CN102197832A - 一种复方柳叶制剂及其用途 - Google Patents

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本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及一种复方柳叶制剂及其用途。分别取柳叶、连翘叶和大青叶，分别加入乙醇，用摇床震荡浸提，用离心机离心得上清液；重复提取2次，合并三次上清液，过滤，将滤液进行减压浓缩，烘干，得到柳叶、连翘叶和大青叶提取物；取捣碎的大蒜，加入圆底烧瓶中，进行水蒸气蒸馏，得大蒜精油；取柳叶提取物、大青叶提取物、连翘叶提取物和大蒜精油制成复方柳叶制剂。本发明产品对串珠镰刀菌、灰霉菌、棉花枯萎病菌具有抑菌作用，可开发相应制剂用于防治植物病害，本发明产品适合工业化生产。

Description

一种复方柳叶制剂及其用途
技术领域
本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及一种复方柳叶制剂及其用途。本发明产品对串珠镰刀菌、棉花枯萎病菌、灰霉菌具有抑菌作用，可开发相应制剂用于防治植物病害，本发明产品适合工业化生产。
背景技术
植物病原菌病害所引起的农作物减产少收是农业发展主要阻碍，人们对于这一难题的防治多年来主要以化学防治为主，然而由于化学农药大多是非自然存在的物质，且常不易降解，残留期较长，对自然生态具有破坏性作用，形成公害，有些甚至危及人类健康。因此，开发对有害生物高效、对非靶标生物安全、易分解、且分解产物对环境无损害的植物源农药已经成为当务之急。在这一机遇推动下植物源农药的开发取得了***的成果。
植物源农药的开发之所以能在近期大放异彩主要是源于其开发成本低，资源丰富，易降解、低残留的特点。然而近年来对植物源农药的开发却与与其优势背道而驰，为了追求高活性，一些高毒、高成本植物也逐渐被用于开发利用如大戟，夹竹桃、丹参等，这极大地阻碍了植物源农药的市场扩展，阻滞植物源农药的普及推广。
柳叶为杨柳科植物垂柳Salix babylonica L的干燥叶。柳叶具有清热，透疹，利尿，解毒的功效，内服用于治疗上呼吸道感染、气管炎、肺炎、膀胱炎、咽喉炎等各种炎症感染，外敷用于疖肿、化脓性腮腺炎、乳腺炎等症。
连翘叶为木犀科植物连翘Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl.的干燥叶。连翘通常以果实入药，对多种革兰阳性及阴性细菌均有抑制作用.其浓缩煎剂在体外可抑制伤寒杆菌、副伤寒杆菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、白喉杆菌及霍乱弧菌、葡萄球菌、链球菌等。对于连翘叶抗菌作用鲜见报道。
大青叶为十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fortune的干燥叶。大青叶主要用于热毒发斑、丹毒、咽喉肿痛、口舌生疮、疮痈肿毒等症。近年来此药在临床上广泛应用，除可用治上述诸症外，又可用于痰热郁肺、咯痰黄稠；尤常用于流行性乙性脑炎。
大蒜精油为蒜Allium sativum L.(Garlic)的鳞茎经水蒸气蒸馏获得的挥发油。大蒜含挥发油约0.2％，油中主要成分为大蒜辣素，具有杀菌作用，是大蒜中所含的蒜氨酸受大蒜酶的作用水解产生。
串珠镰刀菌Fusarium moniliforme Sheld.为非专性、非宿主特异性的病原菌，主要污染玉米、高粱、小麦、棉花、西红柿、花生、香蕉、大豆、青椒及某些饲料。串珠镰刀菌的水溶性代谢产物伏马菌素(Fumonisin FB)，可以引起动物各种疾病，如马脑白质软化症、猪肺水肿或大鼠肝癌，还有证据表明伏马菌素与人类食管癌的高发率有关。
灰霉菌Botrytis cinerea是真菌中的葡萄孢菌，特点是腐生能力强而寄生能力弱，叫兼性寄生菌，寄主范围广，能侵害很多种类的蔬菜，常见的蔬菜几乎都会发生灰霉病，所以很难用更换品种如换茬进行防治。20世纪80年代以前防治灰霉病的杀菌剂如苯并咪唑类的多菌灵、硫代氨基甲酸酯类的甲基托布津、二羧酰亚胺类的异菌脲、腐霉利等已使用了近30年，灰霉病菌对这些药剂均产生了不同程度的抗药性。
棉花枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum是一种专化性较强、寄主范围较窄的病菌，除危害棉花外只能危害秋葵和决明。棉花枯萎病在幼苗期即可发病，严重时造成大量死苗，缺苗，断陇，甚至毁种。发病轻的棉株虽能存活，但棉株生育受到阻碍，导致过早落叶，蕾铃脱落，产量降低，品质变劣。
发明内容
1、一种复方柳叶制剂，其特征在于是由下述重量配比制成的制剂：
柳叶提取物2g-3g、连翘叶提取物1g-2g、大青叶提取物1g-2g、大蒜精油0.001g-0.002g。
2、权利要求1所述的一种复方柳叶制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
步骤(一)：分别取柳叶、连翘叶和大青叶各40g-60g，分别加入400mL-600mL乙醇，用摇床震荡浸提24h，用离心机离心得上清液和残渣；
步骤(二)：将(一)中残渣分别加入200mL-400mL乙醇，用摇床震荡浸提18h，离心机离心得上清液和残渣；
