CN101791285A - 一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及化妆品制剂领域，公开一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳及其制备方法。本发明复合纳米乳微颗粒呈卵圆形、粒径小，分布也非常均匀，因此，其对皮肤渗透作用快、吸收效果好。另外，本发明为清除面部老年斑纳米乳复合物外用制剂，安全性高，无需医务监督使用，给药方便，且本发明制备工艺简练、技术操作简单，整个制备过程不需特殊仪器和设备，纳米乳配制可在常温条件下自发形成纳米乳体系，既可节约能源和成本，又不污染环境，适合规模化生产。

Description

一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种用于清除面部老年斑的新型外用制剂，具体涉及一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳透皮制剂及其制备方法。

背景技术

透皮制剂技术背景

透皮制剂目前医药领域应用的越来越广泛了，因为透皮制剂具有一般剂型不具备的优势。透皮制剂不受消化道内pH值、食物、药物等复杂因素的影响，可以避免功效成分在肝脏的首过效应，可以控制给药剂量、速度，另外透皮制剂在体表给予，使用方便，且一旦出现问题，可以随时中断给药。

但由于皮肤屏障的特点，可严格限制外源性物质，包括蛋白质、水、糖、脂质、维生素、无机离子或化妆品功效成分等任何物质通过，包括祛老年斑透皮功效成分等均无法或很难通过完整的皮肤角质层屏障而发挥应有的生物学作用。

事实上，在表皮角质层中存在着潜在的两个通道：一是在每3-10个角质细胞束之间存在较宽的裂缝(宽度＞0.1μm)；二是在每个角质细胞间存在的均匀狭窄的渗透性较差的通道(平均孔径30nm)。因此，要使功效成分能发挥其作用及优势，必须使它们能够有效地透过表皮这道屏障；而要使这些功效成分透过表皮屏障发挥其生物作用及优势，除非采用一些有效方法突破以下途径：即可逆性地改变皮肤角质层中扁平角化细胞的有序叠集排列结构，增大表皮细胞间隙，并使其类脂质完全流化；增强皮肤表面角蛋白中含氮物质与水的结合能力，提高角质层的水合作用；有效溶解皮肤皮脂腺管内皮脂或腺腔壁上皮脂性分化细胞，降低皮脂腺管内疏水性；通过膨胀和软化角质层，使汗腺、毛囊的开口变大从而促进功效成分透皮吸收；在促进其透皮的同时抑制血液流速，使其在皮肤局部浓度增加。

为了实现这一目标，大量研发人员不仅在外用产品的配方和工艺流程方面进行深入探讨和精心设计，而且在溶媒的种类，基质的调配，促功效成分透皮，调节经皮吸收机制等方面进行了大量科学研究，并尝试或研制了一系列皮肤功效成分的靶向载体及转运***。例如，在透皮制剂中添加有利于促皮肤功效成分透皮吸收的天然制剂，如添加萜类：包括单萜、倍半萜、三萜类化合物；精油：包括薄荷油、丁香油、迷迭香油、玫瑰油、茉莉油、熏衣草油、月桂油等；生物碱；内酯；其它：如薄荷醇及冰片等。还有添加一些有利于功效成分透皮吸收的合成制剂，如有机酸及其酯类：包括脂肪酸、脂肪酸酯、氨基酸酯、内酰胺酯、胆碱酯等；吡咯烷酮类；磷脂和磷酸盐类；酰胺类；酶类等。其中过去最常用的有二甲基亚砜、十四烷基硫酸钠、月桂氮唑酮、月桂酸、可可脂、松节油、鲨烷等，而月桂氮唑酮已成为一些新的促透皮剂的参照物。这些促透皮吸收合成制剂的可能机制是通过溶解皮肤表面的脂质、使表皮蛋白质变性、同时，通过对功效成分增溶或助溶等方式，以增加其穿过皮肤角质层屏障的通透性和它们在表皮各层中的扩散及分布，从而达到促进功效成分透皮吸收的目的。

然而，尽管上述促皮肤渗透剂在促进皮肤功效成分透皮吸收方面发挥了一定的作用，但由于透皮机制中功效成分的来源不同，其理化特性也各不相同，有些是水溶性，有些是脂溶性，有些是醇溶性，还有些是水油双溶或双不溶性，因此，解决上述促皮肤渗透剂与功效成分之间的溶解性和稳定性都非常困难；而且，有些功效成分的分子量小，有些功效成分的分子量大，分子结构和形态也差异明显，单靠上述促皮肤渗透剂的被动透皮效应，仍不足于使功效成分顺利的透皮吸收并发挥最大的生物学作用，有些功效成分甚至仍无法透皮吸收和发挥其应有的生物学作用。特别是随着上述促皮肤渗透剂大多数是化学合成或半合成制剂，如使用浓度的加大或使用过于频繁，不仅使产品的成本增加，而且，还将会使皮肤的过敏率和刺激性加大，毒副作用更加明显；此外一些功效物质对热、对PH值、对光照、对氧化反应敏感，因此，即使上述促皮肤渗透剂能促进功效成分透皮吸收，但由于功效成分的不稳定性，在具体配制产品的实施过程中又容易使这些功效成分失活而无法发挥其相应的作用。

为了克服上述缺点和不足，有学者在近年提出了将脂质体(Liposome)技术应用于在化妆品中。脂质体是一种较好的促功效成分透皮吸收的载体，它是由脂质双分子层膜包封而成的中空球状体，直径约在100-1000nm之间，因其组成成分和结构与生物膜和细胞膜极相似，较易使功效成分透过皮肤角质层屏障进入皮下。虽然，脂质体作为功效成分载体***确有利于发挥其生物学效应，且外用产品制剂方面表现较好的应用前景，但它作为载体制剂，尚存在一些问题仍有待克服和解决：脂质体在制备过程中，使用有机溶剂过多，特别是三氯甲烷(氯仿)、甲醇等有机溶剂使用过多，不仅造成成本升高，且对制备者健康影响很大，同时造成严重的环境污染等；脂质体的制备以磷脂(大豆磷脂和卵黄磷脂)和胆固醇为主，磷脂(大豆磷脂和卵黄磷脂)价格昂贵，不仅大大增加产品成本，使成品***格较高，而且，它在制备过程中的溶解十分困难，费时、费事、费力，操作起来也十分麻烦；尽管功效成分被脂质体包裹好，但表面已完全形成一种类脂质结构，因此，在配制水溶性功效成分时却难以相溶，而且，与其它制剂的相溶性也存在一定问题；除此之外，在实际应用时，脂质体的长期稳定保存有一定困难，而且放置一段时间后，被脂质体包裹的透皮功效成分仍能自动渗漏和溢出，稳定性较差，失去包裹意义；功效成分脂质体的制备受很多因素影响和干扰，尤其是目前脂质体的操作技术，尚不能使脂质体对功效成分的包封率很高，实际上制备的功效成分脂质体的包封率较低；因脂质体本身的理化特性加上工艺操作本身的问题，比较而言，脂质体的粒径仍然较大，且分布不均，这也影响了其功效的发挥；脂质体仍属于被动载体，其靶向作用仍然有限，因此，作用效果也受一定影响。

近期又诞生了一种新的载体制剂—纳米乳(nanoemulsion)。纳米乳由Schulman从20世纪40年代开始研究，直到20世纪90年代末才有药用纳米乳问世，而纳米乳真正在药用制剂中应用也就近几年的事。纳米乳以极微粒著称，它是由油相、水相、乳化剂和助乳化剂组成的乳滴粒径约为10-100nm之间的透明或半透明液体，其乳滴分散在另一种液体中形成胶体分散***，具有一定的乳光，其乳滴大多为球形，且大小比较均匀，流动性良好，经加热或高压灭菌或离心分离也不会使之分层，通常属于热力学稳定***。纳米乳和普通乳状液的两个根本不同在于：首先，普通乳液的形成一般需要外界提供能量，而纳米乳的形成是自发的；其次，普通乳液是热力学不稳定体系，在存放过程中将发生聚结而最终分为油、水两相。而纳米乳是热力学稳定体系，不会发生聚结。

