CN101646689A - 具有长半衰期的血清清蛋白结合蛋白 - Google Patents

具有长半衰期的血清清蛋白结合蛋白 Download PDF

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Abstract

本发明涉及能够结合于血清清蛋白的氨基酸序列；涉及包括或基本由所述氨基酸序列组成的化合物、蛋白质和多肽；涉及编码所述氨基酸序列、蛋白质或多肽的核酸；涉及包括所述氨基酸序列、蛋白质和多肽的组合物，和具体地，药物组合物；和涉及所述氨基酸序列、蛋白质和多肽的用途。

Description

具有长半衰期的血清清蛋白结合蛋白
发明领域
本发明涉及能够结合于血清清蛋白的氨基酸序列；包括或基本由所述氨基酸序列组成的化合物、蛋白质和多肽；编码所述氨基酸序列、蛋白质或多肽的核酸；包括所述氨基酸序列、蛋白质和多肽的组合物和特别是药物组合物；和所述氨基酸序列、蛋白质和多肽的用途。具体地，本发明的氨基酸序列和化合物以这样的方式与血清清蛋白结合或另外关联，所述方式是当所述氨基酸序列或化合物在灵长类动物中与血清清蛋白分子结合或另外关联时，它表现出血清半衰期是所述灵长类动物中血清清蛋白天然半衰期的至少50％。
由本文中进一步的描述，本发明的其他方面、实施方案、优势和应用将变得清晰。
发明背景
能够结合于人血清清蛋白的氨基酸序列及其在多肽构建体中的用途以便增加治疗相关蛋白质和多肽半衰期是本领域中已知的。
例如，WO 91/01743、WO 01/45746和WO 02/076489描述了与血清清蛋白结合的肽部分，其能够与治疗蛋白质和其他治疗化合物和实体相融合，从而增加其半衰期。然而，这些肽部分是细菌或合成来源的，其对于用在治疗中是较不优选的。
Ablynx N.V.的WO 04/041865描述了针对血清清蛋白(和特别是针对人血清清蛋白)的纳米抗体(Nanobodies)其能够与其他蛋白质(诸如一种或多种针对理想靶标的其它纳米抗体
Figure A20078004170700082
)相连，从而增加所述蛋白质的半衰期。
新生Fc受体(FcRn)，也称为“Brambell受体”，与延长清蛋白在循环中的寿命有关(见Chaudhury等，实验医学杂志(The Journal of ExperimentalMedicine)，第3卷，第197号，315-322(2003))。FcRn受体是由可溶性轻链、穿膜区和约50个氨基酸的胞质尾区组成的完整膜糖蛋白，所述可溶性轻链由β2-微球蛋白组成，通过三个细胞外结构域与43kDα链非共价结合。所述胞质尾区包含受体内在化中固有的、以二核苷酸基序为基础的胞吞作用信号。所述α链是蛋白质非经典MHC I家族的成员。β2m与α链的联合对FcRn的正确折叠和离开内质网定向到内体和细胞表面非常关键。
FcRn的总体结构类似于I类分子的总体结构。α-1和α-2区类似由8个反向平行β链组成的平台，所述反向平行β链形成加帽(topped)了2个反向平行α-螺旋的单β-折叠，所述α-螺旋非常类似于MHC I分子中的肽裂。由于α-1螺旋的全面重新定位和α-2螺旋由于存在Pro162而引起该螺旋中断裂的C-末端部分弯曲，FcRn螺旋彼此相当靠近，从而阻断肽结合。FcRn的Arg164侧链也阻断肽N-末端与MHC袋的潜在相互作用。另外，α-1和α-2螺旋间的盐桥和疏水性相互作用也对沟关闭作出贡献。
因此，FcRn不参与抗原呈递，且所述肽裂是空的。
FcRn结合并运输IgG由母体循环穿过胎盘合胞滋养层到达胎儿循环，并保护成年人中IgG免于被降解。除体内稳态外，FcRn控制组织中IgG的胞转作用。FcRn位于上皮细胞、内皮细胞和肝细胞中。
按照Chaudhury等(见上)，清蛋白结合FcRn从而形成具有IgG的三-分子复合物。清蛋白和IgG非协作地结合于FcRn上的不同位点。人FcRn与琼脂糖-HAS和琼脂糖-hIgG的结合是pH依赖性的，其在pH 5.0时达到最大，并在pH 7.0-pH 8时为零。关于FcRn以与结合IgG相同的pH依赖方式结合清蛋白的观察提示清蛋白与FcRn相互作用并由此受到保护免于被降解的机制与IgG的相同，并通过与FcRn类似的pH-敏感性相互作用受到介导。利用SPR测量各个HSA结构域结合固定的可溶性hFcRn的能力，Chaudhury显示FcRn和清蛋白通过清蛋白的D-III结构域，以pH-依赖性方式，在与IgG结合位点不同的位点上相互作用(Chaudhury，PhD论文，见http://www.andersonlab.com/biosketchCC.htm；Chaudhury等生物化学(Biochemistry)，ASAP文章10.1021/bi052628y S0006-2960(05)02628-0(网页公开日期：2006年3月22日))。
本领域中已知清蛋白结合剂的主要缺点是它们在灵长类动物中有限的体内半衰期。在小鼠中，血清清蛋白的天然半衰期是大约2天，且显示出不同的血清半衰期结合剂表现出相似的半衰期，即大约2天。然而，就在灵长类动物(即，猴(Macaca)属的，诸如猕猴和食蟹猴(cynomologusmonkeys))中测试已知的血清清蛋白结合剂来说，它们表现出大约3天的半衰期。参考例如Domantis有限公司的Lucy Holt博士所谓的“AlbudAb’sTM”(AlbudAbTM是Domantis有限公司的商标，剑桥，英国)上的数据，其表述在2006年6月1日的IBC会议“抗体及更多”(“Antibodiesand Beyond”)中的在2006年6月1日提出的“为了最佳实践修整人结构域抗体”(“Tailoring人Domain Antibodies for Best Practices”)中。换言之，本领域中已知其在灵长类动物中半衰期数据的血清清蛋白结合剂是有缺陷的，因为它们在灵长类动物中，在体内表现出短血清半衰期。这些半衰期比这些动物中血清清蛋白的天然半衰期明显更短，例如，是其25％。
许多治疗剂，特别是生物学的(即，肽或多肽药物、多核苷酸，等)在体内经历不充分的血清半衰期。这使得以高频率和/或更高剂量施用所述治疗剂，或使用持续释放剂型成为必要的，以维持治疗功效所需的血清水平。药物的频繁全身性施用与大量有害副作用相关。例如，频繁的，例如每日的，全身性注射显示对患者相当大的不适，并引起高危险的与施药相关的感染，且可能需要住院或频繁去医院，特别是在静脉内施用治疗时。而且，在长期治疗中，每日静脉内注射还可以引起大量由重复刺破血管引起的组织结疤和血管病理学副作用。已知所有频繁全身性施用治疗剂，如例如，向糖尿病患者施用胰岛素，或向患有多发性硬化的患者施用干扰素药物存在类似的问题。全部这些因素对健康***引起降低的患者顺应性和增加的成本。
因此，存在对增加治疗剂在灵长类动物，特别是在人中的血清半衰期的方法的需要。
发明概述
本发明通过提供氨基酸序列(以及包括所述氨基酸序列的化合物，如本文中定义地)解决该需要，所述氨基酸序列以这样的方式与血清清蛋白结合或另外关联，所述方式是当氨基酸序列在灵长类动物中与血清清蛋白分子结合或另外关联时，它表现出这样的血清半衰期，所述血清半衰期是所述灵长类动物中血清清蛋白天然半衰期的至少约50％(诸如约50％-70％)，优选地至少60％(诸如约60％-80％)或优选地至少70％(诸如约70％-90％)，更优选地至少约80％(诸如约80％-90％)或优选地至少约90％。灵长类动物中体内半衰期的这种显著增加使得本发明的氨基酸序列成为延长与之附着的治疗剂血清半衰期的理想候选者。按照本发明的组合的氨基酸序列和治疗剂的长血清半衰期随之容许降低施药频率和/或减少施药量，从而对待治疗的患者产生显著的益处。
在一方面，本发明提供以这样的方式与人血清清蛋白结合或另外关联的氨基酸序列，所述方式是当氨基酸序列与人血清清蛋白结合或另外关联时，所述氨基酸在人中表现出这样的血清半衰期，所述血清半衰期是人血清清蛋白天然半衰期的至少约50％(诸如约50％-70％)，优选地至少60％(诸如约60％-80％)或优选地至少70％(诸如约70％-90％)，更优选地至少约80％(诸如约80％-90％)或优选地至少约90％。本发明的所述氨基酸序列优选地结合于人血清清蛋白，其具有如本文中所定义的解离常数(KD)和/或结合亲和性(KA)。在人中，血清清蛋白的半衰期是约19天(Peters T(1996)关于清蛋白的一切(All About Albumin).学术出版社(AcademicPress)，圣地亚哥)。
本发明还涉及本发明的化合物，所述化合物包括所述氨基酸序列，并在人中具有这样的半衰期，所述半衰期是所述化合物中存在的氨基酸序列在人中半衰期的至少80％，更优选地至少90％，诸如95％或更长或基本相同。
在一个具体的方面，所述氨基酸序列优选地与来自至少一种其他灵长类动物物种的血清清蛋白，且具体地，与来自至少一种这样的灵长类动物物种的血清清蛋白交叉反应，所述这样的灵长类动物物种选自由下列各项组成的组：来自猴属的猴(诸如，和具体地，食蟹猴(Macaca fascicularis)和/或猕猴(Macaca mulatta))和狒狒(Papio ursinus)。优选地，所述交叉反应的氨基酸序列在所述灵长类动物中表现出这样的血清半衰期，所述血清半衰期是所述灵长类动物中血清清蛋白天然半衰期的至少约50％(诸如约50％-70％)，优选地至少60％(诸如约60％-80％)或优选地至少70％(诸如约70％-90％)，更优选地至少约80％(诸如约80％-90％)或优选地至少约90％。本发明的所述氨基酸序列还优选地以如本文中所定义的解离常数(KD)和/或结合亲和性(KA)结合于来自所述灵长类动物的血清清蛋白。
本发明还涉及本发明的化合物，所述化合物包括所述氨基酸序列，并在人和/或所述至少一种灵长类动物物种中具有这样的半衰期，所述半衰期是所述化合物中存在的氨基酸序列分别在人和/或所述灵长类动物物种中半衰期的至少80％，更优选地至少90％，诸如95％或更长或基本相同。
在另一方面，本发明提供以这样的方式与人血清清蛋白结合或另外关联的氨基酸序列，所述方式是当氨基酸序列与人血清清蛋白结合或两位联合时，所述氨基酸在人中表现出血清半衰期是至少约9天(诸如约9-14天)，优选地至少约10天(诸如约10-15天)或至少11天(诸如约11-16天)，更优选地至少约12天(诸如约12-18天或更长)或超过14天(诸如约14-19天)。本发明的所述氨基酸序列还优选地以如本文中所定义的解离常数(KD)和/或结合亲和性(KA)，结合于人血清清蛋白。
本发明还涉及本发明的化合物，所述化合物包括所述氨基酸序列，并在人中具有这样的半衰期，所述半衰期是所述化合物中存在的氨基酸序列在人中半衰期的至少80％，更优选地至少90％，诸如95％或更长或基本相同。
在一个具体的方面，所述氨基酸序列优选地与来自至少一种其他灵长类动物物种的血清清蛋白，且具体地，与来自至少一种这样的灵长类动物物种的血清清蛋白交叉反应，所述这样的灵长类动物物种选自由下列各项组成的组：来自猴属的猴(诸如猕猴或食蟹猴)和狒狒。优选地，所述交叉反应的氨基酸序列在所述灵长类动物中表现出这样的血清半衰期，所述血清半衰期是所述灵长类动物中血清清蛋白天然半衰期的至少约50％(诸如约50％-70％)，优选地至少60％(诸如约60％-80％)或优选地至少70％(诸如约70％-90％)，更优选地至少约80％(诸如约80％-90％)或优选地至少约90％。本发明的所述氨基酸序列还优选地以如本文中所定义的解离常数(KD)和/或结合亲和性(KA)，结合于来自所述灵长类动物的血清清蛋白。
本发明还涉及本发明的化合物，所述化合物包括所述氨基酸序列，并在人和/或所述至少一种灵长类动物物种中具有这样的半衰期，所述半衰期是所述化合物中存在的氨基酸序列分别在人和/或所述灵长类动物物种中半衰期的至少80％，更优选地至少90％，诸如95％或更长或基本相同。
在另一方面，本发明涉及这样的氨基酸序列，所述氨基酸序列与来自至少一种灵长类动物物种的血清清蛋白结合或另外关联，且当血清清蛋白在所述灵长类动物中半衰期是至少约10天，诸如约10-15天，例如约11-13天时(如例如关于猴物种中的猴，诸如关于食蟹猴或关于猕猴所预期的)。例如，关于猕猴，预期的血清清蛋白半衰期是约11-13天，特别地约11-12天；然而，参见下一段中作出的注释，在所述灵长类动物中具有血清半衰期为至少约5天(诸如约5-9天)，优选地至少约6天(诸如约6-10天)或至少7天(诸如约7-11天)，更优选地至少约8天(诸如约8-12天)或超过9天(诸如约9-12天或更长)。本发明的所述氨基酸序列优选地以如本文中所定义的解离常数(KD)和/或结合亲和性(KA)，结合于来自所述灵长类动物物种的血清清蛋白。在一个特别优选的方面，所述氨基酸序列与人血清清蛋白交叉反应，且更优选地，以如本文中所定义的解离常数(KD)和/或结合亲和性(KA)结合于人血清清蛋白。
关于猕猴中血清清蛋白的半衰期，应该注意到在科学文献中，有时也提到低于本说明书中推定的且用作计算本文中提到的所有百分比起始点(包括关于除猕猴以外的那些灵长类动物物种以及人)的11-13天数值的数值。在一些参考文献中，甚至提示血清清蛋白半衰期可以低至6天。基于本文中公开的数据，技术人员应该清楚地是，如果这些现有技术参考文献是正确的，则应该相应地调节本文中提到的百分比。例如，当猕猴中血清清蛋白的半衰期的确是约6天时，本文中公开的氨基酸序列和化合物可以在猕猴中表现出这样的血清半衰期，所述血清半衰期是猕猴血清清蛋白天然半衰期的至少约80％(诸如约80％-120％)，优选地至少90％(诸如约90％-110％)，更优选地至少100％(诸如100％-130％)，或优选地至少130％(诸如约130％-150％)，更优选地至少约150％(诸如约150％-170％)或优选地至少约170％，并且可以是猕猴血清清蛋白天然半衰期的至多200％或更多。类似地，在这样的实例中，本文中公开的氨基酸序列和化合物在其他灵长类动物物种中具有这样的半衰期(条件是本文中公开的氨基酸序列与来自所属灵长类动物物种的血清清蛋白交叉反应)，所述半衰期是所述灵长类动物物种中血清清蛋白天然半衰期的至少约80％(诸如约80％-120％)，优选地至少90％(诸如约90％-110％)，更优选地至少100％(诸如100％-130％)，或优选地至少130％(诸如约130％-150％)，更优选地至少约150％(诸如约150％-170％)或优选地至少约170％，且可以是所述灵长类动物物种中血清清蛋白天然半衰期的至多200％或更多。特别地，在这样的实例中，本文中公开的氨基酸序列和化合物在人中具有这样的半衰期，所述半衰期是人血清清蛋白天然半衰期的至少约80％(诸如约80％-120％)，优选地至少90％(诸如约90％-110％)，更优选地至少100％(诸如100％-130％)，或优选地至少130％(诸如约130％-150％)，更优选地至少约150％(诸如约150％-170％)或优选地至少约170％，且可以是人血清清蛋白天然半衰期的至多200％或更多。
本发明还涉及本发明的化合物，所述化合物包括所述氨基酸序列，并在所述至少一种灵长类动物物种中具有这样的半衰期，所述半衰期是所述化合物中存在的氨基酸序列在所述灵长类动物物种中半衰期的至少80％，更优选地至少90％，诸如95％或更长或基本相同。
在另一方面，本发明涉及这样的氨基酸序列，所述氨基酸序列与来自至少一种灵长类动物物种的血清清蛋白结合或另外关联，且当所述血清清蛋白在所述灵长类动物中半衰期是至少约13天，诸如13-18天(如例如关于狒狒的情形，其中血清清蛋白的半衰期是至少约13天，且通常是约16-18天)时，在所述灵长类动物中具有至少约7天(诸如约7-13天)，优选地至少约8天(诸如约8-15天)或至少9天(诸如约9-16天)，更优选地至少约10天(诸如约10-16天或更长)或超过13天(诸如约13-18天)的血清半衰期。本发明的所述氨基酸序列优选地以如本文中所定义的解离常数(KD)和/或结合亲和性(KA)，结合于来自所述灵长类动物物种的血清清蛋白。在一个特别优选的方面，所述氨基酸序列与人血清清蛋白交叉反应，且更优选地，以如本文中所定义的解离常数(KD)和/或结合亲和性(KA)结合于人血清清蛋白。
本发明还涉及本发明的化合物，所述化合物包括所述氨基酸序列，并在所述至少一种灵长类动物物种中具有这样的半衰期，所述半衰期是所述化合物中存在的氨基酸序列在所述灵长类动物物种中半衰期的至少80％，更优选地至少90％，诸如95％或更长或基本相同。
在优选的实施方案中，本发明提供氨基酸序列，其：
a)以这样的方式与人血清清蛋白结合或另外关联的氨基酸序列，所述方式是当氨基酸序列与人血清清蛋白结合或另外关联时，所述氨基酸在人中表现出血清半衰期是至少约9天(诸如约9-14天)，优选地至少约10天(诸如约10-15天)或至少11天(诸如约11-16天)，更优选地至少约12天(诸如约12-18天或更长)或超过14天(诸如约14-19天)；和
b)与来自至少一种选自猴属物种的灵长类动物的血清清蛋白(且具体地，与来自食蟹猴和/或来自猕猴的血清清蛋白)交叉反应；和
c)在所述灵长类动物中具有血清半衰期为至少约5天(诸如约5-9天)，优选地至少约6天(诸如约6-10天)或至少7天(诸如约7-11天)，更优选地至少约8天(诸如约8-12天)或超过9天(诸如约9-12天或更长)。
优选地，所述氨基酸序列以如本文中所定义的解离常数(KD)和/或结合亲和性(KA)结合于人血清清蛋白和/或来自所述灵长类动物物种的血清清蛋白。
本发明还涉及本发明的化合物，所述化合物包括所述氨基酸序列，并在人和/或所述至少一种灵长类动物物种中具有这样的半衰期，所述半衰期是所述化合物中存在的氨基酸序列分别在人和/或所述灵长类动物物种中半衰期的至少80％，更优选地至少90％，诸如95％或更长或基本相同。
在另一个优选的实施方案中，本发明提供氨基酸序列，其：
a)以这样的方式与人血清清蛋白结合或另外关联的氨基酸序列，所述方式是当氨基酸序列与人血清清蛋白结合或另外关联时，所述氨基酸在人中表现出血清半衰期是至少约9天(诸如约9-14天)，优选地至少约10天(诸如约10-15天)或至少11天(诸如约11-16天)，更优选地至少约12天(诸如约12-18天或更长)或超过14天(诸如约14-19天)；和
b)与来自狒狒的血清清蛋白交叉反应；和
c)在狒狒中具有半衰期为至少约7天(诸如约7-13天)，优选地至少约8天(诸如约8-15天)或至少9天(诸如约9-16天)，更优选地至少约10天(诸如约10-16天或更长)或超过13天(诸如约13-18天)。
优选地，所述氨基酸序列以如本文中所定义的解离常数(KD)和/或结合亲和性(KA)结合于人血清清蛋白和/或来自狒狒的血清清蛋白。
本发明还涉及本发明的化合物，所述化合物包括所述氨基酸序列，并在人和/或所述至少一种灵长类动物物种中具有这样的半衰期，所述半衰期是所述化合物中存在的氨基酸序列分别在人和/或所述灵长类动物物种中半衰期的至少80％，更优选地至少90％，诸如95％或更长或基本相同。
优选地，而且，包括至少一种本发明的氨基酸序列的化合物、构建体、融合蛋白等的半衰期优选地是其中存在(即，在相同的灵长类动物中)的本发明氨基酸序列半衰期的至少80％，更优选地至少90％，诸如95％或更长或基本相同。
在本发明具体的实施方案中，本发明的氨基酸序列(或包括所述氨基酸序列的化合物)可以以这样的方式与血清清蛋白结合或另外关联，所述方式是当所述氨基酸序列或多肽构建体与血清清蛋白分子结合或另外关联时，不(显著)降低或抑制所述血清清蛋白分子与FcRn的结合。
在另一个实施方案中，本发明的氨基酸序列(或包括所述氨基酸序列的化合物)可以以这样的方式与血清清蛋白结合或另外关联，所述方式是当氨基酸序列或多肽构建体与血清清蛋白分子结合或另外关联时，不(显著)缩短所述血清清蛋白分子的半衰期。
在另一个实施方案中，本发明的氨基酸序列(或包括所述氨基酸序列的化合物)能够结合于与血清清蛋白和FcRn的结合无关的血清清蛋白上的氨基酸残基，更具体地，能够结合于不形成血清清蛋白结构域III部分的血清清蛋白上的氨基酸残基。
在本发明的一个实施方案中，所述氨基酸序列是免疫球蛋白序列或其片段，更具体地，免疫球蛋白可变区序列或其片段，例如，VH-、VL-或VHH-序列或其片段。本发明的氨基酸序列可以是结构域抗体，“dAb”，单结构域抗体或纳米抗体，或其中任一项的片段。本发明的氨基酸序列可以是完全人、人源化、骆驼、骆驼化的人或人源化的骆驼的序列，且更具体地，可以包括4种框架区(分别地FR1-FR4)和3种互补决定区(分别地CDR1-CDR3)，其中：
a)CDR1是这样的氨基酸序列，其选自由SEQ ID NOS：8-14的CDR1序列组成的组和/或选自由与所述SEQ ID NOS：8-14的CDR1序列之一具有2个或仅1个“氨基酸差别”(如本文所定义)的氨基酸序列组成的组；
和/或其中：
b)CDR2是这样的氨基酸序列，其选自由SEQ ID NOS：22-29的CDR2序列组成的组；或选自由与所述SEQ ID NOS：22-29的CDR2序列之一具有至少80％，优选地至少90％，更优选地至少95％，甚至更优选地至少99％序列同一性(如本文中定义地)的氨基酸序列组成的组；和/或选自由与所述SEQ ID NOS：22-29的CDR2序列之一具有2个或仅1个“氨基酸差别”(如本文中定义地)的氨基酸序列组成的组；
