CN102008012B

CN102008012B - 真菌发酵饲料生产方法

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Publication number: CN102008012B
Application number: CN2010105542910A
Authority: CN
Inventors: 王玉; 苏俊; 其他发明人请求不公开姓名
Original assignee: 李绩
Current assignee: Complete Ltd By Share Ltd
Priority date: 2010-11-22
Filing date: 2010-11-22
Publication date: 2013-03-06
Anticipated expiration: 2030-11-22
Also published as: CN102008012A

Abstract

本发明公开了一种真菌发酵饲料生产方法，包括斜面菌种活化培养、液体培养、液体二级种子培养、固体发酵培养，其特征在于所述裂褶菌固体发酵阶段培养条件为温度为20-27℃，培养5-8天后，降低温度到6-10℃，培养1-3天，随后提高温度到20-27℃，总的培养时间15-40天。本发明方法得到的产品性能稳定，使用安全，与其它饲料均无配合禁忌。本发明产品在饲料中的添加量为20-100％，饲用后，可显著增强动物机体的免疫力和泌乳能力，提高日增重和饲料转化率。符合动物性食品的绿色化生产要求，社会效益和经济效益显著。

Description

真菌发酵饲料生产方法

技术领域

属于微生物领域，特别涉及真菌饲料产品加工领域

背景技术：

裂褶菌(Schizophyllum commune(Fr.)Fr.)，又名白参、树花、天花菌等，裂褶菌属真菌门、担子菌亚门、层菌纲、非褶菌目、裂褶菌科、裂褶菌属。裂褶菌是一种中国传统食药用真菌，含有裂褶菌多糖、核苷、腺苷、嘌呤等有效成分。裂褶菌胞内和胞外多醣能促进巨噬细胞的局部移动并增强其活性，也能诱导T细胞、NK细胞及许多和免疫相关之细胞激素产生并活化补体，具有强的抗肿瘤活性。裂褶菌性平、味甘，能清肝、明目、催乳、滋补强身，并可治疗妇女白带过多、精神不振、头昏耳鸣、虚汗。目前裂褶菌主要通过人工栽培和深层发酵培养两种方式获得，裂褶菌发酵培养具有周期短，产量大的特点。

目前，国内对裂褶菌的研究的方向有：裂褶菌多糖提取鉴定和多糖药理药效研究，深层发酵条件的研究，裂褶菌人工栽培方法的研究，利用裂褶菌生产苹果酸的研究。裂褶菌产品却较少报道，尽快开发裂褶菌类相关产品，是造福人类的一件好事。

固体发酵是获得裂褶菌的有效方法。固体发酵后所得到的菌质含有菌体的代谢产物，而且菌质本身也是良好的营养物质。固体发酵得到的菌质和菌体是具有营养和药用功能，在天然饲料添加剂的开发应用方面具有良好的应用前景。

饲料添加剂行业随着我国养殖行业的蓬勃发展也获得了飞速的发展，为了提高动物生长性能，降低养殖成本，包括抗生素，激素类生长促进剂(克伦特罗和睾酮等)等饲料添加剂曾经或继续得到广泛应用，它们对畜牧业的发展做出了巨大的贡献。但此类饲料添加剂长期、大量的使用的负面效应也日益明显地暴露出来。具体表现在：畜禽和人体耐药性的产生，抗生素等物质在机体形成残留，动物免疫力下降，人体产生诸多不良反应等，2001年中国畜产品遭遇的出口受阻主要原因就是抗生素的残留。

目前，国内饲料添加剂行业正处于一个过渡期，低残留或无残留、无抗药性、天然的绿色饲料添加剂将逐渐取代抗生素及其它具有残留污染问题的饲料添加剂。绿色饲料添加剂，必须具备“能增强动物的免疫力、能明显改善饲料的转化率及动物的产出量和对环境无污染”等基本要求。绿色饲料添加剂的使用是保障动物性食品安全的基础。它符合饲料添加剂的发展方向，绿色饲料添加剂将成为饲料添加剂市场的主流产品，绿色饲料添加剂的使用是保障我国肉制品安全的基本条件。

目前，我国的绿色饲料添加剂也有所发展，活菌制剂、糖萜素、低聚糖、饲用酶制剂、中草药饲料添加剂是主要的几种。目前绿色饲料添加剂存在产品标准缺乏、技术水平偏低、产品功能成分不明确、添加量大等问题。质量稳定可控，无残留、无环境污染、使用安全、不受原料限制，产品性能稳定的绿色饲料添加剂产品急待发展。

发明内容：

本发明解决的技术问题是提供了一种真菌发酵饲料生产方法。

本发明产品由裂褶菌固体发酵得到的菌体和菌质组成；

所述裂褶菌固体发酵阶段培养温度为20-27℃，培养5-8天后，降低温度到6-10℃，培养1-3天，随后提高温度到20-27℃，总的培养时间15-40天。

本发明产品生产工艺步骤包括如下步骤：种子培养：摇床培养裂褶菌液体种子；固体发酵：转接裂褶菌液体种子固体发酵培养基发酵培养；干燥粉碎：发酵完毕，在流化床或其他干燥设备上干燥固体发酵培养基，干燥完毕进行粉碎；包装：将粉碎物料直接包装既可。

真菌发酵饲料生产方法如下：

(1)斜面菌种活化培养：将保藏的斜面菌种转接到斜面培养基上，22～28℃培养96～120小时左右，至菌丝长满斜面即可；最佳培养温度25℃。

(2)液体一级种子培养：将上述斜面菌种挑取一块接入装有100毫升培养基的500毫升摇瓶中进行一级种子培养，培养条件：旋转式摇床80～180转/分，22～28℃培养96～130小时左右；旋转式摇床150转/分为宜，培养温度以25℃为宜。

(3)液体二级种子培养：将一级摇瓶种子以5～20％接种量接入装有100毫升培养基的500毫升摇瓶中进行二级种子培养，培养条件：旋转式摇床80～180转/分，22～28℃培养96～130小时左右；合适接种量为10％，旋转式摇床150转/分为宜，培养温度以25℃为宜。

(4)固体发酵培养：将二级摇瓶种子以5～10％接种量接入装有灭菌后固体发酵培养基的500L固体发酵罐中，培养条件：装料量50％，培养温度20-27℃，培养5-8天后，降低温度到6-10℃，湿度65-80％，通风量0.1-0.5(V/V)，培养时间1-3天。随后提高温度到20-27℃，湿度75-90％，通风量0.3-1.0(V/V)，总的培养时间15-40天。必要时每隔3-10天开启搅拌10分钟；

(5)发酵培养结束，选择流化床等多种干燥方法，将物料干燥到水分含量在7％以下。对固体发酵物料进行粉碎。

(6)包装。

本发明中斜面培养基组成可以为PDA斜面培养基或其他合适培养基。

本发明固体发酵培养基的碳源主要选择麸皮、葡萄糖、蔗糖、淀粉、玉米粉、玉米芯(粉碎后)等常用原料，氮源可以选择花生饼粉、蛋白胨、脱脂大豆蛋白粉、豆饼粉、酵母粉等；需要添加的无机盐有磷酸二氢钾，硫酸镁。

本发明中液体发酵种子培养基组成：淀粉2～3％，蔗糖3～5％，葡萄糖1～3％，蛋白胨0.5％，脱脂大豆蛋白粉2～3％，磷酸二氢钾0.13～0.2％，硫酸镁0.1～0.15％，维生素B₁2PPm，PH6～7。

本发明中裂褶菌培养方法适合大规模发酵培养制造饲料。

通过实验研究表明：裂褶菌饲料产品具有良好的催乳效果，

本发明产品的性能稳定，使用安全，与其它饲料均无配合禁忌。本发明产品在饲料中的添加量为20-100％，饲用后，可显著增强动物机体的免疫力和泌乳能力，提高日增重和饲料转化率。据试验，饲用本发明饲料的动物***分泌量显著提高，见表1，符合动物性食品的绿色化生产要求，社会效益和经济效益十分显著。

本发明产品裂褶菌饲料产品以生物发酵法生产的中国传统食药用菌为主要原料，产品质量稳定可控，产品在体内无残留、无环境污染、无抗药性，而且可以提高免疫力，能够提高养殖效益。产品完全符合绿色饲料或饲料添加剂的要求。

本发明产品中蛋白质含量10-16％，多糖含量达到8-12％，同时含有维生素E，B1，B2。赖氨酸，谷氨酸等人体必须的各种氨基酸和各种微量元素。产品具有丰富的营养价值。

由于裂褶菌具有较高的营养价值和抑菌功能，能够增强动物泌乳能力，而且无残留对环境无污染。通过生物发酵技术生产裂褶菌并将其加工为饲料，完全符合当今饲料的发展方向，是一种绿色饲料，特别采用生物发酵低温刺激技术有效提高了产品的催乳功能，产品具有质量稳定可控，无残留、无环境污染、使用安全、不受原料限制，产品性能稳定，成本低廉，便于裂褶菌饲料在饲料行业的推广和应用。

泌乳能力效果作用实验。

分别对两组奶牛进行喂养实验，喂养40天，检查时间段牛奶产量.

表1奶牛饲养各时间段牛奶产量实验单位：kg

具体实施方式：

下面的实施例可以使本专业技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1(裂褶菌饲料产品生产方法)

一种裂褶菌饲料产品主要由粉碎后的裂褶菌菌丝体和裂褶菌发酵液中的干燥固形物组成，本例产品以粉状形式存在，产品中由裂褶菌固体发酵菌体和菌质组成，本发明产品的生产过程如下：裂褶菌固体发酵培养，裂褶菌固体发酵培养物粉碎干燥，包装即为产品。

实施例2

裂褶菌饲料生产过程如下：

(1)斜面菌种活化培养：将保藏的裂褶菌斜面菌种转接到斜面培养基上，22℃培养96小时左右，至菌丝长满斜面即可；

(2)液体一级种子培养：将上述裂褶菌斜面菌种挑取一块接入装有100毫升培养基的500毫升摇瓶中进行一级种子培养，培养条件：旋转式摇床150转/分，25℃培养130小时左右；

(3)液体二级种子培养：将一级摇瓶种子以5％接种量接入装有100毫升培养基的500毫升摇瓶中进行二级种子培养，培养条件：旋转式摇床180转/分，25℃培养100小时左右；

(4)固体发酵培养：将二级摇瓶种子以10％接种量接入装有灭菌后固体发酵培养基的500L固体发酵罐中，培养条件：装料量50％，培养温度24℃，培养8天后，降低温度到6℃，湿度65-80％，通风量0.2-0.3(V/V)，培养时间3天。随后提高温度到26℃，湿度75-90％，通风量0.8-1.0(V/V)，总的培养时间26天。必要时每隔3-10天开启搅拌10分钟；

(5)发酵培养结束，对固体发酵物料选择流化床等多种干燥方法干燥，干燥温度控制在80℃以下。将物料干燥到水分含量在7％以下。对干燥完毕的物料进行粉碎。

(6)产品包装。

本发明中固体发酵培养基组成如下：70％麸皮、1.4％蔗糖、10％玉米粉、16％玉米芯(粉碎后)，0.1％蛋白胨、2％脱脂大豆蛋白粉、0.5％酵母粉；培养基PH自然。灭菌条件121℃2小时。

本发明中液体发酵种子培养基组成：淀粉2％，葡萄糖3％，蛋白胨0.3％，脱脂大豆蛋白粉0.5％，磷酸二氢钾0.2％，硫酸镁0.1％，维生素B₁2PPm，PH6。裂褶菌(Schizophyllumcommune Fr.)菌种cfcc 82418购于中国林业微生物菌种保藏管理中心.

实施例3

裂褶菌饲料生产过程如下：

(1)斜面菌种活化培养：将保藏的裂褶菌斜面菌种转接到斜面培养基上，28℃培养96小时左右，至菌丝长满斜面即可；

(2)液体一级种子培养：将上述裂褶菌斜面菌种挑取一块接入装有100毫升培养基的500毫升摇瓶中进行一级种子培养，培养条件：旋转式摇床180转/分，28℃培养96小时左右；

(3)液体二级种子培养：将一级摇瓶种子以5％接种量接入装有100毫升培养基的500毫升摇瓶中进行二级种子培养，培养条件：旋转式摇床180转/分，28℃培养96小时左右；

(4)固体发酵培养：将二级摇瓶种子以10％接种量接入装有灭菌后固体发酵培养基的500L固体发酵罐中，培养条件：装料量50％，培养温度22℃，培养8天后，降低温度到7℃，湿度65-80％，通风量0.2-0.3(V/V)，培养时间1天。随后提高温度到25℃，湿度75-90％，通风量0.8-1.0(V/V)，总的培养时间35天。必要时每隔3-10天开启搅拌10分钟。

(6)产品包装。

本发明中固体发酵培养基组成如下：80％麸皮、1.4％蔗糖、8％玉米粉、8％玉米芯(粉碎后)，0.1％蛋白胨、2％脱脂大豆蛋白粉、0.5％酵母粉；培养基PH自然。灭菌条件121℃2小时。

本发明中液体发酵种子组成：淀粉2％，葡萄糖3％，蛋白胨0.3％，脱脂大豆蛋白粉0.5％，磷酸二氢钾0.2％，硫酸镁0.1％，维生素B₁2PPm，pH6。

菌种：裂褶菌CPCC 810155(Schizophyllum commune)，购于中国药用微生物菌种保藏管理中心。

Claims

1. 一种真菌发酵饲料生产方法，其特征在于，生产过程如下：

(1)斜面菌种活化培养：将保藏的裂褶菌CPCC 810155(Schizophyllum commune)斜面菌种转接到斜面培养基上，28℃培养96小时，至菌丝长满斜面即可；

(2)液体一级种子培养：将上述裂褶菌斜面菌种挑取一块接入装有100ml培养基的500ml摇瓶中进行一级种子培养，培养条件：旋转式摇床180转/分，28℃培养96小时；

(3)液体二级种子培养：将一级摇瓶种子以5％接种量接入装有100ml培养基的500ml摇瓶中进行二级种子培养，培养条件：旋转式摇床180转/分，28℃培养96小时；

(4)固体发酵培养：将二级摇瓶种子以10％接种量接入装有灭菌后固体发酵培养基的500L固体发酵罐中，培养条件：装料量50％，培养温度22℃，培养8天后，降低温度到7℃，湿度65-80％，通风量0.2-0.3(V/V)，培养时间1天，随后提高温度到25℃，湿度75-90％，通风量0.8-1.0(V/V)，总的培养时间35天；

所述固体发酵培养基的组成为：80％麸皮、1.4％蔗糖、8％玉米粉、8％粉碎后玉米芯、0.1％蛋白胨、2％脱脂大豆蛋白粉、0.5％酵母粉，pH自然；

(5)发酵培养结束，对固体发酵物料使用流化床进行干燥，干燥温度控制在80℃以下，将物料干燥到水分含量在7％以下，对干燥完毕的物料进行粉碎；

(6)产品包装。