CN102524510B - 一种低氟南极磷虾蛋白基料的制备方法 - Google Patents

一种低氟南极磷虾蛋白基料的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开一种低氟南极磷虾蛋白基料的制备方法,步骤为:1.低温自溶:将鲜活南极磷虾匀浆,用紫外线照射处理后自溶。2.蛋白提取:向匀浆液中加水,搅拌浸提,离心分离,得上层液相和沉淀。3.稳定蛋白:将上层液冻存或干燥后冻存。4.蛋白制备:将冻存物恢复液态;通过调节pH值至4.8~5.8,或者80~100℃下加热10~30分钟后离心的方法,得产物沉淀,经喷雾干燥获得南极磷虾蛋白质基料。本发明操作简单,尤其适合捕捞船现场操作,能使蛋白质回收率达46%~51%,脂肪回收率达54%~60%。产品中蛋白质含量为70~78g/100g干基,脂肪含量为25~31g/100g干基,氟含量低于1.5μg/g干基。

Description

一种低氟南极磷虾蛋白基料的制备方法
技术领域
本发明涉及利用南极磷虾制备蛋白基料的方法。 
背景技术
南极磷虾(Euphausia superba)是地球上最大的单种生物资源之一,其现存量的估计值约为4~15亿吨,成熟虾年产量为3~5亿吨,年可捕获量可达1亿吨左右,形成巨大的潜在渔业资源。近年来,随着世界性传统渔业资源的逐渐衰竭,以及200海里专属经济区的提出,使南极水域中巨大的南极磷虾资源受到一些远洋渔业发达国家的关注。我国也已把南极磷虾资源列入今后远洋渔业发展的主要开发品种之一。 
南极磷虾中含有11.9%至15.4%蛋白(湿基),是现已查明的人类可利用的最大蛋白资源之一。南极磷虾被誉为人类的蛋白资源宝库,这是由于南极磷虾不但蛋白质含量高,且蛋白质的营养价值也高。世界卫生组织曾将南极磷虾、对虾、牛乳和牛肉的氨基酸综合营养价值比较评分,结果磷虾得100分,牛肉96分,牛乳91分,对虾71分。据分析,人体所必需的8种氨基酸,磷虾中均有,且合起来占蛋白质含量的40%以上。因此,南极磷虾可作为人类重要的优质动物蛋白资源而加以利用。 
南极洲地处遥远、南极磷虾捕捞后需长期运输、保藏。南极磷虾壳中含有高浓度的氟,在保藏过程中会向虾肉迁移,污染虾肉,影响虾肉蛋白产品的安全性。同时,南极磷虾中富含多不饱和脂肪酸,易腐败变质。因此,南极磷虾捕捞需迅速冷冻、超低温保存才能保证虾的原有品质,这大大提高了南极磷虾的运输保藏成本,成为制约南极磷虾资源开发利用的瓶颈。要解决南极磷虾运输、保藏困难的问题,最好的办法就是在捕捞后迅速将南极磷虾加工以制备蛋白,但目前尚缺乏南极磷虾蛋白的船上加工制备方法。 
发明内容
本发明旨在提供一种简易方法在南极磷虾捕捞后立即制成南极磷虾蛋白基料的方法,具有低氟特性,尤其适合捕捞船上操作,可以为南极磷虾的开发利用提供技术支持。 
为了达到上述目的,本发明公开了一种低氟南极磷虾蛋白基料的制备方法,其特征在于,依次包括如下步骤: 
Step1、低温自溶:将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆获得匀浆液,用功率20~40瓦、波长200~300纳米、距离0.5~1米的紫外线照射处理5~10分钟,之后将所述匀浆液置于0~4℃下自溶0.1~1小时。 
Step2、蛋白提取:向所述匀浆液中加入与1~4倍体积的水,混匀,在0~4℃条件下搅拌浸提5~15分钟,离心分离,得第一次上层液相和第一次沉淀。 
Step3、蛋白制备:将所述的第一次上层液相通过调节pH值至4.8~5.8,或者80~100℃下加热10~30分钟后离心的方法,得第二次上层液相和第二次沉淀,将所述第二次沉淀经喷雾干燥即获得南极磷虾蛋白质基料。 
优选方式下,在步骤Step2中,向匀浆液加水的同时,加入终浓度为0.01%~0.03%的氯化钙,以促进蛋白质溶解。此外,步骤Step2中在离心分离之前调节匀浆液的pH值至2~3.5。 
为了提高南极磷虾蛋白质基料的质量,针对第二次沉淀可进一步提纯后再进行喷雾干燥。具体说,在步骤Step3中,可向所述第二次沉淀中加入2~4倍体积的水,混匀,调节混合液pH值为4.8~5.8,离心分离得第三次上层液相和第三次沉淀,所述第三次沉淀经喷雾干燥后即得南极磷虾蛋白质基料。 
优选方式下,步骤Step3中,可在捕捞船上,将第一次上层液相冻存于-15至-25℃或经喷雾干燥后得干粉后冻存于-15至-25℃保存;而后运至操作间,再将所述冻存的第一次上层液相融化或者将所述冻存的干粉溶解于2~4倍体积的水中恢复为液态,作为上述步骤Step3中的第一次上层液相完成步骤Step3及后续步骤。 
为了提高南极磷虾蛋白质基料的产量,在步骤Step2中,向所述第一次沉淀加入2~4倍体积的0~4℃水,搅拌混合,在0~4℃条件下搅拌浸提5~15分钟,离心分离,得第四次上层液相和第四次沉淀;混合所述第一次上层液相和所述第四次上层液相作为步骤Step3中使用的第一次上层液相。 
