CN102690264B

CN102690264B - 2-苯基-3-取代咪唑并[1,2-a]吡啶类衍生物及其制备方法

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Publication number: CN102690264B
Application number: CN201210203694.XA
Authority: CN
Inventors: 曹晓群; 葛燕青; 顾建勇; 朱焰; 林晓辉
Original assignee: Taishan Medical University
Current assignee: Jewim Pharmaceutical Shandong Co ltd
Priority date: 2012-06-20
Filing date: 2012-06-20
Publication date: 2014-07-02
Anticipated expiration: 2032-06-20
Also published as: CN102690264A

Abstract

本发明涉及2-苯基-3-取代咪唑并[1,2-a]吡啶类衍生物，具有***和病毒等疾病的药物化合物I及其制备方法和用途。本发明与现有技术相比，由于具有式I结构，在抗流感病毒的效果明显提高，对胃腺癌细胞也能够起到一定的抑制作用，同时公开了包含化合物I的药学上可接受的盐以及一种或几种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂组成的药物组合物。

Description

2-苯基-3-取代咪唑并[1,2-a]吡啶类衍生物及其制备方法

一、技术领域

本发明涉及肿瘤和抗病毒治疗的药物领域，更确切地说，是涉及一类具有抗肿瘤或抗病毒作用的2-苯基-3-取代咪唑并[1,2-a]吡啶类衍生物的其制备方法及用途，以及含有它们的药物组合物。

二、背景技术

近年来，咪唑并[1,2-a]吡啶类化合物引起了人们广泛关注。这类化合物具有胃病预防与治疗、抗溃疡、抗炎、抗癌、抗病毒等药理活性，例如：在专利CN87106804、CN200980148444.7、CN201010256861.8中描述的咪唑并[1,2-a]吡啶衍生物具有预防和治疗胃肠道疾病的药理活性；专利CN88106859.4和CN87108027所涉及的8-烷氧基基取代的咪唑并[1,2-a]吡啶具有抗溃疡的活性；专利号为CN200880122184.1的专利所涉及的多取代咪唑并[1,2-a]吡啶具有抗炎、抗癌药理活性；专利CN200910146182.2所涉及的咪唑并[1,2-a]吡啶取代的托烷衍生物具有抗病毒的活性。另外，吡唑衍生物还可以作为细胞及酶的抑制剂，在专利CN200480008491.9、CN200480024041.9、CN200480027819.1、CN200580018762.3、CN200980122215.8、CN201080008839.X中均有涉及。在其他方面，专利CN200710193642.8和CN200910023047.9所涉及的咪唑并[1,2-a]吡啶衍生物可以用于制造有机发光二极管以及有机电致磷光发光器件，而专利CN90100789.7中其衍生物可以作为除草剂来应用:。

肿瘤和病毒感染一直是人类面临的严重问题，迫切需要研究开发新的药物。有些药物能够对对抗肿瘤和抗病毒的产生一定的作用，但抗肿瘤和病毒抑制率并不高。

三、发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，寻找一种抗肿瘤和流感病毒效果好的化合物，提供了具有通式I结构的化合物及其药学上可接受的盐。

本发明采取的技术方案是：2-苯基-3-取代咪唑并[1,2-a]吡啶类衍生物，其特征在于：具有式

结构的化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

R¹ 和R²为：–H、-F、-Cl、-Br、-OR、NO₂、-CH₃、-CH₂CH₃、-CH₂CH₂CH₃、-(CH)CH₃、-CH₂CH₂CH₂CH₃、-OH、-N(CH₃)、-CN或-CO(CH₂)_0-3CH₃中的单个或多个取代基，并分别处在芳环上的对位、邻位或间位；

X为 N- R³或 O;

R³是-OH 或C₁-C₄的直链、支链烷基或单取代、多取代苯基。

本发明具本发明有式

结构的化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

R¹ 和R²为：–H、-F、-Cl、-Br、-O CH₃、NO₂、-CH₃、-CH₂CH₃、-CH₂CH₂CH₃、-(CH)CH₃、-CH₂CH₂CH₂CH₃、-OH、-N(CH₃)、-CN或-CO(CH₂)_0-3CH₃中的单个或多个取代基，并分别处在芳环上的对位、邻位或间位；

X为 N- R³或 O;

