CN102669409B - 用香菇渣制备发酵饲料促发酵肽的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种采用双重酶解工艺,用香菇渣制备发酵饲料促发酵肽的方法。是利用纤维素酶和碱性蛋白酶对香菇废渣进行酶解,使细胞壁软化,包埋在细胞壁内可溶性蛋白质最大限度的溶出,然后用碱性蛋白酶对蛋白质等大分子化合物进行酶解,得到小分子的促发酵活性肽,同时含有多糖等其他生物活性成分,香菇渣具有促发酵的效果,香菇渣向香菇渣促发酵肽的转变,提高了乳酸芽孢杆菌的发酵性能,改善了发酵饲料的品质,为香菇废渣的综合利用提供了一个新的途径,实现了香菇渣变废为宝,减少了环境污染,提高了香菇渣生产综合利用效益,具有广阔的市场开发前景。

Description

用香菇渣制备发酵饲料促发酵肽的方法
技术领域
本发明涉及到一种以香菇渣为原料制备发酵饲料促发酵肽的方法,属于畜牧饲料技术领域。
背景技术
香菇是世界第二大食用菌,也是我国特产之一,在民间素有“山珍”之称,它是一种生长在木材上的真菌。味道鲜美,香气沁人,富含大量蛋白质、B族维生素、香菇多糖等营养物质,具有提高人体免疫力,降低血脂血压等功效,素有“植物皇后”美誉。由于香菇多糖的多种生理活性功能,已成为许多保健品和药品的主要原料,目前工业化香菇多糖的生产多以水提乙醇沉淀为主,而香菇多糖的大规模水提取,致使大量的香菇渣滓产生。对香菇渣的处理,由原来的直接丢弃或是燃烧的方式向废弃资源的综合利用的方向转变。经化学成分分析发现,香菇渣浸提后仍残留17~18%的蛋白质、15种氨基酸、7.32%的总糖等营养物质。近几年,香菇渣的综合利用主要体现在:一是作为生物有机质用来育苗;二是作为培养基质来培养特定微生物;三是用做发酵饲料的原材料。这些应用虽然在一定程度上缓解了香菇渣带来的不利影响,但在实际生产中的效益还是不见显著。
生物活性肽是两个或两个以上的氨基酸以肽键相连且具有生物活性的化合物。活性肽具有多种生物体代谢和生理调节功能,易消化吸收,具有促进免疫、激素调节、抗病毒、降血压、降血脂等作用,是当前国际食品界最热门的研究课题和极具发展前景的功能因子。生物活性肽的生产方法主要有:分离提取法、蛋白质水解法、化学合成法、基因重组法和酶解法。目前酶解法由于具有价格便宜、安全性好、工艺简单,而且资源非常丰富和廉价,并且容易进行工业化生产等优点而被广泛应用于实际生产中。促发酵肽是具有调节微生物新陈代谢、提高机体免疫力、促进生长繁殖、缩短发酵周期的一类营养促进剂,但促进发酵作用的机制还尚不清楚。目前公开有绿豆多肽对乳酸菌发酵以及玉米肽对酵母菌的发酵,具有明显的促进作用,香菇废渣经酶解处理制备的活性肽除了肽之外,还含有香菇多糖等其他活性成分,经试验首次发现对乳酸芽孢杆菌及其他发酵饲料的微生物的发酵具有明显的促进作用,同时对提高发酵饲料的品质和降低生产成本具有重要意义,因此命名为香菇渣促发酵肽,目前国内外尚无研究报道。
发明内容
本发明的目的是公开一种采用双重酶解工艺,用香菇渣制备发酵饲料促发酵肽的方法。
本发明是通过以下步骤制备完成:本发明的操作步骤如下:
a.选取干燥香菇渣;
b.进行粉碎过80~100目筛成香菇渣粉;
c.在香菇渣粉内加入无菌水,其重量份配比为:香菇渣粉50~100份无菌水20~30份,用搅拌器充分混匀形成香菇渣浆液,搅拌器的转速为300~600r/min;
d.将混匀的香菇渣浆液在流量40~60L/h、压力30~50Mpa条件下进行均质;