上述步骤中,调节pH值可选用1~6M的HCl或NaOH。此外Step1中“沥干”目的是将鲜活南极磷虾附着的水清除,沥干后虾本身仍保持鲜虾状态。 
本发明整个制备过程均在0~4℃下完成,该温度为捕捞季节南极地区的平均环境温度,操作步骤均可在船上完成,其优势在于利用了鲜活南极磷虾自溶能力强的特点,增加结构蛋白的自身溶解,提高水溶性蛋白的得率。鲜活南极磷虾中氟主要集中于虾壳,尚未向虾肉迁移,此时以水提取,氟主要分布在沉淀中,对水溶性粗蛋白的污染较轻。另外,水溶性南极磷虾粗蛋白经喷雾干燥后运输,增加运输能力,节约运输成本。本发明具有以下优点: 
1、本发明涉及的操作过程简单,不需要复杂的设备,整个制备过程均在0~4℃下完成,该温度为捕捞季节南极地区的平均环境温度,适合在捕捞船上进行操作。 
2、本发明利用鲜活南极磷虾自溶能力强的特点,增加结构蛋白的自身溶解,提高水溶性蛋白的得率。 
3、本发明将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆进行操作,由于鲜活南极磷虾中氟主要集中于虾壳,尚未向虾肉迁移,此时以水提取,氟主要分布在沉淀中,大大减少了对水溶性粗蛋白的污染。 
4、本发明的方法涉及将水溶性南极磷虾粗蛋白冻干或喷雾干燥的步骤,增加了对南极磷虾粗蛋白的运输能力,节约运输成本。 
本发明的方法简便有效:能使南极磷虾的粗蛋白回收率为46%~51%,粗脂质回收率为54%~60%。制备的低氟南极磷虾蛋白质基料氟含量低于1.5ug/g;营养价值高,产品中蛋白质含量为70~78g/100g干基,脂肪含量为25~31g/100g干基,磷脂含量为400~440mg/g;用途广,适合工业化应用,本发明可以为南极磷虾的有效利用提供技术支持。 
此外,根据本发明方法的工艺参数,能够提高生产效率,同时产品纯度及质量较好,具有较高的经济效益。 
具体实施方式
发明公开了一种低氟南极磷虾蛋白基料的船上加工制备方法,依次包括如下步骤: 
1、低温自溶:将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆,用功率20~40瓦、波长200~300纳米、距离0.5~1米的紫外线照射处理5~10分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.1~1小时。此步骤利用了鲜活南极磷虾自溶能力强的特点,增加结构蛋白的自身溶解,提高水溶性蛋白的得率。 
2、蛋白提取:向低温自溶后的匀浆液中加入与1~4倍体积的0~4℃水,混匀,在0~4℃条件下搅拌浸提5~15分钟,离心分离,得第一次上层液相和第一次沉淀。由于鲜活南极磷虾中氟主要集中于虾壳,尚未向虾肉迁移,此时以水提取,氟主要分布在沉淀中,对水溶性粗蛋白的污染较轻。 
3、稳定蛋白:将步骤2中得到的第一次上层液相直接冻存或经喷雾干燥后得干粉后冻存。此步骤增加了运输能力,并节约运输成本。 
4、蛋白制备:将步骤3中得到的冻存液融化或者将所述冻存干粉溶解于2~4倍体积的水中,通过调节PH值至4.8~5.8,或者在80~100℃下加热10~30分钟后离心的方法,得到沉淀,经喷雾干燥即得南极磷虾蛋白质基料。 
上述步骤2中,向匀浆液加水的同时,加入终浓度为0.010%~0.030%的氯化钙。通过调节匀浆液的pH值至2~3.5,增加蛋白得率。 
上述步骤4中制备蛋白质的方法,根据步骤3的产物不同,具体来说有以下四种情况: 
方法1:将冻存的液相融化后,调节pH值为4.8~5.8,搅拌混匀后静置5~15分钟,离心分离得沉淀A;向沉淀A中加入2~4倍体积的水,搅拌混匀,调节混合液pH值为4.8~5.8,搅拌混匀后静置5~15分钟,离心分离得沉淀B;沉淀B经喷雾干燥后即得南极磷虾蛋白质基料。 
方法2:将冻存的液相融化后,80~100℃下加热10~30分钟,搅拌混匀后静置5~15分钟,离心分离得沉淀A;沉淀A经喷雾干燥后即得南极磷虾蛋白质基料。 
方法3:将冻存的干粉溶解于2~4倍体积的水,调节pH值为4.8~5.8,搅拌混匀后静置5~15分钟,离心分离得沉淀A;向沉淀A加入2~4倍体积的水,搅拌混匀,调节混合液pH值为4.8~5.8,搅拌混匀后静置5~15分钟,离心分离得沉淀B;沉淀B经喷雾干燥后即得南极磷虾蛋白质基料。 
