CN102783420A - 一种鱼腥草快速增殖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种鱼腥草快速增殖的方法。包括:外植体的取材与消毒;诱导培养;增殖和生根培养;尤其增殖培养和生根培养能同时进行,培养基配方为:MS+蔗糖30g/L+琼脂5g/L+GA34-5mg/L+0.2mg/L NAA,培养条件为25℃±1℃,光照强度为2000-3000lx,光照时间为16h/d,缩短了获得种苗的时间,提高了生产效率。本方法能够快速、高效、大规模生产纯正、健康、整齐一致的鱼腥草种苗。
Description
技术领域
本发明属于植物组织培养领域,具体涉及一种鱼腥草的快速增殖方法。
背景技术
鱼腥草(Houttuynia cordata Thunb.)为三白草科蕺菜的嫩茎叶,因其茎叶搓碎后有鱼腥味,故名鱼腥草,又名蕺儿菜、折耳根等。我国从20世纪40年代初开始进行鱼腥草的人工栽培,但并没有形成规模,长期以来主要利用野生资源。鱼腥草素(癸酰乙醛)是鱼腥草挥发油中的主要药用成分,其对金黄色葡萄球菌等有明显抑制作用(熊大胜,鱼腥草提取抑菌作用研究,常德师范学院学报自然科学版,2002,14(4):59-60)。鱼腥草还含有槲皮甙等有效成分,具有抗病毒和利尿作用。临床实践表明:鱼腥草对于上呼吸道感染、支气管炎、肺炎、慢性气管炎等均有较好的疗效,尤其对治疗肺痈有特殊的疗效(陈建武,宋康,鱼腥草治疗肺系疾病概述,浙江中西医结合杂志,2010,20(11):713-714;可馨,治疗肺痈的良药,求医问药,2011,07:43-44)。另外,鱼腥草还能增强机体免疫功能,抗肿瘤、消炎(曹俊双,秦荣和,鱼腥草的药理作用及临床应用,现代中西医结合杂志,2001,10:572)等方面的作用。被国家***正式确定为“既是药品,又是食品”的资源之一(国家药典委员会,中华人民共和国药典(一部),北京:化学工业出版社,2001:606-607)。
鱼腥草的繁殖技术主要包括扦插繁殖(余启高等,鱼腥草优质高产栽培技术,安徽农学通报,2007,05:175)分株繁殖(王班琼,浅析鱼腥草的发展及栽培技术,农技服务,2007,24(4):102;刘国庆,鱼腥草栽培技术,现代园艺,2009,4:40-41;徐如意等,鱼腥草人工栽培技术,科技宝典,种植,2008,05:87-880)、根茎繁殖(黄吉美等,鱼腥草无公害丰产栽培技术,云南农业科技,2004,5:15-16;陈洪德等,鱼腥草的栽培管理与综合开发,福建茶叶,2001,01:23-24)、组织培养繁殖。近年来,生产中开始出现病害严重,种根使用混杂,鱼腥草的种根产量和质量难以保证等问题(高静等,鱼腥草的现代研究进展,湖南中医学院学报,2005,12(6):60-62)。因此通过鱼腥草组织或器官的离体培养和形态发生(袁艺等,鱼腥草组织培养的研究,激光生物报,2004,13(6):214-21;龚伟等,鱼腥草组织培养,亚热带植物科学,2005,34(1):60-62),实现种苗的快速繁殖,解决因病害或有性繁殖系数低而影响产量和质量的问题,具有十分重要的生产意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种鱼腥草快速增殖的方法,采用鱼腥草增殖与生根同步的方法,以便快速、高效、大规模地生产纯正、健康、整齐一致的鱼腥草种苗。
本发明的目的是通过以下方式实现的。
一种鱼腥草快速增殖方法,包括以下步骤:
(1)外植体的取材与消毒:取当年生鱼腥草的地下茎节流水清洗4-6h后,切成带1-2个茎节的茎段,用链霉素和青霉素钠的混合液浸泡12h,混合液中链霉素和青霉素钠的浓度均为0.5g/L;然后用70%酒精浸泡30s;再用0.1%升汞消毒12min;后用无菌水冲洗4-5次;最后用0.1%升汞消毒灭菌10min,无菌水冲洗5次后备用;
(2)诱导培养:将消毒好的带1-2个茎节的茎段接种在MS+0.5mg/LNAA+2mg/L6-BA培养基上诱导不定芽产生,培养条件为25℃±1℃,光照强度为2000-3000lx,光照时间为16h/d,30d后得到1-3cm高的启动苗;
