CN102258615B - 炎宁胶囊及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗上呼吸道感染，扁桃体炎，***，急性菌痢，肠炎中药的制备方法，取鹿茸草1953.12g、白花蛇舌草976.56g、鸭跖草976.56g，采用二氧化碳超临界萃取法得上清液，滤液浓缩、干燥，采用气流粉碎机将浸膏粉碎成超细粉体，加入赋形剂混匀装囊，本发明具有活性成分提取完全、生物利用度高、吸收好、质量稳定、重现性好等优点。

Description

炎宁胶囊及其制备方法

技术领域

本发明涉及中药领域，具体来说，涉及一种治疗上呼吸道感染，扁桃体炎，***，急性菌痢，肠炎的炎宁胶囊及其制备方法。

背景技术

炎宁胶囊，清热解毒，消炎止痢。用于治疗上呼吸道感染，扁桃体炎，***，急性菌痢，肠炎等病症，但存在活性成份提取不完全、生物利用度低等不足。

发明内容

为克服上述不足，本发明的目的是采用现代高科技手段提供一种活性成份提取完全、生物利用度高、质量稳定的炎宁胶囊及其制备方法。

炎宁胶囊是通过下列方法制备：

取鹿茸草1953.12g、白花蛇舌草976.56g、鸭跖草976.56g，采用二氧化碳超临界萃取法提取，萃取压力20-50Mpa，萃取温度30-60℃，分离器压力5-10Mpa，分离器温度40-60℃，分离时间2-6小时，二氧化碳流量为20-30L/H，得上清液，滤液浓缩、干燥，采用气流粉碎机将浸膏粉碎成超细粉体，加入药学上可接受的赋形剂混匀装囊，制成1000粒。

其中，气流粉碎机将浸膏粉碎成粒径＜50微米的超细粉体。

上述实施方案所提到的中药材来源如下：

鹿茸草：为玄草科鹿茸草属植物绵毛鹿茸草的全草，具有清热解毒，凉血止血的功效，用于感冒，肺热咳嗽，风口牙痛，小儿鹅口疮，乳痈，***，崩漏，带下，吐血，便血，外伤出血，风湿骨痛。

白花蛇舌草：为茜草科耳草属白花蛇舌草的全草。具有清热解毒，活血消肿，利湿退黄的功效，用于肺热咳喘，肺痈，咽喉肿痛，肠痈，疖肿疮疡，毒蛇咬伤，热淋涩痛，水肿，痢疾肠炎，湿热黄疸，癌肿。

鸭跖草：为鸭跖草科植物鸭跖草Commelina communis L.的干燥地上部分。具有清热泻火，解毒，利水消肿的功效。用于感冒发热，热病烦渴，咽喉肿痛，水肿尿少，热淋涩痛，痈肿疔毒。

炎宁胶囊所用到的原料药均可从普通医药商店购买得到，其规格符合国家医药标准。

具体实施方式

下列实施例仅用于说明本发明，而不是以任何方式限制本发明。

本发明的具体实施例1

取鹿茸草976.56g、白花蛇舌草488.28g、鸭跖草488.28g，采用二氧化碳超临界萃取法提取，萃取压力20Mpa，萃取温度30℃，分离器压力5Mpa，分离器温度40℃，分离时间2小时，二氧化碳流量为20L/H，得上清液，滤液浓缩、干燥，采用气流粉碎机将浸膏粉碎成粒径＜50微米(完全通过300目筛)超细粉体，加入药学上可接受的赋形剂混匀装囊制成1000粒。

本发明的具体实施例2

取鹿茸草2929.68g、白花蛇舌草1464.84g、鸭跖草1464.84g，采用二氧化碳超临界萃取法提取，萃取压力50Mpa，萃取温度60℃，分离器压力10Mpa，分离器温度60℃，分离时间6小时，二氧化碳流量为30L/H，得上清液，滤液浓缩、干燥，，采用气流粉碎机将浸膏粉碎成粒径＜50微米(完全通过300目筛)超细粉体，加入药学上可接受的赋形剂混匀装囊制成1000粒。

