CN102608312A - 一种应用于微量明胶颗粒凝集hiv-1近期感染检测法的血清或血浆样品稀释液 - Google Patents

一种应用于微量明胶颗粒凝集hiv-1近期感染检测法的血清或血浆样品稀释液 Download PDF

Info

Publication number
CN102608312A
CN102608312A CN201210046148XA CN201210046148A CN102608312A CN 102608312 A CN102608312 A CN 102608312A CN 201210046148X A CN201210046148X A CN 201210046148XA CN 201210046148 A CN201210046148 A CN 201210046148A CN 102608312 A CN102608312 A CN 102608312A
Authority
CN
China
Prior art keywords
hiv
recent infection
detection method
diluting solution
agglutinated
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201210046148XA
Other languages
English (en)
Inventor
李洪
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN201210046148XA priority Critical patent/CN102608312A/zh
Publication of CN102608312A publication Critical patent/CN102608312A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

一种应用于微量明胶颗粒凝集检测HIV-1近期感染法的血清或血浆样品稀释液，属于生物技术领域，尤其是一种检测HIV－1近期感染中应用的试剂。本发明的稀释液由缓冲液、30％TritonX100、NaN3和牛血清白蛋白按比例混合制备得。本发明的稀释液完全可以替代DilsimTMll稀释液用于微量明胶颗粒凝集HIV-1近期感染的检测法。

Description

一种应用于微量明胶颗粒凝集HIV-1近期感染检测法的血清或血浆样品稀释液
技术领域
本发明属于生物技术领域，尤其是一种检测HIV－1近期感染中应用的试剂。
背景技术
艾滋病是一种传染病，检测艾滋病毒（HIV）是发现感染者的重要方法。为了掌握其流行趋势，评价预防控制的效果，世界各国都想应用HIV新发感染率来评价，而新发感染率的计算则需要有HIV近期感染数据来进行。
HIV近期感染数据，可以通过多种实验室检测HIV近期感染方法来获得。实验室检测HIV近期感染方法可根据使用的标本是否是血清转阳前或是血清转阳后来分类。血清转阳前的标本采用的方法是检测标本中HIV-1的P24抗原或HIV-1 RNA；血清转阳后的标本采用的方法有3A11-LS、BED-CEIA等方法，它们同属于血清学检测近期HIV-1血清转阳方法的一类（STARHS）。
除上述的方法外，到现在为止所建立起来的实验室检测方法已近20种。微量明胶颗粒凝集HIV-1近期感染检测法，即ML-PA法（以前用的名称为PA-LS）是由目前世界上公认的一种简单、方便的初筛HIV明胶颗粒凝集方法（PA）改良而成的。PA方法是用日本Fujirebio公司生产的HIV艾滋病诊断试剂来进行的，它通过将HIV-1抗原（HIV-1/gp41和HIV-1/P24）包被在人工载体明胶粒子上，致敏离子和血中的HIV-1抗体进行反应发生凝集，产生粒子凝集反应，由此可检测出血清和血浆中的HIV-1抗体。
微量明胶颗粒凝集HIV-1近期感染检测法与目前国际上应用较为广泛的BED HIV-1 近期感染检测方法比较，具有更为简单、便宜、不需要仪器设备和非常易于推广的特点。它的价格仅为BED 方法的二十分之一至三十分之一。但由于该方法中使用的血清或血浆样品的稀释液是BioMerieux（Raleigh, NC) 公司生产的Vironostika HIV抗体专用检测试剂的Dilsim TM ll 稀释液，因此价格昂贵，有效保存期很短，一般情况下不能单独提供，在中国是无法购买得到的。因而，极大的限制了该方法在我国的广泛应用。
发明内容
 本发明所要解决的就是提供一种血清或血浆样品的稀释液，为微量明胶颗粒凝集HIV-1近期感染检测法（ML-PA）能在我国广泛应用的问题。该稀释液可以替代ML-PA检测方法中使用的Dilsim TM ll 稀释液，且不影响该方法的实验和检测结果。
本发明的应用于微量明胶颗粒凝集HIV-1近期感染检测法的血清或血浆样品稀释液，其特征在于该稀释液由缓冲液、30％Triton X 100、NaN3和牛血清白蛋白按比例混合制备得，其中，缓冲液由Na2HPO4 ，Na2HPO4和NaCl溶于去离子水中制备得，每1000毫升去离子水中分别加入1.27克Na2HPO4， 0.3克Na2HPO4和0.85克NaCl；该稀释液按重量缓冲液：NaN3：牛血清白蛋白=1002.42：0.2：10，按体积30％Triton X 10：去离子水=1:100。
其中，缓冲液有助于保持恒定的pH值，以利于抗原抗体的充分反应。30％Triton X 100为一种比较温和的去垢剂，表面活性剂或称界面活性剂，常作为添加剂使蛋白保持稳定，使血清或血浆样品中的蛋白保持稳定。NaN3作为血清血浆样品防腐剂。牛血清白蛋白作为血清血浆样品抗体的保护剂。
本发明的血清或血浆样品稀释液，用于微量明胶颗粒凝集HIV-1近期感染检测方法中，稀释液可以实现自主生产，能够在国内普遍而广泛的使用，能够成为我国制定有效的政策、开展有效的应对艾滋病行动，甚至为各国决策者制定相关政策和规划提供有效的技术支持。
本发明的稀释液应用于微量明胶颗粒凝集HIV-1近期感染检测方法（ML-PA）与采用BioMerieux（Raleigh, NC) 公司专用血清或血浆样品Dilsim TM ll 稀释液的PA-LS方法相比较具有以下的区别和优越性：
Figure 2880DEST_PATH_IMAGE002
而用本发明稀释液的ML-PA方法与普遍采用的Vironostika-LS和BED-CEIA方法相比较具有以下的特点和优越性：
Figure 982338DEST_PATH_IMAGE003
具体实施方式
实施例1：一种应用于微量明胶颗粒凝集HIV-1近期感染的检测法的血清或血浆样品稀释液，该稀释液由1.27克Na2HPO4，0.3克NaH2PO4，0.85克NaCl溶于1000毫升去离子水制备得的缓冲液中加入10毫升增加细胞膜通透性的30％Triton X 100、200毫克防腐剂NaN3，以及10克抗体的保护剂牛血清白蛋白，充分混合均匀获得。
为了确定本发明稀释液与Dilsim TM ll 稀释液的一致性，用450个经过确认的未知感染时间的H IV阳性血清标本，进行近期感染检测的试验。每个标本按1∶10、1∶100、1∶1 000、1∶10 000、1∶20 000、1∶40 000 的6个梯度来用本发明稀释液和Dilsim TM ll 稀释液进行稀释，连续3天，每天一次由不同的两个人在同一个实验室进行3次试验。检测出的近期感染样本为27份，两种稀释液检测出的近期感染样本完全一致，而且每一个样本的稀释梯度结果都是完全一样的，说明本发明的稀释液完全可以替代Dilsim TM ll 稀释液用于微量明胶颗粒凝集HIV-1近期感染的检测法。

Claims (1)

1.一种应用于微量明胶颗粒凝集HIV-1近期感染检测法的血清或血浆样品稀释液，其特征在于该稀释液由缓冲液、30％Triton X 100、NaN3和牛血清白蛋白按比例混合制备得，其中，缓冲液由Na2HPO4 ，Na2HPO4和NaCl溶于去离子水中制备得，每1000毫升去离子水中分别加入1.27克Na2HPO4， 0.3克Na2HPO4和0.85克NaCl；该稀释液按重量缓冲液：NaN3：牛血清白蛋白=1002.42：0.2：10，按体积30％Triton X 10：去离子水=1:100。
CN201210046148XA 2012-02-28 2012-02-28 一种应用于微量明胶颗粒凝集hiv-1近期感染检测法的血清或血浆样品稀释液 Pending CN102608312A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201210046148XA CN102608312A (zh) 2012-02-28 2012-02-28 一种应用于微量明胶颗粒凝集hiv-1近期感染检测法的血清或血浆样品稀释液

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201210046148XA CN102608312A (zh) 2012-02-28 2012-02-28 一种应用于微量明胶颗粒凝集hiv-1近期感染检测法的血清或血浆样品稀释液

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN102608312A true CN102608312A (zh) 2012-07-25

Family

ID=46525851

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201210046148XA Pending CN102608312A (zh) 2012-02-28 2012-02-28 一种应用于微量明胶颗粒凝集hiv-1近期感染检测法的血清或血浆样品稀释液