和/或其中：
c1)CDR3是选自由SEQ ID NOS：42的CDR3序列组成的组中的氨基酸序列；与所述SEQ ID NOS：42的CDR3序列具有至少80％，优选地至少90％，更优选地至少95％，甚至更优选地至少99％序列同一性(如本文中定义地)的氨基酸序列；和/或与所述SEQ ID NOS：42的CDR3序列具有3个、2个或仅1个“氨基酸差别”(如本文中定义地)的氨基酸序列；
或备选地，其中：
c2)CDR3是这样的氨基酸序列，其选自由SEQ ID NOS：36-41的CDR3序列组的组和/或选自由与所述SEQ ID NOS：36-41的CDR1序列之一具有2个或仅1个“氨基酸差别”(如本文中定义地)的氨基酸序列组成的组。
更具体地，按照本发明的氨基酸序列是(单)结构域抗体或纳米抗体。
本发明还涉及与SEQ ID NO′s 50-64的氨基酸序列中的至少一种具有至少80％，优选地至少90％，更优选地至少95％，甚至更优选地至少99％序列同一性(如本文中定义地)的氨基酸序列，更具体地，涉及选自由PMP6A6(ALB1；SEQ ID NO：52)及其人源化变体组成的组中的氨基酸序列，包括但不仅限于克隆ALB 3(SEQ ID NO：57)；ALB 4(SEQ ID NO：58)；ALB 5(SEQ ID NO：59)；ALB 6(SEQ ID NO：60)；ALB 7(SEQ ID NO：61)；ALB 8(SEQ ID NO：62)；ALB 9(SEQ ID NO：63)；和ALB 10(SEQ ID NO：64)，最具体地ALB 8(SEQ ID NO：62)。
在一个实施方案中，本发明涉及包括至少一种本发明的氨基酸序列的化合物(在本文中也称为“本发明的化合物”)，所述化合物可以任选地还包含至少一种治疗部分，其包括选自由小分子、多核苷酸、多肽或肽组成的组中至少之一的治疗部分。本发明的化合物适合于以这样的频率向灵长类动物施药，所述频率对应于所述灵长类动物中血清清蛋白天然半衰期的不少于50％(诸如约50％-70％)，优选地至少60％(诸如约60％-80％)或优选地至少70％(诸如约70％-90％)，更优选地至少约80％(诸如约80％-90％)或优选地至少约90％，或备选地，以至少4天(诸如约4-12天或更长)，优选地至少7天(诸如约7-15天或更长)，更优选地至少9天(诸如约9-17天或更长)，诸如至少15天(诸如约15-19天或更长，特别地，关于向人施药)或至少17天(诸如约17-19天或更长，特别地，关于向人施药)为时间间隔；其中所述施药具体地用于维持所述化合物在受该化合物治疗的受试者血清中的理想水平(如对技术人员应该清楚地，其特别依赖于使用的化合物和/或待治疗的疾病)。临床医生或医师能够选择理想的血清水平和选择向待治疗受试者施用的剂量和/或量，从而在以本文中提到的频率施用本发明的化合物时，在所述受试者中获得和/或维持理想的血清水平。例如，所述剂量可以在理想血清水平1倍-10倍，诸如理想血清水平2倍-4倍的范围内(其中以自身已知的方式重新计算理想血清水平，从而提供待施用的相应剂量)。
还可以将本发明的化合物配制为预期和/或被包装(例如连同对于应用而言合适的说明书)为以上述频率施用的单位剂量，且所述单位剂量和包装产品构成本发明另外的方面。本发明的另一方面涉及本发明化合物在提供所述单位剂量或包装的产品中的用途(即，通过适当地配制和/或包装所述化合物)。
在具体的实施方案中，本发明的化合物是融合蛋白或构建体。在所述融合蛋白或构建体中，本发明的氨基酸序列可以与至少一种治疗部分直接相连，或通过连接体或间隔区与至少一种治疗部分相连。具体的实施方案涉及包括免疫球蛋白序列或其片段的治疗部分，更具体地，(单)结构域抗体或纳米抗体(Nanobody)。
本发明还涉及多价和多特异性纳米抗体构建体，包括至少一种本身是纳米抗体的本发明氨基酸序列和至少一种另外的纳米抗体。所述纳米抗体与所述至少一种另外的纳米抗体直接相连，或通过连接体或间隔区与所述至少一种另外的纳米抗体相连，优选地，通过氨基酸序列连接体或间隔区与所述至少一种另外的纳米抗体相连。
此外，本发明涉及编码按照本发明的氨基酸序列，或按照本发明化合物的氨基酸序列，或本发明多价和多特异性纳米抗体的核苷酸序列或核酸。本发明还提供包含本发明核苷酸序列或核酸和/或表达(或能够表达)本发明氨基酸序列、或按照本发明化合物的氨基酸序列、或本发明多价和多特异性纳米抗体的宿主或宿主细胞。
而且，本发明涉及用于制备本发明氨基酸序列、化合物、或多价和多特异性纳米抗体的方法，其包括在这样的条件下培养或维持本发明的宿主细胞，在所述条件下所述宿主细胞产生或表达所述产物，并任选地，还包括由此产生的所述产物。
在一个实施方案中，本发明涉及药物组合物，其包括选自由本发明氨基酸序列、化合物、或多价和多特异性纳米抗体组成的组中的一种或多种，其中所述药物组合物适合于对灵长类动物，以在所述灵长类动物中血清清蛋白天然半衰期至少约50％的时间间隔施用。所述药物组合物还可以包括至少一种药用载体、稀释剂或赋形剂。
本发明还包括包含本发明氨基酸序列、化合物或多价和多特异性纳米抗体的治疗的医学用途和方法，其中所述医学用途或方法的特征在于所述药物适合于以在所述灵长类动物中血清清蛋白天然半衰期的至少约50％的间隔施用，所述方法包括以在所述灵长类动物中血清清蛋白天然半衰期至少约50％的频率施用。
本发明还涉及用于延长或增加治疗剂血清半衰期的方法。所述方法包括使所述治疗剂与前述的本发明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体(包括多价和多特异性纳米抗体)的任一种相接触，以使所述治疗剂与本发明的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体结合或另外关联。在一些实施方案中，所述治疗剂是生物学治疗剂，优选地是肽或多肽，在该情形中，接触所述治疗剂的步骤可以包括通过使所述肽或多肽与本发明的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体相连接而制备融合蛋白。
这些方法还可以包括在治疗剂与本发明的氨基酸、化合物、融合蛋白或构建体结合或另外关联后，向灵长类动物施用所述治疗剂。在该方法中，所述治疗剂在灵长类动物中的血清半衰期是治疗剂本身半衰期的至少1.5倍，或与治疗剂本身的半衰期相比增加至少1小时。在一些优选的实施方案中，所述治疗剂在所述灵长类动物中的血清半衰期是相应治疗部分本身半衰期的至少2倍、至少5倍、至少10倍或超过20倍。在其他优选的实施方案中，所述治疗剂在灵长类动物中的血清半衰期与相应治疗部分本身的半衰期相比，增加超过2小时，超过6小时或超过12小时。
优选地，增加所述治疗剂在灵长类动物中的血清半衰期，以使所述治疗剂具有如本文中对本发明化合物定义的半衰期(即，在人中和/或在至少一种灵长类动物物种中)。
在另一方面，本发明涉及用于改进治疗剂的方法，这样随着适当施用所述治疗剂以获得所述理想治疗剂水平，所述治疗剂的理想治疗剂水平维持一段延长的时期。
所述方法包括使所述治疗剂与前述的本发明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体(包括多价和多特异性纳米抗体)的任一种相接触，从而使所述治疗剂与本发明的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体结合或另外关联。在一些实施方案中，所述治疗剂是生物学治疗剂，优选地是肽或多肽，在该情形中，接触所述治疗剂的步骤可以包括通过使所述肽或多肽与本发明的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体相连接而制备融合蛋白。
这些方法还可以包括在治疗剂与本发明的氨基酸、化合物、融合蛋白或构建体结合或另外关联后，向灵长类动物施用该治疗剂，从而随着所述施用获得理想的治疗剂水平。在该方法中，所述治疗剂随着所述施用维持理想治疗剂水平的时间是治疗剂本身半衰期的至少1.5倍，或与治疗剂本身的半衰期相比增加至少1小时。在一些优选的实施方案中，所述治疗剂随着所述施用维持理想治疗剂水平的时间是相应治疗部分本身半衰期的至少2倍、至少5倍、至少10倍或超过20倍。在其他优选的实施方案中，所述治疗剂随着所述施用维持理想治疗剂水平的时间与相应治疗部分本身的半衰期相比，增加超过2小时，超过6小时或超过12小时。
优选地，增加所述治疗剂随着所述施用维持理想治疗剂水平的时间，这样可以以本文中关于本发明化合物定义的频率施用所述治疗剂。
在另一方面中，本发明涉及本发明化合物制备药物的用途，所述药物增高和/或扩大患者血清中所述化合物或构建体中治疗剂水平，这样能够以与单独治疗剂相比更低的剂量施用所述化合物或构建体中的所述治疗剂(即，以基本相同的施药频率)。
发明详述
在一方面，本发明通过提供可以通过这样的方式与血清清蛋白结合或另外关联的氨基酸序列，和具体地免疫球蛋白序列，和更具体地免疫球蛋白可变结构域序列实现该目的，所述方式是当所述氨基酸序列或多肽构建体在灵长类动物中与血清清蛋白分子结合或另外关联时，它表现出这样的血清半衰期，所述血清半衰期是所述灵长类动物中血清清蛋白天然半衰期的至少约50％，优选地至少约60％，优选地至少约70％，更优选地至少约80％和更优选地至少约90％。
本发明的氨基酸序列在向灵长类动物施用后的血清半衰期可以是所述灵长类动物中血清清蛋白天然半衰期的至少50％，55％，60％，65％，70％，75％，80％，85％，90％，95％或至少100％。
通过“所述灵长类动物中血清清蛋白天然血清半衰期”意指如下定义的血清半衰期，其中所述血清清蛋白在生理学条件下在健康个体中。例如，人中血清清蛋白的天然血清半衰期是19天。已知较小的灵长类动物具有较短的血清清蛋白天然半衰期，例如在8-19天的范围内。血清清蛋白的具体半衰期可以是至少4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18，或19天或更长。
由此，它遵从，例如在人个体中，本发明的氨基酸序列显示出与血清清蛋白相关的血清半衰期为19天的至少约50％，即7.6天。在较小的灵长类动物中，根据这些物种中血清清蛋白的天然半衰期，所述血清半衰期可能再短几天。
在本说明书中，术语“灵长类动物”指猴和猿物种，并包括猴物种，诸如来自猴属(Macaca)猴(诸如，和具体地，食蟹猴(Macaca fascicularis)和或猕猴(Macaca mulatta))和狒狒(Papio ursinus))的猴，以及狨猴(来自狨(Callithrix)属的物种)，松鼠猴(来自松鼠猴(Saimiri)属的物种)和绢毛猴(来自獠狨(Saguinus)属的物种)，以及猿物种，诸如黑猩猩(Pantroglodytes)，并且还包括人。人是按照本发明优选的灵长类动物。因此，例如，且如可以由以下实验部分所见，包含ALB-8(SEQ ID NO：62，本发明的氨基酸序列)的纳米抗体构建体在猕猴中的半衰期是约10天，其为约90％的该物种中血清清蛋白预期天然血清半衰期(约11天)。
通常可以将氨基酸序列或化合物的半衰期定义为例如由于天然机制引起的序列或化合物降解和/或序列或化合物清除或螯合的原因，在体内多肽的血清浓度被降低50％所需的时间。可以以任何本身已知的方式，诸如通过药物动力学分析，确定本发明氨基酸序列(和包括所述氨基酸序列的化合物)在相关灵长类动物物种中的半衰期。合适的技术对本领域中的技术人员应该是清楚的，且通常可以例如涉及下列步骤：向灵长类动物适当地施用合适剂量的待处理的氨基酸序列或化合物；每隔一定时间间隔从所述灵长类动物中收集血液样品或其他样品；确定所述血液样品中本发明氨基酸序列或化合物的水平或浓度；和计算，从由此获得的数据(图)，直到本发明氨基酸序列或化合物的水平或浓度与给药起始水平相比降低50％的时间。例如参考下文中的实验部分，以及标准手册，诸如Kenneth，A等：药品的化学稳定性：药剂师手册(Chemical Stability of Pharmaceuticals：AHandbook for Pharmacists)和Peters等，药物动力学分析：实践方案(Pharmacokinete analysis：A Practical Approach)(1996)。还参考“药物动力学”(″Pharmacokinetics″)，M Gibaldi & D Perron，由Marcel Dekker出版，第2修订版(1982)。
如在WO 04/003019的第6和7页和在其中引用的其他参考文献中所述，可以利用参数诸如t1/2-α，t1/2-β和曲线下面积(AUC)表示半衰期。在本说明书中，“半衰期的增加”指这些参数中任一项，诸如这些参数中任两项，或基本全部三项参数的增大。“半衰期的增加”具体指在t1/2-α和/或AUC或二者的增加或不增加的条件下，t1/2-β的增加。
在另一方面，本发明提供氨基酸序列，和具体地，免疫球蛋白序列，和更具体地，免疫球蛋白可变结构域序列，所述序列针对血清清蛋白，优选地人血清清蛋白，并在猕猴中具有至少约4，优选地至少约7，更优选地至少约9天的半衰期。
在另一方面，本发明提供氨基酸序列，和具体地，免疫球蛋白序列，和更具体地，免疫球蛋白可变结构域序列，所述序列针对血清清蛋白，优选地人血清清蛋白。
在另一方面，本发明提供氨基酸序列，和具体地，免疫球蛋白序列，和更具体地，免疫球蛋白可变结构域序列，所述序列针对血清清蛋白，优选地人血清清蛋白，并在人中具有至少约7，优选地至少约15，更优选地至少约17天的半衰期。本发明还涉及本发明的化合物，所述本发明的化合物在人中具有这样的半衰期，所述半衰期是所述化合物中存在的本发明氨基酸序列半衰期的至少80％，更优选地至少90％，诸如95％或更长或基本相同。更具体地，本发明还涉及本发明的化合物，所述化合物在人中具有至少约7，优选地至少约15，更优选地至少约17天的半衰期。
本发明还提供包括本发明氨基酸序列的化合物，具体地，除本发明氨基酸序列外包括至少一种治疗部分的化合物。按照本发明的化合物的特征在于，在灵长类动物中表现出与本发明氨基酸序列在灵长类动物中相似的血清半衰期，更优选地，至少是本发明氨基酸序列在灵长类动物中血清半衰期的半衰期，和更优选地，大于本发明氨基酸序列在灵长类动物中半衰期的半衰期。
在一方面，本发明通过提供以这样的方式与血清清蛋白结合或另外关联的氨基酸序列，和具体地，免疫球蛋白序列，和更具体地，免疫球蛋白可变结构域序列实现该目的，所述方式是当所述氨基酸序列或多肽构建体与血清清蛋白分子结合或另外关联时，不(显著)降低或抑制所述血清清蛋白分子与FcRn的结合(即，与当氨基酸序列或多肽构建体不与其结合时，所述血清清蛋白分子与FcRn的结合相比)。在本发明的这个方面，通过“不显著降低或抑制”意指关于血清清蛋白和FcRn的结合亲和性(如利用合适的测定，诸如SPR测量)不被降低超过50％，优选地不被降低超过30％，甚至更优选地不被降低超过10％，诸如不被降低超过5％，或基本完全不被降低。在本发明的这个方面，“不显著降低或抑制”还可以意指(或另外意指)血清清蛋白分子的半衰期不显著缩短(如下定义)。
如技术人员通常理解地，当在本说明书中，提及结合时，所述结合优选地是特异性结合。
当如本文中所述的氨基酸序列是单价免疫球蛋白序列(例如，单价纳米抗体)时，所述单价免疫球蛋白序列优选地以10-5-10-12摩尔/升或更小，和优选地10-7-10-12摩尔/升或更小和更优选地10-8-10-12摩尔/升的解离常数(KD)，和/或以至少107M-1，优选地至少108M-1，更优选地至少109M-1，诸如至少1012M-1的结合亲和性(KA)结合于人血清清蛋白。通常认为任何大于104摩尔/升的KD值(或任何小于104M-1的KA值)表示非-特异性结合。优选地，本发明的单价免疫球蛋白序列以小于500nM，优选地小于200nM，更优选地小于10nM，诸如小于500pM的亲和性，结合于理想抗原。可以以任何本身已知的合适方式，包括，例如，斯卡查德分析和/或竞争结合测定，诸如放射性免疫测定(RIA)、酶免疫测定(EIA)和夹心竞争测定，及其在本领域中本身已知的不同变体，确定抗原-结合蛋白与抗原或抗原决定子的特异性结合。
在另一方面，本发明提供能够以这样的方式与血清清蛋白结合或另外关联的氨基酸序列，和具体地，免疫球蛋白序列，和更具体地，免疫球蛋白可变结构域序列，所述方式是当氨基酸序列或多肽构建体与所述血清清蛋白分子结合或另外关联时，不(显著)缩短所述血清清蛋白分子的半衰期(即，与当氨基酸序列或多肽构建体不与其结合时，血清清蛋白分子的半衰期相比)。在本发明的这个方面，通过“不显著缩短”意指血清清蛋白分子的半衰期(如利用本身已知的合适技术测量)不被缩短超过50％，优选地不被缩短超过30％，甚至更优选地不被缩短超过10％，诸如不被缩短超过5％，或基本完全不被缩短。
在另一方面，本发明提供氨基酸序列，和具体地，免疫球蛋白序列，和更具体地，免疫球蛋白可变结构域序列，所述序列能够结合于不参与血清清蛋白与FcRn的结合的血清清蛋白分子上的氨基酸残基。具体地，按照本发明的这个方面提供这样的氨基酸序列，其能够结合于不形成血清清蛋白结构域III部分的血清清蛋白氨基酸序列。例如，但不限于，本发明的这个方面提供这样的氨基酸序列，其能够结合于形成结构域I和/或结构域II部分的血清清蛋白氨基酸序列。
本发明的氨基酸序列优选地是(单)结构域抗体或适合于用作(单)结构域抗体，并同样地，可以是重链可变结构域序列(VH序列)或轻链可变结构域序列(VL序列)，且优选地是VH序列。所述氨基酸序列可以例如是所谓的“dAb”。
然而，按照特别优选的实施方案，本发明的氨基酸序列是纳米抗体。为了进一步描述和定义纳米抗体，以及本说明书中使用的一些其他术语(诸如，例如且不限于，术语“针对”)，参考Ablynx N.V.的共同待审专利申请(诸如Ablynx N.V.的共同待审国际申请，名称为“针对肿瘤坏死因子-α的改良纳米抗体TM(“Improved NanobodiesTM against Tumor NecrosisFactor-alpha”)，其具有与本申请相同的优先权和相同的国际申请日)；以及其中引用的其他现有技术。
同样地，它们可以是属于“KERE”-类、“GLEW”-类或“103-P，R，S”-类的纳米抗体(也如Ablynx N.V.的共同待审专利申请中定义地)。
优选地，本发明的氨基酸序列是人源化的纳米抗体(也如Ablynx N.V.的共同待审专利申请中定义地)。
可以有利地将本文中公开的氨基酸序列用作融合配偶体，从而增加治疗部分，诸如蛋白质、化合物(包括，但不限于，小分子)或其他治疗实体的半衰期。
因此，在另一方面，本发明提供包括或基本由如本文中公开的氨基酸序列组成的蛋白质或多肽。具体地，本发明提供包括或基本由至少一种本发明的氨基酸序列组成的蛋白质或多肽构建体，所述本发明的氨基酸序列任选地，通过一种或多种合适的连接体或间隔区，与至少一种治疗部分相连。如本文中进一步所述，所述蛋白质或多肽构建体可以例如(不限于)是融合蛋白。
本发明还涉及蛋白质或多肽构建体或融合蛋白和构建体的治疗用途，以及包括所述蛋白质或多肽构建体或融合蛋白的药物组合物。
在一些实施方案中，所述至少一种治疗部分包括或基本由治疗蛋白质、多肽、化合物、因子或其他实体组成。在优选的实施方案中，所述治疗部分针对理想的抗原或靶标，能够结合于理想的抗原(和具体地，能够特异性结合于理想的抗原)，和/或能够与理想的靶标相互作用。在另一个实施方案中，所述至少一种治疗部分包括或基本由治疗蛋白质或多肽组成。在另一个实施方案中，所述至少一种治疗部分包括或基本由免疫球蛋白或免疫球蛋白序列(包括但不仅限于免疫球蛋白片段)，诸如抗体或抗体片段(包括但不仅限于ScFv片段)组成。在再一个实施方案中，所述至少一种治疗部分包括或基本由抗体可变结构域，诸如重链可变结构域或轻链可变结构域组成。
在优选的实施方案中，所述至少一种治疗部分包括或基本由至少一种结构域抗体或单结构域抗体，“dAb”或纳米抗体组成。按照该实施方案，本发明的氨基酸序列还优选地是结构域抗体或单结构域抗体，“dAb”或纳米抗体，这样由此产生的构建体或融合蛋白是多价构建体(如本文中所述)和优选地，包括至少2个结构域抗体的多特异性构建体(也如本文中定义)、单结构域抗体、“dAb”或纳米抗体
Figure A20078004170700262
(或其组合)，至少其中之一针对(如本文中定义)血清清蛋白。
在具体的实施方案中，所述至少一种治疗部分包括或基本由至少一个单价纳米抗体
Figure A20078004170700263
或二价、多价、双特异性或多特异性纳米抗体
Figure A20078004170700264
构建体组成。按照该实施方案，本发明的氨基酸序列还优选地是纳米抗体，这样由此产生的构建体或融合蛋白是多价纳米抗体构建体(如本文中所述)和优选地，包括至少2个纳米抗体的多特异性纳米抗体构建体(也如本文中定义)，至少其中之一针对(如本文中定义)血清清蛋白。
