CN102416087A - 用于治疗***的中药组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
用于治疗***的中药组合物及其制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种用于治疗***的中药组合物及其制备方法和应用,其中中药组合物由黄柏350~500g,椿皮350~500g,虎杖350~500g,白芷350~500g,香附350~500g,白头翁550~650g,蒲公英550~650g,鸡冠花550~650g,甘草180~250g组成。该中药组合物能针对治疗湿热蕴结所致的慢性***起效,临床试验结果总有效率95.92%。
Description
技术领域
本发明涉及***治疗领域,特别地,涉及一种用于治疗***的中药组合物。此外,本发明还涉及一种包括上述中药组合物的制备方法和应用。
背景技术
慢性***是已婚妇女的常见病、多发病。该病具有病程迁延,病情顽固,治愈度低,复发率高等特点。西医目前尚无效果显著的疗法。目前市场上的中成药,均未明确针对湿热所致的慢性***功效。
发明内容
本发明目的在于提供一种用于治疗***的中药组合物及其制备方法和应用,以解决缺乏用于治疗湿热所致的慢性***的中药组合物的技术问题。
为实现上述目的,根据本发明的一个方面,提供了一种用于治疗***的中药组合物,由黄柏350~500g,椿皮350~500g,虎杖350~500g,白芷350~500g,香附350~500g,白头翁550~650g,蒲公英550~650g,鸡冠花550~650g,甘草180~250g组成。
进一步地,由黄柏450g,椿皮450g,虎杖450g,白芷450g,香附450g,白头翁600g,蒲公英600g,鸡冠花600g,甘草200g组成。
根据本发明的另一方面,还提供了一种上述组合物的制备方法,包括以下步骤:
1)取黄柏,加7倍量70%乙醇回流提取75分钟,之后分离药渣和第一提取液,再次向药渣中加入5倍量70%乙醇回流提取60分钟,过滤得到第二提取液,合并第一提取液和第二提取液,过滤,制得醇提浸膏备用;
2)虎杖粉碎成粉状后与椿皮、白芷、香附、白头翁、蒲公英、鸡冠花、甘草一起加水浸泡30分钟,第一次加8倍量水煎煮75分钟,第二次加6倍量水煎煮60分钟,合并提取液,滤过、滤液浓缩至相对密度为1.00~1.05,离心,离心液浓缩至相对密度1.05~1.20;
3)加入醇提浸膏,搅匀,调节相对密度1~1.2,喷雾干燥,干燥粉加糊精,用80%乙醇制粒,干燥,整粒,分装即得药物组合物。
进一步地,喷雾干燥步骤中进风口的温度为280℃~290℃。
本发明具有以下有益效果:
本发明提供的中药组合物能针对治疗湿热蕴结所致的慢性***起效,临床试验结果总有效率95.92%。
除了上面所描述的目的、特征和优点之外,本发明还有其它的目的、特征和优点。下面将参照实施例,对本发明作进一步详细的说明。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明的实施例进行详细说明,但是本发明可以由权利要求限定和覆盖的多种不同方式实施。
本发明提供的中药组合物具有清热利湿、理气止痛、止带止血之功用,能治疗慢性***属湿热蕴结证的安全、有效、疗效稳定、无毒副作用、服用方便的中药制剂。药效学显示该制剂具有抑菌、抗炎、镇痛、止血、增强免疫等作用。无明显毒副作用,
本发明提供的用于治疗***的中药组合物由黄柏350~500g,椿皮350~500g,虎杖350~500g,白芷350~500g,香附350~500g,白头翁550~650g,蒲公英550~650g,鸡冠花550~650g,甘草180~250g组成。