本发明最优选的具体实施例3

取鹿茸草1953.12g、白花蛇舌草976.56g、鸭跖草976.56g，采用二氧化碳超临界萃取法提取，萃取压力35Mpa，萃取温度45℃，分离器压力8Mpa，分离器温度50℃，分离时间4小时，二氧化碳流量为25L/H。得上清液，滤液浓缩、干燥，，采用气流粉碎机将浸膏粉碎成粒径＜50微米(完全通过300目筛)超细粉体，加入药学上可接受的赋形剂混匀装囊制成1000粒。

(一)炎宁胶囊实施例的检验方法：

【鉴别】(1)取本品1g，加乙醇20ml浸渍数分钟后，滤过，取滤液2ml，加三氯化铁试液1～2滴，即显墨绿色。

(2)取本品1g，加乙醇20ml浸渍数分钟后，滤过，取滤液2ml，加三氯化铁试液1～2滴后剩余的滤液5ml，蒸干，加三氯甲烷5ml使溶解，取三氯甲烷液，加硫酸2滴，放置后显微黄色，置水浴中加热变为粉红色。

【含量测定】

对照品溶液的制备精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置100ml量瓶中，加60％乙醇适量，置80℃水浴中加热使溶解，放冷，用60％乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取25ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml含无水芦丁0.1mg)

供试品溶液的制备取本品10粒的内容物，混匀，精密称定，称取0.5g，精密称定，置50ml量瓶中，加30％乙醇稀释至刻度，摇匀，过滤，弃去初滤液，精密量取3ml，置25ml量瓶中，加30％乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。

测定法精密吸取上述两种溶液各2ml，分别置10ml量瓶中，各加入30％乙醇3ml摇匀，精密加入亚硝酸钠溶液(1→20)0.3ml，摇匀，放置6分钟，精密加入三氯化铝溶液(1→10)0.3ml，摇匀，放置10分钟，加入氢氧化钠溶液(1mol/L)4ml，用30％乙醇稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，同时另取上述两种溶液各2ml，分别置10ml量瓶中，加30％乙醇至刻度线摇匀做空白，照分光光度法(《中国药典》2010年版一部附录VA)在5l0nm波长处分别测定吸收度，计算含量，即得。

本品每粒含总黄酮以无水芦丁(C₃₇H₃₀O₁₆)计，不得少于50mg。

规格每粒装0.25g

(二)炎宁胶囊药效学研究

1.上呼吸道感染抗炎、解热、镇痛、抑菌、抗病毒实验

1.1材料

1.1.1药品

本发明炎宁胶囊30g；布洛芬片(安徽省全椒制药厂)；阿司匹林片(山东新华制药厂)；复方大青叶合剂，10ml/支，由鲁南制药股份有限公司生产(批号：20090816)；角叉菜胶由Sigma公司生产；水解酪蛋白琼脂(MH)培养基由上海伊华医学科技有限公司生产(批号：20090404)；营养肉汤由***上海生物制品研究所生产(批号：20090203)；PRMI1640培养基由美国CIBCOBRL公司生产(批号：31800-089)，使用时加入15％的无菌小牛血清。

1.1.2动物：SD大鼠，雌雄兼用，体重180-240g；NIH小鼠，雄性，体重20-25g；家兔，雌雄兼用，体重1.8-2.4Kg。均由浙江大学湖滨校区实验动物中心提供。

