CN102188592A - 一种***化疗后血小板减少的药物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及***化疗后血小板减少的药物，由穿山龙、断血流、丹参、甘草、炙黄芪为原料药，按照步聚：1）先将上述重量份数的穿山龙、断血流加乙醇浸泡，加热回流1～3次，每次1～2小时，每次加乙醇量为6～10倍，弃去药渣，合并三次滤液,滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.20～1.25的清膏,备用；2）再将炙黄芪、丹参、甘草加水煎煮二次，水煎煮二次，合并两次煎液，滤过，浓缩至相对密度为1.20～1.25的清膏，备用；3）合并步骤1）、2）中的清膏，混匀，减压干燥，粉碎成细粉；4）取步骤3）制得的细粉，加乙醇制粒，干燥，填充胶囊制的胶囊剂。

Description

一种***化疗后血小板减少的药物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种药物，具体涉及一种以中药为原料制备的***化疗后血小板减少的药物。本发明还涉及该药物的制备方法。

背景技术

化疗是恶性肿瘤重要治疗方法之一，无论是手术或非手术患者都会涉及化学治疗。在某种意义上讲，化疗在消除手术残留、缓解病情、减肿瘤负荷以及控制肿瘤并发症等方面确能给患者带来临床治疗受益。但化疗可以导致诸多负面影响，如生活质量下降、脏器损害、胃肠道反应、骨髓抑制、周围神经病变、脱发、皮肤反应等等。其中，化疗引发的外周血象下降或骨髓抑制是恶性肿瘤最常见治疗并发症，在常规输血、规范使用G-CSF有效治疗情况下，化疗后血小板减少症(chemotherapy-induced thrombocytopenia)的预防和治疗倍受关注。化疗导致的血小板减少不仅是引起肿瘤患者死亡的主要原因之一，也是限制化疗用药剂量、影响化疗顺利实施以及提高肿瘤临床疗效的重要因素。

目前认为，化疗导致患者外周血小板减少发生机制，一方面是由于化疗药物直接杀生血小板而为，另一方面是化疗药物抑制了骨髓正常造血干细胞增殖与骨髓造血微环境受到化疗药物的伤害。到目前为止，化疗导致的血小板减少症尚无令人满意的治疗措施。输注血小板可暂时减轻及避免因严重血小板减少而出现的并发症，如内脏出血等。然而，反复输注血小板容易出现血小板抗体，使输注效果大打折扣。同时，输注血小板也容易发生输血反应、传播疾病(丙肝、艾滋病)等，且血小板有在体内保存时间短、血源匮乏、花费较高等实际问题，很大程度上限制了临床应用。

因化疗后血小板减少症是肿瘤治疗领域关注的焦点与热点，到目前为止，还缺乏具有针对性中西药能够使血小板维持在较为安全水平。

本发明的目的是“以中医药理论为指导，以临床症状为依据，结合处方中单味药物现代研究进展与相关专家用药经验，提供一种治疗化疗后血小板减少症的药物。

本发明的另一发明目的是提供该药物的制备方法。

本发明解决的技术问题在于克服现有药物的缺点，提供一种毒副作用小、疗效显著的***化疗后血小板减少，中医辨证属“气虚血瘀证”的药物。

基于上述治疗原则，本发明的药物是以下述重量份数的药物为原料药：

穿山龙10～30、断血流10～20、丹参10～20、甘草4～10、炙黄芪10～30。优选为：

穿山龙15份、断血流10份、丹参10份、甘草5份、炙黄芪15份。

本发明优选的药物是胶囊。

本发明药物还可以制成片剂、颗粒剂。

具体制备方法包括以下步聚：

本发明一种***化疗后血小板减少的药物的制备方法，其特征是：包括以下步骤：

1)先将上述重量份数的穿山龙、断血流加50％～80％的乙醇浸泡1～12h，加热回流1～3次，每次1～2小时，每次加乙醇量为6～10倍，弃去药渣，合并三次滤液，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.20～1.25的清膏，备用；

