CN101559095B - 具有免疫增强作用的兽用复方刺五加颗粒及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种具有免疫增强作用的兽用复方刺五加颗粒,由以下重量百分比的中药原料制成:70~60%的刺五加和余量的黄芪,每100g颗粒剂含原生药100g。本发明所产生的复方刺五加颗粒剂稳定性和安全性都很好,临床主要用于增强疫苗免疫效果、增强机体免疫力、抗应激的功效,用于治疗鸡及其他畜禽的各种免疫抑制性疾病,增强疫苗的免疫效果;治疗由运输、转群、气候突变等引起的免疫力低下,食欲下降等症。
Description
技术领域
本发明属于兽药技术领域,涉及一种具有免疫增强作用的兽用复方刺五加颗粒,同时涉及一种该颗粒的制备方法。
背景技术
养殖业的迅猛发展,很大程度上得益于科技的进步,但同时也带来了隐患。科技的进步使养殖业向集约化和工厂化发展,畜禽对病原微生物的易感性增加,病害频繁发生,并造成很大的经济损失。为了防治疾病,传统的做法就是大量使用药物,譬如抗生素作为药物添加剂使用的结果使耐药菌株不断增多,疾病难以控制,畜禽免疫功能急剧下降。使畜禽生长受阻,特别是淋巴细胞、巨噬细胞等免疫细胞长期处于低迷或抑制状态,增加了病毒、细菌性疾病、霉形体、寄生虫病的易感性,可使低致病性的病原体引起多种疾病综合症的发生,甚至达到难以控制的程度,还导致疫苗接种反应增强,副作用加大或使免疫接种失败。商业鸡群中免疫抑制性病毒共同感染的现象也比较普遍,马立克氏病和鸡传染性贫血病(分别占总检测病例的10.02%)混感时有发生,二重、三重、四重混合感染的阳性率分别合计达21.71%、7.79%、2.23%,总计为31.73%。因此,提高动物免疫细胞的活性,增强机体对各种病原体的抵抗能力显得至关重要。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有免疫增强作用的兽用复方刺五加颗粒。
本发明的另一目的是提供一种兽用复方刺五加颗粒的制备方法。
为实现上述目的,本发明采用以下技术方案:一种具有免疫增强作用的兽用复方刺五加颗粒,由以下重量百分比的中药原料制成:70~60%的刺五加和余量的黄芪,每100g颗粒剂含原生药100g。
由以下重量百分比的中药原料制成:70%的刺五加和30%的黄芪。
一种兽用复方刺五加颗粒的制备方法,包括以下步骤:
(1)按比例取刺五加和黄芪,除去杂质,混合后置于多功能提取浓缩机组中,进行两次提取,第一次以两种药材7~10倍量水进行≤70℃低温真空动态提取浓缩,煎煮2~4小时,收集浓缩液;第二次以两种药材5~8倍量水进行≤70℃低温真空动态提取浓缩,煎煮1.5~3小时,将两次浓缩液混合,混合药液浓缩至70℃热测相对密度为1.15~1.20的清膏,清膏经醇沉,过滤至澄清,过滤液回收乙醇后备用;
(2)向过滤液中加入颗粒剂常规辅料进行制粒即可。
所述颗粒剂常规辅料为蔗糖和糊精。
本发明中,刺五加固本为主,黄芪益气为辅。刺五加为扶正固本之良药,擅长益气健脾,补肾安神,为补药中之良品。黄芪为升阳补气之良药,擅长于补益中土,温养脾胃,强壮营卫,利水消肿。两药相伍,相须为用,共收健脾胃,利水湿,益气血,强营卫之功,协同增效,可增强机体免疫力、抗应激的功效。本发明具有如下积极效果:本发明所产生的复方刺五加颗粒剂稳定性和安全性都很好,临床主要用于增强疫苗免疫效果、增强机体免疫力、抗应激的功效,用于治疗鸡及其他畜禽的各种免疫抑制性疾病,增强疫苗的免疫效果;治疗由运输、转群、气候突变等引起的免疫力低下,食欲下降等症。临床试验结果表明,给鸡自由饮水复方刺五加颗粒,与鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗联用,连用5-7天,能够提高鸡及其他畜禽的免疫功能,增强机体抗病力,增强其抗应激能力。
以下为本发明复方刺五加颗粒的试验研究情况:
一、主要研究结果综述
1、药学研究
按本发明的工艺以标准处方10倍量中试生产出的样品成品质量与小试生产的“复方刺五加颗粒”在收率上无明显差别,在成品质量指标上无明显差别,均符合该颗粒剂质量标准草案项下的有关规定,说明复方刺五加颗粒适合大工业生产。
