CN101607059B - 一种中药组合物在制备治疗和预防辐射线损伤的药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种中药组合物在制备治疗和预防辐射线损伤的药物中的应用。本发明药物组合物通过诸药合用，共同达到提高机体免疫功能，健脾补肾的作用，通过清热解毒、补益气血达到标本兼治。

Description

一种中药组合物在制备治疗和预防辐射线损伤的药物中的应用

技术领域

本发明涉及到一种中药组合物在制备治疗和预防辐射线损伤的药物中的应用，属于中草药制剂技术领域。

背景技术

电离辐射(如X线、中子、质子、α或β粒子、γ射线)可直接或通过继发反应损害组织。大剂量辐射可在数天内产生可见的身体效应。小剂量所致的DNA变化可使被照射者产生慢性疾病，使他们的后代发生遗传学缺陷.损伤程度与细胞的愈合或死亡之间的关系十分复杂。

有害的电离辐射源包括用于诊断和治疗的高能X线、镭和其他天然放射性物质(如氡)、核反应堆、回旋加速器、直线加速器、可变梯度同步加速器，用于治疗癌肿的密封的钴和铯以及大量用于医学和工业的人工产生的放射性物质。

被足够高的剂量照射后，可发生细胞坏死。高的亚致死剂量可通过降低有丝***率，减缓DNA合成或使细胞变成息肉状，而干扰细胞的增殖。连续进行更新的组织(如肠上皮，骨髓，性腺)经辐射后可产生剂量依赖的进行性再生不良、萎缩、最终纤维化。某些受损但仍能进行有丝***的细胞，在其死亡前还可经1或2个生殖周期，产生异常的后代(如巨大晚幼粒细胞，分叶过度的嗜中性白细胞)。有报道称，另加极低剂量照射的动物存活时间比仅仅接受本底照射的动物的存活时间长。

长期以来人们在寻找辐射防护剂，但至今仍未找出一个理想的药物用于治疗和预防辐射线所致的毒副作用。

中医理论认为，放射线属热毒之邪，在受到射线损伤以后，易造成机体津液受损，热毒过盛。严重者出现气血不和、脾胃失调及肝肾亏虚。可出现口干、咽痛、口咽粘膜及皮肤溃烂，疲力、自汗等症状。因此，对射线所致的毒副反应以生津润燥、清热解毒、助于凉补气血、滋补肝肾之中药。

中国专利02146571.1公开了一种提高机体免疫功能的药物组合物及制备方法。该专利未公开该药物组合物治疗和预防辐射损伤的应用，本发明在该专利技术的基础上作了进一步研究后证实，本发明中药组合物对辐射损伤有良好的治疗和改善作用。

发明内容

本发明提供一种中药组合物在制备治疗和预防辐射线损伤的药物中的应用，本发明药物组合物扶正祛邪，提高机体免疫功能，健脾补肾，达到标本兼治。通过试验表明，本发明药物组合物用于治疗辐射线照所致的毒副反应；能有效降低致死量辐射线照射后小鼠的死亡率，提高生存质量；不会抵消辐射线对肿瘤细胞的杀死作用，相反，与辐射线有协同抗肿瘤作用；对骨髓及肝肾功能无任何毒性损害。

小鼠急性毒性试验表明，本发明药物组合物临床用量为6g/日，小鼠口服最大耐受量为20.0g/kg，相当于成人临床用量的232.6倍，动物无明显异常及死亡。长期毒性试验表明：本发明对大鼠一般状况、体重、血象等生化指标及主要脏器系数均无明显影响。

本发明的技术方案是这样实现的：

本发明药物是由如下重量份比例的原料药制成的：

黄芪130-390份、女贞子105-315份、人参39-117份、灵芝40-120份、莪术79-327份、绞股蓝157-473份、炒白术40-120份、茯苓40-120份、冬虫夏草5-15份、徐长卿79-237份、土鳖虫40-120份、三七13-39份、白花蛇舌草79-237份、半枝莲79-237份、炒神曲25-75份。

