CN102492765A - 琼脂培养基及其制作方法 - Google Patents

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王立超
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Abstract

本发明公开了一种琼脂培养基，其组成成分及质量数为：每1000ml营养液中：蛋白胨17-23g、乳糖7-13g、氯化钠4-6g、胆盐4-6g、中性红0.04-0.06g、琼脂13-17g。其制作方法，1)将蛋白胨20g、乳糖10g、氯化钠5g、胆盐5g、琼脂15g溶解在1000ml营养液中；2)加热；3)调节pH至7.2±0.2，加入中性红0.05g；4)加热至115℃，并保持20min，冷却至50℃左右，倾注到一次性无菌塑料平皿中；5)冷藏。

Description

琼脂培养基及其制作方法
技术领域
本发明涉及一种琼脂培养技术领域，尤其是一种分离和鉴别肠道细菌的琼脂培养基及其制作方法。
背景技术
目前市场上同类产品的作用主要在于鉴别肠道细菌，这个只是该产品其中一个指标之一，而该产品的另外一个重要指标为非发酵细菌能在该培养基上生长，这个是市场上同类产品做不到的或者是做到效果不明显和显色不容易鉴别的，该指标也是检验该产品的唯一标准。
发明内容
本发明的目的就是提供一种琼脂培养基及其制作方法，提高了对非发酵细菌漏检的现象。
为了达到上述设计目的，本发明采用的技术方案如下：
一种琼脂培养基，其组成成分及质量数为：每1000ml营养液中：蛋白胨17-23g、乳糖7-13g、氯化钠4-6g、胆盐4-6g、中性红0.04-0.06g、琼脂13-17g。
优选地，其组成成分及质量数为：每1000ml营养液中：蛋白胨20g、乳糖10g、氯化钠5g、胆盐5g、中性红0.05g、琼脂15g。
优选地，所述营养液的主要成分为氨基酸、维生素、生长因子。
一种琼脂培养基的制作方法，包括以下步骤：
1)将蛋白胨20g、乳糖10g、氯化钠5g、胆盐5g、琼脂15g溶解在1000ml营养液中；
2)混匀后，加热煮沸充分溶解；
3)调节pH至7.2±0.2，加入中性红0.05g；
4)加热至115℃，并保持20min，冷却至50℃左右，倾注到一次性无菌塑料平皿中；
5)无菌检验后在2℃-8℃环境中冷藏备用。
优选地，所述调整PH至7.2±0.2的方法是，用1N-10N氢氧化钠或1N-10N盐酸溶液调节pH至7.2±0.2。
其原理为：蛋白胨在培养基中提供氮源和其他的营养物质，乳糖作为可发酵的碳源，乳糖被发酵利用后，局部的PH值降低使得菌落呈红色，同时形成胆酸盐沉淀，胆盐抑制革兰氏阳性菌生长。
本发明所述的琼脂培养基及其制作方法的有益效果是：在原来的基础上添加非发酵细菌(鲍曼不动杆菌)的所需的特殊营养物质，通过营养物质对细菌的供应，结果表明不单单是非发酵细菌在该产品上生长情况极好，而其他肠道细菌在该产品上生长也极好，菌落大小和判读结果的时间甚至超过了国内外同类产品，该产品的改进大大提高了对非发酵细菌漏检的现象。
菌落大小优胜于国内外同类产品；标本判读结果的时间比同类产品更短；非发酵细菌的生长改善了市场上同类培养不出或者是培养不好的现象；非发酵细菌的鉴别通过显色更加容易判断。
具体实施方式
实施例1、
一种琼脂培养基，其组成成分及质量数为：每1000ml营养液中：蛋白胨17g、乳糖7g、氯化钠4g、胆盐6g、中性红0.06g、琼脂17g。
实施例2、
一种琼脂培养基，其组成成分及质量数为：每1000ml营养液中：蛋白胨23g、乳糖13g、氯化钠6g、胆盐4g、中性红0.04g、琼脂13g。
实施例3、
一种琼脂培养基，其组成成分及质量数为：每1000ml营养液中：蛋白胨20g、乳糖10g、氯化钠5g、胆盐5g、中性红0.05g、琼脂15g。
上述实施例中，所述营养液的主要成分为氨基酸、维生素、生长因子。
实施例4、
一种琼脂培养基的制作方法，包括以下步骤：
1)将蛋白胨17g、乳糖7g、氯化钠4g、胆盐6g、琼脂17g溶解在1000ml营养液中；
2)混匀后，加热煮沸充分溶解；
3)调节pH至7.2±0.2，加入中性红0.06g；
4)加热至115℃，并保持20min，冷却至50℃左右，倾注到一次性无菌塑料平皿中；
5)无菌检验后在2℃-8℃环境中冷藏备用。
实施例5、
一种琼脂培养基的制作方法，包括以下步骤：
1)将蛋白胨23g、乳糖13g、氯化钠6g、胆盐4g、琼脂13g溶解在1000ml营养液中；
2)混匀后，加热煮沸充分溶解；
3)调节pH至7.2±0.2，加入中性红0.04g；
4)加热至115℃，并保持20min，冷却至50℃左右，倾注到一次性无菌塑料平皿中；
5)无菌检验后在2℃-8℃环境中冷藏备用。
实施例6、
一种琼脂培养基的制作方法，包括以下步骤：
1)将蛋白胨20g、乳糖10g、氯化钠5g、胆盐5g、琼脂15g溶解在1000ml营养液中；
2)混匀后，加热煮沸充分溶解；
3)调节pH至7.2±0.2，加入中性红0.05g；
4)加热至115℃，并保持20min，冷却至50℃左右，倾注到一次性无菌塑料平皿中；
5)无菌检验后在2℃-8℃环境中冷藏备用。
上述实施例中，用1N-10N氢氧化钠或1N-10N盐酸溶液调节pH至7.2±0.2。
本具体实施方式只本发明的优选实施例，并不能对本发明进行限定，具体各项权利保护范围由权利要求书限定。

