CN102791741A - 诱导异味的酶的失活 - Google Patents
诱导异味的酶的失活 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102791741A CN102791741A CN2010800552670A CN201080055267A CN102791741A CN 102791741 A CN102791741 A CN 102791741A CN 2010800552670 A CN2010800552670 A CN 2010800552670A CN 201080055267 A CN201080055267 A CN 201080055267A CN 102791741 A CN102791741 A CN 102791741A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- gelling gum
- temperature
- nutrient medium
- fermented liquid
- food
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims abstract description 45
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims abstract description 45
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 title description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 title 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 86
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 47
- 102000009133 Arylsulfatases Human genes 0.000 claims abstract description 23
- 108060007951 sulfatase Proteins 0.000 claims abstract description 23
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 11
- 241000790234 Sphingomonas elodea Species 0.000 claims abstract description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 36
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 35
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 32
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 30
- 241000736110 Sphingomonas paucimobilis Species 0.000 claims description 28
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims description 27
- 239000003352 sequestering agent Substances 0.000 claims description 25
- 238000007669 thermal treatment Methods 0.000 claims description 25
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 18
- 102000053187 Glucuronidase Human genes 0.000 claims description 17
- 108010060309 Glucuronidase Proteins 0.000 claims description 17
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 12
- 108010064696 N,O-diacetylmuramidase Proteins 0.000 claims description 9
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical group OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000008274 jelly Substances 0.000 claims description 8
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000015173 baked goods and baking mixes Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 4
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000011049 filling Methods 0.000 claims description 4
- 238000001879 gelation Methods 0.000 claims description 4
- 235000015094 jam Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000004213 low-fat Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 4
- 235000011962 puddings Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 claims description 4
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 claims description 3
- 230000008719 thickening Effects 0.000 claims description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 2
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims 1
- 229920002148 Gellan gum Polymers 0.000 abstract description 12
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 12