2)再将炙黄芪、丹参、甘草加水煎煮二次，水煎煮二次，每次加水6～10倍量，煎煮1～2小时，合并两次煎液，滤过，浓缩至相对密度为1.20～1.25的清膏，备用；

3)合并步骤1)、2)中的清膏，混匀，在40～70摄氏度下减压干燥，粉碎成120目的细粉；

4)取步骤3)制得的细粉，加60％乙醇制粒，干燥，填充胶囊制的胶囊剂；或与2～4份稀释剂、0.01～0.03份矫味剂混合，60％乙醇制粒，干燥，整粒，制的颗粒剂；或与0.3～1份润滑剂混合，制粒，压片，制的片剂。

本发明具有益气活血，祛瘀生新，生血止血等功效，用于气虚血瘀引起的气短懒言，疲倦乏力，食少便溏，倦怠自汗，皮肤瘀斑、瘀点，或见内脏出血，舌质淡黯，舌有瘀斑、瘀点，舌苔薄白，脉象细弱或细涩等。

人用剂量为每日33g生药，相当于0.55g生药/kg(人的体重以60kg计)。为了明确本发明***放化疗引起的血小板减少和原发性血小板减少性紫癜的中药药理学基础，探讨其作用机制，我们进行了四个方面的主要药效学试验研究：①本发明对5-氟尿嘧啶、卡铂、环磷酰胺等化疗药和⁶⁰Co-γ照射导致的动物血小板减少的治疗和预防作用。②本发明对免疫性血小板减少性紫癜(ITP)小鼠血小板、骨髓巨核细胞、血清血小板相关抗体(PAIgG)和脾脏、胸腺组织病理学的影响及作用机制研究。③本发明对机体免疫功能的影响。④本发明体对血小板聚集性和凝血功能的影响。研究结果表明：

1.本发明13.75、6.88(相当于临床人用量的25倍、12.5倍)对5-氟尿嘧啶致大鼠血小板减少具有治疗作用，能不同程度地升高模型大鼠外周血血小板数(PLT)、WBC和RBC，升 高骨髓巨核细胞，对骨髓巨核细胞和血小板聚集性有改善作用。本发明13.75、6.88、3.44g生药/kg对卡铂致小鼠血小板减少模型的治疗作用，能升高PLT和RBC。本发明13.75、6.88、3.44g生药/kg对环磷酰胺致小鼠血小板减少模型有一定的治疗作用，给药14天能不同程度地升高模型大鼠外周血血小板数、WBC和RBC。预先给予本发明13.75、6.88、3.44g生药/kg能拮抗环磷酰胺致小鼠外周血血小板、WBC降低，具有预防作用。本发明对⁶⁰Co-γ照射致小鼠血小板减少有治疗作用，中、小剂量能升高模型动物的PLT。

2.给Balb/C小鼠隔日腹腔注射一次1∶4稀释的豚鼠抗Balb/C小鼠血小板血清(GP-APS)，共7次，结果小鼠血小板维持在减少状态，骨髓巨核细胞增多，表明ITP模型成功，该模型与人类ITP的发病特点相似，重复性好。

本发明13.75g生药/kg能够提升ITP小鼠外周血血小板计数，13.75、6.88、3.44g生药/kg降低PAIgG，促进骨髓巨核分向成熟分化、缩短凝血时间，调节脾脏免疫功能，对ITP小鼠具有治疗作用。主要表现为：①提升外周血血小板数，降低PAIgG。血小板与PAIgG结合导致血小板数量减少可导致不同程度出血与出血时间延长，因此，血小板数及PAIgG可作为ITP的一个重要诊断及疗效评定指标。本发明能够明显提升ITP小鼠外周血血小板数，降低PAIgG，其中以大剂量作用较好。②缩短凝血时间，③促进骨髓巨核细胞分化：骨髓巨核细胞巨核细胞正常或增高，伴有成熟障碍是ITP骨髓巨核细胞重要的特征。④调节免疫：模型组小鼠大体观察脾脏显著增大，脾脏指数明显高于正常组，脾脏白髓变大，红髓缩小，淋巴细胞明显增多，红髓中髓索、髓窦内分布多量巨核细胞，高倍镜下巨核细胞核体积大，胞浆丰富。说明ITP小鼠脾脏淋巴细胞增殖，免疫反应增加，使血小板破坏增加。各治疗组脾脏均有不同程度缩小，本发明13.75g生药/kg较为明显。

