CN102276515B - 一种脱氧野尻霉素提取方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种脱氧野尻霉素单体的提取方法，包括如下操作：将桑原料用酸水溶液浸泡提取1～3次；提取液上阳离子交换树脂吸附，水洗后，用氨水洗脱；反渗透预浓缩洗脱液后，回收氨，中间体溶于亲水性溶剂，催化转化，溶液上凝胶层析柱，亲水性溶剂洗脱；回收溶剂后，溶于混合溶剂，上层析柱，混合溶剂洗脱；回收混合溶剂，即得脱氧野尻霉素纯品。本工艺技术能耗低，环保，可以得到10%、50%、99%等各种纯度级别的脱氧野尻霉素纯品。

Description

一种脱氧野尻霉素提取方法

技术领域

本发明涉及生物提取技术，特别涉及一种脱氧野尻霉素单体的提取方法。

背景技术

1—脱氧野尻霉素(1—deoxynojirimycin, DNJ)为一种极性含N化合物,其化学名称是3, 4, 5—三羟基—2—羟甲基四氢吡啶, 分子式为 C₆H₁₃NO₄，相对分子质量为163。DNJ具有很强的抑制α—葡萄糖苷酶的作用,是降血糖、治疗糖尿病的有效成分^[1～4], 此外还具有抗病毒^[5]、抗肿瘤转移^[6]等药理作用。近年来,国内外学者对DNJ的来源、在生物体内的合成机制及化学合成方法进行了大量的研究探索,希望找到一种稳定、高效、经济的获取DNJ的途径^[7]。

李宇亮^[8]等报道了从桑叶中提取脱氧野尻霉素的方法，主要包括提取，提取物过阳离子交换树脂，正丁醇萃取等步骤，得到脱氧野尻霉素纯品。该工艺需要用正丁醇萃取；正丁醇较贵，生产成本较高。

刘韦鋆^[9]等报道了一种从桑叶中提取脱氧野尻霉素的方法，包括桑叶加70%乙醇提取,将提取液浓缩后通过大孔吸附树脂,通过大孔吸附树脂的流出液,浓缩,通过阳离子交换树脂,用蒸馏水洗,用0.5mol/L氨水洗脱,收集洗脱液,浓缩,浓缩液通过硅胶纯化,将有杂质的组分弃去,合并含1-脱氧野尻霉素较纯的组分,浓缩,真空干燥,即得1-脱氧野尻霉素(DNJ)。该工艺需要乙醇提取，在上阳离子交换素质之前需要通过大孔树脂，并4次浓缩；工艺能耗高，使用乙醇成本也高。

周惠燕^[10]等报道了利用反向柱层析技术提取纯化脱氧野尻霉素的方法，脱氧野尻霉素的含量达到10.7%；该技术未能得到纯品。

刘树兴^[11]等以DXA-6 树脂装柱、pH10、原液浓度 0.352 mg/mL、流速 2.0 BV/h 条件下吸附，80%乙醇溶液以 2.5 BV/h 的流速洗脱，提取脱氧野尻霉素。提取工艺需要使用乙醇，而且并未明确最终产物的纯度。

中国专利技术（03101988.9）报道了一种含有桑叶总碱浸膏的制剂及其制备方法：桑叶用水或者亲水溶剂提取，絮凝，上清液离子交换，亲水性溶剂回流提取，浓缩至干得到浸膏。产品的纯度达到50%以上，该制剂具有明显的降血糖及改善糖耐量作用。该方法需要絮凝；被树脂吸附的物资需要用亲水溶剂回流洗脱下来，实际操作中有些不便。

中国专利技术（02113004.3）报道了桑枝提取物及其提取方法和新用途：桑枝提取物由单味药材桑枝用0～95％乙醇水溶液或氯仿、丙酮、乙酸乙酯、甲醇等溶剂或它们的组合在10－100℃温度条件下提取1次或1次以上，合并提取液，回收溶剂即得；或用下列方法进一步纯化：提取液调pH为7.5－9.5，离心后上清液调pH为4－6，沉淀水洗至中性，干燥即得；提取液经石油醚或汽油脱脂而得；提取液经石油醚或汽油脱脂后，用氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇或水分别或依次提取而得；提取液经大孔吸附树脂吸附后，用10－95％乙醇水溶液解吸附而得；提取液经硅藻土、氧化铝等吸附后，用氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇等溶剂洗脱后，浓缩干燥而得；提取液经聚酰胺、硅胶或离子交换树脂等柱层析分离。以上纯化方法可单用或采用几种方法的组合。所得的桑枝提取物中含有大量黄酮类成分，包括芦丁、槲皮素、桑色素等。该专利技术未明确提取物含DNJ的纯度，而且纯化时石油醚脱脂、大孔树脂吸附等，操作程序复杂。

