍及人格异常等神经精神症状为特征。老年痴呆的发病随年龄的增长而增高,65岁以上患病率为5-10%;85岁以上为20-50%。随着我国人口的老龄化,老年痴呆的发病率呈不断上升趋势。因此,开发有效防治老年痴呆药物是当今药物研究领域的重要任务之一。但到目前为止,还未出现根治老年痴呆症的药物。
记忆力减退是由多方面因素引起的脑部病理现象,其发生的主要原因是脑疲劳和脑缺氧。大脑长期超负荷工作,神经递质的合成、分泌都减少,影响到信息传递的速度和质量,造成记忆障碍;另一方面,由于大脑缺氧,会引起大脑微循环速度减慢,营养物质就不能被完全氧化,新陈代谢中产生的自由基等代谢垃圾沉淀,使神经细胞处于缺血缺氧状态,造成神经细胞的急性或慢性损伤,从而影响大脑神经元的活性和反应速度,造成记忆通路不畅,思维受阻,积累在人脑中的知识在短时间内无法提取和应用。如同电线短路,整个记忆通路瘫痪。现代社会竞争激烈,使人们透支着大量的体力和脑力,用脑过度已严重危及到了人们的健康水平;同时老年人随着年龄的增长,大脑新陈代谢减慢,供血供氧不足,记忆力下降明显,如不加以预防,还有可能发展成为老年痴呆症,因此,需十分警惕和加以重视。
高芒果苷的药理研究表明其具有多种生物活性,申请号为201110378996.6的中国专利公开了高芒果苷在制备防治高尿酸血症药物中的用途,具体为在制备防治高尿酸血症及其引起的痛风、***的药物中的用途。该专利研究并公开了高芒果苷能够降低血清尿酸浓度的作用。研究表明,其具有与黄嘌呤氧化酶抑制药别嘌醇相似的抑制血清尿酸的作用,同时,又能明显提高尿中尿酸浓度,具有与促尿酸***药丙磺舒相似的促尿酸***功能。
但到目前为止,尚未有公开文献报道高芒果苷在制备防治老年痴呆及记忆力减退药物中的用途。
发明内容
本发明要解决的技术问题为针对目前治疗老年痴呆症和记忆力减退中缺乏十分有效的药物的问题,提供了高芒果苷在制备防治老年痴呆及记忆力减退药物中的应用。
为解决上述技术问题,本发明提供的技术方案为:
一种如式I所示化合物在制备防治老年痴呆症药物中的用途。
式I
一种如式I所示化合物在制备防治记忆力减退药物中的用途。
老年痴呆是慢性进行性中枢神经***变性病变所导致的一种慢性疾病,以缓慢发展记忆障碍、定向障碍、语言功能障碍等不同程度的认知功能障碍及人格异常等神经精神症状为特征。老年痴呆的发病随年龄的增长而增高,65岁以上患病率为5-10%;85岁以上为20-50%。随着我国人口的老龄化,老年痴呆的发病率呈不断上升趋势。因此,开发有效防治老年痴呆药物是当今药物研究领域的重要任务之一。
在本发明的实施例中,发明人利用APP转基因小鼠对式I化合物进行了治疗和预防老年痴呆以及记忆力减退的药理实验。
研究结果表明,与正常对照组相比,APP转基因小鼠模型组3min内穿越原平台位置的次数显著减少,在原平台所在第四象限停留时间显著减少,游泳路程显著缩短,提示其学习记忆能力明显降低。与模型组相比,本发明高芒果苷组小鼠穿越次数显著增加,在第四象限的停留时间和游泳路程均显著增加,表明高芒果苷可显著改善APP转基因小鼠受损的学习记忆能力。
跳台试验是反映小鼠一次性被动回避反应记忆功能的试验。与模型组比较,本发明高芒果苷组潜伏期明显延长,表明高芒果苷对APP转基因小鼠的短期记忆中的较长时记忆功能有改善作用。
对APP转基因小鼠行为学从Morris水迷宫和跳台试验两方面进行观察,APP695V717I转基因小鼠在9月龄时空间学习记忆能力和一次性被动回避反应记忆能力显著下降;高芒果苷早期干预可明显改善APP转基因小鼠已下降的学习记忆能力,对其空间学习记忆和一次性被动回避反应记忆能力具有明显改善作用。