质量标准鉴别项下根据《中华人民共和国兽药典》以紫丁香酚苷和黄芪甲苷为指标成分进行定性鉴别;同时严格控制并检测制剂的粒度、水分、溶化性等项目。
稳定性试验中加速试验6个月各项指标仍符合规定。经本品的稳定性试验结果显示:铝箔袋能保证药品不被外界污染并且不与药品发生作用。
2、药理毒理研究结果
以免疫增强的药效学和抗应激指标为评判指标,对方剂进行拆方研究,筛选黄芪和刺五加的最佳配比。复方刺五加颗粒剂各个组方(70%、65%、60%的刺五加和余量的黄芪)对小鼠的免疫功能和抗应激功能均有增强作用,且以7∶3比例最佳。
复方刺五加颗粒剂的安全药理研究结果表明复方刺五加颗粒0.2~0.8g生药/kg·bw体重时,对小鼠的一般行为、协调运动及自主活动亦无明显作用,表明本品常规剂量对心血管***、呼吸***及神经***均无明显影响。在临床上应用是安全的。
急性毒理试验结果表明小鼠灌胃给药复方刺五加颗粒的LD50>160g生药/kg,根据毒物毒性分级标准,本品对小鼠实际无毒。
3、临床研究结果
河南新正好生物工程有限公司委托河南省兽药工程技术研究中心进行复方刺五加颗粒剂的靶动物安全性试验,结果,在临床用药的3倍量和5倍量,试验动物生理状态、精神状态及病理剖检与对照组相比均无异常情况发生。
二、评价:
药学试验、药理毒理试验及临床试验结果表明复方刺五加颗粒具有安全、有效、质量可控的特点,分述如下:
1、安全性
1.1毒性试验
河南新正好生物工程有限公司委托河南省兽药工程技术研究中心对本发明复方刺五加颗粒的安全性进行研究。急性毒性试验研究中,以本发明复方刺五加颗粒剂给小鼠灌胃,预试验中每鼠80g(生药)/kg给药剂量组均未见异常,一日最大耐受量为160(生药)g/kg。相当于临床使用量的85倍。
1.2临床安全性试验
河南新正好生物工程有限公司委托河南省兽药工程技术研究中心进行本发明复方刺五加颗粒剂的临床安全性试验,结果,在临床用药的3倍量和5倍量口服,试验动物饮食体重均正常没有明显的刺激反应。
2、有效性
为探讨本发明复方刺五加颗粒的临床作用,河南新正好生物工程有限公司与河南兽药工程技术研究中心共同进行了复方刺五加颗粒的临床研究。结果表明能提高鸡传染性支气管炎血清抗体效价,增强其免疫保护作用,增强其抗应激能力。其效果优于黄芪多糖口服液。
具体实验方法如下:
选择14日龄健康SPF鸡300只,试验随机分为6组,1组为疫苗对照组,2组为本发明复方刺五加颗粒低剂量组,3组为本发明复方刺五加颗粒中剂量组,4组为本发明复方刺五加颗粒高剂量组,5组药物对照组,6组为攻毒对照组。
试验分组如下:
2.1试验分组:
低剂量供试药品组:1L水0.5g颗粒混饮+鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗(La Sota株-M41株);
中剂量供试药品组:1L水1g颗粒混饮+鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗(La Sota株-M41株);
高剂量供试药品组:1L水2g颗粒混饮+鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗(La Sota株-M41株);
药物对照组:黄芪多糖口服液1.5L水1ml混饮+鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗(La Sota株-M41株);
疫苗对照组:鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗(La Sota株-M41株);
攻毒试验对照组:不用药,不接种鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗(La Sota株-M41株)。