(3)增殖培养与生根:将启动苗切成单个茎段,接种在培养基MS+蔗糖30g/L+琼脂5g/L+GA34-5mg/L+0.2mg/L NAA上,培养条件为25℃±1℃,光照强度为2000-3000lx,光照时间为16h/d,30d后得到高6-8cm带5-6个茎节的生根的鱼腥草苗;
(4)炼苗与移栽:将步骤(3)得到的鱼腥草苗进行炼苗移栽。
该发明具有以下优点:(1)采用二步灭菌法比一步灭菌法的灭菌效果更好,对鱼腥草内生细菌的有较好的抑制作用。(2)利用地下茎节做外植体,能灭菌得比较彻底且能保证较高的存活率。采用地上茎节做外植体,如果剥落全部叶片,则容易导致幼嫩芽点被伤害和脱落,存活率不高;如果保留部分叶片,其托叶与叶柄合生成的鞘内部消毒不能彻底,灭菌过程中污染率特别高。(3)增殖和生根培养通过添加合适量的GA3,能促进鱼腥草不定芽的伸长,繁殖系数高,且在增殖的同时诱导生根,缩短培育周期。(4)生根率和移栽成活率高,遗传稳定性好。
此方法可以实现快速繁殖鱼腥草种苗大规模的生产,可以一步快速获得完整植株,每4-6继代一次,移栽成活率达99%左右,对鱼腥草品种选育具有积极的作用。
附图说明
图1是本发明中由地下茎节茎段获得的各阶段鱼腥草植株,其中:A.茎段的启动培养,B-C.增殖与生根培养,D.生根苗移栽到苗床(30d后)。
具体实施方式
以下实施例旨在进一步说明本发明,而不会限制本发明。
实施例1:
(1)外植体的取材与消毒:取当年生鱼腥草的地下茎节流水清洗4-6h后,切成带1-2个茎节的茎段,用链霉素和青霉素钠的混合液浸泡12h,混合液中链霉素和青霉素钠的浓度均为0.5g/L;然后用70%酒精浸泡30s;再用0.1%升汞消毒12min;后用无菌水冲洗4-5次;最后用0.1%升汞消毒灭菌10min,无菌水冲洗5次后备用;
(2)诱导培养:将消毒好的带1-2个茎节的茎段接种在MS+0.5mg/LNAA+2mg/L6-BA培养基上诱导不定芽产生,培养条件为25℃±1℃,光照强度为2000-3000lx,光照时间为16h/d,30d后得到1-3cm高的启动苗;(图1,A)
(3)增殖培养与生根:将启动苗切成单个茎段,接种在培养基MS+GA34-5mg/L+0.2mg/LNAA上,其中MS培养基中的蔗糖添加量为30g/L,琼脂添加量为5g/L,培养条件为25℃±1℃,光照强度为2000-3000lx,光照时间为16h/d,30d后得到高6-8cm带5-6个茎节的生根的鱼腥草苗;增殖系数高达5.63左右,生根率达100%;(图1,B,C)
(4)炼苗与移栽:将生根苗的容器拧开瓶盖,在普通房间放置24h,然后用镊子将生根苗移出,在自来水下冲洗去掉附着在根上的培养基,移栽到温室苗床上,使用的培养基质为培养土(在市场所购):蛭石=1:1;浇透水;之后进行正常的肥水管理;成活的植株与实生苗无差异,完全保持母本的遗传特征(图1,D)。成活率达到99%左右。
Claims (1)
1.一种鱼腥草快速增殖的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)外植体的取材与消毒:取当年生鱼腥草的地下茎节流水清洗4-6h后,切成带1-2个茎节的茎段,用链霉素和青霉素钠的混合液浸泡12h,混合液中链霉素和青霉素钠的浓度均为0.5g/L;然后用70%酒精浸泡30s;再用0.1%升汞消毒12min;后用无菌水冲洗4-5次;最后用0.1%升汞消毒灭菌10min,无菌水冲洗5次后备用;
(2)诱导培养:将消毒好的带1-2个茎节的茎段接种在MS+0.5mg/LNAA+2mg/L6-BA培养基上诱导不定芽产生,培养条件为25℃±1℃,光照强度为2000-3000lx,光照时间为16h/d,30d后得到1-3cm高的启动苗;
(3)增殖培养与生根:将启动苗切成单个茎段,接种在培养基MS+蔗糖30g/L+琼脂5g/L+GA34-5mg/L+0.2mg/L NAA上,培养条件为25℃±1℃,光照强度为2000-3000lx,光照时间为16h/d,30d后得到高6-8cm带5-6个茎节的生根的鱼腥草苗;
(4)炼苗与移栽:将步骤(3)得到的鱼腥草苗进行炼苗移栽。
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