1.1.3药品配制

炎宁混悬液，将炎宁胶囊加蒸馏水研磨，配制成所需浓度的混悬液；

布洛芬或阿司匹林混悬液，将布洛芬片或阿司匹林片研磨成细粉，用0.5％羧甲基纤维素钠(CMC-Na)液配成所需浓度的混悬液。

1.1.4酵母混悬液

将鲜酵母(鹤岗啤酒厂提供)用蒸馏水配成30％酵母混悬液。

1.2方法与结果

1.2.1对大鼠足跖注射角叉菜胶致炎性肿胀的影响

大鼠40只，随机分成5组，每组8只。1组为空白对照组，给生理盐水10ml/kgig，3组为炎宁胶囊低、中、高剂量组，分别给炎宁胶囊2.5、5.0、10.0g/kg ig，1组为阳性对照组，给布洛芬0.1g/kg ig。给药后1H，在无菌操作下于大鼠历后足跖皮下注射新配制的1％角叉菜胶液0.1ml。采用大鼠足跖容积测定仪测定致炎前后不同时间大鼠足跖容积变化，每小时1次，连续5次。以致炎前后足跖容积的差值作为肿胀度。结果表明，炎宁胶囊2.5、5.0、10.0g/kg ig后1小时，对大鼠足跖注射角叉菜胶引起的炎性肿胀均有明显抑制作用(P＜0.05，P＜0.01，与P＜0.001)，经梯度检验P＜0.001，表明作用与剂量有关。阳性对照药布洛芬也有明显抗炎作用(P＜0.01)。见表1

注t检验，与生理盐水组比较*1 P＜0.05，*2P＜0.01，*3P＜0.001。

1.2.2对二甲苯致小鼠耳毛细血管通透性增高的影响。小鼠50只，随机分成5组，每组10只。1组为空白对照组，给生理盐水0.2ml/10g ig；3组为炎宁胶囊低、中、高剂量组，分别给炎宁胶囊5.0、10.0、20.0g/kg ig；1组为阳性对照组，组布洛芬0.1g/kg ig。给药后1H，各组小鼠经尾静脉注入0.5％伊文思蓝生理盐水10g。迅速将二甲苯0.041涂于小鼠右耳前后两面。20min后，右耳部蓝斑明显，将小鼠脱颈椎处死，沿耳廓基线剪下右耳，用直径9mm的打孔器在各鼠右耳相同部位打下圆形耳片。用丙酮-生理盐水(7∶3)提取液提取，离心，用比色法测定耳圆片含有的染料量。结果表明，炎宁胶囊10.0、20.0g/kg ig均能明显抑制二甲苯致小鼠耳毛细血管通透性增高，与生理盐水对照组比较均有显著差异(P＜0.05与P＜0.01)，经梯度检验P＜0.001，表明作用与剂量有关。阳性对照药布洛芬也有明显抗炎作用。见表2

表2炎宁胶囊ig对二甲苯致小鼠耳毛细血管通透性增高的影响/n＝10，

注t检验，与生理盐水比较，*1P＜0.05，*2P＜0.01

1.2.3对大鼠皮下羧甲基纤维素囊中白细胞游出的影响，大鼠40只，随机分成5组，每组8只，雌雄各半。1组为空白对照组，给生理盐水10m1/Kg ig；3组为炎宁胶囊低、中、高剂量组，分别给炎宁胶囊2.5、5.0、10.0g/kg ig；1组为阳性对照组，给布洛芬0.1g/kg。各组均给药2次，间隔4H。将各组大鼠背部剃毛，无菌操作下向背部皮下注入空气5，形成圆形气囊，次日，于首次给药后1H用消毒针头及注射器向囊内注入1.5％CMC液各5ml，于首次给药后3H及7H吸取囊内CMC液0.1ml，精确吸取0.01，稀释到0.5ml，滴于血细胞计数板上，在镜下计数白细胞数。结果表明，炎宁胶囊2.5g/kg ig在首次给药后7H CMC囊内白细胞数均明显减少，与生理盐水组比较有显著差异(P＜0.05、P＜0.01)，与P＜0.001)经梯度检验P＜0.001，表明作用与剂量有关。布洛芬组的白细胞数也明显减少(P＜0.01)。见表3。

表3炎宁胶囊ig对大鼠皮下羧甲基纤维素囊中白细胞游出的影响/n＝8，

注*1为一次给药，*2为二次给药；t检验，与生理盐水组比较，*3P＜0.01，*4P＜0.05，*5P＜0.001

1.2.4对家兔静脉注射酵母液后发热的解热作用

取测温合格(38.6-39.4℃)家兔20只，均静脉注射30％酵母液2ml/kg，2H升温1℃以上，形成发热模型，随机分成4组，每组5只。1组为生理盐水对照组，给生理盐水5ml/kg，2组给炎宁胶囊，剂量分别为5、10；另1组为阳性对照组，给阿司匹林0.2g/kg。每组均灌胃给药，给药后每隔1H测温1次，连续6次，观察药物的解热作用。结果显示，生理盐水对照组于给酵母液5H后体温逐渐下降至正常。致热家兔给炎宁胶囊5g/kg灌胃后1H平均体温降低0.3℃，2H平均体温降低0.8℃，3H体温下降至致热前水平。炎宁胶囊10g/kg灌胃后1H，平均体温降低0.9℃，2H平均体温下降1.1℃，已降至致热前水平。阳性对照组家兔给阿司匹林0.2g/kg灌胃后12H，平均体温降低1.2℃，已降至致热前水平。见表4。