按照本发明的一个实施方案，针对人血清清蛋白的纳米抗体是人源化的纳米抗体。
而且，当本发明的氨基酸序列、蛋白质、多肽或构建体意欲药物或诊断应用时，上述各项优选地针对人血清清蛋白。按照一个优选但非限制性实施方案，所述氨基酸序列、蛋白质、多肽或构建体对人血清清蛋白显示出比对小鼠血清清蛋白亲和性更高的亲和性(如在实验部分所述测量)。
按照一个优选但非限制性实施方案，本发明的氨基酸序列针对人血清清蛋白上的表位与克隆PMP6A6(ALB-1)相同。
按照具体但非限制性实施方案，本发明的氨基酸序列是能够结合于人血清清蛋白的免疫球蛋白序列(和优选地，纳米抗体)，所述人血清清蛋白由4种框架区(分别地FR1-FR4)和3种互补决定区(分别地CDR1-CDR3)组成，其中：
a)CDR1是这样的氨基酸序列，其选自由SEQ ID NOS：8-14的CDR1序列组成的组和/或选自由与所述SEQ ID NOS：8-14的CDR1序列之一具有2个或仅1个“氨基酸差别”(如本文中定义)的氨基酸序列组成的组；
和/或其中：
b)CDR2是这样的氨基酸序列，其选自由SEQ ID NOS：22-29的CDR2序列组成的组；或选自由与所述SEQ ID NOS：22-29的CDR2序列之一具有至少80％，优选地至少90％，更优选地至少95％，甚至更优选地至少99％序列同一性(如本文中定义地)的氨基酸序列组成的组；和/或选自由与所述SEQ ID NOS：22-29的CDR2序列之一具有2个或仅1个“氨基酸差别”(如本文中定义地)的氨基酸序列组成的组；
和/或其中：
c1)CDR3是选自由SEQ ID NOS：42的CDR3序列组成的组中的氨基酸序列；与所述SEQ ID NOS：42的CDR3序列具有至少80％，优选地至少90％，更优选地至少95％，甚至更优选地至少99％序列同一性(如本文中定义地)的氨基酸序列；和与所述SEQ ID NOS：42的CDR3序列具有3个、2个或仅1个“氨基酸差别”的氨基酸序列；
或备选地，其中：
c2)CDR3是这样的氨基酸序列，其选自由SEQ ID NOS：36-41的CDR3序列组成的组和/或选自由与所述SEQ ID NOS：36-41的CDR1序列之一具有2个或仅1个“氨基酸差别”(如本文中定义地)的氨基酸序列组成的组；
且，其中所述框架序列可以是任意合适的框架序列，诸如(单)结构域抗体和特别地纳米抗体的框架序列。
在以上氨基酸序列中：
(1)任何氨基酸取代优选地是保守的氨基酸取代(如本文中定义地)；和/或
(2)所述氨基酸序列与以上氨基酸序列相比，优选地仅包含氨基酸取代，而不包含氨基酸缺失或***。
下表I中可见本发明纳米抗体中CDR序列的一些优选组合，以及本发明纳米抗体中CDR和框架序列的一些优选组合。
下表II列出本发明的一些优选纳米抗体。下表III列出本发明一些优选的人源化纳米抗体。
表I：CDR序列的优选组合、和CDR序列和框架序列的优选组合。
Figure A20078004170700281
表II：本发明的优选但非限制性纳米抗体。
  PMP6A8(ALB2)   50   AVQLVESGGGLVQGGGSLRLACAASERIFDLNLMGWYRQGPGNERELVATCITVG.DSTNYADSVKGRFTISMDYTKQTVYLHMNSLRPEDTGLYYCKIRRTWHSELWGQGTQVTVSS
  PMP6B4   51   EVQLVESGGGLVQEGGSLRLACAASERIWDINLLGWYRQGPGNERELVATITVG.DSTSYADSVKGRFTISRDYDKNTLYLQMNSLRPEDTGLYYCKIRRTWHSELWGQGTQVTVSS
  PMP6A6(ALB1)   52   AVQLVESGGGLVQPGNSLRLSCAASGFTFRSFGMSWVRQAPGKEPEWVSSISGSGSDTLYADSVKGRFTISRDNAKTTLYLQMNSLKPEDTAVYYCTIGGSLSRSSQGTQVTVSS
  PMP6C1   53   AVQLVDSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFSFGSFGMSWVRQYPGKEPEWVSSINGRGDDTRYADSVKGRFSISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAEYYCTIGRSVSRSRTQGTQVTVSS
  PMP6G8   54   AVQLVESGGGLVQPGGSLRLTCTASGFTFRSFGMSWVRQAPGKDQEWVSAISADSSTKNYADSVKGRFTISRDNAKKMLYLEMNSLKPEDTAVYYCVIGRGSPSSPGTQVTVSS
  PMP6A5   55   QVQLAESGGGLVQPGGSLRLTCTASGFTFGSFGMSWVRQAPGEGLEWVSAISADSSDKRYADSVKGRFTISRDNAKKMLYLEMNSLKSEDTAVYYCVIGRGSPASQGTQVTVSS
  PMP6G7   56   QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYWMYWVRVAPGKGLERISRDISTGGGYSYYADSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTALYYCAKDREAQVDTLDFDYRGQGTQVTVSS
表III：本发明优选但非选择性的人源化纳米抗体。
  ALB3(ALB1 HUM1)   57   EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFRSFGMSWVRQAPGKEPEWVSSISGSGSDTLYADSVKGRFTISRDNAKTTLYLQMNSLKPEDTAVYYCTIGGSLSRSSQGTQVTVSS
  ALB4(ALB1 HUM2)   58   EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFGMSWVRQAPGKEPEWVSSISGSGSDTLYADSVKGRFTISRDNAKTTLYLQMNSLKPEDTAVYYCTIGGSLSRSSQGTQVTVSS
  ALB5(ALB1 HUM3)   59   EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFRSFGMSWVRQAPGKGLEWVSSISGSGSDTLYADSVKGRFTISRDNAKTTLYLQMNSLKPEDTAVYYCTIGGSLSRSSQGTQVTVSS
  ALB6(ALB1 HUM1)   60   EVQLVESGGGLVQPGNSLRLSCAASGFTFRSFGMSWVRQAPGKGLEWVSSISGSGSDTLYADSVKGRFTISRDNAKTTLYLQMNSLKPEDTAVYYCTIGGSLSRSSQGTLVTVSS
  ALB7(ALB1 HUM2)   61   EVQLVESGGGLVQPGNSLRLSCAASGFTFRSFGMSWVRQAPGKGLEWVSSISGSGSDTLYADSVKGRFTISRDNAKTTLYLQMNSLRPEDTAVYYCTIGGSLSRSSQGTLVTVSS
  ALB8(ALB1 HUM3)   62   EVQLVESGGGLVQPGNSLRLSCAASGFTFSSFGMSWVRQAPGKGLEWVSSISGSGSDTLYADSVKGRFTISRDNAKTTLYLQMNSLRPEDTAVYYCTIGGSLSRSSQGTLVTVSS
  ALB9(ALB1 HUM4)   63   EVQLVESGGGLVQPGNSLRLSCAASGFTFSSFGMSWVRQAPGKGLEWVSSISGSGSDTLYADSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRPEDTAVYYCTIGGSLSRSSQGTLVTVSS
  ALB10(ALB1 HUM5)   64   EVQLVESGGGLVQPGNSLRLSCAASGFTFSSFGMSWVRQAPGKGLEWVSSISGSGSDTLYADSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRPEDTAVYYCTIGGSLSRSGQGTLVTVSS
因此，在另一方面，本发明的氨基酸序列是纳米抗体，其与SEQ IDNO’s 50-64的氨基酸序列中至少之一具有至少80％，优选地至少90％，更优选地至少95％，甚至更优选地至少99％的序列同一性(如本文中定义地)。
因此，在另一方面，本发明的氨基酸序列是纳米抗体，其与SEQ IDNO’s 50-64的氨基酸序列中至少之一具有至少80％，优选地至少90％，更优选地至少95％，甚至更优选地至少99％的序列同一性(如本文中定义地)，其中：
-所述纳米抗体中存在的CDR1序列选自SEQ ID NOS：8-14的CDR1序列，或选自由与所述CDR1序列仅具有1个氨基酸差别的氨基酸序列；
-所述纳米抗体中存在的CDR2序列选自SEQ ID NOS：22-28的CDR1序列，或选自由与所述CDR2序列仅具有1个氨基酸差别的氨基酸序列；
-和所述纳米抗体中存在的CDR1序列选自SEQ ID NOS：23-42的CDR1序列，或选自由与所述CDR3序列仅具有1个氨基酸差别的氨基酸序列。
在另一方面，本发明的氨基酸序列是纳米抗体，其与SEQ ID NO’s50-64的氨基酸序列至少之一具有至少80％，优选地至少90％，更优选地至少95％，甚至更优选地至少99％的序列同一性(如本文中定义地)，其中：
-所述纳米抗体中存在的CDR1序列选自SEQ ID NOS：8-14的CDR1序列；
-所述纳米抗体中存在的CDR2序列选自SEQ ID NOS：22-28的CDR1序列；
-和所述纳米抗体中存在的CDR1序列选自SEQ ID NOS：23-42的CDR1序列。
本发明中使用的一个特别优选的纳米抗体组包括克隆PMP6A6(ALB1；SEQ ID NO：52)及其人源化变体，包括但不仅限于克隆ALB 3(SEQ ID NO：57)；ALB 4(SEQ ID NO：58)；ALB 5(SEQ ID NO：59)；ALB 6(SEQ ID NO：60)；ALB 7(SEQ ID NO：61)；ALB 8(SEQ ID NO：62)；ALB 9(SEQ ID NO：63)；和ALB 10(SEQ ID NO：64)，其中ALB 8(SEQ ID NO：62)是特别优选的。
因此，在一个优选的方面，本发明涉及这样的氨基酸序列，其与SEQID NO’s 52和57-64氨基酸序列中至少之一具有至少80％，优选地至少90％，更优选地至少95％，甚至更优选地至少99％的序列同一性(如本文中定义地)。
在另一个优选的方面，本发明的氨基酸序列是能够结合于人血清清蛋白的免疫球蛋白序列(和优选地，纳米抗体)，所述人血清清蛋白由4种框架区(分别地FR1-FR4)和3种互补决定区(分别地CDR1-CDR3)组成，其中：
a)CDR1包括，或基本由下列各项组成：
-氨基酸序列SFGMS；或
-与氨基酸序列SFGMS具有至少80％，优选地至少90％，更优选地至少95％，甚至更优选地至少99％序列同一性的氨基酸序列；或
-与氨基酸序列SFGMS具有2个或仅1个氨基酸差别的氨基酸序列；
和/或其中：
b)CDR2包括，或基本由下列各项组成：
-氨基酸序列SISGSGSDTLYADSVKG；或
-与氨基酸序列SISGSGSDTLYADSVKG具有至少80％，优选地至少90％，更优选地至少95％，甚至更优选地至少99％序列同一性的氨基酸序列；或
-与氨基酸序列SISGSGSDTLYADSVKG具有2个或仅1个氨基酸差别的氨基酸序列；
和/或其中：
C)CDR3包括，或基本由下列各项组成：
-氨基酸序列GGSLSR；或
-与氨基酸序列GGSLSR具有至少80％，优选地至少90％，更优选地至少95％，甚至更优选地至少99％序列同一性的氨基酸序列；或
-与氨基酸序列GGSLSR具有2个或仅1个氨基酸差别的氨基酸序列。
具体地，本发明涉及这样的纳米抗体，其中：
-CDR1包括或是氨基酸序列SFGMS；
和/或其中
-CDR2包括或是氨基酸序列SISGSGSDTLYADSVKG；
和/或其中：
-CDR3包括或是氨基酸序列SPSGFN
更具体地，本发明涉及这样的纳米抗体，其中：
-CDR1包括或是氨基酸序列SFGMS；且CDR3包括或是氨基酸序列GGSLSR；
和/或其中：
-CDR1包括或是氨基酸序列SFGMS；且CDR2包括或是氨基酸序列SISGSGSDTLYADSVKG；
和/或其中：
-CDR2包括或是氨基酸序列SISGSGSDTLYADSVKG；且CDR3包括或是氨基酸序列GGSLSR。
甚至更具体地，本发明涉及这样的纳米抗体，其中CDR1包括或是氨基酸序列SFGMS；CDR2包括或是氨基酸序列SISGSGSDTLYADSVKG和CDR3包括或是氨基酸序列GGSLSR。
而且，优选地，这些氨基酸序列与SEQ ID NO’s 52和57-64氨基酸序列中至少之一具有至少80％，优选地至少90％，更优选地至少95％，甚至更优选地至少99％的序列同一性(如本文中定义地)。
同样，此外，这些氨基酸序列优选地是人源化的，如在Ablynx N.V.的共同待审申请中所述。例如通过比较SEQ ID NO：52的非人源化序列和SEQ ID NOS：57-64的相应人源化序列，技术人员清楚一些优选的人源化取代。
当所述氨基酸序列是免疫球蛋白序列，诸如免疫球蛋白可变结构域序列时，还可以使用所述序列的合适(即适合于本文中提及的目的)片段。例如，当所述氨基酸序列是纳米抗体时，所述片段可以基本如WO04/041865中所述。
本发明还涉及包括或基本由本文中所述的氨基酸序列或其合适片段组成的蛋白质或多肽。
如本文中提及地，可以将本文中所述的氨基酸序列有利地用作融合配偶体，从而增加治疗部分，诸如蛋白质、化合物(包括，但不限于，小分子)或其他治疗实体的半衰期。因此，本发明的一个实施方案涉及包括至少一种本发明氨基酸序列和至少一种治疗部分的构建体或融合蛋白。与所述治疗部分本身相比，所述构建体或融合蛋白优选地具有增加的半衰期。通常，(制备和使用)这类融合蛋白和构建体如以上引用的现有技术中所述，但是其具有本发明的氨基酸序列，而不是现有技术中所述的增加半衰期的部分。
通常，本文中所述的构建体或融合蛋白优选地具有这样的半衰期，所述半衰期是相应治疗部分本身半衰期的至少1.5倍，优选地至少2倍，诸如至少5倍，例如至少10倍或超过20倍。
而且，优选地，任何所述融合蛋白或构建体具有这样的半衰期，所述半衰期与相应治疗部分本身的半衰期相比，增加超过1小时，优选地超过2小时，更优选地超过6小时，诸如超过12小时。
而且，优选地，任何所述融合蛋白或构建体具有这样的半衰期，所述半衰期是超过1小时，优选地超过2小时，更优选地超过6小时，诸如超过12小时，和例如约1天、2天、1周、2周或3周，和优选地，不超过2个月，尽管后者可能不太关键。
而且，如上所提及地，当本发明的氨基酸序列是纳米抗体时，可以使用它增加其他免疫球蛋白序列，诸如结构域抗体、单结构域抗体、“dAb”或纳米抗体的半衰期。
因此，本发明的一个实施方案涉及这样的构建体或融合蛋白，其包括至少一种本发明的氨基酸序列和至少一种免疫球蛋白序列，诸如结构域抗体、单结构域抗体、“dAb”或纳米抗体。所述免疫球蛋白序列优选地针对理想的靶标(其优选地是治疗靶标)，和/或有效于或适合于治疗、预防和/或诊断目的其他免疫球蛋白序列。
因此，在另一方面，本发明涉及多特异性(和特别地，双特异性)纳米抗体构建体，其包括至少一种本文中所述的纳米抗体，和至少一种其他纳米抗体，其中所述至少一种其他纳米抗体优选地针对理想的靶标(其优选地是治疗靶标)，和/或有效于或适合于治疗、预防和/或诊断目的其他纳米抗体。
为了一般性描述包含一种或多种纳米抗体的多价和多特异性多肽和它们制备的，参考Conrath等，生物学和化学杂志(J.Biol Chem.)，卷276，10.7346-7350，2001；Muyldermans，分子生物技术综述(Reviews in MolecularBiotechnology)74(2001)，277-302；以及参考例如WO 96/34103和WO99/23221。Ablynx N.V.的共同待审申请中发现关于本发明一些特定多特异性和/或多价多肽的一些其他实例。具体地，对于一般性描述为了增加半衰期而包括至少一种针对血清蛋白的纳米抗体的多价和多特异性构建体、编码所述构建体的核酸、包括所述构建体的组合物、上述各项的制备、和上述各项的用途，参考以上提到的Ablynx.N.V.的国际申请WO 04/041S65。通常可以与其中所述增加半衰期的纳米抗体相类似地，使用本文中所述的氨基酸序列。
在一个非-限制性实施方案中，所述其他纳米抗体针对处于单体和/或多聚体(即三体)形式的肿瘤坏死因子α(TNF-α)。所述纳米抗体构建体的一些实例可以发现于Ablynx.N.V.的共同待审国际申请中，其名称为“针对肿瘤坏死因子-α的改良纳米抗体TM”(“Improved NanobodiesTM againstTumor Necrosis Factor-alpha”)，与本申请具有相同的优先权和相同的国际申请日。
本发明还涉及编码本文中所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白和构建体的核苷酸序列或核酸。本发明还包括包含上述核苷酸序列或核酸的遗传构建体，和一种或多种本身已知的遗传构建体的元件。所述遗传构建体可以是质粒或载体的形式。而且，所述构建体通常可以如本文中所述的Ablynx.N.V.的共同待审专利申请，诸如WO 04/041862或Ablynx.N.V.的共同待审国际申请，名称为“针对肿瘤坏死因子-α的改良纳米抗体TM”(“Improved NanobodiesTM against Tumor Necrosis Factor-alpha”)中所述。
本发明还涉及包含所述核苷酸序列或核酸，和/或表达(或能够表达)本文中所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白和构建体的宿主或宿主细胞。而且，所述宿主细胞通常可以如本文中所述的Ablynx.N.V.的共同待审专利申请诸如WO 04/041862或Ablynx.N.V.的共同待审国际申请，名称为“针对肿瘤坏死因子-α的改良纳米抗体TM”(“Improved NanobodiesTMagainst Tumor Necrosis Factor-alpha”)中所述。
本发明还涉及用于制备本文中所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体的方法，所述方法包括在这样的条件下培养或维持本文中所述的宿主细胞，在所述条件下，所述宿主细胞产生或表达如本文中所述的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体，且任选地，还包括分离由此产生的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体。而且，通常可以如本文中所述的Ablynx.N.V.的共同待审专利申请，诸如WO 04/041862或Ablynx.N.V.的共同待审国际申请，名称为“针对肿瘤坏死因子-α的改良纳米抗体TM”(“Improved NanobodiesTM against Tumor Necrosis Factor-alpha”)中所述地执行所述方法。
本发明还涉及药物组合物，其包括至少一种如本文中所述的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体，和任选地，至少一种药用载体、稀释剂或赋形剂。所述制剂、载体、赋形剂和稀释剂通常可以如本文中所述的Ablynx.N.V.的共同待审专利申请，诸如WO 04/041862或Ablynx.N.V.的共同待审国际申请，名称为“针对肿瘤坏死因子-α的改良纳米抗体TM”(“Improved NanobodiesTM against Tumor Necrosis Factor-alpha”)中所述。