由于ITP属***反应性疾病，通过检测动物血清IFN-γ、IL-4、TGF-β1和脾脏调节性T细胞以及脾脏、胸腺淋巴细胞凋亡、BCL-2、BAX表达和超微结构，以探讨本发明对ITP模型的治疗作用机制。结果表明，ITP模型小鼠外周血血清IFN-γ水平明显高于正常组，而IL-4明显低于正常组，IFN-γ/IL-4比值明显升高，Th1/Th2细胞间失衡，提示ITP小鼠存在细胞免疫功能低下及T细胞亚群漂移，表现为Th1细胞优势；本发明个剂量组能不同程度地降低ITP小鼠血清血INF-γ水平，提升IL-4水平，降低IFN-γ/IL-4比值，提升TGF-β1水平，调节Th1/Th2细胞间失衡状态，其中以大剂量较显著。CD₄ ⁺CD₂₅ ⁺Foxp₃ ⁺调节性T细胞(Treg)数量减少和功能缺陷可能为ITP免疫紊乱的机制之一，ITP小鼠Treg细胞比例下降，由此导致细胞免疫抑制功能缺陷，自身反应性T细胞活化；同时，Treg细胞减少，抑制性细胞因子 分泌水平下降，抑制功能进一步减弱，不能有效的发挥免疫抑制作用，导致激活的T淋巴细胞增多，辅助B细胞产生自身抗体，使血小板破坏增加。本发明可提高ITP小鼠Treg细胞比例。ITP小鼠模型存在淋巴细胞凋亡异常及凋亡基因Bcl-2及Bax的异常表达，而本发明可通过调节淋巴细胞凋亡及凋亡基因Bcl-2、Bax的异常表达而对ITP的免疫失调起调节作用。

综上所述，本发明可能是通过抑制Th1细胞分泌INF-γ，诱导Th2细胞分泌IL-4，促进Th3细胞分泌TGF-β1，恢复Th细胞亚群之间的平衡，提高ITP小鼠Treg细胞比例，调节淋巴细胞凋亡及凋亡基因Bcl-2、Bax的异常表达而对ITP的免疫失调而起防治作用。

3.本发明对2，4-二硝基氯苯(DNCB)致小鼠皮肤迟发型超敏反应(DTH)无明显影响。但能降低SRBC致敏小鼠的血清溶血素水平。

4.本发明10～30mg/ml在体外能不同程度地增强ADP、胶原诱导的兔血小板和ADP诱导的大鼠血小板聚集性，而在整体情况下本发明对正常大鼠有不同程度的促进血小板聚集作用，但对APTT、PT、TT影响不大。

综合上述试验结果认为，本发明对5-氟尿嘧啶、卡铂、环磷酰胺等化疗药和⁶⁰Co-γ照射导致的动物血小板减少，以及免疫性血小板减少具有一定的治疗作用，能升高多种模型动物外周血的血小板数，改善骨髓巨核细胞状态，其作用机制可能与免疫调节、影响骨髓造血***和促进血小板聚集有关。

急性毒理学研究综述

给禁食12小时的昆明种小鼠10只灌胃60％(g浸膏粉/100ml)龙丹升血颗粒浸膏粉混悬液(最大浓度)40ml/kg，结果未见死亡现象。遂后取小鼠20只每隔4小时灌胃给予上述最大浓度1次，连续3次，总剂量为312.5g生药/kg，测定最大给药量。

结果，龙丹升血颗粒组动物给药后出现静卧少动，聚集。12小时后恢复正常，24小时内动物普遍排深黑色稀便，第三天自行消失。在其他观察时间，龙丹升血颗粒组动物外观体征未见异常，活动自如，进食、饮水、粪便均正常，皮毛光洁，口、鼻、眼无分泌物，外阴清洁。给药组体重在观察期内比对照组减轻(表1，P＜0.05)，未出现其他急性毒性反应症状和死亡。尸检胸腔、腹腔未见异常液体，心、肝、脾、肺、肾等重要脏器未见颜色、形态异常，胃粘膜颜色红润，无出血点或溃疡，尸检无异常，肠管未见胀气。各主要脏器没有出血点或其它病理改变，与对照组基本一致。病理学检查心、肝、脾、肺、肾等主要脏器未见明显的与药物有因果关系的病理性损害，与对照组比较差异均无显著性意义(照片1～12)。龙丹升血颗粒小鼠灌胃的最大给药量为312.5g生药/Kg，相当于临床人用量的568倍(每天剂 量为0.55g生药/kg，人的体重以60kg计)，在此剂量下灌胃对小鼠无急性毒性反应。鉴于龙丹升血颗粒处方无毒性药材，无十八反、十九畏等配伍禁忌，结合本试验结果认为，龙丹升血颗粒在临床用法用量时不会引起急性毒性反应。

