CN102580141B - 一种制备脱细胞真皮基质敷料的方法 - Google Patents

一种制备脱细胞真皮基质敷料的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种制备脱细胞真皮基质敷料的方法，将动物皮肤通过制备断层皮片、病毒灭活、脱脂、脱细胞、加碘、冻干、包装和辐照消毒工艺后得到脱细胞真皮基质。本发明的优点：脱脂时间短、效率高，脱细胞彻底，对真皮细胞外基质天然结构损害轻，具有抗菌功能的优点。

Description

一种制备脱细胞真皮基质敷料的方法
技术领域
本发明涉及一种制备脱细胞真皮基质敷料的方法。
背景技术
已有的脱细胞真皮基质材料，存在以下不足：操作较复杂，生产周期较长，效率较低；容易造成基质的损坏。因此，需要提供一种新的技术方案来解决上述问题。
发明内容
本发明的目的是提供一种生产周期短、效率高、对真皮细胞外基质天然结构损害轻的制备脱细胞真皮基质敷料的方法。
本发明采用的技术方案是：
一种制备脱细胞真皮基质敷料的方法，该产品由猪皮、牛皮或羊皮制备而成，包括以下步骤：
a、制备断层皮片工艺：用取皮机将动物皮肤制成厚度为0.1-2.0mm的断层皮片，用打孔器将断层皮片制成不同形状的断层皮片；
b、病毒灭活工艺：将断层皮片用质量浓度0.1%-2.0%的过氧乙酸和质量浓度1.0%-5.0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行灭活30-60分钟，皮片与病毒灭活溶液的质量比为1: 4-7；
c、脱脂工艺：采用质量浓度1.0%-4.0%纯碱、质量浓度1.0%-4.0%烧碱和质量浓度0.1%-1.0%表面活性剂组成的混合脱脂剂进行脱脂30-60分钟，所述表面活性剂为平平加、十二烷基氨基丙酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚、曲拉酮中的一种，皮片与混合脱脂剂的质量比为1: 4-7；
d、脱细胞工艺：采用质量浓度0.1%-0.5%胰酶、质量浓度0.1%-0.3%激活剂、质量浓度0.2%-0.5%脱脂剂组成的脱细胞液进行脱细胞30-60分钟，所述激活剂为质量浓度0.1%-0.3%硫酸铵，所述脱脂剂为质量浓度0.2%-0.5%平平加，质量浓度0.2%-0.5%十二烷基硫酸钠中的一种，皮片与脱细胞液的质量比为1: 4-7；
e、含碘脱细胞真皮基质工艺：将脱细胞真皮基质浸泡于0.1%-0.5%聚维酮碘溶液30-60分钟，制成含碘脱细胞真皮基质；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺：将上述含碘脱细胞真皮基质放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经γ射线辐照消毒灭菌，即为成品。
本发明的有益效果：（1）b步骤采用过氧乙酸和氯化钠溶液组成的病毒灭活溶液进行灭活，既达到了病毒灭活的效果，又避免了过氧乙酸溶液灭活病毒而产生的断层皮片肿胀的问题；（2）c步骤中由纯碱、烧碱、表面活性剂组成的混合脱脂剂具有脱脂时间短、效率高、对皮片组织结构的保护作用强的优点；（3）d步骤中采用酶、激活剂和脱脂剂组成的脱细胞液进行脱细胞工艺，具有脱细胞彻底、时间短、效率高，对真皮细胞外基质天然结构损害轻的优点；（4）e步骤将脱细胞真皮基质制备成含碘的脱细胞真皮基质，具有抗菌功能的优点。
具体实施方式
以下实施例旨在说明本发明而不是对本方明的进一步限定。
实施例1
本发明的一种制备脱细胞真皮基质敷料的方法，该产品由猪皮、牛皮或羊皮制备而成，包括以下步骤：
a、制备断层皮片工艺：用取皮机将动物皮肤制成厚度为0.1mm的断层皮片，用打孔器将断层皮片制成网孔状的断层皮片；
b、病毒灭活工艺：将断层皮片用质量浓度0.1%的过氧乙酸和质量浓度1.0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行灭活30分钟，皮片与病毒灭活溶液的质量比为1: 4；
c、脱脂工艺：采用质量浓度1.0%纯碱、质量浓度1.0%烧碱和质量浓度0.1%平平加组成的混合脱脂剂进行脱脂30分钟，皮片与混合脱脂剂的质量比为1: 4；
d、脱细胞工艺：采用质量浓度0.1%胰酶、质量浓度0.1%激活剂硫酸铵、质量浓度0.2%脱脂剂平平加组成的脱细胞液进行脱细胞30分钟，皮片与脱细胞液的质量比为1: 4；
e、含碘脱细胞真皮基质工艺：将脱细胞真皮基质浸泡于0.1%聚维酮碘溶液30分钟，制成含碘脱细胞真皮基质；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺：将上述含碘脱细胞真皮基质放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经γ射线辐照消毒灭菌，即为成品。 
实施例2
本发明的一种制备脱细胞真皮基质敷料的方法，该产品由猪皮、牛皮或羊皮制备而成，包括以下步骤：
a、制备断层皮片工艺：用取皮机将动物皮肤制成厚度为0.1mm的断层皮片，用打孔器将断层皮片制成网孔状的断层皮片；
b、病毒灭活工艺：将断层皮片用质量浓度0.1%的过氧乙酸和质量浓度1.0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行灭活30分钟，皮片与病毒灭活溶液的质量比为1: 4；
c、脱脂工艺：采用质量浓度1.0%纯碱、质量浓度1.0%烧碱和质量浓度0.1%平平加组成的混合脱脂剂进行脱脂30分钟，皮片与混合脱脂剂的质量比为1: 4；
d、脱细胞工艺：采用质量浓度0.1%胰酶、质量浓度0.1%激活剂硫酸铵、质量浓度0.2%脱脂剂十二烷基硫酸钠组成的脱细胞液进行脱细胞30分钟，皮片与脱细胞液的质量比为1: 4；
e、含碘脱细胞真皮基质工艺：将脱细胞真皮基质浸泡于0.1%聚维酮碘溶液30分钟，制成含碘脱细胞真皮基质；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺：将上述含碘脱细胞真皮基质放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经γ射线辐照消毒灭菌，即为成品。