纳米乳作为透皮制剂的载体，展现出诱人的前景，主要原因是：①与亚微乳相比，纳米乳更有利于生物活性物质和功效成分均匀分布；②与微乳相比，纳米乳仅需要常规用量的表面活性剂；③与脂质体等其它相比，纳米乳更加稳定，制备更易工业化或产业化。④空白纳米乳外观呈淡蓝色乳光，分子量小，易于吸收，使用舒适等。

老年斑概念

老年斑(Senile Speckle，简称SS)或(senile plaques，简称SP)是人皮肤老化最为突出、最为典型、最为直观的特征之一，是由衰老所产生的脂褐素不断沉积于皮肤细胞、汗腺细胞中而逐渐形成于皮肤表层，尤以老年人皮肤表面出现最多，在人体皮肤表面的出现率大约占老年人的30％左右，最多者可达百处。老年斑是中老年人常见的良性表皮疣状增生，又叫老年疣；祖国医学将它称之为“寿斑”或“衰老斑”；生物学上将它命名为“脂褐素”或“脂褐质”，临床医学上叫“脂溢性角化病”或“基底细胞***瘤”。有学者将沉积在衰老皮肤表面清晰可见、由“脂褐素”或“脂褐质”演变形成的褐色斑块，简称为皮肤老年斑。具体地说，皮肤老年斑是一种生长在衰老人体面部、手背、胳膊、甚至身体表面的一种数量不等、大小不均、形似卵圆形、黄豆大小的棕黑色或棕褐色或黑褐色扁平斑点或斑块，其中以头皮和面部颞、颧为主，其次是手背、颈部、胸部、背部和四肢等处多见。老年斑初起为毛孔周围针头大小，外观呈淡黄色、淡褐色，为边界清楚的扁平斑丘疹，并逐渐扩大直径为2厘米或更大的圆形、椭圆形斑片，触之质地柔软，表面粗糙，常覆盖有一层油腻性鳞屑，易剥除，但又能再生，以后颜色渐渐加深、呈深褐色或黑色的斑块。老年斑除了影响容貌外，一般不影响身体健康，皮肤疣状增生也极少发生恶性病变。

老年斑的病理生理特点及临床意义

(一)老年斑的病理生理学特点：随着人体的增龄，机体日渐衰老，脂褐素加快产生、含量也逐渐增加，特别是由于老年人组织细胞功能退化，对脂褐素的分解和***功能减弱甚至消失，结果使其大量堆积在皮肤基底层内。脂褐素能使表皮的色素增加，并刺激表皮产生疣状增生性病变，形成了老年斑。老年斑主要由三种类型的细胞组成：基底细胞、棘细胞和黑色素细胞。

(二)老年斑的临床意义：老年斑不仅仅只出现在老年人的皮肤表面，也可广泛存在于某些器官和组织，如大脑、脊髓、神经节、心脏、血管和生殖腺等组织的细胞中。当细胞内脂褐素积累到一定程度后，会占据细胞的空间位置，改变细胞的空间结构，使细胞萎缩、代谢紊乱等。当它沉积于人的体表时，就产生皮肤老年斑；当它沉积在血管壁上，就会使血管壁发生纤维性病变，导致动脉硬化、高血压、心肌梗塞等心脏血管疾病；当它大量聚集在脑细胞上，就会引起老年人神经器官功能失调，导致记忆力下降、智力障碍，出现抑郁或痴呆症等。因此，皮肤老年斑形成也具有特别重要的临床意义。可以说，当皮肤上出现老年斑的时候，其神经细胞和心血管细胞中实际上已沉积了大量脂褐素，提示机体内可以发生或正在出现与脂褐素损伤相关的各种疾病。

老年斑的病因及发生机制

(一)衰老(senescence)与皮肤老年斑的形成：人类的老化过程大约在25岁开始，以后老年色素会在人体细胞里逐渐积聚起来，挤占了细胞内的一些亚微结构，从而扰乱了细胞的空间位置，影响了细胞的正常功能。当生物膜(细胞膜、线粒体膜、微粒体膜、溶酶体膜等)受损(如线粒体膜受损，细胞对氧的利用率下降，还原物质增高)，体内有害物质生成增多。导致老化色素生成和沉积增多，久而久之即可造成细胞慢慢窒息死亡。脂褐素形成机理与细胞衰老的关系以及脂褐素形成的生化过程有一定的科学依据。通常认为，皮肤老年斑是人体内部组织器官衰老的先兆和表现。随着年龄的增长，过了45岁或50岁以后，全身各组织器官的生理功能即开始逐渐发生退行性病变，新陈代谢过程，血液循环速度减慢，清除有害物质能力减弱，加之老年人进食量减少或偏食等原因，血液内便逐渐形成一种促进衰老的物质--脂褐素，这种不溶性的棕色脂褐素颗粒，不断沉积在皮肤表面即可形成皮肤老年斑。

(二)基因遗传(genes genetic)等因素与皮肤老年斑的形成：从对Alzheimer病又称老年性痴呆病(AD)发病遗传因素最新的研究中发现，早老素(Presenilin，PS)基因突变与老年斑的形成有关。已发现与此病相关的遗传位点有21号染色体上的p淀粉样前体蛋白基因APP，19号染色体上的ApoE4等位基因，14号染色体上的PSI基因和I号染色体上的PS2基因等。这些PS基因突变后的共同特征是增加了脑内细胞Aβ(1-42)的分泌，加速Aβ在老年斑的沉淀，Aβ(1-42)是老年斑的主要蛋白质成分。已有证据表明PS1可直接影响来源不明的γ分泌酶的酶解作用，这种酶解作用可以使APP蛋白释放Aβ蛋白成分。

(三)自由基(FreeRadical，FR)等化学因素与皮肤老年斑的形成：生物学有关脂褐素的形成已有一定的实验证实，即线粒体和溶酶体是脂褐素形成的两个重要的来源。由于线粒体DNA是裸露的，缺少组蛋白的保护，经脂质过氧化反应生成的强力交联剂丙二醛，可使DNA发生交联或断裂失活，而成为脂褐素类沉积物。自由基多在线粒体内产生，可与细胞的磷脂和蛋白质等发生脂质过氧化反应，损伤组织细胞，形成过氧化脂质及其分解产物丙二醛(MDA)，与蛋白质的一级氨基基团反应产生大分子交联，形成荧光产物希夫碱(脂褐素荧光物质)，且丙二醛的双醛基难与蛋白质、肽类或脂类的氨基形成Schiff碱，使膜脂膜蛋白之间或其本身之间相互交联，变成比原来大几倍甚至几十倍的不溶于水的大分子聚合物，经溶酶体吞噬后，不被水解霉类消化逐步蓄积形成脂褐素。医学上大多数学者也倾向于脂褐素的产生是与自由基有关。随着年龄的增长，人体细胞中代谢过程所产生的自由基逐渐增多，当机体清除自由基的功能下降时，这些化学性质活泼的自由基就会与机体发生迅速作用和强烈损伤，其中氧自由基对脂质生物膜的攻击与老年斑出现关系最大。它能使不饱和脂肪酸氧化成过氧化物，该过氧化物可以进一步分解，产生大量的醛类、醇类和烃类。其中丙二醛(MDA)具有很强的生物毒性，极易与磷脂蛋白质等发生反应，形成老年色素即脂褐素。

(四)紫外线(ultraviolet radiation)照射等物理因素与皮肤老年斑的形成：长期、大量、连续紫外线照射可使表皮细胞产生单线态氧(1Q)和超氧自由基、羟自由基等活性氧，它们不仅能使DNA的8-羟基鸟甙(8-OhdG)受损而引起遗传变异，而且，它们能产生或加快表皮脂质过氧化，形成脂褐素或老年斑。除日光照射外，空气污染物质、辐射线、臭氧等等，都会促成自由基的形成，而使皮肤加快形成老年斑。理论上讲，随着海拔的增高，氧分压逐渐降低，与海平面相比低7.89kpa，而太阳辐射中的紫外线随着海拔每升高100m，强度比海平面处增加3～4％，由于缺氧可引起皮肤微循环障碍，末稍血氧循环发生变化。日照时间长，太阳辐射强，干旱少雨，空气干燥，风日长，大风多，这些气候特点可使皮肤水分蒸发，使其处于轻度脱水状态，也加剧了老年斑和皮肤老化的发生，但是随着年龄的增长，皮肤的自然老化也是一个因素。老年斑、皮肤老化是高海拔地区的一种常见皮肤病，男女老少均可患病，但男性多见，有研究人员对生活在海拔2260m地区1000人皮肤老年斑、皮肤老化发生情况进行研究。结果表明，男性皮肤老年斑发生率最高年龄段均为50～59岁、60～69岁，发生率分别为63％、79％，女性皮肤老化的发生率最高年龄段为50～59岁，发生率为38％，老年斑的则为40～49岁，发生率为44％。

