CN101939640B - 肌酸酐浓度和盐分量的测定方法、测定设备和测定装置 - Google Patents
肌酸酐浓度和盐分量的测定方法、测定设备和测定装置 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101939640B CN101939640B CN200980104263.4A CN200980104263A CN101939640B CN 101939640 B CN101939640 B CN 101939640B CN 200980104263 A CN200980104263 A CN 200980104263A CN 101939640 B CN101939640 B CN 101939640B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- kreatinin
- concentration
- sample
- electrode
- urine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 737
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 79
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 title abstract description 11
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 title description 34
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 95
- 150000004696 coordination complex Chemical class 0.000 claims abstract description 45
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 39
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 39
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims abstract description 13
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 13
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 claims description 117
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 87
- 229910000859 α-Fe Inorganic materials 0.000 claims description 77
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 66
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 58
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 claims description 35
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 29
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 21
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 21
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 claims description 21
- 229920002907 Guar gum Polymers 0.000 claims description 18
- 239000000665 guar gum Substances 0.000 claims description 18
- 229960002154 guar gum Drugs 0.000 claims description 18
- 235000010417 guar gum Nutrition 0.000 claims description 18
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 15
- 150000001768 cations Chemical group 0.000 claims description 14
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 abstract description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract description 7
- UETZVSHORCDDTH-UHFFFAOYSA-N iron(2+);hexacyanide Chemical compound [Fe+2].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-] UETZVSHORCDDTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 abstract 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 74
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 45
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 40
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 38
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 32
- -1 kreatinase) Proteins 0.000 description 28
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 27
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 25
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 24
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 20
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 19
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 18
- CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N creatine Chemical compound NC(=[NH2+])N(C)CC([O-])=O CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 16
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 16
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 15
- 241000894007 species Species 0.000 description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 13
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 13
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 12
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 12
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 11
- 229960003624 creatine Drugs 0.000 description 11
- 239000006046 creatine Substances 0.000 description 11
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 11
- 230000008676 import Effects 0.000 description 11
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 9
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 9
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 9
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 8
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 8
- XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N taurine Chemical compound NCCS(O)(=O)=O XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 7
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 7
- 108010066906 Creatininase Proteins 0.000 description 6
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010060059 Sarcosine Oxidase Proteins 0.000 description 6
- 102000008118 Sarcosine oxidase Human genes 0.000 description 6
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 6
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 6
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 6
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 6
- OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N picric acid Chemical compound OC1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 5
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 108010079870 Sarcosine Dehydrogenase Proteins 0.000 description 5
- 102000013000 Sarcosine dehydrogenase Human genes 0.000 description 5
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 5
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 5
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 5
- 238000002484 cyclic voltammetry Methods 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 235000013905 glycine and its sodium salt Nutrition 0.000 description 5
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 5
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 5
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 5
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 5
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical compound C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- FRASJONUBLZVQX-UHFFFAOYSA-N 1,4-naphthoquinone Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C=CC(=O)C2=C1 FRASJONUBLZVQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010077078 Creatinase Proteins 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000001450 anions Chemical group 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- YAGKRVSRTSUGEY-UHFFFAOYSA-N ferricyanide Chemical compound [Fe+3].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-] YAGKRVSRTSUGEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N methylguanidine Chemical compound CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 4
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920000139 polyethylene terephthalate Polymers 0.000 description 4