中国专利技术（200710060127.2）报道了从桑叶中连续提取生物碱、黄酮和多糖活性成分的方法：选用溶剂为20％～90％的乙醇或10％～90％的丙酮回流提取，得到滤液和滤渣；滤液浓缩、加水溶解后，通过大孔树脂分离得含量为30％～50％的黄酮类化合物；经过大孔树脂后的溶液，再通过离子交换树脂分离得含量为40％～60％的生物碱类化合物；桑叶滤渣，用水煎煮并脱色，10％～60％醇沉，得含量为55％～85％的酸性多糖类化合物。该技术需要大量的乙醇或者丙酮进行提取，工艺技术成本高，能耗高，未得DNJ纯品。

中国专利技术（200510030333.X）报道了从桑叶中提取有效成分的方法：将吸附有桑叶提取物的树脂置于萃取釜中，连续通入CO₂进行萃取洗脱，收集流出萃取釜的CO₂，卸压至常压，CO₂放空或加压后回用，获得卸压后的残留物，即为桑叶有效成分，萃取釜中CO₂为超临界状态。本发明的方法，纯化过程不易氧化，便于进行规模化从桑叶中提取、提纯桑叶脱氧野尻霉素类生物碱和桑叶黄酮，选择性高，产物中，脱氧野尻霉素生物碱和桑叶黄酮的总含量可达到75～90％。该技术采用超临界萃取技术，最终产品也未得到脱氧野尻霉素纯品。

中国专利技术（200710067498.3）报道了一种从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法：通过在桑叶的提取液中加入无机酸酸化处理，经冷却除去杂质，再经过柱层析获得。可使桑叶提取物含量不低于10％，但是未得纯品。

中国专利技术（200810122998.7）报道了一种从桑叶总生物碱中分离1-脱氧野尻霉素单体的方法：桑叶总碱溶于水，离子交换树脂吸附，吸附完成后，分布洗脱并收集脱氧野尻霉素纯品部分，减压浓缩干燥，多次重结晶，得到纯品。该方法要求原料的“总生物碱”含脱氧野尻霉素40%以上，分步洗脱剂为不同浓度的醇溶液，重结晶为甲醇和丙酮混合溶液；分步洗脱时需要大量的检测工作和收集纯品部位，操作比较麻烦，重结晶的混合溶剂难以处理。

中国专利技术（200810236144.1）报道了一种联产桑叶黄酮、多糖和生物碱的复合提取工艺，但是并未分离得到脱氧野尻霉素纯品。

中国专利技术（200910192542.2）报道了一种从桑叶中连续提取分离1-脱氧野尻霉素(DNJ)、黄酮的方法：将桑叶和乙醇混合后提取，离心过滤，浓缩后加入絮凝剂絮凝沉淀；除去沉淀后将滤液加入连通的多个阳离子交换树脂柱，并流经与该树脂柱串连在一起的大孔吸附树脂柱；滤液加入结束后用纯净水洗至大孔树脂柱流出液无色时将其断开，再用氨水或含氨的乙醇溶液从阳离子树脂柱上洗脱1-脱氧野尻霉素(DNJ)；洗脱液再上阳离子树脂柱，重复操作后收集洗脱液，用 80D纳滤膜浓缩过滤后喷雾干燥，得棕黄色粉末状1-脱氧野尻霉素(DNJ)。用3％～10％的乙醇洗涤大孔树脂柱以除去胶性杂质，再用50％～70％乙醇洗脱黄酮，收集棕红色洗脱液，减压浓缩回收乙醇后喷雾干燥，得黄棕色粉末状桑叶总黄酮。该技术原料需要用乙醇反复提取，生产成本较高，能耗也较高。

中国专利技术（200710099911.4）报道了一种用离子交换树脂分离桑叶总生物碱的方法。该技术未获得脱氧野尻霉素单体。

中国专利技术（201010130263.6）报道了一种从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法：碱水加热提取黄酮，90-95％乙醇和活性炭再提取生物碱，黄酮提取液调酸过大孔树脂柱，酸化结晶和70-80％乙醇溶解重结晶，生物碱提取液浓缩，丙酮再溶解，过氧化铝短粗柱，氨化结晶和85-90％乙醇溶解重结晶。本技术需要大量的有机溶剂，而且未得到脱氧野尻霉素单体。

