CN102603869A - 六胜肽的合成方法 - Google Patents
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Abstract
一种六胜肽的合成方法,步骤为:树脂溶胀、制备氨基树脂、合成保护肽树脂、合成H2N-Arg(pbf)-HN-Trt-resin、合成NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin肽树脂、合成Fmoc-Glu(tbu)-COOSu、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-OH、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-OOSu、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽、合成H2N-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽、合成Ac-HN-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽、制备六胜肽。
Description
技术领域
本发明属于化妆品技术领域,具体涉及到多肽类中的短肽。
背景技术
六胜肽是一种含有六个氨基酸的活性多肽,氨基酸序列为Ac-Glu-Glu-Met-Gln-Arg-Arg-NH2,具有皮肤除皱的生物活性,广泛用于各种高级美容化妆品中。
六胜肽的制备方法目前主要采用经典固相法生产。即将保护氨基酸由C端向N端逐个延伸,通过缩合、脱除保护、再缩合、切割树脂、离心、冻干和高效液相制备得到纯度高于90%的六胜肽产品。该方法中所需要的树脂市场价格较为昂贵,且其交换活度小,并且在合成中所使用缩合剂和碱都明显过量,造成了六胜肽原料成本的增高。作为化妆品原料,目前六胜肽的市场价格为1000元/g,致使含有六胜肽的化妆品成品价格昂贵,对于普通人群难以接受,因此,降低六胜肽生产成本的工艺方法研究具有重要意义。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于克服上述六胜肽固相合成方法的缺点,结合固相和液相合成方法提供一种方法简单、产品成本低的六胜肽的合成方法。
解决上述技术问题所采用的技术方案由下述步骤组成:
1、树脂溶胀
将Rink-Amide-AM-Resin树脂加入烧瓶中,每克Rink-Amide-AM-Resin树脂加入10mL二氯甲烷,室温搅拌浸泡30分钟使其充分溶胀。
2、制备氨基树脂
在步骤1溶胀的树脂中通入氨气,密封,室温搅拌浸泡30~60分钟,300目砂芯过滤除去溶剂,用二甲基甲酰胺清洗树脂,得氨基树脂。
3、合成保护肽树脂
在步骤2的氨基树脂中加入N,N-二甲基甲酰胺,室温搅拌,加入Fmoc-Arg(pbf)-OH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺,氨基树脂与Fmoc-Arg(pbf)-OH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺的摩尔比为1∶3∶3∶3∶6,室温搅拌反应3~5小时,用N,N-二甲基甲酰胺清洗树脂,得保护肽树脂,序列为Fmoc-Arg(pbf)-HN-Trt-resin。
4、合成H2N-Arg(pbf)-HN-Trt-resin
在每克保护肽树脂中加入10mL质量分数为20%的哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液,室温反应20~40分钟,用砂芯过滤除去溶剂,N,N-二甲基甲酰胺清洗树脂,得H2N-Arg(pbf)-HN-Trt-resin。
5、合成NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin肽树脂
重复步骤3、4,先对保护精氨酸进行偶联,再对保护谷氨酰胺进行偶联、脱除Fmoc保护,砂芯过滤除去溶剂,得与树脂相连的三肽产物NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽。
6、合成Fmoc-Glu(tbu)-COOSu
将Fmoc-Glu(tbu)-COOH置于反应瓶中,按每克Fmoc-Glu(tbu)-COOH加入10~15m L乙酸乙酯,室温搅拌,加入氮羟基丁二酰亚胺,Fmoc-Glu(tbu)-COOH与氮羟基丁二酰亚胺的摩尔比为1∶1~1.5,搅拌溶解,加入二环己基碳二亚胺。Fmoc-Glu(tbu)-COOH与二环己基碳二亚胺的摩尔比为1∶1~2,室温反应20~24小时,减压过滤除去固体不溶物,滤液减压浓缩至干,得Fmoc-Glu(tbu)-COOSu。
7、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-OH
将步骤6所得的产物置于反应瓶中,按每克Fmoc-Glu(tbu)-COOSu加入10~15mL二氧六环,室温搅拌,至Fmoc-Glu(tbu)-COOSu完全溶解。
将γ-叔丁酯谷氨酸和碳酸氢钠溶解于蒸馏水中,所得溶液滴加到Fmoc-Glu(tbu)-COOSu的二氧六环溶液中,γ-叔丁酯谷氨酸与Fmoc-Glu(tbu)-COOSu的摩尔比为1.5∶1,碳酸氢钠与Fmoc-Glu(tbu)-COOSu的摩尔比为2∶1,室温搅拌反应18~20小时,用质量分数为5%盐酸溶液调pH为2~3,加乙酸乙酯萃取,分出有机相,有机相依次用水、饱和食盐水洗,有机相经无水硫酸钠干燥、过滤、减压过滤、滤液减压蒸浓缩得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-COOH。
8、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-OOSu
将Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-COOH采用步骤6所述方法进行反应,得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-COOSu。
9、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH
将步骤8Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-COOSu、蛋氨酸采用步骤7所述的方法进行反应,得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH。
10、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽
将步骤5合成的NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽溶解于N,N-二甲基甲酰胺中,依次加入Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺,Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽与Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺的摩尔比为1∶2~5∶2~5∶2~5∶6~10,室温反应3~5小时,减压过滤,用N,N-二甲基甲酰胺洗树脂1~3次,得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽。
11、合成H2N-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽
用步骤4的方法,对Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin进行脱除Fmoc保护基团,得H2N-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽。
12、合成Ac-HN-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽
在H2N-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽中加入二氯甲烷、乙酸酐、三乙胺,按每克H2N-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽中加入20mL二氯甲烷,H2N-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽与乙酸酐、三乙胺的质量比为1∶0.5∶1。室温反应3~5小时,过滤,用N,N-二甲基甲酰胺洗树脂3次,得Ac-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽。
13、制备六胜肽
配制树脂切割液:将苯酚、1,2-乙二硫醇、苯甲硫醚、三氟乙酸、水按体积比为5∶2.5∶5∶4∶83.5加入到烧杯内搅拌混合。
切割树脂:在步骤12树脂呔中加入切割液,按每克Ac-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽加入10~15mL切割液,室温搅拌反应3小时,过滤,滤液倾倒到冷冻的无水***中,搅拌,离心、分离出上清液,室温减压烘干,得六胜肽粗品,经反相色谱法纯化、浓缩、冻干得纯度大于95%的六胜肽。
在本发明的合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽步骤10中,将步骤5合成的NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽溶解于N,N-二甲基甲酰胺中,依次加入Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺,Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽与Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺的优选摩尔比为1∶2~4∶2~4∶2~4∶6~10,室温反应3~5小时,减压过滤,用N,N-二甲基甲酰胺洗树脂1~3次,得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf0-NH-resin树脂肽。
在本发明的合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽步骤10中,将步骤5合成的NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽溶解于N,N-二甲基甲酰胺中,依次加入Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺,Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽与Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺的最佳摩尔比为1∶3∶3∶3∶8,室温反应3~5小时,减压过滤,用N,N-二甲基甲酰胺洗树脂1~3次,得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽。
本发明采用常规液相合成法制备出六胜肽的N端的三个氨基酸的保护三肽,采用固相法制备与树脂连接的三肽树脂,将六胜肽的N端的三个氨基酸的保护三肽作为一个片段肽与三肽采用固相法缩合得到六胜肽树脂,经树脂切割、离心、高效液相制备、冻干得纯六胜肽。本发明与固相法相比,克服了逐个氨基酸缩合时的空间效应影响,生产成本可降低20%~30%。本发明具有合成方法简单、产品成本低等优点,可用于合成六胜肽。
附图说明
图1是采用本发明实施例1合成的六胜肽的液相色谱图。
