CN101659984A - 一种抗生素残留检测***及其容器 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种快速、灵敏、便捷的检测食品中抗生素残留的***及其容器，属于微生物化学检测领域。该检测***由接种在检测培养基中的检测微生物和检测指示剂组成。本发明还提供一种用于盛放检测培养基的容器，该容器由开口端和封闭端组成，所述封闭端盛有检测培养基，开口端用金属薄膜封闭。使用本发明可以快速、准确、低成本的检测食品中的抗生素残留。
Description
技术领域
本发明涉及一种快速、灵敏、便捷的检测食品中抗生素残留的***及其容器，属于微生物化学检测领域。
背景技术
1949年美国首次发现抗生素对畜禽有促生长作用，此后，许多国家将抗生素广泛应用于畜牧业，我国在20世纪50年代开始将抗生素作为饲料添加剂，其在防治动物疾病方面起到十分显著的作用，取得了明显的经济效益。但抗生素的不规范使用导致动物体内药物的滞留、蓄积，并以残留的方式进入人体内和生态***，给人类健康和环境带来危害。随着世界各国对食品安全性的重视加强，美国、欧盟等国家已相继颁布一系列法律，禁止或限制抗生素的使用。牛奶是人们尤其是婴幼儿的主要营养食品，牛奶中残留抗生素会危害饮用者身体健康。
牛奶“无抗”在国际上是一个雷打不动的硬性市场准入指标。在欧美国家，“有抗奶”及其制品严禁在市场上销售。2008年，农业部颁发了《无公害牛奶标准》，把“无抗”列入其中，表明有关部门对“无抗奶”开始重视起来。
最近在国家新颁布的GB/T 4789.27-2008食品卫生微生物学检验鲜乳中抗生素残留检验中更是严格的规定了生鲜牛乳中的抗生素残留限量，并且取消了“无抗奶”的名称，进一步指向了牛奶行业中的“有抗奶”的检测。
目前市场上出现的一些牛奶抗生素检测仪，其造价成本高，不适合家庭、个人的广泛使用。也有文献报道将微生物方法与仪器分析方法相结合，用嗜热脂肪芽孢杆菌作为指示菌，通过“阻抗分析仪”的自动检测、分析，根据DT时间的产生，判断牛奶中抗生素的残留情况，但该方法尚在研究中，还未产生实质性产品。现在市场上的抗生素快速检测试剂盒大多是国外进口的设备与试剂，可以检测内酰胺类和四环素类抗生素，但其成本很高，其他国产试剂盒也只能检测内酰胺类抗生素，可检测的抗生素品种较少，因此，必须寻找快速、准确、低成本的检测技术，且可以检测常用的抗生素品种，用来检测牛奶中的抗生素是否超标。
发明内容
本发明公开了一种检测牛奶中抗生素的***及其容器，可方便、快速地对市场上销售的各种牛奶中是否含有抗生素进行检测，在2.5-3小时内检查出牛奶中所含的抗生素浓度是否超过欧盟牛奶中抗生素要求最大残留量(MRL)。可检测β-内酰胺类、四环素类、大环内酯类、氨基配糖类、磺胺类及其它种类的抗生素共37种。
本发明采用的技术方案：
本发明提供一种用于盛放检测培养基的容器，其开口端覆盖着一层金属薄膜，可以保持微生物的稳定性、活性，还可防止交叉污染。
其中：检测培养基中接种有检测微生物和指示剂，微生物的生长使培养基发生颜色变化，若样品中存在的抗生素浓度高于检测限，微生物的生长受到抑制，培养基不发生颜色变化。
本发明对牛奶中抗生素浓度的检测，是通过以下过程实现的：
首先确定所需微孔数量，用刀沿微孔外侧划开金属薄膜，取下所需数量，剩余的微孔板需立即放回塑料袋中密封以防止微孔干结，并于4～8℃下储存。
然后将要使用的微孔条安放到另一个空板架上，剥开微孔上的金属薄膜，在每个微孔中加入100μl待测牛奶样品。
用粘胶薄膜或酶标板条帽小心地密封微孔条，将其垂直放入已经预热至65℃的水浴或培养器中培养2.5h。
从微孔底面观察判定结果：
阴性结果：微孔显示绿到黄色；阳性结果：微孔显示蓝到紫色；若微孔显示为绿到蓝色则为未知结果，表明抗生素浓度在检测限附近，仍需继续培养0.5h后再判定结果。
本发明的适用范围：快速检测各种牛奶中抗生素浓度是否超过欧盟牛奶中抗生素要求最大残留量(MRL)，操作简单、快捷，检测灵敏度高，无需专业人员操作，可以广泛用于现场样品和大量样品的快速检测，便于百姓在家庭中自行使用，也可用于工商执法、食品安全、市场的快速检测。
附图说明
图1盛放检测培养基的容器示意图。
表1本发明可检测的抗生素种类
表2本发明对各抗生素的检测限与欧盟标准的最大残留量比较
具体实施方式
检测培养基制备的实施方式
实施例1
葡萄糖 5g/L
蛋白胨 10g/L
琼脂 4g/L
纯水 1L
溴甲酚紫 0.01g/L
将上述溶液分装在容器中灭菌，然后接入浓度为105cfu/ml的嗜热脂肪芽孢杆菌，金属薄膜封口后，置于4～8℃冷藏备用。
实施例2
葡萄糖 5g/L
蛋白胨 10g/L
琼脂 4g/L
纯水 1L
溴甲酚紫 0.05g/L
将上述溶液分装在容器中灭菌，然后接入浓度为107cfu/ml的嗜热脂肪芽孢杆菌，金属薄膜封口后，置于4～8℃冷藏备用。
实施例3
葡萄糖 5g/L
蛋白胨 10g/L
琼脂 4g/L
纯水 1L
溴甲酚紫 0.1g/L
将上述溶液分装在容器中灭菌，然后接入浓度为107cfu/ml的嗜热脂肪芽孢杆菌，金属薄膜封口后，置于4～8℃冷藏备用。
检测实施方式
实施例1
如图1所示的一种盛放检测培养基的容器，主要由以下组件组成：
容器开口端101，容器封闭端102，检测培养基103，金属薄膜104。
将配制好的培养基装入容器中，培养基体积约占容器体积的1/3，灭菌后，接入一定浓度的嗜热脂肪芽孢杆菌，用金属薄膜封口后，置于4～8℃冷藏备用。
实施例2
本发明不能直接检测酸奶等酸性物质，如果检测酸性物质，应先将pH值调整至7.0～7.2范围内再进行检测。其他的检测步骤如下：
1.确定所需微孔数量，用刀沿微孔外侧划开金属薄膜，取下所需数量，剩余的微孔板需立即放回塑料袋中密封以防止微孔干结，并于4～8℃下储存。
2.将要使用的微孔条安放到另一个空板架上，剥开微孔上的金属薄膜，在每个微孔中加入100μl待测牛奶样品。
3.用粘胶薄膜或酶标板条帽小心地密封微孔条，将其垂直放入已经预热至65℃的水浴或培养器中培养2.5h。
4.从微孔底面观察判定结果：
阴性结果：绿-黄色；
阳性结果：蓝-紫色；
未知结果：绿-蓝色，抗生素浓度在试剂盒的检测限附近，需继续培养0.5h判定结果。
本发明可检测的抗生素种类见表1：
表1
实施例3
使用本发明的检测***，可以对食品中的β-内酰胺类、四环素类、大环内酯类、氨基配糖类、磺胺类及其它种类的抗生素的残留进行检测，检测限如表2所示：
表2
根据上表的检测限与欧盟给出的最大残留量比较，本发明产品的检测精度可以满足欧盟标准，并且对大环内酯类抗生素和氨基配糖类抗生素的检测精度有显著的提高，均高于现有的检测产品。且，使用本发明生产的产品其成本低于市场上的同类产品。
最后，应当指出，以上实施例仅是本发明较有代表性的例子。显然，本发明的方案并不限于上述的实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。
Claims (5)
1.一种快速检测食品中抗生素残留的检测***，由接种在检测培养基中的检测微生物及检测指示剂组成，其特征在于，所述检测微生物为嗜热脂肪芽孢杆菌，所述指示剂为溴甲酚紫。
2.根据权利要求1所述的一种快速检测食品中抗生素残留的检测***，其特征在于，所述的检测微生物的浓度为105-107cfu/ml。
3.根据权利要求1所述的一种快速检测食品中抗生素残留的检测***，其特征在于，所述的溴甲酚紫的浓度为0.01-0.1g/L。
4.一种用于盛放检测培养基的容器，该容器由开口端和封闭端组成，所述封闭端盛有检测培养基，其特征在于，所述培养基占到容器总体积的1/3～1/2。
5.根据权利要求4所述的一种用于盛放检测培养基的容器，其特征在于所述容器开口端采用金属薄膜封闭。
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| CN200910091553A CN101659984A (zh) | 2009-08-27 | 2009-08-27 | 一种抗生素残留检测***及其容器 |
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Publications (1)
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| CN (1) | CN101659984A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102072892A (zh) * | 2010-11-05 | 2011-05-25 | 云南健牛生物科技有限公司 | 一种检测牛奶及肉制品中阿莫西林残留量的方法 |
| CN111217624A (zh) * | 2020-01-16 | 2020-06-02 | 福建省田伯生物肥有限公司 | 一种畜禽粪污无抗优质有机肥制备法 |
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2009
- 2009-08-27 CN CN200910091553A patent/CN101659984A/zh active Pending
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