本组方中黄柏、椿皮具有清热燥湿的作用,对湿热蕴结型慢性***具有主要治疗作用。虎杖、白头翁和蒲公英具有清热解毒的作用能起到辅助并加强疗效的作用。鸡冠花、白芷能治疗由发炎引起的出血和发炎的症状,具有止血止带、消肿止痛的作用。香附则能疏肝理气,开郁散结,调经止痛,还能引诸药入肝经,提高药物的疗效,使得药物疗效得到发挥。整个药物组合物各组分的选择严谨,恰中湿热蕴结之病机,融清热利湿,理气止痛,止带止血,起到了祛邪而不伤正之功效。
按照上述重量称取各组分药物后,制成常用的中药剂型均能起到治疗效果。显然的,在上述组方的基础上仅需增加常见辅料,即可将其制成如液体剂型、浸膏、胶囊剂、片剂、分散片、咀嚼片等剂型。
由黄柏450g,椿皮450g,虎杖450g,白芷450g,香附450g,白头翁600g,蒲公英600g,鸡冠花600g,甘草200g组成。此为最优实施例。
上述药物按以下方法制得,具体该方法包括以下步骤:
1)取黄柏,加7倍量70%乙醇回流提取75分钟,之后分离药渣和第一提取液,再次向药渣中加入5倍量70%乙醇回流提取60分钟,过滤得到第二提取液,合并第一提取液和第二提取液,过滤,制得醇提浸膏备用;
2)虎杖粉碎为粉末后与椿皮、白芷、香附、白头翁、蒲公英、鸡冠花、甘草一起加水浸泡30分钟,第一次加8倍量水煎煮75分钟,第二次加6倍量水煎煮60分钟,合并提取液,滤过、滤液浓缩至相对密度为1.00~1.05,离心,离心液浓缩至相对密度1.05~1.20(60℃下测得);
3)加入醇提浸膏,搅匀,调节相对密度1~1.2,喷雾干燥,干燥粉加糊精,用80%乙醇制粒,干燥,整粒,分装即得。
由于黄柏的主要有效成份在水中的溶解度较差,因而采用传统的水提法很难将其完全提取出来。而这些有效成分在乙醇中有较好的溶解度。故将黄柏单独用乙醇提取得到醇提的浸膏。其它药材则用水提取。喷雾干燥时为防止中药液与高温气体的接触,因而将进入的热风温度限定为280~290℃。药物制备时间缩短,有效成分不易因高温而破坏。本浸膏粉具有较强的引湿性,如果用水制粒,所得颗粒较粘稠,无法获得具有独立形状的颗粒,因而采用乙醇制粒。
本发明的另一方面还限定了该组合物的剂量为5.45g/kg。按此计量使用疗效最优。
实施例
以下实施例中所用药物及其他试剂均为市售。
以下实施例中各药物均按以下方法制备,该方法包括以下步骤:
1)取黄柏,加70%乙醇回流提取两次,第1次加7倍量回流提取75分钟,第2次加5倍量回流提取60分钟,合并提取液,过滤,制得醇提浸膏备用;
2)虎杖粉碎成粉末后与椿皮、白芷、香附、白头翁、蒲公英、鸡冠花、甘草一起加水浸泡30分钟,第一次加8倍量水煎煮75分钟,第二次加6倍量水煎煮60分钟,合并提取液,滤过、滤液浓缩至相对密度为1.00~1.05,离心,离心液浓缩至相对密度1.05~1.20;
3)加入醇提浸膏,搅匀,调节相对密度1~1.2,喷雾干燥,此时进风口的温度为280℃~290℃,干燥粉加糊精,用80%乙醇制粒,干燥,整粒,分装即得。
实施例1
由黄柏450g,椿皮450g,虎杖450g,白芷450g,香附450g,白头翁600g,蒲公英600g,鸡冠花600g,甘草200g组成。得到药物1。
实施例2
由黄柏350g,椿皮500g,虎杖500g,白芷500g,香附500g,白头翁650g,蒲公英650g,鸡冠花650g,甘草250g组成。得到药物2。
实施例3
由黄柏500g,椿皮350g,虎杖350g,白芷350g,香附350g,白头翁550g,蒲公英550g,鸡冠花550g,甘草180g组成。得到药物3。
动物试验
以下各项检测手段均为本领域常用。各项检测均对上述药品1进行检测。
一、抗炎试验
1.材料
1.1药物:药物1用量为成人24g/日;妇乐冲剂,由四川泸州制药限公司生产,批号为970315
1.2动物:Wistar大鼠,体重200-300g,雌性由本校动物中心提供。动物合格证号医动字20-009号。
2方法