表4炎宁胶囊ig对30％酵母液(2ml/kg iv)致热家兔的解热作用/n＝5

注：t检验，与生理盐水对照组比较，*1P＜0.001，*2P＜0.05，*3P＜0.01

1.2.5体内抑菌作用的观察

1.2.5.1菌液的制备将金黄色葡萄球菌定量接种于适宜的MH肉汤中，放孵箱增菌6H，取此菌液0.1ml转种于10mlMH肉汤中，放孵箱37℃孵育18H，该菌为原菌液，适当稀释后，用5％灭菌胃膜素配制成感染动物所需浓度菌液，备实验用。

1.2.5.2最小致死量(MLD)实验将原菌液用5％胃膜素进行递次稀释。选健康小鼠60只雌雄各半，分别腹腔注射不同浓度的菌液，进行金黄色葡萄球菌的最小致100％动物死亡测试，测得金黄色葡萄球菌MLD为1.2×10⁵CFU/m1。

1.2.5.3体内保护实验将小鼠随机分为6组，即本发明炎宁胶囊大剂量(8g/kg)组，中剂量(4g/kg)组，小剂量(2g/kg)组；阳性药复方大青叶合剂(8ml/kg)组，青霉素(10万U/kg)组；空白对照组。每组小鼠20只，取培养18H的金黄色葡萄球菌，用5％胃膜素稀释为MLD的菌悬液，每鼠腹腔注射0.5ml，于感染后1、6、12、24、48、72、84、96、108H灌胃给药，给药体积0.5ml/20g小鼠，青霉素腹腔注射给药0.5ml/20g小鼠，记录小鼠死亡数。

1.2.5.4结果各组动物感染细菌后30min出现怠动，继而出现卧位，精神萎靡、呼吸急促，死亡多发生在48H内。阳性对照药复方大青叶合剂及青霉素组动物组感染后也出现上述症状。随着用药剂量的增加，感染、死亡时间延迟。空白对照组小鼠死亡率为95％；本发明炎宁胶囊大剂量组，大青叶合剂组小鼠死亡率分别为50％、55％，与空白对照组差异具有统计学意义(P＜0.05)；青霉素组小鼠药死亡率为10％，与空白对照组差异具有统计学意义(P＜0.01)；本发明炎宁胶囊中、小剂量组死亡率分别为65％、85％，与空白组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

1.2.6抗病毒作用的观察

1.2.6.1本发明炎宁胶囊毒性实验将本发明炎宁胶囊用PRMI1640液稀释成1∶25、1∶50、1∶100、1∶200、1∶400的5种稀释度，接种于Hela细胞培养(每个稀释度作4孔细胞培养)，在37℃培育，观察药物对细胞无毒性作用的最高浓度作为实验用的无毒限量。

1.2.6.2本发明炎宁胶囊对病毒致细胞病变作用的影响将本发明炎宁胶囊用PRMI1640液作1∶100、1∶200、1∶400稀释，Hela单层细胞培养，倾去培养液，用上述三个稀释度的药液的药液，分别稀释病毒RSV与Ad₃成100TCID₅₀。每孔加入上述浓度的病毒0.2ml，35℃培养，观察细胞病变。

