CN101862392B

CN101862392B - 鱼腥草防治血栓的新制药用途

Info

Publication number: CN101862392B
Application number: CN2009102373481A
Authority: CN
Inventors: 梁爱华; 李春英
Original assignee: Institute of Materia Medica of CAMS
Current assignee: Institute of Materia Medica of CAMS
Priority date: 2009-11-16
Filing date: 2009-11-16
Publication date: 2012-03-21
Anticipated expiration: 2029-11-16
Also published as: CN101862392A

Abstract

本发明属于医药领域，涉及鱼腥草防治血栓的新制药用途，以提供鱼腥草在制备预防和/或治疗血栓的药物、制备抗凝血药物中的新的应用。采用鲜或干鱼腥草，用蒸馏法、水煎、有机溶剂提取或采用挥发油提取方法制备鱼腥草活性部分。经过动物试验证明，鱼腥草具有明显的抗血栓、抑制血栓导致的血小板消耗和白细胞消耗的作用。这些作用在鱼腥草以往的研究和临床上未见报道和应用，故本发明具有独特性及新颖性。鱼腥草资源广泛，提取方法简便，可制成各种剂型；血栓性疾病是最常见的疾病，临床用药需求巨大，因此本发明具有很强的实用性，其在预防和/或治疗血栓方面的应用前景十分广阔。

Description

鱼腥草防治血栓的新制药用途

一、技术领域

本发明属于医药领域。

二、背景技术

鱼腥草是三白草科植物蕺菜，别名侧耳根、猪鼻拱(猪鼻孔)、九节莲、折耳根、肺形草、臭腥草。鱼腥草全草(地上部分和地下部分)均既可食用也可药用。作为药用时，既可用鲜品，也可用干燥品。鱼腥草具有清热解毒，消痈排脓，利尿通淋的功能。用于肺痈吐脓，痰热喘咳，热痢，热淋，痈肿疮毒，如肺脓肿，痰热咳嗽，肾炎水肿，***，痈疖。在临床上，鱼腥草被制成外用、口服和注射剂应用。

1.鱼腥草被报道有多方面的药效作用，但未见有抗血栓或抗凝血方面的研究报道。

以往的研究证明鱼腥草有以下作用：(1)抗病原微生物作用：能抑制金黄色葡萄球菌、流感杆菌、肺炎双球菌生长；(2)利尿作用，能增加尿液分泌，可用于***的频尿涩痛；(3)增强免疫作用：能提高慢性气管炎患者白血球的吞噬作用；(4)抗过敏作用：能改善动物过敏性鼻炎症状。但未见有关鱼腥草抗血栓或抗凝血的文献记载或正式公开的研究报道。

2.鱼腥草临床应用广泛，但未见其在血栓性疾病防治方面的应用

鱼腥草在临床应用广泛，既可单独使用，也可与其他药物组成复方应用，既有注射剂，也有口服、外用制剂使用。其用途多用于治疗病毒或细菌导致的呼吸道感染、***、咽炎、扁桃体炎、肾炎等疾病。鱼腥草注射剂应用很广泛。根据鱼腥草注射液的国家标准和生产厂家的说明书，鱼腥草注射液的【功能主治】为清热，解毒，利湿。应用范围为：肺脓疡，痰热咳嗽，白带，***，痈疖。鱼腥草复方制剂如复方鱼腥草片(鱼腥草、黄芩、板蓝根、连翘、金银花)的【功能主治】为清热解毒，用于外感风热所致的急喉痹、急乳蛾，症见咽部红肿、咽痛；急性咽炎、急性扁桃体炎见上述证候者。鱼腥草滴眼液的【功能主治】为清热，解毒，利湿。用于风热疫毒，暴风客热，天行赤眼暴翳(急性卡他性结膜炎，流行性角结膜炎)。迄今，未见鱼腥草单独或以鱼腥草为主要成分的复方以任何用药途径的相关制剂用于防治血栓或凝血的临床应用报道。

三、发明内容

为了充分利用鱼腥草资源，扩大鱼腥草的临床应用，本发明人经过鱼腥草给予大鼠血栓模型后对血栓的抑制作用研究；鱼腥草给予大鼠血栓模型后对血栓造成的血小板消耗的影响；鱼腥草给予大鼠血栓模型后对血栓造成的白细胞消耗的影响等实验，证明了鱼腥草有防治血栓、抗凝血的新作用。因此，本发明的目的是提供鱼腥草在制备预防和/或治疗血栓药物中的应用，在制备抗凝血药物中的应用以及在制备治疗心血管疾病的药物组合物中的应用。

技术解决方案：

本发明内容为：提供鱼腥草在制备预防和/或治疗血栓药物中的新的应用，在制备抗凝血药物中的新的应用。

所述的鱼腥草是鲜或干鱼腥草全草、地上或地下部分的提取物，其制备可采取如下方法：

1.取鲜或干鱼腥草1000g进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液1000ml，再进行重蒸馏，收集蒸馏液500ml，加入3.5g氯化钠及适量的助溶剂(如聚山梨酯80或solution HS15或其他可接受的助溶剂)，混匀，加注射用水使成1000ml，滤过，灭菌。

2.取鲜或干鱼腥草1000g，用沙氏提取器提取挥发油。用生理盐水配制挥发油的饱和水溶液，为了提高挥发油的溶解度，可加入适量可接受的助溶剂(如聚山梨酯80或solution HS15或其他可接受的助溶剂)。

3.取鲜或干鱼腥草100g，加入800ml水煎煮至沸腾后20min，反复2次，合并过滤药液，浓缩至200ml，制得水煎液可以直接入制剂用。为了去除鞣质，也可以将水煎液中再加入95％乙醇，搅拌后，静置过夜。取出上清，过滤，回收乙醇后，制成200ml液体。

4.鱼腥草200g，粉碎成小段，放入合适体积的容器中。加入乙醇或***或石油醚1200ml，塞紧瓶口，浸泡24～48h。滤出药液，挥干石油醚。

本发明的产品包括含有鱼腥草的涉及抗血栓、抗凝血相关应用的药品或保健品。

本发明的产品包括涉及含有鱼腥草的涉及抗血栓、抗凝血相关应用的人用和兽用产品。

本发明再一方面还涉及以鱼腥草提取物为活性成分，以抗血栓、抗凝血为适应症的药物组合物。该药物组合物可将本发明技术方案中所述的方法制备的提取物，与一种或多种药学上可接受的固体或液体赋型剂和/或辅料结合，制成适于人或动物使用的任何剂型。给药途径可为肠道或非肠道途径，如：口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮肤、***、直肠等。给药剂型可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可以是溶液剂(包括真溶液和胶体溶液)、乳剂、微乳、混悬剂、注射剂(包括水针剂、粉针剂和输液)、滴眼剂、滴鼻剂、洗剂、搽剂等；固体制剂可以是片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片等)、胶囊剂(包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、栓剂、膜剂、贴片、气(粉)雾剂、喷雾剂等；半固体制剂可以是软膏剂、凝胶剂、糊剂等。制剂可以制成普通制剂、也可以是缓释剂、控释剂、靶向制剂及各种微粒给药***。

本发明具有的优点和效果：

1.鱼腥草资源非常广泛，提取方法简单易行，可制成注射液、胶囊剂、浓缩丸、颗粒剂、片剂、散剂、口服液等药物制剂。

2.经动物试验证明，鱼腥草能够明显抑制血栓模型的血栓形成，显著缩短血栓长度，抑制由于血栓形成和凝血而导致的血小板下降，抑制血栓形成过程中的白细胞数降低。

四、附图说明

无附图。

五、具体实施方式

实施例一：鱼腥草的航血栓作用试验

1.鱼腥草制备方法

取鲜或干鱼腥草1000g进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液1000ml，再进行重蒸馏，收集蒸馏液500ml，加入3.5g氯化钠及适量的助溶剂(如聚山梨酯80或solution HS15或其他可接受的助溶剂)，混匀，加注射用水使成1000ml，滤过，灭菌。

2.动物实验方法：

将大鼠按随机分组，每组10只，分别为：①正常组；②血栓模型组(角叉菜胶Ca/内毒素LPS造模)；③鱼腥草24ml/kg；④鱼腥草12ml/kg。试验第一天，③、④组大鼠腹腔注射鱼腥草，①、②组腹腔注射生理盐水5ml/kg，每组分别上午和下午各注射1次；下午注射给药完毕后(16:00pm)，除了正常组以外，其他三组均腹腔注射角叉菜胶25mg/kg。随后，将动物禁食16～18h。次日，鱼腥草二个剂量组再腹腔注射给药一次，正常对照组和模型组仍然腹腔注射生理盐水。给药后30分钟，正常对照组静脉注射给予生理盐水0.24ml/100g，其他三个组的动物均经静脉注射给予内毒素(LPS)50μg/kg(每ml含LPS 20μg)。于注射LPS后24h，用卡尺测量大鼠尾部的血栓长度。

3.抗血栓试验结果

采用角叉菜胶/LPS造模后，模型组动物体内形成血栓，具体表现在动物的尾巴远端，形成约5-9cm的血栓长度，由于血栓阻塞尾动脉和静脉血管，而使得相应的组织以及皮肤因缺血而呈现为紫色，因此，血栓长度很容易测量。从表1结果可见，模型组的血栓长度平均约为7.7cm，鱼腥草24ml/kg和12mg/kg均能抑制大鼠血栓形成，其中，24ml/kg组与对照组比较有非常显著的统计学差异(P＜0.05)。结果表明，鱼腥草能够明显抑制血栓形成。

表1 鱼腥草对大鼠血栓形成的抑制作用

注：与模型组比较^**P＜0.01

实施例二：鱼腥草对血栓造成的白细胞消耗的影响

1.鱼腥草制备方法

取鲜或干鱼腥草1000g进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液1000ml，再进行重蒸馏，收集蒸馏液500ml，加入3.5g氯化钠及适量的助溶剂，混匀，加注射用水使成1000ml，滤过，灭菌。

2.动物实验方法

将大鼠按随机分组，每组10只，分别为：①正常组；②血栓模型组(角叉菜胶Ca/内毒素LPS造模)；③鱼腥草24ml/kg；④鱼腥草12ml/kg。试验第一天，③、④组大鼠腹腔注射鱼腥草，①、②组腹腔注射生理盐水5ml/kg，每组分别上午和下午各注射1次；下午注射给药完毕后(16:00pm)，除了正常组以外，其他三组均腹腔注射角叉菜胶25mg/kg。随后，将动物禁食16～18h。次日，鱼腥草二个剂量组再腹腔注射给药一次，正常对照组和模型组仍然腹腔注射生理盐水。给药后30分钟，正常对照组静脉注射给予生理盐水0.24ml/100g，其他三个组的动物均经静脉注射给予内毒素(LPS)50μg/kg(每ml含LPS 20μg)。于注射LPS后4h(当日)，从眼眶静脉丛取血，用全自动血球计数仪，测定血栓形成导致的白细胞消耗。

3.实验结果

根据血栓形成的过程，当血栓凝聚时，血栓内会聚集大量的白细胞，从而造成外周血白细胞数量降低，血栓越大，外周血白细胞数越低。因此外周血白细胞数量降低的程度可反应血栓程度。本实验结果显示，模型组大鼠外周血中的白细胞总数在给予LPS后4小时迅速下降62％(与正常对照组比较P＜0.01)，这是由于血栓聚集了大量的白细胞，而导致外周循环血中的白细胞数量迅速下降。鱼腥草能抑制血栓形成造成的白细胞消耗，从而使得外周血白细胞数量明显增高，其中24ml/kg剂量组较模型组增高约40％，并具有统计学显著性差异(P＜0.05)。结果提示，鱼腥草可抑制血栓形成，从而减少白细胞在血栓的聚集，提升外周血中循环的白细胞数量。结果见表2。

表2 鱼腥草对血栓造成的白细胞消耗的影响

注：与对照组比较##P＜0.01，与模型组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01

实施例三、鱼腥草对血栓造成的血小板消耗的影响

1.鱼腥草制备方法

2.动物实验方法

将大鼠按随机分组，每组10只，分别为：①正常组；②血栓模型组(角叉菜胶Ca/内毒素LPS造模)；③鱼腥草24ml/kg；④鱼腥草12ml/kg。试验第一天，③、④组大鼠腹腔注射鱼腥草，①、②组腹腔注射生理盐水5ml/kg，每组分别上午和下午各注射1次；下午注射给药完毕后(16:00pm)，除了正常组以外，其他三组均腹腔注射角叉菜胶25mg/kg。随后，将动物禁食16～18h。次日，鱼腥草二个剂量组再腹腔注射给药一次，正常对照组和模型组仍然腹腔注射生理盐水。给药后30分钟，正常对照组静脉注射给予生理盐水0.24ml/100g，其他三个组的动物均经静脉注射给予内毒素(LPS)50μg/kg(每ml含LPS 20μg)。于注射LPS后24h(次日)，从眼眶静脉丛取血，用全自动血球计数仪，测定血栓形成导致的血小板消耗。

3.实验结果

根据血栓形成的过程，当血栓凝聚时，血栓内会聚集大量的血小板，从而造成外周血血小板数量降低，血栓越大，外周血小板数越低。本实验结果表明，模型组在给予LPS 24h后外周血中的血小板数(PLT)显著下降62％(与正常对照组比较P＜0.01)，这是由于血栓聚集了大量的血小板，从而导致外周循环血中的血小板数量迅速下降。鱼腥草能显著抑制血小板数量降低，其中24ml/kg剂量组较模型组增高约40％，并具有统计学显著性差异(P＜0.05)。结果提示，鱼腥草可抑制血栓形成，从而减少血小板在血栓的聚集，提升外周血中循环的血小板数量。结果见表3。

表3 鱼腥草对血栓形成造成的血小板消耗的抑制作用

注：与对照组比较##P＜0.01，与模型组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01

Claims

1.鱼腥草提取物在制备预防和/或治疗血栓药物中的应用，其特征在于所述的鱼腥草提取物的制备方法为取鲜或干鱼腥草1000g进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液1000ml，再进行重蒸馏，收集蒸馏液500ml，加入3.5g氯化钠及适量的助溶剂，混匀，加注射用水使成1000ml，滤过，灭菌。

2.根据权利要求1所述的应用，鱼腥草提取物在制备预防和/或治疗血栓药物中的应用的产品为药品或保健品。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的预防和/或治疗血栓的药物为人用或兽用。