方法4:将冻存的干粉溶解于2~4倍体积的水,80~100℃下加热10~30分钟,搅拌混匀后静置5~15分钟,离心分离得沉淀A;沉淀A经喷雾干燥后即得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例1:本发明以南极磷虾为原料,采用现代蛋白质的提取分离技术,制备了低氟南极磷虾蛋白质基料的船上加工制备工艺。捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与2~4倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率20~40瓦、波长200~300纳米、距离0.5~1米的紫外线照射处理5~10分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.1~1小时。向匀浆液中加入氯化钙使其终浓度为0.01%~0.03%,用1~6M盐酸或氢氧化钠调节匀浆液的pH值为2~3.5,在0~4℃条件下搅拌浸提5~15分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向沉淀A加2~4倍体积的0~4℃水,搅拌混合,向混合液中加入氯化钙使其终浓度为0.01%至 0.03%,用1M盐酸或氢氧化钠调节混合液的pH值为2~3.5,在0~4℃条件下搅拌浸提5~15分钟,离心分离得液相B和沉淀B;合并液相A和液相B,得到液相C;向液相C加入1M盐酸或氢氧化钠调节pH值为4.8~5.8,搅拌混匀后在0~4℃条件下静置5~15分钟,离心分离得沉淀C;向沉淀C加入2~4倍体积的0~4℃的水,搅拌混匀,向混合液中加入1M盐酸或氢氧化钠调节pH值为4.8~5.8,搅拌混匀后0~4℃条件下静置5~15分钟,离心分离得沉淀D;沉淀D经喷雾干燥后即得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例2:捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与2倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率40瓦、波长200纳米、距离1米的紫外线照射处理10分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶1小时。向匀浆液中加入氯化钙使其终浓度为0.03%,用6M盐酸或氢氧化钠调节匀浆液的pH值为3.5,在0~4℃条件下搅拌浸提15分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向沉淀A加4倍体积的0~4℃水,搅拌混合,向混合液中加入氯化钙使其终浓度为0.03%,用6M盐酸或氢氧化钠调节混合液的pH值为3.5,在0~4℃条件下搅拌浸提15分钟,离心分离得液相B和沉淀B;合并液相A和液相B,得到液相C;向液相C加入6M盐酸或氢氧化钠调节pH值为5.8,搅拌混匀后在0~4℃条件下静置15分钟,离心分离得沉淀C;向沉淀C加入4倍体积的0~4℃的水,搅拌混匀,向混合液中加入6M盐酸或氢氧化钠调节pH值为5.8,搅拌混匀后0~4℃条件下静置15分钟,离心分离得沉淀D;沉淀D经喷雾干燥后即得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例3:捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与2~4倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率30瓦、波长250纳米、距离0.8米的紫外线照射处理7分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.5小时。向匀浆液中加入氯化钙使其终浓度为0.02%,用2M盐酸或氢氧化钠调节匀浆液的pH值为3,在0~4℃条件下搅拌浸提10分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向沉淀A加3倍体积的0~4℃水,搅拌混合,向混合液中加入氯化钙使其终浓度为0.02%,用2M盐酸或氢氧化钠调节混合液的pH值为3,在0~4℃条件下搅拌浸提10分钟,离心分离得液相B和沉淀B;合并液相A和液相B,得到液相C;向液相C加入2M盐酸或氢氧化钠调节pH值为5,搅拌混匀后在0~4℃条件下静置10分钟,离心分离得沉淀C;向沉淀C加入3倍体积的0~4℃的水,搅拌混匀,向混合液中 加入2M盐酸或氢氧化钠调节pH值为5,搅拌混匀后0~4℃条件下静置10分钟,离心分离得沉淀D;沉淀D经喷雾干燥后即得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例4:捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与2倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率20瓦、波长210纳米、距离0.5米的紫外线照射处理5分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.2小时。