- 239000000216 gellan gum Substances 0.000 abstract description 11
- 235000010492 gellan gum Nutrition 0.000 abstract description 11
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 abstract description 8
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 abstract description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 abstract 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 51
- IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N p-cresol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1 IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 20
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 20
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 20
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 15
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 9
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 7
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 7
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 7
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910019093 NaOCl Inorganic materials 0.000 description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 6
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 102100026031 Beta-glucuronidase Human genes 0.000 description 4
- 101000933465 Homo sapiens Beta-glucuronidase Proteins 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 4
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 4
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 4
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 4
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 4
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 3
- 235000019658 bitter taste Nutrition 0.000 description 3
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 3
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 235000020191 long-life milk Nutrition 0.000 description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- FHUODBDRWMIBQP-UHFFFAOYSA-N Ethyl p-anisate Chemical compound CCOC(=O)C1=CC=C(OC)C=C1 FHUODBDRWMIBQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N butylated hydroxyanisole Chemical compound COC1=CC=C(O)C(C(C)(C)C)=C1.COC1=CC=C(O)C=C1C(C)(C)C CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 2
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000179442 Anacharis Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 1
- 102100026848 Lysozyme-like protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- CDOJPCSDOXYJJF-KSKNGZLJSA-N N-acetyl-beta-D-glucosaminyl-(1->4)-N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](NC(=O)C)[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CDOJPCSDOXYJJF-KSKNGZLJSA-N 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 241000736131 Sphingomonas Species 0.000 description 1
- 102000005158 Subtilisins Human genes 0.000 description 1
- 108010056079 Subtilisins Proteins 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N alpha-D-glucuronic acid Chemical compound O[C@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- -1 aryl fatty acid Chemical class 0.000 description 1
