CN102267906A - 一种绿原酸的提取方法 - Google Patents
一种绿原酸的提取方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102267906A CN102267906A CN2011101696469A CN201110169646A CN102267906A CN 102267906 A CN102267906 A CN 102267906A CN 2011101696469 A CN2011101696469 A CN 2011101696469A CN 201110169646 A CN201110169646 A CN 201110169646A CN 102267906 A CN102267906 A CN 102267906A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cylinder
- bark
- chlorogenic acid
- pure water
- eucommia
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 3-O-Caffeoylquinic acid Natural products O[C@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 0.000 title claims abstract description 46
- PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N Caffeoylquinic acid Natural products CC(CCC(=O)C(C)C1C(=O)CC2C3CC(O)C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(=O)O PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 46
- CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N chlorogenic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N 0.000 title claims abstract description 46
- 235000001368 chlorogenic acid Nutrition 0.000 title claims abstract description 46
- CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N Neochlorogenin-saeure Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N 0.000 title claims abstract description 45
- FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N chlorogenic acid Natural products O[C@@H]1C[C@](O)(C[C@@H](CC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N 0.000 title claims abstract description 45
- 229940074393 chlorogenic acid Drugs 0.000 title claims abstract description 45
- BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N cis-3-O-p-coumaroylquinic acid Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)cc2)[C@@H]1O)C(=O)O BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N 0.000 title claims abstract description 45
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims abstract description 28
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 25
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 21
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000012856 packing Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 70
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 51
- 241000208688 Eucommia Species 0.000 claims description 23
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 20
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 18
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 18
