CN102640857A - 一种大米活性肽螯合铜的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种大米活性肽螯合铜的制备方法，将大米蛋白粉碎过80目后加入水中，再加入胰蛋白酶；胰蛋白酶、大米蛋白粉与水的质量比为1∶50∶200-300，胰蛋白酶活性为118u/mg，然后用NaOH调节pH至7.5，在45℃条件下水解6h，得含有大米活性肽的水解液；然后加入体积为水解液的3-5倍的去离子水和质量为水解液的15-40%的CuSO4·H2O；在室温下，搅拌反应3～4小时后，加入无水乙醇至不再产生沉淀为止，用离心机进行离心分离后，用去离子水洗涤沉淀并干燥，最终得到大米活性肽螯合铜。应用本发明的方法制备大米活性肽螯合铜，纯度和生产总收率较高并且工艺简便、成本低廉，适宜于规模化生产。
Description
技术领域
本发明属于饲料添加剂技术领域，尤其涉及一种在动物技术领域中做营养食物的大米活性肽螯合铜的制备方法。
背景技术
肽是分子结构介于氨基酸和蛋白质之间的一类化合物，是蛋白质的结构和功能片段，并是蛋白质具有数以千万计的生理功能。大米活性肽是指对生物机体的生命活动有益或具有生理功能的肽类化合物，又称功能肽。大米活性肽与氨基酸一样也是生物体内重要的低分子量生物配位体，但与氨基酸不同，大米活性肽不但直接参与这些微量元素的络合与代谢而其本身就在生物体中具有十分重要的功能作用。
螯合物是指一个或多个基团与一个金属离子发生配伍反应所形成的具有环状结构的化合物。一个金属元素离子可以和多个氨基酸形成环螯合物, 形成的环数越多, 螯合物的稳定性越好。这种通过强配位键螯合得到的有机分子（氨基酸或大米活性肽）和金属离子的化合物广泛应用于动物技术领域，其有效性来自所涉及金属离子的生物活性，金属离子在许多酶的反应中作为活化剂并在所有生物有机体的各种新陈代谢中作为调节剂发挥作用。
金属离子由于与肽链或者氨基酸物质的键的螯合，有利于金属离子的吸收、利用和使用，因为它通过有机分子转运到有机体的所有区域。尤其在动物技术领域中，这些化合物用于动物生产领域以增加或增强正常的新陈代谢和功能活动，从而对动物的产出性生长能力有显著的正面影响。
发明内容
本发明的内容是提供一种大米活性肽螯合铜的制备方法，本发明工艺简便、成本低廉，适宜于规模化生产。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：一种大米活性肽螯合铜的制备方法，该方法为：将大米蛋白粉碎过80目后加入水中，再加入胰蛋白酶；胰蛋白酶、大米蛋白粉与水的质量比为1：50：200-300，胰蛋白酶活性为118u/mg，然后用NaOH调节pH至约7.5，在45℃条件下水解约6 h，得含有大米活性肽的水解液；然后加入体积为水解液的3-5倍的去离子水和质量为水解液的15-40%的 ；在室温下，搅拌反应3～4小时后，加入无水乙醇至不再产生沉淀为止，用离心机进行离心分离后，用去离子水洗涤沉淀并干燥，最终得到大米活性肽螯合铜。
本发明的有益效果是，本发明利用硫酸铜及小肽易溶于水不溶于乙醇的特性，在纯化时采用乙醇析出结晶，得到的产品纯度、总回收率高，产品为均匀的疏松的晶体，质量优。本发明工艺简便、成本低廉适宜规模化工业生产。
具体实施方式
大米活性肽螯合铜的制备方法具体为：将大米蛋白粉碎过80目后加入水中，再加入胰蛋白酶，胰蛋白酶、大米蛋白粉与水的质量比为1：50：200-300，胰蛋白酶活性为118u/mg，然后用NaOH调节pH至7.5，在45℃条件下水解6 h，得含有大米活性肽的水解液。此时水解液的水解度约为30%，得率35%以上；三氯乙酸可溶性氮为94.2%；估算的平均肽链长度约为3.3，表明该酶解产物主要是小分子肽。然后加入体积为水解液的3-5倍的去离子水和质量为水解液的15-40%的
。在室温下，搅拌反应3～4小时后，最后加入无水乙醇至不再产生沉淀为止，将大米活性肽螯合铜沉淀出来后，用离心机进行离心分离后，用去离子水洗涤并干燥，最终得到大米活性肽螯合铜。
本发明结合以下实例做进一步说明，本发明的目的将变得更加明显。
实施例1
选用活性为118u/mg的胰蛋白酶，将500克粉碎过80目的大米蛋白溶于2升蒸馏水制成悬浊液，然后加入10克胰蛋白酶，用NaOH调节pH至7.5.在45℃条件下水解4小时，然后将酶解液过滤除去杂质，备用。在室温下向反应器内加入蒸馏水，加入的量为备用酶解液的3倍，按备用酶解液的质量的15%加入
，开动搅拌器使其溶解，搅拌反应3小时后，加入无水乙醇将螯合物沉淀出来，然后用离心机进行离心分离，分离后用去离子水洗涤然后干燥，最终得到大米活性肽螯合铜。
实施例2
选用活性为118u/mg的胰蛋白酶，将500克粉碎过80目的大米蛋白溶于3升蒸馏水制成悬浊液，然后加入10克胰蛋白酶，用NaOH调节pH至7.5.在45℃条件下水解4小时，然后将酶解液过滤除去杂质，备用。在室温下向反应器内加入蒸馏水，加入的量为备用酶解液的5倍，按备用酶解液的质量的40%加入
，开动搅拌器使其溶解，搅拌反应4小时后，加入无水乙醇将螯合物沉淀出来，然后用离心机进行离心分离，分离后用去离子水洗涤然后干燥，最终得到大米活性肽螯合铜。
上述实施例用来解释说明本发明，而不是对本发明进行限制，在本发明的精神和权利要求的保护范围内，对本发明作出的任何修改和改变，都落入本发明的保护范围。
Claims (1)
1.一种大米活性肽螯合铜的制备方法，其特征在于，该方法为：将大米蛋白粉碎过80目后加入水中，再加入胰蛋白酶；胰蛋白酶、大米蛋白粉与水的质量比为1：50：200-300，胰蛋白酶活性为118u/mg，然后用NaOH调节pH至约7.5，在45℃条件下水解约6 h，得含有大米活性肽的水解液；然后加入体积为水解液的3-5倍的去离子水和质量为水解液的15-40%的 
；在室温下，搅拌反应3～4小时后，加入无水乙醇至不再产生沉淀为止，用离心机进行离心分离后，用去离子水洗涤沉淀并干燥，最终得到大米活性肽螯合铜。
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105661049A (zh) * | 2016-03-17 | 2016-06-15 | 上海源耀生物股份有限公司 | 以大豆分离蛋白为基底物制备的多肽铜螯合物及制备方法 |
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| CN101756041A (zh) * | 2010-01-19 | 2010-06-30 | 浙江大学 | 一种酪蛋白肽螯合铜的制备方法 |
| CN102286105A (zh) * | 2011-06-14 | 2011-12-21 | 中国农业大学 | 芝麻蛋白源金属螯合肽与肽微量元素螯合物及其应用 |
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2012
- 2012-05-14 CN CN2012101478401A patent/CN102640857A/zh active Pending
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Application publication date: 20120822 |