选用健康雌性大鼠40只,随机分为4组,(1)模型对照组,妇乐冲剂组(5.49g/kg,相当于临床用量的16倍),(3)药物1组(5.49g/Kg,相当于临床用量的16倍,22.9g生药/kg),(4)药物1小剂量组(2.74g/Kg,相当于临床用量的8倍,11.43g生药/Kg),在戊巴妥钠麻醉下,剪去下腹部毛,75%酒精消毒皮肤,于下腹正中切口2cm曝露子宫,以右侧为对照,沿左侧子宫角上1cm处作横切口,将一塑料管(管径2mm,长0.5cm,重10mg,酒精消毒)放置于宫内,与子宫切口缝合固定,以防脱落。术后2小时按上述分组灌胃给药,每天1次,连续7天,分别给蒸馏水、妇乐冲剂及药物1,7天后杀死动物,取出两侧子宫组织,天平称重,每鼠的左侧子宫重减去右侧子宫重量,即为炎症肿胀程度,按公式计算各织.肿胀率及给药组的肿胀抑制率。肿胀率E按下式计算得到。
其中Vn和Vt分别代表未致炎和致炎子宫平均重量;
其中En和Ec分别代表给药组和对照组的平均肿胀率。标本作病理切片,记录子宫炎症分级积分,结果进行统计学分析(组间均数比较采用q检验)。
子宫炎症的病理变化分级:炎症表现为血管扩张充血、水肿、浆细胞,淋巴细胞等炎症细1浸润,间质纤维***增生,部分子宫内膜柱状上皮变性坏死、脱落。
根据炎症累及子宫内膜的深浅和浆细胞浸润的数量分为轻、中,重3级。
轻度:炎症累及子宫浅表部分,占子宫内膜全层不到1/3部分,浆细胞浸润较少,每个高倍视野≤1~2个/HP,记为1分。
中度:炎症累从子宫内膜全层的超过1/3,不到2/3部分,浆细胞浸润较多,每个高倍视野≤10个/HP,记为2分。
重度:炎症累及子宫内膜全层超过2/3部分,甚至全层,大量浆细胞浸润子宫内膜间质,每个高倍视野>10个/HP,记为3分。0级为无炎症或炎症消失。
动物抗炎试验结果:本品对子宫炎症、皮下肉芽肿模型动物的子宫肿胀及肉芽肿有抑制作用,并能减少炎症子宫的浆细胞浸润。
二、抑菌试验
1.材料
所用试剂和材料均为市售。
2.试验方法
将琼脂培养基溶化并冷却至55℃左右水浴中备用。将各种不同剂量的药物加入琼脂中混匀,倾注平板。待凝固后于温箱中30分钟,使其表面干燥、取各种菌株的增菌液用0.5号麦氏管校正菌液浓度后再稀释10倍,此时菌数1.5×107CFU/ml,然后接种在含药琼脂平板上,同时接种在不含药的琼脂培养基,以资对照(白色念珠菌接种在Sabourand葡萄糖琼脂培养基,其他菌株接种在MH琼脂培养基)35℃培养18-24小时,观察结果,药物浓度范围:洁霉素、庆大霉素、制霉菌索0.06~128μg/ml共12个倍比浓度,药物1、妇乐冲剂0.003~0.8g/ml,9个倍比浓度。结果判断:不含药的琼脂培养基上长菌者,此试验结果方为有效。以最低药物浓度抑制细菌生长者为该-菌株的最低抑菌浓度(MIC)。
2.1对40株细菌的MIC50和MIC90的测定。
从临床分离出肠链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌各10株,其他革兰氏阴性菌10株,(包括变形杆菌3株、克雷伯菌3株、洛菲不动杆菌2株、产碱杆2株)。
2.2体内保护试验
2.2.1菌液及药液稀释
取金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌的标准菌及临床菌四种菌的原菌液用5%高活性干酵母液稀释至所需浓度,测出试验菌株的100%最小致死量(100%MLD)。
药液稀释采用低比值系列稀释法。从高到低,按1∶0.75剂间距设置5个剂量组,最高药物剂量,药物1为6.86g/kg,妇乐冲剂为6.86g/kg,均为临床用量的20倍。
2.2.2保护试验方法
取小鼠110只,雌雄各半,随机分成药物1、妇乐冲剂各5个剂量组、另设蒸馏水对照组,每组10只,以上各组均腹腔注射0.5ml含IMLD菌量致小鼠感染,药物1、妇乐冲剂组感染前6h,1h两次灌胃给药,药液体积为每只小鼠0.5ml,对照组灌服等体积蒸馏水,观察1周,记录各组小鼠死亡数,按Bliss法计算出各药对小鼠感染的半数保护剂量(ED50)及95%可信限及两药ED50的显著性检验。