- 238000007664 blowing Methods 0.000 claims description 15
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 14
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 7
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 6
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 6
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 6
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 6
- 235000018553 tannin Nutrition 0.000 claims description 6
- 229920001864 tannin Polymers 0.000 claims description 6
- 239000001648 tannin Substances 0.000 claims description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 claims description 5
- 239000000835 fiber Substances 0.000 claims description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 5
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 5
- 238000005507 spraying Methods 0.000 claims description 5
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 5
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims description 4
- 241000237502 Ostreidae Species 0.000 claims description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 2
- 238000007654 immersion Methods 0.000 claims description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 claims description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 claims description 2
- 235000020636 oyster Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 claims description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 11
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 7
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000003261 Artemisia vulgaris Nutrition 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 3
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 3
- 235000011116 calcium hydroxide Nutrition 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- JXOHGGNKMLTUBP-HSUXUTPPSA-N shikimic acid Chemical compound O[C@@H]1CC(C(O)=O)=C[C@@H](O)[C@H]1O JXOHGGNKMLTUBP-HSUXUTPPSA-N 0.000 description 3
- JXOHGGNKMLTUBP-JKUQZMGJSA-N shikimic acid Natural products O[C@@H]1CC(C(O)=O)=C[C@H](O)[C@@H]1O JXOHGGNKMLTUBP-JKUQZMGJSA-N 0.000 description 3
- AAWZDTNXLSGCEK-LNVDRNJUSA-N (3r,5r)-1,3,4,5-tetrahydroxycyclohexane-1-carboxylic acid Chemical compound O[C@@H]1CC(O)(C(O)=O)C[C@@H](O)C1O AAWZDTNXLSGCEK-LNVDRNJUSA-N 0.000 description 2
- 235000003826 Artemisia Nutrition 0.000 description 2
- 240000006891 Artemisia vulgaris Species 0.000 description 2
- AAWZDTNXLSGCEK-UHFFFAOYSA-N Cordycepinsaeure Natural products OC1CC(O)(C(O)=O)CC(O)C1O AAWZDTNXLSGCEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 2