- 238000010923 batch production Methods 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 238000009924 canning Methods 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010931 ester hydrolysis Methods 0.000 description 1
- 239000012259 ether extract Substances 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 1
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 1
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 239000011344 liquid material Substances 0.000 description 1
- 239000012263 liquid product Substances 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 150000002931 p-cresols Chemical class 0.000 description 1
- 125000000552 p-cresyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1O*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000003822 preparative gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000008521 reorganization Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002098 selective ion monitoring Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/20—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof containing gelling or thickening agents
- A23L29/269—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof containing gelling or thickening agents of microbial origin, e.g. xanthan or dextran
- A23L29/272—Gellan
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/99—Enzyme inactivation by chemical treatment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y301/00—Hydrolases acting on ester bonds (3.1)
- C12Y301/06—Sulfuric ester hydrolases (3.1.6)
- C12Y301/06001—Arylsulfatase (3.1.6.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
- C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
- C12Y302/01017—Lysozyme (3.2.1.17)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
- C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
- C12Y302/01031—Beta-glucuronidase (3.2.1.31)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12Y304/21062—Subtilisin (3.4.21.62)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Jellies, Jams, And Syrups (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本发明涉及在混合条件下制备结冷胶的方法，所述方法包括a)提供含有结冷胶的发酵液或其他液体培养基，b)如有必要调节所述发酵液/液体培养基的温度和pH以允许或有利于步骤c中的酶处理，c)添加一种或多种能够减少或消除少动鞘氨醇单胞菌来源的芳基硫酸酯酶和/或β-葡糖苷酸酶的酶活性的酶，所述一种或多种酶以足以减少或消除所述发酵液/液体培养基中的少动鞘氨醇单胞菌来源的芳基硫酸酯酶和/或β-葡糖苷酸酶的酶活性的量添加，和/或在90℃至125℃之间的温度下处理所述发酵液/液体培养基持续足以减少或消除所述发酵液/液体培养基中的少动鞘氨醇单胞菌来源的芳基硫酸酯酶和/或β-葡糖苷酸酶的酶活性的一段时间，以及d)任选从所述含有结冷胶的发酵液/液体培养基回收所述结冷胶。
Description
技术领域
本发明涉及减少源自含结冷胶食品中的杂质的活性的异味问题。具体地讲，本发明涉及在含结冷胶食品中减少对甲酚形成的手段和方法。
背景技术
结冷胶是由细菌少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)(此前称为Sphingomonas elodea或Auromonas elodea或Pseudomonas elodea)产生的水溶性多糖(Pollock，1993)。
高酰基(HA)结冷胶主要用作胶凝剂。其能够经受120℃加热。作为食品添加剂，结冷胶被用作增稠剂、乳化剂和稳定剂。如果添加结冷胶，随后加热并冷却，结冷胶会提供独特结构的凝胶。在多种乳制品的制造中，结冷胶起到稳定剂的作用来帮助形成凝胶。结冷胶在高温下的热稳定性和低粘度在制造经历热处理(如超高温(UHT)或高温短时(HTST)处理)的产品中特别有用。
在食品中，结冷胶被用于各种产品，参见Duxbury，D D：“Multi-functional gum gets final FDA approval：gellan gum offers formulators low uselevels and high versatility”，Food Processing，1993年2月发行。掺有结冷胶的典型食品包括焙烤食品馅料、糖果、乳制品、带果块的果冻、糖霜、糖衣和糖皮、果酱和果子冻、低脂涂抹物、微波食品、布丁、调味酱、结构化食品和顶端配料。结冷胶还可用于罐装猫粮和狗粮。