高芒果苷可以提高Ach的含量,增强CHAT的活性,抑制AchE的活性。改善APP转基因痴呆模型病理学、胆碱能***及细胞凋亡等方面指标,这可能是其主要的疗效机制和作用途径,具有防治阿尔茨海默病的作用。
本发明还提供了一种药物组合物,其包含式I所示化合物以及药学上可以接受的辅料。
本发明还提供了一种上述药物组合物在临床上的剂型。
作为优选,该药物组合物在临床上的剂型为口服制剂或注射制剂。
在本发明的实施例中,提供的上述药物组合物在临床上的口服剂型为片剂或胶囊剂。
在本发明的实施例中,提供的上述药物组合物在临床上的注射剂型为注射液剂或冻干粉针剂。
具体实施方式
本发明公开了一种高芒果苷在制备防治老年痴呆及记忆力减退药物中的应用,本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述,相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合,来实现和应用本发明技术。
本发明提供的技术方案为:
一种如式I所示化合物在制备防治老年痴呆症药物中的用途。
式I
一种如式I所示化合物在制备防治记忆力减退药物中的用途。
为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案,下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明。
实施例1:高芒果苷药理实验
1实验材料、试剂与仪器
实验动物:3月龄APP695V717I转基因小鼠60只(雌雄各半),体重17-23g,清洁级,相同遗传背景C57BL/6J小鼠15只为正常对照。动物许可证编号SCXK京2005-0013。
实验药物:阳性对照药选用盐酸多奈哌齐(商品名称:安理申),5mg/片,使用时粉碎,用双蒸水溶解。
主要仪器:DMS-2型Morris水迷宫仪数据自动采集及处理***,STT-2小鼠跳台仪(或DT-200跳台自动测试仪),BH-2型生物显微镜,DpxView Pro型计算机彩色图像处理***。
2 实验方法
2.1分组与给药
根据随机数字(根据SPS S统计软件产生随机数字)将APP转基因小鼠随机分为正常对照组、模型组、本发明式I化合物组和盐酸多奈哌齐组(0.65mg/kg/d),每组15只。正常组和模型组给以等体积蒸馏水灌胃,每日1次。各组小鼠灌胃24周,至9月龄时进行行为学实验。
2.2行为学测试
2.2.1Morris水迷宫试验
Morris水迷宫水池直径120cm,水池深50cm。实验时将水池以四个等距离点均分为四个象限区,在第四象限位于池壁和圆心中间,放置有机玻璃站台。向水池中加水,水深约20cm,水面高出站台表面0.5cm,水温25+1℃,注入奶粉,混匀,使水成不透明的乳白色,达到动物视觉无法辨别池内有无平台的目的,并使计算机能成功跟踪小鼠的活动。试验在隔音的房间内进行,水池位置、光源位置及强度等各种试验条件在整个实验过程中保持不变,以供小鼠来定位平台位置。
测试程序包括:(1)定位航行实验:用于测量动物在水迷宫中的学习和记忆能力。
每天进行1次,连续训练5天。第5天下午撤去平台,任选一个入水点,将小鼠面向池壁放入水池中,摄像***自动记录小鼠3min内进出原平台区的次数及在原平台所在第四象限游泳时间和路程作为评价小鼠学习记忆成绩的指标。
2.2.2跳台试验
跳台仪实验箱与计算机自动记录***相连。实验时将小鼠放入跳台仪实验箱内,适应环境5min,之后将小鼠轻放于跳台上,并将铜栅通电,当小鼠从跳台上跳下四肢接触铜栅时会受到电击,正常回避反应是跳上跳台返回安全区,逃避电击,如此学习5min,并记录此5min内的触电次数(错误次数),以此为学习成绩。24h后进行记忆能力测试,将小鼠置于跳台上,记录小鼠从停留在跳台上至第一次跳下受电击的时间即潜伏期和5min内的错误次数(小鼠四肢同时接触铜栅触电的次数),以此作为记忆功能的评价指标。