皮肤老年斑的预防

老年斑是可以预防和延缓发生的。对皮肤老年斑的预防。其基本措施就是延缓衰老。而延缓衰老的影响因素众多，需要注意的事项也很多，其中，比较重要的包括：(1)合理的饮食：首先是尽量使食物多样化，荤素粗细要搭配；其次是使食物结构合理，蔬菜要充足，水果不可缺，其中冬瓜、黑芝麻、莲子、核桃等都是较好的抗衰老美容食品。油要限量，甜食要少吃，饮酒要节制；(2)坚持良好的生活习惯：按时作息，早睡早起。并保证每天7--8小时的睡眠；同时，坚决克服不良嗜好(吸烟和酗酒)等不利于健康的习惯；(3)适当运动锻炼身体：运动能延长人的寿命，能使内分泌***中的激素分泌增加，能促进机体各部分协调一致，减少疾病。肌肤运动和保湿运动可使皮肤毛孔扩大，汗腺活跃，有效地促进皮肤组织内的血液循环，加快机体内代谢废物***。另外，加强皮肤运动能增强肌肤的湿润。运动结束后，立即用温水洗脸，除去经皮肤***的废物，且避免汗渍中的盐分过久滞留在脸上刺激皮肤；(4)保持健康心理状态及心理学预防：保持年轻的心态、健康的心理、愉快的精神等也是延缓衰老的好方法；(5)采用适当的皮肤护理：给皮肤去角质后，用纱布沾满含有大分子或小分子的天然抗氧化剂的补水精华素或补水滋颜露，敷在面部，静躺数分钟。每周做2--3次，不仅能预防皮肤老年斑，还能给皮肤补充生理水，对皮肤护理也大有裨益；(6)注意防晒：防晒不仅可以减轻紫外线对皮肤的直接损伤，而且可以控制自由基生成增多，对于减少黑色素和脂褐素形成，预防或延缓黄褐斑和老年斑的发生和发展；(7)经常按摩面部：按摩面部可以促进面部血液循环，提高皮肤的新陈代谢能力。延缓皮肤老化，预防或延缓皮肤老年斑形成。；(8)保持整洁清新的环境：温馨舒适的房间使人心情舒畅，房间保持适当通风，拥有充足阳光和新鲜空气，享受大自然赐给的生命要素；(9)自我保健：在医生指导下，可适当服用一些抗氧化剂，如维生素C、维生素E、β-胡萝卜素等。

皮肤老年斑的治疗

老年斑虽可预防或延缓，但如面部已经出现的老年斑，且面积已较大，特别是为防止老年斑恶变，即病变开始时为不规则色素斑，然后逐渐向四周扩大，直径数厘米，边缘不整齐，并出现一边扩展一边消退，消退后的皮肤颜色变浅，又处在暴露部位，特别是面部者；病变部位出现不规则硬块，之后发展为结节，表面溃烂者，均应及时到医院检查、诊断和治疗，不要延误。

(一)饮食方法治疗：老年斑形成和加重均与机体自由基氧化损伤或抗氧化能力不足有关。而蔬菜和水果中含有丰富的抗氧化物质和自由基清除剂，它们均能清除自由基，阻断自由基的氧化或过氧化过程，抑制自由基及其代谢产物的形成和积累，促进血液循环和新陈代谢，调节激素分泌，增强皮肤细胞活力，防治皮肤脂褐素和老年形成。蔬菜和水果中的自由基清除剂主要有胡萝卜素、番红素、维生索C、E和黄酮类化合物及酚羟类结构的化合物等。因此，通过饮食可以从一些食物中获得足够的自由基清除剂，以清除由于过多自由基作用而形成的脂褐素和老年斑。胡萝卜、南瓜、桃、杏、橘子等橙色植物中包含的自由基清除剂主要是β-胡萝卜索。β-胡萝卜素可以与脂质过氧化态自由基结合而中断脂质过氧化连锁反应，同时还可阻止所吸收氧受光照而变成激发态氧的氧化作用。β-胡萝卜素和自由基反应产生环氧类胡萝卜素，进而***成稳定的醛类和酮类；葡萄柚、柠檬、荞麦等黄色植物中包含的自由基清除剂主要是黄酮类化合物。黄酮类化合物可作为断链抗氧化剂阻断自由基链式反应。也可以螯合某些作为促氧化剂的重金属或者抑制脂类氧化酶的活性。菠菜、韭菜、无头甘蓝菜、空心菜、绿花椰菜、芥兰菜、沙棘、猕猴桃等绿色植物中包含的自由基清除剂主要是维生索C和维生素E。维生素C能与细胞中的过氧化物和羟自由基反应，使氧化连锁反应中止进而保护细胞的完整性。另外，维生素C还可将氢原子交给维生素E自由基，以恢复和保护维生素E的功能，发挥间接清除自由基的作用。维生素E是强有效的自由基清除剂，它可以有效地抑制脂质的过氧化作用。维生素E也可以防止油脂氧化和阻断亚硝胺的生成。蕃茄(是番茄红素含量最丰富的食物)、葡萄柚(红肉)、西瓜等红色植物中包含的抗氧化剂主要是番茄红素。番茄红素是有效的生物抗氧化剂。其淬灭单线态氧与清除过氧基自由基能力很强。大蒜、包心菜、洋葱、韭菜和葱等植物中包含的自由基清除剂主要是丙烯基硫化物。所有这些，不仅可以保护机体免受紫外线的侵害，还可以阻止脂褐素的沉积和老年斑的形成。生姜中含有姜辣素，有很强的自由基清除作用；有报道，有些人饮用生姜蜂蜜水一年，面部和手背的老年斑明显减轻或消失。还有报道，多吃茄子老年斑减少且能变淡；同时。有人自制消斑食疗汤(丝瓜络、僵蚕、茯苓、白菊花、红枣、玫瑰花加水煲汤)和五行青菜汤(白葡萄、红葡萄、香菇、白萝卜、牛蒡煲汤)治疗老年斑也取得实效。

(二)物理方法治疗：(1)电灼法治疗老年斑：利用电针瞬间产热，使老年斑凝固变性、气化、炭化、消失。电灼深度在表皮与真皮浅层交界处。术后涂一薄层抗生素软膏保护创面，自然暴露。局部可有轻度红肿，2～4d结痂.7～14d脱痂，脱痂后呈粉红色，1个月后开始有色素沉着，6～12个月后可恢复至正常肤色，无瘢痕形成。电灼法的最大优点是操作方便、电灼病灶精确、可随意调节电压、耗材极少，适用于多种皮肤疾病的治疗，只要操作恰当还具有损伤小，恢复快，无瘢痕，不影响工作的优点；(2)激光法治疗老年斑：激光通过选择性光热破坏原理，大大减少激光热能对生物组织的热损伤，可以在不影响正常组织结构的情况下，有目的的破坏病变组织，从而避免术后瘢痕形成。采用激光治疗老年斑是一种有效、安全、可行、痛苦小、治疗后无瘢痕、术后并发症少、操作简单的方法。当然，该方法治疗老年斑的疗效高低除与老年斑的病程长短、轻重、深浅等外，还与治疗次数、波长、脉宽、能量密度、光斑大小及光斑覆盖密度、治疗间隔时间长短、皮肤类型、全身状况、环境(紫外线)、药物及食物(光敏)等因素有关；(3)其它：可采用超高频电流作用、冷冻、切割、皮肤磨削等方法。特别是通过超高频电流作用产生高热气化，直接剥脱皮肤老年斑表浅组织，祛除老年斑较为精细彻底，损伤正常组织少，正常组织再生愈合快，色素沉着轻，时间短、恢复快，同时，合并使用一些促进刨面愈合和减少其它色素再生成的制剂，并避免日光照射，治疗效果将更加显著。还有人应用三头火针灼热治疗老年斑437例，结果1次治愈426例，2次治愈11例，全部有效.且无明显副作用。