- 239000005020 polyethylene terephthalate Substances 0.000 description 4
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 4
- 229960003080 taurine Drugs 0.000 description 4
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 4
- RXGJTUSBYWCRBK-UHFFFAOYSA-M 5-methylphenazinium methyl sulfate Chemical compound COS([O-])(=O)=O.C1=CC=C2[N+](C)=C(C=CC=C3)C3=NC2=C1 RXGJTUSBYWCRBK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 3
- 229910021607 Silver chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005253 cladding Methods 0.000 description 3
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 3
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 3
- ZOMNIUBKTOKEHS-UHFFFAOYSA-L dimercury dichloride Chemical class Cl[Hg][Hg]Cl ZOMNIUBKTOKEHS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 3
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 3
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 description 3
- BYGOPQKDHGXNCD-UHFFFAOYSA-N tripotassium;iron(3+);hexacyanide Chemical compound [K+].[K+].[K+].[Fe+3].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-] BYGOPQKDHGXNCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAGVANYWTGRDOU-UHFFFAOYSA-N 1,4-dioxonaphthalene-2-sulfonic acid Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(S(=O)(=O)O)=CC(=O)C2=C1 IAGVANYWTGRDOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SXGZJKUKBWWHRA-UHFFFAOYSA-N 2-(N-morpholiniumyl)ethanesulfonate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)CC[NH+]1CCOCC1 SXGZJKUKBWWHRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VFKZECOCJCGZQK-UHFFFAOYSA-M 3-hydroxypropyl(trimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CCCO VFKZECOCJCGZQK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000037157 Azotemia Diseases 0.000 description 2
- 244000303965 Cyamopsis psoralioides Species 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 description 2
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 2
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- 229940111685 dibasic potassium phosphate Drugs 0.000 description 2
- 238000006056 electrooxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- KTWOOEGAPBSYNW-UHFFFAOYSA-N ferrocene Chemical compound [Fe+2].C=1C=C[CH-]C=1.C=1C=C[CH-]C=1 KTWOOEGAPBSYNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N phthalic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C(O)=O XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 238000006479 redox reaction Methods 0.000 description 2
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 description 2
- HKZLPVFGJNLROG-UHFFFAOYSA-M silver monochloride Chemical compound [Cl-].[Ag+] HKZLPVFGJNLROG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 208000009852 uremia Diseases 0.000 description 2
- OYINQIKIQCNQOX-UHFFFAOYSA-M 2-hydroxybutyl(trimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCC(O)C[N+](C)(C)C OYINQIKIQCNQOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QGZCUOLOTMJILH-UHFFFAOYSA-N 2h-tetrazol-2-ium;bromide Chemical compound [Br-].C1=N[NH+]=NN1 QGZCUOLOTMJILH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007375 Jaffe assay Methods 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 241001597008 Nomeidae Species 0.000 description 1
- HFTIWAZPGKZLBA-UHFFFAOYSA-N O=C1N(C)C(=O)NC2=C1NC(=O)N2.O=C1N(C)C(=O)NC2=C1NC(=O)N2 Chemical compound O=C1N(C)C(=O)NC2=C1NC(=O)N2.O=C1N(C)C(=O)NC2=C1NC(=O)N2 HFTIWAZPGKZLBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 229910045601 alloy Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000956 alloy Substances 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 239000007767 bonding agent Substances 0.000 description 1
- 229940075397 calomel Drugs 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000000835 electrochemical detection Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N hydron Chemical compound [H+] GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 1
- 238000009413 insulation Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- WNNJOHWNSYNHPW-UHFFFAOYSA-N osmium Chemical compound [Os].[Os] WNNJOHWNSYNHPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000033116 oxidation-reduction process Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 125000004437 phosphorous atom Chemical group 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- JZHLPJQGSBLRGM-UHFFFAOYSA-N potassium;ruthenium(3+);tetracyanide Chemical compound [K+].[Ru+3].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-] JZHLPJQGSBLRGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012207 quantitative assay Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- LBYKTQRANCZERN-UHFFFAOYSA-N sodium ruthenium(3+) tetracyanide Chemical compound [C-]#N.[Na+].[Ru+3].[C-]#N.[C-]#N.[C-]#N LBYKTQRANCZERN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- DCXPBOFGQPCWJY-UHFFFAOYSA-N trisodium;iron(3+);hexacyanide Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Fe+3].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-] DCXPBOFGQPCWJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/70—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving creatine or creatinine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/5302—Apparatus specially adapted for immunological test procedures
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
- G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
- G01N21/78—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator producing a change of colour
- G01N21/80—Indicating pH value
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
- Y10T436/145555—Hetero-N
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
- Y10T436/145555—Hetero-N
- Y10T436/147777—Plural nitrogen in the same ring [e.g., barbituates, creatinine, etc.]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
一种肌酸酐浓度测定方法,其包括:(A)在作用于肌酸酐的酶和苦味酸的任一种都不存在的条件下,将含有六氰基铁酸盐和六氰基钌酸盐中的至少一方的金属络合物的肌酸酐定量用试剂与含有肌酸酐的试样混合,通过所述肌酸酐还原所述金属络合物的工序;(B)以电化学或者光学的方式测定所述工序A中还原的金属络合物的量的工序;和(C)根据在所述工序B中测定的所述还原的金属络合物的量,求得所述试样中含有的所述肌酸酐的浓度的工序。
Description
技术领域
本发明涉及用于进行在试样中包含的肌酸酐(creatinine)和盐分的定量的测定方法、测定设备和测定装置。
背景技术
包含在试样中的肌酸酐浓度的测定在临床化学和分析化学的领域中是重要的。肌酸酐是肌肉的内在代谢的产物,所以众所周知,尿中的肌酸酐量反应总肌肉质量。因此,人类在一天中***的尿中的肌酸酐量一般对每个人来说是一定的,不会按日变化。因此,存在使用尿中的肌酸酐量作为***的尿的浓淡的尺度的情况。另外,尿中和血中的肌酸酐量会因***或肾功能低下而增减。因此,通过尿中或者血中的肌酸酐量的测定,能够得知有无***或肾功能低下。
作为肌酸酐浓度的测定方法,已知有基于使用着碱性的苦味酸溶液的碱性苦味酸法(Jaffe反应)的方法。在该方法中,对苦味酸与肌酸酐反应而得到的橙红色的生成物进行分光学测定(例如参照专利文献1)。
另外,作为其它的肌酸酐浓度的测定方法,已知使用与肌酸酐进行特异反应的酶的方法。作为使用酶的方法,例如,存在使用肌酸酐脱亚氨酶分解肌酸酐的方法(例如,参照专利文献2)。在该方法中,根据pH或者电位的变化等测定从肌酸酐的分解而产生的氨量,得到肌酸酐浓度。
作为使用酶的其它的方法,存在通过下述式(1)~(3)的反应测定肌酸酐浓度的方法。
肌酸酐+水→肌酸(Creatine) (1)
肌酸+水→肌氨酸(Sarcosine)+尿素(2)
肌氨酸+水+氧→
甘氨酸(Glycine)+甲醛(Formaldehyde)+过氧化氢(3)