长期毒性研究综述

将SD大鼠按体重均衡随机分为4组。本发明大、中、小剂量组分别每天灌胃本发明浸膏粉45.14g生药/kg、22.57g生药/kg和11.28g生药/kg(分别相当于临床人用剂量的82倍和41倍和21倍；临床用量为每天0.55g生药/kg，人体重以60kg计)，对照组给予等容积饮用水。每天给药2次，连续6个月，每天观察一般状况，每周称体重、摄食量各1次。给药3个月后，每组取1/3动物进行血液学、血液生化学、***尸解和病理组织学检查。给药6个月后，各组再取1/3动物进行上述检查。剩余动物停止给药，观察4周，进行相同检查。

结果表明，给药3、6个月和停药4周(恢复期)各给药组动物均未出现明显的与药物有因果关系的毒性反应和死亡现象。各本发明给药组动物的一般状况、血液学、血液生化学与对照组比较差异绝大多数无显著性意义。心脏、肝脏、脾脏、肺脏、胸腺、甲状腺、肾脏、肾上腺、食管、胰腺、胃、十二指肠、结肠、肠系膜***、脊髓、膀胱、卵巢、子宫、大脑、垂体、睾丸、附睾、气管、***、坐骨神经、胸骨等***尸解和病理组织学检查，未见明显异常病理改变。

提示，本发明45.14g生药/kg、22.57g生药/kg和11.28g生药/kg(分别相当于临床人用剂量的82、41和21倍，人体重以60kg计)，连续灌胃6个月，对SD大鼠无明显长期毒性反应和量-毒关系，未发现中毒靶器官。停药恢复4周亦未见延迟毒性反应发生。结合前期的文献资料“本发明大鼠灌胃给药3个月长期毒性试验”的研究结果认为，本发明对SD大鼠无明显长期毒性反应。

本发明组方中：穿山龙：主含薯蓣皂苷(Dioscin)等多种甾体皂苷，由醇溶性皂苷与水溶性皂苷组成，总皂苷水解产物为薯蓣皂苷元(Diosgenin)。文献报道70％乙醇对薯蓣皂苷的提取率较高，因此拟定醇提。

丹参：主要含有水溶性成分丹酚酸类化合物和丹参酮类化合物。其中丹酚酸类化合物为活血化瘀的主要成分，因此拟定水煎煮。

黄芪：黄芪含有皂苷类、多糖类、黄酮类、氨基酸类和无机盐类等成分，皆为水溶性成分，且多糖类为黄芪提高免疫力的主要成分，因此拟定水煎煮。

断血流：含有多种黄酮类及皂苷类成分，皂苷类主含断血流皂苷，文献报道醇提浸膏止血作 用较强，因此拟定醇提。

甘草：主要含三萜类化合物和黄酮类成分，皂苷类以甘草酸为多，常以钾、钙盐的形式存在，因此拟定水煎煮。

根据以上理化性质分析，拟将提取工艺定为穿山龙、断血流采用醇提，丹参、炙黄芪、甘草采用水煎煮。

根据药材理化性质、文献及预试验，将穿山龙、断血流进行醇提，确定考察以下4个因素，见表2。

表2.醇提工艺因素水平表

根据均匀设计的特点，进行正交试验安排，结果见表3。

表3.醇提正交试验安排与结果

K₁～R为干膏率、K₁ ¹～R¹为薯蓣皂苷元

表4醇提干膏得率方差分析表 F_0.05(2.2)＝19 F_0.01(2.2)＝99

*P＜0.05    **P＜0.01

表5薯蓣皂苷元方差分析表 F_0.05(2.2)＝19 F_0.01(2.2)＝99

**P＜0.01

结果分析：①从方差分析结果看，当以干膏得率为考察指标时，醇浓度、提取次数均有显著影响，溶剂量和回流时间无显著影响，影响次序为A＞D＞B＞C；从R值可看出，四因素由大到小依次为A＞D＞B＞C，直观分析与方差分析结果一致。工艺优选最佳因素水平为A₁B₃C₂D₃，即用10倍量的50％乙醇回流提取3次，每次2.0小时。