Claims (5)

1.一种琼脂培养基，其特征在于：其组成成分及质量数为：每1000ml营养液中：蛋白胨17-23g、乳糖7-13g、氯化钠4-6g、胆盐4-6g、中性红0.04-0.06g、琼脂13-17g。
2.根据权利要求1所述的琼脂培养基，其特征在于：其组成成分及质量数为：每1000ml营养液中：蛋白胨20g、乳糖10g、氯化钠5g、胆盐5g、中性红0.05g、琼脂15g。
3.根据权利要求1或2所述的琼脂培养基，其特征在于：所述营养液的主要成分为氨基酸、维生素、生长因子。
4.一种琼脂培养基的制作方法，其特征在于：包括以下步骤：
1)将蛋白胨20g、乳糖10g、氯化钠5g、胆盐5g、琼脂15g溶解在1000ml营养液中；
2)混匀后，加热煮沸充分溶解；
3)调节pH至7.2±0.2，加入中性红0.05g；
4)加热至115℃，并保持20min，冷却至50左右，倾注到一次性无菌塑料平皿中；
5)无菌检验后在2℃-8℃环境中冷藏备用。
5.根据权利要求4所述的琼脂培养基的制作方法，其特征在于：所述调整PH至7.2±0.2的方法是，用1N-10N氢氧化钠或1N-10N盐酸溶液调节pH至7.2±0.2。
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1557943A (zh) * 2004-01-29 2004-12-29 胡常英 细菌培养基及其制备方法
CN101724591A (zh) * 2009-11-27 2010-06-09 南京农业大学 植物乳杆菌菌株及其应用

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Non-Patent Citations (1)

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Title
刘大潜等: "《中药制剂检验分析》", 31 December 1995, 中国医药科技出版社 *

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