2.3脑组织样品处理
小鼠于末次行为学测试后,禁食12h,进行脑组织及血清取材。各组小鼠麻醉后眼球取血,离心(2500r/min,15min),分离血清保持温度在4℃以备后续指标检测;在低温下快速断头取全脑,以冰冷生理盐水清理血迹,用滤纸吸干,称重。每组随机选取6只投入4%多聚甲醛溶液中固定24h以上(4℃),之后换后固定液,待脑组织下沉后即可进行冰冻切片,或石蜡包埋,进行病理及免疫组化染色。其余(除小剂量组为7只外,其他均为8只)小鼠分别迅速分离皮层和海马(冰砖上进行),各加入2ml生理盐水(蒸馏水)匀浆,低温高速离心机离心,分离上清液,用于组织含量测定。在灌胃过程中,中药小剂量组死亡1只;在跳台试验中,西药组有1只触电死亡。
3 实验结果
3.1高芒果苷对APP转基因小鼠空间学习记忆能力的影响
与正常组比较,模型组在Morris水迷宫中穿越原平台位置次数、第四象限游泳时间和路程均显著减少。各给药组治疗后,在Morris水迷宫中穿越原平台位置次数、第四象限游泳时间和路程均较模型组显著增多。结果见表1。
表1高芒果苷对APP转基因小鼠空间学习记忆
能力的影响(x±s,n=15)
3.2高芒果苷对APP转基因小鼠一次性回避反应记忆功能的影响
在跳台试验中,模型组错误次数较正常组明显增高,而各治疗组错误次数较正常组明显下降。与正常组比较,模型组的潜伏期明显缩短,而盐酸多奈哌齐组和高芒果苷组潜伏期明显延。结果见表2。
表2高芒果苷对APP转基因小鼠一次性回避反应记忆功能的影响(x±s,n=15)
3.3高芒果苷对APP小鼠海马内乙酰胆碱、胆碱乙酰转移酶和乙酰胆碱酯酶含量的影响
与正常组相比,模型组海马内Ach、CHAT的含量明显降低而AchE含量明显提高;盐酸多奈哌齐组和高芒果苷组与模型组相比,海马内Ach、CHAT的含量明显提高,而AchE含量明显降低。说明高芒果苷能够有效提高海马内Ach的含量,增强海马内CHAT的活性,抑制海马内AchE的活性,从而改善APP转基因痴呆模型病理学、胆碱能***及细胞凋亡等方面指标。这可能是其具有防治阿尔茨海默病的作用机制和作用途径。结果见表3。
表3高芒果苷对APP转基因小鼠海马Ach、AchE、CHAT含量的影响(x±s,n=15)
3.4高芒果苷对皮层内乙酰胆碱、胆碱乙酰转移酶和乙酰胆碱酯酶含量的影响
与正常组相比,模型组皮层内Ach、CHAT的含量明显降低而AchE含量明显提高;盐酸多奈哌齐组和高芒果苷组与模型组相比,皮层内Ach、CHAT的含量明显提高,而AchE含量明显降低。说明高芒果苷能够有效提高皮层内Ach的含量,增强皮层内CHAT的活性,抑制皮层内AchE的活性,从而改善APP转基因痴呆模型病理学、胆碱能***及细胞凋亡等方面指标。这可能是其具有防治阿尔茨海默病的作用机制和作用途径。结果见表4。
表4高芒果苷对APP转基因小鼠皮层Ach、AchE、CHAT含量的影响(x±s,n=15)
4 结论
APP转基因小鼠是利用显微注射的方法将APP基因或基因片段整合入小鼠的基因组中,使得小鼠脑部表达APP基因。通过APP蛋白在大脑中过量表达,Aβ产生增加,导致神经毒害作用,损伤小鼠学习记忆能力,并聚集和沉积形成老年斑,从而造成小鼠老年性痴呆症转基因动物模型。
本研究结果表明,与正常对照组相比,APP转基因小鼠模型组3min内穿越原平台位置的次数显著减少,在原平台所在第四象限停留时间显著减少,游泳路程显著缩短,提示其学习记忆能力明显降低。与模型组相比,本发明高芒果苷组小鼠穿越次数显著增加,在第四象限的停留时间和游泳路程均显著增加,表明高芒果苷可显著改善APP转基因小鼠受损的学习记忆能力。