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 description 2
- 241000245240 Lonicera Species 0.000 description 2
- 244000167230 Lonicera japonica Species 0.000 description 2
- 235000017617 Lonicera japonica Nutrition 0.000 description 2
- AAWZDTNXLSGCEK-ZHQZDSKASA-N Quinic acid Natural products O[C@H]1CC(O)(C(O)=O)C[C@H](O)C1O AAWZDTNXLSGCEK-ZHQZDSKASA-N 0.000 description 2
- 235000009052 artemisia Nutrition 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 241001233957 eudicotyledons Species 0.000 description 2
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 235000020245 plant milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000012716 precipitator Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N trans-caffeic acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N 0.000 description 2
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 2
- CWVRJTMFETXNAD-KJOPMHRFSA-N (1r,3s,4s,5s)-3-[(e)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)prop-2-enoyl]oxy-1,4,5-trihydroxycyclohexane-1-carboxylic acid Chemical compound O[C@H]1[C@@H](O)C[C@](O)(C(O)=O)C[C@@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-KJOPMHRFSA-N 0.000 description 1
- OJUYFGQEMPENCE-DPKHZRJYSA-N (1s,2r,4as,6ar,6ar,6br,8ar,10s,12ar,14bs)-10-hydroxy-1,2,6b,9,9,12a-hexamethyl-2,3,4,5,6,6a,7,8,8a,10,11,12,13,14b-tetradecahydro-1h-picene-4a,6a-dicarboxylic acid Chemical compound C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C(O)=O)CC[C@@]5(C(O)=O)CC[C@@H](C)[C@H](C)[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C OJUYFGQEMPENCE-DPKHZRJYSA-N 0.000 description 1
- ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N (E)-3,4,5-trihydroxycinnamic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CWVRJTMFETXNAD-GMZLATJGSA-N 5-Caffeoyl quinic acid Natural products O[C@H]1C[C@](O)(C[C@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O CWVRJTMFETXNAD-GMZLATJGSA-N 0.000 description 1
- 235000009051 Ambrosia paniculata var. peruviana Nutrition 0.000 description 1
- 235000003097 Artemisia absinthium Nutrition 0.000 description 1
- 235000017731 Artemisia dracunculus ssp. dracunculus Nutrition 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PDKKRUPVSFVVFM-UHFFFAOYSA-N Chinovinsaeure Natural products CC1(C)CCC2(C)CCC3(C4CCC5C(C)(C)C(O)CCC5(C(=O)O)C4=CCC3C2(C)C1)C(=O)O PDKKRUPVSFVVFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001284615 Frangula californica Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- DYUQAZSOFZSPHD-UHFFFAOYSA-N Phenylpropyl alcohol Natural products CCC(O)C1=CC=CC=C1 DYUQAZSOFZSPHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- 235000004433 Simmondsia californica Nutrition 0.000 description 1