作为催化式(1)~(3)的反应的酶,分别依次使用肌酸酐酰胺水解酶(creatinine amidohydrolase)(creatininase,肌酸酐酶)、肌酸脒基水解酶(Creatine amidinohydrolase)(creatinase,肌酸酶)、肌氨酸氧化酶(Sarcosine oxidase)或者肌氨酸脱氢酶(Sarcosine dehydrogenase)。这里,作为肌酸酐的定量方法,例如使用下述方法,即,与过氧化物酶(peroxidase)一起利用无色染料(leuco色素)或Trinder试剂,使得在式(3)中生成的过氧化氢显色,以分光学进行定量的方法(例如,参照专利文献3)。另外,作为其它的肌酸酐定量方法,使用在电极对在式(3)中生成的过氧化氢进行电化学氧化,根据流过的电流定量肌酸酐的方法(例如,参照专利文献4和5)。
另外,作为使用酶的其它方法,提出了在上述式(1)和(2)的反应的基础上,取代上述式(3)的反应,使用肌氨酸与电子传输体(介体,mediator)的反应对肌酸酐进行定量的方法(例如,参照专利文献6和专利文献7)。
在专利文献6中公开了一种肌酸酐生物传感器,其在基板上至少具备一对作用极和对极,使试剂溶液在电极上或者电极周边的基板上干燥,从而将试剂固定化。试剂溶液是通过使得肌酸酐酶(creatininase)、肌酸酶(creatinase)、肌氨酸氧化酶和铁***(potassium ferricyanide)(介体)溶解在pH7~8.5的缓冲溶液中而得到的。另外,公开了如果缓冲溶液的pH不足7或者pH超过8.5,则酶活性降低,所以并不优选。
专利文献7中公开了,与肌氨酸氧化酶一起使用由环糊精包容的介体,通过比色法或者电化学的检测方法对肌酸酐进行定量的情况。具体而言,作为由环糊精包容的介体的例子能够举出α-萘醌(α-Naphthoquinone)(1,4-萘醌,1,4-Naphthoquinone)。但是,在专利文献7中,还公开了在介体没有被环糊精包容的状态下,不适合使用着酶的肌酸酐的定量的情况。
另外,作为使用酶的其它方法,提出了在式(1)和(2)的反应的基础上,取代式(3)的反应,使用肌氨酸与四唑(tetrazolium)指示剂的反应,以分光学定量肌酸酐的方法(例如,参照专利文献8)。专利文献8中,作为肌酸酐定量用试剂组成物,使用由肌酸酐水解反应酶、肌酸脒基水解酶、肌氨酸脱氢酶、作为四唑指示剂的噻唑蓝和pH7.5的磷酸钾构成的混合试剂。
另外,作为使用酶的其它的方法,提出了使用肌酸酐酰胺水解酶、肌酸脒基水解酶和肌氨酸脱氢酶,将肌酸酐改变为甘氨酸和甲醛后,利用显色剂使得生成的甲醛显色,根据其吸光度对肌酸酐进行定量的方法(例如,参照专利文献9)。专利文献9中公开了,在肌酸酐酰胺水解酶、肌酸脒基水解酶、肌氨酸脱氢酶和显色剂的基础上,使用pH7.5的磷酸缓冲溶液、和作为促进甲醛的生成的反应促进剂的铁***。
另外,作为使用酶的其它的方法,提出了使用促进肌酸酐的水解反应的聚合物、肌氨酸氧化酶和将介体固定化的电极,对肌酸酐进行定量的方法(例如,参照专利文献10)。专利文献10中公开有,作为介体能够使用铁***、二茂铁(フェロセン,ferrocene)、锇(Osmium)衍生物、吩嗪硫酸甲酯(フェナジンメトサルフェ一ト,Phenazinemethosulfate)(PMS)等。
进而,作为其它的肌酸酐定量方法,提出了使用1,4-萘醌-2-磺酸钾的方法(例如,参照专利文献11、非专利文献1~3)。
专利文献1:美国专利第3705013号说明书
专利文献2:日本特表2001-512692号公报
专利文献3:日本特开昭62-257400号公报
专利文献4:日本特表2003-533679号公报
专利文献5:美国专利第5466575号说明书
专利文献6:日本特开2006-349412号公报
专利文献7:日本特开2005-118014号公报
专利文献8:日本特开昭55-023998号公报
专利文献9:日本特开昭54-151095号公报
专利文献10:日本特开2003-326172号公报
专利文献11:日本特开昭63-033661号公报
非专利文献
非专利文献1:沙利文,另一人,《肌酸酐的高特异测定》,生物化学杂志,1958年、第233卷、第2号、p.530-534(Sullivan,“AHighlySpecific Test for Creatinine”,1958,Vol.233,No.2,p.530-534)
非专利文献2:纳拉亚南,另一人,《肌酸酐:回顾》,临床化学,1980年、第26卷、第8号、p.1119-1126(Narayanan,“Creatinine:AReview”,Clinical Chemistry,1980,Vol.26,No.8,p.1119-1126)
非专利文献3:库柏,另一人,《四个尿中肌酸酐测定方法的评价》,临床化学,1961年、第7卷、第6号、p.665-673(Cooper,“An Evaluationof Four Methods of Measuring Urinary Creatinine”,1961,Vol.7,No.6,P.665-673)
但是,在上述现有的方法中,存在下述的问题。
在专利文献1记载的方法中,受到甘氨酸、组氨酸(ヒスチジン,histidine)、谷氨酰胺(Glutamine)、丝氨酸等的氨基酸、蛋白质、葡萄糖等的糖、丙酮、胆红素等的妨碍成分的影响,在包含上述物质的试样,例如尿、血液等的生物体试样中,难以正确地定量肌酸酐。例如,氨基酸、葡萄糖等的糖会与苦味酸发生反应。
另外,在专利文献2记载的方法中,由于pH或电位的变化不稳定,所以难以正确地对肌酸酐进行定量。
另外,在专利文献2~10记载的方法中,如果在试样中存在盐分等的离子种(ion species)或尿素,则酶变性,导致酶的活性降低。从而,根据试样中包含的离子种或尿素的浓度的不同,会在反应速度方面产生偏差。因此,在对包含离子种或尿素的试样、例如尿或血液等的生物体试样中的肌酸酐进行定量时,会由于试样中包含的离子种或尿素的浓度不同而在测定结果中产生误差。
另外,对于专利文献11和非专利文献1中记载的使用着1,4-萘醌-2-磺酸钾的方法,在非专利文献2和3中,报告了测定结果的再现性非常低的问题。
发明内容
因此,本发明就是鉴于上述现有技术的问题而提出的,其第一目的在于提供一种能够良好精度并且良好再现性地对试样中包含的肌酸酐进行定量的肌酸酐浓度的测定方法、测定设备和测定装置。
另外,本发明的第二目的在于提供一种能够良好精度并且良好再现性地对尿中包含的盐分进行定量的盐分量的测定方法、测定设备和测定装置。
为了解决上述现有的问题,本发明的肌酸酐浓度测定方法包括:
(A)在作用于肌酸酐的酶和苦味酸的任一种都不存在的条件下,将含有六氰基铁酸盐和六氰基钌酸盐中的至少一方的金属络合物的肌酸酐定量用试剂与含有肌酸酐的试样混合,通过肌酸酐还原金属络合物的工序;
(B)以电化学或者光学的方式测定工序A中还原的金属络合物的量的工序;和
(C)根据在工序B中测定的还原的金属络合物的量,求得试样中含有的肌酸酐的浓度的工序。
本发明的盐分量测定方法包括:
(a)在作用于肌酸酐的酶和苦味酸的任一种都不存在的条件下,将包含六氰基铁酸盐和六氰基钌酸盐中的至少一方的金属络合物的肌酸酐定量用试剂与作为试样的尿混合,通过尿中的肌酸酐还原试剂的工序;
(b)以电化学或者光学的方式对在工序a中还原的金属络合物的量进行测定的工序;
(c)测定尿的电特性的工序;和
(d)根据在工序b中测定的还原的金属络合物的量与在工序c中测定的电特性,求得反映盐分在尿中的***量的值的工序。
优选工序c在工序a之前进行,或者在工序b后且在工序d前进行。
工序A和工序a中,优选混合后的试样的pH在2.5以上7以下,进而优选在3以上6以下。工序A和工序a中,优选再将磷酸系缓冲剂混合到试样中,这时,尤其优选将试样的pH调整为5~6。工序A和工序a中,若在试样中混合阳离子化亲水性聚合物,则肌酸酐与试剂的反应的再现性提高。优选阳离子化亲水性聚合物是阳离子瓜尔胶。
本发明的肌酸酐浓度测定设备是用于上述肌酸酐浓度测定方法的设备,包括:
用于在作用于肌酸酐的酶和苦味酸的任意一种都没有存在的条件下收容含有肌酸酐的试样的试样收容室;
与试样收容室连通并用于将试样导入试样收容室内的试样导入口;
配置在试样收容室内的肌酸酐定量用试剂;和
配置在试样收容室内的两个以上的电极、或者形成在试样收容室的光学测定用的窗部,
肌酸酐定量用试剂含有六氰基铁酸盐和六氰基钌酸盐中的至少一方的金属络合物。
另外,本发明的盐分量测定设备是用于上述盐分量测定方法的设备,具备:
用于在作用于肌酸酐的酶和苦味酸的任意一种都没有存在的条件下收容作为试样的尿的第1试样收容室;
与第1试样收容室连通且用于将尿导入第1试样收容室内的第1试样导入口;
配置在第1试样收容室内的肌酸酐定量用试剂;
配置在第1试样收容室内的两个以上的电极、或者形成在第1试样收容室的光学测定用的窗部;
用于收容尿的第2试样收容室;
与第2试样收容室连通且用于将尿导入第2试样收容室内的第2试样导入口;和
配置在第2试样收容室内的两个以上的电极,
肌酸酐定量用试剂含有六氰基铁酸盐和六氰基钌酸盐中的至少一方的金属络合物。
本发明的肌酸酐浓度测定装置,包括:
用于安装上述肌酸酐浓度测定设备的测定设备安装部;
在测定设备的试样收容室内,以电化学或者光学的方式测定被肌酸酐还原的金属络合物的量的测定部;和
根据在测定部所测定的被还原的金属络合物的量,计算包含在试样中的肌酸酐的浓度的运算部。
本发明的盐分量测定装置,包括:
用于安装上述盐分量测定设备的测定设备安装部;
在测定设备的第1试样收容室内,用于以电化学或者光学的方式测定被肌酸酐还原的金属络合物的量的第1测定部;
在测定设备的第2试样收容室内,测定尿的电特性的第2测定部;和
运算部,其根据在第1测定部所测定的被还原的金属络合物的量与在第2测定部所测定的电特性,求得反映盐分在尿中的***量的值。
根据本发明的肌酸酐浓度测定方法,在作用于肌酸酐的酶和苦味酸的任一种都不存在的条件下,能够精度良好地对试样中含有的肌酸酐进行定量。
附图说明
图1是表示本发明的实施方式1中的肌酸酐浓度测定设备的结构的分解立体图。
图2是表示实施方式1中的肌酸酐浓度测定装置的外观的立体图。
图3是表示实施方式1中的肌酸酐浓度测定装置的结构的框图。
图4是表示本发明的实施方式2中的肌酸酐浓度测定设备的结构的分解立体图。
图5是表示实施方式2中的的肌酸酐浓度测定装置的外观的立体图。
图6是表示实施方式2中的肌酸酐浓度测定装置的结构的框图。
图7是表示从第一基板的第一面观察到的本发明的实施方式3中的盐分量测定设备的结构的分解立体图。
图8是表示从第一基板的第二面观察到的实施方式3中的盐分量测定设备的结构的分解立体图。
图9是表示实施方式3中的盐分量测定装置的外观的立体图。
图10是表示实施方式3中的盐分量测定装置的结构的框图。
图11是表示本发明实施例1的试样中的肌酸酐浓度与所测定的电流值的关系的图表。
图12是表示本发明的实施例4中施加到第1电极的电位与所测定的电流值的关系的图表。
图13是表示实施例4的试样中的肌酸酐浓度与所测定的电流值的关系的图表。
图14是表示本发明的实施例5的试样中的肌酸酐浓度与所测定的电流值的关系的图表。
图15是表示实施例5和参考例中的使用肌酸酐浓度测定设备而测定的电流值的偏差的图表。
符号说明
100、400:肌酸酐浓度测定设备
102:第1基板
104:第2基板
106:隔板(第1隔板)
108、708:空气孔
110、710:切口(缝隙、切槽)
112:第1电极
114:第2电极
122:第1引线
124:第2引线
130:试剂层
132:试样导入口(第1试样导入口)
200、500:肌酸酐浓度测定装置
202:框体(外壳)
204:显示部
206:测定开始按钮
208:测定设备安装部
302:电压施加部
304:电气信号检测部
306:控制部
308:计时部
310:存储部
502:光源
504:光接收器
700:盐分量测定设备
702:第1面
704:第3基板
706:第2隔板
712:第3电极
714:第4电极
716:第5电极
718:第6电极
722:第3引线
724:第4引线
726:第5引线
728:第6引线
732:第2试样导入口
802:第2面
900:盐分量测定装置
902:恒定电流交流电源
904:电压检测器
具体实施方式
本发明的发明者新发现肌酸酐与下述式(4)记载的3价的负离子即六氰基铁酸盐(hexacyanoferrate)(常用名:铁氰酸盐,フエロシアネ一ト、ferricyanate)直接发生反应。在该反应中,在作用于肌酸酐的酶(例如肌酸酐酰胺水解酶、肌酸酐脱亚氨酶)以及苦味酸的任一种都没有存在的条件下,肌酸酐与3价的六氰基铁酸盐反应,生成肌酸酐的氧化物与下述式(5)中记载的4价的负离子即六氰基铁酸盐(常用名:铁氰酸盐,フエロシアネ一ト、ferricyanate)。本发明者分析的结果是知道了能够得到甲基胍(methylguanidine,メチルグアニジン)和N-甲基尿酸(N-methyluric)作为反应生成物。因此,推测出该反应中的肌酸酐的氧化物是Creatol。
[Fe(CN)6]3-(4)
[Fe(CN)6]4-(5)
另外,本发明者新发现肌酸酐与下述式(6)记载的3价的负离子即六氰基钌酸盐(hexacyanoruthenate、ヘキサシアノルテネ一ト)直接反应。在该反应中,在作用于肌酸酐的酶和苦味酸的任一种都没有存在的条件下,肌酸酐与3价的负离子即六氰基钌酸盐反应,生成肌酸酐的氧化物和下述式(7)记载的4价的负离子即六氰基钌酸盐。
[Ru(CN)6]3-(6)
[Ru(CN)6]4-(7)
本发明的特征在于基于上述新的发现,使用六氰基铁酸盐和六氰基钌酸盐中的至少一种作为肌酸酐浓度测定用试剂。
六氰基铁酸盐和六氰基钌酸盐通常以络盐的状态存在。例如在固体的状态下,六氰基铁酸盐和六氰基钌酸盐与抗衡阳离子(countercation,カウンタ一カチオン)一起构成络盐。另一方面,在溶液中,六氰基铁酸盐和六氰基钌酸盐的络盐进行电离,六氰基铁酸盐和六氰基钌酸盐以媒合后(solvated)的负离子的状态存在。
肌酸酐与试剂的反应,尤其是肌酸酐与3价的六氰基铁酸盐的反应速度在磷酸系缓冲剂的存在下变快。另在,在磷酸系缓冲剂存在的条件下,在使肌酸酐与试剂反应时,若存在阳离子化亲水性聚合物,则反应的再现性提高。
本发明的肌酸酐浓度测定方法包括:
(A)在作用于肌酸酐的酶和苦味酸的任一种都不存在的条件下,将含有六氰基铁酸盐和六氰基钌酸盐中的至少一方的金属络合物的肌酸酐定量用试剂与含有肌酸酐的试样混合,利用上述肌酸酐将上述金属络合物还原的工序;
(B)以电化学或者光学的方式测定上述工序A中还原的金属络合物的量的工序;和
(C)根据在上述工序B中测定的上述还原的金属络合物的量,求得上述试样中含有的上述肌酸酐的浓度的工序。
根据该方法,与现有的测定方法不同,在作用于肌酸酐的酶和苦味酸的任一种都不存在的条件下,肌酸酐与肌酸酐定量用试剂中含有的金属络合物直接反应。从而,反应能够不受盐分等的离子种、尿素、蛋白质、氨基酸、糖、丙酮、胆红素等的妨碍成分的影响地进行。因此,即使在使用着尿或血液等的生物体试样的情况下,与现有的测定方法相比,也能够以良好的精度定量试样中含有的肌酸酐。
肌酸酐定量用试剂优选六氰基铁酸盐。六氰基铁酸盐的化学性质稳定,且与肌酸酐的反应效率好。作为六氰基铁酸盐的络盐,能够使用铁***、铁***等。
六氰基铁酸盐在与肌酸酐反应之前,既可以是3价的六氰基铁酸盐、即六氰基铁酸盐的氧化体,也可以是4价的六氰基铁酸盐、即六氰基铁酸盐的还原体。在肌酸酐定量用试剂是4价的六氰基铁酸盐时,将溶解在试样中的4价的六氰基铁酸盐氧化为3价即可。3价的六氰基铁酸盐能够通过在电极上氧化例如4价的六氰基铁酸盐而得到。