跳台试验是反映小鼠一次性被动回避反应记忆功能的试验。与模型组比较,本发明高芒果苷组潜伏期明显延长,表明高芒果苷对APP转基因小鼠的短期记忆中的较长时记忆功能有改善作用。
对APP转基因小鼠行为学从Morris水迷宫和跳台试验两方面进行观察,APP695V717I转基因小鼠在9月龄时空间学习记忆能力和一次性被动回避反应记忆能力显著下降;高芒果苷早期干预可明显改善APP转基因小鼠已下降的学习记忆能力,对其空间学习记忆和一次性被动回避反应记忆能力具有明显改善作用。
高芒果苷可以提高Ach的含量,增强CHAT的活性,抑制AchE的活性。改善APP转基因痴呆模型病理学、胆碱能***及细胞凋亡等方面指标,这可能是其主要的疗效机制和作用途径,具有防治阿尔茨海默病的作用。
实施例2:药物组合物
实施例3:药物组合物
实施例4:药物组合物
实施例5:药物组合物
实施例6:药物组合物
实施例7:药物组合物
本药物组合物为片剂,将本发明提供的化合物、淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠和硬脂酸镁,混合后于压片机上压片,即得。
实施例8:药物组合物
本药物组合物为片剂,将本发明提供的化合物、淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠和硬脂酸镁,混合后于压片机上压片,即得。
实施例9:药物组合物
本药物组合物为片剂,将本发明提供的化合物、淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠和硬脂酸镁,混合后于压片机上压片,即得。
实施例10:药物组合物
本发明提供的高芒果苷化合物 5%
干淀粉 90%
硬脂酸镁 5%
本药物组合物为胶囊剂,将本发明提供的化合物、干淀粉和硬脂酸镁,混合后填充入硬明胶胶囊中,即得。
实施例11:药物组合物
本发明提供的高芒果苷化合物 12%
干淀粉 73%
硬脂酸镁 15%
本药物组合物为胶囊剂,将本发明提供的化合物、干淀粉和硬脂酸镁,混合后填充入硬明胶胶囊中,即得。
实施例12:药物组合物
本发明提供高芒果苷化合物 15%
干淀粉 65%
硬脂酸镁 20%
本药物组合物为胶囊剂,将本发明提供的化合物、干淀粉和硬脂酸镁,混合后填充入硬明胶胶囊中,即得。
实施例13:药物组合物
本药物组合物为注射液剂,将本发明提供的化合物加乙醇搅拌溶解,加氯化钠及适量注射用水,搅拌均匀,加入0.1%针用活性碳,吸附,过滤脱碳,补加注射用水至规定量,微孔过滤膜过滤,按1mL/支灌封,100℃湿热灭菌20min,经灯检合格,即得。
实施例14:药物组合物
本药物组合物为注射液剂,将本发明提供的化合物加乙醇搅拌溶解,加氯化钠及适量注射用水,搅拌均匀,加入0.1%针用活性碳,吸附,过滤脱碳,补加注射用水至规定量,微孔过滤膜过滤,按1mL/支灌封,100℃湿热灭菌20min,经灯检合格,即得。
实施例15:药物组合物
本药物组合物为注射液剂,将本发明提供的化合物加乙醇搅拌溶解,加氯化钠及适量注射用水,搅拌均匀,加入0.1%针用活性碳,吸附,过滤脱碳,补加注射用水至规定量,微孔过滤膜过滤,按1mL/支灌封,100℃湿热灭菌20min,经灯检合格,即得。
实施例16:药物组合物
本药物组合物为注射液剂,将本发明提供的化合物加乙醇搅拌溶解,加氯化钠及适量注射用水,搅拌均匀,加入0.1%针用活性碳,吸附,过滤脱碳,补加注射用水至规定量,微孔过滤膜过滤,按1mL/支灌封,100℃湿热灭菌20min,经灯检合格,即得。
实施例17:药物组合物
