CN102242152B

CN102242152B - 腐植酸活性组分、其制备方法、应用及含其的药物组合物

Info

Publication number: CN102242152B
Application number: CN201110120205.XA
Authority: CN
Inventors: 曾宪成; 周霞萍; 韩立新; 谢兆佳; 史萍; 刘建文
Original assignee: East China University of Science and Technology
Current assignee: Heilongjiang Zhenmin Biotechnology Co ltd; Shanghai Zhen Derivative Technology Co Ltd
Priority date: 2011-05-10
Filing date: 2011-05-10
Publication date: 2014-04-16
Anticipated expiration: 2031-05-10
Also published as: CN102242152A

Abstract

本发明公开了一种腐植酸活性组分，其制备方法、应用以及含其的药物组合物。本发明通过天然腐植酸的生物降解，或者通过选择植物原料，运用生化腐植酸技术富集，得到了该腐植酸活性组分。本发明的腐植酸活性组分，能够止血又活血，抗炎，抗风湿，可预防或***；并且其与云南白药、普通腐植酸相比，止血活血效果更佳，且具有化瘀止血的功效。

Description

腐植酸活性组分、其制备方法、应用及含其的药物组合物

技术领域

本发明具体的涉及一种腐植酸活性组分，其制备方法、应用以及含其的药物组合物。

背景技术

据调查，现有可止血又可活血的中药，主要有“三七”药材。“三七”中既有止血的“三七素”成分，又有活血的“三七总皂苷”成分。但是用于止血或活血治疗瘀血症，与药物量存在一定的量效关系。不然，会适得其反。

抗炎、抗风湿的药物种类较多，如有糖皮质激素、非甾体抗炎药等。由于口服激素或布洛芬、消炎痛等非甾体抗炎药对胃肠道和肝、肾脏有副作用，不能长期使用。人们对植物类抗炎、抗风湿的药物开发愈加重视起来。如：华东理工大学倪力军，上海中医药大学附属曙光医院史万忠等的研究工作显示，金银花、柴胡等中药也有布洛芬的功能(中成药，2007，29(8)：1217-1221)。

富含多官能团(药效团)，带有萜类、甾类、雌酮等活性组分的天然腐植酸主要存在于年青煤(泥炭、褐煤)中(肖善学，王曾辉。腐植酸中甾、萜系生理活性物质的研究[J].腐植酸，1998(1)：21～23；Jin Sung Ra，Seok-YoungOh，Byung Cheun Lee，Sang Don Kim.The effect of suspended particles coatedby humic acid on the toxicity of pharmaceuticals，estrogens，and phenoliccompounds[J].Environment International，2008，(34)184～192)，它除了包含天然腐植酸的有效活性组分萜、甾类外，还可以含有花青素、槲皮素、皂苷等组分。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供了一种与现有技术完全不同的腐植酸活性组分，其制备方法、应用以及含其的药物组合物。本发明的腐植酸活性组分，能够止血又活血，抗炎，抗风湿，可预防或***；并且其与普通的腐植酸相比，止血活血效果更佳，且具有化瘀止血的功效。

本发明人发现，通过天然腐植酸的生物降解，或者通过选择植物原料，运用生化腐植酸技术富集，可得到一种腐植酸活性组分。该活性组分可结合少量其他中药组分和/或Fe-C微型原电池组合，形成止血又活血，抗炎又抗风湿疾病药剂、膏药或热敷药贴。本发明的制备工艺简单，且避免了使用大量有机溶剂和加热条件的使用。

为达到上述目的，本发明运用放线菌、酵母菌种的脂肪酶、过氧化氢酶降解天然腐植酸，获取其活性组分；或者通过植物原料的选择、配伍，运用酶的生化腐植酸过程得以富集，并可通过元素、LC-MS等检测，确定脂溶、亲水基团比的，用于医院等临床应用。

因此，本发明涉及一种腐植酸活性组分的制备方法，其为下述任一种方法：

方法1：将数均分子量1000-30000(优选数均分子量1000～5000)的泥炭天然腐植酸或褐煤天然腐植酸用脂肪酶和过氧化氢酶进行降解，得到数均分子量300-800的组分。其中，脂肪酶和过氧化氢酶通过里氏木霉、琥珀酸拟杆菌、酵母菌或放线菌筛选而得，脂肪酶和过氧化氢酶的质量比例为1∶10～1∶5(优选1∶5～1∶2)，脂肪酶和过氧化氢酶的总量与泥炭天然腐植酸或褐煤天然腐植酸的质量比例为(0.01-0.50)∶(95-99.9)；降解的温度为10-55℃(优选20-40℃)，时间为36-105小时(优选60-85小时)，脂肪酶和过氧化氢酶在降解前的混合物中的质量浓度为0.3-0.8％；

方法2：将银杏叶(或洋葱皮)，芦荟叶(或辣椒叶)，以及薄荷的叶、茎和/或根，在脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶，以及上述三种酶的培养基作用下，制备生化腐植酸；其中，脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶通过康宁木霉或者酵母菌的培养制得，脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶的总量与银杏叶(或洋葱皮)、芦荟叶(或辣椒叶)以及薄荷叶、茎和/或根的总量的质量比例为(0.02-0.60)∶(94-99.8)；脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶的质量比例为(0.2-5)∶(0.5-5)∶(0.3-1)(优选(1-5)∶(1-2.5)∶(0.5-1)；银杏叶(或洋葱皮)，芦荟叶(或辣椒叶)与“薄荷叶、茎和/或根”的质量比为(0.01-0.3)∶(0.03-0.6)∶(0.02-0.1)；作用的温度为10-55℃，时间为36-96小时。

方法3：将数均分子量1000-30000(优选数均分子量1000～5000)的泥炭天然腐植酸或褐煤天然腐植酸，在脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶多种酶，以及上述三种酶的培养基，制备生化腐植酸；其中，脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶通过康宁木霉或者酵母菌的培养制得，脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶的总量与天然腐植酸或褐煤天然腐植酸的质量比例为(0.3-0.80)∶(92-97)；脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶的质量比例为(0.2-5)∶(0.5-5)∶(0.3-1)，优选(1-5)∶(1-2.5)∶(0.5-1)；作用的温度为10-55℃，时间为36-96小时。

方法1中，所述的泥炭天然腐植酸或褐煤天然腐植酸可为本领域常规的泥炭天然腐植酸或褐煤天然腐植酸。所述的脂肪酶和过氧化氢酶通过里氏木霉、琥珀酸拟杆菌或酵母菌进行筛选的方法可按照本领域此类筛选的常规方法进行，例如，可以参照文献“张陈云，刘金福，王娜，王步，冬枣果酒酿造酵母的分离筛选研究.中国酿造，2010(8)：43-47”中的方法进行。所述的脂肪酶和过氧化氢酶的总量与泥炭天然腐植酸或褐煤天然腐植酸的质量比例较佳的为(0.1-0.5)∶(95-99)。方法1中，对于不能降解的级分，可进行二次降解，或用作其他吸附介质。

方法2中，脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶的总量与银杏叶(或洋葱皮)、芦荟叶(或辣椒叶)以及薄荷叶、茎和/或根的总量的比例较佳的为(0.2-0.60)∶(95-98)。所述的脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶通过康宁木霉或者酵母菌的培养的方法为本领域常规方法，可参照文献“邹水洋、肖凯军等，康宁木霉液态发酵高产纤维素酶和木聚糖酶，华南理工大学，2009(6)：69-73”，“王锡彬吴周新等，碳源对一株酵母菌产生纤维素酶的影响，中国食品学报，2003(增刊)：53-57”，或“陈勇，李凤梅，杜德红.木聚糖酶产生菌的筛选.食品与药品，2009，11，(7)：32-35”中的方法进行。

方法2或方法3中，所述的酶的培养基可为本领域常规的用于培养脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶的培养基。所述的培养基较佳的为碳酸钾、尿素、过磷酸钙和水的混合物，碳酸钾、尿素和过磷酸钙在培养基中的浓度分别较佳的为5～15g/L，2～10g/L和5～20g/L，更佳的为10～15g/L，5～10g/L，15～20g/L。该培养基与“银杏叶(或洋葱皮)、芦荟叶(或辣椒叶)以及薄荷叶、茎和/或根的总量”的质量比例较佳的为0.01～0.5∶99.9～95.0，优选0.05～0.1∶99.5～99.0。

方法3中，所述的脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶通过康宁木霉或者酵母菌的培养的方法为本领域常规方法，可参照文献“邹水洋、肖凯军等，康宁木霉液态发酵高产纤维素酶和木聚糖酶，华南理工大学，2009(6)：69-73”，“王锡彬吴周新等，碳源对一株酵母菌产生纤维素酶的影响，中国食品学报，2003(增刊)：53-57”，或“陈勇，李凤梅，杜德红.木聚糖酶产生菌的筛选.食品与药品，2009，11，(7)：32-35”中的方法进行。

方法3中，脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶的总量与泥炭或褐煤天然腐植酸的质量比例较佳的为(0.3-0.80)∶(92-97)。

较佳的，方法1～3任一方法得到的腐植酸活性组分的脂溶/亲水基团比在1/15-16/2。可采用元素分析，LC-MS检测，并通过计算确定该比例(检测和计算方法均为常规方法，可参照文献“顾鑫荣等九合维生素丸中脂溶性维生素的测定，品牌与标准化，2010(6)：57-58；成绍鑫，腐植酸物质概论，化学工业出版社，2007年”进行。若经过上述方法的检测，腐植酸活性组分的脂溶/亲水基团比未在1/15-16/2范围，可以通过添加-COOH和/或-OH等亲水性基团含量高的小分子黄腐酸，或者添加疏水性强的棕腐酸或者黑腐酸进行调整。

方法1～3制得的腐植酸活性组分均为含活性组分半倍萜、烷甾醇的腐植酸活性组分。

本发明进一步涉及上述制备方法制得的腐植酸活性组分。

本发明的腐植酸活性组分具有止血、活血、抗炎和抗风湿的功效。此外，本发明的腐植酸活性组分对烫伤止血活血、减少疤痕，外用于HIV/AIDS等重大疾病晚期皮肤病变的防治，调节免疫力等也将有积极的贡献。

因此，本发明还涉及上述腐植酸活性组分在制备止血、活血、抗炎、抗风湿、或者预防或***的药物中的应用。

本发明的腐植酸活性组分可与药学上可接受的载体制成各种形式的药物组合物。所述药学上可接受的载体包括但不限于各种常用药用辅料(如稀释剂、润滑剂、崩解剂、粘合剂和赋形剂等)。根据治疗目的，可将药物组合物制成各种类型的给药单位剂型，如片剂、胶囊剂、丸剂、粉剂、溶液剂、悬浮液、乳液剂、乳膏剂、糖浆剂、颗粒剂、栓剂和注射剂(溶液及悬浮液)等。本发明的腐植酸活性组分还可以制成外伤或手术用止血、活血的辅助药剂；抗炎、抗风湿或治红斑狼疮(如类风湿关节炎或SLE等)的膏药或热敷药贴。

因此本发明还涉及包含上述腐植酸活性组分的药物组合物。

所述的药物组合物较佳的为药剂或膏药，其包含微晶蜡、薄荷、医用纤维素、氧化锌以及上述腐植酸活性组分。其中，所述的腐植酸活性组分的质量浓度较佳的为0.5～5％，微晶蜡的质量浓度较佳的为1～8％，薄荷的质量浓度较佳的为0.3～2％，氧化锌的质量浓度较佳的为0.1～10％，医用纤维素的质量浓度较佳的为50～95％。所述的药剂或膏药可由下列方法制得：在5-35℃温度条件下，将上述各成分制成药剂或膏药。其可达到止血、活血的效果。其中，所述的微晶蜡可为从泥炭或褐煤中提取得到的微晶蜡，或者医用的微晶蜡。

较佳的，所述的药物组合物还可为热敷贴，其包含原料层，明胶层和无纺布袋。其中，原料层中包含上述腐植酸活性组分、甘草、铁粉和石墨粉，还可含有花青素、保水剂、氯化钠、氯化钾中的一种或多种。其中，原料层、明胶层和无纺布袋的质量比较佳的为(5～15)∶(0.1～1)∶(0.1～5)，或者(1.2～2.5)∶(0.3～0.9)∶(0.5～2.5)，后者质量比更佳。原料层中，所述的腐植酸活性组分∶甘草∶铁粉∶石墨粉(质量比)＝(0.20～0.30)∶(0.03～0.10)∶(0.30～0.55)∶(0.5～1.5)。当原料层还包含花青素、保水剂、氯化钠、氯化钾中的一种或多种时，所述的腐植酸活性组分：(甘草+花青素)∶铁粉∶石墨粉、保水剂∶氯化钠或氯化钾(质量比)＝(0.20～0.30)∶(0.03～0.10)∶(0.30～0.55)∶(0.5～1.5)∶(1～3)∶(0.2～1)(当不含其中某成分时，该成分含量即为0)。所述的保水剂较佳的为腐植酸-丙烯酸胺保水剂或腐植酸-丙烯酸保水剂。该热敷贴可通过压制法制得，用于抗类风湿关节炎，治红斑狼疮(SLE)等。

本发明中，所述的泥炭、褐煤为常规的泥炭或褐煤原料，可取自内蒙武川和黑龙江。

所述的植物原料银杏、芦荟、薄荷、以及枣的叶、茎、根等，均为常规原料。

本发明中，上述包含腐植酸活性组分的药物组合物，能够止血又活血，抗炎、抗风湿。

在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。

除特殊说明外，本发明所用试剂和原料均市售可得。

本发明的积极进步效果在于：本发明的腐植酸活性组分，能够止血又活血，抗炎，抗风湿，可预防或***；并且其与普通的腐植酸相比，止血活血效果更佳，且具有化瘀止血的功效。

附图说明

图1为实施例2的方法1得到的活性组分中所含有的C-27的甾体结构式，通过图2与标准谱对照的红外光谱法和元素、糖苷测定检测出来的。

图2为对实施例2的方法1得到的腐植酸活性组分，按照与标准谱对照的红外光谱法测得的图谱。

图3为对实施例1中的方法1得到的腐植酸活性组分，按照与标准谱对照的红外光谱法测得的图谱。

图4为对实施例3得到的腐植酸活性组分，按照与标准谱对照的红外光谱法测得的图谱。

具体实施方式

下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。

下述各实施例中，各种生物酶是由华东理工大学国家生物工程重点实验室筛选的。所述的元素、LC-MS等检测由华东理工大学国家生物工程重点实验室及分析测试中心完成。所述的植物原料银杏、芦荟、薄荷、以及枣的叶、茎、根等，由发明人自购和加工(芦荟、银杏、薄荷叶等分别购自上海百路达药业科技园、江苏济川药业园等)，将洗过的鲜叶阴干至外表无水分，机械损伤后装至密封装置中，分别置于烘箱中，在35℃(5h)、37℃(6h)、41℃(10h)、43℃(15h)、47℃(20h)条件下，采用康宁木霉、酵母菌及其脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶进行生物发酵和酶催化，三种酶之间的比例为1∶0.5∶1，芦荟叶以及薄荷叶、茎和/或根总量比例为(1∶99)；银杏叶，芦荟叶与薄荷叶、茎和/或根的质量比为(1∶0.6∶0.1)；在温度35℃，时间为76小时，如方法2制得的生化腐植酸活性组分为含活性组分半倍萜、烷甾醇的生化腐植酸活性组分。然后，采用从泥炭或褐煤中提取得到的微晶蜡，或者医用的微晶蜡，制成药膏、热敷药贴。

实施例1.腐植酸活性组分的制备及其止血活血的效果实验

方法1：取泥炭天然腐植酸(数均分子量2000)100份，利用里氏木霉、琥珀酸拟杆菌中的脂肪酶占总量(即天然腐植酸+脂肪酶+过氧化氢酶的总量)0.05％(质量百分比)，过氧化氢酶(脂肪酶和过氧化氢酶可以按照文献“张陈云，刘金福，王娜，王步，冬枣果酒酿造酵母的分离筛选研究.中国酿造，2010(8)：43-47”中的方法从里氏木霉、琥珀酸拟杆菌中筛选)占总量(指天然腐植酸+脂肪酶+过氧化氢酶的总量)的0.05％(质量百分比)，进行生物降解，温度35℃，时间为65小时，脂肪酶质量浓度为0.2％，过氧化氢酶的质量浓度为0.3％，获取数均分子量360的腐植酸活性组分等。对该活性组分按照与标准谱对照的红外光谱法进行检测，结果见图3。参考文献“王利勤等.C21甾体皂苷inamoside E的结构解析，云南师范大学学报，2008，28(6)：44-49”对该图进行解析，可知：该图第一条线的特征物未检出；第二、第三、第四条线含有无机矿物质特征；第五条线的特征物为木质素磺酸钠的相似物(带萜类的腐植酸降解物)；第六条线的特征物为带甾类的活性组分C₂₁H₄₇N₃O₁₀，第七条线的特征物为胶质体(腐植酸胶质体—鞣质)。因此，该活性组分中包含甾体皂苷C₂₁H₄₇N₃O₁₀。

然后将该腐植酸活性组分灌装成药剂(灌装方法参考文献：王林宽，施雯宇，陈筠等.A/B型液体药剂自动配制过滤灌装机的研制.医疗卫生装备，2008(10)：17-20)。该药剂中，腐植酸活性组分的含量为0.03g/kg，蒸馏水含量为99.97g/kg。将该药剂用于直肠癌开刀的患者，可收敛伤口、加速活血，促进伤口愈合，比空白组的止血效果高出61％、比云南白药组的止血效果高出22％(见下表1)。

方法2：取银杏叶、芦荟叶、(薄荷叶、茎、根)的重量比0.3∶0.6∶0.1，添加来自康宁木霉中的纤维素酶(邹水洋；郭祀远康宁木霉QF-02纤维素酶酶学性质的研究.生物技术通报，2010(5)：203-206；)0.15百分比，碳酸钾、尿素和过磷酸钙三种培养基为10g/L，10g/L，15g/L(这三个浓度值的分母是水的体积)，在温度35℃，时间72hr，由生化腐植酸技术富集，制得腐植酸活性组分。采用元素、LC-MS等检测、确定生化腐植酸技术富集的产物的脂溶/亲水基团比在2/6，如上述方法1灌装成止血、活血药剂用于直肠癌开刀患者，可收敛伤口，与蒸馏水空白组、云南白药组对比，效果明显(见表2)。

表1

表2

*上述表1和表2为不同药物在北京肛肠医院的直肠癌手术病人的治疗中，进行临床试验应用的效果数据。

实施例2腐植酸活性组分的制备及其收敛活血、治类风湿关节炎的效果实验

方法1：取泥炭天然腐植酸(数均分子量3000)200份，分别取来自0.35份酵母菌和0.3份产碱杆菌中的脂肪酶、过氧化氢酶(参照“胡杨等.过氧化氢酶与酵母细胞的共固定化湖南农学院学报，2001，21(2)：164-166”进行操作各0.06份，通过降解(降解温度25-65℃，时间48-102hr)，制得腐植酸活性组分。对该活性组分进行分析(红外图谱见图2)，图2中，第一条线的特征物未检出；第二条线的特征物为带甾类的C-27胆甾烷；第三条线的特征物为木质素磺酸钠的相似物(带萜类的腐植酸降解物)；第四条线的特征物为蜡质组分；第五条线的特征物为胶质体(腐植酸胶质体—鞣质)。因此确认其中包含数均分子量850的C₂₇H₄₂O₁₀(胆甾烷)，即C-27的甾体(结构见图1)。然后将上述腐植酸活性组分制成可涂抹的膏药，该膏药具有抗炎、收敛且活血愈合的功效。

方法2：取洋葱皮，辣椒叶，(薄荷叶、茎和根)的重量比0.5∶0.2∶0.3，在温度55℃，时间65hr，碳酸钾、尿素和过磷酸钙在水溶液中的含量分别为12g/L，15g/L，20g/L的条件下，运用生化腐植酸技术(纤维素酶，过氧化氢酶分别以2∶1，10g/L)富集，采用元素、LC-MS检测，脂溶/亲水基团比在5/2，在25℃温度下，采用上海佳河包装设备有限公司GF-5膏装机，消毒瓶装制成可涂抹的风湿膏药(其中腐植酸活性组分的质量浓度5％，微晶蜡的质量浓度为6％，薄荷的质量浓度为2％，氧化锌7％，医用纤维素及内在水分80％)。该膏药可抗炎、收敛愈合。与空白组、泥炭腐植酸降解物组对比，效果见表3。

表3

实施例3腐植酸活性组分的制备及其抗炎、活血化瘀、治***性红斑踉跄的效果实验

方法3：取泥炭天然腐植酸(数均分子量1500)300份，同时取重量比0.5∶0.2的放线菌、酵母菌中的纤维素酶(邵继海；胡俊林；孙毓临；何绍江；冯新梅.一株产耐热纤维素酶放线菌的固体发酵研究.固体发酵，2006(24)：37-39)，在温度55℃，时间65hr的生化腐植酸技术富集，培养基——碳酸钾、尿素和过磷酸钙在水溶液中的含量分别为10g/L，10g/L，15g/L的条件下，并采用LC-MS、NMR检测、计算脂溶/亲水基团比在5/2。将腐植酸活性组分质量份额28份、甘草-花青素5+2份、铁粉48份、石墨粉12份、腐植酸-丙烯酸胺保水剂(1份)(保水剂制备参考：杜春霖；金莹；刘波.高吸水性树脂的合成及性能研究.辽宁化工，2007(3)：167-170)、铚石3份、氯化钠1份简单组合成原(微)电池{铁(负极)—碳(正极)—电解质是水和无机盐：负极(铁)2Fe-4e＝2Fe²⁺(被氧化)正极(碳)2H₂O+O₂+4e＝4OH^-(被还原)}，同上述原料层，明胶层和无纺布袋(三层的质量比为10∶1∶2)组装成热敷帖。与口服、注射用药相比，更加安全。

表4

Claims

1.一种腐植酸活性组分的制备方法，其为下述任一种方法：

方法1：将数均分子量1000-30000的泥炭天然腐植酸或褐煤天然腐植酸用脂肪酶和过氧化氢酶进行降解，得到数均分子量300-800的组分；其中，脂肪酶和过氧化氢酶通过里氏木霉、琥珀酸拟杆菌、酵母菌或放线菌筛选并培养制得，脂肪酶和过氧化氢酶的质量比例为1:10～1:5，脂肪酶和过氧化氢酶的总量与泥炭天然腐植酸或褐煤天然腐植酸的质量比例为（0.01-0.50）：（95-99.9）；降解的温度为10-55℃，时间为36-105小时，脂肪酶和过氧化氢酶在降解前的混合物中的质量浓度为0.3-0.8%；

方法2：将银杏叶或洋葱皮，芦荟叶或辣椒叶，以及薄荷的叶、茎和/或根，在脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶，以及生产上述三种酶的微生物的培养基作用下，制备生化腐植酸；其中，脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶通过康宁木霉或者酵母菌的培养制得，脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶的总量与银杏叶或洋葱皮、芦荟叶或辣椒叶以及薄荷叶、茎和/或根的总量的质量比例为（0.02-0.60）:（94-99.8）；脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶的质量比例为（0.2-5）：（0.5-5）：（0.3-1）；银杏叶或洋葱皮，芦荟叶或辣椒叶与“薄荷叶、茎和/或根”的质量比为（0.01-0.3）：（0.03-0.6）：（0.02-0.1）；作用的温度为10-55℃，时间为36-96小时；

方法3：将数均分子量1000-30000的泥炭天然腐植酸或褐煤天然腐植酸，在脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶，以及生产上述三种酶的微生物的培养基作用下，制备生化腐植酸；其中，脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶通过康宁木霉或者酵母菌的培养制得，脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶的总量与泥炭或褐煤天然腐植酸的质量比例为（0.3-0.80）：（92-97）；脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶的质量比例为（0.2-5）：（0.5-5）：（0.3-1）；作用的温度为10-55℃，时间为36-96小时；所述的培养基为碳酸钾、尿素、过磷酸钙和水的混合物，碳酸钾、尿素和过磷酸钙在培养基中的浓度分别为5～15g/L，2～10g/L和5～20g/L。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：

方法1中，泥炭天然腐植酸或褐煤天然腐植酸的数均分子量为1000～5000；所述的脂肪酶和过氧化氢酶的质量比例为1:5；降解的温度为20-40℃，降解的时间为60-85小时；所述的脂肪酶和过氧化氢酶的总量与泥炭天然腐植酸或褐煤天然腐植酸的质量比例为（0.1-0.5）：（95-99）；

方法2中：脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶的质量比例为（1-5）：（1-2.5）：（0.5-1）；脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶的总量与银杏叶或洋葱皮、芦荟叶或辣椒叶以及薄荷叶、茎和/或根的总量的比例为（0.2-0.60）：（95-98）；

方法3中，泥炭天然腐植酸或褐煤天然腐植酸的数均分子量为1000～5000；脂肪酶、过氧化氢酶和纤维素酶的质量比例为（1-5）：（1-2.5）：（0.5-1）；

方法2中，所述的培养基为碳酸钾、尿素、过磷酸钙和水的混合物，碳酸钾、尿素和过磷酸钙在培养基中的浓度分别为5～15g/L，2～10g/L和5～20g/L；该培养基与“银杏叶或洋葱皮、芦荟叶或辣椒叶以及薄荷叶、茎和/或根的总量”的质量比例为（0.01～0.5）：（99.9～95.0）。

3.如权利要求1或2所述的制备方法制得的腐植酸活性组分。

4.权利要求3所述的腐植酸活性组分在制备止血或活血的药物中的应用。

5.包含权利要求3所述的腐植酸活性组分的药物组合物。

6.如权利要求5所述的药物组合物，其特征在于：所述的药物组合物为药剂或膏药，其包含微晶蜡、薄荷、医用纤维素、氧化锌以及权利要求3所述的腐植酸活性组分；

或者，所述的药物组合物为热敷贴，其包含原料层，明胶层和无纺布袋；所述的原料层中包含权利要求3所述的腐植酸活性组分、甘草、铁粉和石墨粉；原料层中，所述的腐植酸活性组分：甘草：铁粉：石墨粉的质量比为（0.20～0.30）：（0.03～0.10）：（0.30～0.55）：（0.5～1.5）。

7.如权利要求6所述的药物组合物，其特征在于：

所述的药剂或膏药中，所述的腐植酸活性组分的质量浓度为0.5～5%，微晶蜡的质量浓度为1～8%，薄荷的质量浓度为0.3～2%，氧化锌的质量浓度为0.1～10%，医用纤维素的质量浓度为50～95%。

8.如权利要求6所述的药物组合物，其特征在于：

所述的热敷贴中，原料层、明胶层和无纺布袋的质量比为（5～15）：（0.1～1）：（0.1～5），或者（1.2～2.5）：（0.3～0.9）：（0.5～2.5）；原料层还包含花青素、保水剂、氯化钠、氯化钾中的一种或多种，所述的腐植酸活性组分：（甘草+花青素）：铁粉：石墨粉：保水剂：（氯化钠或氯化钾）的质量比为（0.20～0.30）：（0.03～0.10）：（0.30～0.55）：（0.5～1.5）：（1～3）：（0.2～1），当不含其中某成分时，该成分含量即为0；所述的保水剂为腐植酸-丙烯酸胺保水剂或腐植酸-丙烯酸保水剂。

9.如权利要求7所述的药物组合物，其特征在于：所述的药剂或膏药由下列方法制得：在5-35℃温度条件下，将各成分制成药剂或膏药。