优选的，本发明药物是由如下重量份比例的原料药制成的：

黄芪260份、女贞子210份、人参78份、灵芝80份、莪术158份、绞股蓝315份、炒白术80份、茯苓80份、冬虫夏草10份、徐长卿158份、土鳖虫80份、三七26份、白花蛇舌草158份、半枝莲158份、炒神曲50份。

或：

黄芪130份、女贞子3 15份、人参39份、灵芝120份、莪术79份、绞股蓝473份、炒白术40份、茯苓120份、冬虫夏草5份、徐长卿237份、土鳖虫40份、三七39份、白花蛇舌草79份、半枝莲237份、炒神曲25份。

或：

黄芪390份、女贞子105份、人参117份、灵芝40份、莪术327份、绞股蓝157份、炒白术120份、茯苓40份、冬虫夏草15份、徐长卿79份、土鳖虫120份、三七13份、白花蛇舌草237份、半枝莲79份、炒神曲75份。

本发明还提供了该药物的活性成分由以下步骤制成：

(1)、按照原料药重量比例称取中药材，净选；

(2)、人参、冬虫夏草、三七分别粉碎成细粉，过筛备用；

(3)、黄芪、女贞子、灵芝、莪术、绞股蓝、炒白术、茯苓、徐长卿、土鳖虫、白花蛇舌草、半枝莲、炒神曲加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎煮液过滤，滤液浓缩，干燥，粉碎成干膏粉；

步骤(2)所得细粉和步骤(3)所得干膏粉共同构成本发明中药组合物的活性成份。

本发明药物的剂型为胶囊剂、片剂、散剂、口服液、软胶囊、丸剂、酊剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、喷雾剂或注射剂。

本发明药物的剂型采用常规的制备方法制备，例如，范碧亭《中药药剂学》(上海科学出版社1997年12月第1版)记载的制备工艺，制成药剂学可接受的常规剂型。

为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如：填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括：淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括：淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括：硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括：糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括：甜味剂及各种香精；防腐剂包括：尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括：PEG6000，PEG4000，虫蜡等。为使上述剂型能够实现中药药剂学，需在制备这些剂型时加入药学可接受的其它辅料(范碧亭《中药药剂学》，上海科学出版社1997年12月第1版中各剂型记载的辅料)。

本发明还提供了该药物胶囊剂的制备方法，它由以下步骤组成：

(1)、按照原料药重量比例称取中药材，净选；

(2)、人参、冬虫夏草、三七分别粉碎成细粉，过筛备用；

(3)、黄芪、女贞子、灵芝、莪术、绞股蓝、炒白术、茯苓、徐长卿、土鳖虫、白花蛇舌草、半枝莲、炒神曲加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎煮液过滤，滤液浓缩，干燥，粉碎成干膏粉；

(4)、将步骤(2)所得细粉与步骤(3)所得的干膏粉配研，过筛混匀，装胶囊，即得。

具体实施方式

下面结合本发明药物组合的实例，说明本发明的具体实施方式。

实施例1：

黄芪260g  女贞子210g  人参78g  灵芝80g  莪术158g  绞股蓝315g炒白术80g  茯苓80g  冬虫夏草10g  徐长卿158g  土鳖虫80g三七26g  白花蛇舌草158g  半枝莲158g 炒 神曲50g。

制备方法：

(1)、按照处方量称取方中药材，净选；

(2)、人参、冬虫夏草、三七分别粉碎成细粉，过筛备用；

(3)、黄芪、女贞子、灵芝、莪术、绞股蓝、炒白术、茯苓、徐长卿、土鳖虫、白花蛇舌草、半枝莲、炒神曲加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎煮液过滤，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉；