(三)化学方法治疗：主要是化学剥脱术。化学剥脱术是1962年在美国新奥尔良的整形外科学术会议上提出来的。它采用化学剥脱剂对皮肤表层加以破坏、结痂，使之脱落，以达到治疗目的。用化学剥脱剂对皮肤老年斑进行美容治疗也是医学美容中常用的一种方法。治疗前，先根据不同病程、大小和深浅及面积的老年斑，决定选用化学剥脱剂的种类。直径小于3ram的老年斑选用33％三氯醋酸溶液，而直径大于3mm的老年斑则选用无痛酚(配方：石炭酸500g、达克罗宁10g、樟脑1g、无水洒精50ml、甘油50ml)治疗。一般治疗3日后结痂，14天左右脱痂，脱痂后创面呈淡粉色，表面光滑无瘢痕形成，2周后复诊。个别残留色素斑可于1个月后行二次治疗，皮损深者可反复治疗3--4次至皮损消失。化学剥脱治疗老年斑后，应严格遵守医嘱：①保持结痂干燥，2周后自然脱落；②脱痂后注意防晒；③禁食辛辣刺激性食物；④术后可口服维生素C片，以减轻其它色素形成。另外，按照国外药典合成2，7-二甲夹硫杂蒽，并以此化学合成药物为功效成分配制成祛斑霜(含2，7-二甲夹硫杂葸浓度为15％对老年色素性皮肤病或老年斑有一定效果。

(四)生物技术治疗：(1)SOD制剂及SOD-CCE体系：超氧化物歧化酶(SOD)及SOD复合酶(SOD-CCE)。包括SOD、过氧化化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)等复合体系。其对皮肤老年斑的作用机制是：当人体老化或皮肤衰老产生过多自由基或衰老导致体内自由基清除***生成减少、自由基清除不力而导致自由基增多时，SOD即可首先催化超氧阴离子自由基，使之转变为H₂O₂和O₂，然后再由CAT催化H₂O₂生成无毒色H₂O水和O₂，而GSH-PX与SOD、CAT的联合作用，从而消除了自由基对蛋白、核酸、磷脂及其它不饱和脂肪酸等过氧化损伤而形成的脂褐素或老年斑。目前应用最多、使用最方便的还是将SOD及SOD-CCE配制成外用制剂和美容化妆品。如配制精华素(SOD活性200U刷)或配制膏(霜)剂(SOD活性100-200U/g)，在皮肤老年斑处用力去掉表皮角质层后，再直接、反复多次涂抹，每天2～3次。连续1～3个月左右即可。当然，也可以使用新生代的SOD衍生物(如PEG-SOD、L-SOD、Ac-SOD、Ms-SOD、rh-SOD、Ge-SOD、Se-SOD等)及类SOD活性物质，可以发挥更好的作用效果；(2)金属硫蛋白(MT)：是一类富含半胱氨酸残基与二价金属离子结合能力很强的非酶蛋白，对自由基特别是羟自由基有较好的清除作用，还能保护细胞膜免受自由基的损伤。目前，国内已有人研制成功了MT美容化妆品，如MT日霜和NT晚霜及MT抗衰老美容霜等，对护理皮肤、延缓皮肤老化和预防皮肤老年斑等均有积极作用；有学者正在进行延长MT半衰期、消除大分子或异源性抗原***反应、透皮、透膜吸收和细胞内作用等研究，有些已取得积极进展；(3)活化保护蛋白：保护蛋白(PRP)是Kim等1988年首先从啤酒酵母中提取的一种新型的抗氧化蛋白。PRP没有SOD，GSH-Px等传统过氧化物酶的活性，在DNA与氨基酸序列上也没有任何同源性。但它能特异性防止由巯基化合物如二硫苏糖醇(DTT)、β-巯基乙醇等充当电子供体的混合功能氧化***(MFO)介导的多种氧化损伤，防止多种酶的失活和质粒DNA，小牛胸腺DNA的断裂，目前将它们归为一类新型的抗氧化蛋白家族，统称为过氧化氧还蛋白(PRx)。国内外研究发现，PRP在体外具有清除羟基自由基和H₂O₂的作用，有学者从人红细胞中分离纯化PRP，并对脂褐素或老年斑进行作用。结果表明，保护蛋白是一种新型的抗氧化蛋白，野生型及重组型多通过Cys-47与Cys-170形成二硫键而以二聚体形式存在。实验证明其抗氧化活性依赖巯基，PRP在体外经DTT阿破坏二硫键，暴露其还原性巯基而具有清除羟基自由基和H₂O₂的作用。有实验结果显示PRP可以防止SOD活性的下降，脂质过氧化及脂褐素或老年斑沉积。

(五)西医西药治疗：以氯酯醒(Meclophcnoxate)、β-内啡肽、氯丙嗪、牛磺酸、***、谷胱甘肽(GSH)、半胱氨酸、硒及硒化物、磷脂酰胆碱、乳清酸镁、氨基乙磺酸、维生素C、维生素E、醉椒素、辣椒素等多见。也有学者报道，服用角鲨烯或多烯不饱和脂肪酸(DHA和EPA)两个月，可使老年斑逐渐消退，再坚持服用一段时闻，可使身体里和皮肤上沉积的脂褐素得到消除。实验证明，维生素E能与氧自由基活性基团直接反应，且它还能与细胞膜上的多不饱和酸形成复合体，防止其发生过氧化反应，对脂褐素的形成具有一定的抑制作用；此外，维生素C和辣椒素也都可以减少脂褐素在身体细胞内的沉积。另外，β淀粉样蛋白被证实是老年斑的主要成分，而β淀粉样蛋白是由β-和γ-分泌酶裂解其前体蛋白(APP)而形成，因此，抑制β分泌酶的活性可以减少β-淀粉样蛋白的形成，目前Okalahoma医学研究基金会在研究中发现了两个对β分泌酶有较好抑制作用的化合物OM-991和OM-992，有望作为老年斑的治疗药物。

(六)中医中药治疗：中药祛除脂褐素目前主要采用具有明显抗氧化作用、自由基及其代谢产物清除作用和提高大分子自由基清除剂含量和SOD活性的单味中药和复方中药或中成药。(1)单味中药及其提取液或发酵液：主要有何首乌、枸杞子、人参、西洋参、丹参、黄芪、绞股蓝、珍珠粉、三七、红景天、川芎、锁阳、漏芦、五味子；有报道，枸杞子、地黄研末合用治疗老年斑效果好；(2)复方中药及中成药：目前不少复方中药及中成药抗氧化及自由基清除和祛脂褐素作用已备受关注。玉金方、美颜丸、通郁汤、四君子汤、金刚健身液、天地汤超声波水提液、天地汤纳米制剂、等也都提高动物血浆SOD活性和降低LPO含量的。有些中药方剂如百年乐、龟龄集、参鳖补膏、五味子冲剂、复方丹参合剂等亦有抗氧化作用；(3)天然药物有效成分：除了用单味中药及复方中药方剂及中成药对祛脂褐素的作用外，不少由天然药物中提取的有效成分也具有祛脂褐素的抑制作用。其中，黄酮类化合物、三萜类化合物、姜素类化合物、、皂甙类化合物、葸醌类化合物等研究和应用最多。其它用于抑制脂褐素的天然药物及其制剂还有：抗氧化剂TA9901、螺旋藻、丹酚酸A、丹参酮、丹参素、五味子甲素、五味子乙素、五味子酚、黄芩甙、干草黄酮、知母宁、三七皂甙、川芎嗪、大蒜素、鲤鱼***DNA、姜辣素、巴戟素(糖甙类单体成分，分子量396)、灵芝发酵液、淫羊藿功效成分(ESPS)。