步骤(三)：将(二)中残渣分别加入100mL-200mL乙醇，震荡浸提12h，离心机离心得上清液和残渣，残渣弃去，合并三次上清液，过滤，得滤液，将滤液进行减压浓缩，烘干，得到柳叶、连翘叶和大青叶提取物；
步骤(四)：取捣碎的大蒜10g-20g，加入1000mL圆底烧瓶中，进行水蒸气蒸馏，蒸馏时间1.5h-2.0h，静置，得大蒜精油；
步骤(五)：按权利要求1所述的重量配比制成复方柳叶制剂。
3、权利要求1所述的一种复方柳叶制剂的用途，其特征在于对串珠镰刀菌、灰霉菌、棉花枯萎病菌具有抑菌作用。
根据本发明，本发明中的“％”是重量百分比。
具体实施方式
本发明所述的涉及一种复方柳叶制剂及其用途包括以下实施例，下面的实施例可进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1：
1、一种复方柳叶制剂，其特征在于是由下述重量配比制成的制剂：
柳叶提取物2g、连翘叶提取物1g、大青叶提取物1g、大蒜精油0.001g。
2、权利要求1所述的一种复方柳叶制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
步骤(一)：分别取柳叶、连翘叶和大青叶各40g，分别加入400mL乙醇，用摇床震荡浸提24h，用离心机离心得上清液和残渣；
步骤(二)：将(一)中残渣分别加入200m乙醇，用摇床震荡浸提18h，离心机离心得上清液和残渣；
步骤(三)：将(二)中残渣分别加入100mL乙醇，震荡浸提12h，离心机离心得上清液和残渣，残渣弃去，合并三次上清液，过滤，得滤液，将滤液进行减压浓缩，烘干，得到柳叶、连翘叶和大青叶提取物；
步骤(四)：取捣碎的大蒜10g，加入1000mL圆底烧瓶中，进行水蒸气蒸馏，蒸馏时间1.5h，静置，得大蒜精油；
步骤(五)：按权利要求1所述的重量配比制成复方柳叶制剂。
3、权利要求1所述的一种复方柳叶制剂的用途，其特征在于对串珠镰刀菌、灰霉菌、棉花枯萎病菌具有抑菌作用。
实施例2：
1、一种复方柳叶制剂，其特征在于是由下述重量配比制成的制剂：
柳叶提取物3g、连翘叶提取物2g、大青叶提取物2g、大蒜精油0.002g。
2、权利要求1所述的一种复方柳叶制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
步骤(一)：分别取柳叶、连翘叶和大青叶各60g，分别加入600mL乙醇，用摇床震荡浸提24h，用离心机离心得上清液和残渣；
步骤(二)：将(一)中残渣分别加入400mL乙醇，用摇床震荡浸提18h，离心机离心得上清液和残渣；
步骤(三)：将(二)中残渣分别加入200mL乙醇，震荡浸提12h，离心机离心得上清液和残渣，残渣弃去，合并三次上清液，过滤，得滤液，将滤液进行减压浓缩，烘干，得到柳叶、连翘叶和大青叶提取物；
步骤(四)：取捣碎的大蒜20g，加入1000mL圆底烧瓶中，进行水蒸气蒸馏，蒸馏时间2.0h，静置，得大蒜精油；
步骤(五)：按权利要求1所述的重量配比制成复方柳叶制剂。
3、权利要求1所述的一种复方柳叶制剂的用途，其特征在于对串珠镰刀菌、灰霉菌、棉花枯萎病菌具有抑菌作用。
药理实验
复方柳叶制剂的抑菌作用实验
1材料及方法
1.1供试材料
1.1.1供试菌株
Figure BSA00000466208000041
试验中病菌用马铃薯琼脂固体培养基(PDA)培养。
1.1.2试验仪器
超净工作台、光照培养箱、电子游标卡尺、离心机、旋转蒸发仪、烘箱、中药粉碎机、高压灭菌锅等。
1.1.3供试植物样品
本实验选取植物为柳叶、连翘叶、大青叶、大蒜。
1.2实验方法
1.2.1植物提取物的制备
分别取柳叶、连翘叶和大青叶60g，分别加入600mL乙醇，用摇床震荡浸提24h，用离心机离心得上清液(1)和残渣(1)；将残渣(1)分别加入400mL乙醇，用摇床震荡浸提18h，离心机离心得上清液(2)和残渣(2)；将残渣(2)分别加入200mL乙醇，震荡浸提12h，离心机离心得上清液(3)和残渣(3)，将残渣弃去，合并三次上清液，过滤，得滤液，将滤液进行减压浓缩，烘干，得到柳叶、连翘叶和大青叶提取物；取捣碎的大蒜20g，加入1000mL圆底烧瓶中，进行水蒸气蒸馏，蒸馏时间2.0h，静置，得大蒜粘油；
取柳叶提取物3g、连翘叶提取物2g、大青叶提取物2g、大蒜精油0.002g制成复方连翘制剂。
1.2.2复方连翘制剂对植物病原真菌抑菌活性的测定
采用生长速率法来体现植物提取物对病原菌菌丝生长速率的影响。制备带毒培养基：取校正后100ml锥形瓶，加入20mL PDA，后加入5g复方柳叶制剂，再加入PDA定容到100mL并摇匀，复方柳叶制剂浓度为50mg/mL。溶剂对照加入等量溶剂，阳性对照采用多菌灵使培养基浓度为500μg/mL。将带毒培养基与对照置于25℃培养箱培养，每日以游标卡尺用十字交叉法测量并记录菌丝长度。依据下列公式计算抑菌率，记入表1。
菌落直径＝实测菌落直径-6mm(菌饼直径)
相对抑制率＝(溶剂对照菌落直径-带毒菌落直径)/溶剂对照菌落直径×100％2结果
复方柳叶制剂对病原真菌的菌丝生长速率抑制作用见表1。
表1复方柳叶制剂对病原真菌的菌丝生长速率抑制作用
Figure BSA00000466208000051
表中所计算抑菌率为第五日记录数据。