向匀浆液中加入氯化钙使其终浓度为0.01%,用1M盐酸或氢氧化钠调节匀浆液的pH值为2,在0~4℃条件下搅拌浸提5分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向液相A加入1M盐酸或氢氧化钠调节pH值为4.8,搅拌混匀后在0~4℃条件下静置5分钟,离心分离得沉淀B;向沉淀B加入2倍体积的0~4℃的水,搅拌混匀,向混合液中加入1M盐酸或氢氧化钠调节pH值为4.8,搅拌混匀后0~4℃条件下静置5分钟,离心分离得沉淀C;沉淀C经喷雾干燥后即得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例5:捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与4倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率40瓦、波长280纳米、距离1米的紫外线照射处理5分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.1小时。向匀浆液中加入氯化钙使其终浓度为0.030%,用4M盐酸或氢氧化钠调节匀浆液的pH值为3.5,在0~4℃条件下搅拌浸提15分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向液相A加入1M盐酸或氢氧化钠调节pH值为5.8,搅拌混匀后在0~4℃条件下静置15分钟,离心分离得沉淀B;向沉淀B加入4倍体积的0~4℃的水,搅拌混匀,向混合液中加入1M盐酸或氢氧化钠调节pH值为5.2,搅拌混匀后0~4℃条件下静置15分钟,离心分离得沉淀C;沉淀C经喷雾干燥后即得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例6:捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与3倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率30瓦、波长300纳米、距离0.8米的紫外线照射处理6分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.4小时。向匀浆液中加入氯化钙使其终浓度为0.020%,用2M盐酸或氢氧化钠调节匀浆液的pH值为3,在0~4℃条件下搅拌浸提10分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向液相A加入1M盐酸或氢氧化钠调节pH值为5,搅拌混匀后在0~4℃条件下静置10分钟,离心分离得沉淀B;向沉淀B加入3倍体积的0~4℃的水,搅拌混匀,向混合液中加入1M盐酸或氢氧化钠调节pH值为5,搅拌混匀后0~4℃条件下静置10分钟,离心分离得沉淀C;沉淀C经喷雾干燥后即得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例7:捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与2倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率25瓦、波长220纳米、距离0.6米的紫外线照射处理8分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.7小时。在0~4℃条件下搅拌浸提6分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向沉淀A加3倍体积的0~4℃水,搅拌混合,在0~4℃条件下搅拌浸提8分钟,离心分离得液相B和沉淀B;合并液相A和液相B,得到液相C;将液相C冻存于-15℃保存;融化冻存液,调节PH值至4.8后离心,得到沉淀,将沉淀喷雾干燥即得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例8:捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与4倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率35瓦、波长290纳米、距离0.7米的紫外线照射处理8分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.3小时。