然而，由于本文中所述的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体具有增加的半衰期，所以优选地将它们施用到循环中。同样地，可以以任何容许所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体进入循环的合适方式，诸如静脉内、通过注射或灌输，或以任何其他容许所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体进入循环的合适方式(包括口服施药、经由皮肤施药、跨粘膜施药、鼻内施药、通过肺的施药)施用它们。而且，还例如由WO 04/041862或Ablynx.N.V.的共同待审国际申请，名称为“针对肿瘤坏死因子-α的改良纳米抗体TM”(“Improved NanobodiesTM against TumorNecrosis Factor-alpha”)的教导，技术人员应该清楚合适的施药方法和途径。
因此，在另一方面，本发明涉及用于预防和/或治疗至少一种能够通过使用如本文中所述的化合物、融合蛋白或构建体预防或治疗的疾病或病症的方法，所述方法包括将药物有效量的本发明氨基酸序列、化合物、融合蛋白和构建体，和/或包括所述本发明氨基酸序列、化合物、融合蛋白和构建体的药物组合物施用于有此需要的受试者。能够通过使用如本文中所述的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体预防或治疗的疾病和病症通常与能够通过使用本发明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体中存在的治疗部分预防或治疗的疾病和病症相同。
待治疗的受试者可以是任何灵长类动物，但是特别地是人。如技术人员应该清楚地，待治疗的受试者应该具体地是患有本文中提及疾病和病症或处于本文中提及疾病和病症危险的人。
更具体地，本发明涉及治疗方法，其中施用本发明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体的频率是血清清蛋白在灵长类动物中天然半衰期的至少50％，优选地至少60％，优选地至少70％，更优选地至少80％和最优选地至少90％。
属于本发明范围内的对灵长类动物施药具体频率是如上定义地血清清蛋白在所述灵长类动物中天然半衰期的至少50％，55％，60％，65％，70％，75％，80％，85％，90％，95％或至少100％。
换言之，属于本发明范围内的具体施药频率是每4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18或19天。
不限制地，上文提到的施药频率特别适合于维持利用所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体治疗的受试者血清中的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体的理想水平，任选地，在施用意欲建立所述理想血清水平的一或多(起始)剂量后。技术人员应该清楚地，所述理想的血清水平可以特别依赖于使用的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体和/或待治疗的疾病。临床医生或医师应该能够选择理想的血清水平，和选择向待治疗受试者施用的剂量和/或量，从而在以本文中提到的频率施用本发明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体时，在所述受试者中获得和/或维持理想的血清水平。
在本发明的上下文中，术语“预防和/或治疗”不仅包括预防和/或治疗疾病，通常还包括预防疾病的发作，减缓或逆转疾病进程，预防或减缓一种或多种与疾病相关症状的发作，减轻和/或缓解一种或多种与疾病相关的症状，减少疾病和/或其任意相关症状的严重性和/或持续时间，和/或预防疾病和/或其任意相关症状严重性的进一步增加，预防、降低或逆转由疾病导致的任何生理学损伤，和通常任何有益于待治疗患者的药理学作用。
待治疗的受试者可以是任何灵长类动物，但是特别地是人。技术人员应该清楚地，待治疗的受试者应该具体地是患有能通过本文中提及的治疗部分治疗的疾病和病症或处于能通过本文中提及的治疗部分治疗的疾病和病症危险的人。
在另一个实施方案中，本发明涉及用于免疫治疗，和具体地用于被动免疫治疗的方法，所述方法包括向患有或处于本文中提及疾病和病症危险的受试者施用药物有效量的本发明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体，和/或包括所述本发明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体的药物组合物。
本发明还涉及用于延长或增加治疗剂血清半衰期的方法。在这些方法中，治疗剂与任一本发明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体，包括多价和多特异性纳米抗体相接触，这样该治疗剂与所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体结合或另外关联。
所述治疗剂和所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体可以以技术人员已知的不同方式结合或另外关联。在生物学治疗剂，诸如肽或多肽的情形中，该治疗剂可以按照本领域中已知的方法与所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体融合。所述治疗剂可以直接融合，或利用间隔区或连接体分子或序列融合。在优选的实施方案中，所述间隔区和连接体由氨基酸组成，但是可以如本领域中熟知的方式使用其他非-氨基酸间隔区或连接体。因此，接触所述治疗剂的步骤可以包括通过连接所述肽或多肽和本发明的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体，包括多价和多特异性纳米抗体制备融合蛋白。
所述治疗剂还可以与本发明的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体直接结合。作为一个实例，多价和多特异性纳米抗体可以包括至少一种结合所述血清清蛋白的可变结构域和至少一种结合所述治疗剂的可变结构域。
用于延长或增加治疗剂血清半衰期的方法还可以包括在所述治疗剂与本发明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体结合或另外关联后，向灵长类动物施用所述治疗剂。在所述方法中，如本文中别处所述地，以显著量延长或增加所述治疗剂的半衰期。
按照适合于预防和/或治疗待预防或治疗的疾病或病症的治疗方案，施用所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体和/或包括所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体的组合物。临床医生通常应该能够根据因素，诸如待预防或治疗的疾病或病症，待治疗疾病的严重性和/或其症状的严重性，待使用的本发明具体纳米抗体或多肽，待使用的具体施药途径和药物剂型或组合物，患者的年龄、性别、体重、饮食、一般状态，和临床医生熟知的类似因素，确定合适的治疗方案。
通常，所述治疗方案包括以一种或多种药物有效量或剂量，施用一种或多种本发明的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体，或一种或多种包括所述本发明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体的组合物。临床医生根据以上引用的因素，也可以确定具体的待施用量或剂量。
通常，为了预防和/或治疗本文中提到的疾病和病症，并根据待治疗的具体疾病或病症，待使用的具体氨基酸序列、化合物、融合蛋白或构建体的功效和/或半衰期，使用的具体施药途径和具体药物剂型或组合物，通常应该以这样的量，在一天中连续地(例如通过灌输)作为单次每日剂量或作为多次分开的剂量施用本发明的纳米抗体和多肽，所述量是1克-0.01微克/kg体重/天，优选地0.1克-0.1微克/kg体重/天，诸如约1，10，100或1000微克/kg体重/天。临床医生通常能够根据本文中提到的因素确定合适的每日剂量。还应该清楚地是，在具体情形中，临床医生可以选择偏离这些量，例如，基于以上引用的因素和他的专业判断。通常，可以由对类似常规抗体或抗体片段通常施用的量，考虑亲和性/亲和力、功效、生物分布、半衰期和技术人员熟知的类似因素中的差别，获得一些关于待施用量的指导，所述类似常规抗体或抗体片段针对基本通过相同途径施用的相同靶标。
通常，在以上方法中，使用本发明的单纳米抗体或多肽。然而，组合使用两种或更多本发明的纳米抗体和/或多肽属于本发明的范围。
本发明的纳米抗体和多肽还可以与一种或多种其他药物活性化合物或原理组合使用，即作为组合的治疗方案，其可以引起或可以不引起协同功效。而且，临床医生能够基于以上引用的因素和他的专业判断，选择所述其他化合物或原理，以及合适的组合治疗方案。
具体地，本发明的纳米抗体和多肽可以与其他药物活性化合物或原理组合使用，所述药物活性化合物或原理用于或能够用于预防和/或治疗能够用本发明融合蛋白或构建体预防或治疗的疾病和病症，且作为其结果，可以获得或可以不获得协同功效。
临床医生应该清楚地，可以以关于有关疾病或病症本身已知的任何方式，确定和/或关注按照本发明使用的治疗方案的效力。临床医生还能够，在适当和或个案基础上，改变或更改具体的治疗方案，从而获得理想的治疗效果，以避免、限制或减少不希望的副作用，和/或在一方面获得理想治疗效果和另一方面避免、限制或减少不希望副作用之间获得适当的平衡。
通常，应该遵从所述治疗方案，直到获得理想的治疗效果和/或为了维持理想治疗效果。而且，这可以由临床医生确定。
现通过下列非限制性实验部分和附图的方式，进一步描述本发明，其中：
-图1是三只猕猴血浆中纳米抗体构建体浓度(为微克/毫升为单位)对比时间(以天为单位)的图表，其显示在第0、1、2、4、8和11天时以2mg/kg，向猕猴施用纳米抗体构建体后，纳米抗体构建体的药物动力学。
-图2是两只狒狒血浆中纳米抗体构建体浓度(为微克/毫升为单位)对比时间(以天为单位)的图表，其显示在第0、1、2、4、8、11和14天时以2mg/kg，向狒狒施用纳米抗体构建体后，纳米抗体构建体的药物动力学。
实验部分
实施例1：鉴定血清清蛋白特异性纳米抗体
从被人血清清蛋白免疫的骆驼中鉴定清蛋白特异性纳米抗体。通过使用人、猕猴和小鼠清蛋白的ELISA执行各种纳米抗体的筛选，从而产生一组与不同物种血清清蛋白交叉-反应的纳米抗体。
实施例2：Biacore分析
通过在Biacore 3000仪器中的表面等离振子共振表征纳米抗体与血清清蛋白的结合。来自不同物种的血清清蛋白通过胺偶联共价结合于CM5传感器芯片表面，直到实现250响应单位的增加。使剩余的反应组失活。以一种浓度(1∶20稀释的)评估纳米抗体的结合。以45μl/分钟的流速注射每种纳米抗体4分钟，从而容许其结合于与芯片结合的抗原。以相同的流速，将无纳米抗体的结合缓冲液流过芯片4小时，从而容许结合的纳米抗体自发解离。由对不同纳米抗体获得的sensorgram计算Koff-值。按照Koff-值，为测试的纳米抗体评级，参见下表IV：
表IV：
  种类   人   猕猴   小鼠
  C   PMP6A8   PMP6A8   PMP6B4
  C   PMP6B4   PMP6B4   PMP6A8
  B   PMP6A6   PMP6A6   PMP6A6
  B   PMP6C1   PMP6C1   PMP6C1
  A   PMP6G8   PMP6G8   PMP6G8
  A   PMP6A5   PMP6A5   PMP6A5
  D   PMP6G7   PMP6G7   PMP6G7
在继续的实验中，如上所述地评估结合，只是使用不同浓度的系列。以45μl/分钟的流速注射每种浓度4分钟，从而容许其结合于与芯片结合的抗原。以相同的流速，将无分析物的结合缓冲液送至芯片，从而容许结合的纳米抗体解离。15分钟后，通过注射再生溶液(25mM NaOH)去除剩余的结合分析物。
由对每种分析物不同浓度获得的sensorgram，通过达到平衡时的稳态亲和性计算K消失-值。
表V中总结了结果。对ALB1和ALB2都观察到交叉-反应性。对于人上的ALB2和猕猴TNFα观察到最高亲和性。然而，对于ALB2而言，关于人/猕猴对比小鼠血清清蛋白亲和性差别更显著(因子400)，而对ALB1观察到因子为12的差别。
表V：
Figure A20078004170700411
实施例3：猕猴中的半衰期
在猕猴中研究了包括人源化抗-人血清清蛋白纳米抗体ALB-8(SEQID NO：62)的三价双特异性纳米抗体构建体的药物动力学特征。在第0天，三只猴以2mg/kg接受该构建体。紧随着施药以及在施药后1、2、4、8、11和14天，从所述猕猴中获取血浆样品(如下所示)，并对其进行分析，以确定药物动力学特征。所有猴中的PK特征类似，其具有约10天的计算半衰期。该计算半衰期在猕猴清蛋白推测半衰期的范围内。
在环境适应性研究前，使三只猴适应4周。在第0天，所述猴通过利用留置导管和灌输泵静脉内灌输到右或左臂头静脉(vena cephalica)中，以2mg/kg接受所述构建体。将该剂量作为体积为2ml/kg的缓慢推注(slowbolus)施用5分钟。在每个剂量周期中，在下列时间获取血液样品：
灌输前：
-缓慢推注开始前40分钟
开始灌输后：
-开始缓慢推注后5和30分钟
-开始缓慢推注后1、2、4、和8小时
-给药-后1、2、4、8和11天
从左或右臂头静脉中提取2ml全血，其不用于应用，或从左或右后肢大隐静脉(vena saphena magna)中提取2ml全血，从而在每个取样时间从每只动物获得约800μL肝素钠血浆。
为了PK分析，在4℃，PBS ON中，用2μg/ml NeutrAvidin(Pierce)，以100μl/孔，包被96-孔Maxisorp板。在RT，用PBS，1％酪蛋白，以200μl/孔封闭板2小时。将处于PBS，0.2％酪蛋白中的0.4μg/ml生物素化的抗原，加入到孔中，并在RT下培养1小时。在非-包被的板中稀释血浆样品，并在RT下培养15分钟。然后将100μl每种稀释的血浆样品转移到预先准备的孔中，随后在RT培养2小时。利用稀释1/2000的多克隆兔抗-纳米抗体抗体(由Dabio，德国通过用不同纳米抗体免疫兔定做的)，随后添加抗-兔IgG碱性磷酸酶抗体(稀释了1/2000，西格玛，A1902)和2mg/mlpNPP(对硝苯基磷酸盐)作为底物检测结合的构建体。在405nm处测量吸光率。
通过与稀释在适当浓度的猕猴血浆中的构建体标准曲线相比较，确定血浆样品中构建体的浓度。结果显示在图1中。由该数据，可以看出通常，所有猴表现出约10天最终半衰期的药物动力学特征，这属于推定的猕猴中清蛋白半衰期的范围：纳米抗体构建体的计算最终半衰期(t1/2周期I[d])是8.0-12.5天。
实施例4：狒狒中的半衰期：
在狒狒中，基本以如实施例3中对猕猴研究所述的相同方式测试了实施例3中使用的构建体的药物动力学特征。在第0天，2只狒狒以2mg/kg接受构建体。紧随着施药以及在施药后1、2、4、8、11和14天，从所述狒狒中获取血浆样品(如下所示)，并对其进行分析，以确定该构建体的药物动力学行为。该构建体在狒狒中的药物动力学特征与猕猴中的特征类似，且其特征在于由PK数据计算出约10天的平均半衰期。
在该研究中使用2只雄性未成年狒狒。动物重约10-15kg，并且在使用前至少6周内无疾病。为了容许操作，用约1mg/kg盐酸***镇静狒狒。在第0天，所述狒狒通过利用留置导管和灌输泵静脉内灌输到右或左臂头静脉中，以2mg/kg接受所述构建体。将该剂量作为体积为2ml/kg的缓慢推注施用5分钟。在每个构建体给药周期中，在下列时间获取血液样品：
灌输前：
-缓慢推注开始前40分钟
开始灌输后：
-开始缓慢推注后5和30分钟
-开始缓慢推注后1、2、4、和8小时
-给药-后1、2、4、8和11天
从左或右臂头静脉中提取2ml全血，其不用于应用，或从左或右后肢大隐静脉中提取2ml全血，从而在每个取样时间从每只动物获得约800μL肝素钠血浆。
在4℃，PBS ON中，用2μg/ml NeutrAvidin(Pierce)，以100μl/孔，包被96-孔Maxisorp板。在RT，用PBS，1％酪蛋白，以200μl/孔封闭板2小时。将处于PBS，0.2％酪蛋白中的生物素化的抗原加入到孔中，并在RT下培养1小时。在非-包被的板中稀释血浆样品，并在RT下培养15分钟。然后将100μl每种稀释的血浆样品转移到预先准备的孔中，随后在RT培养2小时。
利用稀释1/2000的多克隆兔抗-纳米抗体抗体(如上)，随后添加抗-兔IgG碱性磷酸酶抗体(稀释了1/2000，西格玛，A1902)和2mg/ml pNPP作为底物检测结合的构建体。在405nm处测量吸光率。通过与稀释在适当浓度的猴血浆中的构建体标准曲线相比较，确定血浆样品中构建体的浓度。
图2给出狒狒中构建体药物动力学的图示。计算的构建体最终半衰期是约11天，这通常与在猕猴中观察到的PK相似。如通过BIAcore确定地，所述构建体中的ALB008构件对狒狒清蛋白具有36nM的亲和力，从而引起纳米抗体TM的最终半衰期从小于1小时延长到约为清蛋白的半衰期，报告所述清蛋白在狒狒中的半衰期是16-18天(Cohen，生物化学(Biochemistry)64，1956)。
使用的术语和表述作为描述而非限制的术语使用，并且不意欲使用所述术语和表述排除所示和所述特征或其部分的任何等价物，承认不同的修改可能属于本发明的范围。
将本文中所述的全部参考文献作为参考引入，特别是为了教导上文中所提到的。
序列表
<110>埃尔斯·拜尔内德
     希尔德·阿迪·皮埃雷特·勒韦兹
     亨德里克斯·雷内瑞斯·雅各布斯·马托伊斯·霍根博姆
     海蒂·玛丽亚·弗洛郎斯
     托尔斯滕·德赖尔
<120>具有长半衰期的血清清蛋白结合蛋白
<130>123855
<160>64
<170>PatentIn version 3.1
<210>1
<211>30
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR1
<400>1
Ala Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Gly Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ala Cys Ala Ala Ser Glu Arg Ile Phe Asp
            20                  25                  30
<210>2
<211>30
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR1
<400>2
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Glu Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ala Cys Ala Ala Ser Glu Arg Ile Trp Asp
            20                  25                  30
<210>3
<211>30
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR1
<400>3
Ala Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Asn
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg
            20                  25                  30
<210>4
<211>30
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR1
<400>4
Ala Val Gln Leu Val Asp Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Phe Gly
            20                  25                  30
<210>5
<211>30
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR1
<400>5
Ala Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg
            20                  25                  30
<210>6
<211>30
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR1
<400>6