②以薯蓣皂苷元含量为考察指标时醇浓度有高度显著性影响，其他因素无显著性影响，影响次序为A＞D＞C＞B；从R¹值可看出，四因素由大到小依次为A＞D＞C＞B，最佳工艺组合为A₂B₂C₂D₃，即用8倍量的70％乙醇回流提取3次，每次1.5小时。

综合以上两个指标分别考察的最佳工艺，干膏为A₁B₃C₂D₃、薯蓣皂苷元含量为A₂B₂C₂D₃，其中醇浓度(A)对薯蓣皂苷元含量有高度显著影响，溶剂量(B)和回流时间(C)对薯蓣皂苷元含量和出膏率均无显著影响，同时并结合工业大生产实际情况及生产需要，节约溶剂、缩短提取时间，将4个因素确定为醇浓度：70％乙醇；提取次数：3次；提取时间：每次1.5小时；溶剂量：10倍量、8倍量、6倍量。

5.水煎煮工艺技术条件的研究

根据药材理化性质、文献及预试验，将丹参、炙黄芪和甘草进行水煎煮，确定考察以下3个因素，见表6。

表6.水煎煮工艺因素水平表

根据均匀设计的特点，进行正交试验安排，结果见表7。

表7.水煎煮正交试验安排与结果

K₁～R为干膏率、K₁ ¹～R¹为丹酚酸B

表8水煎煮干膏得率方差分析表 F_0.05(2.2)＝19 F_0.01(2.2)＝99

*P＜0.05 **P＜0.01

表9丹酚酸B方差分析表 F_0.05(2.2)＝19 F_0.01(2.2)＝99

结果分析：①从方差分析结果看，当以干膏得率为考察指标时，提取次数有高度显著影响，提取时间和加水倍数无显著影响，影响次序为A＞C＞B；从R值可看出，四因素由大到小依次为A＞C＞B，直观分析与方差分析结果一致。工艺优选最佳因素水平为A₃B₃C₃，即加水10倍量煎煮3次，每次2小时。

②以丹酚酸B含量为考察指标时提取次数有显著性影响，提取时间和加水倍数无显著性影响，影响次序为A＞B＞C；从R¹值可看出，四因素由大到小依次为A＞B＞C，最佳工艺组合为A₂B₃C₃，即加水10倍量煎煮2次，每次2小时。

综合以上两个指标分别考察的最佳工艺，干膏为A₃B₃C₃，丹酚酸B含量为A₂B₃C₃，其中提取次数(A)对丹酚酸B含量有显著影响，提取时间(B)和加水倍数(C)对丹酚酸B含量和出膏率均无显著影响，同时并结合工业大生产实际情况及生产需要，节约溶剂、缩短提取时间，将3个因素确定为：加水煎煮2次，第一次2小时，加8倍量水；第二次1.5小时，加6倍量水。

提取工艺验证

取按照确定的提取工艺路线及参数，进行了三批小试验证，均按处方量投料，得干膏量，计算干膏率、薯蓣皂苷元和丹酚酸B的含量，结果见表10。

表10三批提取工艺验证结果

试验结果表明，三批小试验证出膏率、薯蓣皂苷元和丹酚酸B的含量均较一致，说明该提取工艺稳定可行。

为表明本发明的治疗效果，见表如下：

1.1对5-氟尿嘧啶致大鼠血小板减少模型外周血血小板、WBC和RBC的影响(表1-1、1-2)