在药品中，结冷胶可用于制备易吞咽固体剂型，如凝胶剂和包衣片剂，以及用于改变活性成分从片剂和胶囊剂释放的速率。
然而，当添加结冷胶时最不可避免的是，最终产品还污染有源自细菌发酵生产结冷胶的酶，因为结冷胶通常以相对不纯的形式使用。这些残余的酶(描述为β-葡糖苷酸酶和芳基硫酸酯酶)继而导致在最终产品中形成不期望的异味(通常描述为畜圈味(barn-like taste)或奶牛骚味(cow-liketaste))：随时间推移由于少动鞘氨醇单胞菌所产生的酶的作用而形成对甲酚(p-甲酚)。
此前已提出了若干针对该问题的解决方法。
在美国专利申请公开2006/0003051中，提出通过发酵处理来产生结冷胶组合物，包括在培养基中培养少动鞘氨醇单胞菌，其中该少动鞘氨醇单胞菌产生无催化活性的芳基硫酸酯酶或无催化活性的β-葡糖苷酸酶，或者产生无催化活性的芳基硫酸酯酶和无催化活性的β-葡糖苷酸酶。换句话讲，US 2006/000305 1利用经遗传修饰的少动鞘氨醇单胞菌，其中编码这两种酶的基因被抑制或沉默。
还提出在将结冷胶与牛奶组合之前用变性剂处理原始的结冷胶组合物。该方法是美国专利No.6,663,911的主题。
最后，美国专利申请公开2005/0266138公开了制备低钙敏感性HA结冷胶的方法，其中将含有结冷胶的发酵液调节至pH约7.5，然后在后续步骤中对该发酵液进行巴氏灭菌。
本发明的目标
本发明的实施方案的一个目标是提供制备结冷胶的备选手段和方法，该结冷胶例如继而在食品工业中可用作稳定剂，即用于生产乳制品和饮料。
本发明特别是可用于在室温下或高于室温下具有所需储藏期限的乳制品，因为在长的储存时间后未检测到异味。
发明内容
本发明人已发现，用螯合剂和特定酶的组合处理含结冷胶的发酵液使得在分离自该发酵液的结冷胶已加入其中的乳制品中未检测到异味的产生。还已经发现热处理该发酵液会导致减少异味的产生。进行“螯合剂-酶”处理和热处理二者能确保异常好的结果，即使是在未对产结冷胶菌株进行遗传修饰的情况中也是如此。
为了实现好的处理效率：
*将处理过的发酵液保持温热/热以用醇进行沉淀，通常高于胶凝温度。温热的温度会导致发酵液的行为类似于液体而不是像凝胶，并且允许与醇有效混合。因而，确保了更好的沉淀质量和更好的收率以回收纤维。
*连续进行沉淀，将发酵液料流与醇料流混合，通常借助于泵。然后停留数分钟让总料流中的纤维完全沉淀。这样做，与间歇式工艺相比，引入的醇的比例较低，重量通常为1/1，因而显著减少生产的费用。
所以，在第一个方面，本发明涉及在混合条件下制备结冷胶的方法，该方法包括
a)提供发酵液或其他液体培养基，其含有结冷胶，
b)如有必要，调节该发酵液或液体培养基的温度和pH以允许在步骤c中进行酶处理，
c)添加一种或多种能够减少或消除少动鞘氨醇单胞菌来源的芳基硫酸酯酶和/或β-葡糖苷酸酶的酶活性的酶，所述一种或多种酶以足以减少或消除发酵液或液体培养基中少动鞘氨醇单胞菌来源的芳基硫酸酯酶和/或β-葡糖苷酸酶的酶活性的量添加，并且/或者在90℃至125℃之间的温度下处理所述发酵液/液体培养基持续足以减少或消除发酵液或液体培养基中少动鞘氨醇单胞菌来源的芳基硫酸酯酶和/或β-葡糖苷酸酶的酶活性的一段时间，以及
d)任选从含结冷胶的发酵液/液体培养基回收结冷胶。
在第二个方面，本发明涉及含结冷胶的食品或药物制剂的制备，该方法包括将本发明的第一个方面的方法获得的结冷胶与食品成分或药物组分混合并随后实现结冷胶的胶凝以便获得所述含结冷胶的食品或药物制剂。
在第三个方面，本发明涉及食品或药物制剂，所述食品或药物制剂包含本发明的第一个方面的方法获得的结冷胶作为一种成分。
具体实施方式
定义
“少动鞘氨醇单胞菌来源的芳基硫酸酯酶”是存在于少动鞘氨醇单胞菌或其他产结冷胶的鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)菌株中的芳基硫酸酯酶。少动鞘氨醇单胞菌来源的芳基硫酸酯酶从而不必由少动鞘氨醇单胞菌产生，而是由产生结冷胶的菌株产生。芳基硫酸酯酶构成一组在硫酸酯水解和粘多糖代谢中有活性的酶。
“少动鞘氨醇单胞菌来源的β-葡萄糖苷酸酶”为存在于少动鞘氨醇单胞菌中或其他产结冷胶的鞘氨醇单胞菌属菌株中的β-葡萄糖苷酸酶。少动鞘氨醇单胞菌来源的β-葡萄糖苷酸酶从而不必由少动鞘氨醇单胞菌产生，而是由产生结冷胶的菌株产生。β-葡萄糖苷酸酶为攻击天然的和合成的葡萄糖苷酸中的末端糖苷键的酶。
“食品”为旨在用于人口服作为日常饮食的一部分的产品。该术语涵盖固体、半固体和液体产品，特别是上面讨论的产品，即在如下文献中讨论的食品：Duxbury，D D：“Multi-functional gum gets final FDA approval：gellangum offers formulators low use levels and high versatility”，Food Processing，1993年2月发行。典型食品因而包括焙烤食品馅料、糖果、乳制品、带果块的果冻、糖霜、糖衣和糖皮、果酱和果子冻、低脂涂抹物、微波食品、布丁、调味酱、结构化食品和顶端配料。
“药物制剂”是一种或多种药物活性成分与至少一种载体、溶媒或赋形剂之间的混合物-根据本发明的特别关注的药物制剂是旨在用于口服的那些，如凝胶剂及包衣片剂和胶囊剂。
“乳制品”定义为由来自奶牛或其他哺乳动物的奶制备的食品。
“UHT奶”意指在超高温度，通常是约135-140℃下处理持续数秒的奶。
“HTST奶”意指在高温下短时间处理(也就是说在约70-75℃下处理15-30秒)的奶。
“巴氏灭菌”定义为不会导致灭菌的适度加热处理。该处理可以是例如HTST或UHT。
“稀释的奶”意指用水稀释的全奶，从而将最终的蛋白质的量降低至2％或1％。
“GC”和“MS”及“SIM”分别意指气相色谱、质谱、选择性离子监测。
“螯合剂”在本文中为能够通过形成惰性络合物或络离子而结合并稳定金属离子的物质，其中金属原子或离子在两个或更多个位点结合至该物质以形成环结构。
“蛋白酶”(或“蛋白水解酶”)为通过断裂蛋白质或酶中的肽键来降解所述蛋白质和多肽的酶。根据本发明，合适的蛋白酶是能够降解少动鞘氨醇单胞菌来源的芳基硫酸酯酶和/或β-葡糖苷酸酶至它们的酶活性被实质减少或消除的程度的那些蛋白酶。优选的蛋白酶可源于任何来源，可以是天然存在的或者可以是天然存在的蛋白酶的合成的、半合成的或重组的类似物。
“溶菌酶”也称为胞壁质酶或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶，表示催化肽聚糖中的N-乙酰胞壁酸与N-乙酰基-D-葡糖胺残基之间以及壳糊精中N-乙酰基-D-葡糖胺之间的1，4-β-键的水解的酶家族(EC 3.2.1.17)。
本发明的具体实施方案。
第一个方面
在涉及结冷胶制备的本发明第一个方面的一个实施方案中，混合条件可通过本领域常规使用的任何手段提供并且通常通过搅拌功率输入和/或通气流提供。混合因而可通过使用电机、推进刮板、泵等来完成，但也可通过发酵液装于其中的整个隔室的机械运动(例如通过翻滚或翻转)来实现-要实现的重要目标是对含结冷胶的发酵液或液体培养基中的内容物进行令人满意的混合。另外，用于在处理期间维持令人满意的通气的空气流可用于提供必要的混合。