自由饮水,连续7天。除攻毒试验对照组外,对照组和试验组于用药第1d进行鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗(La Sota株-M41株)接种,每羽皮下注射0.3ml鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗(La Sota株-M41株)接种,接种16天后,分别随机选取试验组、免疫对照组、攻毒试验对照组鸡各50只,进行鸡传染性支气管炎病毒攻击保护试验。攻毒后连续观察16天,观察各组试验鸡的精神、采食、饮水、粪便、呼吸等临床情况。对病死鸡立即进行病理剖检。并于疫苗接种前1d和接种后第5、15、30d采集血样,测定抗体效价。
2.2实验结果:
2.2.1攻毒对照组
鸡接种鸡传染性支气管炎病毒72h后,攻毒对照组病鸡出现鸡传染性支气管炎病毒临床症状。病鸡出现出现明显的咳嗽,部分鸡出现罗音、呼吸困难等症状,病鸡精神沉郁,食欲减少,对死亡鸡只进行剖检,出现鸡传染性支气管炎典型病理变化。
病鸡剖检可见:气管下段和支气管中有黄色干酪样渗出物,有的气管下段和支气管处有环状出血,气囊增厚。
22.2试验性治疗组
1~5组在给药和接种疫苗后,与攻毒对照组比较,出现症状减轻或消失,结果见表1。复方刺五加颗粒高、中、低及疫苗对照组对人工感染鸡传染性支气管炎病毒的有效率显著高于攻毒对照组(p<0.01);复方刺五加颗粒高、中剂量组有效率显著高于黄芪多糖口服液组和复方刺五加颗粒低剂量组(p<0.01);复方刺五加颗粒剂高、中剂量组的有效率无统计学差异(p>0.05)。
表1鸡传染性支气管炎强毒攻击保护试验结果
2.2.3复方刺五加颗粒剂对鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗(La Sota株-M41株)抗体水平的影响
鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗(La Sota株-M41株)抗体水平检测结果见表2。由表2可知,在免疫接种前测得的各试验组以及空白对照组抗体水平相当,从免疫5d开始,试验2、3组IHA抗体效价水平均显著高于对照组(P<0.05),而且试验组的抗体产生速度快,持续时间长。试验1组和对照组差异不显著(P>0.05),试验1、2、3组和黄芪多糖口服液组之间两两差异显著(P<0.05),说明混饮1L水1g和2g复方刺五加颗粒剂对鸡传染性支气管炎病毒抗体产生、免疫抗病能力的提高具有明显的促进作用。但低剂量混饮效果增加不明显。
表2复方刺五加颗粒剂对鸡传染性支气管炎病毒抗体水平的影响
注:各试验组与对照比较,用*表示,*表示差异显著(P<0.05),黄芪多糖口服液组和试验组间比较,用#表示,#表示差异显著(P<0.05)。
2.3结论:
以治愈、显效、有效、无效作为疗效判定标准,观察攻毒后病鸡的临床症状变化,对病死鸡进行剖检和病毒分离鉴定,并计算有效率和治愈率。结果表明:本发明复方刺五加颗粒每1L水1g混饮,每1L水2g混饮,对鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗(La Sota株-M41株)有良好的免疫增强作用,与其它用药组相比,能显著提高鸡传染性支气管炎病毒病血清的抗体水平(p<0.01),增强其免疫保护作用,可以提高鸡传染性支气管病毒病血清抗体效价,提高动物机体抗应激能力。
以上临床试验结果表明,给鸡自由饮水复方刺五加颗粒,与鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗联用,连用5-7天,能够提高鸡的免疫功能,增强机体抗病力,增强其抗应激能力。
因此临床推荐复方刺五加颗粒按每1L水1g混饮,与疫苗联用,连用7天,可以提高动物机体的免疫力,增强其抗应激能力,提高疫苗的免疫保护力。
3、质量可控性
3.1质量研究
按照《中药新药质量标准研究的技术要求》对复方刺五加颗粒进行了外观性状的鉴别,并按《中华人民共和国兽药典》附录对性状、鉴别、粒度、水分、溶化性进行考察。
3.2稳定性试验