表1-1对5-氟尿嘧啶致大鼠血小板减少模型外周血血小板的影响 

注：与模型组比较 ^*p＜0.05 ^**p＜0.01

表1-2对5-氟尿嘧啶致大鼠血小板减少模型外周血RBC和WBC的影响 

注：与模型组比较^*p＜0.05  ^**p＜0.01

结果表明，模型组、白介素-11组、升血小板胶囊组、本发明大、中、小剂量组动物给药前RBC、PLT、PCT和正常组比较，差异有显著性意义(p＜0.01或＜0.05)，说明采用5-氟尿嘧啶复制大鼠血小板减少动物模型是成功的。连续给药治疗16天后，本发明大、中剂量组、升血小板胶囊组、白介素-11组PLT与模型组比较，差异有显著性意义(p＜0.01)；本发明大、中剂量组、升血小板胶囊组、白介素-11组PCT与模型组比较，差异有显著性意义(p＜0.01)；本发明大、中、小剂量组、升血小板胶囊组、白介素-11组RBC与模型组比较，差异有显著性意义(p＜0.01)；本发明大剂量组WBC与模型组比较，差异有显著性意义(p＜0.01)。提示：本发明对5-氟尿嘧啶致大鼠血小板减少模型外周血血小板、WBC和RBC降低具有治疗作用。

1.2对5-氟尿嘧啶致大鼠血小板减少模型骨髓巨核细胞的影响(表1-3)

表1-3对5-氟尿嘧啶致大鼠血小板减少模型骨髓巨核细胞的影响(个， 

)

注：与模型组比较^*p＜0.05  ^**p＜0.01.

结果表明，模型组动物幼巨、颗粒巨、产板巨、裸核及骨髓细胞总数与正常组比较，差异有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01)，本发明大剂量组原巨、幼巨、颗粒巨、产板巨、裸核与模型组比较，差异有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01)，本发明中剂量组原巨、幼巨、颗粒巨、裸核与模型组比较，差异有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01)，本发明小剂量组原巨、产板巨、裸核与模型组比较，差异有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01)，白介素-11组幼巨细胞数与模型组比较，差异有显著性意义(P＜0.05)。提示：本发明对5-氟尿嘧啶致大鼠血小板减少模型骨髓巨核细胞有改善作用。

1.3对5-氟尿嘧啶致大鼠血小板减少模型血小板聚集性的影响(表1-4)

表1-4对血小板聚集性的影响 

注：与模型组比较^*P＜0.05  ^**P＜0.01

结果表明，本发明大剂量组与模型组比较，差异有显著性意义(p＜0.05)。提示：本发明对5-氟尿嘧啶致大鼠血小板减少模型血小板聚集性有改善作用。

2.1对卡铂致小鼠血小板减少模型外周血血小板、WBC和RBC的影响(表2-1、2-2)

结果表明，模型组、白介素-11组，升血小板胶囊组、本发明大、中、小剂量组动物给药前RBC、PLT和正常组比较，差异有显著性意义(p＜0.01或＜0.05)，说明采用卡铂复制小鼠血小板减少动物模型是成功的。连续给药治疗两周后，本发明大剂量组和白介素-11组的PLT与模型组比较，差异有显著性意义(p＜0.01)；本发明中、小剂量组的PLT与模型组比较，具有差异(p＜0.05)；本发明大剂量组和白介素-11组的PCT与模型组比较，差异有显著性意义(p＜0.01)；本发明大、小剂量组及白介素-11的RBC与模型组比较，差异有显著性意义 (p＜0.01)。提示，本发明对卡铂致小鼠血小板减少模型外周血血小板和RBC降低具有治疗作用。

表1对卡铂致小鼠血小板减少模型外周血血小板的影响 

表2对卡铂致小鼠血小板减少模型外周血WBC和RBC的影响 

注：与模型组比较^*p＜0.05 ^**p＜0.01给药前，各组动物均为10只；给药后，除模型组、

本发明小剂量组和升血小板胶囊组为8只外，其余各组均为10只。

2.2对卡铂致小鼠血小板减少模型骨髓巨核细胞的影响(表2-3)

表2-3对卡铂致小鼠血小板减少模型骨髓巨核细胞的影响(个， 

)

注：与模型组比较^*p＜0.05 ^**p＜0.01；除本发明小剂量组和升血小板胶囊组为8只、模型组7只、白介素-119只外，其余各组均为10只

结果表明，本发明对卡铂致小鼠鼠血小板减少模型骨髓巨核细胞颗粒巨有改善作用，对其它几无影响。

3.1对环磷酰胺致小鼠血小板减少模型外周血血小板、WBC和RBC的影响(表3-1)