1.2.6.3结果本发明炎宁胶囊浓度在1∶100(1％)时，对病毒RSV、Ad₃均产生明显的抑制作用，见表5

表5本发明炎宁胶囊在细胞培养上的抗病毒作用

2***临床实验

2.1临床资料

以随机、双盲、对照方法设治疗组、对照组各40例，治疗组男性2例，女性38例；年龄18-64岁，平均48岁；病程≤7天32例，8-14天5例，15-28天3例，平均5.65天；病种为急性膀胱炎10例，急性肾盂肾炎4例，慢性肾盂肾炎急性发作26例。对照组男性10例，女性30例；年龄20-65岁，平均45岁；病程≤7天29例，8-14天7例，15-28天4例，平均6.25天；病种是急性膀胱炎12例，急性肾盂肾炎5例，慢性肾盂肾炎急性发作23例。两组病例一般情况相似，具有可比性。

2.2药品

选择尿感宁冲剂作为对照药。治疗组采用炎宁胶囊1号(治疗药)，8粒口服，尿感宁冲剂1号(空白对照药)，1包冲服，每日3次。对照组用炎宁胶囊2号(空白对照药)及尿感宁冲剂2号(治疗药)，服法同上。疗程14天。治疗前后记录中医湿热症候，检查尿白细胞、尿菌落数。安全性指标查肝、肾功能，血常规，心电图。

2.3疗效标准根据《中药新药临床研究指导原则》所定疗效标准判定疗效。治愈：临床症候全部消失，尿常规正常，尿菌落数为阴性，并于治疗结束后第2、6周复查尿菌为阴性。显效：临床症候基本消失(治后湿热症积分值降低80％以上)，尿常规正常或接近正常(白细胞≤±)，尿菌阴性。有效：临床症候改善(积分值降低50％以上)，尿常规改善(白细胞卅卄或卄±)，尿菌＜1万/ml。无效临床症候改善不明显(积分值降低50％以上)，尿常规无改善，尿菌＞1万/ml。

2.4治疗结果湿热症积分比较：治疗组治疗前8.33±2.88，治疗后3.75±2.07，前后比较P＜0.01；对照组治疗前8.78±2.95，治疗后5.97±2.42，前后比较P＞0.05。

尿菌落数改变：两组患者治疗前均为卅(≥10万/ml)，治疗组治疗后卅为2例，卄(＜10万/ml)为3例，+(＜1万/ml)为10例，尿菌阴性25例；对照组治疗后卅为4例，卄为10例，+为12例，阴性为14例。治疗组尿菌转阴率为62.5％，对照组35％，两组间比较有非常显著性差异(P＜0.01)。

临床疗效分析：经2周用药，治疗组40例中，治愈13例，显效11例，有效11例，无效5例，总有效率为87.5％；对照组40例中，治愈5例，显效8例，有效13例，无效14例，总有效率为65％。两组比较有显著性差异(P＜0.05)。

肾功能异常者治疗前后改变：治疗组中有12例，对照组中有3例治前血肌酐120ummol/L，治疗后这些患者的肌酐、尿素氮均为无明显改变(P＞0.05)。2.5复查及随访结查治疗结束后2周复查，治疗组35例(无效病例不再复查)中，3例尿菌＜1万/ml，尿白细胞(+)。对照组26例中，4例尿菌＜1万/ml，尿白细胞(+)。治疗结束后随机抽取治疗组14例(治愈4例，显效4例，有效6例)，随访6个月，尿菌培养及尿常规均为阴性，随访结束时测定肝、肾功能，血常规及心电图均无异常发现。

3肠炎药效学实验

3.1材料和方法

3.1.1仪器张力换能器和PowerLab数据记录与分析***(澳大利亚ADInstruments公司)；麦氏浴槽(江苏省张家港市青松生物医学仪器有限公司)；Lambda25型可见紫外分光光度计(美国PerkinElmer公司)。

3.1.2试剂和药品

番泻叶(上海雷允上中药饮片厂)；蓖麻油(哈药集团三精千鹤制药有限公司自制，批号20100801)；盐酸小檗碱(上海利生制药厂，批号：Y-001-0001)；羧甲基纤维素钠(CMCNa，中国医药集团上海化学试剂有限公司，批号F20100913，用蒸馏水配成所需浓度)；阿托品注射液(上海禾丰制药有限公司，批号100901，用0.5％CMCNa配成0.01mg/ml的溶液)；甲硫酸新斯的明注射液(规格：0.5mg/ml，上海信谊金朱药业有限公司，批号：100401)；氯化乙酰胆碱(中国医药集团上海化学试剂有限公司，批号20100122用三蒸水配成0.4mg/ml的溶液)；酚红(上海三爱思试剂有限公司，批号100112，用2％CMCNa配成0.7mg/L的溶液)。本发明炎宁胶囊用0.5％CMCNa碾磨混悬均匀，分别配成1.14、0.57、0.29g生药/ml的药液。

3.1.3动物SD大鼠药[清洁级，第二军医大学实验动物中心，动物合格证号：SCXK(沪)2010-0006]，雌雄各半，体重250-300g；ICR小鼠[清洁级，中国科学院上海实验动物中心，动物合格证号：SCXK(沪)2010-0010]，雌雄不限，体重18-22g；白色家兔[第二军医大学实验动物中心，动物合格证号：SCXK(沪)2010-0003]，雌雄各半，体重1.8-2.2kg。

3.1.4大鼠正常小肠推进运动实验取50只SD大鼠，按体重以数字化随机法分为5组，各组给药体积均为10ml/Kg体重。炎宁胶囊高、中低剂量组分别灌胃给予1.14、0.57、0.29g生药/ml的炎宁胶囊溶液，即高、中、低剂量组的给药剂量分别为11.4、5.7、2.9g生药/Kg体重。空白对照组灌胃给予0.5％CMCNa溶液，阳性对照组灌胃给予0.01mg/ml的阿托品溶液。每天给药1次，连续3d，进行碳末推进实验前，大鼠禁食过夜。末次给药1H后，灌胃给予活性炭混悬液(用0.5％CMCNa配成0.1g/ml混悬液)10ml/kg体重，30分钟后断颈处死大鼠，打开腹腔，分离肠系膜，剪取幽门至回盲部的肠管置于托盘上，轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度作为小肠总长度。以幽门至炭末前沿的距离作为炭末在肠内推进距离，计算炭末推进百分率和药物的抑制率。炭末推进率＝[炭末在肠内推进距离/小肠总长度]×100％，药物抑制率[(空白对照组炭末推进百分率-给药组炭末推进百分率)/空白对照组炭末推进百分率]×100％。结果：空白对照组平均炭末推进百分率为(72.01±5.77)％，炎宁胶囊高、中、低剂量组和阳性对照组(阿托品)的平均炭末推进百分率为(53.93±5.71)％、(65.98±7.94)％、(68.10±6.98)％和(66.24±5.61)％，抑制率分别为25.11％、8.37％、5.43％和8.01％。炎宁胶囊高、中剂量组和阳性对照组的炭末推进百分率与空白对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05，P＜0.001)，表明高、中剂量的炎宁胶囊和阿托品均能显著抑制大鼠正常小肠的推进运动。炎宁胶囊低剂量组的炭末推进百分率与空白对照组相比差异无统计学意义，但仍显示抑制趋势。

3.1.5小鼠推进机能亢进小肠运动的实验取ICR小鼠60只，各组给药体积均为15ml/Kg体重。给药组分别灌胃给予1.14、0.57、0.29g生药/ml的炎宁胶囊溶液，则给药剂量分别为17.1、8.6、4.3g生药/kg体重。模型对照组和空白对照组均灌胃给予0.5％CMCNa，阳性对照组灌胃给予0.01mg/ml的阿托品溶液。每天给药1次，连续3d。末次给药1H后，除空白对照组外，其作各组均皮下注射新斯的明0.1g/Kg体重造模，15分钟后进行炭末推进实验，计算炭末推进百分率和药物的抑制率。炭末推进百分率计算与3.1.4项下相同。药物的抑制率＝[(模型对照组炭末推进百分率-给药组炭末推进百分率)/模型对照组炭末推进百分率]×100％。

结果：炎宁胶囊对ICR小鼠推进机能亢进小肠运动的影响实验中，空白对照组和模型对照组的平均炭末推进百分率分别为(66.29±16.04)％和(77.46±13.94)％，炎宁胶囊高、中、低剂量组和阳性对照组(阿托品)的平均炭末推进百分率分别为(54.98±7.07)％、(69.20±7.25)％、(70.79±10.98)％和(74.79±15.38)％，药物的抑制率分别为29.02％、10.66％、8.61％和3.45％。皮下注射新斯的明0.1g/kg体重能引起ICR小鼠小肠推进机能亢进。炎宁胶囊高剂量组的炭末推进百分率与模型对照组相比差异有统计学意义，表明高剂量的炎宁胶囊能显著抑制新斯的明导致的推进机能亢进小肠运动机能，炎宁胶囊中、低剂量组及阳性对照组与空白对照组相比差异无统计学意义，但仍有抑制推进机能亢进小肠运动的趋势。

3.1.6家兔离体十二指肠平滑肌活动的实验取家兔40只，雌雄各半，按体重以数字化随机法分为5组，即空白对照组、阳性对照组(阿托品)及炎宁胶囊高、中、低剂量组，每组8只。所有家兔在实验前禁食24H，击头致死，立即剖腹，取出一段十二指肠，迅速于冷台氏液中保存。实验时剪取1.5cm肠段，悬吊在37℃、39ml台氏液的麦氏浴槽中(PH值7.2-7.4)，通100％氧气，静息张力0.5g，平衡0.5H后开始实验，经张力换能器测定肌内收缩力，用PowerLab进行数据记录与分析。(1)对家兔离体十二指肠平滑肌自发活动的影响，按上述操作后，描记正常收缩曲线，各组分别加入1.14、0.57、0.29g生药/ml的炎宁胶囊溶液，阿托品溶液和0.5％CMCNa各1ml，描记加药后的收缩曲线。(2)对氯化乙酰胆碱所致肠痉挛的影响按上述操作常规制备家兔离体肠标本，描记正常收缩曲线，然后在浴槽内加入0.4mg/ml氯化乙酰胆碱0.2ml(终浓度为2ug/ml)，引起肠管痉挛，待其平稳后，向浴槽内分别加入1.14、0.57、0.29g生药/ml炎宁胶囊药液、阿托品溶液和0.5％CMCNa各1ml，描记加药后的收缩曲线。阳性对照组和炎宁胶囊高、中剂量组对家兔平滑肌自发活动的收缩，张力与空白对照组相比差异有统计学意义，说明阿托品和高、中剂量的炎宁胶囊能显著抑制家兔离体十二指肠段自发活动。阳性对照组和炎宁胶囊高、中剂量组对氯化乙酰胆碱所致肠痉挛的收缩张力与空白对照组相比，差异有统计学意义，说明炎宁胶囊和阿托品均能显著抑制氯化乙酰胆碱所致肠痉挛，结果见表6表6炎宁胶囊对家兔离体十二指肠平滑肌收缩张力的影响(n＝8，g)

·P＜0.05，···P＜0.001，与空白对照组比较

3.1.7大鼠胃排空实验取SD大鼠40只，按体重以数字化随机法分为5组，各组给药体积均为10ml/kg体重。空白对照组灌胃给予0.5％CMCNa溶液，阳性对照组灌胃给予1mg/ml的阿托品溶液，炎宁胶囊高、中、低剂量组分别每天灌胃给予1.14、0.57、0.29g生药/ml炎宁胶囊药液，连续3d。胃排空实验前大鼠禁食过夜。末次给药后2H，每只大鼠灌胃给予0.07％酚红溶液1.5ml，15分钟后处死大鼠，立即取胃，将胃内容物洗在10ml蒸馏水中，3.0×10³g离心10分钟，取上清液546波长测定吸光度。另取10蒸馏水加入0.07％酚红溶液1.5ml，离心后测定其546nm吸光度作为基础值，计算胃内酚红残留率。胃内酚红残留率＝(各组A₅₄₆值/基础A₅₄₆值)×100％。

结果：空白对照组和阳性对照组大鼠的胃内残留率分别为(46.79±32.13)％和(97.06±24.96)％，两组相比差异有统计学显著意义(P＜0.01)，说明10mg/kg体重阿托品能显著抑制大鼠的胃排空功能。炎宁胶囊高、中、低剂量组的胃内残留率分别为(40.33±25.94)％、(27.75±10.96)％和(36.06±18.24)％，与空白对照组相比差异无统计学意义，说明各剂量的炎宁胶囊对SD大鼠的胃排空功能没有影响。