肌酸酐定量用试剂也可以是六氰基钌酸盐。作为六氰基钌酸盐的络盐,能够使用钌***、钌***等。
六氰基钌酸盐在与肌酸酐反应前,既可以是3价的六氰基钌酸盐、即六氰基钌酸盐的氧化体,也可以是4价的六氰基钌酸盐、即六氰基钌酸盐的还原体。在肌酸酐定量用试剂是4价的六氰基钌酸盐的情况下,将溶解在试样中的4价的六氰基钌酸盐氧化为3价即可。3价的六氰基钌酸盐能够通过在电极上氧化例如,4价的六氰基钌酸盐而得到。
工序A中,也可以在试样中混合缓冲剂。
作为缓冲剂,能够例举出磷酸氢二钾(dipotassium hydrogenphosphate)、磷酸二氢钾(potassium dihydrogen phosphate)等的磷酸系缓冲剂、柠檬酸系缓冲剂、邻苯二甲酸系缓冲剂、乙酸系缓冲剂、MES(2-Morpholinoethane sulfonic acid)缓冲剂等。优选通过将缓冲剂与试样混合,将试样的pH调整为3~6。尤其,优选通过将磷酸系缓冲剂与试样混合,将试样的pH调整为5~6。
在肌酸酐定量用试剂是六氰基铁酸盐的情况下,尤其,优选通过在试样中混合磷酸系缓冲剂,将试样的pH调整为5~6。这样,由于肌酸酐与3价的六氰基铁酸盐的直接反应速度变快,能够缩短测定时间。
磷酸系缓冲剂优选由磷酸氢二钾与磷酸二氢钾构成。通过将这些磷酸盐溶解在试样中,能够容易地将试样的pH调整到5~6的范围内。
优选试样中的磷酸系缓冲剂的浓度(磷原子的浓度)是5~1100mM,更加优选是5~500mM。本发明者发现随着磷酸系离子的浓度的增加,肌酸酐与3价的六氰基铁酸盐的反应速度变快。只要磷酸系缓冲剂的浓度是5mM以上,就能够得到充分的反应速度。另外,1100mM是磷酸系缓冲剂的溶解度的上限。
在工序A中,除了缓冲剂,还可以将阳离子化亲水性聚合物混合在试样中。六氰基铁酸盐、六氰基钌酸盐和磷酸系缓冲剂是负离子性的。因此,预想到依靠阳离子化亲水性聚合物的阳离子基将试剂变为静电性,试剂变得均一。因此,发现能够再现性良好地对包含在试样中的肌酸酐进行定量。
优选试样中的阳离子化亲水性聚合物的浓度是0.02~0.5重量%。如果阳离子化亲水性聚合物的浓度是0.02重量%以上,则能够得到再现性充分提高的效果。另外,若阳离子化亲水性聚合物的浓度是0.5重量%以下,则阳离子化亲水性聚合物能够良好地溶解在试样中。
作为阳离子化亲水性聚合物,能够例举出阳离子瓜尔胶(cationicguar gum)。瓜尔胶是从作为豆科植物的瓜尔豆的种子的胚乳部得到的多糖类。阳离子瓜尔胶是瓜尔胶的阳离子化物。作为本发明中使用的阳离子瓜尔胶,能够例举出瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵(Guarhydroxypropyltrimonium chloride,グア一ヒドロキシプロピルトリモニウムクロリド)。
本发明的肌酸酐浓度测定方法中,除了磷酸系缓冲剂,还将阳离子化亲水性聚合物混合在试样中,最优选将试样的pH调整在5~6的范围内。
在对还原后的金属络合物的量进行电化学测定的情况下,
例如,工序B包含
(D)使两个以上的电极接触试样,在上述两个电极间施加电压的工序;和
(E)对在上述两个电极间流动的电流值或者电荷量进行检测的工序。
另外,工序C包含根据在工序E中检测到的电流值或者电荷量,求得包含在试样中的肌酸酐的浓度的工序。
这样,能够以电化学的方式容易地求得包含在试样中的肌酸酐的浓度。
在对还原后的金属络合物的量进行光学测定的情况下,
例如,工序B包括:
(F)对试样照射入射光的工序;和
(G)对透过试样的透射光或者在试样中反射的反射光将进行检测的工序。
另外,工序C包含根据在工序G中检测到的透射光或者反射光的强度,求得包含在试样中的肌酸酐的浓度的工序。
这样,能够以光学的方式容易地求得包含在试样中的肌酸酐的浓度。
本发明的盐分量测定方法使用尿作为试样,除了上述肌酸酐浓度测定方法的工序A和B还包含下述的工序c和d。
即,本发明的盐分量测定方法包括:
(a)在作用于肌酸酐的酶和苦味酸的任一种都不存在的条件下,将包含六氰基铁酸盐和六氰基钌酸盐中的至少一方的金属络合物的肌酸酐定量用试剂与作为试样的尿混合,通过尿中的肌酸酐还原金属络合物的工序;
(b)以电化学或者光学的方式对在工序a中还原的金属络合物的量进行测定的工序;
(c)测定尿的电特性的工序;和
(d)根据在工序b中测定的还原后的金属络合物的量与在工序c中测定的电特性,求得反映盐分在尿中的***量的值的工序。
没有溶解肌酸酐定量用试剂的尿的电特性反映包含在尿中的电解质的浓度。包含在尿中的电解质的浓度与包含在尿中的盐分的浓度相关。盐分等的成分受到水分摄取、出汗等的影响,被浓缩或者稀释而***到尿中。因此,不分白天、黑夜而随时采集的尿即随时尿中包含的盐分等的尿中成分的浓度受到尿的浓缩和稀释的影响而有所变动。
另一方面,如上所述,肌酸酐是依存于肌肉量而产生的,所以可知每单位时间内肌酸酐到尿中的***量是一定的。因此,即使在使用随时尿的情况下,例如,通过求得所测定的尿中成分浓度与肌酸酐浓度的比(尿中成分/肌酸酐比),也能够修正尿的浓缩和稀释的影响。
在本发明的盐分量测定方法中,使用高精度且再现性良好地反映肌酸酐浓度的、工序b中的测定值,和反映盐分浓度的、工序c中测定的电特性。由此,能够高精度且再现性良好地修正尿的浓缩和稀释的影响。从而,能够求得适当地反映盐分在尿中的***量的值。
这里,作为尿的电特性,能够例举出电阻、导电率、阻抗、对于输入的电流(或者电压)信号输出的电压(或者电流)信号、输入的交流信号的相位与输出的交流信号的相位的相位差等。
作为在工序d中求得的反映盐分在尿中的***量的值,能够例举出每肌酸酐单位量的盐分量、每单位时间(例如1日)的尿中盐分***量、每单位时间(例如1日)的盐分摄取量等。
本发明的肌酸酐浓度测定设备包括:
用于在作用于肌酸酐的酶和苦味酸的任意一种都没有存在的条件下收容包含肌酸酐的试样的试样收容室;
与试样收容室连通并用于将试样导入试样收容室内的试样导入口;和
配置在试样收容室内的肌酸酐定量用试剂,
肌酸酐定量用试剂含有六氰基铁酸盐和六氰基钌酸盐中的至少一方的金属络合物,用于上述肌酸酐浓度测定方法。
依据该设备,与现有的测定设备不同,在试样收容室内,在作用于肌酸酐的酶和苦味酸的任意一种都不存在的条件下,肌酸酐与包含在试剂中的金属络合物直接反应。因而,反应进行而不受盐分等的离子种、尿素、蛋白质、氨基酸、糖、丙酮、胆红素等的妨碍成分的影响。因此,即使在使用着尿或血液等的生物体试样的情况下,与现有的测定设备相比,也能够精度良好地定量包含在试样中的肌酸酐。另外,六氰基铁酸盐、六氰基钌酸盐和磷酸系缓冲剂是负离子性,通过阳离子化亲水性聚合物的阳离子基而变为静电性,所以认为试剂变为均一。因此,认为能够再现性良好地对包含在试样中的肌酸酐进行定量。
肌酸酐浓度测定设备可以在试样收容室内具备磷酸系缓冲剂,还可以具备阳离子化亲水性聚合物。
肌酸酐浓度测定设备还可以在试样收容室内具备两个以上的电极、或者具备形成在试样收容室的光学测定用的窗部。
这样,能够容易以电化学或者光学的方式求得试样中包含的肌酸酐的浓度。
本发明的盐分量测定设备包括:
用于在作用于肌酸酐的酶和苦味酸的任意一种都没有存在的条件下收容作为试样的尿的第1试样收容室;
与第1试样收容室连通且用于将尿导入第1试样收容室内的第1试样导入口;
配置在第1试样收容室内的肌酸酐定量用试剂;
用于收容尿的第2试样收容室;
与第2试样收容室连通且用于将尿导入第2试样收容室内的第2试样导入口;和
配置在第2试样收容室内的至少两个电极,
肌酸酐定量用试剂包含六氰基铁酸盐和六氰基钌酸盐中的至少一方的金属络合物,用于上述盐分量测定方法。
根据这样的设备,能够有效地测定精度良好地反映肌酸酐浓度的、被还原后的金属络合物的量,和反映盐分浓度的尿的电特性。通过使用上述被还原后的金属络合物的量与电特性而精度良好地补正尿的浓缩和稀释的影响。从而,能够求得适当地反映盐分在尿中的***量的值。
盐分量测定设备还可以在第1试样收容室内具备两个以上的电极或者具备形成在试样收容室的光学测定用的窗部。
本发明的肌酸酐浓度测定装置包括:
用于安装上述肌酸酐浓度测定设备的测定设备安装部;
在测定设备的试样收容室内,以电化学或者光学的方式测定被肌酸酐还原的金属络合物的量的测定部;和
根据在测定部所测定的被还原的试剂的量,计算包含在试样中的肌酸酐的浓度的运算部。
依据该测定装置,使用上述的肌酸酐浓度测定设备,能够以电化学的或者光学的方式测定试样中包含的肌酸酐的浓度。
在以光学的方式测定包含在试样中的肌酸酐的浓度的情况下,测定部具有例如射出向测定设备的试样收容室内入射的入射光的光源、和对透过试样收容室内的透射光或者在试样收容室内反射的反射光进行检测的光接收器。另外,运算部根据在光接收器检测到的透射光或者反射光的强度求得在试样中包含的肌酸酐的浓度。
肌酸酐浓度测定设备还具备配置在试样收容室内的两个以上的电极的情况下,测定部具有例如对上述两个电极间施加电压的电压施加部、和对在上述两个电极间流动的电流值或者电荷量进行检测的检测部。另外,运算部根据通过检测部检测到的电流值或者电荷量,求得试样中包含的肌酸酐的浓度。
本发明的盐分量测定装置包括:
用于安装上述盐分量测定设备的测定设备安装部;
在测定设备的第1试样收容室内,用于以电化学或者光学的方式测定被肌酸酐还原的金属络合物的量的第1测定部;
在测定设备的第2试样收容室内,测定尿的电特性的第2测定部;和
运算部,其根据在第1测定部所测定的被还原的金属络合物的量、与在第2测定部所测定的电特性,求得反映盐分在尿中的***量的值。
依据该测定装置,能够使用高精度且再现性良好地定量的尿中的肌酸酐浓度,根据所测定的尿的电特性补正尿的浓淡。从而,能够高精度且再现性良好地、求得尿中包含的盐分的量。
作为试样,除了水溶液之外,能够例举出血液、血清、血浆、尿、组织液、淋巴液、唾液等的体液。尤其是,尿是非侵入性的为了进行在家的日常健康管理而非常有效的试样。这些体液中的离子种和尿素的浓度比较高,所以能够非常高地得到本发明的效果。
作为本发明中的电极的材料,优选至少包含金、白金、钯或者这些的合金或混合物、和碳的任一种的材料。这些材料在化学和电化学方面是稳定的,能够实现稳定的测定。作为第3电极,也可以将电位稳定的电极、例如Ag/AgCl或饱和甘汞电极(calomel electrode)这样的参照电极与上述两个电极组合使用。若相对第三电极限制两个电极中一方的电极的电位,则用于测定的电位稳定,所以是优选的。另外,作为两个电极中另一方的电极,也可以使用例如Ag/AgCl或饱和甘汞电极。
在本发明的测定设备中,优选以在干燥状态下具备肌酸酐定量用试剂,且在试样被导入到试样收容室内时溶解于试样的方式配置肌酸酐定量用试剂。
在本发明的测定设备中,优选以在干燥状态下具备缓冲剂和阳离子化亲水性聚合物,且在试样被导入试样收容室内时溶解于试样的方式配置该缓冲剂和阳离子化亲水性聚合物。
例如,使玻璃纤维或滤纸等构成的多孔性的载体浸渍在含有肌酸酐定量用试剂的溶液之后,使之干燥,由此使得肌酸酐定量用试剂固定(分配)在上述载体。而且,将该载体设置在与试样接触的部分即可。另外,也可以在与测定设备中的试样接触的部分的壁面,直接涂布含有肌酸酐定量用试剂的溶液后进行干燥,由此配置肌酸酐测定用试剂。也可以使含有肌酸酐定量用试剂的溶液含有缓冲剂或阳离子化亲水性聚合物。
优选上述测定设备以能够安装和拆卸的状态安装在测定装置的测定设备安装部。另外,尤其在使用尿或血液等的生物体液的情况下,从卫生的观点出发,优选测定设备是用完即可丢弃的(一次性的)。
下面,参照附图说明本发明的实施方式。
(实施方式1)
使用图1说明本发明的实施方式l涉及的肌酸酐浓度测定设备100。图1是表示测定设备100的结构的分解立体图。
测定设备100在以电化学的方式定量试样中含有的肌酸酐的浓度的方法中使用。测定设备100具有的结构是,夹着具有切口(slit)110的绝缘性的隔板106组合绝缘性的第1基板102与具有空气孔108的绝缘性的第2基板104。第1基板102、第2基板104和隔板106是例如聚对苯二甲酸乙二酯(Polyethylene Terephthalate,ポリエチレンテレフタレ一ト)制的。
在第1基板102配置有第1电极112、第2电极114、与第1电极112电连接的第1引线122、和与第2电极114电连接的第2引线124。另外,在第1电极112和第2电极114上,配置有含有肌酸酐定量用试剂的试剂层130。第1基板102的尺寸可以适当设定,但是例如,宽度是7mm左右、长度是30mm左右、厚度是0.7mm左右。
下面,对测定设备100的制造方法进行说明。本实施方式中,使用作为六氰基铁酸盐的络盐的铁***作为肌酸酐定量用试剂。
首先,在第1基板102上,在设置有树脂制的电极图案掩模的状态下,对钯进行溅射。由此,形成第1电极112、第2电极114、第1引线122、和第2引线124。第1电极112和第2电极114分别通过第1引线122和第2引线124与后述的肌酸酐浓度测定装置的端子电连接。
接着,在设置在第1基板102上的第1电极112和第2电极114上,使用微型注射器等,对溶解有铁***、磷酸二氢钾、和磷酸氢二钾的水溶液、或者溶解有铁***、阳离子瓜尔胶、磷酸二氢钾、和磷酸氢二钾的水溶液进行定量滴定。之后,将第1基板102静置在室温~30℃程度的环境中,使之干燥,从而形成试剂层130。
根据所需要的设备的特性或尺寸选择进行涂布的含有试剂的水溶液的浓度和量即可。例如,含有试剂的水溶液中的3价的六氰基铁酸盐的浓度是0.1M左右,水溶液的滴定量是1.4μL左右。另外,含有试剂的水溶液含有阳离子瓜尔胶的情况下,水溶液中的阳离子瓜尔胶的浓度是0.25重量%左右,滴定量是1.4μL左右。
虽然根据试剂对于试样的溶解性等,适当选择形成试剂层130的区域的面积即可,例如,可令其面积为3mm2左右。
接着,组合形成有电极和试剂层130的第1基板102、隔板106、和第2基板104。将粘接剂涂布在第1基板102、隔板106和第2基板104的各接合部分,在将这些部件粘合后,按压并静置而使之粘接。也可以取代该方法,不涂布粘接剂而是在将这些部件组合后,使用市售的熔敷机利用热或者超声波对接合部分进行熔敷。
在组合第1基板102、隔板106和第2基板104时,在第1基板102与第2基板104之间,通过在隔板106设置的切口110所形成的空间部起到试样收容室的作用。另外,切口110的开口部起到试样导入口132的作用。
下面,使用图2和图3说明本实施方式涉及的肌酸酐浓度测定装置200和使用着该肌酸酐浓度测定装置的肌酸酐浓度测定方法。图2是表示测定装置200的外观的立体图,图3是表示测定装置200的结构的框图。
首先,参照图2说明测定装置200的结构。
在测定装置200的框体202设置有用于安装测定设备100的测定设备安装部208、显示测定结果等的显示部204、和用于开始基于测定装置200的肌酸酐浓度的测定的测定开始按钮206。另外,在测定设备安装部208的内部设置有分别与测定设备100的第1引线122和第2引线124电连接的第1端子和第2端子。
下面,参照图3说明测定装置200的框体202内部的结构。
测定装置200在框体202内部具备电压施加部302、电气信号检测部304、控制部306、计时部308、和存储部310。
电压施加部302具有对安装在测定设备安装部208的测定设备100饿第1电极112和第2电极114施加电压或者电位的功能。经由分别与测定设备100的第1引线122和第2引线124电连接的第1端子和第2端子进行电压或者电位的施加。
电气信号检测部304具有经由第1端子和第2端子检测来自第1电极112和第2电极114的电气信号的功能。电气信号检测部304相当于本发明的检测部。