中国专利技术（201110021131.4）报道了桑叶中1-脱氧野尻霉素的制备方法：采用高电压脉冲电场技术生产1-脱氧野尻霉素的方法，由于是常温提取，同时提高了产品质量和生产效率，降低了生产成本。该技术未得到脱氧野尻霉素纯品。

中国专利技术（200910167602.5）报道了天然产物中提取分离高纯1-脱氧野尻霉素的方法：原料干粉用亲水溶剂提取，提取液酸化、浓缩后以阴离子交换树脂浸泡，流出液和水洗液浓缩后用阳离子交换柱层析、有机溶剂萃取、重结晶、凝胶柱层析纯化，所得产物中1- 脱氧野尻霉素含量不少于98％，具体实施已进入中试。该技术需要阴离子交换树脂和阳离子交换树脂，同时需要醇、丙酮、氯仿、丁醇等多种有机溶剂，尤其是涉及氯仿，毒性较大；提取过程中需要多次浓缩，能耗较高。

中国专利技术（201110038204.0）报道了由桑叶中提取分离高纯度1-脱氧野尻霉素的方法：将原料粉末用含水溶剂提取，滤掉药渣，物料离心，得提取液；提取液浓缩至无乙醇，超滤膜过滤；再用无机酸调pH至3.0-4.0，沉淀，离心除杂；酸化料液上强酸性阳离子树脂柱，水洗，再进行氨水洗脱；料液上大孔树脂柱，水洗，再用不同浓度的乙醇梯度洗脱，收集目标洗脱液；目标洗脱液减压浓缩、干燥，得到粗品；粗品用无水乙醇溶解，过碱性吸附柱除杂，收集流出液；流出液减压浓缩，进行常温结晶和重结晶，得到1-DNJ精制品。本发明整个工艺过程中，除乙醇外未使用其它有机溶剂，操作安全，1-DNJ含量可达98.3%。该工艺需要采用超滤技术，乙醇分布洗脱，收集目标洗脱液需要不断检测流出组份等，操作复杂；能耗较高。

到目前为止，从现有文献和专利技术上看，提取脱氧野尻霉素纯品或者使用过多的有机溶剂，尤其是使用氯仿，导致安全性不高；或者需要多次浓缩，能耗较高；或者需要使用过多的步骤，或者需要分步检测并收集目标成分，由于脱氧野尻霉素没有紫外吸收，检测比较麻烦，操作复杂，工业生产难以控制；或者无法得到纯品等。

 [1] Gross V, Andus T, Tran-ThiT A, et al. 1-Deoxynojirimycin in pairs oligo saccharide processing of α ₁-proteinase inhibitor and inhibits its secretion in primary cultures of rat hepatocytes[J]. BiolChem, 1983, 258(20):12203-12209.

[2] Yoshiaki Y. Inhibition of intestinal α-glucosidase activity and post prandial hyperglycem ia by moranoline and its N-alkyl derivatives[J]. Agric Biol Chem, 1988, 52(1):121-128.

[3]  原爱红, 马骏, 蒋晓峰, 等。桑叶中糖苷酶抑制活性组分的筛选及体外活性研究[J]。同济大学学报:医学版,2005,26(4):8-11。

 [4] Oku T, YamadaM, Nakamura M, et al. Inhibitory effects of extractives from leaves of Morus alba on human and rat small intestinal disaccharides activity[J]. J Nutr, 2006, 95(5):933-938.

[5] 彭忠田, 申璀, 谭德明, 等. 脱氧野尻霉素衍生物抗乙型肝炎病毒的体外试验研究[J]。中国药房, 2007, 18(1):22-24。

[6] Tsuruka T, FukuyasuH. Inhibition of mouse tum or metastas is with nojirimycin—related compounds[J]. J Antibiot, 1996, 49(2):155-161。

[7] 周晓玲,孙凌云，张进，殷浩，崔为正。脱氧野尻霉素的来源及合成研究进展。蚕业科学。2011, 37(1): 0105- 0111。

[8] 李宇亮,李剑敏,吴雅睿。脱氧野尻霉素提取分离方法研究。应用化工。2006,35（9）：599～661.