向匀浆液中加入氯化钙使其终浓度为0.015%,用1M盐酸或氢氧化钠调节匀浆液的pH值为2.4,在0~4℃条件下搅拌浸提11分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向沉淀A加2倍体积的0~4℃水,搅拌混合,向混合液中加入氯化钙使其终浓度为0.015%,用1M盐酸或氢氧化钠调节混合液的pH值为2.5,在0~4℃条件下搅拌浸提11分钟,离心分离得液相B和沉淀B;合并液相A和液相B,得到液相C;将液相C冻存于-20℃保存;融化冻存液,调节PH值至5.2后离心,得到沉淀C,向沉淀C中加入2倍体积的水,搅拌混匀,调节混合液pH值为5.2,离心分离得液相D和沉淀D,沉淀D经喷雾干燥后即得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例9:捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与3倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率35瓦、波长255纳米、距离0.8米的紫外线照射处理6分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.4小时。向匀浆液中加入氯化钙使其终浓度为0.025%,用2M盐酸或氢氧化钠调节匀浆液的pH值为3,在0~4℃条件下搅拌浸提12分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向沉淀A加2~4倍体积的0~4℃水,搅拌混合,向混合液中加入氯化钙使其终浓度为0.025%,用1M盐酸或氢氧化钠调节混合液的pH值为2,在0~4℃条件下搅拌浸提12分钟,离心分离得液相B和沉淀B;合并液相A和液相B,得到液相C;将液相C冻存于-25℃保存;融化冻存液,调节PH值至5后离心,得到沉淀,经喷雾干燥即得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例10:捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与2.5倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率28瓦、波长230纳米、距离0.9米的紫外线照射处理8分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.5小时。向匀浆液中加入氯化钙使其终浓度为0.010%,用3M盐酸或氢氧化钠调节匀浆液的pH值为2.5,在0~4℃条件下搅拌浸提5分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向沉淀A加3倍体积的0~4℃水,搅拌混合,向混合液中加入氯化钙使其终浓度为0.010%,用1M盐酸或氢氧化钠调节混合液的pH值为2.5,在0~4℃条件下搅拌浸提5分钟,离心分离得液相B和沉淀B;合并液相A和液相B,得到液相C;将液相C冻存于-22℃保存;融化冻存液,调节PH值至5.5后离心,得到沉淀C,向沉淀C中加入4倍体积的水,搅拌混匀,调节混合液pH值为5.5,离心分离得液相D和沉淀D,沉淀D经喷雾干燥后即得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例11:捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与3.5倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率36瓦、波长205纳米、距离1米的紫外线照射处理9分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.6小时。在0~4℃条件下搅拌浸提15分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向沉淀A加2倍体积的0~4℃水,搅拌混合,在0~4℃条件下搅拌浸提15分钟,离心分离得液相B和沉淀B;合并液相A和液相B,得到液相C;得到液相C;将液相C经喷雾干燥后得干粉后冻存于-21℃保存;将所述冻存干粉溶解于2倍体积的水中,调节PH值至4.9后离心,得到沉淀,经喷雾干燥即得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例12:捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与2~4倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率30瓦、波长245纳米、距离0.8米的紫外线照射处理8分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.7小时。