存储部310中存储有与检量线相当的相关数据,该检量线表示肌酸酐浓度和通过电气信号检测部304检测的电气信号的相关。作为存储部310,能够使用例如RAM、ROM等的存储器。
控制部306具有参照上述相关数据,将通过电气信号检测部304检测到的电气信号换算为肌酸酐浓度的功能。控制部306与本发明的运算部相当。作为控制部306,能够使用例如CPU(Central ProcessingUnit)等的微型计算机。
下面,对于使用着测定设备100和测定装置200的本实施方式涉和的肌酸酐浓度测定方法进行说明。
首先,使用者将测定设备100的引线侧***测定装置200的测定设备安装部208。由此,测定设备100的第1引线122和第2引线124与设置在测定设备安装部208内部的第1端子和第2端子分别接触而电导通。
若测定设备100***测定设备安装部208,则测定设备安装部208内设置的由微动开关构成的***检测开关工作,将信号输出到控制部306。若根据来自***检测开关的输出信号,控制部306检测到测定设备100的***,则控制部306控制电压施加部302,经由第1端子和第2端子,在第1电极112与第2电极114之间施加用于检测试样导入的电压(例如0.2V)。
接着,使用者使试样接触测定设备100的试样导入口132。根据接触,试样(例如0.6μL左右)利用毛细管现象而通过试样导入口132,且被吸引到测定设备100的试样收容室内,试样收容室内被试样填充。若试样与第1电极112和第2电极114接触,则电流经由试样而在第1电极112和第2电极114之间流动。从而,电气信号检测部304检测因之而起的电气信号的变化。
若控制部306根据来自电气信号检测部304的输出信号检测到试样被导入了试样收容室,则控制部306控制电压施加部302,将基于电压施加部302的施加电压切换为不同的电压(例如0V或开路)。另外,随着试样导入的检测,控制部306使得作为计时器的计时部308开始计时。
若试样接触在试样收容室内露出的试剂层130,则包含在试剂层130中的铁***溶解在试样中。铁***溶解在试样中从而生成3价的六氰基铁酸盐。生成的3价的六氰基铁酸盐与包含在试样中的肌酸酐直接反应,从而生成肌酸酐的氧化物和4价的六氰基铁酸盐。
若控制部306根据来自计时部308的信号判断经过了规定时间(例如,60秒),则控制部306控制电压施加部302,在第1电极112和第2电极114之间,施加用于测定4价的六氰基铁酸盐的浓度的电压。例如,施加第1电极112与第2电极114相比成为+0.5~+0.6V的电压。这样施加电压而经过一定时间(例如5秒)后,在电气信号检测部304测定第1电极112与第2电极114之间流动的电流等的电气信号。这时,在第1电极112,4价的六氰基铁酸盐被氧化。因而,电气信号检测部304中测定的电气信号依存于试样中包含的肌酸酐浓度。
控制部306读出在存储部310中存储的表示电气信号与肌酸酐浓度的相关的相关数据,并参照该相关数据。由此,将在电气信号检测部304中检测到的电气信号换算为试样中的肌酸酐浓度。
得到的肌酸酐浓度显示在显示部204。通过在显示部204显示肌酸酐浓度,用户能够得知肌酸酐浓度测定结束。优选,得到的肌酸酐浓度与通过计时部308计时的时刻一起保存到存储部310中。
根据测定设备100,与现有的测定设备不同,在试样收容室内,在作用于肌酸酐的酶和苦味酸的任一种都不存在的条件下,肌酸酐与3价的六氰基铁酸盐直接反应。因而,能够不受盐分等的离子种、尿素、蛋白质、氨基酸、糖、丙酮、胆红素等的妨碍成分的影响而进行反应。因此,即使在使用尿或血液等的生物体试样的情况下,与现有的测定设备相比,也能够精度良好地定量包含在试样中的肌酸酐。另外,六氰基铁酸盐和磷酸系缓冲剂是负离子性,通过阳离子化亲水性聚合物的阳离子基而变为静电性,可预想形成均一的试剂。因此,发现能够再现性良好地定量在试样中含有的肌酸酐。
本实施方式中,例示了使用六氰基铁酸盐作为肌酸酐定量用试剂的例子,但是也可以使用六氰基钌酸盐而取代六氰基铁酸盐。作为肌酸酐定量用试剂而使用六氰基钌酸盐的情况下,也能够不受盐分等的离子种、尿素、氨基酸、糖等的妨碍成分的影响而与现有的测定设备相比精度良好地定量试样中含有的肌酸酐。
本实施方式中例示了测定设备具备一个试剂层的例子,但是并不限定于此。测定设备也可以具备两个试剂层、例如含有肌酸酐定量用试剂的第1试剂层与含有磷酸系缓冲剂的第2试剂层。
本实施方式中,虽然表示了通过控制部检测出试样已被导入试样收容室而将基于电压施加部的施加电压切换为不同的电压的例子,但是并不限定于此。只要能够得到依存于肌酸酐的浓度的电流,未必需要切换施加电压。也可以从测定设备的***检测时开始施加测定所需的电压值(例如,第1电极与第2电极相比成为+0.5V~+0.6V的电压)而在试样导入的检测后也继续施加该电压值。
本实施方式中,虽然表示了使得对第1电极的施加电位相对于第2电极为0.5~0.6V的例子,且该对第1电极的施加电位用于得到与4价的六氰基铁酸盐的浓度对应的电气信号,但是并不限定于此。第1电极与第2电极之间的电压只要是能够氧化通过与肌酸酐的氧化还原反应而生成的在肌酸酐定量用试剂中含有的金属络合物的还原体(本实施方式中是4价的六氰基铁酸盐)的电压即可。
本实施方式中,表示了从试样导入的检测后到检测电气信号为止的时间(反应时间)为60秒的例子,但是未必必须是该值。只要能够有意地检测出对于肌酸酐浓度的差异的电流值的差,反应时间也可以比上述时间短。另一方面,在使反应时间更长时,肌酸酐与作为3价的负离子的六氰基铁酸盐的反应到达结束状态或者稳定状态的可能性提高。因此,易于在不受温度等的环境条件的影响的状态下,更加正确地定量肌酸酐的存在量。
本实施方式中,表示了在对电极施加电位开始5秒后检测电气信号的例子,但是并不限定于该时间。该时间只要是能够有意地检测出对于肌酸酐浓度的差异的电气信号的差的时间即可。
另外,电极系、引线、和端子的形状、个数、配置等并不限定于本实施方式。对于其它的实施方式也是同样的。
此外,在本实施方式中,表示了测定被还原的金属络合物的量的例子,但是也可以通过测定金属络合物的氧化体的减少量来间接地得到金属络合物的还原体的量。
为了更平滑地将试样导入测定设备的试样收容室内,将在甲苯或其它的有机溶剂中溶解有卵磷脂(Lecithin,レシチン)的溶液涂布在第2基板的内壁使之干燥,从而形成卵磷脂层也可以。通过这样的结构,能够再现性更好地令试样量一定。因而,能够精度更好地对在试样中含有的肌酸酐进行定量。
肌酸酐浓度测定装置也可以还具备用于将测定结果记录在SD卡等的存储介质中的记录部。通过将测定结果保存能够取下的存储介质中,能够易于将测定结果从测定装置取出。从而,易于向分析相关人员委托该测定结果的分析。
测定装置也可以具备用于将测定结果传送到测定装置外的信息传送部。由此,能够将测定结果传送到医院内的分析相关部门或分析相关人员等。因而,能够缩短从测定到分析的时间。
测定装置也可以还具备用于接收分析相关部门或分析相关人员等的分析结果的信息接收部。由此,能够迅速地将分析结果反馈到使用者。
(实施方式2)
下面,使用图4说明本发明的实施方式2涉及的肌酸酐浓度测定设备400。图4是表示测定设备400的结构的分解立体图。
测定设备400用于以光学的方式对试样中含有的肌酸酐的浓度进行定量的方法。测定设备400具有夹着具有切口110的隔板106组合第1基板102和具有空气孔108的第2基板104的结构。第1基板102、第2基板104和隔板106是例如聚对苯二甲酸乙二酯制的。
测定设备400与实施方式1涉及的测定设备100不同,在第1基板102没有配置第1电极112、第2电极114、第1引线122、和第2引线124。另外,不是在第1电极112和第2电极114上,而是在第1基板102上配置有含有肌酸酐定量用试剂的试剂层130。
下面,说明测定设备400的制造方法。
首先,在第1基板102上,使用微型注射器等,对含有与实施方式1相同的肌酸酐定量用试剂的水溶液进行定量滴定。之后,将第1基板102静置在室温~30℃程度的环境中使之干燥,从而形成试剂层130。进行涂布的含有试剂的水溶液的浓度和量根据所需的设备的特性或尺寸进行选择即可,例如,与实施方式1相同即可。
下面,组合形成有试剂层130的第1基板102、隔板106、和第2基板104。在第1基板102、隔板106和第2基板104的各接合部分涂布粘接剂,而将这些部件粘合后,按压并静置使之粘接。也可以取代该方法,不涂布粘接剂而是在将这些部件组合后,使用市售的熔敷机利用热或者超声波对接合部分进行熔敷。
在组合第1基板102、隔板106和第2基板104时,在第1基板102与第2基板104之间,通过设置在隔板106的切口110形成的空间部起到试样收容室的作用。另外,切口110的开口部发挥试样导入口132的作用。
下面,使用图5和图6说明本实施方式涉及的肌酸酐浓度测定装置500和使用该肌酸酐浓度测定装置500的肌酸酐浓度测定方法。图5是表示测定装置500的外观的立体图,图6是表示测定装置500的结构的框图。
首先,参照图5说明测定装置500的结构。
在测定装置500的框体202,设置有用于安装测定设备400的测定设备安装部208、显示测定结果等的显示部204、和用于开始基于测定装置500的肌酸酐浓度的测定的测定开始按钮206。
下面,参照图6说明测定装置500的框体202内部的结构。
测定装置500在框体202内部具备光源502、光接收器504、控制部306、计时部308、和存储部310。
光源502具备射出入射到安装在测定设备安装部208的测定设备400的试样收容室内的光的功能。从光源502射出的光的波长选择吸收强度根据肌酸酐定量用试剂中的金属络合物与肌酸酐的反应发生变化的波长即可。
光接收器504具有检测从光源502射出而在安装于测定设备安装部208的测定设备400的试样收容室内反射的光的功能。
存储部310中存储有与检量线相当的相关数据,该检量线表示肌酸酐的浓度与由光接收器504检测的反射光的强度的相关。作为存储部310能够使用例如RAM、ROM等的存储器。
控制部306具有参照上述相关数据将由光接收器504检测的反射光的强度换算为肌酸酐浓度的功能。控制部306相当于本发明的运算部。作为控制部306,能够适用例如CPU(Central Processing Unit)等的微型计算机。
下面,对于使用着测定设备400和测定装置500的本实施方式中的肌酸酐浓度测定方法进行说明。
首先,使用者将测定设备400的与试样导入口132的相反侧***测定装置500的测定设备安装部208。
如果测定设备400***测定设备安装部208,则设置在测定设备安装部208内的由微动开关构成的***检测开关工作,将信号输出到控制部306。若控制部306根据来自***检测开关的输出信号,检测到测定设备400的***,则控制部306使光源502工作。由此,来自光源502的光照射到测定设备400的试样收容室。
接着,使用者使试样接触测定设备400的试样导入口132。依靠该接触,试样利用毛细管现象而通过试样导入口132且被吸引到测定设备400的试样收容室内,试样收容室内被试样填充。若试样到达试样收容室内的光的照射位置,则试样收容室内的透过率变化。光接收器504检测因之而起的反射光强度的变化。
若控制部306根据来自光接收器504的输出信号检测到试样导入了试样收容室,则控制部306使得作为计时器的计时部308开始计时。
若在试样收容室内露出的试剂层130与试样接触,则试剂层130中含有的铁***溶解在试样中。通过铁***溶解在试样中,生成3价的六氰基铁酸盐。通过生成的3价的六氰基铁酸盐与在试样中含有的肌酸酐直接反应,生成肌酸酐的氧化物与4价的六氰基铁酸盐。3价的六氰基铁酸盐变化为4价的六氰基铁酸盐导致试样的吸收光谱变化。这里,试样的吸收光谱的变化量依存于所生成的4价的六氰基铁酸盐的浓度。
若控制部306根据来自计时部308的信号判断出经过了规定时间(例如,60秒),则在光接收器504中测定在试样收容室内反射的光的强度。这时,光接收器504中测定的反射光的强度依存于试样中含有的肌酸酐浓度。
控制部306读出存储在存储部310中的与检量线相当的相关数据,并参照该相关数据,其中该检量线表示肌酸酐浓度与光接收器504检测到的反射光的强度的相关。由此,光接收器504检测到的反射光的强度被换算为试样中的肌酸酐浓度。
得到的肌酸酐浓度显示在显示部204。通过在显示部204显示肌酸酐浓度,用户能够得知测定已结束。优选将得到的肌酸酐浓度与通过计时部308计量的时刻一起保存在存储部310。
根据测定设备400,与现有的测定设备不同,在试样收容室内,作用于肌酸酐的酶和苦味酸的任一种都不存在的条件下,肌酸酐と3价的六氰基铁酸盐直接反应。因而,能够不受盐分等额离子种、尿素、蛋白质、氨基酸、糖、丙酮、胆红素等的妨碍成分的影响而进行反应。因此,即使在使用着尿或血液等的生物体试样的情况下,与现有的测定设备相比,也能够精度良好地对试样中含有的肌酸酐进行定量。另外,六氰基铁酸盐和磷酸系缓冲剂是负离子性,通过阳离子化亲水性聚合物的阳离子基而变为静电性,预想到形成均一的试剂。因此,发现能够再现性良好地对试样中含有的肌酸酐进行定量。
本实施方式中,与实施方式1同样,测定设备也可以具备两个以上的试剂层。
本实施方式中,例示了在试样导入的检测后到检测反射光强度为止的时间(反应时间)为60秒的例子,但是未必必须是该值。只要能够有意地检测出相对于肌酸酐浓度的差异的反射光强度的差,反应时间可以比上述时间短。另一方面,在进一步延长反应时间的情况下,易于更加正确地定量肌酸酐的存在量。
为了更平滑地将试样导入试样收容室内,测定设备与实施方式1同样,也可以具备卵磷脂层。
与实施方式1同样,肌酸酐浓度测定装置还可以具备用于将测定结果记录在SD卡等的存储介质中的记录部。另外,测定装置还可以具备用于将测定结果传送到测定装置外的信息传送部。进而,测定装置还可以具备用于接收分析相关部门或分析相关人员等分析到的结果的信息接收部。
(实施方式3)
下面,使用图7和图8说明本发明的实施方式3涉及的盐分量测定设备700。图7是表示测定设备700在第1基板的第1面侧的结构的分解立体图,图8是表示第1基板的第2面侧的结构的分解立体图。
测定设备700用于下述测定方法中,即,以电化学的方式测定作为试样的尿中含有的肌酸酐,并测定尿的电特性,使用这些测定结果,推定一天***的尿中含有的盐分的量的方法。
测定设备700中,绝缘性的第1基板102的第1面702与具有切口110的绝缘性的第1隔板106接触,第1基板102与具有空气孔108的第2基板104夹着第1隔板106而组合。进而,第1基板102的第2面802与具有切口710的绝缘性的第2隔板706接触,第1基板102与具有空气孔708的第3基板704夹着第2隔板706而组合。第1基板102与第1隔板106、第2基板104、第2隔板706和第3基板704时例如聚对苯二甲酸乙二酯制的。
与实施方式1涉及的测定设备100同样,在第1基板102的第1面702上,配置有第1电极112、第2电极114、与第1电极112电连接的第1引线122、和与第2电极114电连接的第2引线124。另外,在第1电极112和第2电极114上配置有含有肌酸酐定量用试剂的试剂层130。
另一方面,在第1基板102的第2面802上配置有第3电极712、第4电极714、第5电极716、和第6电极718。进而,在第2面802上配置有与第3电极712电连接的第3引线722、与第4电极714电连接的第4引线724、与第5电极716电连接的第5引线726、和与第6电极718电连接的第6引线728。第1基板102的尺寸适当设定即可,例如,宽度是7mm左右,长度是30mm左右,厚度是0.7mm左右。