e.双重酶解
e.1 在均质后加入纤维素酶进行酶解,
e.1.1 纤维素酶的活力为20000U/g,
e.1.2 酶添加量为300~400mg/L香菇渣浆液
e.1.3 温度28℃~35℃,
e.1.4 调pH值4~5,
e.1.5水解0.5~1h,
e.2纤维素酶酶解后再进行碱性蛋白酶酶解,
e.2.1 碱性蛋白酶的活力为25000U/g,
e.2.2 酶添加量为200~250mg/L香菇渣浆液,
e.2.3 温度40℃~50℃,
e.2.4 调pH值9~11,
e.2.5水解1~1.5h;
f.干燥、包装,
f.1酶解后的香菇渣浆液采用喷雾或流化床干燥,密闭包装,
g.制成香菇渣促发酵肽。
本发明的效果在于废弃资源的再利用,原料易得,工艺简单,便于操作,既适用于工业化产业生产,也适用于普通农户的产生应用,实际生产效果明显。是利用纤维素酶和碱性蛋白酶对香菇废渣进行酶解,使细胞壁软化,包埋在细胞壁内可溶性蛋白质最大限度的溶出,然后用碱性蛋白酶对蛋白质等大分子化合物进行酶解,得到小分子的促发酵活性肽,同时含有多糖等其他生物活性成分,为香菇废渣的综合利用提供了一个新的途径。香菇渣具有促发酵的效果,香菇渣向香菇渣促发酵肽的转变,实现了香菇渣变废为宝,减少和消除了环境污染隐患,提高香菇渣生产综合利用效益,具有广阔的市场前景。
具体实施方式
现给出以下具体实施例,但本发明并不限于本实施例:
a.选取干燥香菇废渣;
b.进行粉碎过90目筛成香菇渣粉;
c.在香菇渣粉内加入无菌水,其重量份配比为:香菇渣粉50份,无菌水25份,用搅拌器充分混匀形成香菇渣浆液,搅拌器的转速为300r/min;
d.将混匀的香菇渣浆液在流量50L/h、压力30Mpa条件下进行均质;
e.双重酶解
e.1 在均质后加入纤维素酶进行酶解,
e.1.1 纤维素酶的活力为20000U/g,
e.1.2 酶添加量为300mg/L香菇渣浆液,
e.1.3 温度30℃,
e.1.4 调pH值4,
e.1.5水解0.5h,
e.2纤维素酶酶解后再进行碱性蛋白酶酶解,
e.2.1 碱性蛋白酶的活力为25000U/g,
e.2.2 酶添加量为250mg/L香菇渣浆液,
e.2.3 温度50℃,
e.2.4 调pH值10,
e.2.5水解1h;
f.干燥、包装,
f.1酶解后的浆液在流化床上80℃干燥,密闭包装,
g.制成香菇渣促发酵肽。
香菇渣促发酵的试验比较
试验目的:一是观察两组培养基发酵实验的长短,二是发酵后测定两组发酵培养基中活菌数。
1材料与方法:
1.1 菌种,乳酸芽孢杆菌10份,
1.2 培养基,试验组固体培养基:玉米粉170份,米糠200份,豆粕110份,水300份,硫酸铵50份,香菇渣促发酵肽150份。
对照组固体培养基:玉米粉170份,米糠220份,豆粕110份,水300份,硫酸铵50份。
1.3发酵条件,调节发酵温度35℃,调pH值7。
1.4实验方法,发酵后活菌数采用平板菌落计数法测定。
2结果与分析
2.1香菇渣促发酵肽对乳酸芽孢杆菌发酵后活菌数的影响(见表1)
Figure GDA0000292629971
由表1可知,与未添加香菇渣促发酵肽的发酵培养基相比,发酵后香菇渣促发酵肽的发酵培养基中活菌数提高近20倍,这说明香菇渣肽对乳酸芽孢杆菌的生长、繁殖和代谢具有明显的调节作用,同时发酵饲料具有高活性有益菌及其活性代谢产物,对提高饲料的适口性、营养性以及畜禽的肉品质有积极的作用。
2.2香菇渣促发酵肽对乳酸芽孢杆菌发酵时间的影响(见表2)
