CN102526439A

CN102526439A - 一种中华独尾草根提取物及其制备方法

Info

Publication number: CN102526439A
Application number: CN2012100547014A
Authority: CN
Inventors: 刘学波; 肖海芳
Original assignee: Northwest A&F University
Current assignee: Northwest A&F University
Priority date: 2012-03-05
Filing date: 2012-03-05
Publication date: 2012-07-04

Abstract

一种中华独尾草根提取物，包括酚类及黄酮类化合物，其中酚类含量为18.25～23.26mg/g、黄酮类化合物含量为16.24～20.15mg/g。一种中华独尾草根提取物本制备方法为中华独尾草根烘干、粉碎→乙醇提取→离心取上清液→减压浓缩→乙醇沉淀多糖→离心取上清液→减压浓缩→冷冻干燥，即得提取物。本发明提供了一种***科学的中华独尾草根提取物的制备方法，所得中华独尾草根提取物具有抗氧化和抗肿瘤活性，拓宽了中华独尾草的应用范围及产品类型，提高其附加值，增加收入，具有十分重要的意义和潜在的市场前景。

Description

一种中华独尾草根提取物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种植物根茎提取物及其制备方法，具体涉及一种具有抗氧化、抗肿瘤活性的中华独尾草根提取物及其制备方法。

背景技术

中华独尾草（ Eremurus chinensis Fedtsch.）属百合科独尾草属多年生草本植物，又名石参，石蒜苔、崖参，为中国特有品种，主要分布在西部地区，据调查，其在陕西的分布仅见于略阳县境内西淮坝乡的西淮坝村、张家山等几个狭窄地带，目前野生中华独尾草已非常少见。其根肉质，柔软，黄色或深褐色，为其食用部分，干制加工产品呈金黄色，味甘甜，气味甘香，性温和，具有悠久的民间食用历史，古代曾作贡品进献帝王。《本草纲目》记载中华独尾草根：温补肾阳、滋阴、清肝去湿，对失眠、多梦有一定疗效。研究表明，中华独尾草含有丰富的蛋白质纤维素及微量元素，蛋白质几乎接近于大米中的含量，并含有较多的多糖、黄酮等活性物质。目前，中华独尾草根主要用于鲜食及简单加工，对其进行的深入研究较少。中华独尾草属于中国特有资源，对其根中活性物质进行提取，并深入研究其功能活性，可拓宽中华独尾草的应用范围及产品类型，提高其附加值，增加收入，具有十分重要的意义和潜在的市场前景。

发明内容

本发明的目的在于提供一种中华独尾草根提取物及其制备方法，其解决了背景技术中对中华独尾草根深入研究匮乏的技术问题。

本发明的技术解决方案是：

一种中华独尾草根提取物，其特殊之处在于：该提取物包括酚类及黄酮类化合物，其中酚类含量为18.25～23.26 mg/g 、黄酮类化合物含量为16.24～20.15mg/g。

上述提取物中酚类含量为19.46～21.52 mg/g 、黄酮类化合物含量为17.56～19.22mg/g。

上述提取物中酚类含量为20.52mg/g 、黄酮类化合物含量为18.13mg/g。

上述提取物中酚类为大黄酚及其他酚类。

一种上述中华独尾草根提取物的制备方法，其特殊之处在于，该方法包括：

1）取新鲜中华独尾草根，去除杂物，水洗清洁干净，在30～50℃烘干，再粉碎后过30～60目筛，得均匀的粉碎物；

2）将步骤1）所得粉碎物经体积百分比为60～80%乙醇按料液比1：5～1：20g/ml室温浸泡2～5h，然后超声辅助提取2～4次，每次1～3h，超声功率为50～200W，提取温度为35～50℃，将提取液在4000rpm条件下离心15min，取上清液；

3）将步骤2）所得上清液减压浓缩至原体积的1/5，浓缩条件为温度40～50℃，真空度为0.1～0.2mbar，然后加入2～4倍体积的无水乙醇沉淀多糖，搅拌均匀，4℃静置1～4h，在4000rpm条件下离心15min，取上清液；

4）将步骤3）所得上清液在40～50℃、0.1～0.2mbar条件下减压浓缩至无乙醇流出，得到乙醇提取膏状物；

5）将步骤4）所得乙醇提取膏状物在-45℃～-20℃、0.35～0.7mbar下真空冷冻干燥24～72h，即得浅褐色的中华独尾草根提取物。

上述步骤2）中粉碎物经体积百分比为75%乙醇按料液比1：8～1：15g/ml室温浸泡。

上述步骤2）中粉碎物经体积百分比为75%乙醇按料液比1：10g/ml室温浸泡。

上述步骤3）中加入3倍体积的无水乙醇沉淀多糖。

上述步骤1）中粉碎后过40～50目筛，得均匀的粉碎物。

上述步骤中超声辅助提取的超声功率为100W，提取温度为40℃。

本发明的优点在于：提供了一种***科学的中华独尾草根提取物的制备方法，所得中华独尾草根提取物具有抗氧化和抗肿瘤活性，拓宽了中华独尾草的应用范围及产品类型，提高其附加值，增加收入，具有十分重要的意义和潜在的市场前景。