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 1
- 235000009470 Theobroma cacao Nutrition 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 235000019728 animal nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000003260 anti-sepsis Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 244000030166 artemisia Species 0.000 description 1
- 239000001138 artemisia absinthium Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003570 biosynthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006696 biosynthetic metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 235000004883 caffeic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940074360 caffeic acid Drugs 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N cis-caffeic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 description 1
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 1
- YTJJRAWFHJBAMT-UHFFFAOYSA-N depside Natural products OC(=O)CC1=C(O)C=C(O)C=C1OC(=O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 YTJJRAWFHJBAMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000001640 fractional crystallisation Methods 0.000 description 1
- 238000010575 fractional recrystallization Methods 0.000 description 1
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 239000004519 grease Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000003913 materials processing Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- -1 phenylpropyl alcohol chlorins compound Chemical class 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009333 weeding Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
一种绿原酸的提取方法，包括以下步骤：提取、离心膜分离、反渗透膜、酸沉、离心、上柱、洗脱、回收洗脱液、干燥、包装。本发明提取的绿原酸纯度高，性能好。
Description
技术领域
本发明涉及药材加工领域，具体为一种绿原酸的提取方法。
背景技术
绿原酸（chlorogenic acid）是一种从双子叶植物（如忍冬叶、咖啡豆、向日葵等）的叶和果实分离得到的酚类,也是许多中草药（如杜仲、金银花、茵陈等）及中药复方制剂抗菌消炎、清热解毒的主要活性成分，目前已成为中草药制剂质量控制的主要指标之一。中草药是中华民族几千年文明的瑰宝，是我们炎黄子孙的骄傲。千百年来，我们的祖先运用中草药及其复方制剂在防病治病方面取得了异常丰富的临床经验，留下了一大批医药名著。近些年，由于西药的泛滥，病原微生物的变异及抗药性也取得了长足的“进步”，于是，人们重新将目光投向了中草药。特别是在人们日益崇尚天然、无污染食品的“后抗生素”时代，中草药以其独到的优势逐渐受到人们前所未有的青睐，中草药中有效成分的提取工艺、作用机理、应用研究也重新成为医药界追逐的热点，并逐渐成为动物营养界研究的一大方向。 绿原酸是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物。它是一种由咖啡酸(caffeic acid)与奎尼酸(鸡纳酸,quinic acid,即1-羟基六氢没食子酸)缩合而成的缩酚酸,异名咖啡鞣酸,化学名3-O-咖啡酰奎尼酸(3-O-caffeoylquinic acid),分子式为C16H18O9,分子量：345.30，半水合物为针状晶体，110℃时变为无水化合物，易溶于水、乙醇、丙酮，微溶于乙酸乙酯，常温下呈淡黄色固体。
