CN102250174A

CN102250174A - 一种从迎春花叶中提取迎春花素的方法

Info

Publication number: CN102250174A
Application number: CN2011102088009A
Authority: CN
Inventors: 卢成英; 罗玉燕; 李克刚; 陈功锡; 于华忠
Original assignee: Jishou University
Current assignee: Jishou University
Priority date: 2011-07-25
Filing date: 2011-07-25
Publication date: 2011-11-23

Abstract

本发明涉及一种从迎春花叶中提取纯化迎春花素的方法，属植物提取物技术领域。采用溶剂提取、过滤、滤液浓缩、溶剂萃取、硅胶柱层析、洗脱液浓缩、结晶等方法，从迎春花叶中提取纯化迎春花素。本发明具有较为简便、易于操控、生产周期短、生产成本低、提取溶剂可回收利用等优点。纯化物经理化检测和波谱分析数据鉴定为迎春花素（jasminin），该单体具有较强的抑菌活性，可作为抗菌制剂原料或抗菌先导化合物进行深度开发利用研究。

Description

一种从迎春花叶中提取迎春花素的方法

技术领域

本发明涉及植物有效成分提取工艺领域，具体涉及一种有抑菌作用的迎春花叶活性化合物单体提取工艺。

背景技术

迎春花(Jasminum nudiflorum Lindl. )系木犀科茉莉花属植物，其生命力极强，早春春寒料俏之时即绽放出串串金黄色花朵，为我国优秀的园林绿化美化品种，长江流域各地域广有栽培。《本草纲目》中述迎春花治肿毒恶疮，亦为湘西民间常用草药，其叶苦、涩、平、无毒，可解毒清热、止血、止痛，用于治疗跌打损伤、外伤出血、口腔炎、妇科炎症、痈疖肿毒和外阴搔痒等症。花常作茶饮，其味甘、涩、平，清热利尿、解毒，可治疗头痛发热、泌尿***感染和下肢溃疡。文献记载迎春花的枝、叶含丁香甙（Syringin）、迎春花苷(Jasmiflorin)和迎春花苦味质(Jasmipierin)。国外已有迎春花叶化学组分的报道，但是对迎春花化学组分的生物活性及其活性物提取分离的研究尚未见报道，为此申请者检测了迎春花叶的抑菌活性并对活性物进行提取分离研究，从迎春花叶中分离到一具较强抑菌活性的单体，经理化检测和HPLC、IR、¹H-NMR、¹³C-NMR、EI-MS、DEPT等波谱数据分析确认为迎春花素。已知迎春花素结构如下:

在此研究基础上重复、改进、扩大实验，获迎春花素提取纯化新技术。

发明内容

本发明提供了一种从迎春花叶中提取高纯迎春花素（jasminin）的方法，该方法操作简便、生产周期短、成本低廉、易于进行产业化生产。

本发明的实施方案为：一种从迎春花叶中提取迎春花素的方法，包括以下步骤：

（1）迎春花叶45℃烘干，粉碎，过40目筛，加入80%~90%乙醇溶液浸提3次，浸提温度50～60℃，收集提取液，真空浓缩，回收浓缩液；

（2）浓缩液用石油醚常温萃取3～5次、所得水相再用乙酸乙酯常温萃取3～5次，每次萃取时间为2h；

（3）收集乙酸乙酯相萃取物，真空浓缩；

（4）将浓缩物进行硅胶柱层析，氯仿-甲醇溶剂梯度洗脱，收集洗脱液浓缩；

（5）浓缩物乙醇溶解，结晶，干燥得到白色结晶化合物，即为目标化合物。

步骤（1）中，3次浸提时间分别为2h、1h、1h，每次料液质量体积比为1g:6～8ml。浸提最适温度为60℃。

步骤（3）中，浓缩温度为50～60℃。

步骤（4）中，氯仿-甲醇梯度洗脱时，氯仿和甲醇的体积比分别为2:1、3:1、4:1，收集氯仿和甲醇体积比为3:1时所得洗脱液进行浓缩。

本发明产品经HPLC分析确认为迎春花素，纯度≥95%。产品经平板纸片法、试管法检测具有较强的抑菌活性。本发明的产品可用于制备抗菌制剂、原料或抗菌先导化合物进行深度开发利用的研究。