(4)、将步骤(2)所得细粉与步骤(3)所得的干膏粉配研，过筛混匀，制成1000粒胶囊，即得。本发明胶囊临床用量为6g/日。

实施例2：

黄芪130g  女贞子315g  人参39g  灵芝120g  莪术7g  绞股蓝473g炒白术40g  茯苓120g  冬虫夏草5g  徐长卿237g  土鳖虫40g三七39g  白花蛇舌草79g  半枝莲237g  炒神曲25g

制备方法：

(1)、按照处方量称取方中药材，净选；

(2)、人参、冬虫夏草、三七分别粉碎成细粉，过筛备用；

(3)、黄芪、女贞子、灵芝、莪术、绞股蓝、炒白术、茯苓、徐长卿、土鳖虫、白花蛇舌草、半枝莲、炒神曲加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎煮液过滤，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉；

(4)、将步骤(2)所得细粉与步骤(3)所得的干膏粉配研，过筛混匀，按常规方法制成1000片片剂，即得。

实施例3：

黄芪390g  女贞子105g  人参117g  灵芝40g  莪术327g  绞股蓝157g炒白术120g  茯苓40g  冬虫夏草15g  徐长卿79g  土鳖虫120g三七13g  白花蛇舌草237g  半枝莲79g  炒神曲75g

制备方法：

(1)、按照处方量称取方中药材，净选；

(2)、人参、冬虫夏草、三七分别粉碎成细粉，过筛备用；

(3)、黄芪、女贞子、灵芝、莪术、绞股蓝、炒白术、茯苓、徐长卿、土鳖虫、白花蛇舌草、半枝莲、炒神曲加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎煮液过滤，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉；

(4)、将步骤(2)所得细粉与步骤(3)所得的干膏粉碎粉配研，过筛混匀，按常规方法制成丸剂，即得。

实施例4：

为证实本发明药物治疗和预防辐射损伤的疗效，用按实施例1方法制得的胶囊剂内容物(以下称本发明药物)，进行了以下药理试验研究：

本发明药物组合物对辐射损伤小鼠造血功能恢复影响

1材料与方法

1.1试剂与仪器：

本发明药物组合物由河北以岭医药研究院提供；

仪器：美国Multiskan产全自动酶标仪、CO₂培养箱(美国Forma公司生产)、美国产(IE USA)冷冻离心机、超净工作台(苏州净化设备厂生产)：遥控胃肠机(日本东芝DGW一20A)、辐射剂录测录用中国测试技术研究院产9206剂录仪、LPS为美国Sigma产品、MTT(噻唑蓝)为FLUKA公司产品、二甲基亚砜(DMSO)为苏州化工研究所生产、TPMI-1640为美国GIBCO公司产品。

1.2动物分组与给药：

BALB/C小鼠36只，体重18-22g，雌雄兼有，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证编号SCXK(京)2002-0003。将动物随机分3组，每组12只。I组为生理盐水对照正常组；II组为盐水加照射组；III组为本发明药物组合物加照射实验组。I、II组每天用生理盐水灌胃，0.5ml/次，1次/d，III组每天用本发明药物3g生药/kg，每日灌胃给药一次。II、III组于第6天在灌胃后30min行全身暴露X射线照射，用等效方野18cm×18cm，焦点--鼠距80cm。每天照射0.11CGY，1次/d共照射5次。

1.3检测指标及方法

1.3.1骨髓细胞增殖反应

颈椎脱臼处死小鼠，无菌操作取小鼠双股骨骨髓细胞，调细胞浓度至5×10⁶/ml，取100μl加入96孔细胞培养板中，设5个复孔，置37℃，5％CO₂培养箱中培养72h，终止前5h，掺入MTT(5mg/ml)10μl/孔，终止培养时离心弃上清液，每孔加入100μl DMSO溶解MTT还原产物甲臜(Fonnazan)溶解缓冲液，充分震荡10min。全自动酶标仪用560nm波长测OD值，以OD值代表骨髓细胞活性。

1.3.2定量溶血分光光度测定法(QHS)