向匀浆液中加入氯化钙使其终浓度为0.030%,用4M盐酸或氢氧化钠调节匀浆液的pH值为3,在0~4℃条件下搅拌浸提15分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向沉淀A加4倍体积的0~4℃水,搅拌混合,向混合液中加入氯化钙使其终浓度为0.030%,用4M盐酸或氢氧化钠调节混合液的pH值为3,在0~4℃条件下搅拌浸提15分钟,离心分离得液相B和沉淀B;合并液相A和液相B,得到液相C;将液相C经喷雾干燥后得干粉后冻存于-18℃保存;将所述冻存干粉溶解于4倍体积的水中,调节PH值至5.1后离心,得到沉淀C,向沉淀C中加入4倍体积的水,搅拌混匀,调节混合液pH值为5.1,离心分离得液相D和沉淀D,沉淀D经喷雾干燥后即 得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例13:捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与3倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率30瓦、波长265纳米、距离0.8米的紫外线照射处理6分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.8小时。向匀浆液中加入氯化钙使其终浓度为0.030%,用5M盐酸或氢氧化钠调节匀浆液的pH值为3,在0~4℃条件下搅拌浸提15分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向沉淀A加2倍体积的0~4℃水,搅拌混合,向混合液中加入氯化钙使其终浓度为0.010%,用5M盐酸或氢氧化钠调节混合液的pH值为3,在0~4℃条件下搅拌浸提15分钟,离心分离得液相B和沉淀B;合并液相A和液相B,得到液相C;将液相C经喷雾干燥后得干粉后冻存于-24℃保存;将所述冻存干粉溶解于2倍体积的水中,调节PH值至5.0后离心,得到沉淀,将沉淀喷雾干燥即得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例14:捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与4倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率40瓦、波长260纳米、距离0.5米的紫外线照射处理9分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.9小时。向匀浆液中加入氯化钙使其终浓度为0.025%,用1M盐酸或氢氧化钠调节匀浆液的pH值为2.5,在0~4℃条件下搅拌浸提15分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向沉淀A加4倍体积的0~4℃水,搅拌混合,向混合液中加入氯化钙使其终浓度为0.010%,用1M盐酸或氢氧化钠调节混合液的pH值为2,在0~4℃条件下搅拌浸提15分钟,离心分离得液相B和沉淀B;合并液相A和液相B,得到液相C;将液相C经喷雾干燥后得干粉后冻存于-16℃保存;将所述冻存干粉溶解于2~4倍体积的水中,调节PH值至5.8后离心,得到沉淀C,向沉淀C中加入2倍体积的水,搅拌混匀,调节混合液pH值为5.0,离心分离得液相D和沉淀D,沉淀D经喷雾干燥后即得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例15:捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与2倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率30瓦、波长275纳米、距离0.5米的紫外线照射处理9分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.2小时。在0~4℃条件下搅拌浸提10分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向沉淀A加2倍体积的0~4℃水,搅拌混合,在0~4℃条件下搅拌浸提5分钟,离心分离得液相B和沉淀B;合并 液相A和液相B,得到液相C;将液相C冻存于-20℃保存;融化冻存液,100℃下加热10分钟后离心,得到沉淀,经喷雾干燥即得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例16:捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与3倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率30瓦、波长285纳米、距离0.8米的紫外线照射处理9分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.3小时。