图2是采用本发明实施例1合成的六胜肽的质谱图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明进一步详细说明,但本发明不限于这些实施例。
实施例1
以所用原料Rink-Amide-AM-Resin树脂10g为例制备六胜肽,所用的其它原料以及制备方法如下:
1、树脂溶胀
将Rink-Amide-AM-Resin树脂10g加入250ml烧瓶中,加入100ml二氯甲烷,室温搅拌浸泡30分钟使其充分溶胀。
2、制备氨基树脂
在步骤1溶胀的树脂中通入氨气,密封,室温搅拌浸泡30分钟,300目砂芯过滤除去溶剂,并用二甲基甲酰胺清洗树脂,得氨基树脂,树脂交换活度为17mmol。
3、合成保护肽树脂
在氨基树脂中加入100ml N,N-二甲基甲酰胺,及51mmol的Fmoc-Arg(pbf)-OH、51mmol的O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、51mmol的苯并三氮唑及102mmol的二异丙基乙胺,氨基树脂与Fmoc-Arg(pbf)-OH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺的摩尔比为1∶3∶3∶3∶6,室温搅拌反应3~5小时。茚三酮检测树脂颗粒应显示透亮色,表明反应完全。砂芯过滤除去溶剂,并用N,N-二甲基甲酰胺清洗树脂,得保护肽树脂,序列为Fmoc-Arg(pbf)-HN-Trt-resin。
4、合成H2N-Arg(pbf)-HN-Trt-resin
在所合成的保护肽树脂中加入100ml质量分数为20%的哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液,室温搅拌反应20~40分钟,茚三酮检测树脂颗粒应显示蓝色,表明反应完成。砂芯过滤除去溶剂,并用N,N-二甲基甲酰胺清洗树脂,得H2N-Arg(pbf)-HN-Trt-resin。
5、合成NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin肽树脂
重复步骤3、4,先对Fmoc-Arg(pbf)-OH保护氨基酸进行偶联,再对Fmoc-Gln(Trt)-OH氨基酸进行偶联,得与树脂相连的三肽产物NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽。
6、合成Fmoc-Glu(tbu)-COOSu
将Fmoc-Glu(tbu)-COOH 12.8g置于250ml反应瓶中,加入150ml乙酸乙酯,室温搅拌,加入氮羟基丁二酰亚胺4.15g,Fmoc-Glu(tbu)-COOH与氮羟基丁二酰亚胺的摩尔比为1∶1.2,搅拌溶解,加入二环己基碳二亚胺7.43g,Fmoc-Glu(tbu)-COOH与二环己基碳二亚胺的摩尔比为1∶1.2,室温反应20小时,减压过滤除去固体不溶物,滤液减压浓缩至干,得Fmoc-Glu(tbu)-COOSu。
7、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-OH
取步骤6所得的产物5.23g置于反应瓶中,加入60ml二氧六环中,室温搅拌,完全溶解。取γ-叔丁酯谷氨酸2.64g和碳酸氢钠2.18g溶解于60ml蒸馏水中,所得溶液滴加到Fmoc-Glu(tbu)-COOSu的二氧六环溶液中,γ-叔丁酯谷氨酸与Fmoc-Glu(tbu)-COOSu的摩尔比为1.3∶1,碳酸氢钠与Fmoc-Glu(tbu)-COOSu的摩尔比为2∶1,室温搅拌反应18~20小时,用质量分数为5%盐酸溶液调pH为2~3,加乙酸乙酯萃取,分出有机相,有机相依次用水、饱和食盐水洗,有机相经无水硫酸钠干燥、过滤、减压过滤、滤液减压蒸浓缩得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-COOH4.8g,收率78.7%。
8、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-OOSu
将Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-COOH 4.8g,采用第6步所述方法进行反应,得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-COOSu 6.0g。
9、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH
取8合成的Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-COOSu 6.0g和蛋氨酸采用步骤7所述方法进行反应,得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH。
10、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽
将步骤5所合成的NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽溶解于N,N-二甲基甲酰胺中,依次加入Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH 37.8g、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸16.4g、苯并三氮唑6.9g、二异丙基乙胺17.6g,Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽与Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺的摩尔比为1∶3∶3∶3∶8,室温反应3~5小时,减压过滤,用N,N-二甲基甲酰胺洗树脂1~3次,得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽。