有利的是可在步骤a或在步骤b中将螯合剂添加至发酵液/液体培养基。通常，螯合剂选自柠檬酸、草酸、磷酸、DTPA、EDTA和NTA。如果螯合剂为柠檬酸，其优选以约50％溶液的形式添加至发酵液/液体培养基。
在一个实施方案中(当该方法需要在步骤c中添加酶时)，在步骤b)中将温度调节至20至80℃之间，如50至60℃之间，优选53至57℃之间。通常，但不是必需的，通过将蒸汽直接注入包含发酵液/液体培养基的发酵罐中来调节温度。应该指出的是，温度设定点的确切选择通常取决于被添加的酶的特性-例如如果酶在低于20的温度下表现出最大酶活性(例如，如果它们分离自在冷或凉的条件下生活的有机体的话)，则温度调节将显然要旨在达到在其下该酶性能令人满意的温度范围。
在另一个实施方案中，步骤b)还包括调节pH。当本方法要求在步骤c)中添加酶时这也是特别恰当的，所以优选将pH调节至处于步骤c中所用的所述一种或多种酶的最佳活性的范围内。优选地，pH调节通过添加NaOH来进行，但可利用其它碱性物质。
在另一个实施方案中，在步骤a)和b)中添加螯合剂和调节温度基本上同时开始。
在步骤c)中添加的一种或多种酶优选是溶菌酶和蛋白酶中的一者或这二者，如碱性蛋白酶(alcalase)。
在步骤c中，优选将发酵液/液体培养基保持在约55℃、约pH 8下一段时间，然后将pH调节至6至7.5之间，优选6.5至7之间。“约55℃“的温度旨在表示不低于50℃且不高于60℃的温度。通常温度将不会低于51℃，优选温度不低于52℃；更优选温度不低于53°，并且特别优选不低于54℃。进一步优选的是温度不超过59℃，并且优选温度不超过58℃。更优选的是温度不超过57°，特别优选的是温度不超过56℃。55℃的最优选温度在54.5至55.5°之间的范围内。
步骤c)中的热处理优选在90至125℃之间的温度下进行，优选在100至120℃之间的温度范围内进行。因而优选的温度为约100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119或120℃。
在本发明的某些实施方案中，步骤c)包括添加一种或多种酶以及进行热处理二者。然而，在其他实施方案中，步骤c)包括添加一种或多种酶但不包括热处理，在其他实施方案中步骤c)包括热处理但不包括酶处理。
在其中在步骤c)中于90℃至125℃之间的温度下处理发酵液/液体培养基的实施方案中，优选将发酵液/液体培养基冷却至仍超过结冷胶的胶凝温度的温度(例如，至约80℃)，然后沉淀，例如通过添加诸如异丙醇之类的醇沉淀。在该实施方案的优选形式中，该沉淀为连续沉淀。
在第一个方面的其他广义实施方案中，本发明整体涉及将溶菌酶和/或蛋白酶用于减少或消除含结冷胶的发酵液/液体培养基中的少动鞘氨醇单胞菌来源的芳基硫酸酯酶和/或β-葡糖苷酸酶的酶活性。类似地，利用高温来减少或消除含结冷胶的发酵液/液体培养基中的少动鞘氨醇单胞菌来源的芳基硫酸酯酶和/或β-葡糖苷酸酶的酶活性也构成了第一个方面的实施方案，利用1)溶菌酶和/或蛋白酶和2)高温的组合来减少或消除含结冷胶的发酵液/液体培养基中的少动鞘氨醇单胞菌来源的芳基硫酸酯酶和/或β-葡糖苷酸酶的酶活性也构成了第一个方面的实施方案。
落入第一个方面的这些用途也可认为是高温和/或溶菌酶和/或蛋白酶在结冷胶制备中来在含结冷胶产品中防止后续的异味中的用途。
第二个方面
当使用通过本发明的第一个方面的方法获得的结冷胶时，通常以本身已知的方式利用结冷胶。也就是说，采用与在使用通过本领域已知方法获得的结冷胶时采用的那些工艺参数相同或等价的工艺参数，将结冷胶与待生产产品的其他成分混合。第二个方面的方法因而不会产生在结构差异方面具有不同特性的产品，而是产生这样的产品：其在由于少动鞘氨醇单胞菌芳基脂肪酸酶和/或β-葡糖苷酸酶活性而产生任何不期望的异味之前表现出长得多的储藏期限。
从而，为了实行第二个方面，技术人员可例如利用在如下文献中提供的指导原则和建议：Duxbury等人(出处同上)；Giavasis I，Harvey L M，McNeil B：“Gellan Gum，”Crit Rev Biotechnol，20(3)，177-211，2000；MiyazakiS，Aoyama H，Kawasaki N等人：“In situ gelling formulations as Gellanvehicles for oral delivery[J]，”J Controlled Release，60(3)，287，1999；Morris VJ：“Bacterial polysaccharides，in Food polysaccharides and their application”，Stephen A M(编辑)，Marcel Dekker，New York，341-375，1995。
第三个方面
与上述方面密切相关的是第三个方面，其涉及含有通过本发明方法获得的结冷胶的产品(食品或药物制剂)。
含有结冷胶的食品通常选自焙烤食品馅料、糖果、乳制品、带果块的果冻、糖霜、糖衣和糖皮、果酱和果子冻、低脂涂抹物、微波食品、布丁、调味酱、结构化食品和顶端配料，而药物制剂通常选自凝胶剂、片剂和胶囊剂。在这两种情况中，通过本发明方法获得的结冷胶优选以可有效起到增稠剂和/或乳化剂和/或稳定剂的作用的量存在。
实施例
材料和方法
1.‘螯合剂-蛋白酶’处理方案
在发酵过程中，根据代谢将pH调节在6.4至7之间。当完成发酵且由于不再有糖被代谢时，呼吸活性降低，不再进行控制的pH增加(由于溶解的CO2释放)。
然后在搅拌条件下的处理为：
-通过将蒸汽直接注入发酵罐中加热发酵液直至达到约55℃，同时供给空气以帮助混合。
-加热一开始，就在泵的帮助下添加160kg的50％柠檬酸溶液。pH应降低至约5。
-当T＝55℃时停止加热。
-一旦温度已达到55℃，即用碱将pH升高至约8.0。
-将pH保持在约8.0。
-添加如下酶：
-溶菌酶，以约230ppm添加
-蛋白酶，以约1000ppm添加
-将该混合物保持在约55℃ 1小时，而将pH保持在约8.0。
-然后用例如H2SO4将pH降低至约7。
-将发酵液转移至存储槽，同时添加10％的异丙醇。
通过搅拌功率输入和/或通气流速来调节混合条件。
用不同的蛋白酶以及用‘螯合剂-蛋白酶’处理的修改形式进行多个实验：
实验56-6和58-B：该方案的条件，但蛋白酶为I型(碱性蛋白酶2.4L)，以500ppm添加。
实验72-3：该方案的条件，但使用II型蛋白酶(Protex 6L)。
实验72-4和72-7：该方案的条件，但使用III型蛋白酶(蛋白酶T)，以2000ppm添加。
实验72-5：该方案的条件，但使用IV型蛋白酶(Multifect)，以2000ppm添加。
实验72-6：该方案的条件，但蛋白酶为I型(碱性蛋白酶2.4L)，以1000ppm添加。
实验74-2和80-A：该方案的条件，使用II型蛋白酶(Protex 6L)。
实验80-B：该方案的条件，但使用柠檬酸钠而不是柠檬酸并且不控制pH。
2.热处理方案
在螯合剂-蛋白酶处理后，如下使发酵液经历热处理：
-将pH调节至6至7.5之间，优选处于6.5下。
-将温度调节至90℃至125℃之间，优选在100-110℃之间。
-停留时间为至少15分钟。
在下面的实验中，应用的条件如下：
实验72-1：100℃，pH＝7，停留时间15分钟。