结果表明，模型组、白介素-11组，升血小板胶囊组、本发明大、中、小剂量组动物给药前PLT、RBC、PCT和正常组比较，差异有显著性意义(p＜0.01或p＜0.05)，说明采用环磷酰胺复制小鼠血小板减少动物模型是成功的。连续给药本发明治疗7天后，各给药组对外周血血小板、WBC和RBC均无显著性影响。给药14天后，本发明中剂量组PLT与模型组比较，差异有显著性意义(p＜0.01)；本发明中剂量组和白介素-11组的PCT与模型组比较，差异有显著性意义(p＜0.05或p＜0.01)；本发明大、中、小剂量组、白介素-11组及升血小板胶囊组的RBC与模型组比较，差异有显著性意义(p＜0.01)；本发明大、中、小剂量组、白介素-11组及升血小板胶囊组的WBC与模型组比较，差异有显著性意义(p＜0.05或p＜0.01)。提示：本发明给药14天后对环磷酰胺致小鼠血小板减少模型外周血血小板、RBC及WBC降低具有治疗作用。

3.2对环磷酰胺致小鼠血小板减少模型骨髓巨核细胞的影响(表3-2)

表3-2对环磷酰胺致小鼠血小板减少模型骨髓巨核细胞的影响(个， 

)

注：与模型组比较^*p＜0.05  ^**p＜0.01

各组动物数，除空白组10只、模型组和本发明小剂量组7只、白介素-11组9只以外，其余各组均8只

结果表明，模型组动物原巨、产板巨及骨髓细胞总数与正常组比较，差异有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01)；本发明中剂量组颗粒巨及骨髓细胞总数与模型组比较，具有差异性(P＜0.05)；升血小板胶囊骨髓细胞总数与模型组比较，具有差异性(P＜0.05)。提示：本发明对环磷酰胺致小鼠血小板减少模型骨髓巨核细胞总数有一定改善作用。

4.1对环磷酰胺致小鼠血小板减少模型外周血血小板、WBC和RBC的影响(表4-1)

结果表明，给药15天后，模型组动物PLT、RBC、、WBC及PCT和正常组比较，差异有显著性意义(p＜0.01或p＜0.05)，说明环磷酰胺复制小鼠血小板减少动物模型成功。本发明大、中剂量组、升血小板胶囊组和白介素-11组的PLT与模型组比较，差异有差异性(p＜0.05)；本发明大、中剂量组PCT与模型组比较，差异有显著性意义(p＜0.01或p＜0.05)；本发明大、中、小剂量组和白介素-11组的PCT与模型组比较，差异有显著性意义(p＜0.01或p＜0.05)。给药20天后，本发明大剂量组和白介素-11组的PLT与模型组比较，差异有显著性意义(p＜0.01或p＜0.05)；本发明大、中剂量组的WBC与模型组比较，差异有显著性意义(p＜0.01)。提示：本发明给药15、20天对环磷酰胺致小鼠外周血血小板、WBC降低均有预防作用。

4.3对环磷酰胺致小鼠血小板减少模型骨髓巨核细胞的影响(表4-2)

结果表明，本发明对环磷酰胺致小鼠血小板减少模型骨髓巨核细胞影响较小。

表4-2对环磷酰胺致小鼠血小板减少模型骨髓巨核细胞的影响(个， 

)

注：与模型组比较^*P＜0.05  ^**P＜0.01

空白组10只，升血小板胶囊组12只，白介素-11组15只，本发明大、中剂量组分别13、9只外，其余各组均8只

5.1对⁶⁰Co-γ照射致小鼠血小板减少模型血小板的影响

表5-1对⁶⁰Co-γ照射致小鼠血小板减少模型血小板的影响 

注：与模型组比较^*P＜0.05  ^**P＜0.01

结果表明，本发明中、小剂量组、升血小板胶囊组、醋酸***组的PLT与模型组比较，差异有显著性意义(P＜0.01)。提示：本发明对⁶⁰Co-γ射线照射致小鼠血小板减少具有治疗作用。