附图说明

图1 中华独尾草根提取物对ABTS自由基的清除能力；

图2 中华独尾草根提取物对DPPH自由基的清除能力；

图3 中华独尾草根提取物金属螯合能力；

图4 中华独尾草根提取物铁还原能力；

图5中华独尾草根提取物对人肝癌HepG2细胞活力的影响。

具体实施方式

本发明的工艺流程可归纳为：

中华独尾草根烘干、粉碎→乙醇提取→离心取上清液→减压浓缩→乙醇沉淀多糖→离心取上清液→减压浓缩→冷冻干燥，即得提取物。

具体是：

1）取新鲜中华独尾草根，挑去杂物，水洗，30～50℃烘干，粉碎后过30～60目筛，得到均匀的粉碎物；

2）将步骤1）所得粉碎物经60～80%乙醇按料液比1：5～1：20（g/ml）室温浸泡2～5h，然后超声辅助提取2～4次，每次1～3h，超声功率为50～200W，提取温度为35～50℃，提取液4000rpm离心15min，取上清液；

3）将步骤2）所得上清液减压浓缩至原体积的1/5，浓缩条件为温度40～50℃，真空度为0.1～0.2mbar，然后加入2～4倍体积的无水乙醇沉淀多糖，搅拌，4℃静置1～4h，4000rpm离心15min离心取上清液；

5）将步骤4）所得乙醇提取膏状物在～45℃、0.35～0.7mbar下真空冷冻干燥24～72h，即得浅褐色的中华独尾草根提取物；

6）将步骤5）所得中华独尾草根提取物检测其抗氧化能力，当提取物浓度为2mg/ml时，对ABTS自由基的清除率达97.82%，参见图1；当提取物浓度为4mg/ml时，对DPPH自由基的清除率达84.21%，参见图2；当提取物浓度为1mg/ml时，其金属螯合能力为79.67%，参见图3；当提取物浓度为1mg/ml时，其铁还原力为1.13（593nm下吸光度），参见图4。

用DMEM1640培养基分别配制成0.01、0.1、0.5、1、2mg/ml的溶液，MTT法测定其对人肝癌HepG2细胞活力的影响。中华独尾草提取物可抑制人肝癌HepG2细胞的增殖并呈现剂量和时间依赖关系，当提取物浓度为2mg/ml，作用时间24h时，细胞活力仅为54.34%，参见图5。

7）经测定，该提取物中的酚类、黄酮类化合物的含量分别为20.52mg/g、18.13mg/g。LC～MS分析中华独尾草提取物中化学成分包括大黄酚及其他酚类、黄酮类化合物。

Claims

1.一种中华独尾草根提取物，其特征在于：该提取物包括酚类及黄酮类化合物，其中酚类含量为18.25～23.26 mg/g 、黄酮类化合物含量为16.24～20.15mg/g。

2.根据权利要求1所述中华独尾草根提取物，其特征在于：所述提取物中酚类含量为19.46～21.52 mg/g 、黄酮类化合物含量为17.56～19.22mg/g。

3.根据权利要求2所述中华独尾草根提取物，其特征在于：所述提取物中酚类含量为20.52mg/g 、黄酮类化合物含量为18.13mg/g。

4.根据权利要求3所述中华独尾草根提取物，其特征在于：所述提取物中酚类为大黄酚及其他酚类。

5.一种权利要求1所述中华独尾草根提取物的制备方法，其特征在于，该方法包括：

6.根据权利要求5所述中华独尾草根提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤2）中粉碎物经体积百分比为75%乙醇按料液比1：8～1：15g/ml室温浸泡。

7.根据权利要求6所述中华独尾草根提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤2）中粉碎物经体积百分比为75%乙醇按料液比1：10g/ml室温浸泡。

8.根据权利要求5所述中华独尾草根提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤3）中加入3倍体积的无水乙醇沉淀多糖。

9.根据权利要求5所述中华独尾草根提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤1）中粉碎后过40～50目筛，得均匀的粉碎物。

10.根据权利要求5所述中华独尾草根提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤中超声辅助提取的超声功率为100W，提取温度为40℃。