(七)美容化妆品治疗：(1)蛤蜊油防治老年斑：蛤蜊油不仅皮肤滋润光滑了，还能使手背上的老年斑也逐渐变淡和消退。简单的方法是：在每年春、秋、冬3个季节每天使用蛤蜊油擦手擦脸；(2)天然中草药美容膏防治老年斑：以多种中草药组方，并提取其中有效成分配制成美容化妆品。这些天然中草药植物中含有丰富的生物活性成分，包括植物自由基清除荆及SOD、多种氨基酸和微量元素等，具有皮肤滋润、保湿、光洁、细腻、柔软、增白、祛斑、除皱等作用。在临床试验中发现，它对老年斑也有良好效果；(3)鼠银膏治疗皮肤老年斑：利用鼠妇科动物平甲虫与银杏叶提取物烘干研末成细粉，并按照常规膏霜剂制备工艺配制成鼠银膏，每天两次，每次直接涂在皮肤老年斑上，连续使用一个月后，在治愈的老年斑上继续巩固使用10-15天，总有效率达到93％；(4)含有SOD等抗氧化剂的美容化妆品：坚持使用含有SOD等抗氧化剂的美容化妆品，能有效清除皮肤内的自由基，抑制脂褐素产生，防止老年斑形成。通常，在给皮肤去角质后，用纱布沾满含有SOD的精华素或补水滋颜露，敷在面部，静躺数分钟，将纱布轻轻揭下的片刻，你会顿感皮肤娇嫩清爽。如果每周能做2～3次含有SOD的面膜，不仅能防治老年斑，还能给皮肤补充水分，对皮肤也大有裨益；(5)小分子天然抗氧化剂美容化妆品防治皮肤老年斑：小分子天然抗氧化剂美容化妆品以维生素E和维生素C为代表。不久前从美国传人我国市场的Aloe-VeraVitamin E皮肤油和Royal Jelly面油，其主要成分就是维生素E，理论上讲，它作为脂溶性小分子抗氧化剂可以清除自由基，阻断脂质过氧化链反应，保护皮肤和细胞膜免受自由基氧化损伤，对皮肤老年斑的形成有抑制作用。

当前产品的不足之处

通过物理技术手段对在皮肤表面形成的老年斑进行去除，大部分技术安全、可行、痛苦小、治疗后无瘢痕、术后并发症少、操作简单的方法。但是这种方法对医院及患者要求高，顺应性比较差，且此类方法只能起到暂时的控制作用，并不能从根本上治疗老年斑，破坏角质层，使用不当还有可能在皮肤表面形成永久性创面。化学方法治疗主要是化学剥脱术。化学剥脱术是1962年在美国新奥尔良的整形外科学术会议上提出来的。它采用化学剥脱剂对皮肤表层加以破坏、结痂，使之脱落，以达到治疗目的。此方法也是通过化学成分对皮肤角质层进行破坏，达到清除表面老年斑的效果，没有从老年斑形成的机理上去抑制老年斑，且容易引起皮肤副作用。

另外，患者使用物理技术和化学治疗祛除老年斑时必须去医院和相关的机构才能实现，对很多普通百姓患者来说是一大阻碍，他们需要的是一种使用方便、效果好的外用产品。一般的普通外用透皮产品虽然方便使用，但很多的产品因为皮肤的屏障作用，功效成分只能作用于局部皮肤表皮层，根本无法到达真皮层。因此要深入解决皮肤色斑问题，就需要祛老年斑产品功效成分能透过皮肤角质层达到皮肤深层、基底层，这样才能从根本上抑制老年斑的形成，全面改善皮肤。

因此，市场平迫切需要一种用于皮肤祛老年斑的产品，这种产品可以像化妆品一样方便使用，不需要用去医院或者美容机构，不需要通过物理技术或者化学剥脱就可以达到良好的效果。

发明内容

本发明针对现有技术的缺陷和不足，提供一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳，该制剂为透皮制剂，透皮吸收好、稳定性好、粒径小、感观良好、给药方便。本发明的目的在于是提供一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳的制备方法。为解决上述技术问题，本发明所提供的技术方案如下。

1.本发明的技术方案

(1)本发明的一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳是由下列重量百分比的原料组成：

黄皮酰胺                    1～5％

对氯苯氧乙酸二甲氨基乙脂    0.700-0.950％

超氧化物歧化酶              0.005-0.007％

维生素E                     1.2～2.5％

姜辣素                      1.0～1.5％

沙棘油                    1.0～1.5％

肉豆蔻酸异丙酯            12～16％

辅酶Q10                   1.0～1.5％

三蒸水                    32～35％

柠檬酸                    0.1～0.2％

柠檬酸钠                  0.60～0.85％

辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯    32～36％

聚甘油脂肪酸酯            10～12％

(2)本发明的一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳，其中各原料的优选重量百分比是：

黄皮酰胺                  2％

对氯苯氧乙酸二甲氨基乙脂  0.875％

超氧化物歧化酶            0.006％

维生素E                   2％

姜辣素                    1％

沙棘油                    1％

肉豆蔻酸异丙酯            15％

辅酶Q10                   1％

三蒸水                    31.146％

柠檬酸                    0.14％

柠檬酸钠                  0.833％

辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯    33.75％

聚甘油脂肪酸酯            11.25％

(3)本发明功效成分的作用机制及其理论依据：

用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳，采用多种不同机理的功效成分进行复配而成，以上功效成分具有抗氧化、清除自由基、促进细胞代谢、改善皮肤功能。以上功效成分通过一种先进皮肤传递载体-纳米乳进行研发。纳米乳有助于功效成分迅速透过皮肤深层，发挥作用。以下为各功效成分的作用机理：

黄皮酰胺是从芸香科黄皮属植物黄皮叶水浸膏中分离得到的一种吡咯烷酮类化合物。另外，在干燥的黄皮果核中也能检测到一定的浓度。其化学结构中含有4个不对称碳原子，其旋光异构体理论上有16个，经不对称合成和定向拆分可以得到3S、4R、5R、7S构型，称为左旋黄皮酰胺；3R、4S、5S、7S构型称为右旋黄皮酰胺。研究表明，黄皮酰胺能明显抑制由酒精中毒诱发的肝脂质过氧化反应，这对于稳定细胞膜脂质、减少组织损伤、延缓衰老是有利的。因为黄皮酰胺可使肝脑组织胞浆液内的GSH-PX活性明显增高，从而起到清除自由基，保护细胞免受损伤的作用。它是一种生物碱，可抑制铁-半胱氨酸体系引起的大鼠脑、心、肝和睾丸微粒体的脂质过氧化。研究表明，黄皮酰胺对氧自由基的直接捕捉作用是其抗脂质过氧化作用的机理之一。

黄皮酰胺祛除老年斑的另外一个机制清除淀β-粉样蛋白，而β-粉样蛋白是组成老年斑的核心成分。淀粉样蛋白是一种球蛋白和粘多糖复合物，因其有类似淀粉的化学反应(如与碘反应)，故名，其实与碳水化合物淀粉无关。组化证实淀粉样蛋白丝可以是完整的轻链，也可是轻链氨基终端片断，或两者为其主要蛋白成分。电镜下，淀粉样蛋白由直而不分叉、不吻合的丝构成，排列不规则，其直径为6～10nm，周边电子密度较中央高，故呈中空圆柱状，长度未定。免疫化学发现，淀粉样蛋白含γ球蛋白、补体C1、C3和C4、纤维蛋白原、组蛋白及α球蛋白等。淀粉样蛋白广泛沉积于内脏、肌肉、粘膜和皮肤时称泛发性或***性淀粉样变病，进一步分为原发性、继发性、遗传性和老年性等类型。很多研究证实，与目前β-粉样蛋白抑制剂相比较，黄皮酰胺能显著减少机体β-粉样蛋白的水平，具有显著抗老年斑的作用。