11、合成H2N-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽
用步骤4的方法,对Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin进行脱除Fmoc保护基团,得H2N-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽。
12、合成Ac-HN-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽
将步骤11合成的Ac-HN-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽10g,加入200mL二氯甲烷,加入5.0g乙酸酐、10.0g三乙胺,H2N-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽与乙酸酐、三乙胺的质量比为1∶0.5∶1。室温反应4小时,过滤,用N,N-二甲基甲酰胺洗树脂3次,得Ac-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽。
13、制备六胜肽
配制树脂切割液:将苯酚10mL、1,2-乙二硫醇5mL、苯甲硫醚10mL、三氟乙酸8mL、水167mL加入到烧杯内搅拌混合,苯酚与1,2-乙二硫醇、苯甲硫醚、三氟乙酸、水的体积比为5∶2.5∶5∶4∶83.5,备用。
切割树脂:取步骤12合成的Ac-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽10g,加入120ml树脂切割液,室温搅拌反应3小时,过滤,滤液倾倒到冷冻的无水***中,搅拌,离心、分离出上清液,室温减压烘干,得六胜肽粗品9.0g,高效液相色谱分析,纯度大于50%。
以乙腈和含有0.1%TFA的水为流动相,用高效液相色谱进行反向制备纯化。收集主成分馏分,减压,浓缩至原体积的10%±5%,冻干得六胜肽,纯度大于95%。
实施例2
以所用原料Rink-Amide-AM-Resin树脂10g为例制备六胜肽,所用的其它原料以及制备方法如下:
本实施例的树脂溶胀步骤1、制备氨基树脂步骤2、合成保护肽树脂步骤3、合成H2N-Arg(pbf)-HN-Trt-resin步骤4、合成NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin肽树脂步骤5与实施例1相同。
在合成合成Fmoc-Glu(tbu)-COOSu步骤6中,将Fmoc-Glu(tbu)-COOH 12.8g置于250ml反应瓶中,加入128ml乙酸乙酯,室温搅拌,加入氮羟基丁二酰亚胺3.45g,Fmoc-Glu(tbu)-COOH与氮羟基丁二酰亚胺的摩尔比为1∶1,搅拌溶解,加入二环己基碳二亚胺6.18g,Fmoc-Glu(tbu)-COOH与二环己基碳二亚胺的摩尔比为1∶1,室温反应20小时,减压过滤除去固体不溶物,滤液减压浓缩至干,得Fmoc-Glu(tbu)-COOSu。
合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-OH步骤7、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-OOSu步骤8、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH步骤9与实施例1相同。
在合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽步骤10中,将步骤5所合成的NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽溶解于N,N-二甲基甲酰胺中,依次加入Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH25.2g、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸10.9g、苯并三氮唑4.6g、二异丙基乙胺11.7g,Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽与Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺的摩尔比为1∶2∶2∶2∶6,该步骤中的其它步骤与实施例1相同,得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽。
合成H2N-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽步骤11、合成Ac-HN-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽步骤12与实施例1相同。在制备六胜肽步骤13中,取步骤12合成的Ac-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽10g,加入100ml树脂切割液,室温搅拌反应3小时,过滤,滤液倾倒到冷冻的无水***中,搅拌,离心、分离出上清液,室温减压烘干,该步骤中的其它步骤与实施例1相同,得六胜肽粗品。
其它步骤与实施例1相同,制备成六胜肽。
实施例3
以所用原料Rink-Amide-AM-Resin树脂10g为例制备六胜肽,所用的其它原料以及制备方法如下:
本实施例的树脂溶胀步骤1、制备氨基树脂步骤2、合成保护肽树脂步骤3、合成H2N-Arg(pbf)-HN-Trt-resin步骤4、合成NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin肽树脂步骤5与实施例1相同。