动物抑菌实验结果:通过体外抑菌作用试验表明本品对体外金黄色葡萄球、链球菌、大肠杆菌等有明显的抑制作用,小鼠体内保护试验显示,本品对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌感染的小鼠有明显的保护作用。
三、止血试验:
1.材料
1.1药物:药物1,按实施例1的配方制得。妇乐冲剂,由四川沪州制药有限公司生广 批号为970315;枸椽酸钠,上海化学试剂供应采购站出品,批号为960827。
1.2动物:昆明种小鼠,体重18-22g,雌雄各半;Wistar大鼠,体重180~220g,雌雄各半;由本校动物中心提供。动物合格证号医动字第20-011号、第20-009号。
1.3仪器:ACL-200自动血液凝集仪,Instrumentation Laboratory Company,U.S.A生产。
2.试验方法
2.1.药物1对出血时间的影响
取正常小鼠50只,随机分为5组,每组10只,雌雄各半,(1)空白对照组;(2)妇乐冲剂组(2.74g/Kg,相当于临床用量的8倍),(3)药物1大剂量组(5.59g/Kg),中剂量组(2.74g/Kg),小剂量组(1.37g/kg),给药组灌胃给药,对照组给等体积的蒸馏水,给药一次,40分钟后分别用利剪将小鼠尾尖3mm处横断,立即开始记时,每隔20秒钟用滤纸吸去血滴,直至滤纸条上无血痕为止。
2.2.药物1对凝血时间的影响
动物、分组、给药方法同前,于给药后1小时,用内径为1mm的玻璃毛细管***小鼠左眼内眦球后静脉丛取血,至毛细管内血柱达5cm左右时取出,每隔半分钟连续折断毛细管数小段、直至有血丝出现即为血凝,记录凝血时间。
2.3药物1对凝血酶原时间、白陶土部分凝血活酶时间的影响
取Wistar大鼠50只,雌雄各半,随机分为5组,每组10只,对照组、妇乐冲剂组(2.74g/kg,相当于临床用量的8倍)、药物1大、中、小三个剂量组(5.45g/kg、2.74g/kg,1.37g/kg),灌胃给药后1h,心脏取血3.0ml,3.8%枸椽酸钠溶液抗凝,离心取血浆,采用AC1-200自动血液凝集仪进行下列测定:①凝血酶原时间(PT).②白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)。
动物止血实验结果:观察本品对正常小鼠的出血时间、凝血时间及凝血酶原时间、白陶土部分凝血活酶时间的影响,结果表明本品能缩短出血、凝血、凝血酶原时间,说明具有止血作用。
四、镇痛试验:
1.材料
1.1药物:药物1,按实施例1的配方制得。妇乐冲剂,由四川沪州制药有限公司生广 批号为970315;枸椽酸钠,上海化学试剂供应采购站出品,批号为960827。冰醋酸,广州化学试剂厂生产,批号为950406
1.2动物:昆明种小鼠,体重18-22g,由本校动物中心提供。动物合格证号医动字第20-011号、第20-009号。
2.方法
选取健康昆明种小鼠50只,雌雄各半,随机分为5组,每组10只,(1)对照组:(2)妇乐冲剂组(2.74g/kg,相当于临床用量的8倍);(3)药物1的大、中、.小剂量组(5.49g/kg、2.74g/Kg、1.37g/kg,分别相当于临床剂量的16倍、8倍、4倍),每日灌胃给药一次,对照组给等体积蒸馏水,连续7天,于最后一次给药后30分钟,5组均腹腔注射0.6%冰醋酸0.1ml.10g.记录注射致痛剂后20分钟内各小鼠的扭体次数(表现为腹部收缩内陷,躯体扭曲、后肢伸展及蠕行等),
动物镇痛实验结果:能明显减少小鼠因腹腔注射冰醋酸所致扭体次数,提示本品对化学物质致痛有明显镇痛作用。
五、免疫试验:
1材料
1.1药物:药物1,按实施例1的方法制得:贞芪扶正冲剂,吉林化白山制药厂生产,批号951106;环磷酰胺(CY),上海华联制药公司生产,批号960210.