[9] 刘韦鋆，赵骏，高秀梅，刘美平，曾森。1-脱氧野尻霉素提取精制工艺的研究。中华中医药学刊。2009,27（10）：2079～2081。

[10] 周惠燕，胡晓渝，马英。桑叶中脱氧野尻霉素的纯化及含量测定。中国现代应用药学杂志，2008，25（5）：367～368。

[11] 刘树兴，花俊丽，马文锦。树脂法纯化1-脱氧野尻霉素(DNJ)的研究。食品科技。2009,34（7）：168～170。

发明内容

针对现有脱氧野尻霉素单体提取技术的不足，本发明的目的是提供一种脱氧野尻霉素（DNJ）单体的提取方法，能够实现DNJ的提取分离，并且工艺简单，节约能源，无污染，循环利用，实施容易，能够适应规模化生产且成本低廉，同时提取效率高，产品纯度好。

本发明所述的DNJ单体的提取方法，包括如下步骤：

（1）桑原料用2～10倍(w/v)的酸水（0～5%w/v）或者水溶液浸泡（室温～100℃）提取1～3次，每次0.1～48小时；

（2） 提取液用0.1～1倍(v/v)体积比例的阳离子交换树脂吸附，再用1～10倍阳离子交换树脂体积(v/v)的水洗后，用1～10倍阳离子交换树脂体积(v/v)的氨水（0.05～2mol/L）洗脱；

（3） 将氨水洗脱液反渗透预浓缩2～20倍后，蒸馏回收氨，得到中间体A；回收的氨水用于（2）的洗脱；

（4） 中间体A溶于亲水性溶剂并配制成1～20%(w/v)的溶液，催化转化1小时，按照凝胶：溶液为1～10：1的体积比上凝胶层析柱，亲水性溶剂洗脱；

（5） 回收溶剂后得中间体B，中间体B溶于混合溶剂，配制成1～20%(w/v)的溶液，按照吸附剂：溶液为1～10：1的体积比上层析柱，溶剂洗脱；回收的亲水溶剂用于（4）的洗脱；

（6） 回收溶剂，真空干燥，即得脱氧野尻霉素纯品；回收的溶剂用于（5）的洗脱。

本工艺技术可以得到10%、50%、90%、99%等各种纯度级别的脱氧野尻霉素纯品。

进一步地本工艺步骤（1）中的桑原料指桑枝、桑叶、桑白皮等的一种或多种；酸水指硫酸或者盐酸水溶液；浸泡指室温到100℃下浸泡。由于室温浸泡，降低了能耗。

进一步地本工艺步骤（2）中的阳离子交换树脂指普通的强酸性或者弱酸性阳离子交换树脂，包括：732、7320、001、D001、110、122、D113、D151、724等各种阳离子交换树脂。提取液不用处理直接上阳离子交换树脂，大幅度节约成本并消除了环保问题。

进一步地本工艺步骤（3）中的反渗透技术预浓缩氨水洗脱液；本工艺采用的反渗透技术为普通的反渗透技术。该技术浓缩氨水溶液的同时，将氨和DNJ富集，大幅度降低了常规浓缩所消耗的能耗，为节能的关键。

进一步地本工艺步骤（4）中的催化转化，是指上凝胶层析柱前，先用催化剂（0.01～1%W/V的盐酸或者硫酸）在60～100℃下催化转化；凝胶层析柱指Superose、Sephdex LH-20、Hitrap SP、sephodex等；所述的亲水溶剂指水、甲醇、乙醇、丙酮等。本发明采用了催化转化，其为层析时不需要监控中间体的关键，也是增加收率的关键。

进一步地本工艺步骤（5）中的层析柱指氧化钙、氢氧化铝、硅胶、活性炭、三氧化二铝等；所述的溶剂指甲醇—乙酸乙酯、乙醇—乙酸乙酯、丙酮—乙酸乙酯等。

本发明的有益效果是：

本发明的DNJ单体的提取方法以桑叶、桑枝、桑白皮中的至少一种作为原料，结合DNJ各种成分的物理化学特性，对原料在室温～100℃下提取，提取液直接上阳离子交换树脂富集，氨水洗脱后的DNJ氨水溶液采用反渗透技术进行预浓缩富集，大幅度降低能耗；中间体进行催化转化，层析时直接收集产品，无需监控的操作。整个操作过程能耗很低，与传统工艺相比，大大节约了能源。

本发明洗脱阳离子交换树脂上的DNJ使用的氨水溶液中的氨，回收后循环利用；洗脱凝胶柱的亲水溶剂，以及洗脱层析柱的混合溶剂等，均回收利用。整个工艺节能环保，实现了提取溶剂的循环利用。