R³是-OH 或C₁-C₄的直链、支链烷基或单取代、多取代苯基。

本发明通式

化合物或药学上可接受的盐，选自

GYQ-1：2-苯基-3-（5-羟甲基异噁唑）-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶

GYQ-2：2-（4-氟苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶

GYQ-3：2-（4-氯苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶

GYQ-4：2-（4-溴苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶

GYQ-5：2-（4-甲氧基苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶

GYQ-6：2-（4-硝基苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶

GYQ-7：2-苯基-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯

GYQ-8：2-（4-氟苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯

GYQ-9：2-（4-氯苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯

GYQ-10：2-（4-溴苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯

GYQ-11：2-（4-甲氧基苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯

GYQ-12：2-（4-硝基苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯

GYQ-13：2-苯基-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶

GYQ-14：2-（4-氟苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶

GYQ-15：2-（4-氯苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶

GYQ-16：2-（4-溴苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶

GYQ-17：2-（4-甲氧基苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶

GYQ-18：2-（4-硝基苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶

GYQ-19：2-苯基-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯

GYQ-20：2-（4-氟苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯

GYQ-21：2-（4-氯苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯

GYQ-22：2-（4-溴苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯

GYQ-23：2-（4-甲氧基苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯

GYQ-24：2-（4-硝基苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯

GYQ-25：2-苯基-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-羧酸钠。

本发明合成权利要求1-2的通式

化合物的方法，包括如下步骤：将化合物

与DMF、POCl₃作用得到化合物

，溶剂为DMF，反应温度为20-40度，反应时间为8-24小时；化合物

与盐酸羟胺或苯肼反应，溶剂为乙醇，反应温度为50-80度，反应时间为12-48小时，生成化合物

或

；化合物或

用NCS处理，在碱性条件下，与取代的烯或炔发生1，3偶极加成反应生成最终化合物

a或

b，溶剂为二氯甲烷，反应温度为20-50度，反应时间为3-8小时，

。

本发明权利要求1所定义的通式

化合物或药学上可接受的盐在制备抗肿瘤或抗病毒药物方面的应用。

一种药物组合物，含有权利要求1-3之一的通式

化合物或药学上可接受的盐，以及适当的载体或赋形剂。

本发明所述的组合物为固体口服制剂、液体口服制剂或注射剂。

本发明所述式

化合物的药学上可接受的盐，根据不同衍生物可以含有羧基或胺基，羧基可与碱性物质（如碱金属或碱土金属的氢氧化物、碳酸盐和碳酸氢盐）反应，它们包括，但不限于：氢氧化钠，氢氧化钾，氢氧化钙，碳酸钠等形成药学上可接受的盐，如相应的钠盐，钾盐或钙盐等等。也可采用无毒的有机碱如甲胺、三乙胺、葡甲胺等生成盐；胺基可与各种无机酸（如盐酸、硫酸、硝酸、磷酸等，但不仅限于此）或有机酸（如甲酸、乙酸、柠檬酸、草酸、富马酸、马来酸、氨基酸等等，但不仅限于此）生成盐。

本发明所述式化合物的药学上可接受的盐，可与一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂共同制成药物组合物。该药物组合物可以制成固体口服制剂、液体口服制剂等剂型，所述的固体及液体口服制剂包括：片剂、分散片、肠溶片、咀嚼片、口崩片、胶囊、颗粒剂、糖浆剂、口服溶液剂、注射剂。

所述的固体口服制剂采用乳糖、淀粉或甘露醇作为稀释剂，使用明胶，甲基纤维素、羟丙甲纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、淀粉浆等作为粘合剂；使用淀粉、羧甲基纤维素钠、羧甲淀粉钠、低取代羟丙甲纤维素、交联聚维酮、微晶纤维素作为崩解剂；使用滑石粉、微粉硅胶、硬脂酸甘油酯、硬脂酸钙或镁等作为抗粘合剂和润滑剂。

所述固体口服制剂的制备方法包括以下步骤：将活性成分与辅料包括稀释剂、粘合剂、选择性的与一种或两种崩解添加剂组成混合物，采用干法制粒或将该混合物与粘合剂的含水溶液，醇性或含水醇性溶液在合适的设备中进行湿法，或干燥颗粒，随后加入其它的崩解剂、润滑剂和抗粘合剂或胶囊、颗粒剂等适合临床的剂型。

所述液体口服制剂采用乳糖、甘露醇作为稀释剂；甲基纤维素、羟丙甲纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素等作为增稠剂或混悬剂；山梨酸、盐酸、乳酸、氢氧化钠、磷酸二氢钠等作为PH调节剂；泊洛萨姆、十二烷基硫酸钠、聚乙二醇400、聚乙二醇600、聚乙二醇1000等作为增溶剂；阿斯巴甜、甜菊素、谷氨酸钠、果糖、柠檬香精、橙味香精等为矫味剂；尼泊金、苯甲醇等作为防腐剂。

所述液体口服制剂的制备方法包括以下步骤：取蒸馏水适量，加入水溶性填充剂、PH调节剂、增稠剂或混悬剂、增溶剂、矫味剂等搅拌使溶解，再加入本发明物，加入防腐剂后，灌装于瓶中。

本发明的系列化合物还可以通过非肠道形式给药，如外用软膏剂、贴剂等，优选的非肠道给药形式为注射剂给药。

所述的注射给药制剂包括冻干粉针、小针注射液和小输液。其特征包括水溶性填充剂甘露醇、低分子右旋糖苷、山梨醇、聚乙二醇、吐温、葡萄糖。乳糖或半乳糖；PH调节剂磷酸、盐酸、氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸钠或钾或铵盐、碳酸氢钠或钾或铵盐等生理可接受的有机或无机酸和碱及盐；稳定剂卡波姆、十二烷基硫酸钠或三羟甲基氨基甲烷；渗透压调节剂氯化钠、氯化钾的一种或两种组合。