1.2试剂:细胞株,ConA为美国Biochemical Corp生产,3H-TdR由中国科学院原子能研究所提供,RPMI-1640为美国Sigma公司制造,CTLL-2细胞株,瑞士Basel免疫研究所赠送。
1.3动物:BALB/c小鼠,体黄20~22g,由本校动物中心提供。动物合格证号为医动字第20-012号。
2.方法:
取20~22g的BALB/c小鼠,雌雄各半,随机分成6组,每组10只,分组:空白对照组,环磷酰胺+蒸馏水(CY),CY+贞芪扶正冲剂组(3.4g/Kg)相当于临床用量的8倍,CY十柏椿颗粒大、中、小剂量三组(5.49g/kg,2.74g/kg,1.37g/kg),先给各组小鼠按100ml/Kg腹腔注射坏磷酞肢一次,空自对照组除外,然后每天灌胃给药一次,CY组和空白对照组相同体积的蒸馏水,连续7天,第8天处死小鼠,制备脾细胞悬液,检测细胞免疫功能。
2.1淋巴细胞转化试验:取小鼠脾细胞悬液,用3H-TdR掺入法,先加入ConA110μg/ml,培养72h,终止前6h每孔加入H-TdR20μl,多头细胞收集器收集于玻璃纤维滤纸片上,自然干燥后,置液闪仪测β时线强度(cpm),结果以刺激指数(SI)表示(SI=实验组cpm均值/对照组cpm均值)。
2.21L-2诱生和活性检侧:取小鼠脾细胞总悬液加ConA,培养48h,收集上清液,于-20℃保存待测,然后用对数生长期CTLL细胞将RPPMI-1640培养调到1×105/ml,在培养板上每孔加100μl,各孔加入不同稀释度样本100μl,培养24h,收获前6h加入3H-TdR,收集于玻璃纤维滤纸上,自然干燥后用液闪仪测cpm值,结果用生长指数(GI)表示(GI=样本的cpm均值/对照样本的cpm均值)。
动物免疫实验结果:对环磷酰胺所致细胞免疫功能低下的小鼠,本品能促进淋巴细胞转化,增加小鼠脾细胞产生IL-2,提高小鼠细胞免疫的水平。
临床试验
以药物1制成片剂进行临床试验。
以下所用对照药物为:妇乐冲剂,成分为:忍冬藤500g、大血藤500g、甘草500g、大青叶150g、蒲公英150g、牡丹皮150g、赤芍150g、川楝子150g、延胡索150g、大黄(制)100g。
本品用法用量:开水冲服,每天三次,每次8g。并经中国中医研究西苑医院、天津中医学院第二附属医院、湖北省中医院、湖南中医药第一附属医院、湖南中医药研究院附属医院五家临床试验基地医院进行的多中心随机双盲II、III期临床研究结果表明,本品在治疗湿热蕴结型亚急性***时与对照药物相比,疗差异有显著性。本品的总显效率为73.47%,总有效率95.92%。
由上述检测结果可见,本发明提供的中药组合物具有清热利湿、理气止痛、止带止血之功用,药效学显示该制剂具有抑菌、抗炎、镇痛、止血、增强免疫等作用。能治疗湿热蕴结证慢性***。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,对于本领域的技术人员来说,本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种用于治疗***的中药组合物,其特征在于,由黄柏350~500g,椿皮350~500g,虎杖350~500g,白芷350~500g,香附350~500g,白头翁550~650g,蒲公英550~650g,鸡冠花550~650g,甘草180~250g组成。
2.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,由黄柏450g,椿皮450g,虎杖450g,白芷450g,香附450g,白头翁600g,蒲公英600g,鸡冠花600g,甘草200g组成。
3.一种权利要求1或2所述的组合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)取黄柏,加7倍量70%乙醇回流提取75分钟,之后分离药渣和第一提取液,再次向所述药渣中加入5倍量70%乙醇回流提取60分钟,过滤得到第二提取液,合并第一提取液和第二提取液,过滤,制得醇提浸膏备用;
2)虎杖粉碎成粉状后与椿皮、白芷、香附、白头翁、蒲公英、鸡冠花、甘草一起加水浸泡30分钟,第一次加8倍量水煎煮75分钟,第二次加6倍量水煎煮60分钟,合并提取液,滤过、滤液浓缩至60℃时相对密度为1.00~1.05,离心,离心液浓缩至相对密度1.05~1.20;
3)加入所述醇提浸膏,搅匀,调节相对密度1~1.2,喷雾干燥,干燥粉加糊精,用80%乙醇制粒,干燥,整粒,分装即得所述药物组合物。
4.根据权利要求3所述的组合物的制备方法,其特征在于,所述喷雾干燥步骤中进风口的温度为280℃~290℃。
5.一种权利要求1或2所述的组合物的应用,其特征在于,所述组合物的剂量为5.45g/kg。
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
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