Figure GDA0000292629972
由表2可以看出,香菇渣促发酵肽对乳酸芽孢杆菌发酵时间的影响是非常显著的,试验组的发酵饲料所需时间较对照组缩短50%,从整体的生产工艺上来讲,缩短了发酵饲料的生产周期,降低了生产成本,提高了香菇渣的附加值。
2.3香菇渣促发酵肽促发酵过程中产热产气的比较(见图)
Figure GDA0000292629973
由图可得,试验组在发酵过程中产热产气的时间要明显前于对照组,说明香菇渣促发酵肽为乳酸芽孢杆菌的生长繁殖提供了良好的物质基础,有利于菌种生长对数期的到来,同时也缩短了代谢产物产生的周期,降低了生产成本,提高了产品竞争力。
3结论
香菇渣促发酵肽的发酵培养基中产热产气提前0.5~1d,发酵速度提高1~1.5倍,发酵时间缩短1~1.5倍,缩短了发酵饲料的生产周期,降低了生产成本,尤其是发酵后活菌数由原来的2.5×108增加到5.0×109,活菌总数增加20倍左右,提高了发酵饲料的品质。因此香菇渣促发酵肽对于提高乳酸芽孢杆菌的发酵性能和改善发酵饲料的品质有重要作用。

Claims (2)

1.用香菇渣制备发酵饲料促发酵肽的方法,其特征是通过以下步骤制备完成:
a.选取干燥香菇渣;
b.进行粉碎过80~100目筛成香菇渣粉;
c.在香菇渣粉内加入无菌水,其重量份配比为:香菇渣粉50~100份无菌水20~30份,用搅拌器充分混匀形成香菇渣浆液,搅拌器的转速为300~600r/min;
d.将混匀的香菇渣浆液在流量40~60L/h、压力30~50Mpa条件下进行均质;
e.双重酶解
e.1 在均质后加入纤维素酶进行酶解,
e.1.1 纤维素酶的活力为20000U/g,
e.1.2 酶添加量为300~400mg/L香菇渣浆液
e.1.3 温度28℃~35℃,
e.1.4 调pH值4~5,
e.1.5水解0.5~1h,
e.2纤维素酶酶解后再进行碱性蛋白酶酶解,
e.2.1 碱性蛋白酶的活力为25000U/g,
e.2.2 酶添加量为200~250mg/L香菇渣浆液,
e.2.3 温度40℃~50℃,
e.2.4 调pH值9~11,
e.2.5水解1~1.5h;
f.干燥、包装,
f.1酶解后的香菇渣浆液采用喷雾或流化床干燥,密闭包装,
g.制成香菇渣促发酵肽。
2.根据权利要求1所述的用香菇渣制备发酵饲料促发酵肽的方法,其特征是通过以下步骤制备完成:
a.选取干燥香菇废渣;
b.进行粉碎过90目筛成香菇渣粉;
c.在香菇渣粉内加入无菌水,其重量份配比为:香菇渣粉50份,无菌水25份,用搅拌器充分混匀形成香菇渣浆液,搅拌器的转速为300r/min;
d.将混匀的香菇渣浆液在流量50L/h、压力30Mpa条件下进行均质;
e.双重酶解
e.1 在均质后加入纤维素酶进行酶解,
e.1.1 纤维素酶的活力为20000U/g,
e.1.2 酶添加量为300mg/L香菇渣浆液,
e.1.3 温度30℃,
e.1.4 调pH值4,
e.1.5水解0.5h,
e.2纤维素酶酶解后再进行碱性蛋白酶酶解,
e.2.1 碱性蛋白酶的活力为25000U/g,
e.2.2 酶添加量为250mg/L香菇渣浆液,
e.2.3 温度50℃,
e.2.4 调pH值10,
e.2.5水解1h;
f.干燥、包装,
f.1酶解后的浆液在流化床上80℃干燥,密闭包装,
g.制成香菇渣促发酵肽。
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