不同的经注射给药制剂的制备方法如下:

冻干剂

取本发明化合物及其盐和水溶性填充剂、稳定剂、渗透压剂等，加入注射用水适量，调节PH值至4-8使其溶解，加水至刻度，加入0.1-0.5%活性炭，在20-50度下搅拌10-60分钟，脱碳，采用微孔滤膜过滤除菌，滤液进行分装，采用冷冻干燥法，制得白色疏松块状物，封口即的。

小针注射液

取本发明化合物及其盐和水溶性填充剂、稳定剂、渗透压剂等，加入注射用水适量，调节PH值至4-8使其溶解，加水至刻度，加入0.1-0.5%活性炭，在20-50度下搅拌10-60分钟，脱碳，精滤、灌封、灭菌。

小输液

取本发明化合物及其盐和水溶性填充剂、稳定剂、渗透压剂等，加入注射用水适量约30%，调节PH值至4-8使其溶解，加入0.1-0.5%活性炭，在20-50度下搅拌10-60分钟，脱碳，加水至刻度，精滤、灌封、灭菌。

本发明的系列化合物实际服用化合物的剂量应该由医生根据有关的情况来决定，这些情况包括被治疗者的身体状态，患者的给药途径、年龄、体重、对药物的个体反应和症状的严重程度等等。

本发明所述式

化合物的生物活性通过以下方式测定：

（1）抗肿瘤活性

样品以DMSO助溶，无血清DMEM培养基稀释到所需浓度，部分样品溶液呈悬浮状。

细胞株：人早幼粒细胞白血病HL-60细胞；人胃腺癌SGC-7901细胞；人结肠癌SW-480细胞。

取对数生长期的细胞，经0.25%胰蛋白酶消化后（悬浮细胞无需消化），悬浮于含10%小牛血清的DMEM培养液中，用玻璃管轻轻吹打成单细胞悬液，显微镜下用血细胞计数板计数活细胞。96孔培养板每孔接种细胞悬液90μL（细胞浓度为5-10×10⁴个/mL），在37度、100%相对湿度、含5%CO₂、95%空气的培养箱中培养24h后，每孔加10 μL药液（终浓度设为10 μg/mL）。另设阴性对照（等浓度DMSO）及空白本底（不加细胞），各组均设3个复孔。再连续培养24h，然后每孔加入10 μL 5mg/mL的MTT溶液，继续培养4h后，仔细吸去上清液（悬浮细胞，需要先离心，再吸去上层清液）。每孔加入100 μLDMSO，置于微量振荡器震荡5min以使晶体完全溶解，于酶标仪492nm单波长比色，测定OD值。

抑制率（%）= [1-(实验组OD均值-空白组OD均值)/（对照组OD均值-空白组OD均值）] × 100%

（2）抗病毒活性

取对数生长期的MDCK细胞，经0.25%胰蛋白酶消化后（悬浮细胞无需消化），悬浮于含10%小牛血清的DMEM培养液中，用玻璃管轻轻吹打成单细胞悬液，显微镜下用血细胞计数板计数活细胞。96孔培养板每孔接种细胞悬液90 μL（细胞浓度为5-10×10⁴个/mL），在37度、100%相对湿度、含5%CO₂、95%空气的培养箱中培养24h后，每孔加10 μL药液（终浓度设为10 μg/mL）和10 μL甲型流感病毒毒液（滴度1:100）。模型组只加病毒不加药物，正常组不加病毒，另设阴性对照（等浓度DMSO）及空白本底（不加细胞），各组均设3个复孔。再连续培养24h，然后每孔加入10 μL 5mg/mL的MTT溶液，继续培养4h后，仔细吸去上清液（悬浮细胞，需要先离心，再吸去上层清液）。每孔加入100 μLDMSO，置于微量振荡器震荡5min以使晶体完全溶解，于酶标仪492nm单波长比色，测定OD值。

抑制率（%）= (实验组OD均值-模型组OD均值)/（正常组OD均值-模型组OD均值）× 100%。

本发明涉及通式I化合物经药理测定具有一定抗流感病毒和抗肿瘤的生物活性：

	人白血病HL-60细胞抑制率（%）	人胃腺癌SGC-7901细胞抑制率（%）	流感病毒抑制率（%）
				GYQ-1	12.3	15.6	35.7
GYQ-3	48.6	54.4	55.1
				GYQ-7	20.3	15.3	61.1
GYQ-9	30.2	20.1	76.3
				GYQ-13	30.6	23.3	40.0
GYQ-17	40.1	35.5	69.1
				GYQ-20	49.9	27.7	60.6
GYQ-25	53.2	42.2	77.5

由以上实验数据可知：本发明对流感病毒的抑制率平均高达50%以上，对胃腺癌SGC-7901细胞也起到了一定的抑制作用。

本发明的有益效果是：本发明化合物与现有技术相比，由于具有式I 结构，在抗流感病毒的效果明显提高，对胃腺癌细胞也能够起到一定的抑制作用。

具体实施方式：

下面结合实施例对本发明作进一步的说明，发明的化合物经薄层色谱进行检测，随后用¹H NMR确证其结构.