在合成合成Fmoc-Glu(tbu)-COOSu步骤6中,将Fmoc-Glu(tbu)-COOH 12.8g置于250ml反应瓶中,加入128ml乙酸乙酯,室温搅拌,加入氮羟基丁二酰亚胺4.15g,Fmoc-Glu(tbu)-COOH与氮羟基丁二酰亚胺的摩尔比为1∶1.2,搅拌溶解,加入二环己基碳二亚胺7.43g,Fmoc-Glu(tbu)-COOH与二环己基碳二亚胺的摩尔比为1∶1.2,室温反应20小时,减压过滤除去固体不溶物,滤液减压浓缩至干,得Fmoc-Glu(tbu)-COOSu。
合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-OH步骤7、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-OOSu步骤8、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH步骤9与实施例1相同。
在合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽步骤10中,将步骤5所合成的NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽溶解于N,N-二甲基甲酰胺中,依次加入Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH 63g、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸27.3g、苯并三氮唑11.5g、二异丙基乙胺21.9g,Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽与Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺的摩尔比为1∶5∶5∶5∶10,该步骤中的其它步骤与实施例1相同,得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽。
合成H2N-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽步骤11、合成Ac-HN-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽步骤12与实施例1相同。在制备六胜肽步骤13中,取步骤12合成的Ac-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽10g,加入100ml树脂切割液,室温搅拌反应3小时,过滤,滤液倾倒到冷冻的无水***中,搅拌,离心、分离出上清液,室温减压烘干,该步骤中的其它步骤与实施例1相同,得六胜肽粗品。
其它步骤与实施例1相同,制备成六胜肽。
实施例4
以所用原料Rink-Amide-AM-Resin树脂10g为例制备六胜肽,所用的其它原料以及制备方法如下:
本实施例的树脂溶胀步骤1、制备氨基树脂步骤2、合成保护肽树脂步骤3、合成H2N-Arg(pbf)-HN-Trt-resin步骤4、合成NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin肽树脂步骤5与实施例1相同。
在合成合成Fmoc-Glu(tbu)-COOSu步骤6中,将Fmoc-Glu(tbu)-COOH 12.8g置于250ml反应瓶中,加入192ml乙酸乙酯,室温搅拌,加入氮羟基丁二酰亚胺5.19g,Fmoc-Glu(tbu)-COOH与氮羟基丁二酰亚胺的摩尔比为11.5,搅拌溶解,加入二环己基碳二亚胺12.39g,Fmoc-Glu(tbu)-COOH与二环己基碳二亚胺的摩尔比为1∶2,室温反应20~24小时,减压过滤除去固体不溶物,滤液减压浓缩至干,得Fmoc-Glu(tbu)-COOSu。
合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-OH步骤7、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-OOSu步骤8、合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH步骤9与实施例1相同。
在合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽步骤10中,将步骤5所合成的NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽溶解于N,N-二甲基甲酰胺中,依次加入Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH 50.4g、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸21.8g、苯并三氮唑9.18g、二异丙基乙胺21.9g,Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽与Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺的摩尔比为1∶4∶4∶4∶10,该步骤中的其它步骤与实施例1相同,得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽。
合成H2N-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽步骤11、合成Ac-HN-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽步骤12与实施例1相同。在制备六胜肽步骤13中,取步骤12合成的Ac-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽10g,加入100ml树脂切割液,室温搅拌反应3小时,过滤,滤液倾倒到冷冻的无水***中,搅拌,离心、分离出上清液,室温减压烘干,该步骤中的其它步骤与实施例1相同,得六胜肽粗品。
其它步骤与实施例1相同,制备成六胜肽。