按照《兽用中药、天然产物稳定性试验技术指导原则》和《兽药稳定性试验技术规范(试行)》。加速试验6个月和长期稳定性试验2年各项指标仍符合规定,长期稳定试验还在继续进行。稳定性试验表明本品具有良好的稳定性。
上述研究结果表明复方刺五加颗粒剂的质量是可控的。
具体实施方式
实施例1:所用中药原料:70kg刺五加和30kg黄芪,制备成品颗粒剂100kg。
制备方法,包括以下步骤:
(1)称取70kg刺五加和30kg黄芪,除去杂质,混合后置于多功能提取浓缩机组中,进行两次提取,第一次以两种药材10倍量水进行70℃低温真空动态提取浓缩,煎煮4小时,收集浓缩液;第二次以两种药材8倍量水进行70℃低温真空动态提取浓缩,煎煮3小时,将两次浓缩液混合,混合药液浓缩至70℃热测相对密度为1.15的清膏,清膏经醇沉,过滤至澄清,过滤液回收乙醇后备用;
(2)向过滤液中加入95kg蔗糖和1kg糊精进行制粒,最终制得100kg颗粒。
实施例2:所用中药原料:60kg刺五加和40kg黄芪,制备成品颗粒剂100kg。
制备方法,包括以下步骤:
(1)称取60kg刺五加和40kg黄芪,除去杂质,混合后置于多功能提取浓缩机组中,进行两次提取,第一次以两种药材7倍量水进行70℃低温真空动态提取浓缩,煎煮2小时,收集浓缩液;第二次以两种药材5倍量水进行70℃低温真空动态提取浓缩,煎煮1.5小时,将两次浓缩液混合,混合药液浓缩至70℃热测相对密度为1.20的清膏,清膏经醇沉,过滤至澄清,过滤液回收乙醇后备用;
(2)向过滤液中加入90kg蔗糖和2kg糊精进行制粒,最终制得100kg颗粒。
实施例3:所用中药原料:65kg刺五加和35kg黄芪,制备成品颗粒剂100kg。
制备方法,包括以下步骤:
(1)称取65kg刺五加和35kg黄芪,除去杂质,混合后置于多功能提取浓缩机组中,进行两次提取,第一次以两种药材8倍量水进行70℃低温真空动态提取浓缩,煎煮3小时,收集浓缩液;第二次以两种药材6倍量水进行70℃低温真空动态提取浓缩,煎煮2小时,将两次浓缩液混合,混合药液浓缩至70℃热测相对密度为1.18的清膏,清膏经醇沉,过滤至澄清,过滤液回收乙醇后备用;
(2)向过滤液中加入93kg蔗糖和1.5kg糊精进行制粒,最终制得100kg颗粒。
Claims (4)
1.一种具有免疫增强作用的兽用复方刺五加颗粒,其特征在于由以下重量百分比的中药原料制成:70~60%的刺五加和余量的黄芪,每100g颗粒剂含原生药100g;
制备时包括以下步骤:
(1)按比例取刺五加和黄芪,除去杂质,混合后置于多功能提取浓缩机组中,进行两次提取,第一次以两种药材7~10倍量水进行≤70℃低温真空动态提取浓缩,煎煮2~4小时,收集浓缩液;第二次以两种药材5~8倍量水进行≤70℃低温真空动态提取浓缩,煎煮1.5~3小时,将两次浓缩液混合,混合药液浓缩至70℃热测相对密度为1.15~1.20的清膏,清膏经醇沉,过滤至澄清,过滤液回收乙醇后备用;
(2)向过滤液中加入颗粒剂常规辅料进行制粒即可。
2.如权利要求1所述的兽用复方刺五加颗粒,其特征在于由以下重量百分比的中药原料制成:70%的刺五加和30%的黄芪。
3.一种如权利要求1或2所述的具有免疫增强作用的兽用复方刺五加颗粒的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)按比例取刺五加和黄芪,除去杂质,混合后置于多功能提取浓缩机组中,进行两次提取,第一次以两种药材7~10倍量水进行≤70℃低温真空动态提取浓缩,煎煮2~4小时,收集浓缩液;第二次以两种药材5~8倍量水进行≤70℃低温真空动态提取浓缩,煎煮1.5~3小时,将两次浓缩液混合,混合药液浓缩至70℃热测相对密度为1.15~1.20的清膏,清膏经醇沉,过滤至澄清,过滤液回收乙醇后备用;
(2)向过滤液中加入颗粒剂常规辅料进行制粒即可。
4.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于:所述颗粒剂常规辅料为蔗糖和糊精。
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