实验72-2：120℃，pH＝7，停留时间20分钟。
实验74-2和74-3：100℃，pH＝6.5，停留时间20分钟。
实验72-3、72-4、80-A、80-B：100℃，pH＝6.5，停留时间15分钟。
热处理后，将发酵液冷却至不低于胶凝温度的温度，例如处于约80℃。然后通过添加异丙醇以连续工艺使其沉淀。
3.NaOH处理方案
US 6,663,911描述了不同的方案，使用碱或氧化剂来处理结冷胶发酵液。
为了将我们的发明与US 6,663,911中描述的发明相比，我们将US6,663,911中描述的方案应用于我们自己的发酵液。条件如下：
实验56-8、72-8和74-3：1g NaOH/10升发酵液，50℃，3小时，未控制pH。
实验56-9：添加NaOH直至增加pH＝9(约2g/10升发酵液)，然后，50℃，3小时，未控制pH。
4.NaOCl处理方案
US 6,663,911描述了不同的方案，使用碱或氧化剂来处理结冷胶发酵液。
为了将我们的发明与US 6,663,911中描述的发明相比，我们将US6,663,911中描述的方案应用于我们自己的发酵液。条件如下：
实验56-7和72-10：1000ppm NaOCl，50℃，3小时，未控制pH。
5.UHT奶中的样品的制备
必须进行在UHT奶中的实验以确定最终的结冷胶产品是否适于应用于奶中。
在下面的方案中，将市场上已知的结冷胶如来自CP-Kelco的KELCOGEL LT100用作阳性对照。
成分(％)：
-35％脂肪的奶油：8.45
-蔗糖：5
-结冷胶：0.09至0.15
-脱脂乳(经巴氏灭菌)：86.4至86.46
UHT板式换热器的方案：
-将所有成分共混。
-在70℃下预热。
-70℃下以2个步骤均质化，最高至100巴。
-在90℃下加热/保持时间30秒。
-140℃下UHT处理3秒。
-冷却至10℃并装进容器中
-在两种不同温度：5℃和20℃下储存。
6.确定对甲酚含量的测定法
通过气相色谱法确定了对甲酚的浓度：
向10g样品添加1mL 2N HCl、5mL去矿质水和对应于大约100ppb的内标。内标为茴香酸乙酯。
利用磁力搅拌以10mL二***提取30分钟。
通过GC/MS/SIM分析该醚提取物。
对每一份样品重复分析两次，以50和100ppb的水平将对甲酚标准添加至数份样品以验证方法性能。
在5至250ppb的范围内进行校准(二***中的外部校准)。
结果
1.存储4周后对系列1的评价。
*4℃下储存：
实验56-4(未处理)： 异味 55ppb的对甲酚
实验56-6(螯合剂/蛋白酶)： 无异味 12ppb的对甲酚
实验56-7(NaOCl 1000ppm)： 苦味
实验56-8(NaOH 1g/kg)： 苦味
实验56-9(NaOH至pH＝9)： 轻微的异味
*20℃下储存：
实验56-6(螯合剂/蛋白酶)： 无异味 9ppb的对甲酚
实验56-7(NaOCl 1000ppm)： 热乳味
实验56-8(NaOH 1g/kg)： 异味
实验56-9(加NaOH至pH＝9)： 发酵乳味
*阳性对照
20℃下： 强的奶牛骚味 160ppb的对甲酚
4℃下： 奶牛骚味 85ppb的对甲酚
2.存储4周后对系列2的评价。
*20℃下储存：
实验58-A(未处理)： 异味
实验58-B(螯合剂/蛋白酶)： 乳状，无异味
*阳性对照 强的奶牛骚味，苦味
3.储存时间达16周后对系列3的评价
对于如下实验，应用了不同的方案。
实验72-1(100℃下热处理，15分钟)
实验72-2(120℃下热处理，20分钟)
实验72-3(螯合剂/蛋白酶处理+100℃下热处理，15分钟)
实验72-4(螯合剂/蛋白酶处理+100℃下热处理，15分钟)
实验72-5(螯合剂/蛋白酶处理)
实验72-6(螯合剂/蛋白酶处理)
实验72-7(螯合剂/蛋白酶处理)
实验72-8(NaOH，1g/L，50℃下)
实验72-10(NaOCl，1000ppm，50℃下)
实验74-2(螯合剂/蛋白酶处理+100℃下热处理，20分钟)
实验74-3(NaOH+100℃下热处理，20分钟)
实验80-A(螯合剂/蛋白酶处理+100℃下热处理，15分钟)
实验80-B(螯合剂/蛋白酶处理，用柠檬酸钠替代柠檬酸，无pH控制+100℃下热处理，15分钟)
实验1201、实验1202、实验1301、实验1401、实验1402
对于前面全部5个实验，在工业规模上，我们应用了‘螯合剂/蛋白酶’处理+100℃下热处理，20分钟。
针对系列3的异味的评价在下表中示出：
*剂量为牛奶中结冷胶的量。
为了进行评价，+意指‘可检测’，++意指‘显著’，+++意指‘强’。
讨论
经确认，单独的‘螯合剂/蛋白酶’方案或‘螯合剂/蛋白酶’方案加上热处理可得到十分好的结果。
US 6,663,911中公开的使用NaOH或NaOCl的方案可导致异味；该异味不同于存在对甲酚特征性的异味。
至于用热处理进行单独处理，看起来温度是敏感参数。两个实验支持该观点：
采用100℃的实验72-1导致对甲酚异味。
采用120℃的实验72-2导致无对甲酚异味。
巴氏灭菌(在当前技术中理解为以适度温度和/或持续时间进行)因而看起来不足以使引起对甲酚的酶变性。
因而优选的是使用热处理，采用高于100℃的温度和约15分钟的长的持续时间。
另外，除了上述实验，在杀菌乳(retorted milk)中进行了实验，杀菌乳意指在高压釜中121℃下罐装灭菌15分钟的“99.78％牛奶+0.2％蔗糖+0.02％结冷胶”。在20℃或40℃下储存6周后未检测出对甲酚。
在释放对甲酚的酶反应中，由于阳性对照导致相当高的对甲酚浓度，这表明奶中存在的前体不是限制因素。因而，可以假定酶是限制因素。因而，对甲酚的产生将直接取决于结冷胶在奶中的百分比。以0.15％进行的测试可视为最终的0.05％配比的加速测试。
如果使用0.15％剂量16周后未检测到对甲酚，则可以假定使用0.05％剂量48周后将会未检测到对甲酚。
结论
毫无疑问，应用于结冷胶发酵液的‘螯合剂/蛋白酶’处理可导致在长的储存周期中在UHT奶中未形成对甲酚异味。
在一些实验以及也考虑在杀菌乳中的结果后，我们可以得出结论，热处理也能够使负责对甲酚产生的酶变性。
因而，根据本发明单独的这两种方法均可用于减少/消除含结冷产品中的异味问题。然而，看起来在将“螯合剂/蛋白酶”处理与热处理相结合时会获得最佳的结果。
Claims (28)
1.一种在混合条件下制备结冷胶的方法，所述方法包括
a)提供含有结冷胶的发酵液或其他液体培养基，
b)如有必要调节所述发酵液/液体培养基的温度和pH以允许或有利于步骤c中的酶处理，
c)添加一种或多种能够减少或消除少动鞘氨醇单胞菌(S.elodea)来源的芳基硫酸酯酶和/或β-葡糖苷酸酶的酶活性的酶，所述一种或多种酶以足以减少或消除所述发酵液/液体培养基中的少动鞘氨醇单胞菌来源的芳基硫酸酯酶和/或β-葡糖苷酸酶的酶活性的量添加，和/或在90℃至125℃之间的温度下处理所述发酵液/液体培养基持续足以减少或消除所述发酵液/液体培养基中的少动鞘氨醇单胞菌来源的芳基硫酸酯酶和/或β-葡糖苷酸酶的酶活性的一段时间，以及
d)任选从所述含结冷胶的发酵液/液体培养基回收所述结冷胶。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述混合条件通过搅拌功率输入和/或通气流来提供。