为了验证本发明的有益效果,发明人采用本发明实施例1合成的六胜肽采用液相色谱仪测定纯度,液相色谱图见图1,由图1可见,所制备六胜肽的纯度大于95%。
所制备的六胜肽用质谱仪测定其结构,测试结果见图2,由图2可见,所制备的六胜肽分子量及分子离子峰与六胜肽分子量以及分子离子峰一致。
Claims (3)
1.一种六胜肽的合成方法,由下述步骤组成:
(1)树脂溶胀
将Rink-Amide-AM-Resin树脂加入烧瓶中,每克Rink-Amide-AM-Resin树脂加入10mL二氯甲烷,室温搅拌浸泡30分钟使其充分溶胀;
(2)制备氨基树脂
在步骤(1)溶胀的树脂中通入氨气,密封,室温搅拌浸泡30~60分钟,300目砂芯过滤除去溶剂,用二甲基甲酰胺清洗树脂,得氨基树脂;
(3)合成保护肽树脂
在步骤(2)的氨基树脂中加入N,N-二甲基甲酰胺,室温搅拌,加入Fmoc-Arg(pbf)-OH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺,氨基树脂与Fmoc-Arg(pbf)-OH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺的摩尔比为1∶3∶3∶3∶6,室温搅拌反应3~5小时,用N,N-二甲基甲酰胺清洗树脂,得保护肽树脂,序列为Fmoc-Arg(pbf)-HN-Trt-resin;
(4)合成H2N-Arg(pbf)-HN-Trt-resin
在每克保护肽树脂中加入10mL质量分数为20%的哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液,室温反应20~40分钟,用砂芯过滤除去溶剂,N,N-二甲基甲酰胺清洗树脂,得H2N-Arg(pbf)-HN-Trt-resin;
(5)合成NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin肽树脂
重复步骤(3)、(4),先对保护精氨酸进行偶联,再对保护谷氨酰胺进行偶联、脱除Fmoc保护,砂芯过滤除去溶剂,得与树脂相连的三肽产物NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽;
(6)合成Fmoc-Glu(tbu)-COOSu
将Fmoc-Glu(tbu)-COOH置于反应瓶中,按每克Fmoc-Glu(tbu)-COOH加入10~15mL乙酸乙酯,室温搅拌,加入氮羟基丁二酰亚胺,Fmoc-Glu(tbu)-COOH与氮羟基丁二酰亚胺的摩尔比为1∶1~1.5,搅拌溶解,加入二环己基碳二亚胺。Fmoc-Glu(tbu)-COOH与二环己基碳二亚胺的摩尔比为1∶1~2,室温反应20~24小时,减压过滤除去固体不溶物,滤液减压浓缩至干,得Fmoc-Glu(tbu)-COOSu;
(7)合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-OH
将步骤(6)所得的产物置于反应瓶中,按每克Fmoc-Glu(tbu)-COOSu加入10~15mL二氧六环,室温搅拌,至Fmoc-Glu(tbu)-COOSu完全溶解;
将γ-叔丁一酯谷氨酸和碳酸氢钠溶解于蒸馏水中,所得溶液滴加到Fmoc-Glu(tbu)-COOSu的二氧六环溶液中,γ-叔丁酯谷氨酸与Fmoc-Glu(tbu)-COOSu的摩尔比为1.5∶1,碳酸氢钠与Fmoc-Glu(tbu)-COOSu的摩尔比为2∶1,室温搅拌反应18~20小时,用质量分数为5%盐酸溶液调pH为2~3,加乙酸乙酯萃取,分出有机相,有机相依次用水、饱和食盐水洗,有机相经无水硫酸钠干燥、过滤、减压过滤、滤液减压蒸浓缩得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-COOH;
(8)合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-OOSu
将Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-COOH采用步骤(6)所述方法进行反应,得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-COOSu;
(9)合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH
将步骤(8)Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-COOSu、蛋氨酸采用步骤(7)所述的方法进行反应,得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH;
(10)合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽
将步骤(5)合成的NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽溶解于N,N-二甲基甲酰胺中,依次加入Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺,Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽与Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺的摩尔比为1∶2~5∶2~5∶2~5∶6~10,室温反应3~5小时,减压过滤,用N,N-二甲基甲酰胺洗树脂1~3次,得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽;
(11)合成H2N-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽
用步骤(4)的方法,对Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin进行脱除Fmoc保护基团,得H2N-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽;