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102608312A (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103364541A (zh) * 2013-06-28 2013-10-23 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 一种用于间接elisa试验的样品稀释液
CN106546732A (zh) * 2015-09-17 2017-03-29 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 人类免疫缺陷病毒抗原和抗体联合检测试剂盒及其用途和检测方法
CN108484465A (zh) * 2018-04-23 2018-09-04 汕头大学 一种可循环利用的双水相从雨生红球藻中提取虾青素的方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1195772A (zh) * 1997-04-04 1998-10-14 上海荣盛生物技术有限公司 梳式斑点免疫检测法
US6352826B1 (en) * 1991-11-25 2002-03-05 Yoreh Biotechnologies, Ltd. Method and kit for the detection of retroviral specific antibodies in seronegative individuals
WO2006126287A1 (ja) * 2005-05-27 2006-11-30 Masami Moriyama Ｈｉｖ－１を検出する方法およびそれに使用するキット
WO2008059553A1 (fr) * 2006-11-13 2008-05-22 Masami Moriyama Procédé de détection du vih-1 sans être affecté par l'anticorps de la protéine anti-souris existant chez l'homme et trousse destinée à une utilisation dans ce procédé
CN101581720A (zh) * 2008-05-14 2009-11-18 上海英旻泰生物技术有限公司 一种人类免疫缺陷病毒抗体确认试剂盒
CN101643743A (zh) * 2009-07-22 2010-02-10 张强 口腔黏膜渗出液hiv1/2抗体检测试纸及其制备方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6352826B1 (en) * 1991-11-25 2002-03-05 Yoreh Biotechnologies, Ltd. Method and kit for the detection of retroviral specific antibodies in seronegative individuals
CN1195772A (zh) * 1997-04-04 1998-10-14 上海荣盛生物技术有限公司 梳式斑点免疫检测法
WO2006126287A1 (ja) * 2005-05-27 2006-11-30 Masami Moriyama Ｈｉｖ－１を検出する方法およびそれに使用するキット
WO2008059553A1 (fr) * 2006-11-13 2008-05-22 Masami Moriyama Procédé de détection du vih-1 sans être affecté par l'anticorps de la protéine anti-souris existant chez l'homme et trousse destinée à une utilisation dans ce procédé
CN101581720A (zh) * 2008-05-14 2009-11-18 上海英旻泰生物技术有限公司 一种人类免疫缺陷病毒抗体确认试剂盒
CN101643743A (zh) * 2009-07-22 2010-02-10 张强 口腔黏膜渗出液hiv1/2抗体检测试纸及其制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
吉田勉等: "检测AIDS病毒（HIV）抗体的明胶粒子凝集法", 《国外医学临床生物化学与检验学分册》 *
孙丽萍: "实验室HIV检测技术概述及进展", 《海南医学院学报》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103364541A (zh) * 2013-06-28 2013-10-23 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 一种用于间接elisa试验的样品稀释液
CN106546732A (zh) * 2015-09-17 2017-03-29 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 人类免疫缺陷病毒抗原和抗体联合检测试剂盒及其用途和检测方法
CN108484465A (zh) * 2018-04-23 2018-09-04 汕头大学 一种可循环利用的双水相从雨生红球藻中提取虾青素的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Carpentier et al. Microbial reduction and precipitation of vanadium by Shewanella oneidensis
CN103630690B (zh) 丙型肝炎病毒抗原抗体联合检测试剂盒及其检测方法
CN103674657A (zh) 血清或血浆样本中的抗原抗体免疫复合物处理试剂盒及其应用
Ma et al. Novel electrochemical immunosensor for sensitive monitoring of cardiac troponin I using antigen–response cargo released from mesoporous Fe3O4
CN104237344A (zh) 用于卡那霉素检测的电化学适体电极及其制备方法
CN102998447B (zh) 一种检测h5n1亚型禽流感病毒的电化学免疫传感器及其制备方法
KR100326619B1 (ko) 염기해리분석법
CN106546732A (zh) 人类免疫缺陷病毒抗原和抗体联合检测试剂盒及其用途和检测方法
CN102818893A (zh) 金钯核壳材料构建肺癌肿瘤标志物免疫传感器制备及应用
CN102608312A (zh) 一种应用于微量明胶颗粒凝集hiv-1近期感染检测法的血清或血浆样品稀释液
Jia et al. based point-of-care testing of SARS-CoV-2
CN103323308A (zh) 一种处理微量全血的试剂及其应用
CN103713134A (zh) 一种可视化检测病毒的检测试剂盒及其检测方法
Manak et al. Stability of human immunodeficiency virus serological markers in samples collected as HemaSpot and Whatman 903 dried blood spots
CN102662064A (zh) 检测中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的免疫比浊试剂盒及其制备方法
CN108120839A (zh) 一种免疫球蛋白IgG检测试剂盒及其制备、使用方法
Du et al. Self-assembled fluorescent Ce (Ⅲ) coordination polymer as ratiometric probe for HIV antigen detection
CN103142566A (zh) 发热伴血小板减少综合症中重要蛋白的抑制剂
CN106771134B (zh) 一种鲤疱疹病毒ⅱ型夹心elisa检测试剂盒及检测方法
CN103954750A (zh) 一种免疫磁珠及其快速检测奥奈达希瓦氏菌的方法
CN101581720A (zh) 一种人类免疫缺陷病毒抗体确认试剂盒
CN116413253A (zh) 一种人***瘤病毒检测试剂及其应用
CN103698517B (zh) 一种鸡传染性支气管炎病毒的快速检测试剂盒
CN102565396A (zh) 一种应用于微量明胶颗粒凝集hiv-1近期感染检测法的抗原稀释液
CN101304741B (zh) 一种可溶于水、以银的化合物和胱氨酸为主要成分、具有抗病毒活性的制剂及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20120725