CN102778494A

CN102778494A - 一种分离测定护肤类化妆品中6种皮质激素的方法

Info

Publication number: CN102778494A
Application number: CN2012101776881A
Authority: CN
Inventors: 李娟�; 陈新; 商少明; 李萌; 刘瑛
Original assignee: Jiangnan University
Current assignee: Jiangnan University
Priority date: 2012-06-01
Filing date: 2012-06-01
Publication date: 2012-11-14

Abstract

本发明提供了一种分离测定护肤类化妆品中6种激素的方法。以离子液体和β-环糊精为添加剂的反向微乳毛细管电泳法(MEEKC)分离测定化妆品中丙酸氟替卡松、曲安奈德、醋酸可的松、***、氢化可的松和***6种激素。本发明比常规的MEEKC分离测定方法具有更高的分离度。实验结果显示该方法样品处理简单、用量少，方法经济快速，分离度好和灵敏度高，实现了化妆品中皮质激素的毛细管电泳测定。

Description

一种分离测定护肤类化妆品中6种皮质激素的方法

技术领域

本发明属于分析技术领域，具体涉及一种分离测定护肤类化妆品中皮质激素的方法。

技术背景

糖皮质激素(Corticosteroids)是一类由肾上腺皮质分泌的甾类激素，有重要的生理活性，如抗炎及抗过敏，降低毛细血管壁和细胞膜的通透性，减少炎性渗出等作用。短时间使用含有糖皮质激素的护肤类化妆品可使皮肤光滑细腻、红润白嫩、保湿而富有弹性、减少皱纹或治疗粉刺，有着较好的美容效果。但长期使用糖皮质激素会导致面部皮肤损害、发生皮肤变薄、毛细血管扩张、毛囊萎缩。我国《化妆品卫生规范》^]规定此类物质为化妆品中禁用物质。因此建立护肤类化妆品中激素的高效快速检测方法，对于严格控制此类化妆品的产品质量，确保使用安全具有重要的意义。

糖皮质激素的测定方法主要有高效液相色谱法、LC-MS、GC-MS和毛细管电动色谱法等，其中高效液相色谱法是最常用的方法，但是该方法需要比较复杂的样品预处理过程，且液相色谱仪及液相色谱柱价格昂贵，仪器的运行成本也比较高。因而有必要建立一种简单、快速、灵敏度高且成本相对低的检测方法。

微乳毛细管电动色谱(MEEKC)是在20世纪90年代在胶束毛细管电动色谱的基础上发展起来的一种电泳新技术，由于该法具有分离效率高，分析速度快，应用范围广泛，样品预处理简单，分析耗费低等优点，因此越来越受到了人们的重视。

发明内容

本发明提供了一种以离子液体和β-环糊精为添加剂的反向微乳毛细管电泳法(MEEKC)，分离测定护肤类化妆品中丙酸氟替卡松、曲安奈德、醋酸可的松、***、氢化可的松和***6种激素。本发明是这样实现的，样品经甲醇提取后，将样品提取液进样至含有离子液体BMIM-BF₄和β-环糊精的微乳运行液的毛细管电泳上，在电泳及测定条件下分离并测定化妆品中激素的含量。

所述样品提取液采用以下步骤获得，在一定量的样品中加入一定体积的甲醇，超声助溶30min；采用高速离心机，12000r/min，离心20min；如此处理3次，合并3次上清液，在旋转蒸发仪上浓缩至约1mL，转移并加微乳运行液清洗定容至10mL；溶液经0.45μm滤膜过滤，并超声脱气

所述的微乳运行液的组成为：0.026g/mL十二烷基硫酸钠SDS，0.073g/mL正丁醇，0.06g/mL正辛烷，10mmol/L 1-甲基-3-正丁基四氟化硼，10mmol/L β-环糊精，20mmol/L pH2.2的磷酸二氢钠缓冲液。微乳运行液配制时需超声30min，使用前经0.45μm滤膜过滤，并超声脱气10min。