3.根据权利要求2所述的方法，其中在步骤a或b中将螯合剂添加至所述发酵液/液体培养基。
4.根据权利要求3所述的方法，其中所述螯合剂选自柠檬酸、草酸、磷酸、DTPA、EDTA和NTA。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述柠檬酸以约50％溶液的形式添加。
6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在步骤b)中将所述温度调节至20℃至80℃之间，如50℃至60℃之间，优选53℃至57℃之间。
7.根据权利要求6所述的方法，其中通过将蒸汽直接注入包含所述发酵液/液体培养基的发酵罐中来调节所述温度。
8.根据权利要求1所述的方法，其中步骤b)还包括pH的调节。
9.根据权利要求8所述的方法，其中将所述pH调节为在步骤c中所用的所述一种或多种酶的最佳活性的范围内。
10.根据权利要求3-9中任一项所述的方法，其中权利要求4-9是权利要求3的从属权利要求，其中在步骤a)和b)中添加螯合剂和调节温度基本上同时开始。
11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中pH的调节通过添加NaOH来完成。
12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤c)中添加的所述一种或多种酶是溶菌酶和蛋白酶中的一者或二者，如碱性蛋白酶。
13.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤c包括将所述发酵液/液体培养基保持在55℃、约pH 8下一段时间，然后将pH调节至6至7.5之间，优选6.5至7之间。
14.根据权利要求1所述的方法，其中步骤c)中的热处理在90℃至125℃之间的温度下进行，更具体地讲在100℃至120℃之间的温度下进行。
15.根据权利要求1所述的方法，其中步骤c)包括添加所述一种或多种酶和所述热处理二者。
16.根据权利要求1所述的方法，其中步骤c)包括添加一种或多种酶但无热处理。
17.根据权利要求1所述的方法，其中步骤c)包括热处理但无酶处理。
18.根据权利要求1所述的方法，特征在于当在90℃至125℃之间的温度下处理所述发酵液/液体培养基时，将所述发酵液/液体培养基冷却至超过所述结冷胶的胶凝温度的温度，如约80℃的温度，然后通过添加醇如异丙醇来进行沉淀。
19.根据权利要求18所述的方法，其中所述沉淀为连续沉淀。
20.溶菌酶和/或蛋白酶用于减少或消除含有结冷胶的发酵液/液体培养基中的少动鞘氨醇单胞菌来源的芳基硫酸酯酶和/或β-葡糖苷酸酶的酶活性的用途。
21.高温用于减少或消除含有结冷胶的发酵液/液体培养基中的少动鞘氨醇单胞菌来源的芳基硫酸酯酶和/或β-葡糖苷酸酶的酶活性的用途。
22.1)溶菌酶和/或蛋白酶和2)高温的组合用于减少或消除含有结冷胶的发酵液/液体培养基中的少动鞘氨醇单胞菌来源的芳基硫酸酯酶和/或β-葡糖苷酸酶的酶活性的用途。
23.一种制备适于口服使用的含有结冷胶的食品或含有结冷胶的药物制剂的方法，所述方法包括将通过根据权利要求1-19中任一项所述的方法获得的结冷胶与食品成分或药物组分混合，随后实现所述结冷胶的胶凝以便获得所述用于口服使用的含有结冷胶的食品或药物制剂。
24.一种含有结冷胶的食品，所述食品通过根据权利要求1-19中任一项所述的方法制备。
25.根据权利要求24所述的食品，所述食品选自焙烤食品馅料、糖果、乳制品、带果块的果冻、糖霜、糖衣和糖皮、果酱和果子冻、低脂涂抹物、微波食品、布丁、调味酱、结构化食品和顶端配料。
26.一种适于口服使用的含有结冷胶的药物制剂，所述药物制剂通过根据权利要求1-19中任一项所述的方法制备。
27.根据权利要求26所述的药物制剂，所述药物制剂选自凝胶剂、片剂和胶囊剂。
28.根据权利要求24-27中任一项所述的食品或药物制剂，其中所述结冷胶以有效起到增稠剂和/或乳化剂和/或稳定剂的量存在。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP09178663.2 | 2009-12-10 | ||
| EP09178663 | 2009-12-10 | ||
| PCT/EP2010/069295 WO2011070119A1 (en) | 2009-12-10 | 2010-12-09 | Inactivation of off-taste inducing enzymes |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102791741A true CN102791741A (zh) | 2012-11-21 |
| CN102791741B CN102791741B (zh) | 2017-05-10 |
Family
ID=42687580
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201080055267.0A Active CN102791741B (zh) | 2009-12-10 | 2010-12-09 | 诱导异味的酶的失活 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US20120238643A1 (zh) |
| EP (1) | EP2510015B2 (zh) |
| CN (1) | CN102791741B (zh) |
| BR (1) | BR112012013724B8 (zh) |
| WO (1) | WO2011070119A1 (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2554655A1 (de) * | 2011-08-01 | 2013-02-06 | Döhler GmbH | Nährmedium |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002060268A2 (en) * | 2001-02-01 | 2002-08-08 | Cp Kelco U.S. Inc. | Methods of making sterilized milk compositions comprising native gellan gum |
| CN101460065A (zh) * | 2006-12-15 | 2009-06-17 | Cp凯尔科美国股份有限公司 | 超高性能的澄清化吉兰糖胶 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| BRPI0511559B1 (pt) | 2004-05-26 | 2016-04-19 | Cp Kelco Us Inc | goma gelana de acila alta sensível a cálcio baixo, seu processo para preparação e impedir a desacilação de substituintes e bebida produzida a partir da mesma |