植物中绿原酸的生物合成包括了一系列的酶促反应。在酶的催化下,葡萄糖转化成莽草酸(shikimic acid),后者再转化成苯丙氨酸,最后经合成酶作用得绿原酸。其可能的生物合成途径如下： 绿原酸在植物中分布广泛,从高等双子叶植物到蕨类植物均有报道，但含量较高的植物不多，主要存在于忍冬科忍冬属(Lonicera)、菊科蒿属(Artemisia)植物中，其中包括杜仲、金银花、向日葵、咖啡、可可树。 植物的不同品种、发育阶段、同一植株的不同部位、存放时间、生长环境等均能影响植物中绿原酸的含量。以杜仲为例：杜仲叶中绿原酸的含量高于皮中含量数倍之多；用不同干燥方法对绿原酸含量的影响研究中,用阴干、晒干、直接烘干所测绿原酸含量分别是2.21%、2.17%和2.24%；鲜叶中含绿原酸3.52%,放置1年后,叶色棕绿,绿原酸含量为2.47%。
由于绿原酸是极性较强的有机酸，易溶于醇、水，难溶于氯仿、***,因此绿原酸的提取方法较多，有醇（甲醇、乙醇）溶法、水提醇沉、醇提铅沉、石灰乳沉淀法及聚酰胺柱层析法等。下面介绍几种已在被工业化批量生产使用的提取方法。
醇溶法：先用氯仿进行连续提取至流出液呈无色,再改用95%工业乙醇提取,提尽绿原酸；将所得乙醇提取液减压浓缩成浸膏,与干净的细沙拌合后,用热水提取数次,使绿原酸转溶于水中,弃去残渣；所得水溶液用***萃取,进一步除去脂溶性杂质；向脱脂后的水溶液中加入饱和无机盐溶液,至沉淀完全,并稍有过量为止。此时,水中的绿原酸与金属离子结合生成不溶性盐;用离心分离法分离出沉淀并除去沉淀中的金属离子后,将所得滤液用有机溶剂萃取数次,回收溶剂,得绿原酸粗品,经分步结晶和重结晶等方法精制,即得绿原酸纯品,收得率约为0.5%。 这种方法的弊端：工业用酒精（甚至用甲醇代替）都不是安全的提取溶媒；溶剂残留会影响产品质量，很难达到行业标准；会有大量的脂溶性杂质，影响产品纯度。
水提醇沉法：采用水为溶剂,加热煮沸提取,但相应地增加其他水溶性成分如蛋白质、多糖、鞣质等杂质,可用传统的醇沉法除去。醇沉过程中伴随吸附和包夹，致使绿原酸有不同程度的损失。提取水提液中绿原酸时,分次醇沉比一次醇沉所得产品纯度高；当乙醇浓度最终为90%时，一次醇沉的损失率比分次醇沉较大。
水提石灰乳沉淀法：在待测物水溶液中,加石灰乳使绿原酸生成钙盐沉淀,用稀酸分解,提取物中绿原酸收得率较低,可能因为绿原酸是酯类，被强碱水解所致。
虽然许多研究者对绿原酸含量的测定方法进行了研究或评述,在分析、测定过程中不乏采用层析方法,但各种方法均有其不完善之处，难以分离出全部绿原酸并得到纯品。
总的来说，这些方法的弊端：
1、工业用酒精（甚至用甲醇代替）都不是安全的提取溶媒；
2、溶剂残留会影响产品质量，很难达到行业标准；
3、会有大量的脂溶性杂质，影响产品纯度。
发明内容
本发明所解决的技术问题在于提供一种绿原酸的提取方法，以解决上述背景技术中的缺点。
本发明所解决的技术问题采用以下技术方案来实现：
一种绿原酸的提取方法，包括以下步骤：
第一步：提取：称取1-2千克的杜仲，纯水提取三次，第一次：加入的纯水为杜仲质量的8倍，加温到60℃，动态提取1小时，放料液，出液时用板框冷却至30℃以下，第二次：加入的纯水为杜仲质量的6倍，加温到60℃，动态提取1小时放料液出液时用板框冷却至30℃以下，第三次：加入的纯水为杜仲质量的8倍，加温到60℃，动态提取1小时，放料液，出液时用板框冷却至30℃以下，本次料液作为下一批的第一次提取料液；
第二步：离心：用高速管式离心机离心提取后的杜仲，去除机械性杂质，流速不超过1000/h；
第三步：膜分离：40℃以下，用0.4微米的陶瓷膜分离出杜仲叶中的蛋白质、多糖、鞣质；
第四步：反渗透膜：40℃以下，用反渗透膜回收水，浓缩到杜仲质量的4倍；
第五步：酸沉：将3%的稀盐酸加入到浓缩液中，调至PH值3，沉淀1小时；
第六步：离心：用三足沉降离心机离心，流速控制在800/h；
第七步：上柱：树脂型号为LSA-21大孔吸附，上柱流速为柱体的0.6/h，进完上柱液后用PH值3的酸水清洗，酸水用量为柱体的1.5倍，流速为柱体的0.6倍/h；
第八步：洗脱：用为柱体的2倍量的10%乙醇洗脱，流速控制在柱体的0.6倍量，收集洗脱液，用为柱体的3倍量40%乙醇洗脱，流速控制在柱体的0.6倍量，收集洗脱液；
第九步：回收洗脱液：用真空减浓缩回收，10%洗脱液，40%洗脱液单独回收，回收乙醇浓缩到10婆美出液；
第十步：干燥：喷雾干燥，进汽温度控制在145℃—155℃，出汽温度控制在75℃进行喷雾；
第十一步：包装：过80目筛，控制好微生物，纸板桶包装。
本发明中，所述树脂再生方法为：新树脂用95%乙醇浸泡24小时能浸泡到树脂为准，新树脂用95%乙醇渗透清洗，流速为柱体的0.1倍，以流出液加入流出液2倍量的水没有乳白色为准，再用5%NaOH为柱体的两倍进行处理，用纯水洗至PH值7，再用3%HCLI为柱体的两倍量进行处理，用纯水洗至PH值5处理完成。
有益效果
1、将现代分离纯化技术及工艺，从实验室水平提高到了工业化生产水平，实现了植物提取物生产从传统工艺向现代工艺的过度。本项目采用的应用萃取分离、反渗透、离子交换色谱、柱色谱、膜分离等技术手段有机结合的工艺路线。目前在国内少有工业化生产的先例，在国内尚属首例，达到国际先进水平，改变我国生产绿原酸的水或酒精提取、浓缩、萃取分离、结晶分离的传统工艺；
2、首次运用高通量筛选技术，对杜仲植物提取物（绿原酸）抗菌、抗病毒、抗氧化活性成分进行筛选，这为从分子水平研究杜仲仲提取物（绿原酸）的抗菌、抗病毒、抗氧化功能提供了科学依据，实现了绿原酸抗菌、抗病毒、抗氧化活性成分及其部位的快速识别和提取。