下面,说明测定设备700的制造方法。
首先,在第1基板102的第1面702上,在设置有树脂制电极图案掩模的状态下,对钯进行溅射。由此,形成第1电极112、第2电极114、第1引线122、和第2引线124。第1电极112和第2电极114分别通过第1引线122和第2引线124与后述的盐分量测定装置的端子电连接。
接着,在第1基板102的第2面802上,在设置有与上述电极图案掩模不同图案的电极图案掩模的状态下,对钯进行溅射。由此,形成第3电极712、第4电极714、第5电极716、第6电极718、第3引线722、第4引线724、第5引线726、和第6引线728。第3电极712、第4电极714、第5电极716、和第6电极718分别通过第3引线722、第4引线724、第5引线726、和第6引线728与后述的盐分量测定装置的端子电连接。
接着,在设置在第1基板102的第1面702上的第1电极112和第2电极114上,使用微型注射器等对含有与实施方式1相同的肌酸酐定量用试剂的水溶液进行定量滴定。之后,将第1基板102静置在室温~30℃程度的环境中使之干燥,从而形成试剂层130。进行涂布的含有试剂的水溶液的浓度和量根据所需的设备的特性或尺寸进行选择即可,例如,与实施方式1相同即可
接着,以第1基板102的第1面702与第1隔板106接触、第1基板102的第2面802与第2隔板706接触的方式组合第2基板104、第1隔板106、第1基板102、第2隔板706、和第3基板704。在各部材的各接合部分涂布粘接剂,在将这些部件粘合后,按压并静置而使之粘接。也可以取代该方法,不涂布粘接剂而是在将这些部件组合后,使用市售的熔敷机利用热或者超声波对接合部分进行熔敷。
在组合第1基板102、第1隔板106和第2基板104时,在第1基板102与第2基板104之间通过设置在第1隔板106的切口110形成的空间部作为肌酸酐浓度测定用的第1试样收容室起作用。另外,切口110的开口部作为第1试样导入口132起作用。
另一方面,在组合第1基板102、第2隔板706和第3基板704时,在第1基板102与第3基板704之间通过设置在第2隔板706的切口710形成的空间部作为尿的电特性测定用的第2试样收容室起作用。另外,切口710的开口部作为第2试样导入口732起作用。
下面,使用图9和10说明本实施方式中的盐分量测定装置900和使用着该盐分量测定装置900的盐分量测定方法。图9是表示测定装置900的外观的立体图,图10是表示测定装置900的结构的框图。
首先,参照图9说明测定装置900的结构。
在测定装置900的框体202,设置有用于安装测定设备700的测定设备安装部208、显示测定结果等的显示部204、和用于开始基于测定装置900的肌酸酐浓度和尿的电特性的测定的测定开始按钮206。另外,在测定设备安装部208的内部设置有分别与测定设备700的第1引线122、第2引线124、第3引线722、第4引线724、第5引线726、和第6引线728电连接第1端子、第2端子、第3端子、第4端子、第5端子、和第6端子。
下面,参照图10说明测定装置900的框体202内部的结构。
测定装置900在框体202内部具备电压施加部302、电气信号检测部304、恒定电流交流电源902、电压检测器904、控制部306、计时部308、和存储部310。
电压施加部302具有对于安装在测定设备安装部208的测定设备700的第1电极112和第2电极114施加电压或电位的功能。经由分别与测定设备700的第1引线122和第2引线124电连接的第1端子和第2端子进行电压或电位的施加。
电气信号检测部304具有经由第1端子和第2端子检测来自第1电极112和第2电极114的电气信号的功能。电气信号检测部304相当于本发明的检测部。
恒定电流交流电源902具有在安装在测定设备安装部208的测定设备700的第3电极712与第6电极718之间施加一定的交流电流的功能。经由分别与测定设备700的第3引线722和第6引线728电连接的第3端子和第6端子进行一定的交流电流的施加。施加的交流电流,例如,频率是1kHz左右,电流值是0.1mA左右。
电压检测器904具有经由第4端子和第5端子检测第4电极714与第5电极716之间的电压(交流电压的有效值)的功能。
存储部310中存储有:
(i)与第1检量线相当的第1相关数据,其中该第1检量线表示肌酸酐的浓度与通过电气信号检测部304检测到的电气信号的相关;
(ii)与第2检量线相当的第2相关数据,其中该第2检量线表示盐分浓度与通过电压检测器904检测到的电压的相关;和
(iii)与第3检量线相当的第3相关数据,其中该第3检量线表示每日的尿中盐分***量与利用肌酸酐浓度补正的盐分浓度的相关。
作为存储部310,能够使用例如RAM、ROM等的存储器。
控制部306具有下述功能,即,
(I)参照第1相关数据,将通过电气信号检测部304检测到的电气信号换算为肌酸酐浓度的功能;
(II)参照第2相关数据,将通过电压检测器904检测到的电压换算为盐分浓度的功能;
(III)使用所得到的肌酸酐浓度补正盐分浓度的功能;和
(IV)参照第3相关数据,将补正后的盐分浓度换算为每日的尿中盐分***量的功能。
控制部306与本发明的运算部相当。作为控制部306能够使用例如CPU(Central Processing Unit)等的微型计算机。
下面,说明使用着测定设备700和测定装置900的本实施方式涉和的尿中盐分量测定方法。
首先,使用者将测定设备700引线侧***测定装置900的测定设备安装部208。由此,测定设备700的第1引线122、第2引线124、第3引线722、第4引线724、第5引线726、和第6引线728与设置在测定设备安装部208内部的第1端子、第2端子、第3端子、第4端子、第5端子、和第6端子分别电导通。
若测定设备700***测定设备安装部208,则设置在测定设备安装部208内的由微动开关构成的***检测开关工作,将信号输出到控制部306。控制部306利用来自***检测开关的输出信号,检测到测定设备700的***,则控制部306控制电压施加部302,经由第1端子和第2端子在第1电极112与第2电极114之间施加电压(例如0.2V)。
接着,使用者使得试样接触测定设备700的第1试样导入口132和第2试样导入口732。依靠该接触,试样利用毛细管现象而通过第1试样导入口132和第2试样导入口732,且被吸引到测定设备700的2个试样收容室内,两个试样收容室内被试样填充。
在第1试样收容室中,若试样接触第1电极112和第2电极114,则电流经由试样在第1电极112和第2电极114间流动。从而,电气信号检测部304检测因之而起的电气信号的变化。
控制部306根据来自电气信号检测部304的输出信号检测出试样已被导入第1和第2试样收容室。
若控制部306检测出试样已被导入第1和第2试样收容室,则控制部306控制电压施加部302,将基于电压施加部302的施加电压切换为不同的电压(例如0V或开路)。另外,随着试样导入的检测,控制部306使得作为计时器的计时部308开始计时。
随着对试样导入第2试样收容室的检测,控制部306控制恒定电流交流电源902,经由第3端子和第6端子,在第3电极712与第6电极718之间施加一定的交流电流(例如,频率1kHz、电流值0.1mA)。从交流电流的施加开始经过规定时间后(例如5秒后),电压检测器904测定第4电极714与第5电极716之间的电压(交流电流的有效值)。
控制部306读出存储在存储部310中的表示盐分的浓度与由电压检测器904检测的电压的相关的第2相关数据,并参照该第2相关数据。由此,将通过电压检测器904检测到的电压换算为试样中的盐分浓度。得到的盐分浓度显示在显示部204中。
在第1试样收容室中,若试剂层130与试样接触,则试剂层130中含有的铁***溶解在试样中。铁***溶解在试样中而生成3价的六氰基铁酸盐。生成的3价的六氰基铁酸盐与试样中含有的肌酸酐直接反应而生成肌酸酐的氧化物与4价的六氰基铁酸盐。
若控制部306根据来自计时部308的信号判断已经过了规定时间(例如,60秒),则控制部306控制电压施加部302,再次在第1电极112与第2电极114之间施加不同的电压(例如,第1电极112与第2电极114相比为+0.5~+0.6V的电压)。在这样施加电压而经过一定时间(例如5秒)后,电气信号检测部304测定在第1电极112与第2电极114之间流动的电流等的电气信号。这时,4价的六氰基铁酸盐在第1电极112被氧化。电气信号检测部304中测定的电气信号依存于试样中含有的肌酸酐浓度。
控制部306读出存储在存储部310中的表示电气信号与肌酸酐浓度的相关的第1相关数据,并参照该第1相关数据。有此,电气信号检测部304检测到的电气信号被换算为试样中的肌酸酐浓度。
下面,控制部306使用所得到的肌酸酐浓度补正盐分浓度。接着,控制部306读取存储在存储部310中的与表示每日的尿中盐分***量与利用肌酸酐浓度补正的盐分浓度的相关的第3检量线相当的第3相关数据,并参照该第3相关数据。由此,将补正后的盐分浓度换算为每日的尿中盐分***量。
所得到的肌酸酐浓度和每日的尿中盐分***量显示在显示部204。通过在显示部204显示肌酸酐浓度和每日的尿中盐分***量,用户能够得知测定已结束。优选,所得到的肌酸酐浓度和每日的尿中盐分***量与利用计时部308计量的时刻一起保存到存储部310中。
依照测定装置900,能够利用以高精度测定的肌酸酐浓度补正盐分浓度,并根据该补正后的盐分浓度算出每日的尿中盐分***量。因此,能够精度良好地求出每日的尿中盐分***量。
此外,本实施方式中,虽然表示了使用六氰基铁酸盐作为肌酸酐定量用试剂的例子,但是也可以使用六氰基钌酸盐取代六氰基铁酸盐。使用六氰基钌酸盐的情况下,也能够不受盐分等的离子种、尿素、氨基酸、糖等的妨碍成分的影响而与现有的测定设备相比精度良好地定量试样中含有的肌酸酐。
本实施方式中,与实施方式1相同,测定设备也可以具备两个以上的试剂层。
本实施方式中,只要能够得到依存于肌酸酐的浓度的电流,未必必须将基于电压施加部的施加电压切换为不同的电压。
本实施方式中,第1电极与第2电极之间的电压是氧化4价的六氰基铁酸盐的电压即可。
本实施方式中,与实施方式1相同,试样导入的检测后到检测电气信号为止的时间(反应时间)没有被限定。
本实施方式中,例示了在第1电极与第2电极之间施加电压5秒后检测电气信号的例子,但是并不限定于该时间。
本实施方式中,表示了在存储部中存储有上述第1~第3相关数据的例子,但是并不限定于此。取而代之,也可以在存储部中存储表示与由电气信号检测部检测的电气信号、由电压检测器检测的电压、每单位时间(例如1日)的尿中盐分***量的相关的相关数据。这时,也可以不求出肌酸酐浓度或盐分浓度。使用由电气信号检测部检测的电气信号、由电压检测器检测的电压,能够直接求出每单位时间的尿中盐分***量。
为了将试样更平滑地导入盐分量测定设备的试样收容室内,也可以在第2基板和第3基板的内壁形成与实施方式1相同的卵磷脂层。
盐分量测定装置还可以具备用于将测定结果记录在SD卡等的存储介质的记录部。
盐分量测定装置还可以具备用于将测定结果传送到测定装置外的信息传送部。
盐分量测定装置还可以具备用于接收分析相关部门或分析相关人员等分析的结果的信息接收部。
实施例
(实施例1)
为了确认本发明的肌酸酐浓度测定方法的效果进行下面的实验。本实施例中,作为肌酸酐定量用试剂中含有的金属络合物使用六氰基铁酸盐、作为其络盐的铁***(ポタシウムフエリシアネ一ト)。
首先,调制出400mM的磷酸氢二钾(和光纯药工业株式会社制,以下的实施例和参考例中也一样)的水溶液、与400mM的磷酸二氢钾(和光纯药工业株式会社制,以下的实施例和参考例中也一样)的水溶液。使用pH计进行监视同时将两种水溶液交互混合,从而将得到的混合水溶液的pH调整为6。这样,在得到的400mM的磷酸系缓冲溶液(pH=6)中溶解铁***,使得浓度成为400mM。
将所得到的水溶液放入玻璃制的电解槽容器中,将第1电极、第2电极、和第3电极分别浸漬在上述电解槽容器中的水溶液中。作为第1电极,使用金电极(电极面积2mm2)。第2电极通过将长度5cm的白金线卷为线圈状而得到。作为第3电极,使用Ag/AgCl(饱和KCl水溶液)参照极。这些电极全部是BAS株式会社的市售品。将第1电极、第2电极和第3电极的连接端子分别依次连接于电化学分析仪(ALS公司制、ALS-660A)的作用极、对极、参照极的连接端子。
接着,将浓度500mM的肌酸酐水溶液(和光纯药工业株式会社制,以下的实施例和参考例中也一样)少量添加到上述电解槽容器中的水溶液。在每次测定时调整肌酸酐水溶液的添加量,使得电解槽容器中的水溶液中含有的肌酸酐浓度成为规定的值。
添加肌酸酐并开始计时,在肌酸酐的添加开始10分钟后,相对于第3电极在第1电极施加0.5V的电位。从而,测定电位施加后5秒钟后的电流值。以上的实验在室温(约25℃)下进行。
对于电解槽容器中的水溶液中含有的肌酸酐浓度为0、1、2、5、10、20、30、40、和50mM的情况分别进行以上的测定。
图11是相对于肌酸酐浓度绘制所测定的电流值的图表。图11中,横轴表示电解槽容器中的水溶液中含有的肌酸酐浓度(mM)、纵轴表示所测定的电流值(μA)。从图11能够得知,所得到的电流值相对于电解槽容器中的水溶液中含有的肌酸酐浓度的增加而直线增加(即、成比例),表示电流值与肌酸酐浓度高相关。因此,可知依照本发明的肌酸酐浓度测定方法,能够根据得到的电流值进行肌酸酐的定量。
测定后,对于残留在电解槽容器中的、肌酸酐浓度不同的多种水溶液,通过使用着色谱柱的色谱分析法进行反应生成物的分析。分析的结果可知在电解槽容器中的水溶液中生成有4价的六氰基铁酸盐。另外,4价的六氰基铁酸盐的生成量是每1分子肌酸酐最大生成4分子。从以上的分析结果,能够对本发明的肌酸酐浓度测定方法下的反应进行下述说明。
试样中,3价的六氰基铁酸盐在磷酸系缓冲剂的存在下,与肌酸酐反应而被还原,变换为4价的六氰基铁酸盐。即、肌酸酐通过本反应对3价的六氰基铁酸盐供给电子,而被氧化。这时,能够考察出肌酸酐通过本反应受到最大4电子的氧化。在第1电极施加从4价的六氰基铁酸盐接收电子的电位。因此,所生成的4价的六氰基铁酸盐在第1电极被电化学氧化。随之,在第1电极有电流流动。在一定时间生成的4价的六氰基铁酸盐的浓度依存于肌酸酐浓度。另外,4价的六氰基铁酸盐的氧化电流依存于试样中存在的4价的六氰基铁酸盐的浓度。所以,得到的电流值依存于肌酸酐浓度。
(实施例2)
接着,为了调查本发明中的肌酸酐浓度测定方法中优选的pH范围,进行下述实验。实验中使用的试样的调制方法和装置结构以和实验顺序与实施例1相同,所以省略说明。但是,本实施例中,试样中的肌酸酐浓度为27mM。另外,对于添加到试样中的磷酸系缓冲溶液的pH是2、2.5、3、4、5、6、7、8、和9的情况分别进行与实施例1相同的测定。
表1表示电流值的测定结果。在pH是2.5~7的区域尤其是在3~6的区域中,电流值显著变大,并且电流值稳定。从该结果发现在上述pH区域中,能够灵敏度特别好且以高的再现性测定肌酸酐的定量。上述区域中,pH5~6能够通过磷酸系缓冲剂得到。另外,可知在磷酸系缓冲剂的存在下,肌酸酐与3价的六氰基铁酸盐的反应速度变快。因此,优选将磷酸系缓冲剂与试样混合,将pH调整为5~6。另外,这样的pH通过磷酸氢离子与磷酸二氢离子得到。因此,作为磷酸系缓冲剂,优选组合使用例如磷酸氢二钾或磷酸氢二钠与磷酸二氢钾或磷酸二氢钠。另外,在pH是2.5~7的区域中,也能够得到电流值,能够进行肌酸酐的定量。
[表1]
(实施例3)
接着,为了调查本发明的肌酸酐浓度测定方法中,试样中可含有的共存物质的影响,进行以下的实验。