3.1.8止泻实验(1)番泻叶致泻实验造模前1d用番泻叶25g加水300ml，直火煎煮15分钟用纱布过滤，在水浴锅上浓缩成1g/ml溶液备用。取ICR小鼠60只，雌雄各半，按体重以数字化随机法分为6组，各组给药体积均为15ml/kg体重。空白对照组和模型对照组灌胃给予0.5％CMCNa溶液，阳性对照组灌胃给予1.0％的盐酸小檗碱溶液，炎宁胶囊高、中、低剂量给药分别灌胃给予浓度为1.14、0.57、0.29g生药/ml炎宁胶囊药液，即给药剂量分别为17.1、8.6、4.3g生药/kg体重，连续5d。除空白对照组外，各组于末次给药后1H口服番泻叶煎液0.02ml/g体重。每鼠单笼放置，笼底垫干净滤纸，每1小时换1次纸，计数5H内干粪数和湿粪数，计算稀便率。稀便率＝(稀便数/总便数)×100％。(2)蓖麻油致泻实验另取ICR小鼠60只，雌雄各半，按体重以数字化随机法分为6组。各组给药剂量与番泻叶致泻实验相同，每天给药1次，连续5d。除正常对照组外，其作各组均于末次给药后1H口服蓖麻油0.02ml/g体重，记录粪便数量并计算稀便率。

结果：(1)对番泻叶致泻的止泻效果空白对照组未见稀便，模型对照组的稀便率为(80.11±14.99)％，表明番泻叶煎液能诱导小鼠腹泻。阳性对照组(盐酸小檗碱)和炎宁胶囊高剂量组的稀便率分别为(51.43±23.61)％和(60.15±15.95)％，与模型对照组相比差异有统计学意义。炎宁胶囊中、低剂量组的稀便率分别为(73.34±13.75)％和(71.36±16.08)％，与模型对照组相比差异无统计学意义，但仍有止泻趋势，并呈一定的剂量相关性。(2)对蓖麻油致泻的止泻效果空白对照组未见稀便，模型对照组的稀便率为(81.44±14.23)％，表明蓖麻油致泻造模成功。炎宁胶囊高、中、低剂量组和阳性对照组的稀便率分别为(72.51±17.13)％、(71.01±13.20)％、(76.86±17.08)％、(71.03±10.43)％，与模型对照组相比差异无统计学意义，稀便率与剂量的相关性也不明显。

上述结果表明，本发明制备的炎宁胶囊在治疗上呼吸道感染，扁桃体炎，***，急性菌痢，肠炎症状时，相对于市售相同药效的其它药品具有活性成分提取完全、服用剂量小、崩解速度快、批量生产节约能源质量稳定等显著优点，同时微米技术加工的药粉粒度更加细微均匀，使药物的总表面积增加，服用后与胃肠黏膜的接触面积也随之增加，能更好地在胃肠道里分散、溶解和吸收，大大提高了药物的生物利用度。

Claims (3)

1.一种治疗上呼吸道感染，扁桃体炎，***，急性菌痢，肠炎的中药，其特征在于取鹿茸草1953.12g、白花蛇舌草976.56g、鸭跖草976.56g，采用二氧化碳超临界萃取法得上清液，滤液浓缩、干燥，其中萃取压力20-50Mpa，萃取温度30-60℃，分离器压力5-10Mpa，分离器温度40-60℃，分离时间2-6小时，二氧化碳流量为20-30L/H；采用气流粉碎机将浸膏粉碎成粒径＜50微米超细粉体，加入赋形剂混匀制成1000粒。

2.根据权利要求1所述中药的制备方法，其特征在于二氧化碳超临界萃取法的萃取压力20-50Mpa，萃取温度30-60℃，分离器压力5-10Mpa，分离器温度40-60℃，分离时间2-6小时，二氧化碳流量为20-30L/H。

3.根据权利要求1所述中药的制备方法，其特征在于气流粉碎机将浸膏粉碎成粒径＜50微米的超细粉体。