本发明的创新点如下：（1）本发明采用的系列方法技术较为简便、易于操控、生产周期短、生产成本低；（2）本发明提取的迎春花素经HPLC分析，纯度≥95%，具有较高的抑菌活性；（3）提取溶剂材料可回收利用，对环境污染很小。

具体实施方案

以下以具体实施例来说明本发明的技术方案，但本发明的保护范围不限于此。

以下实施例中所述产品得率计算方式为：

产品得率（%）=产品质量/迎春花叶原料质量×100。

以下实施例中所述产品中迎春花素高效液相色谱（HPLC）检测条件为：色谱柱Waters YWG C₁₈(5μm, 3.9mm × 150mm)；流动相:乙睛：水=30：70；柱温为室温；检测波长：240nm；进样量 10μl；流速 1.0ml/min。

实施例1：

将250g迎春花叶粉，加入80%乙醇2000ml， 60℃浸提2h、抽滤，取滤渣加80%乙醇1000ml第2次提取， 60℃1h、抽滤，取滤渣加80%乙醇1000ml第3次提取， 60℃1h、抽滤，合并3次滤液，浓缩，浓缩温度≤55℃，浓缩至无乙醇。浓缩液中加等量石油醚萃取3-5次，取下层水相，加等量乙酸乙酯萃取，重复3-5次，合并乙酸乙酯萃取液，旋转蒸发仪浓缩。浓缩物进行硅胶柱层析，氯仿-甲醇梯度洗脱，收集洗脱液浓缩。浓缩物加90%乙醇析晶。重结晶2-3次得到的白色晶体3.15g。产品得率为1.26%，经HPLC检测迎春花素含量为98.06%。

实施例2

迎春花叶粉250g，加入85%乙醇2000ml， 60℃浸提2h，抽滤，取滤渣加85%乙醇1000ml第2次提取， 60℃、1h，抽滤，滤渣加85%乙醇1000ml第3次提取， 70℃ 1h、抽滤，合并3次滤液，浓缩，浓缩温度≤55℃，浓缩至无乙醇。浓缩物加等量石油醚萃取5次，取下层水相，加等量乙酸乙酯萃取，重复5次，合并乙酸乙酯萃取液，旋转蒸发仪浓缩至干燥粉末状。浓缩物进行硅胶柱层析，氯仿-甲醇梯度洗脱，收集洗脱液浓缩。浓缩物加90%乙醇析晶。重结晶2-3次得到的白色晶体3.4g，产品得率为1.36%，经HPLC检测迎春花素含量为99.17%。

实施例3

迎春花叶粉250g，加90%乙醇2000ml， 60℃浸提2h，抽滤，取滤渣加90%乙醇1000ml第2次提取， 60℃1h，抽滤，滤渣加90%乙醇1000ml第3次提取， 60℃1h、抽滤，合并3次滤液，浓缩，浓缩温度≤55℃，浓缩至无乙醇,浓缩物加等量的石油醚的进行萃取3次，取下层水相，加等量乙酸乙酯萃取，重复3次，合并乙酸乙酯萃取液，旋转蒸发仪浓缩。浓缩物硅胶柱层析，氯仿-甲醇梯度洗脱，收集洗脱液浓缩。浓缩物加90%乙醇析晶。重结晶2-3次得到的白色晶体3.3g，产品得率为1.32%，经HPLC检测迎春花素含量为98.62%。

Claims

1.一种从迎春花叶中提取迎春花素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（2）浓缩液用石油醚常温萃取3～5次，所得水相再用乙酸乙酯常温萃取3～5次，每次萃取时间为2h；

（3）收集乙酸乙酯相萃取物，真空浓缩；

2.根据权利要求1所述的从迎春花叶中提取迎春花素的方法，其特征在于，步骤（1）中，3次浸提时间分别为2h、1h、1h，每次料液质量体积比为1g:6～8ml。

3.根据权利要求1或2所述的从迎春花叶中提取迎春花素的方法，其特征在于，浸提温度为60℃。

4.根据权利要求1所述的从迎春花叶中提取迎春花素的方法，其特征在于，步骤（3）中，浓缩温度为50～60℃。

5.根据权利要求1所述的从迎春花叶中提取迎春花素的方法，其特征在于，步骤（4）中，氯仿-甲醇梯度洗脱时，氯仿和甲醇的体积比分别为2:1、2.5:1、3:1，收集氯仿和甲醇体积比为3:1时所得洗脱液进行浓缩。