实施例1 7-甲基-2-苯基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲醛

冰浴下，将三氯氧磷1.38 mL（15mmol）缓慢滴加到10 mLDMF中，滴加完毕后室温搅拌1h，向体系中滴加7-甲基-2-苯基咪唑并[1,2-a]吡啶（2.08g，10 mmol）的DMF溶液，滴加完毕后室温搅拌24h，倒入冰水中，搅拌1h后，二氯甲烷萃取三次，合并有机相，水洗，干燥，浓缩得粗品，二氯甲烷重结晶得纯品。产率86%。¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 7.0(dd), 1H; 7.5-7.6(m), 4H; 7.8(m), 2H; 9.5(d), 1H; 10.0(s), 1H.。

实施例2

参照例1制备7-甲基-2-（4-氟苯基）咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲醛，产率（89%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 7.3(d), 1H; 7.4(d), 2H; 7.8(s), 1H; 8.2(d), 2H; 9.4(d), 1H; 10.0(s), 1H。.

实施例3

参照例1制备7-甲基-2-（4-溴苯基）咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲醛，产率（80%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 7.1(d), 1H; 7.6(s), 1H; 7.7(d), 2H; 7.8(d), 2H; 9.4(d), 1H; 10.0(s), 1H.。

实施例4

参照例1制备7-甲基-2-（4-甲氧基苯基）咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲醛，产率（84%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 3.9(s), 3H; 6.9(d), 1H; 7.0(d), 2H; 7.5(s), 1H; 7.8(d), 2H; 9.5(d), 1H; 10.0(s), 1H.。

实施例5

参照例1制备7-甲基-2-（4-硝基苯基）咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲醛，产率（78%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 7.4(d), 1H; 7.9(s), 1H; 8.1(d), 2H; 8.3(d), 2H; 9.4(d), 1H; 10.0(s), 1H.。

实施例6

参照例1制备2-苯基-3-甲酰基咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（76%）¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 4.4(q), 2H; 7.0(dd), 1H; 7.5-7.8(m), 5H; 8.0(s), 1H; 9.7(d), 1H; 10.0(s), 1H.。

实施例7

参照例1制备2-（4-氟苯基）-3-甲酰基咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（70%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 4.4(q), 2H; 7.3(d), 1H; 7.4(d), 2H; 8.0(s), 1H; 8.2(d), 2H; 9.7(d), 1H; 10.0(s), 1H.。

实施例8

参照例1制备2-（4-氯苯基）-3-甲酰基咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（79%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 4.4(q), 2H; 7.2(d), 1H; 7.6(d), 2H; 8.0(s), 1H; 8.0(d), 2H; 9.7(d), 1H; 10.0(s), 1H.。

实施例9

参照例1制备2-（4-溴苯基）-3-甲酰基咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（70%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 4.4(q), 2H; 7.1(d), 1H; 7.6(s), 1H; 7.7(d), 2H; 7.8(d), 2H; 9.6(d), 1H; 10.0(s), 1H.。

实施例10

参照例1制备2-（4-甲氧基苯基）-3-甲酰基咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（74%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 3.9(s), 3H; 4.4(q), 2H; 6.9(d), 1H; 7.0(d), 2H; 7.6(s), 1H; 7.8(d), 2H; 9.6(d), 1H; 10.0(s), 1H.。

实施例11

参照例1制备2-（4-硝基苯基）-3-甲酰基咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（72%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 4.4(q), 2H; 7.4(d), 1H; 8.1(s), 1H; 8.2(d), 2H; 8.4(d), 2H; 9.7(d), 1H; 10.0(s), 1H。.

实施例12 7-甲基-2-苯基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲醛肟

在50 mL圆底烧瓶中加入15 mL甲醇和7-甲基-2-苯基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲醛（1.18g， 5 mmol），搅拌均匀后加入盐酸羟胺（0.42g，6 mmol），完全溶解后慢慢加入碳酸钠（0.318g， 3 mmol），室温搅拌4h，TLC检测反应结束后，加入50 mL水，二氯甲烷萃取三次，合并有机相，水洗，干燥，浓缩得白色固体，产物直接用于下步反应。产率92%。

实施例13

参照例12制备7-甲基-2-（4-氟苯基）咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲醛肟，产率（89%）。.

实施例14

参照例12制备7-甲基-2-（4-氯苯基）咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲醛肟，产率（91%）。.

实施例15

参照例12制备7-甲基-2-（4-溴苯基）咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲醛肟，产率（86%）。.

实施例16

参照例12制备7-甲基-2-（4-甲氧基苯基）咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲醛，产率（87%）。.

实施例17

参照例12制备7-甲基-2-（4-硝基苯基）咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲醛肟，产率（84%）。.

实施例18

参照例12制备2-苯基-3-羟亚胺甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（71%）。

实施例19

参照例12制备2-（4-氟苯基）-3-羟亚胺甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（70%）。.

实施例20

参照例12制备2-（4-氯苯基）-3-羟亚胺甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（69%）。.

实施例21

参照例12制备2-（4-溴苯基）-3-羟亚胺甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（67%）。

实施例22

参照例12制备2-（4-甲氧基苯基）-3-羟亚胺甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（66%）.。

实施例23

参照例12制备2-（4-硝基苯基）-3-羟亚胺甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（61%）。.

实施例24 7-甲基-2-苯基-3-醛基苯腙咪唑并[1,2-a]吡啶

在50 mL圆底烧瓶中加入15 mL甲醇和7-甲基-2-苯基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲醛（1.18g， 5 mmol），搅拌均匀后加入苯肼（0.65g，6 mmol），室温反应12h，TLC检测反应结束后，加入50 mL水，二氯甲烷萃取三次，合并有机相，水洗，干燥，浓缩得白色固体，产物直接用于下步反应。产率88%。

实施例25

参照例24制备7-甲基-2-（4-氟苯基）-3-醛基苯腙咪唑并[1,2-a]吡啶，产率（80%）。.

实施例26

参照例24制备7-甲基-2-（4-氯苯基）-3-醛基苯腙咪唑并[1,2-a]吡啶，产率（81%）。.

实施例27

参照例24制备7-甲基-2-（4-溴苯基）-3-醛基苯腙咪唑并[1,2-a]吡啶，产率（81%）。.

实施例28

参照例24制备7-甲基-2-（4-甲氧基苯基）-3-醛基苯腙咪唑并[1,2-a]吡啶，产率（78%）。.

实施例29

参照例23制备7-甲基-2-（4-硝基苯基）-3-醛基苯腙咪唑并[1,2-a]吡啶，产率（80%）。.

实施例30

参照例24制备2-苯基-3-醛基苯腙咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（61%）。

实施例31

参照例24制备2-（4-氟苯基）-3-醛基苯腙咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（60%）。.

实施例32

参照例24制备2-（4-氯苯基）-3-醛基苯腙咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（64%）。.

实施例33

参照例24制备2-（4-溴苯基）-3-醛基苯腙咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（63%）.。

实施例34

参照例24制备2-（4-甲氧基苯基）-3-醛基苯腙咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（65%）。.

实施例35

参照例24制备2-（4-硝基苯基）-3-醛基苯腙咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（61%）。

实施例36 7-甲基-2-苯基-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶

在50 mL圆底烧瓶中加入20 mL二氯甲烷和7-甲基-2-苯基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲醛肟（1.26g，5 mmol），搅拌均匀后加入NCS（0.85g，6 mmol），加热回流30min，加入炔丙醇（0.28g，5 mmol），滴加三乙胺（0.60g，6 mmol），加热回流3h。TLC检测反应结束后，浓缩，硅胶柱层析分离，洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯（5:1）。产率65%。¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 4.7(s), 2H; 6.4(s), 1H; 7.0(dd), 1H; 7.5-7.6(m), 4H; 7.8(m), 2H; 8.6(d), 1H。

实施例37

参照例36制备7-甲基-2-（4-氟苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶，产率（69%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 4.8(s), 2H; 6.5(s), 1H; 7.3(d), 1H; 7.4(d), 2H; 7.8(s), 1H; 8.2(d), 2H; 8.6(d), 1H。

实施例38

参照例36制备7-甲基-2-（4-氯苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶，产率（68%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 4.7(s), 2H; 6.4(s), 1H; 7.2(d), 1H; 7.6(d), 2H; 7.7(s), 1H; 8.0(d), 2H; 8.6(d), 1H。

实施例39

参照例36制备7-甲基-2-（4-溴苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶，产率（60%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 4.7(s), 2H; 6.4(s), 1H; 7.1(d), 1H; 7.6(s), 1H; 7.7(d), 2H; 7.8(d), 2H; 8.6(d), 1H。

实施例40

参照例36制备7-甲基-2-（4-甲氧基苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶，产率（64%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 3.9(s), 3H; 4.7(s), 2H; 6.4(s), 1H; 6.9(d), 1H; 7.0(d), 2H; 7.5(s), 1H; 7.8(d), 2H; 8.5(d), 1H。

实施例41

参照例36制备7-甲基-2-（4-硝基苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶，产率（78%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 4.8(s), 2H; 6.5(s), 1H; 7.4(d), 1H; 7.9(s), 1H; 8.1(d), 2H; 8.3(d), 2H; 8.8(d), 1H。

实施例42

参照例36制备2-苯基-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（63%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 4.4(q), 2H; 4.7(s), 2H; 6.4(s), 1H; 7.0(dd), 1H; 7.5-7.6(m), 4H; 7.8(m), 2H; 8.6(d), 1H。

实施例43

参照例36制备2-（4-氟苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（66%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 4.4(q), 2H; 4.8(s), 2H; 6.5(s), 1H; 7.3(d), 1H; 7.4(d), 2H; 7.8(s), 1H; 8.2(d), 2H; 8.6(d), 1H。

实施例44

参照例36制备2-（4-氯苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（67%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 4.4(q), 2H; 4.7(s), 2H; 6.4(s), 1H; 7.2(d), 1H; 7.6(d), 2H; 7.7(s), 1H; 8.0(d), 2H; 8.6(d), 1H。

实施例45

参照例36制备2-（4-溴苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（62%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 4.4(q), 2H; 4.7(s), 2H; 6.4(s), 1H; 7.1(d), 1H; 7.6(s), 1H; 7.7(d), 2H; 7.8(d), 2H; 8.6(d), 1H。

实施例46

参照例36制备2-（4-甲氧基苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（64%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 3.9(s), 3H; 4.4(q), 2H; 4.7(s), 2H; 6.4(s), 1H; 6.9(d), 1H; 7.0(d), 2H; 7.5(s), 1H; 7.8(d), 2H; 8.5(d), 1H。

实施例47

参照例36制备2-（4-硝基苯基）-3-（5-羟甲基异噁唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（60%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 4.4(q), 2H; 4.8(s), 2H; 6.5(s), 1H; 7.4(d), 1H; 7.9(s), 1H; 8.1(d), 2H; 8.3(d), 2H; 8.8(d), 1H。

实施例48 7-甲基-2-苯基-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶

在50 mL圆底烧瓶中加入20 mL二氯甲烷和7-甲基-2-苯基3-醛基苯腙咪唑并[1,2-a]吡啶（1.26g，5 mmol），搅拌均匀后加入NCS（0.85g，6 mmol），加热回流30min，加入炔丙醇（0.28g，5 mmol），滴加三乙胺（0.60g，6 mmol），加热回流3h。TLC检测反应结束后，浓缩，硅胶柱层析分离，洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯（5:1）。产率59%。¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 4.8(s), 2H; 6.4(s), 1H; 7.0(dd), 1H; 7.3-7.4, 7.5-7.8(m), 10H; 7.8(s), 1H; 8.6(d), 1H。

实施例49

参照例48制备7-甲基-2-（4-氟苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶，产率（61%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 4.8(s), 2H; 6.5(s), 1H; 7.2(d), 2H; 7.3(d), 1H; 7.4-8.0(m), 8H; 8.6(d), 1H。

实施例50

参照例48制备7-甲基-2-（4-氯苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶，产率（61%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 4.8(s), 2H; 6.5(s), 1H; 7.2(d), 2H; 7.3(d), 1H; 7.4-7.9(m), 8H; 8.6(d), 1H。

实施例51

参照例48制备7-甲基-2-（4-溴苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶，产率（60%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 4.8(s), 2H; 6.5(s), 1H; 7.2(d), 2H; 7.3(d), 1H; 7.4-7.9(m), 8H; 8.6(d), 1H。

实施例52

参照例48制备7-甲基-2-（4-甲氧基苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶，产率（64%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 4.8(s), 2H; 6.5(s), 1H; 6.9(d), 1H; 7.0(d), 2H; 7.4-7.8(m), 8H; 8.5(d), 1H。

实施例53

参照例48制备7-甲基-2-（4-硝基苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶，产率（56%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 4.9(s), 2H; 6.6(s), 1H; 7.4(d), 1H; 7.9(s), 1H; 8.1(d), 2H; 8.3(d), 2H; 8.8(d), 1H。

实施例54

参照例48制备2-苯基-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（62%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 4.4(q), 2H; 4.8(s), 2H; 6.7(s), 1H; 7.0(d), 1H; 7.2-8.2 (m), 11H; 8.6(d), 1H。

实施例55

参照例48制备2-（4-氟苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（60%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 4.4(q), 2H; 4.8(s), 2H; 6.8(s), 1H; 7.3(d), 1H; 7.4-8.2(m), 11H; 8.6(d), 1H。

实施例56

参照例48制备2-（4-氯苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（60%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 4.4(q), 2H; 4.7(s), 2H; 6.7(s), 1H; 7.2(d), 1H; 7.4-8.2(m), 11H; 8.6(d), 1H。

实施例57

参照例48制备2-（4-溴苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（62%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 4.4(q), 2H; 4.7(s), 2H; 6.4(s), 1H; 7.1(d), 1H; 7.2-8.2(m), 11H; 8.6(d), 1H。

实施例58

参照例48制备2-（4-甲氧基苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（64%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 3.9(s), 3H; 4.4(q), 2H; 4.7(s), 2H; 6.6(s), 1H; 6.9(d), 1H; 7.1-8.0 11H; 8.5(d), 1H。

