一种阿胶肽的提取方法
技术领域
本发明方法涉及阿胶的深加工技术领域,具体涉及一种阿胶肽的提取方法,是一种以阿胶为原料,利用生物复合酶酶解阿胶从而获取阿胶肽的方法。
背景技术
阿胶为马科动物驴的干燥皮或鲜皮经煎煮、浓缩制成的固体胶。性味甘、平,归肺肝肾经,功能补血、止血、滋阴润燥,主治血虚症,另可用于肿瘤的辅助治疗。阿胶主含胶原蛋白,但胶原蛋白的消化吸收需要蛋白酶参与降解,而适应症人群则常见脾胃虚弱或有胃肠道反应,服用阿胶不仅会造成患者消化***的负担,而且药效也不能得到充分的发挥。
而采用现代生物酶切技术对阿胶进行处理得到的小分子阿胶肽,可以有效克服上述问题,为人类健康带来福音。阿胶肽具有以下特性:1、阿胶肽对缺铁性贫血有明显的补血作用。它具有升高红细胞和血红蛋白的作用,可促进造血功能;能升高白细胞、血小板和提高血氧含量。2、阿胶肽能增加血清钙含量,调节人体内钙的平衡,提高耐缺氧,耐疲劳能力。3、阿胶肽具有止血、抗疲劳、抗休克、抗辐射、抗肌痿、耐寒冷、提高肌体免疫力、滋阴补肾、强筋健骨以及利尿消肿等作用。此外,它能扩张微血管,扩大血容量,降低血粘度和降低血管壁通透性作用。
目前,提取阿胶肽的方法主要有碱液提取法和生物酶解法,前者在提取过程中使用了大量的碱处理,既对环境造成污染又对人体存在安全隐患,还破坏了蛋白质的成分。中国专利申请阿胶低肽的制备方法,公开号CN 101294186A中使用的是胃蛋白酶和胰蛋白酶进行水解,继而用超滤柱进行超滤,接着用大孔吸附树脂分离纯化,减压,低温浓缩,干燥得成品,该方法操作步骤繁琐,不适合工业化生产,而浓缩操作容易破坏产品的品相,也没有用到膜分离技术,影响了产品的质量。本发明在复合酶水解的基础上,进而采用风味蛋白酶进行定向外切,得到的产品的总蛋白中,分子量在500-3000道尔顿的阿胶肽在97%以上。
发明内容
针对现有技术中存在的不足,本发明的目的在于提供了一种阿胶肽的提取方法,以阿胶为原料,无需用碱处理,利用复合酶酶解,然后再通过膜分离技术脱盐和浓缩,提取出阿胶肽。本发明操作简便,对环境友好,非常适合工业化生产。
为了实现上述技术目的,本发明采取以下技术措施:
一种阿胶肽的提取方法,其步骤如下:
1、以正宗东阿阿胶块(蛋白质60-80wt%)为原料,加入原料重量的6-8倍的蒸馏水搅拌均匀,升温至100℃蒸煮6-8h;
2、冷却至50-60℃,调pH值为7-8,然后分别按原料阿胶重量的1-2.5%和0.5-1%的比例加入碱性蛋白酶和胰蛋白酶,反应过程中用氢氧化钠溶液维持体系pH在7-8,恒温搅拌酶解6-10h;再按原料阿胶重量的1-2%加入风味蛋白酶,搅拌酶解5-8h,酶解过程中保持反应体系的pH值为7-8;将得到的酶解液升温至90-100℃,保持10-20min灭酶;
3、将酶解液离心后过滤,除去蛋白酶,上清液中按原料阿胶重量的2-2.5%加入粉末状活性炭,55℃搅拌吸附1h脱色,然后再使用膜分离手段进行分离,浓缩,将浓缩液干燥即得到阿胶肽干品。
本发明方法中使用的碱性蛋白酶、胰蛋白酶和风味蛋白酶的酶活力分别为:25U/mg、35U/mg和30U/mg。
与现有技术相比,本发明方法的优点和有益效果如下:
1、有效避开了化学手段处理所带来的环境污染及对人体伤害的问题;
2、本发明方法生产出来的阿胶肽产品的纯度高,而且其总蛋白质中分子量在500-3000道尔顿的肽含量达到97%以上,分子量≥3000道尔顿的在3%以内;
3、本发明方法生产出来的阿胶肽的分子量小,人体容易吸收,吸收率达90%以上;
4、本发明方法采用了活性炭脱色,所得产品为白色均匀粉末,保证了产品的天然洁白度;
5、本发明方法的生产周期短、操作简便、成本低、安全无毒副作用,可广泛应用于多功能保健品、药品等领域。
具体实施方式
下面通过具体的实施例对本发明方法做进一步的详细说明。
实施例1:
一种阿胶肽的提取方法,其步骤如下:
1、称取正宗东阿阿胶块(蛋白质60-80wt%)1kg,然后加入蒸馏水7kg,搅拌均匀后,升温至100℃蒸煮8h;
2、冷却至55℃,用0.1M的食品级片状氢氧化钠溶液调pH至7-8,然后加入25g碱性蛋白酶和10g胰蛋白酶,在55℃下搅拌酶解10h,酶解过程中用上述0.1M氢氧化钠溶液保持反应体系的pH值稳定在7-8;再加入10g风味蛋白酶,55℃搅拌酶解8h,酶解过程中用上述0.1M的氢氧化钠溶液保持反应体系pH值在7-8;然后升温至95℃,保温15min灭酶;
3、将酶解液过滤,得上清液;上清液中加入25g粉末状活性炭,55℃搅拌吸附1h脱色,滤除活性炭;滤液经孔径为1nm的纳滤膜分离***进行分离,脱盐并浓缩;浓缩液经喷雾干燥,得到415g白色(本发明中采用活性炭脱色,所得产品的色泽为白色,优于国家标准规定的淡黄色)粉末状阿胶肽,所得产品的检测报告见表1。
表1实施例1所得产品的检测报告
实施例2:
一种阿胶肽的提取方法,其步骤如下:
1、称取正宗东阿阿胶块(蛋白质60-80wt%)2kg,然后加入蒸馏水14kg,搅拌均匀后,升温至100℃蒸煮6h;
2、冷却至50℃,用0.1M的食品级片状氢氧化钠的溶液调pH至7-8,然后加入20g碱性蛋白酶和10g胰蛋白酶,在50℃下搅拌酶解8h,酶解过程中用上述0.1M的氢氧化钠溶液保持反应体系的pH值稳定在7-8;再加入30g风味蛋白酶,50℃搅拌酶解7h,酶解过程中用上述0.1M的氢氧化钠溶液保持反应体系pH值在7-8;然后升温至100℃,保温10min灭酶;
3、将酶解液过滤,得上清液;上清液中加入45g粉末状活性炭,55℃搅拌吸附1h脱色,滤除活性炭;滤液经孔径为1nm的纳滤膜分离***进行分离,脱盐并浓缩;浓缩液经喷雾干燥,得到835g白色粉末状阿胶肽,所得产品的检测报告见表2。
表2实施例2所得产品的检测报告
实施例3:
一种阿胶肽的提取方法,其步骤如下:
1、称取正宗东阿阿胶块(蛋白质60-80wt%)10kg,然后加入蒸馏水80kg,搅拌均匀后,升温至100℃蒸煮7h;
2、冷却至55℃,用0.1M的食品级片状氢氧化钠的溶液调pH至7-8,然后加入200g碱性蛋白酶和100g胰蛋白酶,在55℃下搅拌酶解7h,酶解过程中用上述0.1M的氢氧化钠溶液保持反应体系的pH值稳定在7-8;再加入200g的风味蛋白酶,55℃搅拌酶解5h,酶解过程中用上述0.1M的氢氧化钠溶液保持反应体系pH值在7-8;然后升温至90℃,保温20min灭酶;
3、将酶解液过滤,得上清液;上清液中加入250g粉末状活性炭,55℃搅拌吸附1h脱色,滤除活性炭;滤液经孔径为1nm的纳滤膜分离***进行分离,脱盐并浓缩;浓缩液经喷雾干燥,得到4.16kg白色粉末状阿胶肽,所得产品的检测报告见表3。
表3实施例3所得产品的检测报告
实施例4:
一种阿胶肽的提取方法,其步骤如下:
1、称取正宗东阿阿胶块(蛋白质60-80wt%)100kg,然后加入蒸馏水600kg,搅拌均匀后,升温至100℃蒸煮6h;
2、冷却至60℃,用0.1M的食品级片状氢氧化钠的溶液调pH至7-8,然后加入1.5kg碱性蛋白酶和0.75kg胰蛋白酶,在60℃下搅拌酶解6h,酶解过程中用上述0.1M的氢氧化钠溶液保持反应体系的pH值稳定在7-8;再加入1.8kg的风味蛋白酶,60℃搅拌酶解6h,酶解过程中用上述0.1M的氢氧化钠溶液保持反应体系pH值在7-8;然后升温至95℃,保温15min灭酶;
3、将酶解液过滤,得上清液;上清液中加入2kg粉末状活性炭,55℃搅拌吸附1h脱色,滤除活性炭;滤液经孔径为1nm的纳滤膜分离***进行分离,脱盐并浓缩;浓缩液经喷雾干燥,得到42.5kg白色粉末状阿胶肽,所得产品的检测报告见表4。
表4实施例4所得产品检测报告