CN101757688A - 一种用纤维蛋白胶材料构建支架的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种用纤维蛋白胶材料构建支架的方法，该方法包括以下步骤：(1)分别配置A1和B1溶液，(2)将A1和B1溶液等量快速混匀并倒入模具，(3)冷冻干燥，(4)伽马射线照射灭菌；所述的A1溶液包括重量比为3～9∶1∶0.05～0.2∶15～25的纤维蛋白原，羧甲基纤维素，氨肽酶和甘油；所述的B1溶液为凝血酶1～5IU/ml，氯化钙2～8mg/ml。与现有技术相比，本发明具有方法简单可靠、可随意变换结构、应用性强等优点。
Description
技术领域
本发明涉及动物纤维蛋白胶材料，尤其是涉及一种用纤维蛋白胶材料构建支架的方法。
背景技术
纤维蛋白胶是由富纤维蛋白原组分(Fibrinogen-Rich-Fraction FRF。其中主要含有纤维蛋白原、XIII因子、纤维连接蛋白)、凝血酶、氯化钙等组成的生物材料。通过模拟凝血反应的最后阶段，用凝血酶激活纤维蛋白原形成纤维蛋白。Liu等使用原子力荧光显微镜检测单一纤维蛋白丝的弹性限度和可延长性，显示纤维蛋白具有异乎寻常的可延长性和弹性，其物理性能远强于蜘蛛丝，这一结果刊登在2006年8月的“科学”杂志上。
纤维蛋白胶材料的应用目前还主要集中在临床止血方面，在其他方面的应用还有极大扩展空间，尤其是组织工程支架方面。纤维蛋白可以促进成纤维细胞和平滑肌细胞分泌细胞外基质；可以与众多的细胞基质(如纤维连接蛋白)，生长因子(如成纤维细胞生长因子，血管内皮细胞生长因子等)结合，使其成为一种“智能生物材料”，作为一种创伤愈合和组织修复的起始蛋白。近年来逐渐引起人们越来越多的重视。纤维蛋白胶体的机械强度，伸展性、降解速度等物理特性可以通过添加凝血酶、XIII因子、钙离子、纤溶活性物质及其它辅料加以调节；另外，纤维蛋白胶(无论是人血来源还是动物血来源)在外科临床的广泛应用，证明该材料与人体组织相容性极好，不仅具有丰富的原料来源，宿主对移植物不产生免疫反应，安全可靠。所以纤维蛋白胶的应用还有待挖掘。
发明内容
本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种方法简单可靠、可随意变换结构、应用性强的用纤维蛋白胶材料构建支架的方法。
本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：一种用纤维蛋白胶材料构建支架的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)分别配置A1和B1溶液，(2)将A1和B1溶液等量快速混匀并倒入模具，(3)冷冻干燥，(4)伽马射线照射灭菌；所述的A1溶液包括重量比为3～9∶1∶0.05～0.2∶15～25的纤维蛋白原，羧甲基纤维素，氨肽酶和甘油；所述的B1溶液为凝血酶1～5IU/ml，氯化钙2～8mg/ml。
所述的A1溶液包括重量比为6∶1∶0.1∶18的纤维蛋白原，羧甲基纤维素，氨肽酶和甘油；所述的B1溶液为凝血酶2IU/ml，氯化钙4.4mg/ml。
所述的A1和B1溶液在1～3分钟内混匀并倒入模具，并在1～3分钟后从模具中取出。
所述的A1和B1溶液在2分钟内混匀并倒入模具，并在2分钟后从模具中取出。
所述的冷冻干燥使材料的水份在1％以下。
所述的冷冻干燥使材料的水份为0.5～1％。
所述的伽马射线照射灭菌为20～30KGY剂量的伽马射线照射24～72小时。
与现有技术相比，本发明采用的工艺简单有效，只要提供适合的模具均能制作出以纤维蛋白为原料的支架，利于纤维蛋白胶的应用，纤维蛋白原的浓度具有调整空间，可以制作出不同性质的纤维蛋白支架，采用冻干后射线灭菌技术，可以保证纤维蛋白不被破坏，这点是制作组织工程支架的基础。
附图说明
图1为管形支架的模具示意图；
图2为冻干曲线图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
配置溶液：
一，纤维蛋白原溶液10ml备用(A1)，其中纤维蛋白原30mg/ml、羧甲基纤维素CMC5mg/ml、氨肽酶APN 0.5mg/ml、甘油90mg/每份。二，准备催化剂溶液(B1)10ml，B1溶液中凝血酶2IU/ml，氯化钙4.4mg/ml备用。
制备凝胶管：
如图1所示，把A1溶液和B1溶液混匀搅拌后，迅速注入塞好皮塞3的玻璃套1和玻璃杆2套件。
冻干：小心取下凝胶管放入准备好的平皿中，冻干，冻干曲线如图2所示。
灭菌：采用3层塑胶袋将冻干材料密封，在20-30KGY剂量下辐照灭菌24小时。
实施例2
一种用纤维蛋白胶材料构建支架的方法，该方法包括以下步骤：(1)分别配置A1和B1溶液，(2)将A1和B1溶液等量在1分钟内混匀并倒入模具，并在1分钟后从模具中取出，(3)冷冻干燥，使材料的水份为0.5％，(4)采用20KGY剂量的伽马射线照射72小时灭菌；所述的A1溶液包括重量比为3∶1∶0.05∶15的纤维蛋白原，羧甲基纤维素，氨肽酶和甘油；所述的B1溶液为凝血酶1IU/ml，氯化钙2mg/ml。
实施例3
一种用纤维蛋白胶材料构建支架的方法，该方法包括以下步骤：(1)分别配置A1和B1溶液，(2)将A1和B1溶液等量在3分钟内混匀并倒入模具，并在3分钟后从模具中取出，(3)冷冻干燥，使材料的水份为1％，(4)采用20KGY剂量的伽马射线照射36小时灭菌；所述的A1溶液包括重量比为9∶1∶0.2∶25的纤维蛋白原，羧甲基纤维素，氨肽酶和甘油；所述的B1溶液为凝血酶5IU/ml，氯化钙8mg/ml。
Claims (7)
1.一种用纤维蛋白胶材料构建支架的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)分别配置A1和B1溶液，(2)将A1和B1溶液等量快速混匀并倒入模具，(3)冷冻干燥，(4)伽马射线照射灭菌；所述的A1溶液包括重量比为3～9∶1∶0.05～0.2∶15～25的纤维蛋白原，羧甲基纤维素，氨肽酶和甘油；所述的B1溶液为凝血酶1～5IU/ml，氯化钙2～8mg/ml。
2.根据权利要求1所述的一种用纤维蛋白胶材料构建支架的方法，其特征在于，所述的A1溶液包括重量比为6∶1∶0.1∶18的纤维蛋白原，羧甲基纤维素，氨肽酶和甘油；所述的B1溶液为凝血酶2IU/ml，氯化钙4.4mg/ml。
3.根据权利要求1所述的一种用纤维蛋白胶材料构建支架的方法，其特征在于，所述的A1和B1溶液在1～3分钟内混匀并倒入模具，并在1～3分钟后从模具中取出。
4.根据权利要求3所述的一种用纤维蛋白胶材料构建支架的方法，其特征在于，所述的A1和B1溶液在2分钟内混匀并倒入模具，并在2分钟后从模具中取出。
5.根据权利要求1所述的一种用纤维蛋白胶材料构建支架的方法，其特征在于，所述的冷冻干燥使材料的水份在1％以下。
6.根据权利要求1所述的一种用纤维蛋白胶材料构建支架的方法，其特征在于，所述的冷冻干燥使材料的水份为0.5～1％。
7.根据权利要求1所述的一种用纤维蛋白胶材料构建支架的方法，其特征在于，所述的伽马射线照射灭菌为20～30KGY剂量的伽马射线照射24～72小时。
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Cited By (1)
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|---|---|---|---|---|
| CN105705172A (zh) * | 2013-11-19 | 2016-06-22 | 上海松力生物技术有限公司 | 用于组织再生的亲水性静电纺生物复合支架材料及其制法与应用 |
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2008
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| CN105705172B (zh) * | 2013-11-19 | 2021-12-03 | 上海松力生物技术有限公司 | 用于组织再生的亲水性静电纺生物复合支架材料及其制法与应用 |
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| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
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