实施例59

参照例48制备2-（4-硝基苯基）-3-（5-羟甲基-1-苯基吡唑）咪唑并[1,2-a]吡啶-7-酸乙酯，产率（60%）.¹H NMR(CDCl₃, TMS) δ(ppm): 1.4(t), 3H; 2.5(s), 3H; 4.4(q), 2H; 4.8(s), 2H; 6.8(s), 1H; 7.4-8.3(d), 12H; 8.8(d), 1H。

实施例60

实施例54的产物，加入0.2M的NaOH溶液适量，加热至50度溶解，冷藏下充分结晶，既得钠盐，收率50%. ¹H NMR(D₂O, TMS) δ(ppm): 2.5(s), 3H; 4.8(s), 2H; 6.7(s), 1H; 7.0(d), 1H; 7.2-8.2 (m), 11H; 8.6(d), 1H。

实施例61

实施例55的产物，加入0.2M的NaOH溶液适量，加热至50度溶解，加盐酸调pH为2左右，使沉淀充分析出，静止数小时后，抽滤得固体，固体加适量甲醇溶解，加适量三乙胺，搅拌1h后，冷藏下充分结晶，既得三乙胺盐。

实施例62

片剂制备方法如下：

处方用量/片

实施例55产物 10mg

乳糖 80mg

微晶纤维素 20mg

预交化淀粉 40mg

聚维酮 4mg

羧甲基淀粉钠 10mg

硬脂酸镁 qs

工艺：将活性成分辅料分别过100目筛，称取处方量的主药和辅料（一半羧甲基淀粉钠）充分混合，加入聚乙烯吡咯烷酮水溶液适量，过20目筛，制得湿颗粒于50-60度烘箱中干燥2小时，将剩余的羧甲基淀粉钠，硬脂酸镁与颗粒混合均匀，整粒，测定中间体含量，用异型冲压片。

实施例63

胶囊的制备方法如下：

处方用量/粒

实施例56产物 15mg

乳糖 100mg

微晶纤维素 20mg

羟丙甲纤维素 5mg

微粉硅胶 4mg

羧甲基淀粉钠 8mg

滑石粉 qs

工艺：将活性成分辅料分别过100目筛，称取处方量的主药和辅料充分混合，加入羟丙甲纤维素适量，过24目筛，制得湿颗粒于50-60度烘箱中干燥2小时，将微粉硅胶、滑石粉与颗粒混合均匀，整粒，测定中间体含量，用3号胶囊灌装。

实施例64

口服溶液剂的制备（每瓶量）

处方用量/片

实施例56产物 30mg

甘露醇 100mg

柠檬酸 20mg

橙味香精 10mg

阿斯巴甜 10mg

蒸馏水 100ml

尼泊金 qs

工艺：取蒸馏水100ml，称取处方量的甘露醇、柠檬酸、橙味香精、阿斯巴甜和药品搅拌溶解，加入防腐剂后，灌装于瓶中。

实施例65（分散片）（每片量）

实施例57产物 50mg

乳糖 120mg

微晶纤维素 30mg

羧甲基淀粉钠内加10mg外加10mg

阿斯巴甜 3mg

橘子香精 3mg

2%羟丙甲纤维素 qs

二氧化硅 qs

硬脂酸钙 qs

工艺：将主料与辅料分别过100目筛，充分混合，然后称取处方辅料与主药充分混合。再加入粘合剂制软材，20木筛制粒，55干燥，18目筛整粒。最后加入润滑剂和剩余的羧甲淀粉钠混合均匀压片。

实施例66（口崩片）（每片量）

实施例58 70mg

甘露醇 120mg

微晶纤维素 40mg

交联羧甲基纤维素钠 15mg

硬脂酸镁 qs

工艺：将主料与辅料分别过100目筛，充分混合，采用锟压机压饼，再用整粒过18目筛整粒，最后加入润滑剂混合均匀压片。

实施例67（泡腾片）（每片量）

实施例59 100mg

酒石酸 100mg

碳酸氢钠 100mg

甲基纤维素 10mg

麦芽糖醇 10mg

柠檬香精 5mg

滑石粉 qs

制备工艺同实施例62。

实施例68（咀嚼片）（每片量）

实施例48 120mg

甘露醇 100mg

山梨醇 30mg

5%聚乙二醇6000（50%乙醇） qs

甜菊 5mg

橙皮酊 5mg

硬脂酸 qs

制备工艺同实施例62

实施例69（颗粒剂每袋）

实施例49 200mg

乳糖 600mg

甘露醇 180mg

甜菊素 5mg

香精 5mg

2%羟丙甲纤维素（水） qs

工艺：将主药与辅料分别过100目筛，充分混合，然后称取处方量辅料与主药充分混合。

再加入粘合剂制软材，14目筛制粒，55℃干燥，16目筛整粒，测定袋重包装。

实施例70（肠溶片）（每片量）

素片处方

实施例50 100mg

磷酸氢钙 80mg

乳糖 40mg

羟甲基纤维素钠 10mg

交联聚维酮 10mg

2%羟丙甲纤维素 qs

硬脂酸镁 qs

制备工艺同实施例65。

包衣处方：

素片 80g

丙烯酸树脂L100-55 10.0g

滑石粉 2.5g

二氧化钛 2.0g

柠檬酸三乙酯 qs

95%乙醇加至160ml

包衣工艺：

a、将处方量的丙烯酸树脂L100-55、二氧化钛、滑石粉、柠檬酸三乙酯溶于95%的乙醇中，充分混匀；

b将处方量素片置于包衣锅中，开动鼓风，使片温为40℃左右，用喷枪喷入肠溶衣，喷速为5ml/分钟，至肠溶衣喷完，干燥1h，分装即可。

实施例71

小针注射液的制备

实施例52 的产物 0.5g

磷酸二氢钠 10mg

柠檬酸 20mg

氯化钠 450mg

注射用水 50ml

工艺：取注射用水50ml，称取处方量的柠檬酸、磷酸二氢钠、氯化钠搅拌使溶解，加入样品搅拌溶解，用0.1mol/L的盐酸或氢氧化钠调pH值为5.0-8.0，加入0.1%的活性炭吸附20分钟。先用0.45μm滤膜滤过，再用0.22μm精滤。按每安剖2ml灌装，105℃高温灭菌30分钟即得注射液。

实施例72

冻干注射液的制备

实施例52产物 1.0g

甘露醇 200mg

柠檬酸 5mg

泊洛沙姆 10mg

注射用水 100ml

工艺：取注射用水50ml，称取处方量的柠檬酸、泊洛沙姆搅拌使溶解，加入样品搅拌溶解，用0.1mol/L的盐酸或氢氧化钠调pH值为4.0-6.0，补加水至100ml。加入0.5g的活性炭在30℃下吸附20分钟。先用0.45μm滤膜滤过，再用0.22μm精滤。滤液按每支2ml进行分装，预冻2小时后，冷冻下减压干燥18小时，至样品温度到室温后，再干燥5小时，制得白色疏松块状物，封口即得冻干粉针。

实施例73

小输液的制备

实施例52的产物 0.1g

磷酸二氢钠 0.1g

柠檬酸 0.2g

氯化钠 9g

注射用水 1000ml

工艺：取注射用水500ml，称取处方量的柠檬酸、磷酸二氢钠、氯化钠搅拌使溶解，加入样品搅拌溶解，用0.1mol/L的盐酸或氢氧化钠调pH值为4.0-8.0，加入0.1%的活性炭吸附20分钟。补加水至1000ml，先用0.45μm滤膜滤过，再用0.22μm精滤。灌封每瓶100ml，灭菌，即得发明化合物氯化钠注射液。

实施例74

通式

化合物的合成方法，包括如下步骤：将化合物

与DMF、POCl₃作用得到化合物

，溶剂为DMF，反应温度为20度，反应时间为8小时；化合物

与盐酸羟胺或苯肼反应，溶剂为乙醇，反应温度为50度，反应时间为12小时，生成化合物

或

；化合物

或

用NCS处理，在碱性条件下，与取代的烯或炔发生1，3偶极加成反应生成最终化合物 a或

b，溶剂为二氯甲烷，反应温度为20度，反应时间为3小时。

实施例75

合成权利要求1-2的通式

化合物的方法，包括如下步骤：将化合物

与DMF、POCl₃作用得到化合物

，溶剂为DMF，反应温度为40度，反应时间为24小时；化合物

与盐酸羟胺或苯肼反应，溶剂为乙醇，反应温度为80度，反应时间为48小时，生成化合物

或

；化合物

或

a或

b，溶剂为二氯甲烷，反应温度为50度，反应时间为8小时。

实施例76

合成权利要求1-2的通式化合物的方法，包括如下步骤：将化合物与DMF、POCl₃作用得到化合物

，溶剂为DMF，反应温度为30度，反应时间为12小时；化合物与盐酸羟胺或苯肼反应，溶剂为乙醇，反应温度为65度，反应时间为24小时，生成化合物

或

；化合物或用NCS处理，在碱性条件下，与取代的烯或炔发生1，3偶极加成反应生成最终化合物

a或

b，溶剂为二氯甲烷，反应温度为35度，反应时间为6小时。

实施例77

合成权利要求1-2的通式化合物的方法，包括如下步骤：将化合物

与DMF、POCl₃作用得到化合物

，溶剂为DMF，反应温度为35度，反应时间为20小时；化合物

与盐酸羟胺或苯肼反应，溶剂为乙醇，反应温度为70度，反应时间为33小时，生成化合物

或

；化合物或

a或 b，溶剂为二氯甲烷，反应温度为40度，反应时间为6小时。