作为生物体试样中能含有的共存物质,例举出离子种、酶变性剂、肌酸酐的酶反应生成物、糖、氨基酸等。因此,本实施例中,作为共存物质的代表例,使用通过溶解在试样中而生成离子种的NaCl、作为酶变性剂的尿素、作为肌酸酐的酶反应生成物的肌酸、肌氨酸和甘氨酸、作为糖的葡萄糖、以和作为氨基酸的组氨酸、牛磺酸(taurine)、谷氨酰胺(Glutamine、谷氨酸盐)、和丝氨酸。
按照与实施例1相同的顺序,调制浓度50mM的磷酸缓冲溶液(pH=6),按照成为规定的浓度的方式在该缓冲溶液中溶解了各共存物质。进行了室温25℃下的测定与为了促进反应而将试样加温到60℃的测定。其它的试样的调制方法和装置结构以和实验的顺序与实施例1相同,所以省略说明。
表2表示使用着的共存物质和其浓度、与测定的电流值。表2中,试样1是不含共存物质而含有3mM的肌酸酐的磷酸缓冲溶液。另外,试样2~11含有表2记载的各共存物质,肌酸酐不含。表2中,表示以试样1中测定的电流值为100的情况下,测定的电流值的相对值。
从表2可知,含有任意共存物质的试样也含有肌酸酐,与不存在共存物质的试样1相比,没有测定有意的电流。从该结果可知本发明中的肌酸酐浓度测定方法即使在试样中含有NaCl、尿素、肌酸(creatine)、肌氨酸(sarcosine)、甘氨酸(glycine)、葡萄糖(glucose)、组氨酸(histidine)、牛磺酸(taurine)、谷氨酰胺(glutamine)、和丝氨酸(serine)的任意的物质也不会受到影响。
[表2]
另一方面,可知如碱性苦味酸法那样,在碱性溶液中使用氧化剂进行肌酸酐的定量的现有的方法中,糖或氨基酸给测定结果的影响大。这是因为在碱性溶液中苦味酸与肌酸酐一样,易于与多数的有机分子反应。
作为比较例,按照现有的酶法进行同样的试样。首先,调制了含有7U/mL肌酸酐酰胺水解酶(肌酸酐酶)(东洋纺株式会社制、CNH-311)、10U/mL肌酸脒基水解酶(creatinase)(东洋纺株式会社制、CRH-221)、5U/mL肌氨酸氧化酶(东洋纺株式会社制、SAO-351)、和100mM铁***的50mM磷酸缓冲溶液(pH=7)。
按照浓度成为3mM的方式在上述的磷酸缓冲溶液中添加肌酸酐,调制了试样12。
按照浓度成为0.5M的方式,进一步在试样12中添加NaCl作为共存物质,调制了试样13。
按照浓度成为1M的方式,进一步在试样12中添加尿素作为共存物质,调制了试样14。
对于试样12~14,为了促进反应而将试样加温到40℃,除此之外,按照与本实施例相同的顺序进行了实验。
表3表示比较例得到的结果。电流值通过以对试样12测定的电流值为100的相对值来表示。
从表3可知,试样中存在0.5M的NaCl或1M的尿素时,与没有存在共存物质的情况相比较,由肌酸酐引起的电流值大大降低。这样的结果可认为是因为高浓度的NaCl或尿素使得酶蛋白质变性。可知由于这些共存物质,使用于测定的酶的活性下降为25~80%。认为酶的变性的结果是酶活性降低,一定时间内的反应的进行下降,所以电流值减少。并且认为这样的倾向在室温下也一样。
[表3]
共存物质 | 电流 | |
试样12 | 无 | 100.0 |
试样13 | 0.5M NaCl | 89.8 |
试样14 | 1M尿素 | 96.4 |
从以上的结果可知,根据本发明的肌酸酐浓度测定方法,能够不受离子种、尿素、肌酸酐的酶反应生成物、糖、氨基酸等的共存成分的影响,与现有的测定方法相比能够精度良好地对试样中含有的肌酸酐进行定量。
(实施例4)
为了确认本发明中的肌酸酐浓度测定方法的效果进行以下的实验。
本实施例中,使用下述式(8)表示的4价的负离子即六氰基钌酸盐的钾盐(三津和化学药品株式会社制)作为肌酸酐定量用试剂。
K4[Ru(CN)6](8)
首先,调制出200mM的磷酸氢二钾水溶液与200mM的磷酸二氢钾水溶液。在使用pH计进行监测的同时交互混合两种水溶液,从而将所得的混合水溶液的pH调整为6。在这样得到的200mM的磷酸系缓冲溶液(pH=6)中溶解式(8)所示的六氰基钌酸盐的钾盐,使得浓度成为1mM。
本实施例中使用的电解槽容器和测定装置的结构与实施例1相同而省略说明。
接着,将浓度500mM的肌酸酐水溶液少量添加到上述电解槽容器中的水溶液。在每次测定时调整肌酸酐水溶液的添加量,使得电解槽容器中的水溶液含有的肌酸酐浓度成为规定的值。对于电解槽容器中的水溶液含有的肌酸酐浓度为0、8、16、32、和64mM的情况分别进行以下的测定。
添加肌酸酐水溶液后,利用电化学分析仪(ALS社制、ALS-660A)从相对于第3电极的0.5V向1V扫描施加到第1电极的电位,并接着从1V向0.5V扫描,测定这时流动的电流。电位的扫描速度是1mV/秒。
图12表示测定结果(cyclic voltammogram,循环伏安图)。图12中,曲线A~E表示肌酸酐浓度分别为0、8、16、32、和64mM时的测定结果。不存在肌酸酐的情况下,看到以0.75V附近为氧化还原电位的六氰基钌酸盐在第1电极上的氧化还原反应。通过添加肌酸酐,比0.8V积极的电位下的电流有意增加。以上的结果暗示出肌酸酐被六氰基钌酸盐的氧化体氧化,生成的六氰基钌酸盐的还原体在第1电极被氧化。即,表示肌酸酐的电化学催化剂氧化反应通过六氰基钌酸盐进行。
对于肌酸酐浓度不同的各试样,从图12所示的循环伏安图求出0.9V下的氧化电流值,计算出与肌酸酐浓度为0时的氧化电流值的差。图13是相对于肌酸酐浓度绘制得到的氧化电流值的差的图表。如图13所示,得到的氧化电流值与肌酸酐的浓度的增大共同增加。因此,可知通过如本实施例那样进行循环伏安法求氧化电流值,能够进行肌酸酐的定量。
此外,本实施例中,通过循环伏安法测定了氧化电流,但是并不限定于此。也可以取代上述,例如,相对于第3电极向第1电极施加0.9V的一定电位,在添加肌酸酐而经过一定时间(例如3分钟)后测定流动的氧化电流。这时,氧化电流值根据试样中含有的肌酸酐的浓度而增加,能够进行肌酸酐的定量。
(实施例5)
为了确认本发明中的肌酸酐浓度测定方法的效果进行下述的实验。
本实施例中,使用铁***(ポタシウムフエリシアネ一ト,Potassium ferricyanate)作为六氰基铁酸盐的金属络合物,使用阳离子瓜尔胶作为阳离子化亲水性聚合物。另外,按照与实施方式1相同的顺序制作具有图1所示的结构的肌酸酐浓度测定设备。本实施例中,作为阳离子瓜尔胶使用市售的瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵。
在形成试剂层130时使用的含有试剂的水溶液按照下述方式调制。首先,调制出400mM的磷酸氢二钾水溶液与400mM的磷酸二氢钾水溶液。接着,在使用pH计进行监测的同时交互混合两种水溶液,从而将得到的混合水溶液的pH调整为6。最后,在这样得到的400mM的磷酸系缓冲溶液(pH=6)中溶解铁***,使得浓度成为100mM,通过按照浓度成为0.25重量%的方式溶解阳离子瓜尔胶,得到含有试剂的水溶液。
通过在第1电极112和第2电极114上滴定1.4μL按照上述顺序调制的水溶液形成试剂层130。形成试剂层130的区域的面积为3mm2。另外,所制作的肌酸酐浓度测定设备的试样收容室的容积是0.6μL。
另外,作为参考例,除了在形成试剂层时使用的水溶液中不添加阳离子瓜尔胶这方面外,按照与实施例1相同的顺序,制作具有图1所示的结构的肌酸酐浓度测定设备。
在肌酸酐浓度测定设备的第1引线、和第2引线分别连接上电化学分析仪(ALS社制、ALS-660A)的作用极用端子、以和对极、参照极用的两个端子。之后,通过使溶解有作为试样的肌酸酐的水溶液接触肌酸酐浓度测定设备的试样导入口,将0.6μL的试样导入试样收容室内。从试样的导入开始经过60秒钟后,使用上述电化学分析仪,施加第1电极与第2电极相比为+0.6V的电压。从电压的施加开始经过10秒钟后,测定在第1电极与第2电极之间流动的电流。以上的实验在室温(约25℃)下进行。
分别对肌酸酐浓度为0、10、30、和40mM的试样进行以上的测定。
图14是对于肌酸酐浓度绘制使用实施例5的肌酸酐浓度测定设备测定的电流值的图表。图14中,横轴表示试样中含有的肌酸酐浓度(mM),纵轴表示测定的电流值(μA)。从图14可知,得到的电流值相对于试样中含有的肌酸酐浓度的增加直线增加(即,成比例),表示电流值与肌酸酐浓度高相关。
图15是表示使用实施例5和参考例的肌酸酐浓度测定设备测定的电流值的偏差(变动系数)的图表。图15中,横轴表示试样中含有的肌酸酐浓度(mM),纵轴表示变动系数(%)。另外,白色柱状图表示实施例5的数据,黑色柱状图表示参考例的数据。
从图15可知,在对肌酸酐浓度不同的任意试样进行测定的情况下,与参考例相比,在实施例5的肌酸酐浓度测定设备中,变动系数变低。从该结果可知,通过在试剂层添加阳离子瓜尔胶,肌酸酐浓度测定的再现性提高。
产业上的可利用性
本发明在对试样尤其是尿等的生物体试样中所含有的肌酸酐进行定量时是有用的。
Claims (7)
1.一种肌酸酐浓度测定方法,该肌酸酐浓度测定方法是尿或者血液中含有的肌酸酐浓度的测定方法,其特征在于,包括:
(A)在作用于肌酸酐的酶和苦味酸的任一种都不存在的条件下,将含有六氰基铁酸盐和六氰基钌酸盐中的至少一方的金属络合物的肌酸酐定量用试剂与含有肌酸酐的尿或者血液混合,通过所述肌酸酐还原所述金属络合物的工序,此处,在所述工序(A)中,混合后的所述尿或者血液的pH为2.5以上7以下;
(B)以电化学的方式测定所述工序A中还原的金属络合物的量的工序;和
(C)根据在所述工序B中测定的所述还原的金属络合物的量,求得所述尿或者血液中含有的所述肌酸酐的浓度的工序。
2.根据权利要求1所述的肌酸酐浓度测定方法,其特征在于:在工序A中混合后的所述尿或者血液的pH为3以上6以下。
3.根据权利要求1所述的肌酸酐浓度测定方法,其特征在于:在所述工序A中,
进一步将磷酸系缓冲剂混合到所述尿或者血液中。
4.根据权利要求1所述的肌酸酐浓度测定方法,其特征在于:
在所述工序A中,
通过进一步将磷酸系缓冲剂混合到所述尿或者血液中,将所述尿或者血液的pH调整为5~6。
5.根据权利要求1所述的肌酸酐浓度测定方法,其特征在于:
在所述工序A中,
进一步将阳离子化亲水性聚合物混合到所述尿或者血液中。
6.根据权利要求5所述的肌酸酐浓度测定方法,其特征在于:
所述阳离子化亲水性聚合物是阳离子瓜尔胶。
7.根据权利要求1所述的肌酸酐浓度测定方法,其特征在于,
所述工序B包括:
(D)使两个以上的电极接触所述尿或者血液,在所述两个电极间施加电压的工序;和
(E)对在所述两个电极间流动的电流值或者电荷量进行检测的工序,
在所述工序C中,
根据在所述工序E中检测到的所述电流值或者所述电荷量,求得所述尿或者血液中所含的所述肌酸酐的浓度。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2008129380 | 2008-05-16 | ||
JP2008-129380 | 2008-05-16 | ||
JP2008136225 | 2008-05-26 | ||
JP2008-136225 | 2008-05-26 | ||
PCT/JP2009/002166 WO2009144881A1 (ja) | 2008-05-16 | 2009-05-15 | クレアチニン濃度の測定方法、測定デバイス、及び測定装置、並びにそれらを用いた塩分量の測定方法、測定デバイス、及び測定装置 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201010293618.3A Division CN101949939A (zh) | 2008-05-16 | 2009-05-15 | 盐分量测定方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101939640A CN101939640A (zh) | 2011-01-05 |
CN101939640B true CN101939640B (zh) | 2013-05-22 |
Family
ID=41376772
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201010293618.3A Withdrawn CN101949939A (zh) | 2008-05-16 | 2009-05-15 | 盐分量测定方法 |
CN200980104263.4A Active CN101939640B (zh) | 2008-05-16 | 2009-05-15 | 肌酸酐浓度和盐分量的测定方法、测定设备和测定装置 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201010293618.3A Withdrawn CN101949939A (zh) | 2008-05-16 | 2009-05-15 | 盐分量测定方法 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US7816145B2 (zh) |
EP (1) | EP2228645B1 (zh) |
JP (2) | JP4486702B2 (zh) |
CN (2) | CN101949939A (zh) |
WO (1) | WO2009144881A1 (zh) |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP5778617B2 (ja) * | 2011-04-25 | 2015-09-16 | アークレイ株式会社 | 分析システム、分析方法及び分析プログラム |
EP2737078B1 (en) | 2011-07-27 | 2017-11-01 | Agamatrix, Inc. | Reagents for electrochemical test strips |
JP5984814B2 (ja) * | 2011-08-05 | 2016-09-06 | オムロンヘルスケア株式会社 | 尿成分分析装置および尿成分分析方法 |
US9084975B2 (en) | 2012-08-20 | 2015-07-21 | Sabic Global Technologies B.V. | Real-time online determination of caustic in process scrubbers using near infrared spectroscopy and chemometrics |
US11209382B2 (en) | 2014-12-18 | 2021-12-28 | Radiometer Medical Aps | Calibration concept for amperometric creatinine sensor correcting for endogenous modulators |
WO2016181229A1 (en) * | 2015-05-12 | 2016-11-17 | Indian Insitute Of Science | Device and method for detecting creatinine and albumin to creatinine ratio |
JP6527406B2 (ja) | 2015-07-01 | 2019-06-05 | 本田技研工業株式会社 | 分析用電池及びその製造方法 |
JP6471069B2 (ja) * | 2015-08-26 | 2019-02-13 | 本田技研工業株式会社 | 分析用電池 |