本药物组合物为注射液剂,将本发明提供的化合物加乙醇搅拌溶解,加氯化钠及适量注射用水,搅拌均匀,加入0.1%针用活性碳,吸附,过滤脱碳,补加注射用水至规定量,微孔过滤膜过滤,按1mL/支灌封,100℃湿热灭菌20min,经灯检合格,即得。
实施例18:药物组合物
本药物组合物为注射液剂,将本发明提供的化合物加乙醇搅拌溶解,加氯化钠及适量注射用水,搅拌均匀,加入0.1%针用活性碳,吸附,过滤脱碳,补加注射用水至规定量,微孔过滤膜过滤,按1mL/支灌封,100℃湿热灭菌20min,经灯检合格,即得。
实施例19:药物组合物
本药物组合物为冻干粉针剂,将本发明提供的化合物加乙醇搅拌溶解,加氯化钠、甘露醇及适量注射用水,搅拌均匀,加入0.1%针用活性碳,吸附,过滤脱碳,补加注射用水至规定量,微孔过滤膜过滤,按4mL/支分装,冷冻干燥,封装,经检验合格,即得。
实施例20:药物组合物
本药物组合物为冻干粉针剂,将本发明提供的化合物加乙醇搅拌溶解,加氯化钠、甘露醇及适量注射用水,搅拌均匀,加入0.1%针用活性碳,吸附,过滤脱碳,补加注射用水至规定量,微孔过滤膜过滤,按4mL/支分装,冷冻干燥,封装,经检验合格,即得。
实施例21:药物组合物
本药物组合物为冻干粉针剂,将本发明提供的化合物加乙醇搅拌溶解,加氯化钠、甘露醇及适量注射用水,搅拌均匀,加入0.1%针用活性碳,吸附,过滤脱碳,补加注射用水至规定量,微孔过滤膜过滤,按4mL/支分装,冷冻干燥,封装,经检验合格,即得。
实施例22:药物组合物
本药物组合物为冻干粉针剂,将本发明提供的化合物加乙醇搅拌溶解,加氯化钠、甘露醇及适量注射用水,搅拌均匀,加入0.1%针用活性碳,吸附,过滤脱碳,补加注射用水至规定量,微孔过滤膜过滤,按4mL/支分装,冷冻干燥,封装,经检验合格,即得。
实施例23:药物组合物
本药物组合物为冻干粉针剂,将本发明提供的化合物加乙醇搅拌溶解,加氯化钠、甘露醇及适量注射用水,搅拌均匀,加入0.1%针用活性碳,吸附,过滤脱碳,补加注射用水至规定量,微孔过滤膜过滤,按4mL/支分装,冷冻干燥,封装,经检验合格,即得。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种如式I所示化合物在制备防治老年痴呆症药物中的用途
2.一种如式I所示化合物在制备防治记忆力减退药物中的用途
3.根据权利要求1或2所述的用途,其特征在于,所述药物为药物组合物,所述药物组合物包含式I所示化合物及药学上可接受的辅料。
4.根据权利要求3所述的用途,其特征在于,所述药物组合物具有在临床上可接受的剂型。
5.根据权利要求4所述的用途,其特征在于,所述药物组合物为口服制剂或注射制剂。
6.根据权利要求5所述的用途,其特征在于,所述口服制剂为片剂或胶囊剂。
7.根据权利要求6所述的用途,其特征在于,所述片剂按质量比例计组成为:
如式I所示化合物 5%-15%
淀粉 40%-65%
微晶纤维素 10%-25%
羧甲基淀粉钠 5%-20%
硬脂酸镁 1%-5%。
8.根据权利要求5所述的用途,其特征在于,所述注射制剂为注射液剂或冻干粉针剂。
9.根据权利要求8所述的用途,其特征在于,所述注射液剂按质量比例计组成为:
如式I所示化合物 0.1%-1%
乙醇 0-20%
氯化钠 1%-15%
注射用水 65%-98%。
10.根据权利要求8所述的用途,其特征在于,所述冻干粉针剂按质量比例计组成为:
如式I所示化合物 0.1%-1%
乙醇 0-20%
氯化钠 0.1%-5%
甘露醇 0.6%-5%
注射用水 70%-99%。
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