向匀浆液中加入氯化钙使其终浓度为0.010%,用1M盐酸或氢氧化钠调节匀浆液的pH值为2.5,在0~4℃条件下搅拌浸提10分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向沉淀A加2倍体积的0~4℃水,搅拌混合,向混合液中加入氯化钙使其终浓度为0.010%,用1M盐酸或氢氧化钠调节混合液的pH值为2.5,在0~4℃条件下搅拌浸提10分钟,离心分离得液相B和沉淀B;合并液相A和液相B,得到液相C;将液相C冻存于-19℃保存;融化冻存液,80℃下加热30分钟后离心,得到沉淀,经喷雾干燥即得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例17:捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与2倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率20瓦、波长295纳米、距离0.5米的紫外线照射处理8分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.6小时。在0~4℃条件下搅拌浸提15分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向沉淀A加2倍体积的0~4℃水,搅拌混合,在0~4℃条件下搅拌浸提10分钟,离心分离得液相B和沉淀B;合并液相A和液相B,得到液相C;得到液相C;将液相C经喷雾干燥后得干粉后冻存于-21℃保存;将所述冻存干粉溶解于2倍体积的水中,90℃下加热20分钟后离心,得到沉淀,经喷雾干燥即得南极磷虾蛋白质基料。 
实施例18:捕捞后的鲜活南极磷虾沥干水分,与4倍体积的0~4℃水混合后匀浆,用功率40瓦、波长225纳米、距离0.5的紫外线照射处理8分钟,之后将匀浆液置于捕捞地区环境温度下自溶0.2小时。向匀浆液中加入氯化钙使其终浓度为0.010%,用1M盐酸或氢氧化钠调节匀浆液的pH值为3.5,在0~4℃条件下搅拌浸提5分钟,离心分离得液相A和沉淀A;向沉淀A加2倍体积的0~4℃水,搅拌混合,向混合液中加入氯化钙使其终浓度为0.010%,用1M盐酸或氢氧化钠调节混合液的pH值为3.5,在0~4℃条件下搅拌浸提15分钟,离心分离得液相B和沉淀B;合并液相A和液相B,得到液相C;将液相C经喷雾干 燥后得干粉后冻存于-23℃保存;将所述冻存干粉溶解于2倍体积的水中,85℃下加热30分钟后离心,得到沉淀,经喷雾干燥即得南极磷虾蛋白质基料。 
以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。 

Claims (7)

1.一种低氟南极磷虾蛋白基料的制备方法,其特征在于,依次包括如下步骤:
S1、低温自溶:将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后匀浆获得匀浆液,用功率20~40瓦、波长200~300纳米、距离0.5~1米的紫外线照射处理5~10分钟,之后将所述匀浆液置于0~4℃下自溶0.1~1小时;
S2、蛋白提取:向所述匀浆液中加入1~4倍体积的水,混匀,在0~4℃条件下搅拌浸提5~15分钟,离心分离,得第一次上层液相和第一次沉淀;
S3、蛋白制备:将所述的第一次上层液相通过调节pH值至4.8~5.8或者80~100℃下加热10~30分钟,而后离心的方法得第二次上层液相和第二次沉淀,将所述第二次沉淀经喷雾干燥即获得南极磷虾蛋白质基料。
2.如权利要求1所述的低氟南极磷虾蛋白基料的制备方法,其特征在于:在步骤S2中,向匀浆液加水的同时,加入终浓度为0.01%~0.03%的氯化钙。
3.如权利要求2所述的低氟南极磷虾蛋白基料的制备方法,其特征在于:在步骤S2中在离心分离之前调节所述匀浆液的pH值至2~3.5。
4.如权利要求3所述的低氟南极磷虾蛋白基料的制备方法,其特征在于:在步骤S3中,将所述第二次沉淀经喷雾干燥即获得南极磷虾蛋白质基料替代为向所述第二次沉淀中加入2~4倍体积的水,混匀,调节混合液pH值为4.8~5.8,离心分离得第三次上层液相和第三次沉淀,所述第三次沉淀经喷雾干燥后即得南极磷虾蛋白质基料。
5.如权利要求4所述的低氟南极磷虾蛋白基料的制备方法,其特征在于:在步骤S3中,将所述第一次上层液相冻存于-15至-25℃或经喷雾干燥后得干粉后冻存于-15至-25℃保存;而后运至操作间后,将所述冻存的第一次上层液相融化或者将所述冻存的干粉溶解于2~4倍体积的水中恢复为液态,完成步骤S3及后续步骤。
6.如权利要求1~5任一所述的低氟南极磷虾蛋白基料的制备方法,其特征在于:步骤S2中向所述第一次沉淀加入2~4倍体积的0~4℃水,搅拌混合,在0~4℃条件下搅拌浸提5~15分钟,离心分离,得第四次上层液相和第四次沉淀;混合所述第一次上层液相和所述第四次上层液相,替代步骤S3中使用的第一次上层液相。
7.如权利要求1~5任一所述的低氟南极磷虾蛋白基料的制备方法,其特征在于:调节pH值选用1~6M的HCl或NaOH。
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