对氯苯氧乙酸二甲氨基乙脂(盐酸甲氯酚酯Meclofenoxate Hydrochlorid，MH)为白色粉末、易溶于水、无毒。它是细胞代谢功能活化剂，具有抗氧化、清除自由基等作用。有报道，它可以清除动物神经细胞中的脂褐素，加入对氯苯氧乙酸二甲氨基乙脂(盐酸甲氯酚酯)后三天，神经元中脂褐素的色素即发生溶解，从而使脂褐素颜色逐渐变淡，有些脂褐素变成空泡，有些则裂解。此效应可能与其所具有的抗氧化、清除自由基等作用有关。机体中过剩的自由基是危害极大的氧化活性物质，能与机体各组织发生强氧化反应.破坏性极强，不仅可以诱发一系列的连锁反应，使多肽链发生交联或断裂，引起蛋白质变性，使酶活性部位的氨基酸氧化或还原，导致酶分子二级结构的改变而使酶失活，使细胞膜上的不饱和脂肪酸产生过氧化反应，引起膜的理化特性发生改变，引起核糖和碱基的氧化、链的断裂及蛋白质一交联等，而且，还能导致形成脂质过氧化和脂褐素及老年斑。脂褐素是一种脂质或蛋白质的聚合物，存在于不同组织有丝***后细胞的溶酶体内，它随着年龄的增加而增多，因此又被称为“衰老色素”或“衰老标志”或“老年斑”。应用对氯苯氧乙酸二甲氨基乙脂(盐酸甲氯酚酯)，可在体内和皮内代谢后生成的对氧苯氧乙酸和二甲氨基乙醇等，均具有抗自由基的能力，并能影响生化代谢和及线粒体电子传递链中的一些关键酶，影响三羧酸循环，抑制葡萄糖酵解和有氧代谢途径，促进戊糖磷酸化途径，从而促进皮肤组织能量代谢；同时，盐酸甲氯酚酯还能明显增强细胞色素C还原酶、谷胱甘肽脱氢酶的活性，促进细胞代谢，特别是它能提高体内抗氧化酶，包括超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)的活性，也可增强机体的氧自由基清除能力，由于对氯苯氧乙酸二甲氨基乙脂(盐酸甲氯酚酯与细胞膜具有一定的亲和力，可与膜磷脂结合，调节膜结构，增加在静息状态下细胞膜对钾离子的通透性，维持衰老细胞的膜电位，并通过其对经自由基的清除作用参与保护细胞膜，减慢因年龄增长所致的细胞内新陈代谢所导致的废产物过多产生等，这对减轻或抑制皮肤脂褐素及老年斑的形成具有积极作用。

SOD(超氧化物歧化酶)是抗氧酶，能有效防止皮肤衰老、祛斑、抗皱。防根据衰老的自由基学说，老化是自由基产生和消除功能发生障碍的结果，在正常情况下产生与消除处于平衡状态，但随着机体的衰老或某些外界因素的影响，这种平衡往往被打破，多余的自由基就能够通过多种渠道损害机体，而SOD是超氧化自由基清除剂，通过适当途径对机体不断补充外源SOD能有效防止或延缓上述过程的发生。

维生素E是理想的油溶性广谱抗氧化剂，能清除多种氧自由基，并能阻止过氧化反应及不饱和脂肪酸生成脂褐质色素。而维生素C也是较为公认的水溶性广谱抗氧化剂，既可直接清除自由基，发挥良好的抗氧化作用，而且也可以协助维生素E作用，并能与维生素一起发挥相互协同和增效的生物学作用。

沙棘油(Seabuckthorn oil，SO)是从沙棘果核中提取的精华，含有多种生物活性成分。其中的沙棘总黄酮含量较高，此类生物活性成分不仅对机体免疫***的多环节具有不同程度的调节能力，且具有很强的抗氧化作用及清除自由基功能；沙棘中含有大量的氨基酸、有机酸等多种生物活性成分，特别是沙棘中含有的苹果酸、草酸等有机酸具有直接或间接清除脂褐素及老年斑作用。沙棘中的磷酯类化合物也是一种生物活性较高的成分，可促进细胞代谢，改善皮肤功能。而且，磷脂、三萜类化合物等通过控制脂质合成酶抑制脂质形成，并促进脂质转运和清除。沙棘中的生物活性成分花青素、苦木素、香豆素等天然生物活性成分具有多种生理功能，对于清除脂褐素及老年斑作用具有积极作用。而且，沙棘油含丰富的不饱和脂肪酸能抑制血小板聚集，防止脂褐素及老年斑形成和聚集。其中油酸、亚油酸、亚麻酸等可部分溶解及清除已沉积在细胞内的脂褐素及老年斑；沙棘油中的甾醇是构成细胞膜的成份之一，能够促进细胞新陈代谢，也能促进脂褐素及老年斑清除代谢。沙棘油中富含的VE更是一种强抗氧化剂，可促进新陈代谢，防止过氧化反应的发生发展及加剧，抑制不饱和脂肪酸氧化，从而预防和降低皮肤脂褐素及老年斑形成和聚集。

姜辣素为生姜油中的主要成分，具有活血化瘀，改善微循环等，所有这些，均对预防和治疗脂褐素及老年斑沉积有积极意义。

辅酶Q10(Coenzyme Q10)是一种脂溶性醌环类化合物。辅酶Q10在体内主要有两个作用，一是在营养物质在线粒体内转化为能量的过程中起重要的作用，二是有明显的抗脂质过氧化作用。自由基氧化损伤生物大分子是造成机体衰老和多种老年性疾病发生的原因，而用抗氧化剂能够有效地清除自由基，具有延缓衰老的功能。瑞典Emster揭示出类维生素物质辅酶Q10的抗氧化作用和自由基清除作用。线粒体衰老在机体衰老过程作用被认为氧自由基对线粒体DNA的损伤程度较对核DNA高16倍。其原因可能与线粒体基质中DNA更易接近内源性氧自由基，并且线粒体内DNA修复机制远不如核DNA。因此推论，随着年龄的增长线粒体DNA内亚单位受自由基损伤增大。衰老与线粒体辅酶Q10浓度关系的实验显示线粒体辅酶Q10浓度降低是骨骼肌的衰老的一个重要方面。一项大鼠的衰老实验研究显示衰老大鼠心脏线粒体辅酶Q10含量降低，肝脏和骨骼肌内含量更低。随年龄增长的免疫功能下降是自由基和自由基反应的结果。辅酶Q10是有效的抗氧化剂和自由基清除剂，它作为线粒体呼吸链的组成部分包埋在线粒体内膜脂质双分子中，从线粒体复合体I或复合体II接受的2个电子后变成醇式，再将电子传递给复合体III。体内辅酶Q10被大量消耗变成醇式，它既是有效的抗氧化剂，同时也是运动的电子载体，它将氢原子从其羟基转给脂质过氧化自由基，因而减少线粒体内膜的脂质过氧化物反应。在此过程中生成了与辅酶Q10和辅酶Q10的醇式不成比例的自由基泛半醌，或与氧发生反应形成超氧化物，自由基泛半醌在超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的作用下转运自由基实现解毒作用，如此循环往复呼吸链将辅酶Q10不断再生成醇式，恢复了它的抗氧化剂活性作用。实验证明体内辅酶Q10变成醇式后通过直接与过氧化物自由基反应，并且可以再生VE，独力并协同VE发挥抗氧化剂的作用。随年龄增长的免疫功能下降是自由基和自由基反应的结果，辅酶Q10作为一种强抗氧化剂单独使用或与维生素B6(吡哆醇)结合使用可抑制自由基对免疫细胞上受体与细胞分化和活性相关的微管***的修饰作用，增强免疫***，延缓衰老。局部实验表明随着年龄的增加皮肤胶原蛋白抵御紫外线等氧化刺激物损伤的能力下降，而长期使用辅酶Q10能够有效防止皮肤光衰老，减少眼部周围的皱纹，因为辅酶Q10渗透进入皮肤生长层可以减弱光子的氧化反应，在生育醇的协助下可以启动特异性的磷酸化酪氨酸激酶，防止DNA的氧化损伤，抑制紫外光照射下人皮肤成纤维母细胞胶原蛋白酶的表达，保护皮肤免于损伤。广泛的研究认为辅酶Q10抑制脂质过氧化反应，减少自由基的生成，保护SOD活性中心及其结构免受自由基氧化损伤，提高体内SOD等酶活性，抑制氧化应激反应诱导的细胞凋亡，具有显著的抗氧化、延缓衰老的作用。

柠檬酸和二水合柠檬酸三钠能够组成良好的缓冲体系，维持纳米乳体系PH值的相对稳定，从而有利于功效成分的有效发挥。

(4)本发明一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳的制备方法

①水相的配制：在三蒸水中依次溶解黄皮酰胺、柠檬酸、柠檬酸钠、盐酸甲氯酚酯和SOD，将此溶液作为水相。

②油相的配制：用分析天平准确称取肉豆蔻酸异丙酯，置于另一个经过洗消过的容器中；然后，再依次溶解加入维生素E、姜辣素、沙棘油、辅酶Q10，充分混合溶解后，将此溶液作为油相。

③乳化剂/助乳化剂混合物的配制：按照配方中已设计好的辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯(S)∶聚甘油脂肪酸酯(C)＝3∶1的比例，分别准确称取辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和聚甘油脂肪酸酯，并将这两者原料置于第三个合适容器中；加盖，并将此容器迅速置于液体快速混合器上，充分混合均匀，使之形成乳化剂/助乳化剂混合物。

④按照油相∶乳化剂/助乳化剂∶水相＝20％∶45％∶35％的比例，先分别取水相、S/C混合物置于第四个经过洗消过的200mL洁净容器之中。

⑤将上述水相、S/C混合物两液相充分混合后，再在此容器中直接加入油相，并将整个体系在超声振荡器中超声5min左右，充分混合后。体系外观如是无色、流体性和分散性好、有明显可见乳光者，即为一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳。

⑥将此一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳迅速分装于不同规格的避光玻璃容器之中，迅速加盖，包装，并置于干燥、通风、阴凉、避光的室温之中密闭保存即可。

2.本发明的有益效果

本发明的一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳制剂，外观微淡黄色、透明、可见乳光、具有一定的流动性。经透射电子显微镜检测，液滴直径分布在10～100nm之间。采用染色法鉴定，用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳制剂为水包油型纳米乳。

本发明与现有的技术相比，具有以下优点：

①热力学稳定性高：纳米乳液作为两种互不相溶的液体按一定的比例，在表面活性剂和助表面活性剂的共同作用下自然形成热力学稳定的分散体系，本发明制备比较简单，不分相、贮存稳定性提高。

②功效成分更新：我们选择的祛老年斑功效成分，如黄皮酰胺、姜辣素、沙棘油、辅酶Q10、对氯苯氧乙酸二甲氨基乙脂，都是疗效确切，副作用小。目前还未应用于祛老年斑领域中。另外用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳，采用多种不同机理的功效成分进行复配而成，从各种不同的角度抑制老年斑，具有抗氧化、清除自由基、促进细胞代谢、改善皮肤功能。达到综合性的效果。

③载体新颖：纳米乳液作为新型透皮传递给药***(TDDS)属热力学稳定***，在皮肤祛老年斑方面应用尚属首创，利用最佳纳米乳体系包容和包裹具有共济协同和联合增效作用的皮肤祛老年斑功效成分，使产品应用更加安全和有效。

④感观性更好：本发明制备的产品为两种互不相溶的液体按一定的比例，通过表面活性剂和助表面活性剂的共同作用自然形成热力学稳定的、各向同性的、流动性好、清澈透明、晶莹剔透的、有细微黄色的、略带乳光的分散体系，具有良好的感观性，实际使用舒适性极佳。

⑤生物利用度提高：通常的透皮制剂需要一些有效的渗透剂协助，才有可能透过表皮屏障而进入皮肤内发挥它们应有的生物学作用，而通常的渗透剂不仅对皮肤有一定得刺激性，使得皮肤增加了一种过敏原。本发明的用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳粒径小，被包容的功效成分分散度大大提高，提高了难溶性药物溶解度和单位体积功效成分浓度，使药物作用强度加大。再加上纳米乳载体的特点，促进功效成分的透皮吸收，提高了功效成分的生物利用度。

⑥提高了产品防腐的能力：纳米乳是透明液体，可以滤过，易于消毒灭菌处理，且本身有一定抗菌作用，不需添加化学防腐剂就能预防产品变质，使皮肤刺激性减少，安全性提高。

⑦本发明制备的方法在室温下制备，因此对于保护不耐热、高温功效成分的活性及含量、特别是保护蛋白类、肽类、酶类、细胞生长因子类等活性物质具有重要价值，提高蛋白多肽类药物或功效成分的稳定性，能最大限度保持其生物活性及生物学作用，对于保护这些功效成分在其它领域的应用也提供了一种很好的方法。

⑧本产品制备工艺简单，利于环保。传统的乳液化妆品由于需要使用多种原料，其油相和水相成分复杂，工艺流程繁琐，生产周期较长，特别是油相和水相必须在高温条件下才能完成乳化等，而本产品配制成分精简、成本低廉、制备工艺简单、实际操作容易、制备高效快速、不需要特殊仪器设备，不需要外界提供能量、不需要加热、不需要电力和其它能源，既可节约能源和成本，又不污染环境，适合规模化生产。

4.本发明的制备注意事项

①产品配制时所用的容器必须按照规定严格清洗和消毒，最好采用强酸浸泡后水冲，再清水洗涤干净，后用蒸馏水浸泡晾干，再置于烘箱高温消毒干燥后备用；另外，在进行产品配制时，所用容器均要特别注意防止含有杂质或金属离子及微生物等污染，以免影响产品质量和稳定性。

②因目前同种褪老年斑功效成分和原料的质量标准不完全相同，特别是含量和纯度存在一定差异，因此，在进行产品配制时，务必高度注意原料的质量和来源。在最后确定配方原料和制备方法后，原则上不要再更换原料来源和品质，以免影响产品质量、稳定性和使用效果。

③严格按照上述剂量和方法进行配制。在进行该产品配制时，应根据上述流程顺序添加，其添加剂量务必要求准确无误，而且，在其它原料的添加上，一定要等上一种加入的原料充分溶解后才能再加入下一种原料，以免出现浑浊，影响整个纳米乳体系的配制。

④在配制外用褪老年斑纳米乳时需要选择和确定S/C质量比(km值)，而确定S/C质量比(km值)1、2、3、4，是需要进行滴定水油两相的二元液试验并通过伪三元相图分析后才能最后确定，只有在确定并计算出得到最大的纳米乳区域的km值，才是较为理想的km值。上述制备方法已通过试验确定Km值为3，但在实际进行产品配制时，表面活性剂(S)和助表面活性剂按此比例仍须在进行混合后还要再充分混匀，以免影响配制效果和质量。

⑤由于液态溶液的比重或密度不同的关系，在进行产品配制时，所选配制容器的容量一定要稍大于实际配制的产品量，如配制100g产品，需要选择150-200mL的配制容器，这样既便于各成分充分混合和溶解，也便于超声震荡或者搅拌混匀，而不至于往外溢出。

⑥空白纳米乳本身虽具有一定的抑制细菌生长的特点，本产品配方中未有另外添加防腐剂，故在进行产品配制时，除配制容器必须进行严格清洗和消毒外，具体配制时也应严格按照操作规程，尽可能在无菌条件下并按照无菌操作要求进行操作，避免该纳米乳样品受到污染，影响产品质量。

⑦配制完成的样品务必用避光包装，并尽可能置于阴凉干燥通风避光处保存，要远离火源或热源。另外，产品平时使用后，无须置于低温或冰箱保存，但务必加盖密封严实，放置于自然室温避光保存即可。

⑧本品可能对皮肤有刺激性，如使用部位出现明显反应请立即暂停使用；在实际使用过程中，切勿将本品弄入眼内；皮肤受伤、有伤口或红肿不得使用、使用后如有持续红肿，应停止使用；婴儿和儿童不得使用；皮肤敏感者，使用前应做皮肤敏感性测试，测试完全无刺激性反应方可使用。

附图说明

图1.一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳的制备工艺流程及技术路线。

具体实施方式

实施例1.以下通过发明人给出的实施例子来进一步说明一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳的具体制备方法。

一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳各原料的优选重量百分比是：

肉豆蔻酸异丙酯15％，辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯33.75％，聚甘油脂肪酸酯11.25％，三蒸水31.146％，黄皮酰胺2％，维生素E 2％，姜辣素1％，沙棘油1％，辅酶Q10 1％，对氯苯氧乙酸二甲氨基乙脂0.875％，超氧化物歧化酶0.006％，柠檬酸0.14％，柠檬酸钠0.833％。

一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳的具体制备方法(以配制100g为例)：

①在31.146g水中依次溶解0.14g柠檬酸、0.833g柠檬酸钠、2g黄皮酰胺、0.875g对氯苯氧乙酸二甲氨基乙脂和0.006g超氧化物歧化酶。将此溶液作为水相(I)35g。

②用分析天平准确称取15g重量的肉豆蔻酸异丙酯，置于另一个经过洗消过的50mL三角烧瓶之中；然后，再依次溶解加入2g维生素E、1g姜辣素、1g沙棘油、1g辅酶Q10，超声5min充分混合溶解后，用记号笔清楚标记为油相(II)20g。

③按照事先已设计好的辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯(S)∶聚甘油脂肪酸酯(C)＝3∶1的比例，分别准确称取33.75g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和11.25g聚甘油脂肪酸酯，并将这两者原料置于第三个经过洗消过的100mL洁净三角烧瓶之中；加盖，并将此三角烧瓶迅速置于液体快速混合器上，打开液体快速混合器，并将其调至II档，充分混合均匀，使之形成乳化剂/助乳化剂(S/C)混合物，3-5min后，关闭液体快速混合器，取下三角烧瓶，并用记号笔清楚标记为S/C混合物(III)45g。

④按照油相(II)∶S/C(III)∶水相(I)＝20％∶45％∶35％的比例，先分别取水相(I)35g、S/C混合物(III)45g置于第四个经过洗消过的200mL洁净三角烧瓶之中。

⑤将上述水相(I)、S/C混合物(III)两液相充分混合后，再在室温25℃条件下或者自然室温中，将其放入超声振荡器中震荡并超声2min左右，或者在室温25℃条件下或者自然室温中，启动定时恒温磁力搅拌器，以200rpm·min^-1的转速磁力搅拌5min，然后，再在此容器中直接加入油相(II)20g，并将整个体系在超声振荡器中超声5min左右，或者在室温25℃条件下或者自然室温中，启动定时恒温磁力搅拌器，以200rpm·min^-1的转速磁力搅拌20min。

⑥关闭超声振荡器或者定时恒温磁力搅拌器，取下200mL三角烧瓶，观察其外观如是橙色透明、流体性和分散性好、有明显可见乳光者，即为100g一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳。

⑦将此100g一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳迅速分装于不同规格的避光玻璃容器之中，迅速加盖，包装，并置于干燥、通风、阴凉、避光的室温之中密闭保存即可。

实施例2.

将上述实施例1制备的一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳进行稳定性考察实验。

①强光照射试验：取黄皮酰胺复合纳米乳，置于玻璃磨口瓶中，在4000lx的光照下放置，于第5天、第十天测定，结果同放置前比较没有差异。结果发现本用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳外观依旧透明，未发现浑浊或沉淀，无分层和破乳现象说明稳定性好。

②常温留样考察：将市售包装在常温(25℃±2℃/RH75％)条件下进行，按一定时间间隔(0、1、3、6、12、24、36个月)，测定稳定性考察项目(有无分层)。结果发现本用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳外观依旧透明，未发现浑浊或沉淀，说明稳定性好。

③高温试验考察：取黄皮酰胺复合纳米乳，置于密闭器皿中于40℃、60℃、80℃分别放置，于第五天、第十天测定，结果发现本用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳外观依旧透明，未发现浑浊或沉淀，说明稳定性好。

④低温抗冻考察：将市售包装在冰箱中-4℃条件下进行，按一定时间间隔(0、1、3、6、12个月)取出恢复至室温，测定稳定性考察项目(是否透明、有无分层)。结果发现本用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳外观依旧透明，未发现浑浊或沉淀，说明本产品抗冻性好，稳定。

⑤加速稳定性考察：取用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳，置于高速离心机所配套的离心管中，以15000rpm·min^-1的速度离心20min，没有分层，依旧透明，说明本产品稳定性好。

实验结果，显示本发明制备的黄皮酰胺复合纳米乳稳定性好，可以长期贮存。

实施例3.

将上述实施例1制备的一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳进行透皮渗透率实验。

本实验主要研究内容为制备含有相同浓度本发明中祛老年斑功效成分的乳剂、凝胶和纳米乳，通过Franz体外透皮扩散仪对三种制剂的透皮性进行比较研究，从而评价纳米乳的体外透皮渗透的能力进行研究。结果表明黄皮酰胺复合纳米乳，比一般的透皮制剂具有更好的皮肤渗透性，三种不同的透皮剂型的累计透皮吸收量(见表1)(P＜0.01)具有显著性差异，纳米乳＞乳剂＞凝胶。

表1.黄皮酰胺复合纳米乳制剂、乳剂、凝胶制剂的单位面积累积透皮吸收量Q(n＝3)

实施例4.

将上述实施例1制备的一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳进行皮肤刺激实验。

健康新西兰白兔8只，雌雄各半，进行皮肤刺激实验，于给药前24小时，将动物脊柱两侧用Na₂S脱毛，脱毛区面积为35cm²即可。兔子一侧涂黄皮酰胺复合纳米乳1mL的敷料，另一侧涂黄皮酰胺复合纳米乳3mL的敷料，给药24小时后，揭去伤口敷料，用温水去除皮肤残留药物，观察均未出现明显皮肤刺激性。

实施例5.

将上述实施例1制备的一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳进行祛老年斑观察试验。

试验对象为30例老年斑患者，男女各半。每天早晚清洁面部后涂上本发明人实验室制备的黄皮酰胺复合纳米乳1mL左右，连续使用一个月，实验结果发现。30患者中具有不同程度的改善，其中22例患者效果显著，显效率达73.3％。同时观察到黄皮酰胺复合纳米乳在使用后，均未出现明显的刺激性。个别患者在开始使用后会出现小的红斑点，但长期使用后，这种状况就会消失。本试验虽然未与相关的外用祛老年斑产品进行比较，但本试验证实了黄皮酰胺复合纳米乳的有效性。

本发明所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行的描述，并非对本发明构思和范围进行限定，在不脱离本发明设计思想的前题下，本领域中工程技术人员对本发明的技术方案作出的各种变型和改进，均应落入本发明的保护范围，本发明请求保护的技术内容，已经全部记载在权利要求书中。

Claims (6)

1.一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳透皮制剂，其特征在于它是由下述重量百分比的原料组成：

黄皮酰胺                    1～5％

对氯苯氧乙酸二甲氨基乙脂    0.700-0.950％

超氧化物歧化酶              0.005-0.007％

维生素E                     1.2～2.5％

姜辣素                      1.0～1.5％

沙棘油                      1.0～1.5％

肉豆蔻酸异丙酯              12～16％

辅酶Q10                     1.0～1.5％

三蒸水                      32～35％

柠檬酸                      0.1～0.2％

柠檬酸钠                    0.60～0.85％

辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯      32～36％

聚甘油脂肪酸酯              10～12％

2.根据权利要求1所述的一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳，其中各原料的优选重量百分比是：

黄皮酰胺                    2％

对氯苯氧乙酸二甲氨基乙脂    0.875％

超氧化物歧化酶         0.006％

维生素E                2％

姜辣素                 1％

沙棘油                 1％

肉豆蔻酸异丙酯         15％

辅酶Q10                1％

三蒸水                 31.146％

柠檬酸                 0.14％

柠檬酸钠               0.833％

辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯 33.75％

聚甘油脂肪酸酯         11.25％

3.根据权利要求1所述的一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳，其特征在于它是由下述重量比的原料组成：油相20％、乳化剂/助乳化剂45％、水相35％。

4.根据权利要求3所述的一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳，其特征在于所述的油相是肉豆蔻酸异丙酯、维生素E、姜辣素、沙棘油、辅酶Q10。

5.根据权利要求3所述的一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳，其特征在于所述的水相是三蒸水、黄皮酰胺、柠檬酸、柠檬酸钠、对氯苯氧乙酸二甲氨基乙脂、超氧化物歧化酶。

6.根据权利要求3所述的一种用于清除面部老年斑(脂褐素)的黄皮酰胺复合纳米乳，其特征在于所述的乳化剂/助乳化剂是辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、聚甘油脂肪酸酯的混合物。

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