Claims (3)

1.一种复方柳叶制剂，其特征在于是由下述重量配比制成的制剂：
柳叶提取物2g-3g、连翘叶提取物1g-2g、大青叶提取物1g-2g、大蒜精油0.001g-0.002g。
2.权利要求1所述的一种复方柳叶制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
步骤(一)：分别取柳叶、连翘叶和大青叶各40g-60g，分别加入400mL-600mL乙醇，用摇床震荡浸提24h，用离心机离心得上清液和残渣；
步骤(二)：将(一)中残渣分别加入200mL-400mL乙醇，用摇床震荡浸提18h，离心机离心得上清液和残渣；
步骤(三)：将(二)中残渣分别加入100mL-200mL乙醇，震荡浸提12h，离心机离心得上清液和残渣，残渣弃去，合并三次上清液，过滤，得滤液，将滤液进行减压浓缩，烘干，得到柳叶、连翘叶和大青叶提取物；
步骤(四)：取捣碎的大蒜10g-20g，加入1000mL圆底烧瓶中，进行水蒸气蒸馏，蒸馏时间1.5h-2.0h，静置，得大蒜精油；
步骤(五)：按权利要求1所述的重量配比制成复方柳叶制剂。
3.权利要求1所述的一种复方柳叶制剂的用途，其特征在于对串珠镰刀菌、灰霉菌、棉花枯萎病菌具有抑菌作用。
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