实施例3
一种制备脱细胞真皮基质敷料的方法，该产品由猪皮、牛皮或羊皮制备而成，包括以下步骤：
a、制备断层皮片工艺：用取皮机将动物皮肤制成厚度为1.0mm的断层皮片，用打孔器将断层皮片制成网孔状的断层皮片；
b、病毒灭活工艺：将断层皮片用质量浓度1.0%的过氧乙酸和质量浓度3.0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行灭活45分钟，皮片与病毒灭活溶液的质量比为1:5.5；
c、脱脂工艺：采用质量浓度2.5%纯碱、质量浓度2.5%烧碱和质量浓度0.5%十二烷基氨基丙酸钠组成的混合脱脂剂进行脱脂45分钟，皮片与混合脱脂剂的质量比为1:5.5；
d、脱细胞工艺：采用质量浓度0.3%胰酶、质量浓度0.2%激活剂硫酸铵、质量浓度0.3%脱脂剂平平加组成的脱细胞液进行脱细胞45分钟，皮片与脱细胞液的质量比为1:5.5；
e、含碘脱细胞真皮基质工艺：将脱细胞真皮基质浸泡于0.3%聚维酮碘溶液45分钟，制成含碘脱细胞真皮基质；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺：将上述含碘脱细胞真皮基质放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经γ射线辐照消毒灭菌，即为成品。
实施例4
一种制备脱细胞真皮基质敷料的方法，该产品由猪皮、牛皮或羊皮制备而成，包括以下步骤：
a、制备断层皮片工艺：用取皮机将动物皮肤制成厚度为1.0mm的断层皮片，用打孔器将断层皮片制成网孔状的断层皮片；
b、病毒灭活工艺：将断层皮片用质量浓度1.0%的过氧乙酸和质量浓度3.0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行灭活45分钟，皮片与病毒灭活溶液的质量比为1:5.5；
c、脱脂工艺：采用质量浓度2.5%纯碱、质量浓度2.5%烧碱和质量浓度0.5%十二烷基氨基丙酸钠组成的混合脱脂剂进行脱脂45分钟，皮片与混合脱脂剂的质量比为1:5.5；
d、脱细胞工艺：采用质量浓度0.3%胰酶、质量浓度0.2%激活剂硫酸铵、质量浓度0.3%脱脂剂十二烷基硫酸钠组成的脱细胞液进行脱细胞45分钟，皮片与脱细胞液的质量比为1:5.5；
e、含碘脱细胞真皮基质工艺：将脱细胞真皮基质浸泡于0.3%聚维酮碘溶液45分钟，制成含碘脱细胞真皮基质；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺：将上述含碘脱细胞真皮基质放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经γ射线辐照消毒灭菌，即为成品。
实施例5
一种制备脱细胞真皮基质敷料的方法，该产品由猪皮、牛皮或羊皮制备而成，包括以下步骤：
a、制备断层皮片工艺：用取皮机将动物皮肤制成厚度为2.0mm的断层皮片，用打孔器将断层皮片制成圆孔状的断层皮片；
b、病毒灭活工艺：将断层皮片用质量浓度2.0%的过氧乙酸和质量浓度5.0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行灭活60分钟，皮片与病毒灭活溶液的质量比为1: 7；
c、脱脂工艺：采用质量浓度4.0%纯碱、质量浓度4.0%烧碱和质量浓度1.0%脂肪醇聚氧乙烯醚组成的混合脱脂剂进行脱脂60分钟，皮片与混合脱脂剂的质量比为1: 7；
d、脱细胞工艺：采用质量浓度0.5%胰酶、质量浓度0.3%激活剂硫酸铵、质量浓度0.5%脱脂剂平平加组成的脱细胞液进行脱细胞60分钟，皮片与脱细胞液的质量比为1: 7；
e、含碘脱细胞真皮基质工艺：将脱细胞真皮基质浸泡于0.5%聚维酮碘溶液60分钟，制成含碘脱细胞真皮基质；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺：将上述含碘脱细胞真皮基质放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经γ射线辐照消毒灭菌，即为成品。
实施例6
一种制备脱细胞真皮基质敷料的方法，该产品由猪皮、牛皮或羊皮制备而成，包括以下步骤：
a、制备断层皮片工艺：用取皮机将动物皮肤制成厚度为2.0mm的断层皮片，用打孔器将断层皮片制成圆孔状的断层皮片；
b、病毒灭活工艺：将断层皮片用质量浓度2.0%的过氧乙酸和质量浓度5.0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行灭活60分钟，皮片与病毒灭活溶液的质量比为1: 7；
c、脱脂工艺：采用质量浓度4.0%纯碱、质量浓度4.0%烧碱和质量浓度1.0%脂肪醇聚氧乙烯醚组成的混合脱脂剂进行脱脂60分钟，皮片与混合脱脂剂的质量比为1: 7；
d、脱细胞工艺：采用质量浓度0.5%胰酶、质量浓度0.3%激活剂硫酸铵、质量浓度0.5%脱脂剂十二烷基硫酸钠组成的脱细胞液进行脱细胞60分钟，皮片与脱细胞液的质量比为1: 7；
e、含碘脱细胞真皮基质工艺：将脱细胞真皮基质浸泡于0.5%聚维酮碘溶液60分钟，制成含碘脱细胞真皮基质；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺：将上述含碘脱细胞真皮基质放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经γ射线辐照消毒灭菌，即为成品。
c步骤脱脂工艺中的表面活性剂还可以为曲拉酮。
本发明的有益效果：（1）b步骤采用过氧乙酸和氯化钠溶液组成的病毒灭活溶液进行灭活，既达到了病毒灭活的效果，又避免了过氧乙酸溶液灭活病毒而产生的断层皮片肿胀的问题；（2）c步骤中由纯碱、烧碱、表面活性剂组成的混合脱脂剂具有脱脂时间短、效率高、对皮片组织结构的保护作用强的优点；（3）d步骤中采用酶、激活剂和脱脂剂组成的脱细胞液进行脱细胞工艺，具有脱细胞彻底、时间短、效率高，对真皮细胞外基质天然结构损害轻的优点；（4）e步骤将脱细胞真皮基质制备成含碘的脱细胞真皮基质，具有抗菌功能的优点。
该脱细胞真皮基质敷料供医疗机构用于因烧伤、外伤、手术、感染等原因引起的各种创面的覆盖治疗。