所述的毛细管电泳所采用的毛细管为未涂层石英毛细管，总长度为65cm，有效长度50cm，柱内径为50μm。

所述的毛细管电泳的条件为：进样电压-20kV，进样时间3s，反相运行电压-20kV，运行温度20℃。

样品提取液经毛细管电泳分离后，采用紫外光检测器检测，检测波长为245nm。

所述的方法，其特征是进行毛细管电泳时，要对毛细管进行冲洗压力为20kpa冲洗，按照冲洗目的的需要，冲洗的程序为：

进行毛细管电泳时，要对毛细管进行冲洗，冲洗压力为20kpa，按照冲洗目的的需要，冲洗的程序为：

A、对于新的毛细管在使用前进行的冲洗

B、进样前对毛细管进行的冲洗：

H₂O 3min，

0.1mol/NaOH 5min，

H₂O 3min，

微乳运行液 5min.。

C、检测结束对毛细管进行的冲洗

H₂O 3min，

0.1mol/NaOH 5min，

H₂O 3min，

空气 5min。

附图说明

β-环糊精和离子液体为添加剂的MEEKC分离6种激素的电泳谱图

具体实施方案

实施例：

1、材料与方法

(1)试验材料：

某品牌化妆品中的乳液。

(2)仪器及色谱条件：

TH-3100高效毛细管电泳仪。

采用未涂层石英毛细管(总长度为65cm，有效长度50cm，柱内径为50μm)为分离通道，以离子液体BMIM-BF₄和β-环糊精为添加剂的微乳液为运行缓冲溶液，以压力-20kV方式阴极进样3s，紫外检测波长245nm，运行电压-20kV，温度20℃。

(3)激素标准溶液的配制：

准确称取***、氢化可的松、醋酸可的松、丙酸氟替卡松、曲安奈德、***各0.0800g，分别加10.0mL甲醇溶解、混匀，配制成质量浓度均为8mg/mL的6种激素的标准储备液，于4℃冰箱内避光保存，使用时根据需要稀释成不同浓度的标准液。

(4)样品溶液制备：称取2.00g化妆品，加入10mL甲醇，超声助溶30min采用高速离心机，12000r/min，离心20min；如此处理3次，合并3次上清液，在旋转蒸发仪上浓缩至约1mL，转移并加微乳运行液清洗定容至10mL；溶液经0.45μm滤膜过滤，并超声脱气后使用。

(5)微乳运行液的制备：0.026g/mL十二烷基硫酸钠SDS，0.073g/mL正丁醇，0.06g/mL正辛烷，10mmol/L 1-甲基-3-正丁基四氟化硼，10mmol/L β-环糊精，20mmol/LpH 2.2的磷酸二氢钠缓冲液。超声30min。使用前经0.45μm滤膜过滤，并超声脱气10min。

(6)化妆品中激素含量的测定：

优化的实验条件下，化妆品提取液在高效毛细管电泳仪上进样，平行测定3次。

(7)样品回收率测定：

在相应化妆品中加入一定量相应激素的标准溶液，充分混匀，与相应样品同时同样处理，所得提取液在高效毛细管电泳仪上进样，同样平行测定3次。

2、测定结果

(1)激素分离结果(如附图所示)

(2)激素测定结果：

6种激素的线性范围、回归方程及相关系数、检出限见表1所示。

表1、6种激素线性范围、回归方程及相关系数、检出限

样品加标回收率见表2。

表2 样品中6种皮质激素的加标回收率

N.F：未检出

Claims

1.一种分离测定护肤类化妆品中6种激素的方法，其特征是以离子液体和β-环糊精为添加剂的反向微乳毛细管电泳法(MEEKC)，样品经甲醇提取后，将样品提取液进样至含有离子液体BMIM-BF₄和β-环糊精的微乳运行液的毛细管电泳上，在电泳及测定条件下分离并测定化妆品中丙酸氟替卡松、曲安奈德、醋酸可的松、***、氢化可的松和***激素的含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是样品提取液采用以下步骤获得，在一定量的样品中加入一定体积的甲醇，超声助溶30min；采用高速离心机，12000r/min，离心20min；如此处理3次，合并3次上清液，在旋转蒸发仪上浓缩至约1mL，转移并加微乳运行液清洗定容至10mL；溶液经0.45μm滤膜过滤，并超声脱气。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征是微乳运行液的组成为：0.026g/mL十二烷基硫酸钠SDS，0.073g/mL正丁醇，0.06g/mL正辛烷，10mmol/L 1-甲基-3-正丁基四氟化硼，10mmol/Lβ-环糊精，20mmol/L pH 2.2的磷酸二氢钠缓冲液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征是微乳运行液配制时需超声30min，使用前经0.45μm滤膜过滤，并超声脱气10min。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征是毛细管电泳所采用的毛细管为未涂层石英毛细管，总长度为65cm，有效长度50cm，柱内径为50μm。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征是毛细管电泳的条件为：进样电压-20kV，进样时间3s，反相运行电压-20kV，运行温度20℃。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征是样品提取液经毛细管电泳分离后，采用紫外光检测器检测，检测波长为245nm。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征是进行毛细管电泳时，要对毛细管进行冲洗，冲洗压力为20kpa，按照冲洗目的的需要，冲洗的程序为：

A、对于新的毛细管在使用前进行的冲洗

B、进样前对毛细管进行的冲洗：

H₂O 3min，

0.1mol/NaOH 5min，

H₂O 3min，

微乳运行液 5min.。

C、检测结束对毛细管进行的冲洗

H₂O 3min，

0.1mol/NaOH 5min，

H₂O 3min，

空气 5min。