本发明选用的洗脱溶剂和中间体催化转化技术，自动实现了分级洗脱，三次分离中的每一次分离不用中间监控，生产技术容易掌握。得到的产品，其纯度可以控制在10%、50%、90%、99%四个级别。可以满足降糖药物和抗癌药物的原料药，也可以作为对照品使用，还可以作为其他产品原料之用。

具体实施方式

以下将对本发明的优选实施例进行详细的描述。应当理解，优选实施例仅为了说明本发明，而不是为了限制本发明的保护范围。

实施例1

（1）桑枝条1Kg用10升0.1%(w/v)的硫酸溶液室温下浸泡48小时；过滤，得到提取液（约9升）。

（2） 提取液9升用0.9升预处理好的732阳离子交换树脂搅拌吸附，然后，用0.9升水洗涤树脂，再用0.9升2mol/L氨水洗涤树脂。约得到0.9升氨水洗脱液。

（3）0.9升氨水洗脱液反渗透浓缩2倍后（约得到0.45升浓缩液），蒸馏回收氨，得到中间体A（约10克）；回收的氨水用于（2）的洗脱。

（4） 中间体A溶于水并配制成20%的溶液（约50毫升），加0.01%的盐酸（w/v）100℃下回流转化1小时，上50毫升Superose凝胶层析柱，用水洗脱；收集洗脱液。

（5） 回收溶剂后得中间体B，中间体B（约1克）溶于5毫升甲醇—乙酸乙酯（1：1）混合溶剂，溶液上5克硅胶柱，用甲醇—乙酸乙酯（1：1）混合溶剂洗脱。

（6） 回收溶剂，真空干燥，即得脱氧野尻霉素纯品。脱氧野尻霉素纯度99%。

实施例2

（1）桑叶1Kg用2升5%(w/v)的盐酸溶液100℃下浸泡0.1小时，过滤，得到提取液（约1升）；残渣再用2升0.5%（w/v）的盐酸溶液100℃下浸泡0.1小时，过滤，得到提取液（约1升）；残渣再用2升水100℃下浸泡0.1小时，过滤，得到提取液（约1升）。合并三次提取液，得到提取液约3升。

（2） 提取液3升用3升预处理好的001阳离子交换树脂搅拌吸附，然后，用30升水洗涤树脂，再用30升0.05mol/L氨水洗涤树脂。约得到30升氨水洗脱液。

（3）30升氨水洗脱液反渗透浓缩20倍后（约得到1.5升浓缩液），蒸馏回收氨，得到中间体A（约20克）；回收的氨水用于（2）的洗脱。

（4） 中间体A溶于甲醇并配制成1%的溶液（约2000毫升），加1%的硫酸（w/v）60℃下保温转化1小时，上20000毫升Sephdex LH-20凝胶层析柱，用甲醇洗脱；收集洗脱液。

（5） 回收溶剂后得中间体B，中间体B（约1克）溶于100毫升乙醇—乙酸乙酯（1：1），溶液上1000克三氧化二铝柱，乙醇—乙酸乙酯（1：1）洗脱。

（6） 回收溶剂，真空干燥，即得脱氧野尻霉素纯品。脱氧野尻霉素纯度50%。

实施例3

（1）桑白皮1Kg用5升1%(w/v)的硫酸溶液60℃下浸泡5小时，过滤，得到提取液（约3升）；残渣再用5升1%(w/v)的硫酸溶液60℃下浸泡5小时，过滤，得到提取液（约4升）。合并二次提取液，得到提取液约7升。

（2） 提取液7升用3.5升预处理好的D151阳离子交换树脂搅拌吸附，然后，用7升水洗涤树脂，再用7升0.5mol/L氨水洗涤树脂。约得到7升氨水洗脱液。

（3）7升氨水洗脱液反渗透浓缩10倍后（约得到0.7升浓缩液），蒸馏回收氨，得到中间体A（约30克）；回收的氨水用于（2）的洗脱。

（4） 中间体A溶于乙醇并配制成10%的溶液（约300毫升），加0.1%的硫酸（w/v）75℃下保温转化1小时，上1500毫升Hitrap SP凝胶层析柱，用乙醇洗脱；收集洗脱液。

（5） 回收溶剂后，中间体B（约5克）溶于50毫升丙酮—乙酸乙酯（1：1），溶液上250克活性炭柱，丙酮—乙酸乙酯（1：1）洗脱。

（6） 回收溶剂，真空干燥，即得脱氧野尻霉素纯品。脱氧野尻霉素纯度10%。

实施例4

（1）桑枝条1Kg用6升水90℃下浸泡12小时，过滤，得到提取液（约4升）；残渣再用4升水90℃下浸泡12小时，过滤，得到提取液（约3升）。合并二次提取液，得到提取液约7升。

（2） 提取液7升用1.4升预处理好的122阳离子交换树脂搅拌吸附，然后，用2.8升水洗涤树脂，再用2.8升0.1mol/L氨水洗涤树脂。约得到2.8升氨水洗脱液。

（3）2.8升氨水洗脱液反渗透浓缩5倍后（约得到0.6升浓缩液），蒸馏回收氨，得到中间体A（约10克）；回收的氨水用于（2）的洗脱。

（4） 中间体A溶于丙酮并配制成5%的溶液（约200毫升），加0.2%的盐酸（w/v）60℃下保温转化1小时，上200毫升sephodex凝胶层析柱，用丙酮洗脱；收集洗脱液。

（5） 回收溶剂后得中间体B，中间体B（约2克）溶于40毫升甲醇—乙酸乙酯（1：1），溶液上80克氧化钙柱，甲醇—乙酸乙酯（1：1）洗脱。

（6） 回收溶剂，真空干燥，即得脱氧野尻霉素纯品。脱氧野尻霉素纯度90%。

最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。 

Claims (8)

1.一种脱氧野尻霉素单体的提取方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）桑原料用2～10倍w/v的酸水溶液或者水浸泡提取1～3次，每次0.1～48小时；

（2）将提取液用0.1～1倍体积的阳离子交换树脂吸附；再用1～10倍阳离子交换树脂体积的水洗后，最后用1～10倍阳离子交换树脂体积的氨水洗脱；

（3） 将氨水洗脱液反渗透预浓缩2～20倍后，蒸馏回收氨，得到中间体A；

（4） 中间体A溶于水或亲水溶剂并配制成1～20%w/v的溶液，使用0.01～1%w/v的盐酸或硫酸催化转化1小时，按照凝胶：溶液为1～10：1的体积比上凝胶层析柱，水或亲水溶剂洗脱；

（5） 回收所述水或亲水溶剂后得中间体B，将中间体B溶于甲醇-乙酸乙酯或乙醇-乙酸乙酯或丙酮-乙酸乙酯的混合溶剂，配制成1～20%w/v的溶液，按照吸附剂：溶液为1～10：1的体积比上层析柱，所述混合溶剂洗脱； 

（6） 回收所述混合溶剂，真空干燥，即得脱氧野尻霉素产品。

2.根据权利要求1所述的脱氧野尻霉素单体的提取方法，其特征在于：步骤（1）中的桑原料指桑枝、桑叶、桑白皮中的一种或多种；酸水指硫酸或者盐酸水溶液，其质量体积百分比浓度为>0%，并≤5%；浸泡指室温到100℃下浸泡。

3.根据权利要求1所述的脱氧野尻霉素单体的提取方法，其特征在于：步骤（2）中的阳离子交换树脂指普通的强酸性或者弱酸性阳离子交换树脂，选择732、7320、001、D001、110、122、D113、D151、724。

4.根据权利要求1所述的脱氧野尻霉素单体的提取方法，其特征在于：步骤（2）中氨水的浓度为0.05～2mol/L。

5.根据权利要求1所述的脱氧野尻霉素单体的提取方法，其特征在于：步骤（4）中的使用0.01～1%w/v的盐酸或硫酸催化转化，是指上凝胶层析柱前，先用0.01～1%w/v的盐酸或者硫酸做催化剂在60～100℃下催化转化；凝胶层析柱选自Superose、Sephdex LH-20、Hitrap SP、sephodex；所述的亲水溶剂指甲醇、乙醇或丙酮。

6.根据权利要求1所述的脱氧野尻霉素单体的提取方法，其特征在于：步骤（5）中的层析柱指氧化钙、氢氧化铝、硅胶、活性炭或三氧化二铝。

7.根据权利要求1-6之任一项所述的脱氧野尻霉素单体的提取方法，其特征在于：步骤（3）回收的氨水用于第二步（2）的洗脱；步骤（5）回收的水或亲水溶剂用于第（4）步的洗脱；步骤（6）回收的所述混合溶剂用于第（5）步的洗脱。

8.根据权利要求1-6之任一项所述的脱氧野尻霉素单体的提取方法，其特征在于：本提取方法能得到10%、50%、90%、99%纯度的脱氧野尻霉素产品。