本法体外B细胞产生分泌抗体裂解红细胞所释放的血红蛋白量(以OD值表示)，其结果可反应机体体液免疫功能。实验第5天分别将5％的绵羊红细胞0.2ml注入各组小鼠腹腔内，第11天眼球放血，颈椎脱臼致死，常规取脾脏，然后进行脾细胞计数，调细胞浓度至1×10⁷/ml，取脾细胞1ml，1∶10新鲜豚鼠血清(补体)1ml，2％绵羊红细胞(SRBC)1ml混匀，37℃水浴1h，1500r/m离心10min，取上清液用96孔细胞培养板于全自动酶标仪450 nm波长处测A值，作为QHS反应值。

1.4统计学方法实验结果采用组间均数差异t检验的方法进行统计学分析。

2结果

本发明中药组合物对小鼠骨髓细胞增殖、抗体产生的影响见表1

表1本发明中药组合物对小鼠骨髓细胞增殖抗体产生的影响(X±SD)

组别	骨髓细胞增殖	QHS
			I组	0.589±0.046	0.599±0.073
II组	0.298±0.021###	0.357±0.039###
			III组	0.572±0.048#**	0.583±0.019#**

与正常组(I组)比较，#P＜0.05，###P＜0.001；与照射组(II组)比较，^**P＜0.001，n＝12

以上实验表明，本发明中药组合物可刺激小鼠抗体的产生，使抗体分泌量增多，与照射组相比，有非常明显的显著性差异(P＜0.001)，本发明中药组合物对骨髓细胞增值有明显的促进作用，与与照射组相比，有非常明显的显著性差异(P＜0.001)。

由此可见，本发明中药组合物有明显的抗辐射作用，调解骨髓造血和促进抗体产生的作用。

实施例5：

本发明药物组合物对辐射损伤大鼠外周血细胞及血清SOD的影响

1材料与方法

1.1试剂与仪器：

本发明药物组合物由河北以岭医药研究院提供；

试剂与仪器：SOD试剂盒由广州展晨生物科技有限公司提供。756型紫外分光光度计(上海精密仪器科学有限公司)。

1.2动物分组与给药：

Wistar大鼠，雄性，体重170±10g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证编号SCXK(京)2002-0003。将动物随机分3组，每组10只。I组为预防组，于照射前3天起用本发明中药组合物灌胃，剂量为3g生药/kg；II组为治疗组，以同样剂量于受照射当天开始给药，连续7天；III组为照射组，灌服等量蒸馏水7天。各组同时接收一次性全身照射γ射线照射，总剂量3.0Gy，剂量率1.0Gy/min，照射3min。

1.3取样

实验动物于照射前1天，照后1、4、7天心脏采血。***麻醉大鼠，75％乙醇消毒大鼠胸部，用2ml一次性注射器采血1ml左右。用白细胞稀释液(HCL∶CH₃COOH＝1∶3)0.38ml加入0.02ml全血混匀后计数各组白细胞数，3000r/min，15min非抗凝分离血清。

1.4 SOD测定

采用黄嘌呤氧化酶法-羟胺法，利用756型紫外可见分光光度计在波长550nm处检测吸光度。

1.5统计处理  采用SPSS 11.5统计软件对实验数据进行分析。

2结果

2.1本发明中药组合物对受照射大鼠外周血WBC的影响  见表1表1本发明中药组合物对受照射大鼠外周血WBC的影响(X±SD，1×10⁵cells)

组别	照前1天	照后1天	照后4天	照后7天
					照射组	12.9±1.40	2.97±0.15*	0.49±0.05*	1.03±0.41*
预防组	12.9±3.50	2.99±0.10*	0.84±0.04*#	1.42±0.36*#
					治疗组	12.8±5.90	3.11±0.28*#	0.70±0.06*#	1.66±0.25*#

注：与照射前1天比，^*P＜0.05；与照射组比较，#P＜0.05

对受照大鼠外周血WBC的影响由表1可见，照射前1d各处理组间WBC计数差异无显著性；照射后1、4、7d各组WBC计数与照射前相比均有显著下降，其中照后4d降至最低，7d显著回升。照射后1d各组间差异无显著性，照射后4、7d，本发明药物组合物预防组和治疗组WBC值与照射组相比显著升高(P＜0.05)。在整个动态观察过程中，预防组和治疗组无显著差异。

2.2本发明中药组合物对受照大鼠血清SOD的影响

表2  本发明中药组合物对受照大鼠血清SOD的影响(X±SD，U/ml)

组别	照前1天	照后1天	照后4天	照后7天
					照射组	155.4±12.1	72.9±26.3*	88.0±46.8*	119.7±14.4
预防组	156.8±19.8	122.1±18.7#	1 31.1±42.4#	142.7±10.4
					治疗组	152.6±11.8	142.7±10.3#	132.6±52.9#	152.3±14.6

注：与照射前1天比，^*P＜0.05；与照射组比较，#P＜0.05

由表2可见，照射前1d，各处理组间SOD活性差异无显著性。照后1、4d，各组SOD活性与照射前相比均显著下降。而照射组又显著低于预防组及治疗组。照后7d，各组SOD活性恢复接近照射前，但照射组仍低于预防组及治疗组。

3、结论

机体受到照射后，由于电离辐射的间接作用可产生大量的自由基，自由基的性质十分活泼，能引发多种化学反应，并可作用于生物膜产生脂质过氧化，而过氧化损伤又是许多毒作用的起点，导致多种病理过程。SOD是最主要的清除自由基的抗氧化酶，能有效的清除体内产生的超氧阴离子，并终止自由基连锁反应。本实验结果显示，电离辐射能明显降低大鼠血清SOD活性，而本发明中药组合物对辐射所致大鼠血清SOD活性的下降有显著拮抗作用。

由于血液***对辐射比较敏感，动物受到照射后，可引起白细胞迅速下降。本实验证明，照射前、后给予本发明中药组合物均具有促进WBC恢复的作用，提示对于辐射损伤，具有预防和治疗的双重作用。

Claims (8)

1.一种中药组合物在制备治疗与预防辐射线损伤的药物中的应用，其特征在于是由下述重量份的原料药制成的：

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于是由下述重量份的原料药制成的：

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于是由下述重量份的原料药制成的：

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于是由下述重量份的原料药制成的：

5.根据权利要求1-4中任一项所述的应用，其特征在于所述中药组合物的活性成分由以下步骤制成：

(1)、按照原料药重量比例称取中药材，净选；

(2)、人参、冬虫夏草、三七分别粉碎成细粉，过筛备用；

(3)、黄芪、女贞子、灵芝、莪术、绞股蓝、炒白术、茯苓、徐长卿、土鳖虫、白花蛇舌草、半枝莲、炒神曲加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎煮液过滤，滤液浓缩，干燥，粉碎成干膏粉；

步骤(2)所得细粉和步骤(3)所得干膏粉共同构成所述中药组合物的活性成份。

6.根据权利要求1-4任一所述的应用，其特征在于所述中药组合物的制剂剂型为胶囊剂、片剂、散剂、口服液、丸剂、酊剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、喷雾剂或注射剂。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于所述的胶囊剂的制备方法是由以下步骤制成：

(1)、按照原料药重量比例称取中药材，净选；

(2)、人参、冬虫夏草、三七分别粉碎成细粉，过筛备用；

(3)、黄芪、女贞子、灵芝、莪术、绞股蓝、炒白术、茯苓、徐长卿、土鳖虫、白花蛇舌草、半枝莲、炒神曲加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎煮液过滤，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉；

(4)、将步骤(3)所得细粉与步骤(2)所得的粉碎粉配研，过筛混匀，装胶囊，即得。

8.根据权利要求1-4中任一项所述的应用，其特征在于治疗和预防肿瘤病人放射治疗以后损伤。