| ES2365798T1 (es) * | 2004-06-21 | 2011-10-11 | Cp Kelco, U.S., Inc. | Goma gelán genéticamente purificada. |
-
2010
- 2010-12-09 EP EP10787781.3A patent/EP2510015B2/en active Active
- 2010-12-09 US US13/513,126 patent/US20120238643A1/en not_active Abandoned
- 2010-12-09 BR BR112012013724A patent/BR112012013724B8/pt active IP Right Grant
- 2010-12-09 WO PCT/EP2010/069295 patent/WO2011070119A1/en active Application Filing
- 2010-12-09 CN CN201080055267.0A patent/CN102791741B/zh active Active
-
2016
- 2016-12-22 US US15/388,073 patent/US10435484B2/en active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002060268A2 (en) * | 2001-02-01 | 2002-08-08 | Cp Kelco U.S. Inc. | Methods of making sterilized milk compositions comprising native gellan gum |
| CN101460065A (zh) * | 2006-12-15 | 2009-06-17 | Cp凯尔科美国股份有限公司 | 超高性能的澄清化吉兰糖胶 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2011070119A1 (en) | 2011-06-16 |
| EP2510015B1 (en) | 2018-06-27 |
| US20170233500A1 (en) | 2017-08-17 |
| EP2510015B2 (en) | 2022-10-26 |
| EP2510015A1 (en) | 2012-10-17 |
| US20120238643A1 (en) | 2012-09-20 |
| BR112012013724B8 (pt) | 2021-05-25 |
| BR112012013724B1 (pt) | 2021-01-26 |
| US10435484B2 (en) | 2019-10-08 |
| CN102791741B (zh) | 2017-05-10 |
| BR112012013724A2 (pt) | 2016-03-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101703209B (zh) | 一种天然猪、牛骨肉味香精的制作方法 | |
| KR101526106B1 (ko) | 혼합발효를 통한 점질물 및 gaba가 증진된 밀기울 발효물 제조방법 및 밀기울 발효물을 이용한 쿠키 제조방법 | |
| CN105831784B (zh) | 一种微囊化壳寡糖及其制备方法和应用 | |
| CN105614614B (zh) | 一种活性乳酸菌发酵饮料及其制备方法 | |
| WO2023125992A1 (zh) | 谷胱甘肽酵母、产品的制备方法和应用 | |
| JP2009161448A (ja) | 麦芽根抽出物、その製造方法、およびそれを含んでなる微生物の発酵促進剤 | |
| CN1151253C (zh) | 海藻糖基水解酶及其制备和用途 | |
| US20160348140A1 (en) | Method for the production of dextran | |
| CN102791741A (zh) | 诱导异味的酶的失活 | |
| CN106070622A (zh) | 含微生物源多聚葡萄糖的酸奶及其制备方法 | |
| CN114591864A (zh) | 用于喷雾干燥乳酸菌的干燥保护剂及喷雾干燥乳酸菌的制备方法 | |
| US6706294B1 (en) | Method for producing foodstuffs, dietetic foodstuffs and food additives on the basis of grain stillage | |
| CN107372826A (zh) | 一种无糖酸奶及其制备方法 | |
| CN1292673C (zh) | 玉米蛋白活性肽的制作方法 | |
| JP6674514B2 (ja) | 食品またはその前駆体を製造する方法、食品またはその前駆体、および対応する使用 | |
| Saji et al. | β-Galactosidase: Application in Dairy and Food Industry | |
| CN1177043C (zh) | 嗜酸耐热海藻糖基合成酶及其制备和用途 | |
| WO2018016393A1 (ja) | デオキシリボ核酸保存用組成物およびその製造方法、デオキシリボ核酸を保存する方法、乳酸菌産生物およびその使用方法 | |
| JP2004057047A (ja) | 乳酸菌の生育促進剤及びその製造法 | |
| CN108851009A (zh) | 一种酱油的制备方法 | |
| CN106616839A (zh) | 鸡腿菇复合调味液的制作方法 | |
| CN1076588A (zh) | 植物蛋白酸乳的制造方法 | |
| CN106307519A (zh) | 液体阿胶的制备方法及其制品 | |
| CN105661239A (zh) | 一种绿豆玉米发酵汁及其制备方法 | |
| JP3472707B2 (ja) | 乳酸菌増殖組成物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CP03 | Change of name, title or address |
Address after: Tanba Goro haro Patentee after: International Nutrition and Health Denmark Ltd. Country or region after: Denmark Address before: Tanba Goro haro Patentee before: DUPONT NUTRITION BIOSCIENCES APS Country or region before: Denmark |
|
| CP03 | Change of name, title or address |