具体实施方式

实施例1：

按下述配比称取原料：

穿山龙10g、断血流10g、丹参10g、甘草4g、炙黄芪10g。

具体制备方法：

1)先将上述重量份数的穿山龙、断血流加50％的乙醇浸泡2h，加热回流1次，1小时，加乙醇量为6倍，弃去药渣，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.20的清膏，备用；

2)再将炙黄芪、丹参、甘草加水煎煮二次，水煎煮二次，每次加水6倍量，煎煮1小时，合并两次煎液，滤过，浓缩至相对密度为1.20的清膏，备用；

3)合并步骤1)、2)中的清膏，混匀，在40摄氏度下减压干燥，粉碎成120目的细粉；

4)取步骤3)制得的细粉，加60％乙醇制粒，干燥，填充胶囊制的胶囊剂。

实施例2：

按下述配比称取原料：

穿山龙30g、断血流20g、丹参20g、甘草10g、炙黄芪30g。

具体制备方法：

1)先将上述重量份数的穿山龙、断血流加80％的乙醇浸泡12h，加热回流3次，每次2小时，每次加乙醇量为10倍，弃去药渣，合并三次滤液，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25的清膏，备用；

2)再将炙黄芪、丹参、甘草加水煎煮二次，水煎煮二次，每次加水10倍量，煎煮2小时，合并两次煎液，滤过，浓缩至相对密度为1.25的清膏，备用；

3)合并步骤1)、2)中的清膏，混匀，在70摄氏度下减压干燥，粉碎成120目的细粉；

4)取步骤3)制得的细粉，与2g稀释剂、0.03g矫味剂混合，加60％乙醇制粒，干燥，整粒，制的颗粒剂。

实施例3：

按下述配比称取原料：

穿山龙15g、断血流10g、丹参10g、甘草5g、炙黄芪15g。

具体制备方法：

1)先将上述重量份数的穿山龙、断血流加70％的乙醇浸泡1～12h，加热回流2次，每次1.5小时，每次加乙醇量为8倍，弃去药渣，合并二次滤液，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25的清膏，备用；

2)再将炙黄芪、丹参、甘草加水煎煮二次，水煎煮二次，每次加水8倍量，煎煮1.5小时，合并两次煎液，滤过，浓缩至相对密度为1.25的清膏，备用；

3)合并步骤1)、2)中的清膏，混匀，在60摄氏度下减压干燥，粉碎成120目的细粉；

4)取步骤3)制得的细粉，与0.3g润滑剂混合，制粒，压片，制的片剂。

Claims (5)

1.一种***化疗后血小板减少的药物，其特征是以下述重量份数的药物为原料药：

穿山龙10～30、断血流 10～20、丹参 10～20、甘草 4～10、炙黄芪 10～30。

2.根据权利要求1所述的一种***化疗后血小板减少的药物，其特征是：其中各原料药的用量为： 

穿山龙15份、断血流10份、丹参10份、甘草5份、炙黄芪15份。

3.根据权利要求1或2所述的一种***化疗后血小板减少的药物，其特征是:所述的药物是任何一种药剂学上所说的剂型。

4.根据权利要求1或2所述的一种***化疗后血小板减少的药物，其特征是：所述的药物是胶囊。

5.根据权利要求1所述的一种***化疗后血小板减少的药物的制备方法，其特征是： 包括以下步骤：

1）先将上述重量份数的穿山龙、断血流加50%～80%的乙醇浸泡1～12h，加热回流1～3次，每次1～2小时，每次加乙醇量为6～10倍，弃去药渣，合并三次滤液, 滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.20～1.25的清膏,备用；

2）再将炙黄芪、丹参、甘草加水煎煮二次，水煎煮二次，每次加水6～10倍量，煎煮1～2小时，合并两次煎液，滤过，浓缩至相对密度为1.20～1.25的清膏，备用；

3）合并步骤1）、2）中的清膏，混匀，在40～70摄氏度下减压干燥，粉碎成120目的细粉；

4）取步骤3）制得的细粉，加60%乙醇制粒，干燥，填充胶囊制的胶囊剂；或与2～4份稀释剂、0.01～0.03份矫味剂混合，60%乙醇制粒，干燥，整粒，制的颗粒剂；或与0.3～1份润滑剂混合，制粒，压片，制的片剂。