Gln Val Gln Leu Ala Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly
            20                  25                  30
<210>7
<211>30
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR1
<400>7
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser
            20                  25                  30
<210>8
<211>5
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR1
<400>8
Leu Asn Leu Met Gly
1               5
<210>9
<211>5
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR1
<400>9
Ile Asn Leu Leu Gly
1               5
<210>10
<211>5
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR1
<400>10
Ser Phe Gly Met Ser
1               5
<210>11
<211>5
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR1
<400>11
Ser Phe Gly Met Ser
1               5
<210>12
<211>5
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR1
<400>12
Ser Phe Gly Met Ser
1               5
<210>13
<211>5
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR1
<400>13
Ser Phe Gly Met Ser
1               5
<210>14
<211>5
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR1
<400>14
Asn Tyr Trp Met Tyr
1               5
<210>15
<211>14
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR2
<400>15
Trp Tyr Arg Gln Gly Pro Gly Asn Glu Arg Glu Leu Val Ala
1               5                   10
<210>16
<211>14
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR2
<400>16
Trp Tyr Arg Gln Gly Pro Gly Asn Glu Arg Glu Leu Val Ala
1               5                   10
<210>17
<211>14
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR2
<400>17
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Pro Glu Trp Val Ser
1               5                   10
<210>18
<211>14
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR2
<400>18
Trp Val Arg Gln Tyr Pro Gly Lys Glu Pro Glu Trp Val Ser
1               5                   10
<210>19
<211>14
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR2
<400>19
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Asp Gln Glu Trp Val Ser
1               5                   10
<210>20
<211>14
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR2
<400>20
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Glu Gly Leu Glu Trp Val Ser
1               5                   10
<210>21
<211>14
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR2
<400>21
Trp Val Arg Val Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Arg Ile Ser
1               5                   10
<210>22
<211>17
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR2
<400>22
Thr Cys Ile Thr Val Gly Asp Ser Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1               5                   10                  15
Gly
<210>23
<211>16
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR2
<400>23
Thr Ile Thr Val Gly Asp Ser Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly
1               5                   10                  15
<210>24
<211>17
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR2
<400>24
Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1               5                   10                  15
Gly
<210>25
<211>17
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR2
<400>25
Ser Ile Asn Gly Arg Gly Asp Asp Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1               5                   10                  15
Gly
<210>26
<211>17
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR2
<400>26
Ala Ile Ser Ala Asp Ser Ser Thr Lys Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1               5                   10                  15
Gly
<210>27
<211>17
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR2
<400>27
Ala Ile Ser Ala Asp Ser Ser Asp Lys Arg Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1               5                   10                  15
Gly
<210>28
<211>18
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR2
<400>28
Arg Asp Ile Ser Thr Gly Gly Gly Tyr Ser Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
1               5                   10                  15
Lys Gly
<210>29
<211>32
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR3
<400>29
Arg Phe Thr Ile Ser Met Asp Tyr Thr Lys Gln Thr Val Tyr Leu His
1               5                   10                  15
Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Gly Leu Tyr Tyr Cys Lys Ile
            20                  25                  30
<210>30
<211>32
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR3
<400>30
Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Asp Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln
1               5                   10                  15
Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Gly Leu Tyr Tyr Cys Lys Ile
            20                  25                  30
<210>31
<211>32
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR3
<400>31
Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Thr Thr Leu Tyr Leu Gln
1               5                   10                  15
Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Ile
            20                  25                  30
<210>32
<211>32
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR3
<400>32
Arg Phe Ser Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln
1               5                   10                  15
Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Glu Tyr Tyr Cys Thr Ile
            20                  25                  30
<210>33
<211>32
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR3
<400>33
Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Met Leu Tyr Leu Glu
1               5                   10                  15
Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Ile
            20                  25                  30
<210>34
<211>32
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR3
<400>34
Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Met Leu Tyr Leu Glu
1               5                   10                  15
Met Asn Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Ile
            20                  25                  30
<210>35
<211>32
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR3
<400>35
Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln
1               5                   10                  15
Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys Ala Lys
            20                  25                  30
<210>36
<211>8
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR3
<400>36
Arg Arg Thr Trp His Ser Glu Leu
1               5
<210>37
<211>8
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR3
<400>37
Arg Arg Thr Trp His Ser Glu Leu
1               5
<210>38
<211>6
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR3
<400>38
Gly Gly Ser Leu Ser Arg
1               5
<210>39
<211>7
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR3
<400>39
Gly Arg Ser Val Ser Arg Ser
1               5
<210>40
<211>5
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR3
<400>40
Gly Arg Gly Ser Pro
1               5
<210>41
<211>5
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR3
<400>41
Gly Arg Gly Ser Pro
1               5
<210>42
<211>13
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>CDR3
<400>42
Asp Arg Glu Ala Gln Val Asp Thr Leu Asp Phe Asp Tyr
1               5                   10
<210>43
<211>11
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR4
<400>43
Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
1               5                   10
<210>44
<211>11
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR4
<400>44
Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
1               5                   10
<210>45
<211>11
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR4
<400>45
Ser Ser Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
1               5                   10
<210>46
<211>11
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR4
<400>46
Arg Thr Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
1               5                   10
<210>47
<211>11
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR4
<400>47
Ser Ser Pro Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
1               5                   10
<210>48
<211>11
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR4
<400>48
Ala Ser Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
1               5                   10
<210>49
<211>11
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>FR4
<400>49
Arg Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
1               5                   10
<210>50
<211>117
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>纳米抗体序列
<400>50
Ala Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Gly Gly Gly
1               5                   10                 15
Ser Leu Arg Leu Ala Cys Ala Ala Ser Glu Arg Ile Phe Asp Leu Asn
            20                  25                  30
Leu Met Gly Trp Tyr Arg Gln Gly Pro Gly Asn Glu Arg Glu Leu Val
        35                  40                  45
Ala Thr Cys Ile Thr Val Gly Asp Ser Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Met Asp Tyr Thr Lys Gln Thr Val Tyr
65                  707                  5                  80
Leu His Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Gly Leu Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Lys Ile Arg Arg Thr Trp His Ser Glu Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln
            100                 105                 110
Val Thr Val Ser Ser
        115
<210>51
<211>116
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>纳米抗体序列
<400>51
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Glu Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ala Cys Ala Ala Ser Glu Arg Ile Trp Asp Ile Asn
            20                  25                  30
Leu Leu Gly Trp Tyr Arg Gln Gly Pro Gly Asn Glu Arg Glu Leu Val
        35                  40                  45
Ala Thr Ile Thr Val Gly Asp Ser Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Asp Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Gly Leu Tyr Tyr Cys Lys
                85                  90                  95
Ile Arg Arg Thr Trp His Ser Glu Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val
            100                 105                 110
Thr Val Ser Ser
        115
<210>52
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>纳米抗体序列
<400>52
Ala Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Asn
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
            20                  25                  30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Pro Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Thr Thr Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Gln Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>53
<211>116
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>纳米抗体序列
<400>53
Ala Val Gln Leu Val Asp Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Phe Gly Ser Phe
            20                  25                  30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Tyr Pro Gly Lys Glu Pro Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Ser Ile Asn Gly Arg Gly Asp Asp Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Ser Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Glu Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Thr Ile Gly Arg Ser Val Ser Arg Ser Arg Thr Gln Gly Thr Gln Val
            100                 105                 110
Thr Val Ser Ser
        115
<210>54
<211>114
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>纳米抗体序列
<400>54
Ala Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
            20                  25                  30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Asp Gln Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Ala Ile Ser Ala Asp Ser Ser Thr Lys Asn Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Met Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Glu Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Val Ile Gly Arg Gly Ser Pro Ser Ser Pro Gly Thr Gln Val Thr Val
            100                 105                 110
Ser Ser
<210>55
<211>114
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>纳米抗体序列
<400>55
Gln Val Gln Leu Ala Glu Ser Gly Cly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Ser Phe
            20                  25                  30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Glu Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Ala Ile Ser Ala Asp Ser Ser Asp Lys Arg Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Met Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Glu Met Asn Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Val Ile Gly Arg Gly Ser Pro Ala Ser Gln Gly Thr Gln Val Thr Val
            100                 105                 110
Ser Ser
<210>56
<211>123
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>纳米抗体序列
<400>56
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
            20                  25                  30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Val Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Arg Ile
        35                  40                  45
Ser Arg Asp Ile Ser Thr Gly Gly Gly Tyr Ser Tyr Tyr Ala Asp Ser
    50                  55                  60
Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu
65                  70                  75                  80
Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr
                85                  90                  95
Cys Ala Lys Asp Arg Glu Ala Gln Val Asp Thr Leu Asp Phe Asp Tyr
            100                 105                 110
Arg Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
        115                 120
<210>57
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>纳米抗体序列
<400>57
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
            20                  25                  30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Pro Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ash Ala Lys Thr Thr Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Gln Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>58
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>纳米抗体序列
<400>58
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe
            20                  25                  30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Pro Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thy Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Thr Thr Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Gln Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>59
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>纳米抗体序列
<400>59
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
            20                  25                  30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Thr Thr Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Gln Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>60
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>纳米抗体序列
<400>60
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Asn
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
            20                  25                  30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Thr Thr Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>61
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>纳米抗体序列
<400>61
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Asn
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
            20                  25                  30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Thr Thr Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>62
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>纳米抗体序列
<400>62
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Asn
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe
            20                  25                  30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Thr Thr Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Ash Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                  110
Val Ser Ser
        115
<210>63
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>纳米抗体序列
<400>63
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Asn
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe
            20                  25                  30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Ash Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>64
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>纳米抗体序列
<400>64
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Asn
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe
            20                  25                  30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115

Claims (48)

1.以这样的方式与血清清蛋白结合或另外关联的氨基酸序列，所述方式是当所述氨基酸序列在灵长类动物中与血清清蛋白分子结合或另外关联时，所述氨基酸序列表现出血清半衰期是所述灵长类动物中血清清蛋白天然血清半衰期的至少50％。
2.按照权利要求1的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列表现出血清半衰期是所述灵长类动物中血清清蛋白天然血清半衰期的至少60％。
3.按照权利要求1的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列表现出血清半衰期是所述灵长类动物中血清清蛋白天然血清半衰期的至少80％。
4.按照权利要求1的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列表现出血清半衰期是所述灵长类动物中血清清蛋白天然血清半衰期的至少90％。
5.按照权利要求1-4中任一项的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列表现出血清半衰期是至少4天。
6.按照权利要求5的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列表现出血清半衰期是至少7天。
7.按照权利要求5或6的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列表现出血清半衰期是至少9天。
8.按照权利要求1-7中任一项的氨基酸序列，所述氨基酸序列能够以这样的方式与血清清蛋白结合或另外关联，所述方式是当所述氨基酸序列与血清清蛋白分子结合或另外关联时，不(显著)减少或抑制所述血清清蛋白分子与FcRn的结合。
9.按照权利要求1-8中任一项的氨基酸序列，所述氨基酸序列能够以这样的方式与血清清蛋白结合或另外关联，所述方式是当所述氨基酸序列与血清清蛋白分子结合或另外关联时，不(显著)缩短所述血清清蛋白分子的半衰期。
10.按照权利要求1-9中任一项的氨基酸序列，所述氨基酸序列能够结合于不参与血清清蛋白和FcRn的结合的血清清蛋白上的氨基酸残基。
11.按照权利要求1-10中任一项的氨基酸序列，所述氨基酸序列能够结合于不形成血清清蛋白结构域III部分的血清清蛋白上的氨基酸残基。
12.按照权利要求1-11中任一项的氨基酸序列，所述氨基酸序列是免疫球蛋白序列或其片段。
13.按照权利要求12的氨基酸序列，所述氨基酸序列是免疫球蛋白可变结构域序列或其片段。
14.按照权利要求13的氨基酸序列，所述氨基酸序列是VH-、VL-或VHH-序列或其片段。
15.按照权利要求11-14中任一项的氨基酸序列，其中所述免疫球蛋白序列是结构域抗体、“dAb”、单结构域抗体或纳米抗体，或它们任一项的片段。
16.按照权利要求1-15中任一项的氨基酸序列，所述氨基酸序列是完全人、人源化、骆驼、骆驼化的人序列或人源化的骆驼序列。
17.按照权利要求1-16中任一项的氨基酸序列，所述氨基酸序列包括4种框架区(分别地，FR1-FR4)和3种互补决定区(分别地，CDR1-CDR3)，其中：
a)CDR1是这样的氨基酸序列，其选自由SEQ ID NOS：8-14的CDR1序列组成的组和/或选自由与所述SEQ ID NOS：8-14的CDR1序列之一具有2个或仅1个“氨基酸差别”(如本文中所定义)的氨基酸序列组成的组；
和/或其中：
b)CDR2是这样的氨基酸序列，其选自由SEQ ID NOS：22-29的CDR2序列组成的组；或选自由与所述SEQ ID NOS：22-29的CDR2序列之一具有至少80％，优选地至少90％，更优选地至少95％，甚至更优选地至少99％序列同一性(如本文中定义地)的氨基酸序列组成的组；和/或选自由与所述SEQ ID NOS：22-29的CDR2序列之一具有2个或仅1个“氨基酸差别”(如本文中定义地)的氨基酸序列组成的组；
和/或其中：
c1)CDR3是选自由一下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NOS：42的CDR3序列；与所述SEQ ID NOS：42的CDR3序列具有至少80％，优选地至少90％，更优选地至少95％，甚至更优选地至少99％序列同一性(如本文中定义地)的氨基酸序列；和与所述SEQ ID NOS：42的CDR3序列具有3个、2个或仅1个“氨基酸差别”的氨基酸序列；
或备选地，其中：
c2)CDR3是这样的氨基酸序列，其选自由SEQ ID NOS：36-41的CDR3序列组成的组和/或选自由与所述SEQ ID NOS：36-41的CDR1序列之一具有2个或仅1个“氨基酸差别”(如本文中定义地)的氨基酸序列组成的组。
18.按照权利要求17的氨基酸序列，其是(单)结构域抗体或纳米抗体。
19.按照权利要求17或18的基酸序列，所述氨基酸序列与SEQ IDNO′s 50-64氨基酸序列中至少之一具有至少80％，优选地至少90％，更优选地至少95％，甚至更优选地至少99％的序列同一性(如本文中定义地)。
20.按照权利要求19的氨基酸序列，所述氨基酸序列选自由PMP6A6(ALB1；SEQ ID NO：52)及其人源化变体，优选地，ALB 3(SEQ ID NO：57)；ALB 4(SEQ ID NO：58)；ALB 5(SEQ ID NO：59)；ALB 6(SEQ ID NO：60)；ALB 7(SEQ ID NO：61)；ALB 8(SEQ ID NO：62)；ALB 9(SEQ ID NO：63)；或ALB 10(SEQ ID NO：64)组成的组。
21.按照权利要求20的氨基酸序列，所述氨基酸序列是ALB 8(SEQID NO：62)。
22.包括按照权利要求1-21中任一项氨基酸序列的化合物。
23.按照权利要求22的化合物，其中所述化合物还包括至少一种治疗部分。
24.按照权利要求23的化合物，其中所述治疗部分选自由小分子、多核苷酸、多肽或肽组成的组中的至少一种。
25.按照权利要求22-24中任一项的化合物，其是融合蛋白或构建体。
26.按照权利要求25的化合物，其中在所述融合蛋白或构建体中，按照权利要求1-21中任一项的氨基酸序列与所述至少一种治疗部分直接相连，或通过连接体或间隔区与所述至少一种治疗部分相连。
27.按照权利要求22-26中任一项的化合物，其中所述治疗部分包括免疫球蛋白序列或其片段。
28.按照权利要求27的化合物，其中所述治疗部分包括(单)结构域抗体或纳米抗体。
29.多价和多特异性纳米抗体构建体，其包括至少一种本身是纳米抗体的按照权利要求1-21中任一项的氨基酸序列和至少一种另外的纳米抗体。
30.按照权利要求29的多价和多特异性纳米抗体构建体，其中所述本身是纳米抗体的按照权利要求1-21中任一项的氨基酸序列与所述至少一种另外的纳米抗体直接相连，或通过连接体或间隔区与所述至少一种另外的纳米抗体相连。
31.按照权利要求30的多价和多特异性纳米抗体构建体，其中所述本身是纳米抗体的按照权利要求1-21中任一项的氨基酸序列通过连接体或间隔区与所述至少一种另外的纳米抗体相连，且其中所述连接体是氨基酸序列。
32.核苷酸序列或核酸，其编码按照权利要求1-21中任一项的氨基酸序列、或按照权利要求22-28中任一项化合物的氨基酸序列、或权利要求29-31中任一项的多价和多特异性纳米抗体。
33.宿主或宿主细胞，其包含按照权利要求32的核苷酸序列或核酸，和/或表达(或能够表达)按照权利要求1-21中任一项的氨基酸序列、或按照权利要求22-28中任一项化合物的氨基酸序列、或权利要求29-31中任一项的多价和多特异性纳米抗体。
34.用于制备按照权利要求1-21中任一项的氨基酸序列、或按照权利要求22-28中任一项化合物的氨基酸序列、或权利要求29-31中任一项的多价和多特异性纳米抗体的方法，所述方法包括在这样的条件下培养或维持按照权利要求33的宿主细胞，在所述条件下所述宿主细胞产生或表达按照权利要求1-21中任一项的氨基酸序列、或按照权利要求22-28中任一项化合物的氨基酸序列、或权利要求29-31中任一项的多价和多特异性纳米抗体，并任选地还包括分离由此产生的按照权利要求1-20中任一项的氨基酸序列、或按照权利要求22-28中任一项化合物的氨基酸序列、或权利要求29-31中任一项的多价和多特异性纳米抗体。
35.药物组合物，包括选自由按照权利要求1-21中任一项的氨基酸序列、或按照权利要求22-28中任一项的化合物、或权利要求29-31中任一项的多价和多特异性纳米抗体组成的组中的一种或多种，其中所述药物组合物适合于对灵长类动物，以在所述灵长类动物中血清清蛋白天然半衰期至少50％的时间间隔施用。
36.按照权利要求35的药物组合物，还包括至少一种药用载体、稀释剂或赋形剂。
37.按照权利要求1-21中任一项的氨基酸序列、或按照权利要求22-28中任一项的化合物、或权利要求29-31中任一项的多价和多特异性纳米抗体在制备制备用于对灵长类动物施用的药物中的用途，其中所述药物以在所述灵长类动物中血清清蛋白天然半衰期至少50％的时间间隔被施用。
38.按照权利要求37的用途，其中所述灵长类动物是人。
39.按照权利要求38的用途，其中所述药物以至少7天的时间间隔被施用。
40.治疗方法，包括将按照权利要求1-21中任一项的氨基酸序列、按照权利要求22-28中任一项的化合物、或权利要求29-31中任一项的多价和多特异性纳米抗体施用于需要其的灵长类动物，其中所述施药以在所述灵长类动物中血清清蛋白天然半衰期至少50％的频率发生。
41.按照权利要求40的方法，其中所述灵长类动物是人。
42.按照权利要求41的方法，其中以至少7天的时间间隔施用所述药物。
43.用于延长或增加治疗剂血清半衰期的方法，所述方法包括使所述治疗剂与按照权利要求1-21中任一项的氨基酸序列、按照权利要求22-28中任一项的化合物、或权利要求29-31中任一项的多价和多特异性纳米抗体相接触，以使所述治疗剂与所述氨基酸序列、化合物、或多价和多特异性纳米抗体结合或另外关联。
44.权利要求43的方法，其中所述治疗剂是生物学治疗剂。
45.权利要求44的方法，其中所述生物学治疗剂是肽或多肽，且其中，所述接触所述治疗剂的步骤包括通过使所述肽或多肽与所述氨基酸序列、化合物、或多价和多特异性纳米抗体相连接而制备融合蛋白。
46.权利要求43-45中任一项的方法，还包括在所述治疗剂与所述氨基酸序列、化合物、或多价和多特异性纳米抗体结合或另外关联后，向灵长类动物施用所述治疗剂。
47.权利要求46的方法，其中所述治疗剂在所述灵长类动物中的血清半衰期是治疗剂本身半衰期的至少1.5倍。
48.权利要求46的方法，其中所述治疗剂在所述灵长类动物中的血清半衰期是与所述治疗剂本身的半衰期相比增加至少1小时。
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Cited By (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104672329A (zh) * 2015-02-16 2015-06-03 杨艳坤 一种蛋白质
CN109641047A (zh) * 2016-05-20 2019-04-16 哈普恩治疗公司 单结构域血清白蛋白结合蛋白质
CN110191896A (zh) * 2017-01-17 2019-08-30 埃博灵克斯股份有限公司 改进的血清白蛋白结合物
CN110437321A (zh) * 2010-07-09 2019-11-12 阿菲博迪公司 多肽
CN111108126A (zh) * 2017-07-19 2020-05-05 非营利性组织佛兰芒综合大学生物技术研究所 血清白蛋白结合剂
US10730954B2 (en) 2017-05-12 2020-08-04 Harpoon Therapeutics, Inc. MSLN targeting trispecific proteins and methods of use
US10815311B2 (en) 2018-09-25 2020-10-27 Harpoon Therapeutics, Inc. DLL3 binding proteins and methods of use
US10844134B2 (en) 2016-11-23 2020-11-24 Harpoon Therapeutics, Inc. PSMA targeting trispecific proteins and methods of use
US10849973B2 (en) 2016-11-23 2020-12-01 Harpoon Therapeutics, Inc. Prostate specific membrane antigen binding protein
US10927180B2 (en) 2017-10-13 2021-02-23 Harpoon Therapeutics, Inc. B cell maturation antigen binding proteins
US10954311B2 (en) 2015-05-21 2021-03-23 Harpoon Therapeutics, Inc. Trispecific binding proteins and methods of use
US11136403B2 (en) 2017-10-13 2021-10-05 Harpoon Therapeutics, Inc. Trispecific proteins and methods of use
US11180563B2 (en) 2020-02-21 2021-11-23 Harpoon Therapeutics, Inc. FLT3 binding proteins and methods of use
US11535668B2 (en) 2017-02-28 2022-12-27 Harpoon Therapeutics, Inc. Inducible monovalent antigen binding protein
US11607453B2 (en) 2017-05-12 2023-03-21 Harpoon Therapeutics, Inc. Mesothelin binding proteins
US11623958B2 (en) 2016-05-20 2023-04-11 Harpoon Therapeutics, Inc. Single chain variable fragment CD3 binding proteins
CN116023487A (zh) * 2022-07-11 2023-04-28 南方医科大学第三附属医院（广东省骨科研究院） 与多种血清白蛋白结合的纳米抗体及其制备方法与应用

Families Citing this family (87)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9512236B2 (en) 2006-12-19 2016-12-06 Ablynx N.V. Amino acid sequences directed against GPCRS and polypeptides comprising the same for the treatment of GPCR-related diseases and disorders
US9212226B2 (en) 2008-05-16 2015-12-15 Ablynx N.V. Amino acid sequences directed against CXCR4 and other GPCRs and compounds comprising the same
US8444976B2 (en) 2008-07-02 2013-05-21 Argen-X B.V. Antigen binding polypeptides
WO2010100135A1 (en) 2009-03-05 2010-09-10 Ablynx N.V. Novel antigen binding dimer-complexes, methods of making/avoiding and uses thereof
US8748581B2 (en) 2009-04-10 2014-06-10 Ablynx N.V. Anti-IL-6R polypeptides and pharmaceutical compositions thereof
US10618964B2 (en) 2009-04-10 2020-04-14 Ablynx N.V. Nanobody against IL-6R
SG176095A1 (en) 2009-06-05 2011-12-29 Ablynx Nv Monovalent, bivalent and trivalent anti human respiratory syncytial virus (hrsv) nanobody constructs for the prevention and/or treatment of respiratory tract infections
EP2473527B1 (en) 2009-09-03 2016-11-30 Ablynx N.V. Stable formulations of polypeptides and uses thereof
EP2507262A1 (en) 2009-11-30 2012-10-10 Ablynx N.V. Improved amino acid sequences directed against human respiratory syncytial virus (hrsv) and polypeptides comprising the same for the prevention and/or treatment of respiratory tract infections
EP2513145B1 (en) 2009-12-14 2018-01-24 Ablynx N.V. Single variable domain antibodies against ox40l, constructs and therapeutic use
WO2011083140A1 (en) 2010-01-08 2011-07-14 Ablynx Nv Immunoglobulin single variable domain directed against human cxcr4
US9120855B2 (en) 2010-02-10 2015-09-01 Novartis Ag Biologic compounds directed against death receptor 5
CN105380904A (zh) 2010-02-11 2016-03-09 埃博灵克斯股份有限公司 用于制备气雾剂的方法和组合物
US8937164B2 (en) 2010-03-26 2015-01-20 Ablynx N.V. Biological materials related to CXCR7
US20130109842A1 (en) 2010-04-30 2013-05-02 Ablynx N.V. Amino acid sequences of nanobodies directed against p19 subunit of the heterodimeric cytokine il-23
EP3546483A1 (en) 2010-05-20 2019-10-02 Ablynx N.V. Biological materials related to her3
KR20230156435A (ko) * 2010-07-09 2023-11-14 바이오버라티브 테라퓨틱스 인크. 인자 iｘ 폴리펩티드 및 이들의 사용 방법
EP2621953B1 (en) 2010-09-30 2017-04-05 Ablynx N.V. Biological materials related to c-met
WO2012175400A1 (en) 2011-06-23 2012-12-27 Ablynx Nv Serum albumin binding proteins
US11644471B2 (en) 2010-09-30 2023-05-09 Ablynx N.V. Techniques for predicting, detecting and reducing aspecific protein interference in assays involving immunoglobulin single variable domains
EP2638068B1 (en) 2010-11-08 2018-12-26 Novartis AG Cxcr2 binding polypeptides
ES2758352T3 (es) 2010-11-26 2020-05-05 Molecular Partners Ag Proteínas de repetición diseñadas que se une a la seroalbúmina
EP2691418A1 (en) 2011-03-28 2014-02-05 Ablynx N.V. Bispecific anti-cxcr7 immunoglobulin single variable domains
US9527925B2 (en) 2011-04-01 2016-12-27 Boehringer Ingelheim International Gmbh Bispecific binding molecules binding to VEGF and ANG2
US20130078247A1 (en) * 2011-04-01 2013-03-28 Boehringer Ingelheim International Gmbh Bispecific binding molecules binding to dii4 and ang2
UA117218C2 (uk) 2011-05-05 2018-07-10 Мерк Патент Гмбх Поліпептид, спрямований проти il-17a, il-17f та/або il17-a/f
CN108329391A (zh) 2011-05-27 2018-07-27 埃博灵克斯股份有限公司 使用rankl结合肽抑制骨质吸收
JP2014525736A (ja) * 2011-06-23 2014-10-02 アブリンクス エン．ヴェー． ＩｇＥに対する免疫グロブリン単一可変ドメイン
US20180009888A9 (en) 2011-06-23 2018-01-11 Ablynx N.V. Techniques for predicting, detecting and reducing aspecific protein interference in assays involving immunoglobulin single variable domains
US9346884B2 (en) 2011-09-30 2016-05-24 Ablynx N.V. Biological materials related to c-Met
EP2747783B1 (en) * 2011-09-30 2017-06-14 Ablynx N.V. Biological materials related to c-met
MX349192B (es) 2012-02-27 2017-07-18 Boehringer Ingelheim Int Polipeptidos de union a cx3cr1.
WO2013138338A2 (en) 2012-03-12 2013-09-19 Massachusetts Institute Of Technology Methods for treating tissue damage associated with ischemia with apoliporotein d
WO2013167883A1 (en) 2012-05-07 2013-11-14 The University Court Of The University Of Aberdeen Single domain binding molecule
US9328174B2 (en) 2012-05-09 2016-05-03 Novartis Ag Chemokine receptor binding polypeptides
WO2013177187A2 (en) 2012-05-22 2013-11-28 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with extended-pk il-2 and therapeutic agents
WO2014111550A1 (en) 2013-01-17 2014-07-24 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Modified anti-serum albumin binding proteins
CN105531370A (zh) 2013-04-23 2016-04-27 阿伯丁大学理事会 治疗靶向特异性vnar结构域与icosl的分离
NL2013661B1 (en) 2014-10-21 2016-10-05 Ablynx Nv KV1.3 Binding immunoglobulins.
US20170216403A1 (en) 2014-08-12 2017-08-03 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with il-2, a therapeutic antibody, and an immune checkpoint blocker
DK3180018T3 (da) 2014-08-12 2019-10-28 Massachusetts Inst Technology Synergistisk tumorbehandling med IL-2 og integrinbindende Fc-fusionsprotein
WO2016100803A2 (en) 2014-12-19 2016-06-23 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating tissue calcification
CN114874313A (zh) * 2015-11-16 2022-08-09 Ubi蛋白公司 用于延长蛋白质半衰期的方法
SI3383425T1 (sl) 2015-12-04 2020-11-30 Boehringer Ingelheim International Gmbh Biparatopični polipeptidi, ki antagonizirajo WNT-signaliziranje v tumorskih celicah
KR102365977B1 (ko) 2016-05-20 2022-02-22 하푼 테라퓨틱스, 인크. 단일 쇄 가변 단편 cd3 결합 단백질
US11364284B2 (en) 2016-06-16 2022-06-21 Inozyme Pharma, Inc. Methods of treating myointimal proliferation
CA3043515A1 (en) 2016-11-16 2018-05-24 Ablynx Nv T cell recruiting polypeptides capable of binding cd123 and tcr alpha/beta
IL310340A (en) * 2016-12-07 2024-03-01 Ablynx Nv Immunoglobulin sites with a single variable enhance serum albumin binding
AU2018207303A1 (en) 2017-01-10 2019-07-25 xCella Biosciences, Inc. Combination tumor treatment with an integrin-binding-Fc fusion protein and immune modulator
US10350266B2 (en) 2017-01-10 2019-07-16 Nodus Therapeutics, Inc. Method of treating cancer with a multiple integrin binding Fc fusion protein
US11897944B2 (en) * 2017-01-17 2024-02-13 Ablynx N.V. Immunoglobulin single variable domain (ISVD) capable of binding to serum albumin
MY200744A (en) 2017-05-31 2024-01-13 Boehringer Ingelheim Int Gmbh Polypeptides antagonizing wnt signaling in tumor cells
US11485781B2 (en) 2017-08-17 2022-11-01 Massachusetts Institute Of Technology Multiple specificity binders of CXC chemokines
CA3096821A1 (en) 2017-09-27 2019-04-04 Inozyme Pharma, Inc. Methods of improving cardiovascular function and treating cardiovascular disease using a recombinant ectonucleotide pyrophosphatase phosphodiesterase (npp1)
CA3089784A1 (en) 2018-02-12 2019-08-15 Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh Treatment using cytokine encoding rna
KR102206762B1 (ko) * 2018-03-19 2021-01-25 울산대학교 산학협력단 알부민 결합 나노바디가 융합된 wkymvm 펩티드의 수용성 과발현 및 정제 방법
CA3106858A1 (en) 2018-07-24 2020-01-30 Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh Il2 agonists
WO2020154032A1 (en) 2019-01-23 2020-07-30 Massachusetts Institute Of Technology Combination immunotherapy dosing regimen for immune checkpoint blockade
MX2021009506A (es) 2019-02-08 2021-09-08 Biontech Cell & Gene Therapies Gmbh Tratamiento que implica celulas t modificadas con car y citoquinas.
KR20210143759A (ko) 2019-03-18 2021-11-29 비온테크 쎌 & 제네 테라피스 게엠베하 면역 작용 세포의 특이적 활성화를 위한 인터루킨-2 수용체 (il2r) 및 인터루킨-2 (il2) 변이체
WO2020200481A1 (en) 2019-04-05 2020-10-08 Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh Treatment involving interleukin-2 (il2) and interferon (ifn)
TW202115105A (zh) 2019-06-24 2021-04-16 德商拜恩迪克Ｒｎａ製藥有限公司 Ｉｌ２激動劑
WO2021058091A1 (en) 2019-09-24 2021-04-01 Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh Treatment involving therapeutic antibody and interleukin-2 (il2)
WO2021129927A1 (en) 2019-12-23 2021-07-01 Biontech Cell & Gene Therapies Gmbh Treatment with immune effector cells engineered to express an antigen receptor
WO2021129945A1 (en) 2019-12-27 2021-07-01 Biontech Cell & Gene Therapies Gmbh In vitro and in vivo gene delivery to immune effector cells using nanoparticles functionalized with designed ankyrin repeat proteins (darpins)
CA3171370A1 (en) 2020-03-16 2021-09-23 Ugur Sahin Antigen-specific t cell receptors and t cell epitopes
WO2021197589A1 (en) 2020-03-31 2021-10-07 BioNTech SE Treatment involving non-immunogenic rna for antigen vaccination
EP4237438A1 (en) * 2020-10-27 2023-09-06 Beijing QL Biopharmaceutical Co., Ltd. Fusion proteins of gdf15 and use thereof
WO2022135667A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Therapeutic rna for treating cancer
TW202245808A (zh) 2020-12-21 2022-12-01 德商拜恩迪克公司 用於治療癌症之治療性ｒｎａ
WO2022135666A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Treatment schedule for cytokine proteins
WO2022218891A2 (en) 2021-04-12 2022-10-20 BioNTech SE Rna compositions comprising a buffer substance and methods for preparing, storing and using the same
BR112023021654A2 (pt) 2021-04-20 2023-12-26 BioNTech SE Vacina contra vírus
WO2023051926A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 BioNTech SE Treatment involving non-immunogenic rna for antigen vaccination and pd-1 axis binding antagonists
CA3235180A1 (en) 2021-10-21 2023-04-27 BioNTech SE Coronavirus vaccine
EP4238577A3 (en) 2021-10-22 2023-12-06 BioNTech SE Compositions for administration of different doses of rna
WO2023083434A1 (en) 2021-11-09 2023-05-19 BioNTech SE Rna encoding peptidoglycan hydrolase and use thereof for treating bacterial infection
CN113912730B (zh) * 2021-12-14 2022-03-04 北京科诺信诚科技有限公司 缓释的抗FcRn抗体或抗原结合片段及其应用
WO2023126053A1 (en) 2021-12-28 2023-07-06 BioNTech SE Lipid-based formulations for administration of rna
WO2023165681A1 (en) 2022-03-01 2023-09-07 BioNTech SE Rna lipid nanoparticles (lnps) comprising a polyoxazoline and/or polyoxazine polymer
WO2023193892A1 (en) 2022-04-05 2023-10-12 BioNTech SE Nucleic acid compositions comprising an inorganic polyphosphate and methods for preparing, storing and using the same
US11878055B1 (en) 2022-06-26 2024-01-23 BioNTech SE Coronavirus vaccine
WO2024017479A1 (en) 2022-07-21 2024-01-25 BioNTech SE Multifunctional cells transiently expressing an immune receptor and one or more cytokines, their use and methods for their production
WO2024028325A1 (en) 2022-08-01 2024-02-08 BioNTech SE Nucleic acid compositions comprising amphiphilic oligo ethylene glycol (oeg)-conjugated compounds and methods of using such compounds and compositions
WO2024027910A1 (en) 2022-08-03 2024-02-08 BioNTech SE Rna for preventing or treating tuberculosis
WO2024028445A1 (en) 2022-08-03 2024-02-08 BioNTech SE Rna for preventing or treating tuberculosis
WO2024083843A1 (en) 2022-10-18 2024-04-25 Confo Therapeutics N.V. Amino acid sequences directed against the melanocortin 4 receptor and polypeptides comprising the same for the treatment of mc4r-related diseases and disorders

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004041865A2 (en) * 2002-11-08 2004-05-21 Ablynx N.V. Stabilized single domain antibodies
US7432238B2 (en) * 2004-04-16 2008-10-07 Stc.Unm Human Kunitz-type inhibitor with enhanced antifibrinolytic activity
AU2005293752A1 (en) * 2004-10-13 2006-04-20 Ablynx N.V. Single domain camelide anti-amyloid beta antibodies and polypeptides comprising the same for the treatment and diagnosis of degenarative neural diseases such as Alzheimer's disease
EP1888640B1 (en) * 2005-05-18 2012-03-14 Ablynx N.V. Improved nanobodies against tumor necrosis factor-alpha

Cited By (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110437320B (zh) * 2010-07-09 2023-10-20 阿菲博迪公司 多肽
CN110437321A (zh) * 2010-07-09 2019-11-12 阿菲博迪公司 多肽
CN110437320A (zh) * 2010-07-09 2019-11-12 阿菲博迪公司 多肽
CN104672329B (zh) * 2015-02-16 2019-08-06 苏州智晟生物科技有限责任公司 一种蛋白质
CN104672329A (zh) * 2015-02-16 2015-06-03 杨艳坤 一种蛋白质
US10954311B2 (en) 2015-05-21 2021-03-23 Harpoon Therapeutics, Inc. Trispecific binding proteins and methods of use
US11623958B2 (en) 2016-05-20 2023-04-11 Harpoon Therapeutics, Inc. Single chain variable fragment CD3 binding proteins
CN109641047A (zh) * 2016-05-20 2019-04-16 哈普恩治疗公司 单结构域血清白蛋白结合蛋白质
US11453716B2 (en) 2016-05-20 2022-09-27 Harpoon Therapeutics, Inc. Single domain serum albumin binding protein
US10844134B2 (en) 2016-11-23 2020-11-24 Harpoon Therapeutics, Inc. PSMA targeting trispecific proteins and methods of use
US10849973B2 (en) 2016-11-23 2020-12-01 Harpoon Therapeutics, Inc. Prostate specific membrane antigen binding protein
CN110191896A (zh) * 2017-01-17 2019-08-30 埃博灵克斯股份有限公司 改进的血清白蛋白结合物
CN110191896B (zh) * 2017-01-17 2023-09-29 埃博灵克斯股份有限公司 改进的血清白蛋白结合物
US11535668B2 (en) 2017-02-28 2022-12-27 Harpoon Therapeutics, Inc. Inducible monovalent antigen binding protein
US10730954B2 (en) 2017-05-12 2020-08-04 Harpoon Therapeutics, Inc. MSLN targeting trispecific proteins and methods of use
US11607453B2 (en) 2017-05-12 2023-03-21 Harpoon Therapeutics, Inc. Mesothelin binding proteins
CN111108126B (zh) * 2017-07-19 2024-04-26 非营利性组织佛兰芒综合大学生物技术研究所 血清白蛋白结合剂
CN111108126A (zh) * 2017-07-19 2020-05-05 非营利性组织佛兰芒综合大学生物技术研究所 血清白蛋白结合剂
US10927180B2 (en) 2017-10-13 2021-02-23 Harpoon Therapeutics, Inc. B cell maturation antigen binding proteins
US11136403B2 (en) 2017-10-13 2021-10-05 Harpoon Therapeutics, Inc. Trispecific proteins and methods of use
US11976125B2 (en) 2017-10-13 2024-05-07 Harpoon Therapeutics, Inc. B cell maturation antigen binding proteins
US11807692B2 (en) 2018-09-25 2023-11-07 Harpoon Therapeutics, Inc. DLL3 binding proteins and methods of use
US10815311B2 (en) 2018-09-25 2020-10-27 Harpoon Therapeutics, Inc. DLL3 binding proteins and methods of use
US11180563B2 (en) 2020-02-21 2021-11-23 Harpoon Therapeutics, Inc. FLT3 binding proteins and methods of use
CN116023487A (zh) * 2022-07-11 2023-04-28 南方医科大学第三附属医院（广东省骨科研究院） 与多种血清白蛋白结合的纳米抗体及其制备方法与应用
CN116023487B (zh) * 2022-07-11 2024-03-26 南方医科大学第三附属医院（广东省骨科研究院） 与多种血清白蛋白结合的纳米抗体及其制备方法与应用

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