Claims (1)

1.一种制备脱细胞真皮基质敷料的方法，其特征在于,该产品由猪皮、牛皮或羊皮制备而成，包括以下步骤：
a、制备断层皮片工艺：用取皮机将动物皮肤制成厚度为0.1-2.0mm的断层皮片，用打孔器将断层皮片制成不同形状的断层皮片；
b、病毒灭活工艺：将断层皮片用质量浓度0.1%-2.0%的过氧乙酸和质量浓度1.0%-5.0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行灭活30-60分钟，皮片与病毒灭活溶液的质量比为1: 4-7；
c、脱脂工艺：采用质量浓度1.0%-4.0%纯碱、质量浓度1.0%-4.0%烧碱和质量浓度0.1%-1.0%表面活性剂组成的混合脱脂剂进行脱脂30-60分钟，所述表面活性剂为平平加、十二烷基氨基丙酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚、曲拉酮中的一种，皮片与混合脱脂剂的质量比为1: 4-7；
d、脱细胞工艺：采用质量浓度0.1%-0.5%胰酶、质量浓度0.1%-0.3%激活剂、质量浓度0.2%-0.5%脱脂剂组成的脱细胞液进行脱细胞30-60分钟，所述激活剂为质量浓度0.1%-0.3%硫酸铵，所述脱脂剂为质量浓度0.2%-0.5%平平加，质量浓度0.2%-0.5%十二烷基硫酸钠中的一种，皮片与脱细胞液的质量比为1: 4-7；
e、含碘脱细胞真皮基质工艺：将脱细胞真皮基质浸泡于0.1%-0.5%聚维酮碘溶液30-60分钟，制成含碘脱细胞真皮基质；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺：将上述含碘脱细胞真皮基质放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经γ射线辐照消毒灭菌，即为成品。
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