(12)合成Ac-HN-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽
在H2N-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽中加入二氯甲烷、乙酸酐、三乙胺,按每克H2N-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽中加入20mL二氯甲烷,H2N-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽与乙酸酐、三乙胺的质量比为1∶0.5∶1。室温反应3~5小时,过滤,用N,N-二甲基甲酰胺洗树脂3次,得Ac-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽;
(13)制备六胜肽
配制树脂切割液:将苯酚、1,2-乙二硫醇、苯甲硫醚、三氟乙酸、水按体积比为5∶2.5∶5∶4∶83.5加入到烧杯内搅拌混合;
切割树脂:在步骤(12)树脂呔中加入切割液,按每克Ac-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽加入10~15mL切割液,室温搅拌反应3小时,过滤,滤液倾倒到冷冻的无水***中,搅拌,离心、分离出上清液,室温减压烘干,得六胜肽粗品,经反相色谱法纯化、浓缩、冻干得纯度大于95%的六胜肽。
2.按照权利要求1所述的六胜肽的合成方法,其特征在于:在合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽步骤(10)中,将步骤(5)合成的NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽溶解于N,N-二甲基甲酰胺中,依次加入Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺,Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽与Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺的摩尔比为1∶2~4∶2~4∶2~4∶6~10,室温反应3~5小时,减压过滤,用N,N-二甲基甲酰胺洗树脂1~3次,得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽。
3.按照权利要求1所述的六胜肽的合成方法,其特征在于:在合成Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽步骤(10)中,将步骤(5)合成的NH2-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽溶解于N,N-二甲基甲酰胺中,依次加入Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺,Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽与Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-COOH、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸、苯并三氮唑、二异丙基乙胺的摩尔比为1∶3∶3∶3∶8,室温反应3~5小时,减压过滤,用N,N-二甲基甲酰胺洗树脂1~3次,得Fmoc-Glu(tbu)-Glu(tbu)-Met-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pbf)-NH-resin树脂肽。
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CN (1) | CN102603869B (zh) |
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103613642A (zh) * | 2013-11-20 | 2014-03-05 | 陕西东大生化科技有限责任公司 | 一种六胜肽的液相分段合成方法 |
CN103694316A (zh) * | 2013-12-31 | 2014-04-02 | 杭州华津药业股份有限公司 | 一种阿基瑞林的制备方法 |
CN106632609A (zh) * | 2017-01-05 | 2017-05-10 | 陕西慧康生物科技有限责任公司 | 一种六胜肽的制备方法及其产品 |
CN106749529A (zh) * | 2017-01-05 | 2017-05-31 | 陕西慧康生物科技有限责任公司 | 一种六胜肽的制备方法及其产品 |
WO2018126524A1 (zh) * | 2017-01-04 | 2018-07-12 | 陕西慧康生物科技有限责任公司 | 一种六胜肽的纯化方法 |
CN110426476A (zh) * | 2019-08-15 | 2019-11-08 | 珠海伊斯佳科技股份有限公司 | 一种化妆品中乙酰基六肽-8含量的测定方法 |
CN110684077A (zh) * | 2019-10-18 | 2020-01-14 | 陕西慧康生物科技有限责任公司 | 一种阿基瑞林的规模化合成方法 |
CN113845586A (zh) * | 2021-11-14 | 2021-12-28 | 汉肽生物医药集团有限公司 | 一种液相合成乙酰基六肽-8的方法 |
CN113968895A (zh) * | 2021-12-01 | 2022-01-25 | 浙江湃肽生物有限公司 | 一种阿基瑞林的中间体组合物及其制备方法与应用 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1450906A (zh) * | 1999-07-07 | 2003-10-22 | 特莱默里斯公司 | 用于肽合成的方法和组合物 |
US7071167B2 (en) * | 2002-11-13 | 2006-07-04 | L'oreal | Use of a combination of components with an inhibitory synergistic effect on calcium channels to prevent or treat wrinkles and fine lines |
CN101870732A (zh) * | 2009-04-22 | 2010-10-27 | 兰州大学 | 用固-液相结合法进行单聚乙二醇化胸腺五肽的合成方法 |
-
2012
- 2012-03-27 CN CN2012100830840A patent/CN102603869B/zh active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1450906A (zh) * | 1999-07-07 | 2003-10-22 | 特莱默里斯公司 | 用于肽合成的方法和组合物 |
US7071167B2 (en) * | 2002-11-13 | 2006-07-04 | L'oreal | Use of a combination of components with an inhibitory synergistic effect on calcium channels to prevent or treat wrinkles and fine lines |
CN101870732A (zh) * | 2009-04-22 | 2010-10-27 | 兰州大学 | 用固-液相结合法进行单聚乙二醇化胸腺五肽的合成方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
C.BLANES-MIRA ET AL.: "A synthetic hexapeptide(Argireline)with antiwrinkle activity", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF COSMETIC SCIENCE》, vol. 24, 31 December 2002 (2002-12-31), pages 303 - 310, XP009045291, DOI: doi:10.1046/j.1467-2494.2002.00153.x * |
朱亮亮 等: "大位阻氨基酸Fmoc-Arg(Pbf)-OH与Rink Amide-AM树脂的高效缩合", 《现代化工》, vol. 32, no. 2, 29 February 2012 (2012-02-29), pages 62 - 65 * |
郑彦慧 等: "Rink Amide树脂结构对多肽合成的影响研究", 《离子交换与吸附》, vol. 24, no. 6, 31 December 2008 (2008-12-31), pages 563 - 569 * |
Cited By (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103613642A (zh) * | 2013-11-20 | 2014-03-05 | 陕西东大生化科技有限责任公司 | 一种六胜肽的液相分段合成方法 |
CN103613642B (zh) * | 2013-11-20 | 2015-05-13 | 陕西东大生化科技有限责任公司 | 一种六胜肽的液相分段合成方法 |
CN103694316A (zh) * | 2013-12-31 | 2014-04-02 | 杭州华津药业股份有限公司 | 一种阿基瑞林的制备方法 |
CN103694316B (zh) * | 2013-12-31 | 2015-09-09 | 杭州华津药业股份有限公司 | 一种阿基瑞林的制备方法 |
WO2018126524A1 (zh) * | 2017-01-04 | 2018-07-12 | 陕西慧康生物科技有限责任公司 | 一种六胜肽的纯化方法 |
WO2018126525A1 (zh) * | 2017-01-05 | 2018-07-12 | 陕西慧康生物科技有限责任公司 | 一种六胜肽的制备方法及其产品 |
CN106749529A (zh) * | 2017-01-05 | 2017-05-31 | 陕西慧康生物科技有限责任公司 | 一种六胜肽的制备方法及其产品 |
CN106632609A (zh) * | 2017-01-05 | 2017-05-10 | 陕西慧康生物科技有限责任公司 | 一种六胜肽的制备方法及其产品 |
CN106632609B (zh) * | 2017-01-05 | 2020-05-19 | 陕西慧康生物科技有限责任公司 | 一种六胜肽的制备方法及其产品 |
CN110426476A (zh) * | 2019-08-15 | 2019-11-08 | 珠海伊斯佳科技股份有限公司 | 一种化妆品中乙酰基六肽-8含量的测定方法 |
CN110684077A (zh) * | 2019-10-18 | 2020-01-14 | 陕西慧康生物科技有限责任公司 | 一种阿基瑞林的规模化合成方法 |
CN113845586A (zh) * | 2021-11-14 | 2021-12-28 | 汉肽生物医药集团有限公司 | 一种液相合成乙酰基六肽-8的方法 |
CN113968895A (zh) * | 2021-12-01 | 2022-01-25 | 浙江湃肽生物有限公司 | 一种阿基瑞林的中间体组合物及其制备方法与应用 |
CN113968895B (zh) * | 2021-12-01 | 2023-09-22 | 浙江湃肽生物有限公司 | 一种阿基瑞林的中间体组合物及其制备方法与应用 |
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