EP3435868A4 (en) * | 2016-03-31 | 2020-01-01 | Polymer Technology Systems, Inc. | SYSTEMS AND METHODS FOR ELECTROCHEMICAL ASSAYS OF CREATININE |
TW201819898A (zh) * | 2016-11-30 | 2018-06-01 | 友達光電股份有限公司 | 化學感測器及其製造方法 |
JP7011906B2 (ja) * | 2017-08-25 | 2022-01-27 | 国立大学法人 筑波大学 | クレアチニンセンサ |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1142867A (zh) * | 1993-12-08 | 1997-02-12 | 尤尼利弗公司 | 电化学测量方法和仪器 |
WO2003057905A1 (fr) * | 2001-12-28 | 2003-07-17 | Arkray, Inc. | Procede de colorimetrie et reactif utilise dans ce procede |
CN1705883A (zh) * | 2002-10-15 | 2005-12-07 | 爱科来株式会社 | 肌酸酐测定用试片 |
JP2006349412A (ja) * | 2005-06-14 | 2006-12-28 | National Institute Of Advanced Industrial & Technology | クレアチニンバイオセンサ |
JP2008070346A (ja) * | 2006-09-15 | 2008-03-27 | Shino Test Corp | 生体試料中の測定対象物質の測定方法及び測定試薬、ヘモグロビンの影響回避方法、並びにヘモグロビンの影響回避剤 |
Family Cites Families (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3705013A (en) | 1970-01-05 | 1972-12-05 | Xerox Corp | Analytical procedures and compositions therefor |
CS164231B2 (zh) * | 1972-09-28 | 1975-11-07 | ||
JPS54151095A (en) | 1978-05-19 | 1979-11-27 | Eiken Chemical | Method of measuring quantity of creatine and creatinine |
US4215197A (en) | 1978-08-04 | 1980-07-29 | Miles Laboratories, Inc. | Test means and method for creatinine determination |
US5141868A (en) | 1984-06-13 | 1992-08-25 | Internationale Octrooi Maatschappij "Octropa" Bv | Device for use in chemical test procedures |
US4812399A (en) | 1986-04-21 | 1989-03-14 | Eastman Kodak Company | Analytical element and method for the determination of creatinine or creatine |
JPS6333661A (ja) | 1986-07-28 | 1988-02-13 | Otsuka Pharmaceut Co Ltd | クレアチニン定量用試薬組成物 |
JPH0698032B2 (ja) | 1987-01-23 | 1994-12-07 | 財団法人野田産業科学研究所 | クレアチンもしくはクレアチニンの測定法及びこれらの測定用試薬 |
US5200051A (en) | 1988-11-14 | 1993-04-06 | I-Stat Corporation | Wholly microfabricated biosensors and process for the manufacture and use thereof |
JP3259010B2 (ja) | 1994-03-10 | 2002-02-18 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | 酵素電極およびそれを使用する測定器 |
JP3516002B2 (ja) * | 1995-08-29 | 2004-04-05 | アークレイ株式会社 | クレアチニン測定用試験片 |
JP3853407B2 (ja) | 1995-10-31 | 2006-12-06 | ロッシュ ディアグノスティクス ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 免疫学的自動分析装置 |
US5958786A (en) | 1997-08-05 | 1999-09-28 | Bayer Corporation | Fluorescent polymeric sensor for the detection of creatinine |
AT408662B (de) * | 2000-05-16 | 2002-02-25 | Hoffmann La Roche | Creatinin-sensor |
US6767441B1 (en) * | 2001-07-31 | 2004-07-27 | Nova Biomedical Corporation | Biosensor with peroxidase enzyme |
JP2003326172A (ja) | 2002-05-14 | 2003-11-18 | Koji Hayade | 酵素模倣ポリマー |
JP2004138407A (ja) * | 2002-10-15 | 2004-05-13 | Arkray Inc | クレアチニン測定用試験片 |
JP2005118014A (ja) | 2003-10-20 | 2005-05-12 | Arkray Inc | 分析方法およびそれに用いる試薬 |
-
2009
- 2009-05-15 EP EP09754390.4A patent/EP2228645B1/en active Active
- 2009-05-15 CN CN201010293618.3A patent/CN101949939A/zh not_active Withdrawn
- 2009-05-15 JP JP2009541527A patent/JP4486702B2/ja active Active
- 2009-05-15 WO PCT/JP2009/002166 patent/WO2009144881A1/ja active Application Filing
- 2009-05-15 CN CN200980104263.4A patent/CN101939640B/zh active Active
-
2010
- 2010-02-05 JP JP2010024487A patent/JP4510933B2/ja active Active
- 2010-03-04 US US12/717,493 patent/US7816145B2/en active Active
- 2010-09-28 US US12/892,428 patent/US20110014712A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1142867A (zh) * | 1993-12-08 | 1997-02-12 | 尤尼利弗公司 | 电化学测量方法和仪器 |
WO2003057905A1 (fr) * | 2001-12-28 | 2003-07-17 | Arkray, Inc. | Procede de colorimetrie et reactif utilise dans ce procede |
CN1705883A (zh) * | 2002-10-15 | 2005-12-07 | 爱科来株式会社 | 肌酸酐测定用试片 |
JP2006349412A (ja) * | 2005-06-14 | 2006-12-28 | National Institute Of Advanced Industrial & Technology | クレアチニンバイオセンサ |
JP2008070346A (ja) * | 2006-09-15 | 2008-03-27 | Shino Test Corp | 生体試料中の測定対象物質の測定方法及び測定試薬、ヘモグロビンの影響回避方法、並びにヘモグロビンの影響回避剤 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
杨维平,王卓,章竹君.偶合反应流动注射化学发光分析法测定有机还原性物质的研究.《陕西师范大学学报(自然科学版)》.2003,第31卷(第2期),67-70. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20110014712A1 (en) | 2011-01-20 |
CN101939640A (zh) | 2011-01-05 |
JP4510933B2 (ja) | 2010-07-28 |
JP2010151826A (ja) | 2010-07-08 |
EP2228645B1 (en) | 2013-09-04 |
EP2228645A4 (en) | 2011-01-26 |
JPWO2009144881A1 (ja) | 2011-10-06 |
JP4486702B2 (ja) | 2010-06-23 |
CN101949939A (zh) | 2011-01-19 |
US7816145B2 (en) | 2010-10-19 |
WO2009144881A1 (ja) | 2009-12-03 |
EP2228645A1 (en) | 2010-09-15 |
US20100159606A1 (en) | 2010-06-24 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101939640B (zh) | 肌酸酐浓度和盐分量的测定方法、测定设备和测定装置 | |
CN101883982B (zh) | 肌酸酐浓度的测定方法、测定器件及测定装置和使用这些的尿中盐分量的测定方法、测定器件及测定装置 | |
CA2700507C (en) | Multi-region and potential test sensors, methods, and systems | |
JP3387926B2 (ja) | 電位差式バイオセンサー及びその使用方法 | |
Shin et al. | A planar amperometric creatinine biosensor employing an insoluble oxidizing agent for removing redox-active interferences | |
CN108120761B (zh) | 基于具有电催化活性的多肽模拟物的电化学生物传感器用于乙酰胆碱酯酶检测 | |
Liu et al. | Integrated hand-held electrochemical sensor for multicomponent detection in urine | |
Martín-Yerga et al. | In situ spectroelectrochemical monitoring of dye bleaching after electrogeneration of chlorine-based species: application to chloride detection | |
Ding et al. | Optical ion sensing platform based on potential-modulated release of enzyme | |
Gülce et al. | Polyvinylferrocenium immobilized enzyme electrode for choline analysis | |
CN110376269A (zh) | 确定输入信号持续时间的方法 | |
US8124418B2 (en) | Method for electrochemically measuring phosphoric acid and/or phosphate | |
Izadi et al. | Influence of protein modification and glycosylation in the catalytic hydrogen evolution reaction of avidin and neutravidin: an electrochemical analysis | |
JPH04118554A (ja) | 電気化学的酵素測定方法およびバイオセンサ | |
Babu et al. | Enzymatic Precipitation of Highly Electroactive and Ion-Transporting Prussian Blue for a Sensitive Electrochemical Immunosensor | |
JP2010008182A (ja) | クレアチニン測定方法、クレアチニン測定デバイス、及びクレアチニン測定装置、並びにそれらを用いた尿中塩分量測定方法、尿中塩分量測定デバイス、及び尿中塩分量測定装置 | |
JP2009281907A (ja) | クレアチニン測定方法、クレアチニン測定デバイス、及びクレアチニン測定装置、並びにそれらを用いた尿中塩分量測定方法、尿中塩分量測定デバイス、及び尿中塩分量測定装置 | |
Evtugyn et al. | Biosensor Signal Transducers | |
Mann et al. | Microplate-compatible biamperometry array for parallel 48-channel amperometric or coulometric measurements | |
JP2010008183A (ja) | クレアチニン測定方法、クレアチニン測定デバイス、及びクレアチニン測定装置、並びにそれらを用いた尿中塩分量測定方法、尿中塩分量測定デバイス、及び尿中塩分量測定装置 | |
Gallardo-Soto | Characterisation and applications of AC impedance biosensors | |
JP2009281906A (ja) | クレアチニン測定方法、クレアチニン測定デバイス、及びクレアチニン測定装置、並びにそれらを用いた尿中塩分量測定方法、尿中塩分量測定デバイス、及び尿中塩分量測定装置 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |