CN101828514A - 一种大叶藻种子快速萌发方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种大叶藻种子快速萌发方法，其步骤是：将大叶藻种子冲洗干净之后，直接放入5‰的低盐度人工海水；将浸泡有大叶藻种子的5‰低盐度人工海水置入恒温光照培养箱内培养3周使其萌发，该恒温光照保持温度12℃～16℃，光照强度40μmolm-2s-1，L∶D＝12∶12；萌发种子再进入盐度升高驯化阶段：使浸泡已萌发的大叶藻种子的人工海水盐度每天提高5‰，直至达到30‰的正常海水盐度；然后在指定的海场播种已萌发和已适应自然海水盐度的大叶藻种苗。本发明可以使大叶藻种子迅速萌发并且完全正常发育，使大叶藻种子遭受食种子生物吞食的几率大大减少，有利于大叶藻海草场的恢复重建，快速恢复良好的海洋生态环境。
Description
技术领域
本发明涉及大叶藻种子的培育方法，尤其涉及大叶藻种子的快速萌发方法。
背景技术
大叶藻(Zostera marina L.)俗称海带草，属于被子植物门(Angiospermae)，单子叶植物纲(Monocotyledoneae，或称百合纲Liliopsida)，泽泻目(Alismales)，眼子菜科(Potamogetonaceae)，大叶藻属(Zostera L.)，多年生草本，根状茎匍匐，节上生须根。茎疏生分枝，扁平，淡绿色。叶互生，绿色，长条形，长达50厘米以上，宽约3～5毫米，顶端圆形，全缘，有5～7脉，托叶膜质。肉穗花序初时包于佛焰苞内，长4～6厘米，花序轴扁平，边缘无苞片状附属物；花小，单性，雌、雄花沿花序轴一侧交互排成2列，无花被；子房卵状长椭圆形；柱头2，刚毛状。种子矩圆形，长约4毫米，有纵纹。大叶藻分布于我国的山东、河北、辽宁等省份；以及分布于朝鲜、日本、欧洲、北美等国家和地区。大叶藻生于海滩，它具有极高的海洋生态价值，大面积大叶藻形成“海草场”，可为部分经济鱼类以及许多海洋生物提供优良的栖息环境和产卵场，并可以净化海水，对降低海洋环境的富营养化，减少赤潮发生，维护近岸海洋渔业环境，维持海洋生态平衡具有重要价值。由于大叶藻自然资源的减少和衰退，进行大叶藻人工恢复成为海洋环境保护的研究热点之一。利用收集的大叶藻种子进行海草场重建是进行海草场恢复的重要技术手段之一。但大叶藻种子在不利环境下具有休眠的特性，休眠时间可长达一年之久。目前海草场重建是将大叶藻种子采集后直接播种或者播散到海区，由于大叶藻种子具有休眠特性而不能立即进入萌发状态，使大叶藻种子在休眠期间，虽然能顺利度过不利萌发环境，但同时也增加遭受食种子生物的吞食的几率，另外，大叶藻种子休眠的不统一性，也使种子萌发不能同步进行，从而造成种子的大量损失，在自然状态下的大叶藻种子最终能够萌发和成活的数量很低。目前，国内对大叶藻种子萌发进行研究的机构很少，仅有的几家研究机构尝试大叶藻种子在自然海水(自然海水盐度为30‰)中进行萌发试验，该技术缺陷是：萌发速度非常缓慢，需要数月时间才能萌发，这样长的孵化和萌发时间增加了大叶藻种子损失的几率，一定程度上减少了种子有效萌发，增加了海草场重建的成本和劳动强度，达不到大叶藻种子快速萌发的目的。
发明内容
本发明的目的是克服现有大叶藻种子萌发不同步，自然状态下萌发缓慢，影响海草场重建效率的难题，提供一种使大叶藻种子迅速萌发并且完全正常发育的培育方法。
本发明解决上述技术问题的技术方案是：
一种大叶藻种子快速萌发方法，其步骤是：
(1)用人工海水素和纯水配制成盐度为5‰的低盐度人工海水；
(2)将大叶藻种子冲洗干净之后，直接放入上述步骤(1)配制成的5‰的低盐度人工海水；
(3)将上述步骤(2)浸泡有大叶藻种子的5‰低盐度人工海水置入恒温光照培养箱内培养3周使其萌发，该恒温光照保持温度12℃～16℃，光照强度40μmol m-2s-1，L∶D＝12∶12；
(4)萌发的种子进入盐度升高驯化阶段：使浸泡已萌发的大叶藻种子的人工海水盐度每天提高5‰，直至达到30‰的正常海水盐度；
(5)在指定的海场播种已萌发和已适应自然海水盐度的大叶藻种苗。
上述步骤(3)中的最佳恒温光照保持温度为14℃。
本发明的技术效果是：本发明克服了现有大叶藻种子休眠期长，萌发迟缓而影响海草场重建效率的技术难题，应用本发明方法，可以使大叶藻种子迅速萌发并且完全正常发育，达到大叶藻种子快速萌发的目的，使大叶藻种子遭受食种子生物吞食的几率大大减少，有利于大叶藻海草场的恢复重建，快速恢复良好的海洋生态环境。
附图说明
1、图1为本发明步骤流程图。
2、图2为大叶藻种子在盐度5‰的低盐度海水中不同时间种子萌发状态照片。
3、图3为大叶藻种子在盐度30‰的自然海水中不同时间种子萌发状态照片。
具体实施方式
实施例1
如图1所示，一种海洋大叶藻种子快速萌发方法，其步骤是：
(1)用人工海水素和纯水配制成盐度为5‰的低盐度人工海水。
(2)将挑选形状完整，质地坚硬，颗粒饱满，成熟并具有活力的大叶藻种子冲洗干净之后，直接放入上述(1)配制成的5‰低盐度人工海水。大叶藻种子用纯水冲洗时，直到没有明显的附着物和杂质即可，冲洗纯水的水温一般保持常温即可。
(3)将上述步骤(2)浸泡有大叶藻种子的5‰低盐度人工海水置入恒温光照培养箱内培养3周使其萌发，该恒温光照保持温度14℃，光照强度40μmol m-2s-1，L∶D＝12∶12。其中L∶D＝12∶12为光照时间比黑暗时间，即光照12小时，黑暗12小时，模拟昼夜切换。3周后大叶藻种子完全萌发。
(4)萌发的大叶藻种子进入盐度升高驯化阶段：使浸泡已萌发的大叶藻种子的人工海水盐度每天提高5‰，直至达到30‰的正常海水盐度，即：
将浸泡在盐度5‰的人工海水并已经萌发的大叶藻种子放入盐度10‰的人工海水培育1天；
将浸泡在盐度10‰的人工海水并已经萌发的大叶藻种子放入盐度15‰的人工海水培育1天；
将浸泡在盐度15‰的人工海水并已经萌发的大叶藻种子放入盐度20‰的人工海水培育1天；
将浸泡在盐度20‰的人工海水并已经萌发的大叶藻种子放入盐度25‰的人工海水培育1天；
将浸泡在盐度25‰的人工海水并已经萌发的大叶藻种子放入盐度30‰(自然海水的盐度)的人工海水培育1天，这时大叶藻种子已完全适应30‰的自然海水盐度；
(5)在指定的海场播种已完全萌发和已适应自然海水盐度30‰的大叶藻种苗。
“盐度升高驯化”程序的目的是为了防止处于低盐度的大叶藻幼苗从低盐度直接进入高盐度会导致大叶藻幼苗脱水，从而造成幼苗损伤。本发明涉及的“盐度升高驯化”程序是将处于较低盐度的已经发芽和萌发的大叶藻种子转移到较高盐度人工海水中，按照大叶藻种子从盐度5‰→盐度10‰→盐度15‰→盐度20‰→盐度25‰→盐度30‰的顺序浸泡培育，每24小时盐度升高一次，每次盐度差为5‰。较高盐度的人工海水温度必须与大叶藻幼苗原先处于较低盐度的人工海水温度保持一致，防止温度剧烈变化而对大叶藻幼苗造成损伤。
对比实验：图2和图3为两个大叶藻种子试验组分别在盐度为5‰人工海水和盐度为30‰的自然海水的萌发状态对比照片。
图2为试验组大叶藻种子在盐度为5‰人工海水的萌发状态图，其中A图(图2左上图)为大叶藻种子刚放入培养皿时的状态照片；B图(图2右上图)为大叶藻种子经过1周后的萌发状态照片；C图(图2左下图)为大叶藻种子经过2周后的萌发状态照片，这时大叶藻子叶已长至1厘米以上；D图(图2右下图)为大叶藻种子经过1个月后的萌发状态照片，这时大叶藻子叶已长至3.5厘米以上。
图3为试验组大叶藻种子在盐度为30‰的自然海水的萌发状态图，其中a图(图2左图)为大叶藻种子刚放入培养皿时的状态照片；b图(图2右图)为大叶藻种子经过1个月后的状态照片，可以看出在30‰的自然海水盐度的大叶藻种子1个月也未见萌芽迹象。
通过图2和图3对比可知，本发明的优点在于能够使处于休眠期的大叶藻种子大大缩短休眠时间，甚至终止了休眠期，而直接进入萌发阶段，并且实现种子萌芽同步化，使大叶藻种子尽快进入萌芽阶段，从而继续发育、生长，利用已经快速萌芽的种苗进行大叶藻海草场人工构建会大大提高构建效率和大叶藻的有效成活率。
上述分别配制盐度为5‰、10‰、15‰、20‰、25‰、30‰的人工海水，具体盐度人工海水的配制方法可参照下面公式：
式中：S为盐度值，m为1000毫升纯水当中需要加入人工海水素的重量，单位：克，即向1000毫升纯水中加重量为m克的人工海水素，所得海水盐度即为S‰。由于1毫升纯水等于1克，故：
即在1000重量份纯水当中加入5.025重量份人工海水素，配制成盐度为5‰的人工海水；
在1000重量份纯水当中加入10.101重量份人工海水素，配制成盐度为10‰的人工海水；
在1000重量份纯水当中加入15.228重量份人工海水素，配制成盐度为15‰的人工海水；
在1000重量份纯水当中加入20.408重量份人工海水素，配制成盐度为20‰的人工海水；
在1000重量份纯水当中加入25.641重量份人工海水素，配制成盐度为25‰的人工海水；
在1000重量份纯水当中加入30.928重量份人工海水素，配制成盐度为30‰的人工海水。
人工海水素俗称人工海水盐，人工海水素的组成接近自然海水的成分，使用时，只要将人工海水素按照一定的比例与纯水兑合，就可配成与天然海水较接近的人工海水。其成分由氯化钠、硫酸镁、氯化钾和几十种微量元素组成。人工海水素可以在市场上购得，如美国绅堡企业股份有限公司(Aquarium Systems Company)生产的即时海洋(Instant Ocean)人工海水素；德国热带海洋公司(Tropic Marin Sea Salt Company)生产的热带海洋(Tropic Marin)人工海水素；潍坊滨海洪波海水晶厂生产的“珊瑚牌”速溶海盐(Instant Sea Salt)人工海水素；以及青岛通用海大海水素有限公司生产的蓝色宝藏(Blue Treasure)人工海水素。上述品牌的人工海水素均能满足本发明的使用要求。
本实施例所用纯水为纯水机处理生产的纯水，本实施例所用的纯水器为青岛紫泉仪器有限公司生产的型号为FMN1001-RO的纯水器，本实施例纯水器的来源水为市政自来水。
本实施例所用恒温光照培养箱为上海一恒科学仪器有限公司生产的光照培养箱，其型号为：MGC-250，该恒温光照培养箱能够模拟自然光照条件，在一定光照和温度情况下，能昼夜自动切换。
实施例2
将实施例1步骤(3)中的恒温光照保持温度设定为12℃，其它步骤和培养条件同实施例1。
实施例3
将实施例1步骤(3)中的恒温光照保持温度设定为16℃，其它步骤和培养条件同实施例1。
Claims (2)
1.一种大叶藻种子快速萌发方法，其特征在于，其步骤是：
(1)用人工海水素和纯水配制成盐度为5‰的低盐度人工海水；
(2)将大叶藻种子冲洗干净之后，直接放入上述步骤(1)配制成的5‰的低盐度人工海水；
(3)将上述步骤(2)浸泡有大叶藻种子的5‰低盐度人工海水置入恒温光照培养箱内培养3周使其萌发，该恒温光照保持温度12℃～16℃，光照强度40μmol m-2s-1，L∶D＝12∶12；
(4)萌发的种子进入盐度升高驯化阶段：使浸泡已萌发的大叶藻种子的人工海水盐度每天提高5‰，直至达到30‰的正常海水盐度；
(5)在指定的海场播种已萌发和已适应自然海水盐度的大叶藻种苗。
2.根据权利要求1所述一种大叶藻种子快速萌发方法，其特征在于：所述步骤(3)中的恒温光照保持温度14℃。
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