3、将膜分离技术成功应用于天然产物纯化技术领域，研制筛选了绿原酸的高效分离体系与介质，创立了高纯度绿原酸制备的体系，使得超纯度的绿原酸与生物合成的绿原酸具有相近的含量和价格，填补了高纯度绿原酸产业化的空白，突破了产品色泽鲜亮稳定已经溶解性好、得率低、纯度高等难题。首次采用膜分离技术对大孔树脂进行预处理，解决了应用大孔树脂分离纯化植物成分中的树脂残留问题，有效的去除了树脂单体、聚合体、胶联体、致孔剂等残留物，确保大孔吸附树脂制备绿原酸符合国际标准和中国SFDA的要求，成功解决了绿原酸因为热稳定不好而容易被氧化的问题。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。
实施例1
称取1千克的杜仲，纯水提取三次，第一次：加入8千克的纯水，加温到60℃，动态提取1小时，放料液，出液时用板框冷却至30℃，第二次：加入6千克的纯水，加温到60℃，动态提取1小时放料液出液时用板框冷却至28℃，第三次：加入8千克的纯水，加温到60℃，动态提取1小时，放料液，出液时用板框冷却至25℃，本次料液作为下一批的第一次提取料液；用高速管式离心机离心提取后的杜仲，去除机械性杂质，流速不超过1000/h；40℃时，用0.4微米的陶瓷膜分离出杜仲叶中的蛋白质、多糖、鞣质；反渗透膜：38℃时用反渗透膜回收水，浓缩到4千克；将3%的稀盐酸加入到浓缩液中，调至PH值3，沉淀1小时；用三足沉降离心机离心，流速控制在800/h；用树脂型号为LSA-21大孔吸附，上柱流速为柱体的0.6/h，进完上柱液后用PH值3的酸水清洗，酸水用量为柱体的1.5倍，流速为柱体的0.6倍/h；用为柱体的2倍量的10%乙醇洗脱，流速控制在柱体的0.6倍量，收集洗脱液，用为柱体的3倍量40%乙醇洗脱，流速控制在柱体的0.6倍量，收集洗脱液；回收洗脱液：用真空减浓缩回收，10%洗脱液，40%洗脱液单独回收，回收乙醇浓缩到10婆美出液；喷雾干燥，进汽温度控制在145℃，出汽温度控制在75℃进行喷雾；过80目筛，控制好微生物，纸板桶包装。
实施例2
称取1.5千克的杜仲，纯水提取三次，第一次：加入12千克的纯水，加温到60℃，动态提取1小时，放料液，出液时用板框冷却至30℃，第二次：加入9千克的纯水，加温到60℃，动态提取1小时放料液出液时用板框冷却至29℃，第三次：加入12千克的纯水，加温到60℃，动态提取1小时，放料液，出液时用板框冷却至25℃，本次料液作为下一批的第一次提取料液；用高速管式离心机离心提取后的杜仲，去除机械性杂质，流速不超过1000/h；40℃时，用0.4微米的陶瓷膜分离出杜仲叶中的蛋白质、多糖、鞣质；反渗透膜：38℃时用反渗透膜回收水，浓缩到6千克；将3%的稀盐酸加入到浓缩液中，调至PH值3，沉淀1小时；用三足沉降离心机离心，流速控制在800/h；用树脂型号为LSA-21大孔吸附，上柱流速为柱体的0.6/h，进完上柱液后用PH值3的酸水清洗，酸水用量为柱体的1.5倍，流速为柱体的0.6倍/h；用为柱体的2倍量的10%乙醇洗脱，流速控制在柱体的0.6倍量，收集洗脱液，用为柱体的3倍量40%乙醇洗脱，流速控制在柱体的0.6倍量，收集洗脱液；回收洗脱液：用真空减浓缩回收，10%洗脱液，40%洗脱液单独回收，回收乙醇浓缩到10婆美出液；喷雾干燥，进汽温度控制在150℃，出汽温度控制在75℃进行喷雾；过80目筛，控制好微生物，纸板桶包装。
实施例3
称取2千克的杜仲，纯水提取三次，第一次：加入16千克的纯水，加温到60℃，动态提取1小时，放料液，出液时用板框冷却至30℃，第二次：加入12千克的纯水，加温到60℃，动态提取1小时放料液出液时用板框冷却至28℃，第三次：加入16千克的纯水，加温到60℃，动态提取1小时，放料液，出液时用板框冷却至25℃，本次料液作为下一批的第一次提取料液；用高速管式离心机离心提取后的杜仲，去除机械性杂质，流速不超过1000/h；40℃时，用0.4微米的陶瓷膜分离出杜仲叶中的蛋白质、多糖、鞣质；反渗透膜：38℃时用反渗透膜回收水，浓缩到8千克；将3%的稀盐酸加入到浓缩液中，调至PH值3，沉淀1小时；用三足沉降离心机离心，流速控制在800/h；用树脂型号为LSA-21大孔吸附，上柱流速为柱体的0.6/h，进完上柱液后用PH值3的酸水清洗，酸水用量为柱体的1.5倍，流速为柱体的0.6倍/h；用为柱体的2倍量的10%乙醇洗脱，流速控制在柱体的0.6倍量，收集洗脱液，用为柱体的3倍量40%乙醇洗脱，流速控制在柱体的0.6倍量，收集洗脱液；回收洗脱液：用真空减浓缩回收，10%洗脱液，40%洗脱液单独回收，回收乙醇浓缩到10婆美出液；喷雾干燥，进汽温度控制在145℃，出汽温度控制在75℃进行喷雾；过80目筛，控制好微生物，纸板桶包装。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征及本发明的优点，本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内，本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
Claims (2)
1.一种绿原酸的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
第一步：提取：称取1-2千克的杜仲，纯水提取三次，第一次：加入的纯水为杜仲质量的8倍，加温到60℃，动态提取1小时，放料液，出液时用板框冷却至30℃以下，第二次：加入的纯水为杜仲质量的6倍，加温到60℃，动态提取1小时放料液出液时用板框冷却至30℃以下，第三次：加入的纯水为杜仲质量的8倍，加温到60℃，动态提取1小时，放料液，出液时用板框冷却至30℃以下，本次料液作为下一批的第一次提取料液；
第二步：离心：用高速管式离心机离心提取后的杜仲，去除机械性杂质，流速不超过1000/h；
第三步：膜分离：40℃以下，用0.4微米的陶瓷膜分离出杜仲叶中的蛋白质、多糖、鞣质；
第四步：反渗透膜：40℃以下，用反渗透膜回收水，浓缩到杜仲质量的4倍；
第五步：酸沉：将3%的稀盐酸加入到浓缩液中，调至PH值3，沉淀1小时；
第六步：离心：用三足沉降离心机离心，流速控制在800/h；
第七步：上柱：树脂型号为LSA-21大孔吸附，上柱流速为柱体的0.6/h，进完上柱液后用PH值3的酸水清洗，酸水用量为柱体的1.5倍，流速为柱体的0.6倍/h；
第八步：洗脱：用为柱体的2倍量的10%乙醇洗脱，流速控制在柱体的0.6倍量，收集洗脱液，用为柱体的3倍量40%乙醇洗脱，流速控制在柱体的0.6倍量，收集洗脱液；
第九步：回收洗脱液：用真空减浓缩回收，10%洗脱液，40%洗脱液单独回收，回收乙醇浓缩到10婆美出液；
第十步：干燥：喷雾干燥，进汽温度控制在145℃—155℃，出汽温度控制在75℃进行喷雾；
第十一步：包装：过80目筛，控制好微生物，纸板桶包装。
2.根据权利要求1所述的一种绿原酸的提取方法，其特征在于，所述树脂再生方法为：新树脂用95%乙醇浸泡24小时能浸泡到树脂为准，新树脂用95%乙醇渗透清洗，流速为柱体的0.1倍，以流出液加入流出液2倍量的水没有乳白色为准，再用5%NaOH为柱体的两倍进行处理，用纯水洗至PH值7，再用3%HCLI为柱体的两倍量进行处理，用纯水洗至PH值5处理完成。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201110169646.9A CN102267906B (zh) | 2011-06-23 | 2011-06-23 | 一种绿原酸的提取方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201110169646.9A CN102267906B (zh) | 2011-06-23 | 2011-06-23 | 一种绿原酸的提取方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102267906A true CN102267906A (zh) | 2011-12-07 |
| CN102267906B CN102267906B (zh) | 2014-01-15 |
Family
ID=45050389
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201110169646.9A Expired - Fee Related CN102267906B (zh) | 2011-06-23 | 2011-06-23 | 一种绿原酸的提取方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102267906B (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103450019A (zh) * | 2013-09-18 | 2013-12-18 | 重庆市中药研究院 | 一种从灰毡毛忍冬花蕾和叶中提取纯化活性成分的方法 |
| CN103992224A (zh) * | 2014-05-05 | 2014-08-20 | 四川九章生物化工科技发展有限公司 | 一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法 |
| CN104490980A (zh) * | 2013-12-26 | 2015-04-08 | 湖北老龙洞杜仲开发有限公司 | 一种细胞破壁低温提取杜仲绿原酸的方法 |
| CN108373413A (zh) * | 2018-05-14 | 2018-08-07 | 肖锦 | 一种从杜仲中提取绿原酸的方法 |
| CN108484401A (zh) * | 2018-05-14 | 2018-09-04 | 肖锦 | 一种从新鲜金银花中提取绿原酸的工艺 |
| CN108836990A (zh) * | 2018-09-05 | 2018-11-20 | 河南大学 | 一种金银花叶抗炎活性组分及其制备方法和应用 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101704748A (zh) * | 2009-09-28 | 2010-05-12 | 南京泽朗医药科技有限公司 | 一种绿原酸的提取方法 |
-
2011
- 2011-06-23 CN CN201110169646.9A patent/CN102267906B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101704748A (zh) * | 2009-09-28 | 2010-05-12 | 南京泽朗医药科技有限公司 | 一种绿原酸的提取方法 |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103450019A (zh) * | 2013-09-18 | 2013-12-18 | 重庆市中药研究院 | 一种从灰毡毛忍冬花蕾和叶中提取纯化活性成分的方法 |
| CN104490980A (zh) * | 2013-12-26 | 2015-04-08 | 湖北老龙洞杜仲开发有限公司 | 一种细胞破壁低温提取杜仲绿原酸的方法 |
| CN103992224A (zh) * | 2014-05-05 | 2014-08-20 | 四川九章生物化工科技发展有限公司 | 一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法 |
| WO2015168962A1 (zh) * | 2014-05-05 | 2015-11-12 | 四川九章生物化工科技发展有限公司 | 一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法 |
| CN103992224B (zh) * | 2014-05-05 | 2016-08-17 | 四川九章生物化工科技发展有限公司 | 一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法 |
| JP2017520616A (ja) * | 2014-05-05 | 2017-07-27 | スーチョアン チウチャン バイオロジカル サイエンス アンド テクノロジー カンパニー リミテッド | 杜仲葉からクロロゲン酸を抽出する方法 |
| CN108373413A (zh) * | 2018-05-14 | 2018-08-07 | 肖锦 | 一种从杜仲中提取绿原酸的方法 |
| CN108484401A (zh) * | 2018-05-14 | 2018-09-04 | 肖锦 | 一种从新鲜金银花中提取绿原酸的工艺 |
| CN108836990A (zh) * | 2018-09-05 | 2018-11-20 | 河南大学 | 一种金银花叶抗炎活性组分及其制备方法和应用 |
| CN108836990B (zh) * | 2018-09-05 | 2021-06-11 | 河南大学 | 一种金银花叶抗炎活性组分及其制备方法和应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102267906B (zh) | 2014-01-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102267906B (zh) | 一种绿原酸的提取方法 | |
| CN101580557B (zh) | 菊苣根中提取菊粉的制备工艺 | |
| CN101857523B (zh) | 一种利用木糖母液同时生产木糖醇和***糖醇的方法 | |
| CN1321961C (zh) | 一种从虎杖中提取纯化白藜芦醇的新方法 | |
| CN102432582A (zh) | 一种原花青素的制备方法 | |
| CN105294790A (zh) | 一种从甜叶菊中提取高纯度甜叶菊糖苷的方法 | |
| CN102001947A (zh) | 一种金银花绿原酸的制备方法 | |
| CN103333067A (zh) | 一种高纯度绿原酸的提取方法 | |
| CN109293712A (zh) | 一种甜叶菊的工业化利用方法及其甜菊糖苷和绿原酸 | |
| CN103012544B (zh) | 一种从油茶籽饼粕中提取皂素和多糖的方法 | |
| CN101366829B (zh) | 一种从荷叶中同步提取黄酮和生物碱的方法 | |
| CN1384088A (zh) | 一种从虎杖植物中提取白藜芦醇的制备方法 | |
| CN101134751A (zh) | 从赤霉酸发酵液中提取赤霉酸ga4+7的方法 | |
| CN104311616B (zh) | 一种从秦皮中提取高纯度秦皮甲素和秦皮苷的方法 | |
| CN102320953A (zh) | 用毛叶山桐子毛油制备天然a-亚麻酸的方法 | |
| CN101704749A (zh) | 葵花粕中绿原酸和蛋白质的提取方法 | |
| CN103265583B (zh) | 一种水苏糖结晶的制备方法 | |
| CN104311515B (zh) | 穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的分离提取工艺 | |
| CN106360727B (zh) | 一种植物的综合利用方法 | |
| CN102516041A (zh) | 一种从天然橡胶乳清中提取白坚木皮醇的方法 | |
| CN112159300A (zh) | 一种从植物脱臭馏出物提取角鲨烯的方法 | |
| CN103289969A (zh) | 一种从植物茎叶中提取超氧化物歧化酶的方法 | |
| CN105193880A (zh) | 一种软枣猕猴桃黄酮的提取方法 | |
| CN113277932B (zh) | 一种以水为提取溶剂提取蒿属植物中白坚木皮醇的方法 | |
| CN112830881B (zh) | 从橙皮苷废液中分离辛弗林的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| ASS | Succession or assignment of patent right |
Owner name: XIANG HANG Effective date: 20140106 Owner name: WANG KEMING Free format text: FORMER OWNER: HUNAN CHANGSHA YUANHANG BIOLOGY PRODUCT CO., LTD. Effective date: 20140106 |
|
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20140106 Address after: 30 dormitory building 1, Nongda Road, Furong district, Hunan, Changsha 410000 Patentee after: Wang Keming Patentee after: Xiang Hang Address before: Taiwanese investment zone gaotangling 410000 Hunan province Changsha County of Wangcheng City Patentee before: Hunan Changsha Yuanhang Biology Product Co., Ltd. |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20140115 Termination date: 20200623 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |